لا تشكّ أبدًا في أن مجموعة صغيرة من المواطنين المفكرين والمخلصين قادرة على تغيير العالم. في الواقع، إنها الوحيدة الموجودة.
تتمثل مهمة Cureus في تغيير نموذج النشر الطبي القائم منذ فترة طويلة، حيث قد يكون تقديم الأبحاث مكلفًا ومعقدًا ويستغرق وقتًا طويلاً.
بلازما غنية بالصفائح الدموية/PRP، تجديد الأنسجة، تنشيط الصفائح الدموية، العلاج التكاثري للجلوكوز، الصفائح الدموية، العلاج التكاثري
استشهد بهذه المقالة على النحو التالي: هاريسون تي إي، بولر جيه، ريفز كيه، وآخرون (١٧ مايو ٢٠٢٢) تأثير الجلوكوز على عدد وحجم الصفائح الدموية: تداعيات على الطب التجديدي. مجلة كيور ١٤(٥): e25081. doi:10.7759/cureus.25081
تُستخدم محاليل البلازما الغنية بالصفائح الدموية (PRP) والجلوكوز عالي التوتر عادةً للحقن في الطب التجديدي، وأحيانًا معًا. لم يُبلّغ سابقًا عن تأثير الجلوكوز عالي التوتر على انحلال الصفائح الدموية وتنشيطها. اختبرنا تأثير ارتفاع تركيزات الجلوكوز على عدد الصفائح الدموية وكريات الدم الحمراء، بالإضافة إلى حجم الخلايا في محاليل البلازما الغنية بالصفائح الدموية والدم الكامل. لوحظ انخفاض جزئي سريع في عدد الصفائح الدموية عند خلط جميع مخاليط الجلوكوز مع البلازما الغنية بالصفائح الدموية أو الدم الكامل، وهو ما يتوافق مع الانحلال الجزئي. بعد الدقيقة الأولى، ظلت أعداد الصفائح الدموية مستقرة، مما يشير إلى التكيف السريع للصفائح الدموية المتبقية مع فرط التوتر الشديد (>2000 ميلي أسمول). بعد الدقيقة الأولى، ظلت أعداد الصفائح الدموية مستقرة، مما يشير إلى التكيف السريع للصفائح الدموية المتبقية مع فرط التوتر الشديد (>2000 ميلي أسمول). بعد الدقائق الأولى، أدى العديد من الترومبون إلى الاستقرار الذي يوفر إقامة جيدة في الترومبوسا إلى أقصى درجة (>2000 ميكرومتر) gipertonusas. بعد الدقيقة الأولى، ظل عدد الصفائح الدموية مستقراً، مما يشير إلى التكيف السريع للصفائح الدموية المتبقية مع فرط التوتر الشديد (>2000 ميلي أسمول).في هذه الحالة، يجب أن يكون حجمها أكبر من 2000 مللي أوسمول (> 2000 ملي أوسمال).2000 ملي أوسمال. بعد الدقائق الأولى، أدى عدد كبير من الترومبون إلى استقرار ما يؤدي إلى التكيف التام مع الترومبون القديم أقصى (> 2000 ميكرومتر) giperosmolularnomu состоянию. بعد الدقيقة الأولى، ظل عدد الصفائح الدموية مستقراً، مما يشير إلى التكيف السريع للصفائح الدموية المتبقية مع حالة فرط الضغط الأسمولية القصوى (>2000 ميلي أسمول).أدت تركيزات الجلوكوز التي تبلغ 25% فأكثر إلى زيادة ملحوظة في متوسط ​​حجم الصفائح الدموية (MPV)، مما يشير إلى مرحلة مبكرة من تنشيط الصفائح الدموية. هناك حاجة إلى مزيد من الدراسات لتحديد ما إذا كان انحلال الصفائح الدموية أو تنشيطها يحدث، وما إذا كان حقن الجلوكوز عالي التوتر وحده أو مع البلازما الغنية بالصفائح الدموية (PRP) قد يوفر فوائد سريرية إضافية.
في خمسينيات القرن الماضي، اكتشف الجراح الأمريكي جورج هاكيت إمكانية تخفيف آلام المفاصل والظهر بشكل دائم لدى العديد من المرضى عن طريق حقن محلول تكاثري في الأوتار والأربطة. وأظهرت تجاربه على الأرانب أن هذا العلاج، الذي أطلق عليه اسم العلاج التكاثري، يُسبب تضخم الأوتار وتقويتها. وأكدت الدراسات النسيجية إنتاج كولاجين جديد خلال هذه العملية [1].
خلال العقود القليلة الأولى، جُرِّبت العديد من حلول التوزيع المختلفة. وبحلول تسعينيات القرن الماضي، اعتبر معظم الممارسين أن التركيزات العالية من الجلوكوز هي الطريقة الأكثر أمانًا وفعالية. ومع ذلك، لا تزال آلية العمل غير واضحة.
أُجريت دراسات سريرية قليلة في القرن العشرين بعد عمل هاكيت. ومع ذلك، تجدد الاهتمام في العقد الأول من القرن الحادي والعشرين، وأُجريت العديد من التجارب السريرية الناجحة للعلاج التكاثري لعلاج آلام أسفل الظهر [2]، وهشاشة العظام في الركبة [3]، والتهاب المرفق الجانبي [4].
