Javascript is tans in jou blaaier gedeaktiveer. Sommige kenmerke van hierdie webwerf sal nie werk wanneer javascript gedeaktiveer is nie.
Registreer met jou spesifieke besonderhede en spesifieke dwelm van belang en ons sal die inligting wat jy verskaf met artikels in ons uitgebreide databasis pas en dadelik vir jou 'n PDF-kopie e-pos.
By Stella S, Vitale SR, Martorana F, Massimino M, Pavone G, Lanzafame K, Bianca S, Barone C, Gorgone C, Fichera M, Manzella L
Stefania Stella, 1,2 Silvia Rita Vitale, 1,2 Federica Martorana, 1,2 Michele Massimino, 1,2 Giuliana Pavone, 3 Katia Lanzafame, 3 Sebastiano Bianca, 4 Chiara Barone, 5 Cristina Gorgone, 6 Marco Fichera, 6, 7. 95123, Italië;2 Sentrum vir Eksperimentele Onkologie en Hematologie, AOU Policlinico “G.Rodolico – San Marco”, Catania, 95123, Italië;3 Mediese Onkologie, AOU Polikliniek “G.Rodolico – San Marco”, Catania, 95123, Italië;4 Mediese Genetika, ARNAS Garibaldi, Catania, 95123, Italië;5 Geneeskunde Genetika, ASP, Syracuse, 96100, Italië;6 Departement Biomediese en Biotegnologie Wetenskappe, Universiteit van Catania, Mediese Genetika, Catania, Italië, 95123;7Oasi Navorsingsinstituut-IRCCS, Troina, 94018, Italië Kommunikasie: Stefania Stella, tel +39 095 378 1946, e-pos [e-pos beskerm];[email protected] Doel: Kiemlynmutasies in BRCA1 en BRCA2 en gevestigde borskanker (BC), ovarium (OC) en ander wat met 'n leeftydrisiko van kanker geassosieer word. Toetsing vir die BRCA-geen is die sleutel tot die beoordeling van individuele risiko, sowel as om voorkomingsmetodes by gesonde draers te vind en behandelings aan te pas by kankerpasiënte. ogeniese variante in Siciliaanse families, studies wat spesifiek populasies in oostelike Sisilië teiken, ontbreek.Die doel van ons studie was om die voorkoms en verspreiding van BRCA patogene kiemlyn veranderinge in 'n kohort BC pasiënte van oostelike Sicilië te ondersoek en om hul assosiasie met spesifieke BC eienskappe te assesseer deur gebruik te maak van volgende generasie opeenvolging van gewasopeenvolging, Die oorgeskakelde opeenvolging van gewas, en oorlewe van gewas graderings:Oorheengehorreleerde opeenvolging. 35 pasiënte (9%) het 'n BRCA patogene variant gehad, 17 (49%) in BRCA1 en 18 (51%) in BRCA2.BRCA1 veranderinge is algemeen in trippel-negatiewe BC pasiënte, terwyl BRCA2 mutasies meer algemeen is in luminale BC pasiënte. In vergelyking met nie-draers, verskaf vakke met beduidende hoër BRCA1 gewas-uitsigte en proliferatiewe resultate van BRCA1 gewas. mutasiestatus in BC-pasiënte van Oos-Sicilië en bevestig die rol van NGS-analise in die identifisering van pasiënte met oorerflike BC. Oor die algemeen stem hierdie data ooreen met vorige bewyse wat BRCA-sifting vir behoorlike voorkoming en behandeling van kanker in mutasiedraers ondersteun.
