“Moet nooit twyfel dat ’n klein groepie bedagsame, toegewyde burgers die wêreld kan verander nie. Trouens, dis die enigste een daar.”
Cureus se missie is om die langdurige model van mediese publikasies te verander, waarin navorsingsvoorleggings duur, kompleks en tydrowend kan wees.
Plaatjie-ryke plasma/prp, weefselregenerasie, plaatjie-aktivering, glukose proliferatiewe terapie, plaatjies, proliferatiewe terapie
Haal hierdie artikel aan as: Harrison TE, Bowler J, Reeves K, et al. (17 Mei 2022) Die effek van glukose op plaatjietelling en -volume: implikasies vir regeneratiewe medisyne. Cure 14(5): e25081. doi:10.7759/cureus.25081
Bloedplaatjie-ryke plasma (PRP) en hipertoniese glukose-oplossings word algemeen gebruik vir inspuiting in regeneratiewe medisyne, soms saam. Die effek van hipertoniese glukose op bloedplaatjie-lise en -aktivering is nog nie voorheen gerapporteer nie. Ons het die effek van verhoogde glukosekonsentrasies op bloedplaatjie- en eritrosiettellings, sowel as selvolumes in PRP en volbloed (WB), getoets. 'n Vinnige gedeeltelike vermindering in bloedplaatjietelling het voorgekom met alle glukosemengsels gemeng met PRP of volbloed, wat ooreenstem met gedeeltelike lise. Na die eerste minuut het die plaatjietellings stabiel gebly, wat dui op 'n vinnige akkommodasie van oorblywende plaatjies tot uiterste (>2000 mOsm) hipertonisiteit. Na die eerste minuut het die plaatjietellings stabiel gebly, wat dui op 'n vinnige akkommodasie van oorblywende plaatjies tot uiterste (>2000 mOsm) hipertonisiteit. После первой минуты количество тромбоцитов оставалось стабильным, что указывает op быструю аккоходац тромбоцитов до экстремального (>2000 мОсм) гипертонуса. Na die eerste minuut het die plaatjietelling stabiel gebly, wat dui op 'n vinnige akkommodasie van die oorblywende plaatjies tot uiterste (>2000 mOsm) hipertonisiteit.第一分钟后，血小板计数保持稳定，表明残余血小板迅速适应极端（> 2000 mOsm）高渗状态.2000 mOsm）高渗状态. После первой минуты количество тромбоцитов оставалось стабильным, что указывает на быструю адаптацихи тромбоцитов к экстремальному (>2000 мОсм) гиперосмолярному состоянию. Na die eerste minuut het die bloedplaatjietelling stabiel gebly, wat dui op 'n vinnige aanpassing van die oorblywende bloedplaatjies na die uiterste (>2000 mOsm) hiperosmolêre toestand.Glukosekonsentrasies van 25% en hoër het gelei tot 'n beduidende toename in gemiddelde plaatjievolume (MPV), wat dui op 'n vroeë stadium van plaatjieaktivering. Verdere studies is nodig om te bepaal of plaatjielise of -aktivering plaasvind en of hipertoniese glukose-inspuiting alleen of in kombinasie met PRP addisionele kliniese voordeel kan bied.
In die 1950's het die Amerikaanse chirurg George Hackett ontdek dat hy gewrigs- en rugpyn permanent by baie pasiënte kon verlig deur 'n proliferatiewe oplossing in senings en ligamente in te spuit. Sy eksperimente op konyne het getoon dat die behandeling, wat hy proliferatiewe terapie genoem het, veroorsaak het dat die senings vergroot en versterk. Histologiese studies het bevestig dat nuwe kollageen tydens hierdie proses geproduseer word [1].
Gedurende die eerste paar dekades is baie verskillende verspreidingsoplossings probeer. Teen die 1990's het die meeste praktisyns hoë konsentrasies glukose as die veiligste en doeltreffendste metode beskou. Die werkingsmeganisme bly egter onduidelik.
Min kliniese studies is in die 20ste eeu na Hackett se werk uitgevoer. In die 2000's was daar egter hernieude belangstelling en verskeie suksesvolle kliniese proewe van proliferatiewe terapie is voltooi vir die behandeling van lae rugpyn [2], osteoartritis van die knie [3] en laterale epikondilitis [4].