يتطلب تجديد الأنسجة مشاركة الخلايا الجذعية. لذلك، لا بد أن تُحفّز التركيزات العالية من الجلوكوز هجرة الخلايا الجذعية وتكاثرها وتمايزها بطريقة ما. نفترض أن الصفائح الدموية قد تعمل كناقلات، وأن التركيزات العالية من الجلوكوز قد تُحفّز الصفائح الدموية على إطلاق السيتوكينات وعوامل النمو، مما يُعزز عمليات التجديد، وخاصةً هجرة الخلايا الجذعية إلى مناطق تركيز الجلوكوز العالية.
يسبق تنشيط الصفائح الدموية دائمًا زيادة الكالسيوم داخل الخلايا [5]. أظهر ليو وآخرون عام 2008 أن ارتفاع مستويات الجلوكوز يزيد من نشاط قنوات مستقبلات الجهد العابر من النوع السادس (TRPC6) في الغشاء البلازمي، مما يؤدي إلى تدفق أيونات الكالسيوم إلى الصفائح الدموية [6]. أظهرت دراسة أخرى أن تعرض المنطقة الهامشية للأنابيب الدقيقة لأيونات الكالسيوم يسبب ارتخاءها وتمددها وتشوهها، مما يؤدي بدوره إلى تغيير شكلها من قرصي إلى كروي، مما يؤدي إلى متوسط ​​حجم الصفائح الدموية [7].
فرضيتنا في هذه الدراسة هي أن تعرض الصفائح الدموية لتركيزات عالية من الجلوكوز يؤثر على المنطقة الهامشية للأنابيب الدقيقة والبيئة داخل الخلايا، مما يؤدي إلى زيادة MPV.
وقّع جميع المشاركين على نموذج موافقة مستنيرة بعد شرح تفاصيل الدراسة وقبل استلام العينات. في هذه الدراسة، استُخدمت عينات البلازما الغنية بالصفائح الدموية (PRP) التي يزيد تركيز الهيماتوكريت فيها عن 2% فقط، وذلك لإدراج عدد كريات الدم الحمراء ومتوسط ​​حجم الكريات الدموية الحمراء للمقارنة.
أُجريت الدراسة على أربع مراحل، المرحلة الأولى كانت PRP، والمراحل المتبقية كانت دمًا كاملًا (الجدول 1). وكما هو موضح سابقًا [8]، حُسبت جميع قوى الطرد المركزي النسبية (RCF، قوة التسارع) من نقطة المنتصف (Rmid، بالسنتيمتر) لعمود الدم في المحقنة الطاردة المركزية. وقد اخترنا استخدام MPV كمؤشر لتحسس الصفائح الدموية، وعدد الصفائح الدموية كمؤشر لاحتمالية انحلال الصفائح الدموية، وكلاهما يُمكن قياسه بسهولة باستخدام أجهزة تحليل الدم القياسية.
في المرحلة الأولى، تبرع 47 متطوعًا بعينات دم - أنبوب واحد من حمض إيثيلين ديامين رباعي الأسيتيك (EDTA) وعينة دم كاملة من البلازما الغنية بالصفائح الدموية (PRP) (مضاد للتخثر باستخدام سترات الصوديوم (NaCl، 3%)) (الجدول 1). وُضع جهاز الهزاز في الأنبوب فورًا. أُجري تعداد دم كامل (CBC) لعينات EDTA في ثلاث نسخ، وحُللت عينات كلوريد الصوديوم في ثلاث نسخ لتحليل تعداد الدم الكامل، ثم حُضِّرت البلازما الغنية بالصفائح الدموية (PRP) بالطرق المختلفة الموضحة أعلاه [8]. حُضِّرت جميع عينات البلازما الغنية بالصفائح الدموية (PRP) بالطرد المركزي عند سرعة 900-1000 غرام. اخلط كل عينة من البلازما الغنية بالصفائح الدموية (PRP) في خلاط دوامي لمدة 5-10 ثوانٍ، ثم قسِّم خمس عينات صغيرة (0.5 مل) إلى أنابيب.
لتقييم تأثير تعرض الصفائح الدموية على ارتفاع تركيزات الجلوكوز، خُلطت كميات متساوية (0.5 مل) من 0%، 5%، 12.5%، 25%، و50% من الجلوكوز في الماء مع عينات الصفائح الدموية للحصول على تركيزات 0%، 2.5%، 6.25%، 12.5%، و25% من خليط الجلوكوز، ثم خُلطت الأنابيب على رجّاز أنابيب الاختبار لمدة 15 دقيقة. حُلّلت القيمة الكلية الإجمالية (TAC) لكل خليط ثلاث مرات بعد 15 دقيقة. حُسب متوسط ​​عدد الصفائح الدموية (PLT)، وعدد كريات الدم الحمراء، وحجم الخلية الوسطي (MCV)، وحجم الخلية الوسطي (MPV) لكل أنبوب، وحُسب متوسط ​​عدد الصفائح الدموية، وعدد كريات الدم الحمراء، وحجم الخلية الوسطي (MCV)، وحجم الخلية الوسطي (MPV) لجميع عينات PRP.