Borskanker (BC) is die algemeenste kwaadaardigheid wêreldwyd en die dodelikste kanker by vroue.1 Die biologiese kenmerke wat BC-prognose en kliniese gedrag bepaal, is breedvoerig bestudeer en gedeeltelik toegelig met verloop van tyd. Trouens, verskeie surrogaatmerkers word tans gebruik om BC in verskillende molekulêre subtipes te klassifiseer. Dit is estrogeen (R)-reseptor-groeifaktor (ER) en reseptor-progeorg-faktor vir menslike groei 2) amplifikasie, proliferasie-indeks Ki-67 en tumorgraad (G).2 Die kombinasie van hierdie veranderlikes het die volgende BC-kategorieë geïdentifiseer: 1) Luminale gewasse, wat ER- en/of PgR-uitdrukking toon, was verantwoordelik vir 75% van BC's. Hierdie gewasse is verder verdeel in Luminaal A, wanneer Ki-67 gelyk was aan die 20% en HER20% en HER20% negatief en HER20% en HER20% negatief was. teenwoordigheid van HER2-amplifikasie, ongeag die proliferasie-indeks;2) HER2+-gewasse wat ER- en PgR-negatief is, maar HER2-versterking toon. Hierdie groep is verantwoordelik vir 10% van alle borsgewasse;3) Drie-negatiewe borskanker (TNBC), wat nie ER- en PgR-uitdrukking en HER2-amplifikasie toon nie, is verantwoordelik vir ongeveer 15% van borskankers.2-4
Onder hierdie BC-subtipes verteenwoordig tumorgraad en proliferasie-indeks deursnee-biomerkers wat direk en onafhanklik geassosieer word met tumoraggressiwiteit en prognose.5,6
Benewens die voorgenoemde biologiese kenmerke, het die rol van oorgeërfde genetiese veranderings wat tot die ontwikkeling van BC lei, oor die afgelope paar jaar al hoe belangriker geword.7 Ongeveer 1 uit 10 borsgewasse word geërf as gevolg van kiemlynveranderinge in spesifieke gene.8 Twee groot epidemiologiese studies waarby meer as 180,000-groepe van ATM, BRCA a1, het onlangs agt, BRCA a1-vroue geïdentifiseer. 2, CHK2, PALB2, RAD51C en RAD51D) wat hoofsaaklik verantwoordelik is vir oorerflike BC. Onder hierdie gene het BRCA1 en BRCA2 (hierna verwys as BRCA1/2) die sterkste korrelasie met die ontwikkeling van borsgewasse getoon. , pankreas, kolorektale en melanoom. Vanaf ouderdom 13 tot 80 jaar is die kumulatiewe voorkoms van BC 72% in vroue met 'n BRCA1 patogeniese variant (PV) en 69% in vroue met 'n BRCA2 PV.14
Veral, 'n onlangse publikasie dui daarop dat BC risiko afhang van die tipe PV. Trouens, in vergelyking met patogeniese afkappende variante, word skreiende missense variante, veral in die BRCA1 geen, geassosieer met 'n verminderde risiko van BC, veral by ouer vroue.15
Die teenwoordigheid van BRCA1 of BRCA2 PV was geassosieer met verskillende biologiese en kliniespatologiese kenmerke.16,17 BRCA1-geassosieerde BC's is geneig om klinies aggressief, swak gedifferensieerde en hoogs proliferatief te wees. Hierdie gewasse is gewoonlik drievoudig negatief en het 'n vroeë ouderdom van aanvang. Tumore wat voorkom in BRCA2-gemuteerde pasiënte om tipies te gradeer-gedifferentieerde gematigde gematigde en gematigde tumore te vertoon. s is meer algemeen in lumen B en kom gewoonlik voor by ouer volwassenes.16-18 Veral mutasies in BRCA1 en BRCA2 verhoog sensitiwiteit vir spesifieke behandelings, insluitend platinumsoute en geteikende middels soos poli(ADP-ribose) polimerase inhibeerders (PARPi).19,20
Oor die afgelope paar jaar het die implementering van volgende-generasie volgordebepaling (NGS) in die kliniese praktyk 'n toenemende aantal BC-pasiënte in staat gestel om molekulêre toetse vir kankervatbaarheidsindroom te ondergaan, insluitend BRCA1/2.21 Terselfdertyd is definisies gebaseer op presiese kriteria met betrekking tot familiegeskiedenis, demografiese en kliniekopatologiese kenmerke die moeite werd om hierdie individuele konteks beter te identifiseer. muteer op BRCA1/2-sifting in spesifieke populasies, wat verskille oor geografiese streke uitlig.24–27 Alhoewel daar verslae oor die BC-kohort in Wes-Sicilië is, is minder data beskikbaar oor BRCA1/2-sifting in die oostelike Sisilië-bevolking.28,29
Ons beskryf hier die resultate van kiemlyn BRCA1/2-sifting in BC-pasiënte van Oos-Sicilië, wat die teenwoordigheid van BRCA1- of BRCA2-mutasies verder korreleer met die hoofklinikopatologiese kenmerke van hierdie gewasse.
'n Retrospektiewe studie is uitgevoer by die "Sentrum vir Eksperimentele Onkologie en Hematologie" by die Policlinico Hospitaal.Rodolico – San Marco in Catania.Van Januarie 2017 tot Maart 2021 is 'n totaal van 455 pasiënte met bors- en eierstokkanker, melanoom-, pankreas- of prostaatkanker verwys na ons genetiese toetsmolekulêre diagnostiese studie in die laboratoriumooreenstemming van BRCA2. Helsinki, en alle deelnemers het skriftelike ingeligte toestemming gegee voor molekulêre analise.