Weefselregenerasie vereis die deelname van stamselle. Daarom moet hoë konsentrasies glukose op een of ander manier die migrasie, replikasie en differensiasie van stamselle veroorsaak. Ons hipotetiseer dat bloedplaatjies as boodskappers kan optree en dat hoë glukosekonsentrasies kan veroorsaak dat bloedplaatjies sitokiene en groeifaktore vrystel, wat regeneratiewe prosesse bevorder, veral stamselmigrasie na gebiede met hoë glukosekonsentrasies.
Bloedplaatjie-aktivering gaan altyd 'n toename in intrasellulêre kalsium vooraf [5]. Liu et al. het in 2008 getoon dat hoë glukosevlakke die aktiwiteit van oorgangsreseptorpotensiaal-kanonieke tipe 6 (TRPC6)-kanale in die plasmamembraan verhoog, wat lei tot 'n invloei van kalsiumione in bloedplaatjies [6]. Nog 'n studie het getoon dat blootstelling van die mikrotubuli-marginale sone aan kalsiumione ontspanning, uitbreiding en vervorming van die marginale sone veroorsaak, wat weer 'n verandering in vorm van skyf na sferies veroorsaak, wat lei tot gemiddelde bloedplaatjievolume (MPV) [7].
Ons hipotese in hierdie studie is dat blootstelling van bloedplaatjies aan hoë konsentrasies glukose die mikrotubuli-marginale sone en intrasellulêre omgewing beïnvloed, wat lei tot 'n toename in MPV.
Alle deelnemers het 'n ingeligte toestemmingsvorm onderteken nadat die besonderhede van die studie verduidelik is en voordat hulle die monsters ontvang het. In hierdie studie is slegs PRP-monsters met 'n hematokriet van meer as 2% gebruik sodat die eritrosiettelling (eritrosiet) en gemiddelde korpuskulêre volume van rooibloedselle (MCV) vir vergelyking ingesluit kon word.
Die studie is in vier fases uitgevoer, die eerste fase was PRP en die oorblywende fases was volbloed (Tabel 1). Soos voorheen beskryf [8], is alle relatiewe sentrifugale kragte (RCF, g-krag) bereken vanaf die middelpunt (Rmid, in cm) van die bloedkolom in die sentrifugale spuit. Ons het gekies om MPV as 'n merker van plaatjie-sensitisering en plaatjietelling as 'n aanduiding van potensiële plaatjie-lise te gebruik, wat albei maklik gemeet kan word op standaard hematologie-analiseerders.
In die eerste fase het 47 vrywilligers bloedmonsters geskenk—een buis etileendiamientetraasynsuur (EDTA) en een PRP-volbloedmonster (antikoaguleer met natriumsitraat (NaCl, 3%)) (Tabel 1). Plaas die wiptoestel onmiddellik in die buis. 'n Volledige bloedtelling (CBC) is in drievoud op EDTA-monsters uitgevoer, en NaCl-monsters is in drievoud vir CBC-analise geanaliseer, en toe is PRP voorberei deur verskeie metodes wat hierbo beskryf word [8]. Alle PRP-monsters is voorberei deur sentrifugering teen 900–1000 g. Meng elke PRP-monster vir 5–10 sekondes op 'n vortexmenger, en verdeel dan vyf 0,5 ml-aliquots in buisies.
Om die effek van plaatjie-blootstelling op verhoogde glukosekonsentrasies te evalueer, is gelyke hoeveelhede (0.5 ml) van 0%, 5%, 12.5%, 25% en 50% glukose in water met plaatjiemonsters gemeng om 0%, 2.5%, 6.25%, 12.5% ​​en 25% konsentrasies van die glukosemengsel te verkry, en die buise is vir 15 minute op 'n proefbuisskudder gemeng. Die TAC van elke mengsel is na 15 minute in drievoud geanaliseer. Plaatjietelling (PLT), RBC-telling, MCV en MPV is vir elke buis gemiddeld, en die gemiddelde plaatjietelling, RBC-telling, MCV en MPV is vir alle PRP-monsters bereken.
Nadat die eerste fase van data-insameling voltooi is, het ons 'n beduidende toename in plaatjievolume in PRP-plaatjies opgemerk na die byvoeging van D50W. PRP-plaatjies verteenwoordig nie noodwendig alle plaatjies in die bloed nie, en PRP-medium verskil van WB-medium. Daarom het ons besluit om 'n tweede fase-proefneming uit te voer oor die effek van die byvoeging van D50W tot volbloed.