بعد انتهاء المرحلة الأولى من جمع البيانات، لاحظنا زيادة ملحوظة في حجم الصفائح الدموية في صفائح PRP بعد إضافة D50W. لا تُمثل صفائح PRP بالضرورة جميع الصفائح الدموية في الدم، ويختلف وسط PRP عن وسط WB. لذلك، قررنا إجراء تجربة ثانية لتأثير إضافة D50W إلى الدم الكامل.
للجولة الثانية، اخترنا عينةً حجمها 30 بناءً على نتائج السلسلة الأولى، كما هو موضح في قسم التحليل. في هذه السلسلة، تبرع 20 متطوعًا بعينات دم (الجدول 1). سُحب دم كامل (1.8 مل) إلى محقنة سعة 3 مل، وأُضيف إليه 0.2 مل من محلول كلوريد الصوديوم 40%، وهو مضاد للتخثر. خُلط الدم الكامل في المحقنة لمدة خمس ثوانٍ باستخدام خلاط دوامي، ثم حُلِّل تعداد الدم الكامل ثلاث مرات. بعد التحليل، تمت إضافة الدم المضاد للتخثر إلى 2 مل من الجلوكوز بنسبة 50٪ في محقنة سعة 5 مل (كان تركيز الجلوكوز النهائي حوالي 25٪ (D25) ووضعه في أنبوب رج لمدة 30 دقيقة. بعد 30 دقيقة، تم تحليل D25 / CBC في محاقن WB في ثلاث نسخ. تم حساب متوسط ​​عدد الصفائح الدموية وعدد خلايا الدم الحمراء وحجم الخلية الوسطي وحجم الكرياتينين لكل محقنة، وتم حساب متوسط ​​PLT وعدد خلايا الدم الحمراء وحجم الخلية الوسطي وحجم الكرياتينين لكل عينة قبل وبعد إضافة الجلوكوز.
نظرًا لأن الصفائح الدموية في الدم الكامل تتعرض عادةً للجلوكوز عالي التوتر أثناء العلاج بالجلوكوز التكاثري بسبب الحقن طفيف التوغل، ونظرًا لعدم شيوع دمج البلازما الغنية بالصفائح الدموية مع الجلوكوز عالي التوتر قبل الحقن مباشرةً، فقد قررنا دراسة الجلوكوز عالي التوتر مع WB في القسم 1. الخطوتان الثالثة والرابعة. في كل مرحلة، تبرع 20 متطوعًا بـ 7-8 مل من ACD-A (حمض يحتوي على سترات ثلاثي الصوديوم (22.0 جم/لتر)، وحمض الستريك (8.0 جم/لتر)، وجلوكوز (24.5 جم/لتر)، ومحلول سترات الدكستروز) كمضادات تخثر في الدم (الجدول 1). استُخدمت فقط مخاليط الجلوكوز التي تزيد عن 12.5% ​​لتحديد النسبة المئوية العتبية المرتبطة بزيادة MPV. في المرحلة الثالثة، وُضع 1 مل من الدم في أنبوب اختبار. ثم اخلط الدم باستخدام خلاط دوامي لمدة ١٠ ثوانٍ، وذلك بإضافة ١ مل من ٣٠٪ جلوكوز، أو ٤٠٪ جلوكوز، أو ٥٠٪ جلوكوز إلى الأنبوب للحصول على تركيز جلوكوز نهائي بنسبة ١٥٪، أو ٢٠٪، أو ٢٥٪، على التوالي. حُلّلت عينات دم الجلوكوز لفحص تعداد الدم الكامل (CBC) فورًا بعد الخلط، وتكررت كل دقيقتين لمدة ٣٠ دقيقة.
أثناء الخلط الأولي، تُعرِّض إضافة جلوكوز مفرط التوتر بنسبة 1:1 مع WB أو PRP الصفائح الدموية لتركيزات أعلى من 25% لعدة ثوانٍ. في الخطوة الرابعة، لتقييم تأثير الجلوكوز مفرط التوتر بتركيزات ذروة أولية ضئيلة واختبار الحد الأقصى لتأثير الجلوكوز، أضفنا كمية صغيرة فقط من الدم إلى D25W أو D50W. وضعنا 1 مل من D25W أو D50W في أنبوب، وأضفنا 0.2 مل من WB مع تحريك العينة لمدة 10 ثوانٍ. في هذه الحالات، عُرِّض الدم للجلوكوز بتركيز أعلى بحوالي 20% من التركيز النهائي، بدلاً من 50% أعلى من التركيز النهائي كما في المرحلة الثالثة، مما أدى إلى تركيزات جلوكوز نهائية بلغت 20.8% و41.6%. حُلِّلت العينات المختلطة في نفس الفترة الزمنية كما في الخطوة الثالثة.
