Nature.comን ስለጎበኙ እናመሰግናለን።እየተጠቀሙበት ያለው የአሳሽ ስሪት የተወሰነ የሲኤስኤስ ድጋፍ አለው።ለበለጠ ልምድ፣ የዘመነ አሳሽ እንድትጠቀም እንመክርሃለን (ወይም የተኳኋኝነት ሁነታን በኢንተርኔት ኤክስፕሎረር አሰናክል)።እስከዚያው ድረስ ቀጣይ ድጋፍን ለማረጋገጥ ጣቢያውን ያለ ቅጦች እና ጃቫስክሪፕት እናቀርባለን።
Angustifolius lupine (NLL, Lupinus angustifolius L.) ለምግብ ምርት እና ለአፈር መሻሻል የሚያገለግል ጥራጥሬ ተክል ነው።የአለም አቀፍ የኤንኤልኤል መስፋፋት እንደ ሰብል ብዙ በሽታ አምጪ ፈንገሶችን ስቧል፣ ሉፒን አንትሮክኖዝን ጨምሮ፣ አውዳሚውን የአንትራክኖስ በሽታ ያስከትላል።በኤንኤልኤል እርባታ ውስጥ ሁለት አሌሎች፣ Lanr1 እና AnMan፣ ተጨማሪ የመቋቋም አቅምን ይሰጣሉ፣ ነገር ግን ከስር ያሉት ሞለኪውላዊ ዘዴዎች አይታወቁም።በዚህ ጥናት ውስጥ, የ Lanr1 እና AnMan ማርከሮች የአውሮፓ NLL ናሙናዎችን ለማጣራት ጥቅም ላይ ውለዋል.ክትባቱ ቁጥጥር ባለበት አካባቢ መሞከር የሁለቱም ተከላካይ ለጋሾችን ውጤታማነት አረጋግጧል።የልዩነት የጂን አገላለጽ መገለጫ በተወካይ ተከላካይ እና በተጋለጡ መስመሮች ላይ ተካሂዷል።አንትሮክኖዝ መቋቋም የጂን ኦንቶሎጂ ቃላት "GO: 0006952 የመከላከያ ምላሽ", "GO: 0055114 Redox Process" እና "GO: 0015979 ፎቶሲንተሲስ" ከሚባሉት የጂን ኦንቶሎጂ ቃላት ከመጠን በላይ ከመግለጽ ጋር የተያያዘ ነው.በተጨማሪም፣ Lanr1(83A፡476) መስመር ከክትባት በኋላ በከፍተኛ ፍጥነት የመገለባበጥ ሂደት አሳይቷል፣ሌሎች መስመሮች ደግሞ የዚህ ምላሽ በ42 ሰአት ያህል መዘግየታቸውን አሳይተዋል።የመከላከያ ምላሾች ከ TIR-NBS, CC-NBS-LRR እና NBS-LRR ጂኖች, 10 ፕሮቲኖች በበሽታ ተውሳክ ውስጥ የተካተቱ ፕሮቲኖች, የሊፕድ ማስተላለፊያ ፕሮቲኖች, endoglucan-1,3-β-glucosidase, glycine-rich cell wall proteins, እና ጂኖች ከኦክሲጅን ምላሽ ሰጪ መንገድ ጋር የተያያዙ ናቸው.ለ 83A፡476 ቀደምት ምላሾች ከፎቶሲንተሲስ ጋር ተያይዘው የሚመጡ ጂኖችን በጥንቃቄ ማፈንን ጨምሮ በፈንገስ ባዮሎጂ የእፅዋት እድገት ወቅት ከተሳካ ጥበቃ ጋር የተገጣጠሙ ሲሆን ይህም ተፅዕኖ ፈጣሪ በሽታ የመከላከል አቅምን እንደሚያነሳሳ ይጠቁማል።የማንዴሎፕ ምላሽ ልክ እንደ አጠቃላይ አግድም መጎተት ዝግ ነው።
ጠባብ ቅጠል ያለው ሉፒን (NLL፣ Lupinus angustifolius L.) ከምዕራባዊ ሜዲትራኒያን ክልል የተገኘ ከፍተኛ የፕሮቲን እህል ነው።1,2.በአሁኑ ጊዜ ለእንስሳት እና ለሰዎች የምግብ ሰብል ሆኖ ይበቅላል.በተጨማሪም በሲምባዮቲክ ናይትሮጅን መጠገኛ ባክቴሪያ እና በአጠቃላይ የአፈር አወቃቀር መሻሻል በናይትሮጅን መጠገኛ ምክንያት በሰብል ማሽከርከር ስርዓቶች ውስጥ እንደ አረንጓዴ ፍግ ይቆጠራል።NLL ባለፈው ምዕተ-አመት ፈጣን የቤት ውስጥ ሂደትን አከናውኗል እና አሁንም በከፍተኛ የእርባታ ጫና ውስጥ ነው3,4,5,6,7,8,9,10,11,12.ኤንኤልኤልን በስፋት በማልማት፣ በሽታ አምጪ ፈንገስ በተከታታይ አዳዲስ የእርሻ ቦታዎችን በማዳበር አዳዲስ ሰብሎችን የሚያበላሹ በሽታዎችን አስከትሏል። ለሉፒን ገበሬዎች እና አርቢዎች በጣም የሚያስደንቀው አንትራክኖዝ በሽታ አምጪ ፈንገስ፣ ኮሌቶትሪክ ሉፒኒ (ቦንደር) ኒረንበርግ፣ ፌይለር እና ሃገዶርን13. ለሉፒን ገበሬዎች እና አርቢዎች በጣም የሚያስደንቀው አንትራክኖዝ በሽታ አምጪ ፈንገስ፣ ኮሌቶትሪክ ሉፒኒ (ቦንደር) ኒረንበርግ፣ ፌይለር እና ሃገዶርን13. Наиболее примечательным для фермеров и селекционеров люпина было примечательным для фермеров ሉፒኒ (ቦንደር) Nirenberg፣ Feiler & Hagedorn13. በሉፒን ገበሬዎች እና አርቢዎች ዘንድ በጣም የሚታወቀው አንትሮክኖዝ በተባለው በሽታ አምጪ ፈንገስ ኮሌቶትሪችም ሉፒኒ (ቦንደር) ኒረንበርግ፣ ፌይለር እና ሃገዶርን13 መከሰቱ ነው።对于羽扇豆农民和饲养者来说，最引人注目的是炭疽病的出现，它是由病原真说：最引人注目的是炭疽病的出现，它是由病原真说！ 3 引起的.对于羽扇豆农民和饲养者来说，最引人注目的是炭疽病的出现，它是由病原真語就病原真語說：最引人注目的是炭疽病的出现。 Наиболее поразительным для фермеров и селекционеров люпина ቶትሪኩም ሉፒኒ (ቦንደር) Nirenberg፣ Feiler & Hagedorn13. ለሉፒን ገበሬዎች እና አርቢዎች በጣም የሚያስደንቀው አንትራክኖስ በሽታ አምጪ ፈንገስ ኮሌቶትሪኩም ሉፒኒ (ቦንደር) ኒረንበርግ፣ ፌይለር እና ሃገዶርን13 መከሰት ነው።የበሽታው የመጀመሪያ ዘገባዎች ከብራዚል እና ከዩናይትድ ስቴትስ የመጡ ናቸው, የተለመዱ ምልክቶች በ 1912 እና 1929 በቅደም ተከተል ታይተዋል.ይሁን እንጂ ከ 30 ዓመታት ገደማ በኋላ, በሽታ አምጪ ተህዋሲያን እንደ ኮሌቶትሪክ ግሎኦስፖሪዮይድስ (ፔንዝ) ፔንዝ ተብሎ ተጠርቷል. & Sacc.፣ teleomorph Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld. & Sacc.፣ teleomorph Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld. & Sacc.፣ телеоморф ግሎሜሬላ ሲንጉላታ (ስቶንማን) ስፓልድ። & Sacc.፣ የግሎሜሬላ ሲንጉላታ (ስቶንማን) ስፓልድ ቴሌሞርፍ። & Sacc.፣有目的形态的 Glomerella cingulata (ስቶማን) ስፓልድ። & Sacc.፣有目的形态的 Glomerella cingulata (ስቶማን) ስፓልድ። & Sacc.፣ Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld в Целенаправленной морфологии. & Sacc.፣ Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld በታላሚ ሞርፎሎጂ። & H. Schrenk,. & H. Schrenk፣እና H. Schrenk. & H.施伦克፣ & H.施伦克፣እና H. Schlenk,.በ 20 ኛው ክፍለ ዘመን አጋማሽ ላይ የተደረገው የቅድመ-ህመም ፍኖቲፒንግ በኤንኤልኤል እና በቢጫ ሉፒን (L. luteus L.) ተደራሽነት ላይ አንዳንድ ተቃውሞዎችን አሳይቷል, ነገር ግን ሁሉም ነጭ ሉፒን (ኤል. አልቡስ ኤል.) የተሞከሩት ንክኪዎች በጣም የተጋለጡ ነበሩ15,16.ጥናቶች እንደሚያሳዩት የአንትሮክኖዝ እድገት ከዝናብ (የአየር እርጥበት) እና የሙቀት መጠን (በ 12-28 ዲግሪ ሴንቲግሬድ ክልል ውስጥ) ከፍተኛ የሙቀት መጠን መቋቋምን ወደ መጣስ ይመራል 17, 18. በእርግጥ, ኮኒዲያ ለመብቀል እና በሽታው ለመጀመር የሚያስፈልገው ጊዜ, በ 24 ° ሴ (4 ሰአታት) በ 1 የአየር እርጥበት ውስጥ በአራት እጥፍ ያነሰ ነበር.ስለዚህ እየተካሄደ ያለው የአለም ሙቀት መጨመር አንትሮኖዝ እንዲስፋፋ አድርጓል።ሆኖም በሽታው በፈረንሣይ (1982) እና በዩክሬን (1983) እንደ መጪው ስጋት አስጊ ሆኖ ታይቷል፣ነገር ግን በሉፒን ኢንዱስትሪ በጊዜው ችላ ተብሎ ነበር20,21።ከጥቂት አመታት በኋላ፣ ይህ አስከፊ በሽታ በአለም ላይ ተሰራጭቶ እንደ አውስትራሊያ፣ፖላንድ እና ጀርመን ያሉ ዋና ዋና የሉፒን አምራች ሀገራትንም ነካ።22,23,24።እ.ኤ.አ. በ1990ዎቹ አጋማሽ ላይ የአንትሮክኖዝ በሽታ መከሰቱን ተከትሎ፣ ሰፊ ምርመራ በ NLL19 ናሙናዎች ውስጥ በርካታ ተከላካይ ለጋሾችን መለየት ችሏል።ኤንኤልኤል ለአንትሮክኖዝ መቋቋም የሚቆጣጠረው በተለያዩ የጀርም ፕላዝማ ምንጮች ውስጥ በሚገኙ ሁለት የተለያዩ ዋና ዋና አለርጂዎች ነው፡ Lanr1 in cultivar Tanjil እና Wonga and AnMan in cultivar።ማንዳላይ 25, 26. እነዚህ alleles በመራቢያ ፕሮግራሞች ውስጥ የመቋቋም ችሎታ ያለው ጀርምፕላዝዝ ምርጫን የሚደግፉ ሞለኪውላዊ ምልክቶችን ያሟላሉ25,26,27,28,29,30.83A፡476 ላንር1 አለሌ የተሸከመው ተከላካይ የመራቢያ መስመር የ RIL ህዝብ ለ anthracnose ተከላካይነት ለመለየት በተጋለጠው የዱር መስመር P27255 ተሻገረ፣ ይህም የ Lanr1 ቦታን ወደ ክሮሞሶም NLL-1131፣ 32፣ 33 መመደብ አስችሎታል። NLL በተመሳሳይ ክሮሞሶም (NLL-11) ላይ የሚገኙትን ሶስቱም alleles የሚገኙበትን ቦታ ገልጿል ነገር ግን በተለያዩ ቦታዎች 29,34,35.ነገር ግን፣ በጥቂቱ RILs እና በጠቋሚዎች እና በተዛማጅ አለርጂዎች መካከል ያለው ትልቅ የጄኔቲክ ርቀት፣ ስለ ዘረ-መል (ጂኖቻቸው) አስተማማኝ መደምደሚያዎች ሊደረጉ አይችሉም።በሌላ በኩል በሉፒን ውስጥ የተገላቢጦሽ ጀነቲክስ አጠቃቀም በጣም ዝቅተኛ የመልሶ ማቋቋም አቅማቸው አስቸጋሪ ስለሆነ ይህ ደግሞ የዘረመል ማጭበርበርን ከባድ ያደርገዋል37።
እንደ 83A:476 (Lanr1) እና Mandelup (AnMan) ያሉ በግብረሰዶማውያን ግዛት ውስጥ የሚፈለገውን አሌል ተሸክሞ የሚኖረው የቤት ውስጥ ጀርምፕላዝዝ ልማት በዱር ህዝቦች ውስጥ ተቃራኒ የሆኑ የአለርጂ ውህዶች ባሉበት ሁኔታ አንትሮኖዝ መከላከልን ለማጥናት በር ከፍቷል።የሞለኪውላዊ ዘዴዎች እድሎች.በተወሰኑ ጂኖታይፕስ የሚመነጩ የመከላከያ ምላሾችን ያወዳድሩ።ይህ ጥናት የኤንኤልኤልን ለ C. ሉፒኒ ክትባት የሚሰጠውን የመጀመሪያ ትራንስክሪፕት ምላሽ ገምግሟል።በመጀመሪያ፣ 215 መስመሮችን የያዘው የአውሮፓ ኤንኤልኤል ጀርምፕላዝማ ፓነል ላንር1 እና አንማን አሌሌስ የሚያመለክቱ ሞለኪውላር ማርከሮችን በመጠቀም ታይቷል።ከዚያም አንትሮክኖዝ ፊኖቲፒንግ በ 50 NLL መስመሮች ላይ ተካሂዷል, ቀደም ሲል ለሞለኪውላር ማርከሮች, በተቆጣጠሩት ሁኔታዎች.በእነዚህ ሙከራዎች ላይ በመመስረት፣ በአንትሮክኖዝ ተከላካይነት የሚለያዩ አራት መስመሮች እና ላንር1/አንማን አሌሊክ ቅንብር ለሁለት ተጨማሪ አቀራረቦችን በመጠቀም ለተለያየ የመከላከያ ዘረመል መገለጫ ተመርጠዋል፡ ከፍተኛ የአር ኤን ኤ ቅደም ተከተል እና የእውነተኛ ጊዜ PCR መጠን።