Vir die tweede rondte het ons 'n steekproefgrootte van 30 gekies gebaseer op die resultate van die eerste reeks, soos beskryf in die Analise-afdeling. In hierdie reeks het 20 vrywilligers bloedmonsters geskenk (Tabel 1). Volbloed (1.8 ml) is in 'n 3 ml-spuit getrek en met 0.2 ml 40% NaCl antikoaguleer. Die volbloedspuit is vir vyf sekondes met 'n vortexmenger gemeng en die CBC is in drievoud geanaliseer. Na analise is antikoaguleerde bloed by 2 ml 50% glukose in 'n 5 ml-spuit gevoeg (finale glukosekonsentrasie was ongeveer 25% (D25)) en vir 30 minute in 'n skudbuis geplaas. Na 30 minute is D25/CBC in WB-spuite in drievoud geanaliseer. Plaatjietelling, RBC-telling, MCV en MPV per spuit is gemiddeld, en gemiddelde PLT, RBC-telling, MCV en MPV is vir elke monster bereken voor en na die byvoeging van glukose.
Omdat bloedplaatjies in volbloed algemeen blootgestel word aan hipertoniese glukose tydens proliferatiewe glukoseterapie as gevolg van minimaal indringende inspuiting, en dit nie algemeen is om PRP met hipertoniese glukose net voor inspuiting te kombineer nie, het ons besluit om hipertoniese glukose in kombinasie met WB in Afdeling 1, Stap Drie en vier, te bestudeer. In elke stadium het 20 vrywilligers 7-8 ml ACD-A (suur wat trinatriumsitraat (22.0 g/l), sitroensuur (8.0 g/l) en glukose (24.5 g/l), dekstrose-sitraatoplossing) vir bloedantikoagulante geskenk (Tabel 1). Slegs mengsels van glukose groter as 12.5% ​​is gebruik om die drempelpersentasie wat verband hou met 'n toename in MPV te bepaal. In die derde stadium word 1 ml bloed in 'n proefbuis geplaas. Meng dan die bloed vir 10 sekondes op 'n vortexmenger deur 1 ml 30% glukose, 40% glukose of 50% glukose by die buis te voeg om 'n finale glukosekonsentrasie van onderskeidelik 15%, 20% en 25% te verkry. Glukosebloedmonsters is onmiddellik na vermenging vir CBC geanaliseer en elke twee minute vir 30 minute herhaal.
Tydens die aanvanklike vermenging stel die byvoeging van 1:1 hipertoniese glukose en WB of PRP bloedplaatjies bloot aan konsentrasies bo 25% vir 'n paar sekondes. In die vierde stap, om die effek van hipertoniese glukose met minimale aanvanklike piekkonsentrasies te evalueer en die boonste grens van die effek van glukose te toets, het ons slegs 'n klein hoeveelheid bloed by D25W of D50W gevoeg. Plaas 1 ml D25W of D50W in 'n buis en voeg 0.2 ml WB by terwyl die monster vir 10 sekondes gevortex word. In hierdie gevalle is die bloed blootgestel aan glukose teen 'n konsentrasie van ongeveer 20% bo die finale konsentrasie, eerder as 50% bo die finale konsentrasie soos in Fase 3, wat gelei het tot finale glukosekonsentrasies van 20.8% en 41.6%. Gemengde monsters is met dieselfde tydsinterval as in stap 3 geanaliseer.
In die eerste stap van elke glukoseverdunningsreeks is 30 monsters geneem, aangesien dit die gepaste steekproefgrootte vir die loodsstudie was [9]. Aan die einde van elke fase (insluitend die eerste fase), evalueer die toereikendheid van die steekproefgrootte met behulp van die formule wat gebruik word om die steekproefgrootte te bepaal wat nodig is om die gemiddelde van die kontinue uitkomsveranderlike in een populasie te skat. Formule n = Z2 x SD2 /E2. In hierdie vergelyking is Z die Z-telling, SD is die standaardafwyking en E is die verlangde fout [10]. Ons alfa is 0.05, wat ooreenstem met 'n Z-waarde van 1.96, en ons verwag 'n fout van 5 (in persent). Daarom los ons op vir n = (1.962 x SD2)/52. Die resultate het getoon dat die steekproefgrootte wat vir elke stadium benodig is, kleiner was as die werklike aantal wat versamel is.