في الخطوة الأولى من كل سلسلة تخفيف الجلوكوز، تم أخذ 30 عينة حيث كان هذا هو حجم العينة المناسب للدراسة التجريبية [9]. في نهاية كل مرحلة (بما في ذلك المرحلة الأولى)، قم بتقييم مدى كفاية حجم العينة باستخدام الصيغة المستخدمة لتحديد حجم العينة اللازم لتقدير متوسط ​​متغير النتيجة المستمرة في مجتمع واحد. الصيغة n = Z2 x SD2 / E2. في هذه المعادلة، Z هي الدرجة Z، وSD هو الانحراف المعياري، وE هو الخطأ المطلوب [10]. ألفا لدينا هو 0.05، وهو ما يتوافق مع قيمة Z البالغة 1.96، ونتوقع خطأ قدره 5 (كنسبة مئوية). ومن ثم نحل من أجل n = (1.962 x SD2) / 52. أظهرت النتائج أن حجم العينة المطلوب لكل مرحلة كان أصغر من العدد الفعلي الذي تم جمعه.
خلال الفترات ١ و٣ و٤، باستخدام أكثر من تركيز جلوكوز واحد، تم تحليل تأثير تراكيز الجلوكوز المختلفة بمقارنة التغير الجزئي بين الوقت ٠ وكل مرة لاحقة (المرحلة ١ عند ١٥ دقيقة، الفترة ٣ عند ١٥ دقيقة). وأربعة عند ١٥ ثانية، ثم كل دقيقتين. قورنت معدلات التغير لكل فترة زمنية باستخدام اختبار مان-ويتني يو، لأن البيانات لم تتبع التوزيع الطبيعي كما حدده اختبار شابيرو-ويلك للتوزيع الطبيعي. بما أنه تم إجراء تحليل واحد لواحد لعدة مجموعات (خمس مجموعات) في الخطوات الأولى والثالثة والرابعة (خمس مجموعات إجمالاً)، فقد تم إجراء تصحيح بونفيروني لضبط قيمة ألفا المطلوبة إلى ≤٠٫٠١ وليس ≤٠٫٠٥.
انخفاض عدد الصفائح الدموية مع جميع تركيزات الدكستروز عالي التوتر وزيادة في MPV في الصفائح الدموية PRP عند تركيز دكستروز >12.5%: ارتفع عدد الصفائح الدموية PRP من مرة واحدة إلى خمس مرات التركيز مقارنة بالدم الكامل الأساسي، ويختلف ذلك حسب الطريقة (غير موضحة). انخفاض عدد الصفائح الدموية مع جميع تركيزات الدكستروز عالي التوتر وزيادة في MPV في الصفائح الدموية PRP عند تركيز دكستروز> 12.5٪: ارتفع عدد الصفائح الدموية PRP من واحد إلى خمسة أضعاف التركيز مقارنة بالدم الكامل الأساسي، ويختلف حسب الطريقة (غير موضحة). تقليل كمية الترومبونات مع جميع تركيزات دكسترون الجبرتون وMPV المتفوق في الترومبون PRP مع التركيزات المواد الغذائية > 12,5%: مجموعة من البلازما من البلازما الغنية بالصفائح الدموية (PRP) تنمو خلال 1-5 مرات على الأقل مع نتيجة نهائية حسنًا ، في إدراك الطريقة (غير واضحة). انخفاض عدد الصفائح الدموية في جميع تركيزات الدكستروز شديدة التوتر وزيادة MPV في الصفائح الدموية PRP عند تركيز دكستروز> 12.5٪: زاد عدد الصفائح الدموية PRP بمقدار 1-5 مرات مقارنة بالدم الكامل الأساسي، اعتمادًا على الطريقة (غير موضحة). ).أكثر من 12.5% ​​من التخفيضات في أسعار الفائدة على المركبات، وفحص PRP لـ MPV على سبيل المثال: قد يستغرق الأمر وقتًا طويلاً، حيث يتم إجراء عملية PRP في 1 إلى 5 أيام، ويتم إجراء هذا الاختبار. عند تركيز جلوكوز > 12.5٪، يقلل التركيز العالي للجلوكوز من عدد الدم، ويزيد MPV الدم PRP: بالمقارنة مع 与基线全血، يزيد عدد الدم PRP من 1 إلى 5 مرات من التركيز (غير موصوف). عند تركيزات الجلوكوز> 12,5%، أدت جميع تركيزات الجلوكوز الجبرتونية إلى زيادة عدد الترومبونات، مما أدى إلى ارتفاع MPV في ترومبيتات PRP: يتم زيادة عدد الترومبيتات PRP من 1 إلى 5 تركيزات دقيقة تركيزات منخفضة بشكل نهائي، وفقًا للطريقة (غير موصى بها). عند تركيزات الجلوكوز > 12.5%، أدت جميع تركيزات الجلوكوز في مرضى ارتفاع ضغط الدم إلى انخفاض عدد الصفائح الدموية وزيادة MPV في صفائح PRP: زاد عدد صفائح PRP بمقدار 1 إلى 5 أضعاف مقارنة بتركيزات الدم الكاملة الأساسية، اعتمادًا على الطريقة (كما هو موضح).يوضح الشكل 1 أن عدد الصفائح الدموية انخفض بنسبة 75% تقريبًا بعد التخفيف في الماء وبنسبة 20-30% بعد 15 دقيقة من التخفيف بتركيزات مختلفة من الجلوكوز مقارنةً بـ PRP الأساسي وتخفيف 1:1 المعدل للحجم (1- k1 مع تصحيح الحجم). k-1 تربية).1 تربية).
يتم التعبير عن عدد الخلايا في كل تخفيف على شكل جزء من العدد الأصلي قبل التخفيف.