የኤንኤልኤል ጀርምፕላዝም ስብስብ (N = 215) በጠቋሚዎች Lanr1 (Anseq3 እና Anseq4) እና AnMan (Anseq4) እና AnMan (AnManM1) የማጣሪያ ምርመራ እንደሚያሳየው አንድ መስመር ብቻ (95726፣ በሳላማንካ-ቢ አቅራቢያ) ለሁሉም ማርከሮች “የመቋቋም” አቅምን ያጠናክራል፣ 8 ለሁሉም ጠቋሚዎች የመቋቋም አቅም የለውም። 73.5%) መስመሮች.አስራ ሶስት መስመሮች የ Lanr1 ምልክት ማድረጊያ ሁለት "የሚቋቋሙ" alleles ያመርታሉ, እና 8 መስመሮች የ Lanr1 "የሚቋቋም" alleles አምርተዋል.ምልክት ማድረጊያ.የ AnMan ምልክት ማድረጊያው “የመቋቋም” (ተጨማሪ ሠንጠረዥ S1)።ሁለት መስመሮች ለ Anseq3 ማርከር heterozygous እና አንድ heterozygous ለ AnManM1 ማርከር ነበሩ።42 መስመሮች (19.5%) የ Anseq3 እና Anseq4 alleles ተቃራኒ ደረጃዎችን ተሸክመዋል፣ ይህም በእነዚህ ሁለት ሎሲዎች መካከል ከፍተኛ ድግግሞሽን ያሳያል።በተቆጣጠሩት ሁኔታዎች (ተጨማሪ ሠንጠረዥ S2) ውስጥ ያሉ አንትሮክኖስ ፊኖታይፕስ በተፈተኑት የጂኖይፕስ ዓይነቶች የመቋቋም ችሎታ ላይ ተለዋዋጭነት አሳይቷል ፣ ይህም በአንትሮሴስ ከባድነት ላይ ተንፀባርቋል።በአማካኝ ውጤቶች ውስጥ ያለው ልዩነት ከ 1.8 (በመጠነኛ ተከላካይ) ወደ 6.9 (ተጋላጭ) እና የእፅዋት ክብደት ልዩነት ከ 0.62 (ተጋላጭ) እስከ 4.45 ግ (ተከላካይ) ነው. በሙከራው ሁለት ድግግሞሽ (0.51 ለበሽታ ክብደት ውጤቶች, P = 0.00017 እና 0.61 ለዕፅዋት ክብደት, P <0.0001) እንዲሁም በእነዚህ ሁለት መመዘኛዎች (- 0.59 እና - 0.77, P <0.0001) መካከል በተመለከቱት እሴቶች መካከል ጉልህ የሆነ ትስስር ነበር. በሙከራው ሁለት ድግግሞሽ (0.51 ለበሽታ ክብደት ውጤቶች ፣ P = 0.00017 እና 0.61 ለዕፅዋት ክብደት ፣ P <0.0001) እንዲሁም በእነዚህ ሁለት መመዘኛዎች (- 0.59 እና - 0.77 ፣ P <0.0001) መካከል በተመለከቱት እሴቶች መካከል ጉልህ የሆነ ትስስር ነበረ። በቪያቬሌና ዶስቶቬርናያ ኮርሬላሺያ ሜዙዱ ዝናሽያሚ፣ ናብላቴዳሚሚ ቮዱህ ፖስቶቨርናያ ኮርሬልያሺያ ሜዙዱ ዝናሽያሚ፣ ናብላዳኤሚሚ 0,00017 እና 0,61 ዲሊያ ማሴ ራስቴኒያ፣ ፒ <0,0001)፣ እና ታክዚ ሜዝዱ ኤቲሚ ዶምያ ፓራምቴራሚ (-0,59 እና -0,77፣ Р <10) 0፣0)። በሙከራው ሁለት ድግግሞሽ (0.51 ለበሽታ ክብደት, P = 0.00017 እና 0.61 ለዕፅዋት ክብደት, P <0.0001), እንዲሁም በእነዚህ ሁለት መመዘኛዎች (- 0.59 እና -0.77, P <0.0001) መካከል በተመለከቱት እሴቶች መካከል ጉልህ የሆነ ትስስር ተገኝቷል.在两次重复实验中观察到的值之间存在显着相关性（疾病严重程度评分为0.0.00P1 = 1.50% 0.61፣ P <0.0001）以及这两个参数之间（- 0.59 和- 0.77፣ P <0.0001)።在 两 次重复 实验 中 观察 的 值 之间 存在 相关性 （疾病 严重程度 评 分严重 程度 评 分不1 分上。 0.00017 , 植物 为 为 0.61 , p <0.0001） 以及 两 个 参数 之间和 - 0.77፣ P <0.0001)። Наблюдалась значительная корреляция между значениями, наблюдаемыmy в двух повторностях, 00 017 እና ማሴ ራስቴኒያ 0,61, P <0,0001), እና ሜጄዱ ኤቲሚ ድቮሚያ ፓራሜትራሚ (-0,59 እና -0,0001) 0,77, P <0,0001. በተባዙ (የበሽታ ክብደት ነጥብ 0.51, P = 0.00017 እና የእጽዋት ክብደት 0.61, P <0.0001) እና በእነዚህ ሁለት መመዘኛዎች (-0.59 እና -0 .0001) 0.77, P<0.0001. መካከል በተመለከቱት እሴቶች መካከል ጉልህ የሆነ ትስስር ነበር. ).በተጋለጡ ተክሎች ውስጥ የሚታዩ የተለመዱ ምልክቶች የ "እረኛው ቀስት" መዋቅርን በሚመስል ግንድ ላይ መንቀጥቀጥ እና መጠምዘዝ, ከዚያም ኦቫል ወርሶታል ብርቱካንማ/ሮዝ ስፖሮዞይቶች (ተጨማሪ ምስል 1).ላንር1 (83A፡476 እና ታንጂል) እና አንማን (ማንዴሉፕ) ጂኖችን የሚሸከሙ የአውስትራሊያ መጠቀሚያዎች በመጠኑ ተከላካይ ናቸው፣ 0.0331 እና 0.0036)።እንዲሁም “የሚቋቋም” Lanr1 እና/ወይም AnMan alleles የሚይዙ አንዳንድ መስመሮች የበሽታውን ምልክቶች ያሳያሉ።
የሚገርመው "ተከላካይ" የማርጊሽ (ፒኤች.ዲ.ፒ.ፒ. (ዋጋን ለቁጥር (ፒ.ዲ.ዲ. / ኤም.ዲ.ዲ.ዲ.ፒ. የሚገርመው "ተከላካይ" የማርጊሽ (ፒኤች.ዲ.ፒ.ፒ. (ዋጋን ለቁጥር (ፒ.ዲ.ዲ. / ኤም.ዲ.ዲ.ዲ.ፒ. Интересно, что несколько линий ኤንኤልኤል остик антракнозу (сопоставимый или более высоky, чем для генотипов Lanr1 ወይም AnMan), таких как Boregine (значение 1) ቦጃር (значение P <0,0001 для оценки и 0,001 для массы растения) እና популяции B-549/79b (значение P <0,0001 днля ). የሚገርመው ነገር፣ ብዙ የኤንኤልኤል መስመሮች ምንም ዓይነት 'የሚቋቋም' ምልክት ማድረጊያ አሌሌል የሌላቸው እንደ ቦርጂን (P value <0.0001 ለሁለቱም መለኪያዎች)፣ ቦጃር (P ዋጋ <0.0001 ለዕፅዋት እና 0.00001 ለግምገማ እና ለክብደት 0.5017) እና ለ 0.0017 ህዝብ ለ ‹Lanr1› ወይም AnMan genotypes (ከ Lanr1 ወይም AnMan genotypes ጋር ሊነፃፀር የሚችል ወይም ከፍ ያለ) ከፍተኛ የመቋቋም ደረጃ አሳይቷል። 1 ለግምገማ እና ለክብደት አስፈላጊ አይደለም).有趣的是，一些缺乏任何“抗性”标记等位基因的NLL型相当或更高），例如 ቦረጂን（两个参数的P 值< 0.0001） B-549/79b（得分P 值< 0.0001፣重量不显着）。 ምንም ዓይነት "አንቲጂኒክ" ጠቋሚዎች የሌላቸው አንዳንድ የኤንኤልኤል ስርዓቶች ከፍተኛ አግድም የመቋቋም ችሎታ (Lanr1 ወይም AnMan ጂኖች ወይም ከዚያ በላይ) እንደ Boregine (ሁለቱም መለኪያዎች P <0.0001), Bojar (P ዋጋ <0.0001, የእጽዋት ክብደት 0.001) እና ጫና B-549/7 00.0 ጉልህ ያልሆነ ክብደት (P) ክብደት አለመሆኑ ትኩረት የሚስብ ነው. Интересно, что некоторые ሊኒኒ ኤን.ኤል.ኤል. к антракнозу (сравнимые или выше, чем у генотипов Lanr1 ወይም AnMan), такие как Boregine (значение P для обоих повыше,00ер <1) 1, масса растения 0,001) እና популяция B-549/79b (оценка P-значение <0,0001, масса незначительна). የሚገርመው ነገር፣ ምንም ዓይነት 'የመቋቋም' ምልክት የሌላቸው አንዳንድ የኤንኤልኤል መስመሮች ከፍተኛ መጠን ያለው አንትራክኖስ የመቋቋም ደረጃን አሳይተዋል (ከ Lanr1 ወይም AnMan genotypes ጋር ሊወዳደር ወይም ከፍ ያለ)፣ እንደ Boregine (P ዋጋ ለሁለቱም መለኪያዎች <0.0001) ክብደት ጉልህ አይደለም).ይህ ክስተት በጠቋሚ ጂኖታይፕስ እና በበሽታ ፍኖታይፕስ (ከ ~ 0.42 እስከ ~ 0.98 የፒ እሴቶች) መካከል ያለውን ትስስር እጥረት በማብራራት አዲስ የጄኔቲክ የመቋቋም ምንጭ ሊኖር እንደሚችል ይጠቁማል።ስለዚህ የኮልሞጎሮቭ-ስሚርኖቭ ሙከራ እንደሚያሳየው በአንትሮክሳይስ የመቋቋም ችሎታ ላይ ያለው መረጃ በመደበኛነት ለነጥቦች (P-values ​​0.25 እና 0.11) እና የእፅዋት ብዛት (P-እሴቶች 0.47 እና 0.55) ይሰራጫል ፣ እኔ ከ Lanr1 እና AnMan የበለጠ alleles ይሳተፋሉ ብዬ እገምታለሁ።
በአንትራክስ መከላከያ ምርመራ ውጤት ላይ በመመርኮዝ ለትራንስክሪፕት ትንታኔ 4 መስመሮች ተመርጠዋል-83A:476, Boregine, Mandelup, and Population 22660. እነዚህ መስመሮች በ RNA ቅደም ተከተል በክትባት ሙከራዎች ውስጥ እንደገና የተፈተኑ ናቸው, ይህም ካለፈው ፈተና ጋር ተመሳሳይ ከሆነ.የውጤት እሴቶቹ የሚከተሉት ነበሩ፡ Boregin (1.71 ± 1.39)፣ 83A: 476 (2.09 ± 1.38)፣ Mandelup (3.82 ± 1.42) እና የህዝብ ብዛት 22660 (6.11 ± 1.29)።
የኢሉሚና ኖቫሴክ 6000 ፕሮቶኮል በአማካይ 40.5 Mread ጥንዶች በአንድ ናሙና (29.7 እስከ 54.4 ኤምሬድስ) (ተጨማሪ ሠንጠረዥ S3) አሳክቷል።የማመሳከሪያ ነጥቦች በማጣቀሻው ቅደም ተከተል ከ 75.5% ወደ 88.6% ይደርሳሉ.በባዮሎጂያዊ ቅጂዎች መካከል በሙከራ ልዩነቶች መካከል ያለው የተነበበ ቆጠራ ውሂብ አማካኝ ግንኙነት ከ0.812 እስከ 0.997 (ማለት 0.959) ነው። ከተተነተኑት 35,170 ጂኖች ውስጥ፣ 2917 ምንም አይነት መግለጫ አላሳየም፣ እና ሌሎቹ 4785 ጂኖች በቸልተኝነት ደረጃ ተገልጸዋል (መሰረታዊ አማካይ <5)። ከተተነተኑት 35,170 ጂኖች ውስጥ፣ 2917 ምንም አይነት መግለጫ አላሳየም፣ እና ሌሎቹ 4785 ጂኖች በቸልተኝነት ደረጃ ተገልጸዋል (መሰረታዊ አማካይ <5)። Иz 35 170 ፕሮአናሊዚሮቫንጊ ገንኖቭ 2917 እና ፕሮጄልሲ овне (базовое среднее <5)። ከተተነተኑት 35,170 ጂኖች ውስጥ፣ 2917 ምንም አይነት መግለጫ አላሳየም፣ የተቀሩት 4785 ጂኖች ደግሞ በቸልተኝነት ደረጃ (ቤዝ አማካኝ <5) ተገልጸዋል።在分析的35,170 个基因中，2917 个没有表达，其他478535,170 Иz 35 170 ፕሮአናሊዚሮቫንጊ ገንኖቭ 2917 እና ኤክስፕረስሲሮቫሊስ፣ ኦስትልነስ 4785 е среднее значение <5)። ከተተነተኑት 35,170 ጂኖች ውስጥ፣ 2917ቱ አልተገለፁም እና የተቀሩት 4785 ጂኖች ቸልተኛ አገላለጽ ነበራቸው (መሰረታዊ አማካይ <5)።ስለዚህ በሙከራው ወቅት የተገለጹት የጂኖች ብዛት (ቤዝ አማካኝ ≥ 5) 27,468 (78.1%) (ተጨማሪ ሠንጠረዥ S4) ነበር።