Gedurende periodes 1, 3 en 4 met meer as een glukosekonsentrasie, is die effek van verskillende glukosekonsentrasies geanaliseer deur die fraksionele verandering tussen tyd 0 en elke daaropvolgende tyd te vergelyk (fase 1 teen 15 minute, periode 3 teen 15 minute), en vier teen 15 sekondes, dan elke twee minute.) Veranderingstempo's vir elke tydperk is vergelyk met behulp van die Mann-Whitney U-toets omdat die data nie 'n normale verspreiding gevolg het soos bepaal deur die Shapiro-Wilk-normaliteitstoets nie. Aangesien 'n 1-tot-1-analise van verskeie groepe (vyf) in die eerste, derde en vierde stappe (vyf in totaal) uitgevoer is, is 'n Bonferroni-korreksie uitgevoer om die verlangde alfa-waarde aan te pas na ≤0.01, maar nie ≤0.05 nie.
Vermindering van plaatjietelling met alle konsentrasies hipertoniese dekstrose en 'n toename in MPV in PRP-plaatjies teen >12.5% ​​dekstrose-konsentrasie: PRP-plaatjietellings het gestyg van een tot vyf keer die konsentrasie in vergelyking met die basislyn-volbloed, wat wissel volgens die metode (nie uitgebeeld nie). Vermindering van plaatjietelling met alle konsentrasies hipertoniese dekstrose en 'n toename in MPV in PRP-plaatjies teen >12.5% ​​dekstrose-konsentrasie: PRP-plaatjietellings het gestyg van een tot vyf keer die konsentrasie in vergelyking met die basislyn-volbloed, wat wissel volgens die metode (nie uitgebeeld nie). Уменьшение количества тромбоцитов при всех концентрациях гипертонической декстрозы en увеличение MPV вRP концентрации декстрозы > 12,5%: количество тромбоцитов PRP увеличилось в 1-5 раз по сравнению с исходной зависимости от метода (nie показано). Verminderde plaatjietelling by alle hipertoniese dekstrose-konsentrasies en verhoogde MPV in PRP-plaatjies by >12.5% ​​dekstrose-konsentrasie: PRP-plaatjietelling het 1-5 keer toegeneem in vergelyking met basislyn-volbloed, afhangende van die metode (nie getoon nie). ).在> 12.5% ​​的葡萄糖浓度下，所有浓度的高渗葡萄糖降低血小板计数，PRP 血增加：与基线全血相比，PRP 血小板计数从浓度的1 倍上升到5 倍，因方漂，因方漂而 By 'n glukosekonsentrasie van >12.5% ​​verminder die hoë glukosekonsentrasie die bloedtelling, PRP-bloed-MPV neem toe: in vergelyking met 与基线全血 neem die PRP-bloedtelling toe van 1 tot 5 keer dié van die konsentrasie (nie beskryf nie). При концентрациях глюкозы >12,5% все концентрации гипертонической глюкозы снижали количество MP, повышали in тромбоцитах PRP: количество тромбоцитов PRP увеличивалось от 1- tot 5-kratenye концентраций исходными концентрациями цельной крови, в зависимости от метода (nie описано ). By glukosekonsentrasies >12.5% ​​het alle hipertensiewe glukosekonsentrasies plaatjietellings verlaag en MPV in PRP-plaatjies verhoog: PRP-plaatjietellings het 1- tot 5-voudig toegeneem in vergelyking met die basislyn-volbloedkonsentrasies, afhangende van die metode (soos beskryf).Figuur 1 toon dat die aantal bloedplaatjies met byna 75% afgeneem het na verdunning in water en met 20-30% na 15 minute se verdunning met verskillende konsentrasies glukose in vergelyking met die basislyn-PRP en 'n 1:1 verdunning aangepas vir volume (1-k1 met volumekorreksie). k -1 teling).1 teling).
Die aantal selle in elke verdunning word uitgedruk as 'n fraksie van die oorspronklike getal voor verdunning.
MPV het minimaal afgeneem tydens PRP-produksie, sonder verdere verandering in verdunningskonsentrasies tot 12.5% ​​in water of glukose (insluitend 25% PRP-glukosemengsels) en het met meer as 20% toegeneem na verdunning in 50% glukose-oplossing (Fig. .2). In teenstelling hiermee het eritrosiete geen beduidende verandering in volume getoon by enige verdunning anders as H2O nie.
Die gemiddelde volume selle in elke verdunning word uitgedruk as 'n persentasie van die oorspronklike volume voor verdunning.
'n Soortgelyke, maar minder uitgesproke afname in plaatjietelling en 'n toename in KV is waargeneem in borskanker wat aan 50% glukose blootgestel is (om met 25% glukose te formuleer). Tabel 2 vergelyk selgetalle en selvolumes in volbloed verdun in 50% dekstrose met fase 1 PRP-data verdun in 50% dekstrose. Veranderinge in RBC-telling en RBC MCV was nie voor die hand liggend nie en was nie die fokus van ons aandag nie.