انخفض MPV بشكل طفيف أثناء إنتاج PRP، دون مزيد من التغيير في تركيزات التخفيف إلى 12.5٪ في الماء أو الجلوكوز (بما في ذلك مخاليط الجلوكوز PRP بنسبة 25٪) وزاد بنسبة تزيد عن 20٪ بعد التخفيف في محلول الجلوكوز بنسبة 50٪ (الشكل 2). ). في المقابل، لم تظهر كريات الدم الحمراء أي تغيير كبير في الحجم عند أي تخفيف بخلاف H2O.
يتم التعبير عن متوسط ​​حجم الخلايا في كل تخفيف كنسبة مئوية من الحجم الأصلي قبل التخفيف.
لوحظ انخفاض مماثل، وإن كان أقل وضوحًا، في عدد الصفائح الدموية وزيادة في حجم الخلايا الكبدية لدى مرضى سرطان الدم النخاعي الذين تعرضوا لجرعة ٥٠٪ جلوكوز (لتركيبة تحتوي على ٢٥٪ جلوكوز). يقارن الجدول ٢ أعداد الخلايا وحجمها في الدم الكامل المخفف بجرعة ٥٠٪ دكستروز مع بيانات المرحلة الأولى من اختبار البلازما الغنية بالصفائح الدموية (PRP) المخففة بجرعة ٥٠٪ دكستروز. لم تكن التغيرات في عدد خلايا الدم الحمراء وحجم خلايا الدم الحمراء الوسطي (MCV) واضحة، ولم تكن محور اهتمامنا.
SD = الانحراف المعياري، MD = متوسط ​​الفرق بين المجموعات، SE = الانحراف المعياري لمتوسط ​​الفرق، RBC = كريات الدم الحمراء، PLT = الصفائح الدموية، PRP = البلازما الغنية بالصفائح الدموية، WB = الدم الكامل
بعد إضافة D50W إلى WB، بلغت نسبة فقدان الصفائح الدموية المعدلة بالتخفيف 7.7% (310±73 مقابل 286±96) مقارنةً بـ 17.8% لتخفيف PRP في D50W (664±348 مقابل 544±277). وارتفعت قيمة MPV WB بنسبة 16.8% (من 10.1±0.5 إلى 11.8±0.6)، بينما ارتفعت قيمة MPV PRP بنسبة 26% (9.2±0.8 مقابل 11.6±0.7). على الرغم من أن الاختلافات المتوسطة في كل من انخفاض عدد الصفائح الدموية وزيادة MPV كانت أكبر بشكل ملحوظ مع PRP، فإن التغييرات في انخفاض عدد الصفائح الدموية داخل WB كانت كبيرة جدًا (310 ± 73 إلى 286 ± 96 (-7.7٪)؛ ص = .06) وكانت الزيادة في MPV كبيرة (10.1 ± 0.5 إلى 11.8 ± 0.6 (+16.8) ص < .001). على الرغم من أن الاختلافات المتوسطة في كل من انخفاض عدد الصفائح الدموية وزيادة MPV كانت أكبر بشكل ملحوظ مع PRP، فإن التغييرات في انخفاض عدد الصفائح الدموية داخل WB كانت كبيرة جدًا (310 ± 73 إلى 286 ± 96 (-7.7٪)؛ ص = .06) وكانت الزيادة في MPV كبيرة (10.1 ± 0.5 إلى 11.8 ± 0.6 (+16.8) ص < .001).على الرغم من أن الاختلافات المتوسطة في كل من انخفاض عدد الصفائح الدموية وزيادة معدل ضربات القلب كانت أكبر بشكل ملحوظ مع PRP، فإن التغييرات في انخفاض عدد الصفائح الدموية داخل WB كانت كبيرة تقريبًا (310 ± 73 إلى 286 ± 96 (-7.7٪)؛ ص = 0.06).كان увеличение MPV значительным (من 10,1 ± 0,5 إلى 11,8 ± 0,6 (+16,8) p <0,001). كانت الزيادة في MPV كبيرة (من 10.1 ± 0.5 إلى 11.8 ± 0.6 (+16.8) ص < 0.001).يمكن استخدام تقنية PRP للتصوير بالرنين المغناطيسي وMPV للتصوير الفوتوغرافي من خلال WB عداد السرعة القصوى للمركبة (310 ± 73 ± 286 ± 96 (-7.7%) ； p = .06) وMPV الحد الأقصى المسموح به (10.1 ± 0.5 إلى 11.8 ± 0.6) (+16.8) ص < .001).يتم إجراء عملية PRP في وقت مبكر من أجل الحصول على نتائج أفضل، وهو أمر لا مفر منه الحد الأقصى لحجم السيارة （((310 ± 73 إلى 286 ± 96 (-7.7%) ； p = .06) وMPV 的增是显着的(10.1 ± 0.5) 11.8 ± 0.6 (+16.8) ف <.001).كان التغيير في انخفاض عدد الصفائح الدموية داخل WB مهمًا تقريبًا (من 310 ± 73 إلى 286 ± 96 (-7.7٪)؛ ص = 0.06)، على الرغم من أن PRP كان لديه فروق متوسطة أكبر بشكل ملحوظ في انخفاض عدد الصفائح الدموية وزيادة MPV. وكانت الزيادة في MPV كبيرة.(من 10,1 ± 0,5 إلى 11,8 ± 0,6 (+16,8) ص < 0,001). (من 10.1 ± 0.5 إلى 11.8 ± 0.6 (+16.8) ص < 0.001).