ከመጀመሪያው ጊዜ ጀምሮ ሁሉም የኤንኤልኤል መስመሮች ለትራንስክሪፕት (ሠንጠረዥ 1) እንደገና በማዘጋጀት ለ C. lupini (strain Col-08) መከተብ ምላሽ ሰጥተዋል, ነገር ግን በመስመሮቹ መካከል ከፍተኛ ልዩነቶች ተስተውለዋል.ስለዚህ የተከላካይ መስመር 83A:476 (Lanr1 geneን የሚሸከም) በመጀመሪያው ጊዜ ነጥብ (6 hpi) ላይ ጉልህ የሆነ የትራንስክሪፕት ሪፐሮግራም አሳይቷል በዚህ ጊዜ ከሌሎች የጊዜ ነጥቦች ጋር ሲነፃፀር በ 31-69 ጊዜ የተገለሉ ወደ ላይ እና ወደ ታች-ጂኖች ቁጥር ጨምሯል።በተጨማሪም ፣ በሁለተኛው ጊዜ (12 hpi) ላይ የጥቂት ጂኖች አገላለጽ በከፍተኛ ሁኔታ ተቀይሮ በመቆየቱ ይህ ጫፍ ለአጭር ጊዜ ነበር።የሚገርመው፣ በችግኝት ፈተና ውስጥ ከፍተኛ የመቋቋም ችሎታ ያሳየው ቦረጂን፣ በሙከራው ወቅት ይህን የመሰለ ግዙፍ የጽሑፍ ለውጥ አላደረገም።ነገር ግን በተለየ መልኩ የተገለጹት ጂኖች (DEG) ቁጥር ​​ለቦረጂን እና 83A፡476 በ12 HPI ተመሳሳይ ነው።ሁለቱም ማንዴላፕ እና የህዝብ ቁጥር 22660 በመጨረሻው ጊዜ ነጥብ (48 l/s) የ DEG ከፍተኛ ከፍታዎችን አሳይተዋል፣ ይህም የመከላከያ ምላሾች አንጻራዊ መዘግየትን ያሳያል።
ምክንያቱም 83A:476 ለ C. lupini በ 6 HPI ምላሽ ውስጥ ትልቅ የትራንስክሪፕት ዳግም መርሃ ግብር ተካሄዷል ከሁሉም መስመሮች ጋር ሲነጻጸር ~91% በዚህ ጊዜ የተስተዋሉት DEGs የዘር-ተኮር ናቸው (ምስል 1)።ነገር ግን፣ በጥናት መስመሮች መካከል 68.5%፣ 50.9% እና 52.6% DEG በቦረጂን፣ ማንደልፕ እና የህዝብ ቁጥር 22660 በቅደም ተከተል፣ በ83A፡476 ከተገኙት ጋር በተወሰነ ጊዜ ውስጥ መደራረብ በቀዳሚ ምላሾች መካከል በጥናት መስመሮች መካከል የተወሰነ መደራረብ ነበር።ሆኖም፣ እነዚህ DEGs በአሁኑ ጊዜ 83A:476 በመጠቀም ከተገኙት ዲጂዎች ውስጥ ትንሽ ክፍልፋይ (0.97–1.70%) ብቻ ነው የያዙት።በተጨማሪም ፣ ከሁሉም መስመሮች 11 DEGs በዚህ ጊዜ (ተጨማሪ ሰንጠረዦች S4-S6) ፣ የእጽዋት መከላከያ ምላሾችን የተለመዱ አካላትን ጨምሮ-የስብ ማስተላለፊያ ፕሮቲን (ታንጂልጂ_32225) ፣ endoglucan-1,3-β-glucoside ኤንዛይም (ታንጂልጂ_23384) ፣ ሁለት ውጥረት-የማይቻሉ ፕሮቲኖች እንደ SAM2G83 የቴክስ ፕሮቲን (ታንጂልጂ_32352)፣ እና ሁለት ግሊሲን-የበለፀጉ መዋቅራዊ ሕዋስ ግድግዳ ፕሮቲኖች (ታንጂልጂ_19701 እና ታንጂልጂ_19702)።በ83A:476 እና Boregine በ24 HPI (ጠቅላላ 16-38% DEG) እና በማንዴላፕ እና በህዝብ ቁጥር 22660 መካከል በ48 HPI (በአጠቃላይ 14-20% DEG) መካከል በግልባጭ ምላሾች በአንጻራዊነት ከፍተኛ መደራረብ ተፈጥሯል።
የቬን ዲያግራም በጠባብ ቅጠል ሉፒን (ኤንኤልኤል) መስመሮች ውስጥ በኮሌቶትሪችም ሉፒኒ የተከተቡ ልዩ ልዩ ጂኖች (DEG) ቁጥር ​​ያሳያል (ውጥረት Col-08 ከሉፒን ሜዳዎች በዊየርዠኒስ ፣ ፖላንድ ፣ 1999 የተገኘ)።የተተነተኑት የኤንኤልኤል መስመሮች፡ 83A፡476 (የሚቋቋም፣የ Lanr1 allele)፣ Boregine (የሚቋቋም፣የዘረመል ዳራ የማይታወቅ)፣ ማንደልፕ (በመጠነኛ የሚቋቋም፣ AnMan allele) እና የህዝብ ቁጥር 22660 (በጣም የተጋለጠ)።የ HPi ምህጻረ ቃል ከክትባት በኋላ ለሰዓታት ይቆማል.ግራፉን ለማቃለል ዜሮ እሴቶች ተወግደዋል።
በ 6 hpi ላይ ከመጠን በላይ የተጨመቁ የጂኖች ስብስብ በካኖኒካል አር ጂን ጎራዎች (ተጨማሪ ሠንጠረዥ S7) ላይ ተተነተነ.ይህ ጥናት በ83A፡476 ላይ ብቻ ከNBS-LRR ጎራዎች ጋር የጥንታዊ በሽታን የመቋቋም ጂኖች ግልባጭ አሳይቷል።ይህ ስብስብ አንድ TIR-NBS-LRR ጂን (tanjilg_05042)፣ አምስት CC-NBS-LRR ጂኖች (tanjilg_06165፣ tanjilg_06162፣ tanjilg_22773፣ tanjilg_22640 እና አራት ታንጂልግ_1616-2L) እና አራት ታንጂልግ_16162 (tanjilg_16162) እንዲሁም አራት NBS-Lrr (tanjilg_16162) እና አራት NBS-LRR (TANJILG_16162)።እነዚህ ሁሉ ጂኖች በተጠበቁ ቅደም ተከተሎች የተደረደሩ ቀኖናዊ ጎራዎች አሏቸው።ከNBS-LRR ዶሜይን ጂኖች በተጨማሪ በርካታ RLL kinases በ 6 hpi ነቅተዋል ይህም በቦረጂን (ታንጂልጂ_19877) ሁለቱ በማንዴሉፕ (ታንጂልጂ_07141 እና ታንጂልጂ_19877) እና በህዝብ 22660 (ታንጂል ታንጂ 2061 ጂ) 6 እና 09014 እና ሁለት .
ከ C. lupini (strain Col-08) ጋር ለመከተብ ምላሽ በከፍተኛ ሁኔታ የተለወጠ አገላለጽ ያላቸው ጂኖች ለጂን ኦንቶሎጂ (GO) ማበልጸጊያ ትንተና (ተጨማሪ ሠንጠረዥ S8) ተደርገዋል። በጣም በተደጋጋሚ የተወከለው ባዮሎጂያዊ ሂደት ቃል "GO: 0006952 የመከላከያ ምላሽ" በ 6 ከ 16 (የጊዜ × መስመር) ጥምረት ከፍተኛ ጠቀሜታ ያለው (P ዋጋ <0.001) (ምስል 2) ታየ. በጣም በተደጋጋሚ የተወከለው ባዮሎጂያዊ ሂደት ቃል "GO: 0006952 የመከላከያ ምላሽ" በ 6 ከ 16 (የጊዜ × መስመር) ጥምረት ከፍተኛ ጠቀሜታ ያለው (P ዋጋ <0.001) (ምስል 2) ታየ. Наиболее часто чрезмерно предስታቭለንን ተርሚኖም ቢዮሎጊቺስኮጎ ፕሮፕስሴስ ቢይል «GO: 0006952 ዛሺቲት» я 6 из 16 (время × линия) комбинаций с высокой значимостью (значение P <0,001) (አር. 2). በብዛት በብዛት የተወከለው ባዮሎጂካል ሂደት ቃል 'GO:0006952 የመከላከያ ምላሽ' ሲሆን ይህም በ 6 ከ 16 (ጊዜ × የዘር) ጥምረት ከፍተኛ ጠቀሜታ ያለው (P እሴት <0.001) (ምስል 2) ታየ።最常被过度代表的生物过程术语是“ሂድ:0006952具有高显着性（P 值< 0.001）（图2）。 በጣም ተወካይ የሆነው ባዮሎጂካል ሂደት ቃል "GO: 0006952 የመከላከያ ምላሽ" ነው, እሱም በ 6 ከ 16 (时间× 线) ውህዶች ውስጥ ይታያል, ከፍተኛ ጠቀሜታ (P ዋጋ <0.001) (图2) . Наиболее часто чрезмерно представленыm ቴርሚኖም ባዮሎጂቺስካጎ ፔሮሽንስ ቢይል "GO: 0006952 የመከላከያ ምላሽ", 1. комбинаций (время × линия) с высокой значимостью (значение P <0,001) (рис. 2). በብዛት በብዛት የተወከለው ባዮሎጂካል ሂደት ቃል 'GO:0006952 የመከላከያ ምላሽ' ሲሆን ይህም ከ 6 ከ 16 ውህዶች (የጊዜ × መስመር) ከፍተኛ ጠቀሜታ ያለው (P እሴት <0.001) (ምስል 2).ይህ ቃል በ 83A: 476 እና Boregine (6 እና 24 hpi) እና በአንድ ጊዜ በማንዴሉፕ እና በህዝብ ቁጥር 22660 (12 እና 6 hpi, በቅደም ተከተል) በሁለት የጊዜ ነጥቦች ላይ ከመጠን በላይ ተወክሏል.ይህ የሚጠበቀው ውጤት ነው, የመቋቋም መስመሮችን ፀረ-ፈንገስ ምላሽ ያሳያል.በተጨማሪም, 83A: 476 "GO: 0055114 redox process" በሚለው ቃል ከሚወከለው የኦክሳይድ ፍንዳታ ጋር የተያያዙ ጂኖችን በፍጥነት በማነሳሳት ለ C. lupini ምላሽ ሰጥቷል, ይህም የተለየ የመከላከያ ምላሽ ያሳያል, Boregine ደግሞ 'GO' ከሚለው ቃል ጋር የተያያዘ ልዩ የመከላከያ ምላሾችን አሳይቷል.0006950 የጭንቀት ምላሽ።የህዝብ ቁጥር 22660 የሁለተኛ ደረጃ ሜታቦሊቲዎችን የሚያካትተውን አግድም የመቋቋም ምላሽን አግብቷል ፣ ይህም ከመጠን በላይ የቃላቶችን ብዛት ጎላ አድርጎ ያሳያል “GO:0016104 triterpene biosynthesis” እና “GO:0006722 triterpene ተፈጭቶ ሂደት” (ሁለቱም ቃላቶች የመረጋጋት ጂኖች ስብስብ ናቸው) ፣ በ GO እና በ Bodel 2 ምላሽ መካከል ያለውን የመረጋጋት ውጤት ከግምት ውስጥ በማስገባት። ,ቅድመ ምላሽ 83A:476 (6 hpi) እና የዘገየ ምላሽ ማንደልፕ እና ህዝብ 22660 GO:0015979 'photosynthesis' እና ሌሎች ተዛማጅ ባዮሎጂካል ሂደቶችን ያካትታሉ።
ጠባብ ቅጠል ሉፒን (NLL) በአንትራክስ ሉፒን የተከተበው (በ1999 በዊየርዠኒስ ፖላንድ ከሉፒን ሜዳ የተገኘ ኮል-08 ዝርያ) በተገለበጠ ምላሾች በልዩ ሁኔታ የተገለጹ ጂኖች ማብራሪያ ላይ የተመረጡት የባዮፕሮሰሰር ጂን ኦንቶሎጂ ቃላት በጣም የተጋነኑ ናቸው።የተተነተኑት የኤንኤልኤል መስመሮች፡ 83A፡476 (የሚቋቋም፣ ሆሞዚጎስ ላንር1 allele)፣ Boregine (የሚቋቋም፣ የማይታወቅ የዘረመል ዳራ)፣ ማንደልፕ (በመጠነኛ ተከላካይ፣ ግብረ-ሰዶማዊውን አንማን አሌል የሚይዝ) እና ሕዝብ 22660 (የተጋለጠ)።
ይህ ጥናት ለ anthracnose መቋቋም አስተዋጽኦ የሚያደርጉትን ጂኖች ለመለየት ያለመ ስለሆነ GO "GO: 0006952 Defensive responses" እና "GO: 0055114 Redox ሂደቶች" ለሚሉት ቃላት የተመደቡት ጂኖች ከተቆራረጡ ጋር ተንትነዋል ምክንያቱም መነሻው ≥ 30 ቢያንስ በአንድ መስመር ነው።× በጊዜ ውስጥ ነጥብ በስታቲስቲክስ ጉልህ የሆኑ የሎግ2 እሴቶችን በማጣመር (የማጠፍ ለውጥ)።እነዚህን መስፈርቶች የሚያሟሉ የጂኖች ብዛት 65 ለ GO: 0006952 እና 524 ለ GO: 0055114 ነበር.