Histologiese en biologiese kenmerke (ER, PgR, HER2-status, Ki-67 en graad) van BC is op kernbiopsie of chirurgiese monsters geassesseer, met inagneming van slegs aggressiewe tumorkomponente. Op grond van hierdie kenmerke is BC's soos volg geklassifiseer: luminale A (ER+ en/of PgR+, HER2-, B0 Kiluminal, ER2-, Kiluminal, ERg,+7, 2-, 20-7, 20 %) -67≥20%), luminale B-HER2+ (ER en/of PgR+, HER2+), HER2+ (ER en PgR-, HER2+) of drievoudig negatief (ER en PgR-, HER2-).
Voordat BRCA1- en BRCA2-mutasiestatus geassesseer is, het 'n multidissiplinêre span, insluitend 'n onkoloog, 'n genetikus en 'n sielkundige, 'n tumorgenetika-konsultasie vir elke pasiënt gedoen om die teenwoordigheid van BRCA1 en/of BRCA1 te bepaal.of individue met 'n hoë risiko van PV in die BRCA2-geen. Pasiëntseleksie is uitgevoer volgens die Italiaanse Vereniging van Mediese Onkologie (AIOM) se riglyne en plaaslike Siciliaanse aanbevelings.30,31 Hierdie kriteria sluit in: (i) familiegeskiedenis van bekende patogene variante in vatbaarheidsgene (bv. BRCA1, BRCA2, TP53, PTEN);(ii) mannetjies met BC;(iii) diegene met BC en OC;(iv) vroue met BC <36 jaar, TNBC <60 jaar, of bilaterale BC <50 jaar;(v) persoonlike mediese geskiedenis van BC <50 jaar en ten minste een eerstegraadse familielid: (a) BC < 50 jaar;(b) nie-slymerige en nie-grens OC van enige ouderdom;(c) bilaterale BC;(d) manlike BC;(e) pankreaskanker;(f) prostaatkanker;(vi) twee of meer Persoonlike geskiedenis van BC > 50 jaar en familiegeskiedenis van BC, OC, of ​​pankreaskanker vir familielede wat eerstegraadse familielede van mekaar is (insluitend familielede met wie sy eerstegraadse familielede is);(vii) Persoonlike geskiedenis van OC en ten minste een eerstegraadse familielid: (a) vC <50 jaar;(b) NOC;(c) bilaterale BC;(d) manlike BC;(vii) wyfie met hoëgraadse sereuse OC.
'n 20 ml perifere bloedmonster is van elke pasiënt verkry en in EDTA-buise (BD Biosciences) versamel. Genomiese DNA is geïsoleer uit 0,7 ml volbloedmonsters met behulp van die QIAsymphony DSP DNA Midi kit Isolation Kit (QIAGEN, Hilden, Italië) volgens die vervaardiger se instruksies en deur 'n vloeibare buis van 0,7 ml geïsoleer. kwantifisering.Teikenverryking en biblioteekvoorbereiding word uitgevoer deur die Oncomine™ BRCA Research Assay Chef, gereed om in die Ion AmpliSeq™ Chef Reagents DL8 Kit gelaai te word vir geoutomatiseerde biblioteekvoorbereiding volgens die vervaardiger se instruksies. Die stel bestaan ​​uit twee multipleks PCR-primerpoele wat gebruik kan word om alle BRCA1 (NM_00730)_00730 (NM.0073)- en BRCA1 (NM.0073)-genen (NM_00730) (NM_00730) en BRCA1 (NM_0020)_0020000200002000020000200002000. kortweg, 15 µL van elke verdunde monster-DNA (10 ng) is by strepiesgekodeerde plate gevoeg vir biblioteekvoorbereiding en alle reagense en verbruiksgoedere is op die Ion Chef™-instrument gelaai. Geoutomatiseerde biblioteekvoorbereiding en strepieskode-monsterbiblioteekpoel is dan op die Ion Chef™-instrument uitgevoer. Die aantal voorbereide cientbiblioteke is toe deur 'n Qubit, 0 Fisher® beoordeel. MA, VSA) volgens die vervaardiger se instruksies. Laastens word biblioteke in ekwimolêre verhoudings gekombineer in Ion Chef™-biblioteekmonsterbuise (strepieskodebuisies) en op die Ion Chef™-instrument gelaai. Volgordebepaling is uitgevoer met behulp van 'n Ion Torrent S5 (Thermo Fisher Scientific) instrument (Thermo Fisher an I Scientific) is uitgevoer deur Ammoniak en I Scientific 510-analise (Thermo Fisher an I Scientific). plicon Suite (SmartSeq srl) en Ion Reporter sagteware.