كان مطلوبًا تركيز نهائي بنسبة 20٪ من الجلوكوز لرؤية تغيير كبير في MPV، ولكن التغيير في MPV كان أكثر وضوحًا عند التركيز النهائي بنسبة 25٪. استقر فقدان الصفائح الدموية بعد الانخفاض الأولي. لاحظنا انخفاضًا حادًا أوليًا في CVR، ومع ذلك، تم استعادة CVR بسرعة عند تركيز الجلوكوز النهائي بنسبة 25٪، والذي كان أعلى بكثير من مستويات CVR التي لوحظت عند تركيزات الجلوكوز النهائية بنسبة 20٪ و 15٪ (الشكل 3 وإلى يسار الجدول 3؛ المربعات المظللة). تشير إلى قيم p ≤ ألفا مع تصحيح بونفيروني 0.01). كان هناك أيضًا انخفاض حاد أولي في عدد PLT، لوحظ في المرحلة الأولية من 0-15 ثانية، ثم ظل مستقرًا (من 15 ثانية إلى 30 دقيقة؛ يسار الجدول 4).
أدت إضافة تركيزات مختلفة من الجلوكوز إلى الدم الكامل إلى انخفاض سريع في القيمة المتوسطة للدم (MPV) في البداية، تلاه تحسن مرتبط بالتركيز بنسبة تزيد عن 20%. يوضح الرسم البياني تركيز الجلوكوز بعد التخفيف. أُجريت اختبارات D15 وD20 وD25 بتخفيف 1:1. أما D21 وD41، فقد أُجريت بتخفيف 1:5.
يوضح الجدول 4 التغير في عدد الصفائح الدموية عند تخفيفها في جلوكوز مفرط التوتر. لاحظنا علاقة مرتبطة بالجرعة بين الانخفاض الفوري في أعداد الصفائح الدموية عند التخفيف 1:1 وعند التخفيف 1:5. بمقارنة التخفيفات 1:1 كمجموعة واحدة مع التخفيفات 1:5، شهدت مجموعة التخفيف 1:1 انخفاضًا فوريًا في عدد الصفائح الدموية أقل من مجموعة التخفيف 1:5، حيث بلغ 66±48,000 (23%) مقابل 99±69,000 (37%). (p = 0.014) في مجموعة التخفيف 1:5. بعد الانخفاض الأولي عند نقطة القياس الأولى، استقر عدد الصفائح الدموية كنسبة مئوية من الجلوكوز (الشكل 4).
عند إضافة الدم الكامل إلى الجلوكوز بنسبة ١:١، ينخفض ​​عدد الصفائح الدموية بنحو ٢٥٪. أما عند إضافة الدم الكامل بنسبة ١:٥، فكان الانخفاض أكبر بكثير، حوالي ٥٠٪.
زاد تركيز الجلوكوز بنسبة 41% من قيمة MPV بشكل أسرع وأكثر دراماتيكية من تركيزي 25% و21%. تظهر نتائج تركيز MPV في الشكل 3. في جميع التخفيفات الأخرى، لم يُلاحظ أي انخفاض أولي فوري في تركيز MPV بعد إضافة تركيز 50% من الجلوكوز. عند استخدام تركيز 25% من الجلوكوز (تركيز الجلوكوز 20.8% عند التخفيف النهائي)، كان التغير في تركيز MPV مماثلاً للتغير في تركيز 20% من الجلوكوز عند تخفيف 1:1 (الشكل 3). على الرغم من أن التغيرات في تركيز MPV كانت أكبر في البداية عند تركيز 41% المختلط مقارنةً بتركيز 25%، إلا أن الفرق في تركيز MPV بين تركيز 41% و25% لم يعد ذا دلالة إحصائية بعد 16 دقيقة (الجدول 3، على اليمين). ومن المثير للاهتمام أيضًا أن تركيز 25% من الجلوكوز زاد تركيز MPV بشكل أكثر فعالية من تركيز 20.8%.