83A:476 GO:0006952 በሚለው ቃል የተገለጹ ሁለት DEG ከፍተኛ ከፍታዎችን አሳይቷል፣ የመጀመሪያው በ6 ጂኖች በአንድ ኢንች (64 ጂኖች፣ ወደ ላይ እና ወደ ታች ደንብ) እና ሁለተኛው በ 24 ጂኖች በአንድ ኢንች (15 ጂኖች ፣ ደንብ ብቻ)።Boregine በተጨማሪም GO:0006952 በአንድ ጊዜ ከፍተኛ ደረጃ ላይ እንደደረሰ አሳይቷል፣ ነገር ግን ባነሰ DEG (11 እና 8) እና ተመራጭ ማግበር።ማንዴሎፕ በ 12 እና 48 HPI ላይ የ GO:0006952 ሁለት ጫፎችን አሳይቷል, ሁለቱም 12 ጂኖች (የመጀመሪያው የሚያነቃ ጂኖች, ሁለተኛው ደግሞ አፋኝ ጂኖች ያሉት) ሲሆኑ, 22660 በ 6 HPI (13 ጂኖች) ላይ ያለው የ 22660 ህዝብ የጨመረው ከፍተኛ የበላይነት ነበረው.ደንብ.በእነዚህ ቁንጮዎች ውስጥ 96.4% የ GO:0006952 DEG ተመሳሳይ አይነት ምላሽ (ወደ ላይ ወይም ወደ ታች) እንደነበራቸው ልብ ሊባል የሚገባው ሲሆን ይህም በጂኖች ብዛት ላይ ልዩነት ቢኖረውም በመከላከያ ምላሾች ላይ ከፍተኛ መደራረብን ያሳያል.GO:0006952 ከሚለው ቃል ጋር የሚዛመደው ትልቁ ተከታታይ ቡድን ከረሃብ ውጥረት ጋር የተያያዘ መልእክት ፕሮቲን 22 (SAM22-like) ሲሆን ይህም ከክፍል 10 በሽታ አምጪ ፕሮቲን (PR-10) ፕሮቲን ክላድ እና ከዋናው ፕሮቲን ላቴክስ ጋር ነው።ተመሳሳይ (MLP-like) ፕሮቲን) ፕሮቲን (ምስል 3).ሁለቱ ቡድኖች በአገላለጽ ባህሪ እና በምላሹ አቅጣጫ ይለያያሉ።SAM22 መሰል ፕሮቲኖችን የሚመሰክሩት ጂኖች በመጀመርያ ጊዜ (6 ወይም 12 hpi) ላይ ተከታታይ እና ጉልህ የሆነ ኢንዳክሽን አሳይተዋል እና በአጠቃላይ በሙከራው መጨረሻ (48 hpi) ምላሽ የማይሰጡ ነበሩ፣ MLP መሰል ፕሮቲኖች ደግሞ በ6 hpi ላይ ቅንጅት አሳይተዋል።hpi83A:476 እና Mandelup በ 48 hp/ in፣ ሁሉም ሌሎች የመረጃ ነጥቦች ማለት ይቻላል ምላሽ አልሰጡም።በተጨማሪም ፣ የ SAM22 መሰል የፕሮቲን ጂኖች የገለፃ መገለጫዎች ልዩነት በአንታክኖዝ የመቋቋም ውስጥ ተለዋዋጭነት ተስተውሏል ፣ ምክንያቱም የበለጠ ተከላካይ መስመሮች የበለጠ ተጋላጭ ከሆኑ ጂኖች የበለጠ እነዚህን ጂኖች በከፍተኛ ሁኔታ ያነሳሳሉ።ሌላ LlR18A/B-like PR-10 ጂን ከSAM22-እንደ ፕሮቲን ጂን ጋር በጣም ተመሳሳይ የሆነ የአገላለጽ ዘይቤ አሳይቷል።
የባዮሎጂካል ሂደት ቃል ዋና ዋና ክፍሎች "GO: 0006952 የመከላከያ ምላሽ" እና የ Lanr1 እና AnMan alleles የእጩ ጂኖች መግለጫዎች ተለይተዋል.የሎግ2 ልኬት በተከተቡ (Colletotrichum lupini፣ strain Col-08፣ ከሉፒን ሜዳዎች የተገኘ፣ ዊዜኒካ፣ ፖላንድ፣ 1999) እና ቁጥጥር (በሻም-የተከተቡ) እፅዋት መካከል የሎግ2 እሴቶችን (የታጠፈ ለውጥ) ይወክላል።የሚከተሉት ጠባብ ቅጠል ሉፒን መስመሮች ተተነተኑ፡ 83A፡476 (የሚቋቋም፣ ግብረ-ሰዶማዊውን ላንር1 አሌል የሚይዝ)፣ ቦረጂን (የሚቋቋም፣ የጄኔቲክ ዳራ የማይታወቅ)፣ ማንደልፕ (በመጠነኛ የሚቋቋም፣ ግብረ-ሰዶማዊውን አንማን አሌል የሚይዝ) እና የህዝብ ቁጥር 22660 (ተጋላጭ)።
በተጨማሪም የ RNA-seq እጩ ጂኖች Lanr1 (TanjilG_05042) እና AnMan (TanjilG_12861) መገለጫዎች ተገምግመዋል (ምስል 3)።የ TanjilG_05042 ጂን በ 83A:476 ላይ ከፍተኛ ምላሽ (ማግበር) በመጀመሪያው ጊዜ (6 hpi) አሳይቷል፣ ታንጂልጂ_12861 በማንዴሎፕ ግን በሁለት የሰዓት ነጥቦች ላይ ጉልህ ነበር፡ 6 hpi (down regulation) እና 24 hpi (6 hpi)።ጋር)።ሊስተካከል የሚችል)).
በ GO: 0055114 "redox ሂደት" ውስጥ በጣም የተጋነኑ ጂኖች ሳይቶክሮም ፒ 450 ፕሮቲኖችን እና ፐርኦክሳይድ (ምስል 4) የሚይዙ ጂኖች ናቸው.ከ 83A:476 በ 6 HPI ለተለዩ ናሙናዎች ከፍተኛ ወይም ዝቅተኛው log2 (የማጠፍ ለውጥ) እሴቶች (ለ 86.6% ጂኖች) በአጠቃላይ በተከተቡ እና በተቆጣጠሩት እፅዋት መካከል ተስተውለዋል ፣ይህም ጂኖታይፕ ወሲብን ለመከተብ ያለውን ከፍተኛ ምላሽ ያሳያል።83A: 476 በጣም አስፈላጊ የሆነውን GO አሳይቷል: 0055114 DEG በ 6 hpi (503 ጂኖች), የተቀሩት መስመሮች በ 48 hpi (Boregine, 31 genes, Mandelup, 85 genes, and Population 22660, 78 genes))።በአብዛኛዎቹ የ GO:0055114 ቤተሰብ ጂኖች ውስጥ ለክትባት ሁለት አይነት ምላሾች (ማግበር እና መከልከል) ተስተውለዋል.የሚገርመው፣ GO ለሚለው ቃል እስከ 97.6% የሚደርሱት የ DEGs ተለይተው ይታወቃሉ፡ 0055114 በማንዴሉፔ በ 48 hp እነዚህ ምልከታዎች እንደሚጠቁሙት ምንም እንኳን በጣም ትንሽ መጠን ያለው (ማለትም የተውውቴሽን ሪዶክስ ጂኖች ቁጥር 85 ከ 503 ጋር) ፣ የዘገየ ትራንስክሪፕት ምላሾች ምሳሌ ከማንዴሎፕ 4 ጋር ተመሳሳይ ነው።በቦረጂን እና በህዝብ ቁጥር 22660 ይህ ውህደት በ 51.6% እና በ 75.6% ዝቅተኛ ነው.
የባዮሎጂ ሂደት "GO: 0055114 Redox ሂደት" የሚለው ቃል ዋና ዋና ክፍሎች መግለጫዎች ተገለጡ.የሎግ2 ልኬት በተከተቡ (Colletotrichum lupini፣ strain Col-08፣ ከሉፒን ሜዳዎች የተገኘ፣ ዊዜኒካ፣ ፖላንድ፣ 1999) እና ቁጥጥር (በሻም-የተከተቡ) እፅዋት መካከል የሎግ2 እሴቶችን (የታጠፈ ለውጥ) ይወክላል።የሚከተሉት ጠባብ ቅጠል ሉፒን መስመሮች ተተነተኑ፡ 83A፡476 (የሚቋቋም፣ ግብረ-ሰዶማዊውን ላንር1 አሌል የሚይዝ)፣ ቦረጂን (የሚቋቋም፣ የጄኔቲክ ዳራ የማይታወቅ)፣ ማንደልፕ (በመጠነኛ የሚቋቋም፣ ግብረ-ሰዶማዊውን አንማን አሌል የሚይዝ) እና የህዝብ ቁጥር 22660 (ተጋላጭ)።
83A:476 ከሲ ሉፒኒ ጋር ለመከተብ የተሰጡ ግልባጭ ምላሾች (ውጥረት ኮል-08) በተጨማሪም GO:0015979 "ፎቶሲንተሲስ" እና ሌሎች ተዛማጅ ባዮሎጂካል ሂደቶች (FIG. 5) ለሚለው ቃል የተሰጡ ጂኖች የተቀናጀ ጸጥታ ያካትታሉ።ይህ የGO:0015979 DEG ስብስብ በ6 hpi በ83A:476 በከፍተኛ ሁኔታ የተጨመቁ 105 ጂኖችን ይዟል።በዚህ ንዑስ ስብስብ ውስጥ፣ 37 ጂኖች በማንዴሉፕ በ48 HPI እና 35 በተመሳሳይ ጊዜ በ22660 ህዝብ ውስጥ ተቀንሰዋል፣ ይህም ለሁለቱም ጂኖታይፕስ የተለመዱ 19 DEGsን ጨምሮ።ከGO ጋር የሚዛመዱ DEGs የለም፡ 0015979 በማንኛውም ጥምረት (መስመር x ጊዜ) በከፍተኛ ሁኔታ ነቅቷል ።
የባዮሎጂ ሂደት "GO: 0015979 ፎቶሲንተሲስ" የሚለው ቃል ዋና ዋና ክፍሎች መግለጫዎች ተገለጡ።የሎግ2 ልኬት በተከተቡ (Colletotrichum lupini፣ strain Col-08፣ ከሉፒን ሜዳዎች የተገኘ፣ ዊዜኒካ፣ ፖላንድ፣ 1999) እና ቁጥጥር (በሻም-የተከተቡ) እፅዋት መካከል የሎግ2 እሴቶችን (የታጠፈ ለውጥ) ይወክላል።የሚከተሉት ጠባብ ቅጠል ሉፒን መስመሮች ተተነተኑ፡ 83A፡476 (የሚቋቋም፣ ግብረ-ሰዶማዊውን ላንር1 አሌል የሚይዝ)፣ ቦረጂን (የሚቋቋም፣ የጄኔቲክ ዳራ የማይታወቅ)፣ ማንደልፕ (በመጠነኛ የሚቋቋም፣ ግብረ-ሰዶማዊውን አንማን አሌል የሚይዝ) እና የህዝብ ቁጥር 22660 (ተጋላጭ)።
የልዩነት መግለጫ ትንተና ውጤቶች ላይ በመመስረት እና በሽታ አምጪ ፈንገስ ላይ የመከላከያ ምላሾች ውስጥ ተሳትፎ የሚገመተው, ይህ ሰባት ጂኖች ስብስብ የገለጻ መገለጫዎች በእውነተኛ ጊዜ PCR (ተጨማሪ ሠንጠረዥ S9) ለመለካት ተመርጧል.