Alle variant nomenklatuur het die huidige riglyne van die Human Genome Variation Consortium gevolg, wat aanlyn beskikbaar is (HGVS, http://www.hgvs.org/mutnomen). Die kliniese betekenis van BRCA1/2 variante is gedefinieer deur gebruik te maak van die klassifikasie van die International Consortium ENIGMA (Evidence-Based Network for Interpreting Germline Mutenmac/Database for Interpreting Germline Mutenigons) en https://-databasis soos Mutantumar/ UP, BRCAEXCHANGE , ClinVar, IARC_LOVD en UMD. Die klassifikasie sluit vyf afsonderlike risikokategorieë in: benigne (kategorie I), waarskynlik benigne (kategorie II), variant van onsekere betekenis (VUS, kategorie III), waarskynlik patogenies (kategorie IV), en patogenies (kategorie V) (kategorie V, mutatiewe funksie en ook ontleed proteïen-effek van 'n databasis-effek, 3). 32
Om potensiële kliniese betekenis aan elke VUS toe te ken, is die volgende berekeningsproteïenvoorspellingsalgoritmes gebruik: MUTATION TASTER, 33 PROVEAN-SIFT (http://provean.jcvi.org/index.php), POLYPHEN-2 (http:// /genetics.bwh.harvard.edu/pph2/) en Align_aggvgvah.GDvgd.GDvgvah. input.php).Variante wat as klas 1 en 2 geklassifiseer is, is as wilde tipe beskou.
Sanger-volgordebepaling het die teenwoordigheid van elke patogene variant bevestig. Kortliks, 'n paar spesifieke primers is ontwerp vir elke bespeurde variant deur gebruik te maak van die BRCA1- en BRCA2-geenverwysingsvolgorde (NG_005905.2, NM_007294.3 en NG_012772.3, NM_0000059, onderskeidelik uitgevoer deur die PCR, 000059, NM_000059). sing.
Pasiënte wat negatief getoets het vir die BRCA1/2 geen is getoets deur multipleks ligasie-afhanklike probe amplifikasie (MLPA) volgens die vervaardiger se instruksies om die teenwoordigheid van groot genomiese herrangskikkings (LGR) te assesseer. Kortliks, DNA monsters word gedenatureer en tot 60 BRCA1 en BRCA2 geen-spesifieke probes word gebruik, wat elkeen bestaan ​​uit 'n spesifieke DNA-volgorde met 'n reeks van ongeveer 60 nucleot-plooi-produkte. van PCR-amplikone, is toe ontleed deur kapillêre elektroforese en deur Cofalyser.Net-sagteware in samewerking met die toepaslike bondelspesifieke Cofalyser-tabelle (www.mrcholland.com).
Geselekteerde klinikopatologiese veranderlikes (histologiese graad en Ki-67% proliferasie-indeks) was geassosieer met die teenwoordigheid van BRCA1/2 PV, bereken deur gebruik te maak van die Prism sagteware v. 8.4 deur gebruik te maak van Fisher se presiese toets wat aanneem dat p-waarde <0.05 betekenisvol is.
Tussen Januarie 2017 en Maart 2021 is 455 pasiënte vir kiemlyn BRCA1/2-mutasies gekeur. Mutasietoetse is by die Policlinico Hospitaal se Sentrum vir Eksperimentele Onkologie en Hematologie uitgevoer.Volgens die Siciliaanse riglyn (http://www.gurs.regione.sicilia.it/Inndic,N.htm20,N.htm20,N. 020), die Rodolico van Catania – San Marco” in die algemeen, 389 pasiënte. Daar was borskanker, 37 eierstokkanker, 16 pankreaskanker, 8 prostaatkanker en 5 melanoom.Die verspreiding van pasiënte volgens kankertipe en ontledingsresultate word in Figuur 1 getoon.
Figuur 1 toon 'n vloeidiagram wat 'n oorsig van die studie toon. Pasiënte met bors-, melanoom-, pankreas-, prostaat- of eierstokgewasse is getoets vir mutasies in die BRCA1- en BRCA2-gene.
Afkortings: PV's, patogene variant;VUS, variant van onsekere betekenis;WT, wildtipe BRCA1/2-volgorde.
Ons het ons studies selektief op borskankerkohorte gefokus. Die pasiënte het 'n mediaan ouderdom van 49 jaar (reeks 23-89) en was oorwegend vroulik (n=376, of 97%).
Van hierdie proefpersone het 64 (17%) BRCA1/2-mutasies gehad en was almal vroulik. Vyf-en-dertig (9%) het PV en 29 (7.5%) het VUS. Sewentien (48.6%) van die 35 patogene variante het in BRCA1 voorgekom en 18 (51.4%) in BRCA2, terwyl 8.4% van die patogene in BRCA2 voorgekom het (8%) (Figure 1 en 2). LGR was nie teenwoordig in die MLPA-analise nie.