وقد أكدت هذه الدراسة التي أجريت في المختبر فرضيتنا جزئيا. وقد أظهرت انحلال جزئي محتمل للصفائح الدموية عن طريق خليط الدكستروز، واستيعاب سريع للصفائح الدموية لفرط التوتر الشديد، وارتفاع كبير في MPV استجابة لتركيزات > 25٪ من الدكستروز شديد التوتر. وقد أظهرت انحلال جزئي محتمل للصفائح الدموية عن طريق خليط الدكستروز، واستيعاب سريع للصفائح الدموية لفرط التوتر الشديد، وارتفاع كبير في MPV استجابة لتركيزات > 25٪ من الدكستروز شديد التوتر. عرض لجزء محتمل من إجازة الترومبونات الأساسية من خلال الإقامة المريحة في الترومبوت إلى أقصى الحدود الجيبرتونوس والمركبة MPV الأفضل في الكشف عن تركيز الجيبيرتونيوس > 25%. وقد أظهرت انحلال جزئي محتمل للصفائح الدموية مع سكر العنب، واستيعاب سريع للصفائح الدموية لفرط التوتر الشديد، وزيادة كبيرة في MPV استجابة لمستويات سكر العنب شديدة التوتر >25%.قد يكون من الصعب على أي شخص أن يتخيل ما إذا كانت هذه هي الطريقة التي يجب أن يكون بها هذا المنتج> احصل على 25% من سعر السيارة MPV.قد يكون من الصعب العثور على أي شيء في المنزل في أي وقت من الأوقات.响应> 25% من إجمالي قيمة السيارة هو MPV. من خلال إظهار الجرعات الجزئية المحتملة من جلسات الجلوكوز التي تتكيف بشكل جيد مع الجرعات الجيبرتونوس الشديد و الـ MPV المتميز للغاية في زيادة تركيز الغلوكوز الجيبرتوني > 25%. يُظهر تحلل الصفائح الدموية الجزئي المحتمل بواسطة مخاليط الجلوكوز، والتكيف السريع للصفائح الدموية مع فرط التوتر الشديد، وزيادة كبيرة في MPV استجابةً للجلوكوز شديد التوتر> 25٪.بلغت الزيادة الأولية أقصاها عند التعرض للجلوكوز بنسبة 41.6%، ولكن الزيادة في MPV اقتربت من التعرض للجلوكوز بنسبة 25% بعد حوالي 20 دقيقة من التعرض.
يتأثر تركيز الصفائح الدموية بالجلوكوز. لاحظنا انخفاض كمية PLT عند جميع تخفيفات الجلوكوز. قد يرتبط الانخفاض الحاد في عدد الصفائح الدموية في تخفيفات H2O (0%) من سلسلة PRP بالتحلل الأسموزي. أو قد يكون هذا ناتجًا عن تكتل الصفائح الدموية، ولكن هذا يتناقض مع عدم تغير MPV عند هذا التخفيف. تشير هذه النتيجة إلى أن بعض الصفائح الدموية حساسة جدًا لنقص الأسمولية.
في جميع تخفيفات الجلوكوز بنسبة 1:1، انخفضت كمية PLT بنسبة 20-30%، حتى عند D5W (ناقص الضغط عند 252 ملي أسمول)، مما قد يشير إلى تأثير غير أسموزي محدد للجلوكوز، حيث ظل كلٌّ من PLT وMPV ثابتين عند زيادة تركيز الجلوكوز ثلاثة أضعاف. في الواقع، اتجهت تركيزات PLT إلى الزيادة الطفيفة مع زيادة الأسمولية.
انخفاض تركيز PLT بين التخفيفين 1:1 و1:5 يعني أن تأثير الذوبان يعتمد على تركيزي الجلوكوز الابتدائي والنهائي. لو كان يعتمد فقط على التركيز الابتدائي، لكان من المتوقع ملاحظة فرق في انخفاض PLT بين التركيزين 1:1. لكننا لم نلاحظ ذلك. إذا كان تأثير التحلل يعتمد فقط على تركيز الجلوكوز النهائي، فلا نتوقع فرقًا كبيرًا بين تخفيف 20% 1:1 وتخفيف 20.8% 1:5. ومع ذلك، فقد نجحنا في ذلك.
في حال فقدان الصفائح الدموية نتيجةً لانحلالها، يتكوّن محلول جزئي، وبعد ذلك تُطلق السيتوكينات وعوامل النمو إلى البيئة خارج الخلوية. وقد أظهرت العديد من الدراسات أن محلول الصفائح الدموية يُضاهي فعالية البلازما الغنية بالصفائح الدموية (PRP) كمحلول تكاثر [11]. وقد ثبت أن البلازما الغنية بالصفائح الدموية نفسها تُعدّ محلولاً فعالاً لعلاج تكاثر الخلايا [12-14].
تدور الصفائح الدموية غير النشطة على شكل قرص مُدعّم بهياكل داخلية متعددة. أثناء التنشيط، تتخذ شكلًا كرويًا أو أميبيًا، مما يؤدي إلى زيادة في الحجم. تتطلب هذه الزيادة في الحجم زيادة في مساحة السطح، نتيجةً لطرد نظام الأنابيب المفتوحة (OCS) وإضافة حبيبات مُفرزة إلى الغشاء. يبقى تحديد ما إذا كانت زيادة حجم الصفائح الدموية (MPV) الناتجة عن ارتفاع مستوى الجلوكوز تتضمن إحدى هاتين الآليتين أو كلتيهما، ولكن إذا كانت الأخيرة، فإن زيادة حجم الصفائح الدموية (MPV) تشير إلى زوال التحبيب.
وأظهرت هذه الدراسة أن التعرض لتركيزات عالية من الجلوكوز على الصفائح الدموية الغنية بالصفائح الدموية أو الصفائح الدموية الكاملة أدى إلى زيادة في MPV في غضون 15 دقيقة مع تركيز الجلوكوز بنسبة 25٪ و 41.6٪ على التوالي.