የፑቲቭ ፕሮቲን ጂን ታንጂልጂ_10657 በሁሉም የተጠኑ መስመሮች እና የጊዜ ነጥቦች ከቁጥጥር (ማስመሰል) እፅዋት (ተጨማሪ ሰንጠረዦች S10፣ S11) ጋር ሲነጻጸር በከፍተኛ ሁኔታ ተነሳሳ።በተጨማሪም፣ የ TanjilG_10657 አገላለጽ መገለጫ ለሁሉም መስመሮች በሙከራው ሂደት ውስጥ እየጨመረ የመጣ አዝማሚያ አሳይቷል።የህዝብ ቁጥር 22660 በ 24 HPI (ምስል 6a) በ 114 እጥፍ ማግበር እና ከፍተኛ አንጻራዊ አገላለጽ ደረጃ (4.4 ± 0.4) በ 24 HPI (ምስል 6a) ለመከተብ የታንጂልጂ_10657 ከፍተኛውን ትብነት አሳይቷል።የ PR10 LlR18A ፕሮቲን ጂን TanjilG_27015 በሁሉም መስመሮች እና የጊዜ ነጥቦች ላይ ማግበርን አሳይቷል፣ ይህም በአብዛኛዎቹ የመረጃ ነጥቦች ላይ ስታትስቲካዊ ጠቀሜታ አለው (ምስል 6 ለ)።ከታንጂልጂ_10657 ጋር በሚመሳሰል መልኩ፣ የታንጂልጂ_27015 ከፍተኛው አንጻራዊ አገላለጽ ደረጃ በ22660 በተከተበው ህዝብ በ24 HPI (19.5 ± 2.4) ታይቷል።የአሲድ ኢንዶቺቲናሴ ጂን ታንጂልጂ_04706 በሁሉም መስመሮች እና በማንኛውም ጊዜ ከቦረጂን 6 hpi በስተቀር (ምስል 6c) በከፍተኛ ሁኔታ ተስተካክሏል።በመጀመሪያ ጊዜ (6 HPI) በ 83A:476 (በ 10.5 ጊዜ) እና በመጠኑ በሌሎች መስመሮች (በ 6.6-7.5 ጊዜ) ጨምሯል.በሙከራው ወቅት የታንጂልጂ_04706 አገላለጽ በ 83A:476 እና Boregine ተመሳሳይ ደረጃ ላይ ሲቆይ በማንዴላፕ እና በህዝብ ብዛት 22660 በከፍተኛ ደረጃ ጨምሯል, በአንጻራዊነት ከፍተኛ እሴቶች (5.9 ± 1.5 እና 6.2 ± 1.5, በቅደም ተከተል).የ endoglucan-1,3-β-glucosidase-እንደ ጂን TanjilG_23384 በመጀመሪያዎቹ ሁለት ጊዜ ነጥቦች (6 እና 12 hpi) በሁሉም መስመሮች ከ 22660 (ምስል 6d) በስተቀር ከፍተኛ እንቅስቃሴ አሳይቷል.በማንዴሉፕ (2.7 ± 0.3) እና 83A:476 (1.5 ± 0.1) ውስጥ የታንጂልጂ_23384 ከፍተኛ አንጻራዊ አገላለጽ ደረጃዎች በሁለተኛው ጊዜ (12 hpi) ታይተዋል።በ24 HPI፣ TanjilG_23384 አገላለጽ በሁሉም የተጠኑ መስመሮች (ከ0.04 ± 0.009 እስከ 0.44 ± 0.12) በአንጻራዊ ሁኔታ ዝቅተኛ ነበር።
በቁጥር PCR የተገለጹ የተመረጡ ጂኖች (አግ) መግለጫዎች።ቁጥሮች 6, 12 እና 24 ከክትባት በኋላ ሰዓታትን ይወክላሉ.የLanDExH7 እና LanTUB6 ጂኖች ለመደበኛነት ጥቅም ላይ ውለው ነበር እና LanTUB6 ለተከታታይ-ተከታታይ ልኬትነት ጥቅም ላይ ውሏል።የስህተት አሞሌዎች በሶስት ባዮሎጂያዊ ቅጂዎች ላይ ተመስርተው መደበኛውን ልዩነት ይወክላሉ, እያንዳንዳቸው በአማካይ ሶስት ቴክኒካዊ ቅጂዎች ናቸው. በክትባቱ (Colletotrichum lupini, strain Col-08, በ 1999 በዊየርዜኒካ, ፖላንድ ውስጥ ካለው የሉፒን መስክ የተገኘው) እና የቁጥጥር (ሞክ-ኢንኮሌት) ተክሎች መካከል ባለው የገለፃ ደረጃዎች መካከል ያለው ልዩነት ስታቲስቲካዊ ጠቀሜታ ከመረጃ ነጥቦች በላይ ምልክት ይደረግበታል (* P ዋጋ <0.05, *** P ዋጋ ≤ 0.01, 0.01). በክትባቱ (Colletotrichum lupini, strain Col-08, በ 1999 በዊየርዜኒካ, ፖላንድ ውስጥ ካለው የሉፒን መስክ የተገኘው) እና የቁጥጥር (ሞክ-ኢንኮሌት) ተክሎች መካከል ባለው የገለፃ ደረጃዎች መካከል ያለው ልዩነት ስታቲስቲካዊ ጠቀሜታ ከመረጃ ነጥቦች በላይ ምልክት ይደረግበታል (* P ዋጋ <0.05, *** P ዋጋ ≤ 0.01, 0.01). ስታቲስቲቼስካ ዛናቺሞስት ራዝሊቺይ ዩሮቪንያህ ኤክስፕረስሲ ሜጄዱ እናኩሊሮቫንኒሚ (Colletotrichum Lupini, Shatamm Col-08, 9) люпина в Верженице, Польша P ≤ 0,01, ***значение P ≤ 0,001)። በክትባት (Colletotrichum lupini, strain Col-08, በ 1999 በዊየርዠኒስ, ፖላንድ ውስጥ ከሉፒን መስክ የተገኘ) እና የቁጥጥር (የሻም-ኢንኮልድ) ተክሎች መካከል ባለው የገለጻ ደረጃዎች መካከል በስታቲስቲካዊ ጉልህ ልዩነቶች መካከል ያለው ልዩነት ከመረጃ ነጥቦቹ በላይ (* P ዋጋ <0.05, ** P-እሴት ≤ 0.01, 0.01, ≤-1).ኮል-08差异的统计学显着性标记在数据点上方（*P值< 0.05፣ **P 值≤ 0.01፣ ***P 值≤ 0.001)።接种 （colletotrichum lupini፣ color-08 株፣ 1999 年 波兰 波兰 wierzenica 的差异 的 统计学 显着性 标记 数据点 上方*p 值 <0.05, **P ≤ 0.01, ***P ≤ 0.001)። ስታቲስቲችስኪ ዝናቺሚ ራዝሊቺያ ዩሮቪንያህ ኤክስፕረስሲ ሜጄዱ ኢንኩሊሮቫንኒሚ (Colletotrichum Lupini, Shem Col-08, PYMY Col-08, PYMEX Верженице, Польша, в 1999 г.) እና ካንቴርኖሚ -значение ≤ 0,01, *** P-значение ≤ 0,001)። በክትባት (Colletotrichum lupini, strain Col-08, ከሉፒን ሜዳዎች በቬርዜኒስ, ፖላንድ, በ 1999 የተገኘ) እና የቁጥጥር (የሻም-ኢንኮልድ) ተክሎች ከመረጃ ነጥቦቹ በላይ (* P ዋጋ <0.05, ** P-value ≤ 0.01) መካከል በስታቲስቲካዊ ጉልህ ልዩነቶች መካከል ልዩነት አላቸው.የተተነተኑት የኤንኤልኤል መስመሮች፡ 83A፡476 (የሚቋቋም፣ ግብረ-ሰዶማዊውን ላንር 1 አሌል ተሸክሞ)፣ ማንዴሉፕ (በመጠነኛ ደረጃ የሚቋቋም፣ ግብረ-ሰዶማዊውን አንማን አሌል ተሸክሞ)፣ ቦረጂን (ተከላካይ፣ የማይታወቅ የዘረመል ዳራ) እና ሕዝብ 22660 (ተጋላጭ)።
በ Lanr1 ቦታ ላይ ያለው እጩ ጂን TanjilG_05042 ከ RNA-seq ጥናቶች ከተገኙት መገለጫዎች (ምስል 6e) በጣም የተለየ የአገላለጽ ዘይቤ አሳይቷል።በማንዴላፕ እና በ 22660 ህዝብ (እስከ 39.7 እና 11.7 ጊዜ) ውስጥ የዚህ ዘረ-መል (ጅን) ጉልህ የሆነ ማግበር ታይቷል, በዚህም ምክንያት በአንጻራዊነት ከፍተኛ የመግለጫ ደረጃዎች (እስከ 1.4 ± 0.14 እና 7.2 ± 1.3, በቅደም ተከተል).83A:476 በተጨማሪም የታንጂልጂ_05042 ጂን (እስከ 3.8-fold) አንዳንድ ማስተካከያዎችን አሳይቷል፣ ሆኖም የተገኘው አንጻራዊ አገላለጽ ደረጃዎች (0.044 ± 0.002) በማንዴላፕ እና በ22660 ህዝብ ከታዩት ከ30 እጥፍ ያነሰ ነበር።በqPCR የተተነተነው በአስቂኝ ክትባቶች (ቁጥጥር) ልዩነቶች ውስጥ በሚገኙ ጂኖታይፕስ መካከል ባለው የገለጻ ደረጃ ላይ ከፍተኛ ልዩነት እንዳለው አሳይቷል፣ በ22660 እና 83A፡476 እንዲሁም በ22660 እና 22660 ህዝብ መካከል 58 እጥፍ ልዩነት ደርሷል።
በ AnMan ቦታ ያለው እጩ ጂን TanjilG_12861፣ በ83A:476 እና Mandelup ውስጥ ለክትባት ምላሽ ነቅቷል፣ በ22660 ህዝብ ውስጥ ገለልተኛ ነበር፣ እና በቦረጂን (ምስል 6f) ውስጥ ተቀንሷል።የ TanjilG_12861 ጂን አንጻራዊ አገላለጽ በተከተበው 83A: 476 (0.14±0.01) ውስጥ ከፍተኛው ነበር።17.4 kDa ክፍል I የሙቀት ድንጋጤ ፕሮቲን ጂን TanjilG_05080 HSP17.4 በሁሉም የተጠኑ ውጥረቶች እና የጊዜ ነጥቦች ዝቅተኛ አንጻራዊ አገላለጽ ደረጃ አሳይቷል (ምስል 6 ግ)።በ 22660 ህዝብ (0.14 ± 0.02, ለክትባት ምላሽ ስምንት እጥፍ ጭማሪ) በ 24 HPI ውስጥ ከፍተኛው እሴት ታይቷል.
የጂን አገላለጽ መገለጫዎችን ማወዳደር (ምስል 7) በ TanjilG_10657 እና በአራት ሌሎች ጂኖች መካከል ከፍተኛ ትስስር አሳይቷል: TanjilG_27015 (r = 0.89), TanjilG_05080 (r = 0.85), TanjilG_05042 (r = 0.80) (r = 0.80), እና Tanji 40.7.እንደነዚህ ዓይነቶቹ ውጤቶች በመከላከያ ምላሾች ወቅት የእነዚህን ጂኖች የጋራ ቁጥጥርን ሊያመለክቱ ይችላሉ.TanjilG_12861 እና TanjilG_23384 ጂኖች ከሌሎች ጂኖች ጋር ሲነፃፀሩ ዝቅተኛ የፔርሰን ትስስር ቅንጅት እሴቶች (ከ0.08 እስከ 0.43 እና -0.19 እስከ 0.28 በቅደም ተከተል) የተለያየ አገላለጽ መገለጫዎችን አሳይተዋል።
በጂን አገላለጽ መገለጫዎች መካከል ያለው ግንኙነት መጠናዊ PCR በመጠቀም ተገኝቷል።የሚከተሉት ጠባብ ቅጠል ሉፒን መስመሮች ተተነተኑ፡ 83A፡476 (የሚቋቋም፣ ግብረ-ሰዶማዊውን ላንር 1 አሌል ተሸክሞ)፣ ማንዴሉፕ (በመጠነኛ ደረጃ የሚቋቋም፣ ግብረ-ሰዶማዊውን አንማን አሌል የሚይዝ)፣ ቦረጂን (የሚቋቋም፣ የጄኔቲክ ዳራ የማይታወቅ) እና የሕዝብ ቁጥር 22660 (ተጋላጭ)።ሶስት ጊዜ ነጥቦች (ከተከተቡ በኋላ 6, 12 እና 24 ሰዓታት), የተከተቡ (Colletotrichum lupini, strain Col-08, በ 1999 በዊየርዠኒስ, ፖላንድ ውስጥ ከሉፒን ሜዳዎች የተገኘ) እና የቁጥጥር (በሻም-የተከተቡ) ተክሎችን ጨምሮ.ልኬቱ የፒርሰን ትስስር ቅንጅት ዋጋን ያሳያል።