SD = standaardafwyking, MD = gemiddelde verskil tussen groepe, SE = standaardafwyking van gemiddelde verskil, RBC = eritrosiete, PLT = bloedplaatjies, PRP = bloedplaatjie-ryke plasma, WB = volbloed
Nadat D50W by WB gevoeg is, was die persentasie verdunnings-aangepaste plaatjieverlies 7.7% (310±73 vs. 286±96) in vergelyking met 17.8% vir PRP-verdunning in D50W (664±348 vs. 544±277). MPV WB het met 16.8% toegeneem (van 10.1 ± 0.5 tot 11.8 ± 0.6), terwyl MPV PRP met 26% toegeneem het (9.2 ± 0.8 vs. 11.6 ± 0.7). Alhoewel die gemiddelde verskille in beide plaatjietellingvermindering en MPV-toename beduidend meer was met PRP, was die veranderinge in plaatjietellingvermindering binne WB byna beduidend (310 ± 73 tot 286 ± 96 (-7.7%); p = .06) en die toename in MPV was beduidend (10.1 ± 0.5 tot 11.8 ± 0.6 (+16.8) p < .001). Alhoewel die gemiddelde verskille in beide plaatjietellingvermindering en MPV-toename beduidend meer was met PRP, was die veranderinge in plaatjietellingvermindering binne WB byna beduidend (310 ± 73 tot 286 ± 96 (-7.7%); p = .06) en die toename in MPV was beduidend (10.1 ± 0.5 tot 11.8 ± 0.6 (+16.8) p < .001).Alhoewel die gemiddelde verskille in beide plaatjietellingvermindering en CVR-toename beduidend groter was met PRP, was veranderinge in plaatjietellingafname binne WB byna beduidend (310 ± 73 tot 286 ± 96 (-7.7%); p = 0.06).увеличение MPV было значительным (van 10,1 ± 0,5 tot 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001). Die toename in MPV was beduidend (van 10.1 ± 0.5 tot 11.8 ± 0.6 (+16.8) p < 0.001).尽管PRP 在血小板计数减少和MPV 增加方面的平均差异显着更大，但WB内血小板计数减少的变化几乎是显着的（310 ± 73 至286 ± 96 (-7.7%)；p = .06）和的增加是显着的（10.1 ± 0.5 到11.8 ± 0.6 (+16.8) p < .001）.尽管 PRP 在 血小板 计数 和 和 增加 方面 的 平均 差异减少 的 几乎 是 显着 的 （（（310 ± 73 至 286 ± 96 (-7.7%) ； p = .06）和MPV 的睯暘映瀄睯暘（瀝增嚘. ± 0,5 到11,8 ± 0,6 (+16.8) p < .001）.Die verandering in plaatjietellingvermindering binne die WB was byna beduidend (van 310 ± 73 tot 286 ± 96 (-7.7%); p = 0.06), hoewel PRP beduidend groter gemiddelde verskille in plaatjietellingvermindering en MPV-toename gehad het, en die toename in MPV was beduidend.(от 10,1 ± 0,5 tot 11,8 ± 0,6 (+16,8) р < 0,001). (van 10.1 ± 0.5 tot 11.8 ± 0.6 (+16.8) p < 0.001).
'n Finale konsentrasie van 20% glukose was nodig om 'n beduidende verandering in MPV te sien, maar die verandering in MPV was meer prominent by die finale konsentrasie van 25%. Plaatjieverlies het gestabiliseer na die aanvanklike afname. Ons het 'n aanvanklike skerp afname in KV opgemerk, maar KV is vinnig herstel by die finale glukosekonsentrasie van 25%, wat aansienlik hoër was as die KV-vlakke wat waargeneem is by die finale glukosekonsentrasies van 20% en 15% (Fig. 3 en links van Tabel 3; geskakeerde blokkies). dui p-waardes ≤ alfa aan met 'n Bonferroni-korreksie van 0.01). Daar was ook 'n aanvanklike skerp afname in die aantal PLT, waargeneem in die aanvanklike fase van 0-15 s, en het toe stabiel gebly (van 15 s tot 30 min; links van tabel 4).