Figuur 2. Ontleding van BRCA1- en BRCA2-mutasies in 389 borskankerpasiënte.(A) Verspreiding van patogene variante (PV) (rooi), variante van onsekere betekenis (VUS) (oranje), en WT (blou) in 389 borskankerpasiënte;(B) 389 borskankerpasiënte Vyf-en-dertig (9%) het BRCA1/2 patogeniese variante (PV's) gehad. Onder hulle was 17 (48.6%) BRCA1 PV-draers (donkerrooi) en 18 (51.4%) was BRCA2-draers (ligrooi);(C) 29 (7.5%) van 389 proefpersone het VUS-, 5 (17.2%) BRCA1-gene (donkeroranje) en 24 (82.8%) BRCA2-gene (ligoranje) gedra.
Afkortings: PV's, patogene variant;VUS, variant van onsekere betekenis;WT, wildtipe BRCA1/2-volgorde.
Ons het vervolgens die voorkoms van BC molekulêre subtipes in pasiënte met BRCA1/2 PV ondersoek. Die verspreiding het 2 (5.7%) luminale A ingesluit, 15 (42.9%) luminale B, 3 (8.6%) luminale B-HER2+, 2 (5.7%) HER2+ en 13 (37.1%) TNCA-pasiënte (37.1%) , 97.1% TN-5, TN-5%-pasiënte. B BC, 2 (11.8%) het HER2+-siekte gehad, en 10 (58.8%) het TNBC. Tumore sonder BRCA1-mutasies was óf luminale A óf luminale B-HER2+ (Figuur 3). In die BRCA2-positiewe subgroep was 10 (55.6%) gewasse luminale B, 7ER (TN6 %) (TN6 %). BC en 2 (11.1%) was luminale A (Figuur 3). Geen HER2+ gewasse was teenwoordig in hierdie groep nie. BRCA1 mutasies is dus algemeen in TNBC pasiënte, terwyl BRCA2 veranderinge oorheersend is in lumen B individue.
Figuur 3 Voorkoms van borskankersubtipes by pasiënte met patogene variante in BRCA1 en BRCA2. Histogramme wat die verspreiding van BRCA1- (donkerrooi) en BRCA2- (ligrooi) PV's onder molekulêre subtipes van borskankerpasiënte aantoon. Getalle wat binne elke blokkie gerapporteer word, verteenwoordig die persentasie pasiënte met BRCA1- en BRCA2-kankertipe vir elke tipe kanker.
Afkortings: PV's, patogeniese variant;HER2+, menslike epidermale groeifaktor reseptor 2 positief;TNBC, trippel-negatiewe borskanker.
Vervolgens het ons die tipe en geen-lokalisering van BRCA1 en BRCA2 PV's beoordeel. In BRCA1 PV het ons 7 enkelnukleotiedvariante (SNV's), 6 delesies, 3 dupliserings en 1 invoeging waargeneem. Slegs een mutasie (c.5522delG) verteenwoordig 'n nuwe ontdekking. Die mees algemene BRCA1 PV is in beide 505 PV's opgespoor. verandering behels 'n delesie van vyf nukleotiede (CTAAT) in BRCA1-ekson 15, wat lei tot die vervanging van die aminosuur leucine deur tyrosine by kodon 1679, en as gevolg van 'n translasieraamverskuiwing met 'n voorspelde alternatiewe stopkodon lei tot voortydige proteïenafkapping. Alle ander veranderinge word in slegs een geval van die PV-plek gerapporteer (geen konsentrasie-plek. c.4357+1G>T) (Tabel 1).
Wat BRCA2 PV betref, het ons 6 delesies, 6 SNV'e en 2 dupliserings waargeneem. Geeneen van die veranderinge wat gevind is, is nuut nie. Drie mutasies het in ons populasie herhaal, c.428dup en c.8487+1G>A waargeneem in 3 proefpersone, gevolg deur c.5851_5854 herhaling van C.5851_5854. 5 van BRCA2, voorspel om 'n afgeknotte, nie-funksionele proteïen te kodeer. Die c.8487+1G>A-mutasie vind plaas in die introniese streek van BRCA2 intron 19 (± 1,2) en beïnvloed die splicing-konsensusvolgorde, wat lei tot veranderde splicing wat lei tot abnormale of afwesige a585AG-proteïen. Die c. otieddelesie vanaf nukleotiedposisies 5851 tot 5854 in die koderende ekson 10 van die BRCA2-geen en lei tot 'n translasieraamverskuiwing met 'n voorspelde alternatiewe stopkodon (p.S1951WfsTer). Opmerklik, soos voorheen gerapporteer, is beide veranderings c.631G>A en c.2>T dieselfde in die pasiënt opgespoor en c.2>T vervang. enosien (A) in BRCA2-ekson 7 met 'n guanien (G)-bevattende nukleotied wat lei tot 'n verandering van valien na isoleucien by kodon 211, isoleucien Aminosuur is 'n aminosuur met hoogs soortgelyke eienskappe. Hierdie verandering beïnvloed normale mRNA-splyting. Die tweede variant is geleë in 'n introniese streek en lei tot 'n dubbele (T)13-substitusie van BRCA-en-ctimien-geen. 7008-2A>T verandering kan veelvuldige transkripsies van verskillende lengtes genereer. Verder, in die groep BRCA2 PV's, was 4 uit 18 veranderinge (22.2%) intronies.