በአንድ ኢንች 6 ፈረስ ሃይል በተገኘ መረጃ መሰረት፣ WGCNA በ9981 DEG ተለይተው የተከተቡ እና ቁጥጥር እፅዋትን በማነፃፀር ቀደምት የመከላከያ ምላሾች ላይ በማተኮር (ተጨማሪ ሠንጠረዥ S12) ተከናውኗል።በጂኖታይፕ እና በሙከራ ልዩነቶች መካከል ሃያ ሁለት የጂን ሞጁሎች (ክላስተር) ከተዛመደ (አዎንታዊ ወይም አሉታዊ) መግለጫ መገለጫዎች ጋር ተገኝተዋል። በአማካይ፣ የጂን አገላለጽ ደረጃዎች በቅደም ተከተል 83A፡476 > ማንደልፕ > ቦሬጂን > የሕዝብ ብዛት 22660 እየቀነሱ ነበር (በሁለቱም ልዩነቶች ግን ይህ አዝማሚያ በቁጥጥር እፅዋት ላይ ጠንካራ ነበር)። በአማካይ፣ የጂን አገላለጽ ደረጃዎች በቅደም ተከተል 83A፡476 > ማንደልፕ > ቦሬጂን > የሕዝብ ብዛት 22660 እየቀነሱ ነበር (በሁለቱም ልዩነቶች ግን ይህ አዝማሚያ በቁጥጥር እፅዋት ላይ ጠንካራ ነበር)። В сrednem urovny эkspressy gonov snyzhalis в PORYADKE 83A: 476 > ማንደልፕ > ቦረጂን > የሕዝብ ብዛት 22660 ( ቪ. ильнее у контрольных растений). በአማካይ የጂን አገላለጽ ደረጃዎች በቅደም ተከተል 83A:476 > ማንደልፕ > ቦሬጂን > የሕዝብ ብዛት 22660 ቀንሷል (በሁለቱም ልዩነቶች ግን ይህ አዝማሚያ በመቆጣጠሪያ ተክሎች ላይ የበለጠ ጠንካራ ነበር)።平均而言，基因表达水平按83A:476 > ማንዴላፕ > ቦረጂን > የህዝብ ብዛት 22660物中更强)።平均 而言 ， 基因 水平 按 83a: 476> ማንደልፕ> ቦረጂን> የህዝብ ብዛት 22660 . . . . . . В сrednem urovny эkspressi ገንኖቭ сниzhalys в Ryadu 83A:476 > ማንደልፕ > ቦረጂን > የሕዝብ ብዛት 22660 е у контрольных растений). በአማካይ የጂን አገላለጽ ደረጃዎች በተከታታዩ 83A፡476 > ማንደልፕ > ቦሬጂን > የሕዝብ ብዛት 22660 ቀንሷል (ነገር ግን በሁለቱም ልዩነቶች ይህ አዝማሚያ በቁጥጥር እፅዋት ላይ ጠንካራ ነበር)።ክትባቱ የጂን አገላለጽ እንዲስተካከል አድርጓል፣ በተለይም በሞጁሎች 18፣ 19፣ 14፣ 6 እና 1 (በወራዳ የውጤት ቅደም ተከተል)፣ አሉታዊ ደንብ (ለምሳሌ ሞጁሎች 9 እና 20) ወይም በገለልተኛ ተፅእኖዎች (ለምሳሌ ሞጁሎች 11፣ 22፣ 8 እና 13)።የGO ቃል ማበልጸጊያ ትንተና (ተጨማሪ ሠንጠረዥ S13) “GO: 0006952 የመከላከያ ምላሾች” ለተከተበው ሞጁል (18) በከፍተኛ ማግበር፣ በqPCR (TanjilG_04706፣ TanjilG_23384፣ TanjilG_23384፣ TanjilG_23384፣ TanjilG_23384፣ TanjilG_23384፣ TanjilG_10652) እና በጣም ብዙ ታንጂል ፕሬስ ፎቶሲንተተኑ ጂኖችን ጨምሮ በከፍተኛ እንቅስቃሴ አሳይቷል። ሞጁሎች (9)ሞዱል 18 ማጎሪያ (ምስል 8) እንደ TanjilG_26536 ጂን እንደ PR-10-like LlR18B ፕሮቲን ኢንኮዲንግ ሆኖ ተለይቷል፣ እና ሞጁል 9 ማጎሪያ TanjilG_28955 ጂን የፎቶ ሲስተም II PsbQ ፕሮቲንን በኮድ ተለይቷል።እጩ አንትራክኖዝ የመቋቋም ጂን Lanr1፣ TanjilG_05042፣ በሞጁል 22 (ምስል 9) ውስጥ ተገኝቷል እና “GO:0044260 Cellular macromolecular metabolism ሂደቶች” እና “GO:0006355 ግልባጭ ደንብ፣ ዲ ኤን ኤ ቴምፕሊቲንግ” ከሚሉት ቃላት ጋር የተቆራኘ ነው TanjilG_0121ዘረ-መል (ጅን) የሙቀት ጭንቀትን (HSFA4a) ግልባጭ ነጥብን A-4a (HSFA4a) ያሳያል።
ከመጠን በላይ ውክልና ያላቸው ባዮሎጂያዊ ሂደት ቃላት "GO: 0006952 የመከላከያ ምላሾች" ጋር ሞጁሎች ጂን አብሮ-መግለጫ ላይ ክብደት ያለው አውታረ መረብ ትንተና.በqPCR (TanjilG_04706፣ TanjilG_23384፣ TanjilG_10657 እና TanjilG_27015) የተተነተኑትን አራቱን ጂኖች ለማጉላት Ligation ቀላል ነበር።
ከመጠን በላይ ውክልና ያለው ባዮሎጂካል ሂደት ቃል "GO: 0006355: ግልባጭ ደንብ, ዲ ኤን ኤ ቴምፕሊንግ" እና እጩ አንትሮሴስ የመቋቋም ጂን Lanr1 TanjilG_05042 ጋር ሞጁል ያለውን ጂን አብሮ መግለጫ ክብደት መረብ ትንተና.ታንጂልጂ_05042 ጂን እና ማዕከላዊውን ታንጂልጂ_01212 ጂን ለመለየት ligation ቀለል ብሏል።
በአውስትራሊያ ውስጥ የተሰበሰበው አንትሮክኖዝ የመቋቋም ምርመራ እንደሚያሳየው አብዛኞቹ ቀደምት የተለቀቁ ዝርያዎች በቀላሉ ሊጎዱ የሚችሉ ናቸው።ካሊያ፣ ኮሮሙፕ እና ማንደልፕ በመጠኑ ተከላካይ ተብለው የተገለጹ ሲሆን ዎንጋ፣ ታንጂል እና 83A፡476 በጣም ተከላካይ 26፣27፣31 ተደርገዋል።ተመሳሳይ ተቃውሞ ያለው፣ Lanr1 ተብሎ የተሰየመው፣ እና ኮሮሙፕ እና ማንደልፕ AnMan10፣ 26፣ 39 የተሰየሙ የተለያዩ ቅየሎች ነበሯቸው፣ ካሊያ ደግሞ የተለየ ዘንበል አልፏል።, ላንር2.በጀርመን የአንትሮክኖዝ በሽታን ለመከላከል የተደረገው ማጣሪያ Bo7212 ተከላካይ መስመርን ከ Lanr1 በስተቀር ሌላ እጩ አሌል መለየት አስከትሏል, LanrBo36.
ጥናታችን በተፈተነው ጀርምፕላዝም ውስጥ ካለው የ Lanr1 allele በጣም ዝቅተኛ ድግግሞሽ (6%) አሳይቷል።ይህ ምልከታ አንሴክ3 እና አንሴቅ4 ማርከርን በመጠቀም የምስራቅ አውሮፓን ጀርምፕላዝምን ከማጣራት ጋር የተጣጣመ ሲሆን ይህም Lanr1 allele በሁለት የቤላሩስ መስመሮች ውስጥ ብቻ እንደሚገኝ ያሳያል።ይህ የሚያሳየው Lanr1 allele ከአውስትራሊያ በተለየ መልኩ በአካባቢው የመራቢያ መርሃ ግብሮች በስፋት ጥቅም ላይ ያልዋለ መሆኑን ያሳያል።ይህ ሊሆን የቻለው በ Lanr1 allele በአውሮፓ የመስክ ሁኔታዎች ከአውስትራሊያ ዘገባ ጋር ሲነጻጸር ዝቅተኛ የመቋቋም ደረጃ ነው።በተጨማሪም በአውስትራሊያ ውስጥ ከፍተኛ ዝናብ በሚዘንብባቸው አካባቢዎች አንትሮክኖዝ ላይ የተደረጉ ጥናቶች እንደሚያሳዩት በLanr1 allele የሚደረጉ የመከላከያ ምላሾች ለበሽታ አምጪ ተህዋሲያን እድገት እና ፈጣን እድገትን በሚሰጡ የአየር ሁኔታዎች ላይ ውጤታማ ላይሆኑ ይችላሉ19,42.እንደ እውነቱ ከሆነ, በዚህ ጥናት ውስጥ, Lanr1 allele በተሸከሙት genotypes ላይ አንዳንድ የአንትሮክኖስ ምልክቶች ተስተውለዋል, ይህም ለሲ ሉፒኒ እድገት ተስማሚ ሁኔታዎችን መቋቋም እንደሚቻል ይጠቁማል.በተጨማሪም, ከ Lanr1 አካባቢ በግምት 1 ሴ.ሜ የሆኑ የ Anseq3 እና Anseq4 ማርከሮች መገኘት የውሸት አወንታዊ ትርጓሜዎች 28,30,43 ይቻላል.
ጥናታችን እንደሚያሳየው 83A:476, Lanr1 alleleን ተሸክሞ, ለ C. lupini inoculation በትላልቅ የትራንስክሪፕት ሪፐሮግራም ለመጀመሪያ ጊዜ በተተነተነ የጊዜ ነጥብ (6 hpi) ምላሽ የሰጠ ሲሆን በማንዴላፕ ውስጥ ደግሞ አንማን አሌሌል ተሸክሞ, የጽሑፍ ግልባጭ ምላሾች ብዙ ቆይተው ተስተውለዋል.(ከ 24 እስከ 48 ኪ.ፒ.)እነዚህ የመከላከያ ምላሾች ጊዜያዊ ልዩነቶች ከበሽታ ምልክቶች ልዩነት ጋር የተቆራኙ ናቸው, ይህም ቀደምት በሽታ አምጪ ተህዋስያንን ለበሽታ መቋቋም ስኬታማ ምላሽ አስፈላጊ መሆኑን ያጎላል.የእፅዋትን ቲሹ ለመበከል አንትራክስ ስፖሮች በአስተናጋጁ ወለል ላይ ብዙ የእድገት ደረጃዎችን ማለፍ አለባቸው ፣ እነሱም ማብቀል ፣ የሕዋስ ክፍፍል እና አፕረሶሪየም መፈጠርን ያጠቃልላል።አባሪ ከሆስቴሩ ወለል ጋር ተጣብቆ ወደ አስተናጋጅ ቲሹዎች ውስጥ መግባቱን የሚያመቻች ኢንፌክሽኑ መዋቅር ነው።ስለዚህ የ C. gloeosporioides ስፖሮች በአተር ማውጫ ውስጥ የመጀመሪያውን የኒውክሊየስ ክፍል ከ 75-90 ደቂቃዎች በኋላ ፣ ከ90-120 ደቂቃዎች በኋላ የጀርም ቱቦ መፈጠር እና ከ 4 ሰዓታት በኋላ 45 መጨናነቅን አሳይተዋል ።ማንጎ C. gloeosporioids ከ 40% በላይ ኮንዲየል ማብቀል ከ 3 ሰአታት በኋላ እና 20% ገደማ የሚሆኑት አፕፕሬተሮች ከ 4 ሰዓታት በኋላ አሳይተዋል ።የ C. gloeosporioides ቫይረስ-ተያይዟል CAP20 ጂን በአቮካዶ ወለል ሰም ውስጥ ከ 3.5 ሰአታት በኋላ በኤፒፊይት-ፈጠራ ኮንዲያ ውስጥ ከ 4 ሰዓት 46 ደቂቃዎች በኋላ ከፍተኛ የ CAP20 ፕሮቲን ይዘት ያለው የጽሑፍ ግልባጭ እንቅስቃሴ አሳይቷል።በተመሳሳይ ሁኔታ በ C. trifolii ውስጥ ያለው የሜላኒን ባዮሲንተሲስ ጂኖች እንቅስቃሴ በ 2 ሰዓት ውስጥ በክትባት ወቅት ተነሳስቶ ከ 1 ሰዓት በኋላ አፕረሶሪየም ተፈጠረ።በቅጠል ቲሹዎች ላይ የተደረጉ ጥናቶች እንደሚያሳዩት በ C. acutatum የተከተቡ እንጆሪዎች በመጀመሪያ በ 8 hpi, በ C. coccodes የተከተቡ ቲማቲሞች በመጀመሪያ በ 4 hpi48,49.ከColletotrichum spp የጊዜ መለኪያ ጋር በአብዛኛው የሚስማማ።ተላላፊ ሂደት.ለ 83A:476 ፈጣን የመከላከያ ምላሾች በዚህ መስመር ውስጥ የእፅዋትን የመቋቋም እና የውጤት ቀስቃሽ የበሽታ መከላከያ (ኢቲአይ) ጂኖች ተሳትፎን ይጠቁማሉ ፣ የማንዴሉፕ ዘግይቶ ምላሾች በጥቃቅን-ተያያዥ ሞለኪውላዊ ጥለት-ቀስቃሽ የበሽታ መከላከያ (ኤምቲአይ) መላምት 50. ቀደምት ምላሾች ለ 83A: 4.476 እና Mandelupበዘገየ ምላሽ ወደላይ ወይም ወደ ታች በሚቆጣጠሩት ጂኖች መካከል ያለው ከፊል መደራረብ ይህንን ጽንሰ-ሐሳብ ይደግፋል, ምክንያቱም ETI ብዙውን ጊዜ የተፋጠነ እና የተሻሻለ MTI ምላሽ እንደሆነ ተደርጎ ይቆጠራል, ይህም በበሽታው ቦታ ላይ በፕሮግራም የታቀዱ ሴሎች ሞት ያበቃል, አናፊላቲክ ድንጋጤ 51,52 .