Die byvoeging van verskillende konsentrasies glukose tot volbloed het gelei tot 'n aanvanklike vinnige afname in MPV, gevolg deur 'n konsentrasie-afhanklike herstel van meer as 20%. Die legende toon die konsentrasie glukose na verdunning. D15, D20 en D25 is in 'n 1:1 verdunning uitgevoer. D21 en D41 is in 'n 1:5 verdunning uitgevoer.
Tabel 4 toon die verandering in plaatjietelling wanneer dit in hipertoniese glukose verdun word. Ons het 'n dosisafhanklike verband waargeneem tussen die onmiddellike daling in PLT-getalle by die 1:1 verdunning en by die 1:5 verdunning. Deur die 1:1 verdunnings as 'n enkele groep met die 1:5 verdunnings te vergelyk, het die 1:1-groep 'n onmiddellike afname in plaatjietelling gehad, minder as die 1:5-groep (66±48 000 (23%) teenoor 99±69 000 (37%). (p = 0,014) in die 1:5-groep. Na 'n aanvanklike daling by die eerste meetpunt het die plaatjietelling as 'n persentasie van glukose gestabiliseer (Fig. 4).
Wanneer volbloed in 'n 1:1-verhouding by glukose gevoeg word, word die plaatjietelling met ongeveer 25% verminder. Wanneer volbloed egter in 'n verhouding van 1:5 bygevoeg is, was die vermindering baie groter – ongeveer 50%.
41% glukose het MPV vinniger en meer dramaties verhoog as 25% of 21%. MPV-resultate word in Figuur 3 getoon. By alle ander verdunnings is geen onmiddellike aanvanklike afname in MPV waargeneem na die byvoeging van 50% glukose nie. Met die gebruik van 25% glukose (glukosekonsentrasie 20.8% by die finale verdunning), was die verandering in MPV vergelykbaar met die verandering in 20% glukose by 'n 1:1 verdunning (Fig. 3). Alhoewel veranderinge in MPV aanvanklik groter was by die 41% gemengde konsentrasie as by 25%, was die verskil in MPV tussen 41% en 25% na 16 minute nie meer beduidend nie (Tabel 3, regs). Dit is ook interessant dat 25% glukose MPV meer effektief verhoog het as 20.8%.
Hierdie in vitro-studie het ons hipotese gedeeltelik bevestig. Dit het potensiële gedeeltelike plaatjie-lise deur dekstrose-mengsel getoon, 'n vinnige akkommodasie van plaatjies tot uiterste hipertonisiteit, en 'n beduidende styging in MPV in reaksie op > 25% konsentrasies hipertoniese dekstrose. Dit het potensiële gedeeltelike plaatjie-lise deur dekstrose-mengsel getoon, 'n vinnige akkommodasie van plaatjies tot uiterste hipertonisiteit, en 'n beduidende styging in MPV in reaksie op > 25% konsentrasies hipertoniese dekstrose. Он показал потенциальный частичный лизис тромбоцитов примесью декстрозы, быструю аккомодациц тромби экстремального гипертонуса en значительное повышение MPV в ответ op гипертоническую концентрацию декстрозы > 25%. Dit het potensiële gedeeltelike plaatjie-lise met dekstrose, vinnige plaatjie-akkommodasie tot uiterste hipertonisiteit, en 'n beduidende toename in MPV in reaksie op hipertoniese dekstrosevlakke >25% getoon.它显示出通过葡萄糖混合物潜在的部分血小板溶解，血小板快速适应极端高渗，以及响应> 25% 浓度的高渗葡萄糖时MPV 显着上升.它 显示 出 通过 葡萄糖 潜在 的 部分 血小板 溶解 血小板 快速 适庸响应> 25% 浓度 高渗 葡萄糖 时 时 mpv 显着。。。。。 Он показывает потенциальный частичный лизис тромбоцитов смесями с глюкозой, быструю адаптацию тромбоцитов экстремальному гипертонусу en значительное увеличение MPV в ответ op концентрацию гипертонической глюкозы > 25%. Dit toon potensiële gedeeltelike plaatjie-lise deur glukosemengsels, vinnige plaatjie-aanpassing aan uiterste hipertonisiteit, en 'n beduidende toename in MPV in reaksie op hipertoniese glukose >25%.Die aanvanklike toename was maksimaal teen 41.6% glukoseblootstelling, maar die toename in MPV het 25% glukoseblootstelling ongeveer 20 minute na blootstelling benader.