Ons het daarna BRCA1/2-skadelike mutasies in funksionele domeine en proteïenbindende streke gekarteer (Fig. 4). In die BRCA1-geen was 50% van PV's in die borskanker-klusterstreek (BCCR) geleë, terwyl 22% van die mutasies in die eierstokkanker-klusterstreek (OCCR) geleë was (Fig. 5. 4A. 7, in die BRCA2A-streek was geleë, en in die PVCR-variant). 42.8% van die mutasies was in die OCCR geleë (Fig. 4B). Vervolgens het ons die ligging van PV binne die BRCA1- en BRCA2-proteïendomeine geassesseer.Vir die BRCA1-proteïen het ons drie PV's in die lus- en opgerolde spoeldomeine gevind, en twee mutasies in die BRCT-domein (Fig. 4A-proteïen, in die BRCA2A-proteïen, in die BRC-proteïen, in die B-proteïen, in die BRC-domein, in die BRC-proteïen, in die herhaling) gekarteer. troniese en 3 eksoniese veranderinge is opgespoor in die oligo/oligosakkaried-bindende (OB) en toring (T) domeine (Figuur 4B).
Figuur 4 Skematiese voorstelling van BRCA1- en BRCA2-proteïene en lokalisering van patogene variante. Hierdie figuur toon die verspreiding van BRCA1 (A) en BRCA2 (B) patogene variante in borskankerpasiënte. Eksoniese mutasies word in blou getoon, terwyl introniese variante in oranje getoon word. Die staafhoogte verteenwoordig die aantal gevalle. Die BRCA1- en BRCA2-proteïene-domiene bevat die gerapporteerde funksionele (BRCA2-proteïene) domiene. in (RING) en 'n kernlokaliseringsvolgorde (NLS), 'n opgerolde spoeldomein, 'n SQ/TQ-klusterdomein (SCD), en 'n BRCA1 C-terminale domein (BRCT).(B) Die BRCA2-proteïen bevat agt BRC-herhalings, 'n DNA-bindende domein met 'n heliese domein (Helical, Helical, charotide-oligouwerin-binding) (T), en 'n NLS aan die C-kant. Gebiede wat die Borskankerklusterstreek (BCCR) en Ovariale Kankerklusterstreek (OCCR) genoem word, word onderaan getoon.*Verteenwoordig mutasies wat stopkodons bepaal.
Ons het toe BC-klinikopatologiese kenmerke ondersoek wat moontlik met die teenwoordigheid van BRCA1/2 PV kan korreleer. Volledige kliniese rekords was beskikbaar vir 181 BRCA1/2-negatiewe pasiënte (nie-draers) en alle draers (n = 35). Daar was 'n korrelasie tussen tumorproliferasietempo en graad.
Ons het die verspreiding van Ki-67 bereken op grond van die mediaan van ons kohort (25%, reeks <10-90%).Vakke met Ki-67 < 25% is gedefinieer as “lae Ki-67″, terwyl individue met waardes ≥ 25% as “hoë Ki-67″ beskou is. Betekenisvolle verskille tussen 1-0, 1 en 0, is gevind. draers (Fig. 5A).
Figuur 5 Korrelasie van Ki-67 met graadverspreiding in borskankervroue met en sonder BRCA1 en BRCA2 PVs.(A) Boxplot wat mediaan Ki-67 waardes toon in 181 nie-draer BC pasiënte teenoor BRCA1 (18) of BRCA2 (17) PV pasiënte. graadgroepe (G2 en G3) volgens BRCA1- en BRCA2-mutasiestatus (WT-vakke, BRCA1- en BRCA2-PVs-draers).
Ons het eweneens ondersoek of tumorgraad met die teenwoordigheid van BRCA1/2 PV korreleer. Aangesien G1 BC afwesig was in ons populasie, het ons die pasiënte in twee groepe (G2 of G3) verdeel. In ooreenstemming met die Ki-67-resultate het die analise 'n statisties beduidende korrelasie tussen tumorgraad en BRCA1-mutasie aan die lig gebring, met 'n hoër proporsie van G3- nie-Figur0-draers in vergelyking met BRCA-draers in vergelyking met G3-<Figur0-draers. e 5B).