ጂን ኦንቶሎጂ GO:0006952 "የመከላከያ ምላሽ" ለሚለው ከመጠን በላይ ውክልና የተሰጣቸው አብዛኛዎቹ ጂኖች በውጥረት ምክንያት የሚመጣ የጾም መልእክት 22 ፕሮቲን (ከSAM22 ጋር ተመሳሳይ) እና ሰባቱ ዋና የላቴክስ ፕሮቲን መውደዶች (MLPs) 11 ግብረ ሰዶማውያን ናቸው።-እንደ ፕሮቲኖች 31, 34, 43 እና 423 ተከታታይ ተመሳሳይነት አሳይተዋል.SAM22 መሰል ጂኖች ረዘም ላለ ጊዜ የሚቆይ ጉልህ የሆነ ማግበር አሳይተዋል፣ ይህም የአንትሮሴስ መከላከያ (83A:476 እና Boregine) ጨምሯል።ነገር ግን፣ MLP የሚመስሉ ጂኖች የተቀነሱት የእጩውን የመቋቋም አሌሌ በተሸከሙት መስመሮች ብቻ ነው (83A፡476/Lanr1 በ6 hpi እና Mandelup/AnMan at 24 hpi)።ሁሉም ተለይተው የሚታወቁት SAM22 መሰል ግብረ ሰዶማውያን የሚመነጩት በግምት 105 ኪ.ባ በሚሸፍነው የጂን ክላስተር ሲሆን ኤምኤልፒ መሰል ጂኖች ግን ከተለያዩ የጂኖም ክልሎች የመጡ መሆናቸውን ልብ ሊባል ይገባል።የእንደዚህ አይነት SAM22 መሰል ጂኖች የተቀናጀ ማንቃት ቀደም ሲል NLL ለ Diaporthetoxica inoculation መቋቋሙን ባደረግነው ጥናት ውስጥ በመከላከያ ምላሹ አግድም ክፍሎች ውስጥ እንደሚሳተፉ ይጠቁማል።ይህ መደምደሚያ SAM22 መሰል ጂኖች ለጉዳት ወይም በሳሊሲሊክ አሲድ፣ በፈንገስ ኢንዳክተሮች ወይም በሃይድሮጅን ፓርሞክሳይድ ለተደረገው አወንታዊ ምላሽ ሪፖርቶች የተደገፈ ነው።
ኤምኤልፒ መሰል ጂኖች በብዙ የእጽዋት ዝርያዎች ውስጥ የባክቴሪያ፣ የቫይራል እና በሽታ አምጪ ፈንገስ በሽታዎችን ጨምሮ ለተለያዩ አቢዮቲክ እና ባዮቲክ ጭንቀቶች ምላሽ እንደሚሰጡ ታይቷል።በእጽዋት እና በሽታ አምጪ ተህዋሲያን መካከል ለተወሰኑ መስተጋብሮች ምላሽ የሚሰጡ አቅጣጫዎች በከፍተኛ ደረጃ እየጨመረ ከመምጣቱ (ማለትም ጥጥ በ Verticillium dahliae በሚበከልበት ጊዜ) በከፍተኛ ሁኔታ እየቀነሰ (ማለትም በአልተርናሪያ spp. የፖም ዛፍ ከተበከለ በኋላ) 56,57.የአቮካዶ መከላከያ ለኤፍ.ኒጀር ኢንፌክሽን እና በፖም ዛፍ ላይ በሚበከልበት ወቅት የ MLP-እንደ 423 ጂን ጉልህ የሆነ ማሽቆልቆል ተስተውሏል.cn.piricola እና Alternaria alternata የአፕል ፓቶታይፕስ58,59 ናቸው።በተጨማሪም አፕል ካሊ ኤምኤልፒን የሚመስል 423 ጂን ከመጠን በላይ መግለፅ ከተከላካይነት ጋር የተገናኙ ጂኖች አገላለጽ ዝቅተኛ ነበር እና ለፈንገስ ኢንፌክሽን የበለጠ ተጋላጭ ነበር።Fusarium oxysporum ኤፍን ተከትሎ፣ MLP-የሚመስለው 423 ዘረ-መል (ጅን) ተከላካይ በሆነው የጋራ ባቄላ ጀርም ፕላዝማ ውስጥም ታፍኗል።cn.የባቄላ ኢንፌክሽን 60.
በአር ኤን ኤ ሴክ ጥናት ውስጥ የተገለጹት ሌሎች የ PR-10 ቤተሰብ አባላት ለውድቀት ምላሽ ለመስጠት LlR18A እና LlR18B ጂኖች እንዲሁም የተሻሻለ (1 ጂን) ወይም የተቀነሰ (3 ጂኖች) ጂን ለሊፕድ ማስተላለፊያ ፕሮቲን DIR1 ናቸው።.በተጨማሪም፣ WGCNA በዚህ ሞጁል ውስጥ የLlR18B ጂን እንደ ማዕከል ያደምቃል፣ ይህም ለክትባት በጣም የተጋለጠ እና በርካታ የመከላከያ ምላሽ ጂኖችን ይይዛል።የ LlR18A እና LlR18B ጂኖች ለበሽታ አምጪ ተህዋሲያን ምላሽ ለመስጠት በቢጫ ሉፒን ቅጠሎች እንዲሁም በኤንኤልኤል ግንዶች ውስጥ D. toxica inoculation ከተደረጉ በኋላ የእነዚህ ጂኖች የሩዝ ሆሞሎግ ፣ RSOsPR10 ፣ በጃስሞኒክ አሲድ ማጓጓዣ መንገድ ፣ ዘረ-16 ፣6 ፕሮቲን ያልሆነ የጃስሞኒክ አሲድ ማጓጓዣ መንገድ ፣ ዘረ-53 ፣ 6 ለስርዓታዊ የተገኘ የመቋቋም (SAR) መጀመሪያ የሚያስፈልጉ ዎች።በመከላከያ ምላሾች እድገት ፣ የ DIR1 ፕሮቲን ከኢንፌክሽኑ ትኩረት ወደ ፍሎም በኩል በማጓጓዝ በሩቅ የአካል ክፍሎች ውስጥ SAR እንዲፈጠር ያደርጋል።የሚገርመው ነገር፣ TanjilG_02313 DIR1 ጂን ለመጀመሪያ ጊዜ በመስመር 84A፡476 እና Population 22660 በከፍተኛ ሁኔታ ተነሳሳ፣ነገር ግን አንትሮክኖዝ የመቋቋም አቅም የተገኘው በመስመር 84A፡476 ብቻ ነው።ይህ በ NLL ውስጥ የ DIR1 ጂን አንዳንድ ንዑስ ተግባራትን ሊያመለክት ይችላል ፣ ምክንያቱም የተቀሩት ሶስት ግብረ-ሰዶማውያን በ 83A:476 መስመር በ 6 hpi ላይ ለመከተብ ምላሽ የሰጡ ሲሆን ይህ ምላሽ ወደ ታች ተመርቷል ።
በጥናታችን ውስጥ "GO: 0055114 Redox process" ከሚባለው ባዮሎጂያዊ ሂደት ጋር የሚዛመዱ በጣም የተለመዱ ክፍሎች ሳይቶክሮም P450 ፕሮቲን, ፐርኦክሳይድ, ሊኖሌሊክ አሲድ 9S-/13S-lipoxygenase እና 1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid oxidase ናቸው.በተጨማሪም፣ የእኛ WGCNA የ HSFA4a homologue እንደ Lanr1 የመቋቋም ጂን እጩ TanjilG_05042 ያሉ ሞጁሎችን የሚሸከም ማዕከል አድርጎ ይገልፃል።HSFA4a በእጽዋት ውስጥ የኒውክሌር ግልባጭ የዳግም-ጥገኛ ደንብ አካል ነው።
ሳይቶክሮም P450 ፕሮቲኖች NADPH እና/ወይም O2-ጥገኛ hydroxylation ምላሽ የመጀመሪያ እና ሁለተኛ ደረጃ ተፈጭቶ ውስጥ, xenobiotics መካከል ተፈጭቶ ጨምሮ, እንዲሁም ሆርሞኖች, fatty acids, sterols, የሕዋስ ግድግዳ ክፍሎችን, ባዮፖሊመር, እና የመከላከያ ውህዶች ባዮሲንተሲስ 69, P50 በእኛ ተግባር ውስጥ NADPH እና / ወይም O2-ጥገኛ hydroxylation ምላሽ የሚያበረታታ oxidoreductases ናቸው. 6 ሎግ2 (የማጠፍ ለውጥ) ወደ 5.7 በበርካታ የተለወጡ ግብረ ሰዶማውያን (37) እና በተወሰኑ ጂኖች መካከል ያለው የምላሽ ቅጦች ልዩነት ወደ ላይ ያለውን ክለሳ የሚያንፀባርቅ ነው።.እንደዚህ ባለ ትልቅ የፕሮቲን ሱፐር ቤተሰብ ውስጥ ያለውን የኤንኤልኤል ጂኖች ባዮሎጂያዊ ተግባር ለማብራራት አር ኤን ኤ ሴክ መረጃን ብቻ መጠቀም በጣም ግምታዊ ይሆናል።ይሁን እንጂ አንዳንድ ሳይቶክሮም ፒ 450 ጂኖች በሽታ አምጪ ፈንገሶች ወይም ባክቴሪያ የመቋቋም ጨምሯል የመቋቋም ጋር የተያያዙ አለርጂ ምላሽ69,70,71 አስተዋጽኦ ጨምሮ, ማስተዋሉ ጠቃሚ ነው.
ክፍል III peroxidases ተክል እድገት እና ልማት ወቅት ተፈጭቶ ሂደቶች ሰፊ ክልል ውስጥ የሚሳተፉ multifunctional ተክል ኢንዛይሞች ናቸው, እንዲሁም እንደ ጨዋማነት, ድርቅ, ከፍተኛ ብርሃን ኃይለኛ እና በሽታ አምጪ ጥቃት72 እንደ የአካባቢ ውጥረቶችን ምላሽ.Peroxidases ስቴሎሳንቴስ ሆሚሊስ እና ሲ ግሎኦስፖሪዮይድስ ፣ ሌንስ ኩሊናሪስ እና ሲ ትሩንካተም ፣ ፋሲለስ vulgaris እና C. lindemuthianum ፣ Cucumis sativus እና C. lagenarium 73,764,75 ን ጨምሮ ከአንትራሲስ ጋር በበርካታ የእፅዋት ዝርያዎች መስተጋብር ውስጥ ይሳተፋሉ።ምላሹ በጣም ፈጣን ነው, አንዳንዴም በ 4 HPI, ፈንገስ ወደ ተክል ቲሹ73 ከመግባቱ በፊት.የፔሮክሳይድ ጂን ለ D. toxica NLL ክትባት ምላሽ ሰጥቷል.ኦክሲዲቲቭ ፍንዳታን ለመቆጣጠር ወይም ኦክሳይድ ውጥረትን ለማስወገድ ከሚሰጡት ዓይነተኛ ተግባራቶች በተጨማሪ፣ ፐርኦክሳይድስ የተወሰኑ ውህዶችን በመለጠጥ፣ በንዑስ ክፍል ወይም በማገናኘት ወቅት የሕዋስ ግድግዳ ማጠናከሪያ ላይ የተመሰረቱ አካላዊ መሰናክሎችን በመፍጠር በሽታ አምጪ ተህዋስያንን ሊያስተጓጉል ይችላል።ይህ ተግባር በሲሊኮ ውስጥ በ TanjilG_03329 ጂን ኢንኮዲንግ putative lignin-forming anion peroxidase በጥናታችን በ 83A:476 ተከላካይ መስመር 6 HPI ላይ በከፍተኛ ደረጃ የተሻሻለ ነገር ግን ምላሽ ባልሰጡ ሌሎች ውጥረቶች እና የጊዜ ነጥቦች ላይ ሊወሰድ ይችላል።
9S-/13S-lipoxygenase of linoleic acid በሊፒድ ባዮሲንተሲስ78 ኦክሳይድ መንገድ ውስጥ የመጀመሪያው እርምጃ ነው።የዚህ መንገድ ምርቶች በእጽዋት መከላከያ ውስጥ በርካታ ተግባራት አሏቸው, ይህም የካሎዝ እና የፔክቲን ክምችቶችን በመፍጠር የሕዋስ ግድግዳን ማጠናከር, እና ምላሽ ሰጪ የኦክስጂን ዝርያዎችን በማምረት የኦክሳይድ ውጥረትን መቆጣጠርን ያካትታል 79,80,81,82,83.አሁን ባለው ጥናት የሊኖሌይክ አሲድ 9S-/13S-lipoxygenase አገላለጽ በሁሉም ዓይነቶች ላይ ተቀይሯል፣ነገር ግን በተጋለጠ ህዝብ 22660፣የቁጥጥር ቁጥጥር በተለያዩ ጊዜያት አሸንፏል።
1-aminocyclopropane-1-carboxylate oxidase (ACO) homologue በሉፒን ሲከተቡ በከፍተኛ ሁኔታ ተሻሽለዋል (9 ጂኖች) ወይም ወደ ታች (2 ጂኖች)።ከሁለት በስተቀር፣ እነዚህ ሁሉ ምላሾች የተከሰቱት በ6 hp ነው።በ83A፡476።በኤኮ ፕሮቲኖች የሚስተዋለው የኢንዛይም ምላሽ የኢትሊን ምርት ፍጥነትን የሚገድብ ደረጃ ነው ስለዚህም በከፍተኛ ደረጃ ቁጥጥር ይደረግበታል84.ኤቲሊን የእጽዋት እድገትን በመቆጣጠር እና ለአባዮቲክ እና ባዮቲክ ውጥረት ሁኔታዎች ምላሽ ለመስጠት የተለያዩ ሚናዎችን የሚጫወት የእፅዋት ሆርሞን ነው።የ ACO ቅጂን ማነሳሳት እና የኤትሊን ምልክት ማድረጊያ መንገድን ማግበር የሩዝ ምላሽን የኦክስጅን ዝርያዎችን እና ፋይቶአሌክሲን በማቀናጀት የሂሚቢዮትሮፊክ ፈንገስ ኦሪዛ ኦሪዛን የመቋቋም አቅም በመጨመር ይሳተፋል።በዚህ ጥናት ውስጥ በተዘገበው 83A:476 መስመር ላይ ካለው የ ACO homologues ለውጥ ዳራ አንጻር በ M. oryzae እና C. lupini88,89 መካከል የተገኘው በጣም ተመሳሳይ የሆነ ቅጠል ኢንፌክሽን ሂደት ለኤንኤልኤል አንትሮኖዝ ኢቲሊን በሞለኪውላዊ መንገዶች ውስጥ ማዕከላዊ እርምጃን የመቋቋም እድልን ይለውጣል።