Die konsentrasie van bloedplaatjies word deur glukose beïnvloed. Ons het opgemerk dat die hoeveelheid PLT by alle verdunnings van glukose afgeneem het. 'n Skerp daling in die aantal bloedplaatjies in H2O (0%) verdunnings van die PRP-reeks kan geassosieer word met osmotiese lise. Alternatiewelik kan dit 'n artefak wees wat veroorsaak word deur bloedplaatjie-klontering, maar dit is in teenstelling met die gebrek aan MPV-verandering by hierdie verdunning. Hierdie bevinding beteken dat sommige bloedplaatjies baie sensitief is vir hipoosmolariteit.
In alle 1:1 verdunnings van glukose het die hoeveelheid PLT met 20-30% afgeneem, selfs met D5W (hipotonies teen 252 mOsm), wat 'n spesifieke nie-osmotiese effek van glukose kan aandui, aangesien beide PLT en MPV onveranderd gebly het met 'n drievoudige toename in glukosekonsentrasie van D5W na D25W. Trouens, PLT-konsentrasies het geneig om effens toe te neem met toenemende osmolariteit.
Die afname in PLT tussen 1:1 en 1:5 verdunnings beteken dat die oplossingseffek afhang van die aanvanklike en finale glukosekonsentrasie. As dit slegs van die aanvanklike konsentrasie afhang, sou mens verwag om 'n verskil in PLT-vermindering tussen 1:1 konsentrasies te sien. Maar ons doen nie. As die lise-effek slegs van die finale glukosekonsentrasie afhang, verwag ons nie veel verskil tussen 'n 20% 1:1 verdunning en 'n 20.8% 1:5 verdunning nie. En tog het ons dit gedoen.
Indien plaatjieverlies as gevolg van plaatjie-lise plaasvind, word 'n gedeeltelike lisaat gevorm, waarna sitokiene en groeifaktore in die ekstrasellulêre omgewing vrygestel word. Verskeie studies het getoon dat plaatjie-lisaat amper so effektief is soos PRP as 'n proliferasie-oplossing [11]. PRP self is bewys as 'n effektiewe oplossing vir die behandeling van proliferasie [12-14].
Onreaktiewe bloedplaatjies sirkuleer in die vorm van 'n skyf wat versterk is met verskeie interne strukture. Tydens aktivering neem hulle 'n meer sferiese of amoeba-vorm aan, wat lei tot 'n toename in volume. Die toename in volume vereis 'n toename in oppervlakarea, wat die gevolg is van die ekstrusie van die oop tubulusstelsel (OCS) en die byvoeging van eksositiese granules tot die membraan. Dit moet nog bepaal word of die toename in MPV wat deur hipertoniese glukose veroorsaak word, een of albei van hierdie meganismes behels, maar indien laasgenoemde, dan sal 'n toename in MPV degranulasie aandui.
Hierdie studie het getoon dat blootstelling aan hoë konsentrasies glukose op PRP of volbloedplaatjies 'n toename in MPV binne 15 minute tot gevolg gehad het met 'n glukosekonsentrasie van onderskeidelik 25% en 41.6%.
Die toename in plaatjie MPV kan te wyte wees aan die dilatasie van die omliggende mikrotubuli-tangels in reaksie op kalsiuminvloei. Liu et al. Daar is getoon dat glukose kalsiuminvloei deur die plaatjie TRPC6-kanaal bemiddel [6]. Ons hipotese is dat glukose die ontspanning van mikrotubuli-tangels veroorsaak, wat lei tot 'n toename in MPV en plaatjie-sensitisering en/of -aktivering. Te oordeel aan ons resultate is dit egter slegs 'n deel van die storie. In ons toetse het geen konsentrasie onder D25W 'n toename in MPV tot gevolg gehad nie. Aangesien ons nie blootstelling aan glukosekonsentrasies tussen 12,5% en 25% getoets het nie, dui ons fase 1-resultate daarop dat daar 'n drempel in hierdie reeks glukosekonsentrasies kan wees wat lei tot 'n toename in MPV. Verdere toetse in stadiums 3 en 4 het getoon dat 20-25% glukose die drempel hiervoor blyk te wees, maar dit bly onduidelik hoekom.
Ons het ook 'n ~9% afname in MPV na sentrifugering waargeneem. Dit is nie duidelik of hierdie afname in MPV te wyte is aan groter en digter bloedplaatjies wat in die RBC-laag van die sentrifuge vasgevang is nie. Hierdie waarneming kan belangrik wees vir klinici, aangesien dit kan impliseer dat PRP-bloedplaatjies 'n kleiner en minder digte subgroep van WB-bloedplaatjies is.