Vooruitgang in DNS-volgordebepalingstegnologie het ongekende vooruitgang in BRCA1/2 genetiese toetsing moontlik gemaak, met deurslaggewende implikasies vir pasiënte met 'n familiegeskiedenis van kanker. Tot op hede is ongeveer 20 000 BRCA1/2 variante geïdentifiseer en geklassifiseer volgens die American Society of Medical Genetics 35 en die ENIGMA6 BRCA-sisteem oor die geografiese gebiede heen.32/ s.37 Binne Italië het die koers van BRCA1/2 PV's gewissel van 8% tot 37%, wat wye intra-land wisselvalligheid toon.38,39 Met 'n bevolking van byna 5 miljoen, is Sicilië die vyfde grootste streek in Italië in terme van die aantal inwoners. Alhoewel daar data bestaan ​​oor die verspreiding van BRCA1/2 in die westelike deel van die weste, is daar geen uitgebreide bewyse van die oostelike deel van die ooste nie.
Ons studie is een van die eerste verslae oor die voorkoms van BRCA1/2 PV in BC-pasiënte in oostelike Sicilië.28 Ons het ons ontleding op BC gefokus, aangesien dit verreweg die mees algemene siekte in ons kohort is.
Wanneer 389 BC pasiënte getoets is, het 9% BRCA1/2 PV's gedra, eweredig versprei tussen BRCA1 en BRCA2. Hierdie resultate stem ooreen met dié wat voorheen in die Italiaanse bevolking gerapporteer is.28 Interessant genoeg was 3% (13/389) van ons kohort manlik. Hierdie koers is hoër as wat verwag is vir manlike borskanker (1% van alle populasie met mutasie van BRCA's) (1% van alle populasie van BRCA's wat gebaseer is op BRCA's), 40 BC's. , nie een van hierdie mans het 'n BRCA1/2 PV ontwikkel nie, dus was hulle kandidate vir verdere molekulêre analise om die teenwoordigheid van minder algemene mutasies soos PALB2, RAD51C en D, onder andere uit te sluit. Variante van onsekere betekenis is in 7% van die vakke gekry waarin BRCA2 VUS duidelik was. Selfs hierdie resultaat is konsekwent met 414 bewyse,28.
Toe ons die verspreiding van BC molekulêre subtipes in BRCA1/2 mutante vroue ontleed het, het ons bekende assosiasies bevestig tussen TNBC en BRCA1 PV (58.8%) en tussen luminale B BC en BRCA2 PV (55.6%).16,43 Die luminale A en HER2+ gewasse in BRCA1 en BRCA1 PV4 draers stem ooreen met bestaande literatuur3 draers.
Ons fokus dan op die tipe en ligging van die BRCA1/2 PV.In ons kohort was die mees algemene BRCA1 PV c.5035_5039delCTAAT.Alhoewel Incorvaia et al.het nie hierdie variant in hul Siciliaanse kohort beskryf nie, ander skrywers het dit as 'n kiemlyn BRCA1 PV.34 gerapporteer. Verskeie BRCA1 PV's is in ons kohort gevind – bv. c.181T>G, c.514del, c.3253dupA en c.5266dupC – wat in hierdie twee Sici- en 1G-muters waargeneem is (BRC>28 van c. .5266dupC) word algemeen gevind in Ashkenazi-Jode van Oos- en Sentraal-Europa (Pole, Tsjeggies), Sloweens, Oostenryks, Hongaarse, Wit-Russies en Duitsers), 44,45 en, in die Verenigde State en Argentinië, is onlangs gedefinieer as 'n "herhalende kiemlynvariant" in Italiaanse pasiënte met BC en OC5134c was voorheen geïdentifiseerde kankerpasiënte van BC en OC5134c. in Palermo en Messina. Interessant genoeg, selfs Incorvaia et al.het die c.3253dupA-variant in sommige families in Catania gevind.28 Die mees verteenwoordigende BRCA2 PV's is c.428dup, c.5851_5854delAGTT en die introniese variant c.8487+1G>A, wat in meer besonderhede gerapporteer is 28 in 'n pasiënt in Palermo met c.4258dupdel, c.4258d. noordwestelike Sicilië, hoofsaaklik in die Trapani- en Palermo-streke, terwyl c.5851_5854delAGTT PV in huishoudings in noordwestelike Sisilië waargeneem is. Die 8487+1G>A-variant was meer algemeen in vakke van Messina, Palermo en Caltanissetta.28 Rebbeck et al.voorheen die c.5851_5854delAGTT-verandering in Colombia beskryf.37 Nog 'n BRCA2 PV, c.631+1G>A, is gevind in BC- en OC-pasiënte van Sicilië (Agrigento, Siracusa en Ragusa).28 Opmerklik het ons die naasbestaan ​​van twee BRCA2-variante in dieselfde BRCA2->208-pasiënt (BRCA.7G>A,-pasiënt) en c31.708-pasiënt waargeneem. wat ons aangeneem het om in cis-modus geskei te wees, soos voorheen so gerapporteer.34,46 Hierdie BRCA2-uble-mutasies word inderdaad gereeld in die Italiaanse streek waargeneem en daar is gevind dat dit voortydige stopkodons inbring, wat boodskapper-RNA-splywing beïnvloed en die BRCA2-proteïen laat misluk.47,48
Ons het ook BRCA1 en BRCA2 PV's in vermeende OCCR- en BCCR-streke van proteïendomeine en gene gekarteer. Hierdie streke is beskryf deur Rebbeck et al.as risiko-areas vir die ontwikkeling van onderskeidelik eierstok- en borskanker.49 Die bewyse aangaande die verband tussen die ligging van kiemlynvariante en die risiko van bors- of eierstokkanker bly egter omstrede.28,50-52 In ons bevolking was BRCA1 PV's hoofsaaklik in die BCCR-streek geleë, terwyl BRCA2 PV's oorwegend in die BCCR-streek geleë was, waar daar onoorheersend was tussen enige PV-gebiede wat ons bevind. OCCR- en BCCR-streke en BC-kenmerke. Dit kan wees as gevolg van die beperkte aantal pasiënte met BRCA1/2-mutasies. Vanuit 'n proteïendomeinperspektief word BRCA1 PV's langs die hele proteïen versprei, en BRCA2-veranderings word verkieslik in die BRC-herhalingsdomein gevind.