አሁን ባለው ጥናት ከፎቶሲንተሲስ ጋር የተያያዙ ብዙ ጂኖችን በከፍተኛ ሁኔታ ማፈን በ 6 hpi በ 83A: 476 እና በ 48 hpi በማንዴሎፕ እና በ 22660 ህዝብ ታይቷል.የእነዚህ ለውጦች መጠን እና ግስጋሴ ከደረጃው ጋር ተመጣጣኝ ነው።በዚህ ሙከራ ውስጥ አንትራክኖስ የመቋቋም ችሎታ ታይቷል.በቅርብ ጊዜ፣ ከፎቶሲንተሲስ ጋር የተገናኙ ግልባጮች ጠንካራ እና ቀደምት ጭቆና በብዙ የእጽዋት-በሽታ አምጪ ተህዋሲያን፣ በሽታ አምጪ ተህዋሲያን እና ፈንገሶችን ጨምሮ ሪፖርት ተደርጓል።ችኮላ (በአንዳንድ ግንኙነቶች ከ 2 HPI) እና ከፎቶሲንተሲስ ጋር የተያያዙ ጂኖችን ለኢንፌክሽን ምላሽ መስጠትን ዓለም አቀፍ መጨፍለቅ ምላሽ ሰጪ የኦክስጂን ዝርያዎችን በመዘርጋት እና ከሳሊሲሊክ አሲድ መንገድ ጋር በመተባበር የአለርጂ ምላሾችን 90,94 ላይ በመመርኮዝ የእፅዋትን በሽታ የመከላከል አቅምን ያነሳሳል።
በማጠቃለያው ፣ እጅግ በጣም ተከላካይ ለሆኑ የዘር ሐረጎች (83A: 476) የታቀዱ የመከላከያ ምላሽ ዘዴዎች በ R ጂን (የሚገመተው TIR-NBS-LRR TanjilG_05042) እና የአለርጂ ምላሽ-መካከለኛ የሳሊሲሊክ አሲድ እና የኢትሊን ምልክት ፣ ከዚያም የረጅም ርቀት SAR መመስረትን ያካትታሉ።እርምጃ በ DIR-1 ፕሮቲን የተደገፈ ነው.ለ C. Lupini ኢንፌክሽን የባዮትሮፊክ ጊዜ በጣም አጭር (በግምት 2 ቀናት) መሆኑን ልብ ሊባል ይገባል, ከዚያም የኔክሮቲክ እድገት95 ነው.በነዚህ ደረጃዎች መካከል ያለው ሽግግር ከኒክሮሲስ እና ከኤትሊን-ኢንዶክቲቭ ፕሮቲኖች መግለጫ ጋር የተቆራኘ ሊሆን ይችላል, ይህም በእፅዋት ውስጥ ለከፍተኛ ስሜታዊነት ምላሽ እንደ ቀስቅሴዎች ሆነው ያገለግላሉ.ስለዚህ በባዮትሮፊክ ደረጃ ላይ ሲ. ሉፒኒን በተሳካ ሁኔታ ለመያዝ ያለው የጊዜ መስኮት በጣም ጠባብ ነው.በ 83A:476 በ 6 hpi ላይ ከሪዶክስ እና ፎቶሲንተሲስ ጋር የተዛመዱ ጂኖች እንደገና ማደራጀት ከፈንገስ ሃይፋ እድገት ጋር የሚጣጣም እና በባዮትሮፊክ ደረጃ ላይ የተሳካ የመከላከያ ምላሽ እድገትን ያበስራል።የማንዴላፕ እና የ22660 ህዝብ ግልባጭ ምላሾች ወደ ኒክሮቲክ እድገት ከመቀየሩ በፊት ፈንገሱን ለመያዝ በጣም ዘግይተው ሊሆን ይችላል፣ነገር ግን ማንዴሉፕ ከ22660 ህዝብ የበለጠ ውጤታማ ሊሆን ይችላል ምክንያቱም የ PR-10 ፕሮቲን በአንፃራዊ ፈጣን ቁጥጥር አግድም መቋቋምን ያበረታታል።
ETI፣ በቀኖናዊው አር ጂን የሚመራ፣ ባቄላ ለአንታራኮዝ በሽታ የመቋቋም የተለመደ ዘዴ ይመስላል።ስለዚህ, በአምሳያው የሜዲካጎ ትሩንካቱላ ውስጥ, አንትሮክኖስን መቋቋም በ RCT1 ጂን, የ TIR-NBS-LRR97 ተክል R ጂን ክፍል አባል ነው.ይህ ዘረ-መል (ጅን) ለአልፋልፋ ሰፊ-ስፔክትረም anthracnose የመቋቋም አቅም ወደ ተጋላጭ ተክሎች ሲተላለፍ ይሰጣል።በጋራ ባቄላ (P. vulgaris) ውስጥ እስካሁን ድረስ ከሁለት ደርዘን በላይ አንትሮክኖስ መከላከያ ጂኖች ተለይተዋል.ከእነዚህ ጂኖች ውስጥ አንዳንዶቹ ቀኖናዊ R ጂኖች በሌሏቸው ክልሎች ውስጥ ይገኛሉ፣ ነገር ግን ብዙዎቹ TIR-NBS-LRRs99ን ጨምሮ NBS-LRR ጂን ክላስተር በተሸከሙ ክሮሞሶምች ዳርቻ ላይ ይገኛሉ።የጂኖም-ሰፊ የኤስኤስአር ጥናት የ NBS-LRR ጂን በጋራ ባቄላ ውስጥ ከአንታሮዝ መከላከያ ጋር መገናኘቱን አረጋግጧል።ቀኖናዊው አር ጂን በጂኖሚክ ክልል ውስጥ በነጭ ሉፒን 101 ውስጥ ዋናውን አንትራክኖስ የመቋቋም ቦታን ይዞ ተገኝቷል።
የእኛ ሥራ እንደሚያሳየው በእጽዋት ኢንፌክሽን መጀመሪያ ደረጃ ላይ የነቃ ፈጣን የመቋቋም ምላሽ (በተለይም ከ 12 hpi) በጠባብ ቅጠል ላይ ያለውን ሉፒን በተህዋሲያን ፈንገስ ኮሎሎትሪክኩም ሉፒኒ ምክንያት ከአንትሮክኖዝ ይከላከላል።ከፍተኛ የፍተሻ ቅደም ተከተልን በመጠቀም፣ በLanr1 እና AnMan ተከላካይ ጂኖች መካከለኛ በሆኑ የኤንኤልኤል እፅዋት ውስጥ የአንትሮሴስ መከላከያ ጂኖች ልዩነት መግለጫዎችን አሳይተናል።በተሳካ ሁኔታ መከላከል ተክሉ በሽታ አምጪ ተህዋሲያን ለመጀመሪያ ጊዜ በተገናኘ በሰአታት ውስጥ በሪዶክክስ፣ ፎቶሲንተሲስ እና በሽታ አምጪ ተህዋስያን ላይ ለተሳተፉ ፕሮቲኖች ጂኖችን በጥንቃቄ መንደፍን ያካትታል።ተመሳሳይ የመከላከያ ምላሾች, ነገር ግን በጊዜ ዘግይተዋል, ተክሎችን ከበሽታዎች ለመጠበቅ በጣም አነስተኛ ናቸው.በLanr1 ጂን የሚስተናገደው የአንትራክስ መድሀኒት የ R ጂን (በተፅእኖ የሚቀሰቅስ የበሽታ መከላከያ) የተለመደው ፈጣን ምላሽ ይመስላል፣ የ AnMan ጂን በአብዛኛው አግድም ምላሽ ይሰጣል (ከማይክሮቦች ጋር በተያያዙ ሞለኪውላዊ ጥለት የሚቀሰቀስ በሽታ የመከላከል አቅም) መጠነኛ የመቆየት ደረጃን ይሰጣል።
ለአንትሮክኖዝ ማርከሮች ማጣሪያ ጥቅም ላይ የዋሉት 215 NLL መስመሮች 74 cultivars፣ 60 በማቋረጥ ወይም በማዳቀል የተገኙ 60 መስመሮች፣ 5 ሚውቴሽን እና 76 የዱር ወይም ኦርጅናል ጀርሞችን ያቀፉ ናቸው።መስመሮቹ ከ17 አገሮች የመጡ ሲሆን በዋናነት ከፖላንድ (58)፣ ከስፔን (47)፣ ከጀርመን (27)፣ ከአውስትራሊያ (26)፣ ከሩሲያ (19)፣ ከቤላሩስ (7)፣ ከጣሊያን (5) እና ከሌሎችም መስመሮች የመጡ ናቸው።ከ 10 አገሮች.ስብስቡ የማጣቀሻ ተከላካይ መስመሮችንም ያካትታል፡ 83A፡476፣ Tanjil፣ Wonga Lanr1 allele እና ማንደልፕ የ AnMan allele ተሸክመዋል።መስመሮቹ የተገኙት በፖዝናን ፕላንት እርባታ ሊሚትድ፣ ዊያትሮዎ፣ ፖላንድ (ተጨማሪ ሠንጠረዥ S1) ከሚጠበቀው ከአውሮፓ ሉፒን የዘረመል ሀብት ዳታቤዝ ነው።
ተክሎች የሚበቅሉት በተቆጣጠሩት ሁኔታዎች (photoperiod 16 ሰዓታት, የሙቀት መጠን 25 ° ሴ በቀን እና በሌሊት 18 ° ሴ) ነው.ሁለት ባዮሎጂያዊ ቅጂዎች ተተነተኑ.ዲኤንኤ በፕሮቶኮሉ መሰረት DNeasy Plant Mini Kit (Qiagen, Hilden, Germany) በመጠቀም ከሶስት ሳምንት ቅጠሎች ተለይቷል.የነጠላው ዲ ኤን ኤ ጥራት እና ትኩረት የሚገመገመው በስፔክትሮፎቶሜትሪክ ዘዴዎች (NanoDrop 2000፣ Thermo Fisher Scientific፣ Waltham, MA, USA) ነው።የአንማን ኤም 1 ምልክት የአንትራኮዝ መከላከያ ጂን AnMan (ከሲቪ. ማንደልፕ የተገኘ) እና ጠቋሚዎቹ Anseq3 እና Anseq4 ከጂን Lanr1 (ከ cv. ታንጂል የተገኘ) 11,26,28 ተንትነዋል።ሆሞዚጎት ለ ተከላካይ አሌል “1″፣ ተጋላጭ - እንደ “0″፣ እና heterozygotes – እንደ 0.5 ተመዝግቧል።
ለጠቋሚዎች AnManM1, AnSeq3 እና AnSeq4 የማጣሪያ ውጤቶች እና ለመጨረሻው የክትትል ሙከራዎች ዘሮች መገኘት ላይ በመመርኮዝ, 50 NLL መስመሮች ለአንትራክሲስ መከላከያ ፍኖቲፒ ተመርጠዋል.ትንታኔው የተካሄደው በኮምፒዩተር ቁጥጥር ስር ባለው ግሪን ሃውስ ውስጥ የ14 ሰአት የፎቶፔሪዮድ የሙቀት መጠን በቀን 22°C እና በሌሊት ደግሞ 19°C ነው።ዘሮቹ ከመዝራታቸው በፊት የዘሩ እቅፍ እንዳይኖር ለመከላከል እና አንድ ወጥ የሆነ ማብቀልን ለማረጋገጥ ዘሮች ይቧጫራሉ (ከፅንሱ በተቃራኒው በኩል ያለውን የዝርያ ቀሚስ በሹል ምላጭ መቁረጥ)።እፅዋት በድስት (11 × 11 × 21 ሴ.ሜ) በንፁህ አፈር (TS-1 REC 085 መካከለኛ መሰረታዊ, ክላስማን-ዲልማን ፖልስካ, ዋርሶ, ፖላንድ) ውስጥ ይበቅላሉ.ክትባቱ የተካሄደው በ 1999 በቬርዜኒትሳ፣ ታላቋ ፖላንድ (52° 27′ 42″ N 17° 04′ 05″ E) ውስጥ ከሚበቅሉት ጠባብ ቅጠል ያላቸው የሉፒን ተክሎች ግንድ በ 1999 በተመረተው የኮሌቶትሪክ ሉፒኒ ኮል-08 ዝርያ ነው።አካባቢ ያግኙ።ገለባዎቹ በኤስኤንኤ መካከለኛ በ20 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ በጥቁር ብርሃን ስር ለ21 ቀናት እንዲበቅሉ ተደርገዋል።ከተዘራ ከአራት ሳምንታት በኋላ እፅዋቱ 4-6 ቅጠል ደረጃ ላይ ሲደርሱ በ 0.5 x 106 ኮኒዲያ በአንድ ሚሊ ሊትር ውስጥ በኮንዲያ እገዳ በመርጨት መከተብ ተከናውኗል.ከተከተቡ በኋላ እፅዋቱ ለ 24 ሰዓታት በጨለማ ውስጥ በ 98% እርጥበት እና በ 25 ዲግሪ ሴንቲግሬድ የሙቀት መጠን ውስጥ ኮንዲያን ለማብቀል እና የኢንፌክሽን ሂደትን ያመቻቻል ።ከዚያም ተክሎቹ በ 14-ሰዓት የፎቶፔሪዮድ ስር በ 22 ° ሴ ቀን / 19 ° ሴ ምሽት እና 70% እርጥበት.የበሽታው ውጤት ከተከተቡ ከ 22 ቀናት በኋላ የተሰራ ሲሆን ከ 0 (የበሽታ መከላከያ) እስከ 9 (በጣም የተጋለጠ) በግንዶች እና ቅጠሎች ላይ የኔክሮቲክ ቁስሎች መኖር ወይም አለመገኘት ላይ በመመርኮዝ ነው.በተጨማሪም, ውጤት ካስመዘገቡ በኋላ የተክሎች ክብደት ተለክቷል.በጠቋሚ ጂኖታይፕስ እና በበሽታ ፌኖታይፕ መካከል ያሉ ግንኙነቶች እንደ ነጥብ ሁለት-ተከታታይ ትስስሮች (የ anthracnose resistance phenotype ትንታኔ ለማግኘት በመስመሮች ስብስብ ውስጥ heterozygous ጠቋሚዎች አለመኖር) ይሰላሉ.