In 'n vorige studie het ons getoon dat PRP-voorbereiding deur middel van manuele metodes goedkoop is [8]. As glukose weefselplaatjies of PRP sensitiseer, wat hulle meer vatbaar maak vir aktivering, of as PRP met gedeeltelike lisaat-eienskappe geproduseer word, kan dit regenerasie verbeter en die behoefte aan terapie verminder. Daarom kan die kombinasie van PRP en hoogs gekonsentreerde glukose meer koste-effektief wees as PRP of glukose alleen.
Ons studie het verskeie tekortkominge. Eerstens gebruik ons ​​PRP wat verkry is deur verskeie verskillende metodes. Dit kan lei tot teenstrydige resultate. Tweedens kon ons nie 'n biochemiese analise van enige van ons monsters uitvoer om meer akkuraat te bepaal of plaatjie-aktivering plaasgevind het nie. Ons wil graag P-selektien, plaatjiefaktor 4, monositiese plaatjie-aggregate of ander merkers van plaatjie-aktivering meet om die graad of teenwoordigheid van alfa-granule-degranulasie beter te verstaan, maar dit val buite die bestek van hierdie studie. Derdens kon ons nie deur elektronmikroskopie of ander metodes bevestig dat die toename in MPV in glukose-blootgestelde plaatjies te wyte was aan die effek op mikrotubuli-tangels nie.
Mengsels van WB of PRP met 25% glukose het MPV verhoog, wat die aanvang van plaatjie-aktivering aandui, hoewel hierdie studie nie die progressie van aggregasie of degranulasie getoon het nie. Die hipertoniese glukosemengsel het gelei tot plaatjieverlies, wat moontlik 'n litiese effek verteenwoordig. Gedeeltelike aktivering of lise van plaatjies kan weefselregenerasie na plaatjie-inspuiting veroorsaak. Dit is nie duidelik watter kliniese gevolge hierdie veranderinge kan hê nie. Verdere studies het meer akkurate metings van aktivering of lise getoon en die verskillende kliniese effekte van hipertoniese glukosemengsels met WB of PRP geëvalueer.
Glukose proliferatiewe terapie is 'n eenvoudige en goedkoop regeneratiewe terapie wat vinnig uitbrei en kliniese navorsing ondersteun. Hierdie studie dui op 'n fisiologiese meganisme wat, indien bevestig, ons kan help om 'n deel van die regeneratiewe meganisme van proliferatiewe terapie te verstaan.
Biomediese en Gesondheidsinformatika aan die Universiteit van Missouri, Kansas City School of Medicine, Kansas City, VSA
Menslike proefpersone: Alle deelnemers aan hierdie studie het toestemming gegee of nie. Die Internasionale Vereniging vir Sellulêre Geneeskunde het ICMS-2017-003-goedkeuring uitgereik. Die volgende protokol is goedgekeur vir verdere gebruik deur die Institusionele Hersieningsraad van die Internasionale Vereniging vir Sellulêre Geneeskunde: Titel: Berekening van plaatjie-ryke plasma-dwelmopbrengs gebaseer op basislyn-CBC-plaatjietelling. Dierproefpersone: Alle outeurs het bevestig dat geen diere of weefsels by hierdie studie betrokke was nie. Belangebotsings: In ooreenstemming met die ICMJE Uniform Disclosure Form, verklaar alle outeurs die volgende: Betalings-/diensinligting: Alle outeurs verklaar dat hulle geen finansiële ondersteuning van enige organisasie vir die ingediende werk ontvang het nie. Finansiële Verhoudings: Alle outeurs verklaar dat hulle tans of binne die afgelope drie jaar geen finansiële verhoudings met enige organisasie het wat in die ingediende werk belangstel nie. Ander Verhoudings: Alle outeurs verklaar dat daar geen ander verhoudings of aktiwiteite is wat die ingediende werk kan beïnvloed nie.
Harrison TE, Bowler J, Reeves K et al. (17 Mei 2022) Die effek van glukose op plaatjietelling en -volume: implikasies vir regeneratiewe medisyne. Cure 14(5): e25081. doi:10.7759/cureus.25081
© Kopiereg 2022 Harrison et al. Hierdie is 'n ooptoegangartikel wat versprei word onder die bepalings van die Creative Commons Attribution License CC-BY 4.0. Onbeperkte gebruik, verspreiding en reproduksie in enige medium word toegelaat, mits die oorspronklike outeur en bron erken word.