Laastens het ons BC-klinikopatologiese kenmerke met BRCA1/2 PV gekorreleer. As gevolg van die beperkte aantal pasiënte wat ingesluit is, het ons slegs 'n beduidende korrelasie tussen Ki-67 en tumorgraad gevind. Alhoewel die assessering en interpretasie van Ki-67 ietwat kontroversieel bly, is dit seker dat hoë proliferatiewe koerse geassosieer word met 'n verhoogde risiko van siekte-oorlewing en "afname vir die herhaling van die siekte en die afname van die siekte-oorlewing en "afname". laag” Ki-67 is 20%. Hierdie drempel is egter nie van toepassing op ons BRCA1/2-mutasie-pasiëntpopulasie nie, wat 'n mediaan Ki-67-waarde van 25% het. Hierdie tendens in hoë Ki-67-koerse kan verklaar word deur die voorkoms in ons luminale B- en TNBC-kohorte, waarvan min luminale A-vere-gewasse daarop dui dat 'n Ki-6 tot 7% ​​hoër bewyse was (Howe mag dalk 'n hoër afsny van Ki-67%) voorkom. stratifiseer pasiënte volgens hul prognose.53,54 Uit die resultate van ons ontleding is 'n beduidende korrelasie nie verbasend nie.Kom voor tussen hoë Ki-67 en grade en die teenwoordigheid van BRCA1 PV. Trouens, BRCA1-verwante gewasse is tipies van TNBC en vertoon meer aggressiewe kenmerke.16,17
Ten slotte verskaf hierdie studie 'n verslag oor die mutasiestatus van BRCA1/2 in 'n BC-kohort van Oos-Sicilië. Oor die algemeen stem ons bevindinge ooreen met bestaande bewyse, beide in terme van mutasievoorkoms en kliniko-patologiese kenmerke in BC. Meer studies in groter populasies van BRCA1/2-mutante BC-pasiënte, soos die gebruik van multigenoom-analise, is verwerplik om mutasie-analise te evalueer. gereeld as BRCA1/2. Dit sal die identifikasie en behoorlike bestuur van die toenemende aantal proefpersone met 'n verhoogde risiko van kanker moontlik maak as gevolg van genetiese mutasies.
Ons het bevestig dat pasiënte ingeligte toestemming onderteken het om hul tumormonsters anoniem vir navorsingsdoeleindes vry te stel. Alle pasiënte het skriftelike ingeligte toestemming onderteken volgens die Verklaring van Helsinki. Volgens die beleid van AOU Policlinico “G.Rodolico – S.Marco”, is hierdie studie vrygestel van etiese hersiening omdat die BRCA1/2-analise uitgevoer is volgens die skriftelike toestemming van hul pasiënte se gebruik van die kliniese inligtingspraktyke en ook die toestemming van die pasiënte se toestemmings gebruik. .
Ons bedank prof. Paolo Vigneri vir sy bystand in die versorging van borskankerpasiënte soos deur die Etiekkomitee versoek.
Federica Martorana rapporteer honoraria van Istituto Gentili, Eli Lilly, Novartis, Pfizer. Die ander skrywers verklaar geen botsing van belange in hierdie werk nie.
1. Sung H, Ferlay J, Siegel RL, et al.Global Cancer Statistics 2020: GLOBOCAN skat die voorkoms en mortaliteit van 36 kankers in 185 lande regoor die wêreld.CA Cancer J Clin.2021;71(3):209-249.doi: 21603.22/caac.