قد يكون سبب زيادة MPV للصفائح الدموية هو تمدد تشابكات الأنابيب الدقيقة المحيطة استجابةً لتدفق الكالسيوم. ليو وآخرون. وقد ثبت أن الجلوكوز يتوسط تدفق الكالسيوم من خلال قناة TRPC6 للصفائح الدموية [6]. فرضيتنا هي أن الجلوكوز يحفز استرخاء تشابكات الأنابيب الدقيقة، مما يؤدي إلى زيادة MPV وتحسس الصفائح الدموية و/أو تنشيطها. ومع ذلك، واستنادًا إلى نتائجنا، فإن هذا ليس سوى جزء من القصة. في اختباراتنا، لم ينتج عن أي تركيز أقل من D25W زيادة في MPV. ونظرًا لأننا لم نختبر التعرض لتركيزات الجلوكوز بين 12.5٪ و25٪، فإن نتائج المرحلة الأولى تشير إلى أنه قد يكون هناك حد في هذا النطاق من تركيزات الجلوكوز يؤدي إلى زيادة MPV. أظهرت الاختبارات الإضافية في المرحلتين 3 و4 أن 20-25٪ من الجلوكوز يبدو أنه الحد الأقصى لذلك، ولكن لا يزال من غير الواضح السبب.
لاحظنا أيضًا انخفاضًا بنسبة 9% تقريبًا في MPV بعد الطرد المركزي. ليس من الواضح ما إذا كان هذا الانخفاض في MPV ناتجًا عن حُبس الصفائح الدموية الأكبر حجمًا والأكثر كثافةً في طبقة خلايا الدم الحمراء في جهاز الطرد المركزي. قد تكون هذه الملاحظة مهمة للأطباء، إذ قد تشير إلى أن صفائح PRP هي مجموعة فرعية أصغر حجمًا وأقل كثافة من صفائح WB.
في دراسة سابقة، أظهرنا أن تحضير البلازما الغنية بالصفائح الدموية (PRP) بالطرق اليدوية غير مكلف [8]. إذا كان الجلوكوز يُحسِّس الصفائح الدموية في الأنسجة أو البلازما الغنية بالصفائح الدموية، مما يجعلها أكثر عرضة للتنشيط، أو إذا تم إنتاج البلازما الغنية بالصفائح الدموية بخصائص مُحَلَّلة جزئيًا، فقد يُعزز ذلك عملية التجديد ويُقلل الحاجة إلى العلاج. لذلك، قد يكون الجمع بين البلازما الغنية بالصفائح الدموية والجلوكوز عالي التركيز أكثر فعالية من حيث التكلفة من البلازما الغنية بالصفائح الدموية أو الجلوكوز وحدهما.
تعاني دراستنا من عدة عيوب. أولًا، نستخدم بلازما غنية بالصفائح الدموية (PRP) مُحصّلة بطرق مختلفة، مما قد يؤدي إلى نتائج متضاربة. ثانيًا، لم نتمكن من إجراء تحليل كيميائي حيوي لأي من عيناتنا لتحديد ما إذا كان تنشيط الصفائح الدموية قد حدث بدقة أكبر. نود قياس P-selectin، أو عامل الصفائح الدموية الرابع، أو تكتلات الصفائح الدموية الوحيدة، أو غيرها من مؤشرات تنشيط الصفائح الدموية لفهم درجة أو وجود تحلل حبيبات ألفا بشكل أفضل، ولكن هذا يتجاوز نطاق هذه الدراسة. ثالثًا، لم نتمكن من التأكد، باستخدام المجهر الإلكتروني أو غيره من الطرق، من أن زيادة MPV في الصفائح الدموية المعرضة للجلوكوز كانت بسبب التأثير على تشابكات الأنابيب الدقيقة.
أدى استخدام خلائط WB أو PRP مع 25% جلوكوز إلى زيادة MPV، مما يشير إلى بدء تنشيط الصفائح الدموية، على الرغم من أن هذه الدراسة لم تُظهر تطورًا في التكتل أو إزالة التحبب. أدى خليط الجلوكوز عالي التوتر إلى فقدان الصفائح الدموية، مما قد يُمثل تأثيرًا انحلاليًا. يمكن أن يُسبب التنشيط الجزئي أو انحلال الصفائح الدموية تجديد الأنسجة بعد حقن الصفائح الدموية. لم تتضح بعد الآثار السريرية التي قد تُسببها هذه التغييرات. أظهرت دراسات أخرى قياسات أكثر دقة للتنشيط أو الانحلال، وقيّمت الآثار السريرية المختلفة لمخاليط الجلوكوز عالي التوتر مع WB أو PRP.
يُعدّ العلاج التكاثري بالجلوكوز علاجًا تجديديًا بسيطًا وغير مكلف، ويشهد توسعًا سريعًا ويدعم الأبحاث السريرية. تشير هذه الدراسة إلى آلية فسيولوجية، إذا تأكدت، قد تساعدنا في فهم جزء من الآلية التجديدية للعلاج التكاثري.
المعلوماتية الطبية الحيوية والصحية في كلية الطب بجامعة ميسوري، كانساس سيتي، كانساس سيتي، الولايات المتحدة الأمريكية
المواضيع البشرية: أعطى جميع المشاركين في هذه الدراسة موافقتهم أو لم يعطوها. أصدرت الجمعية الدولية للطب الخلوي موافقة ICMS-2017-003. تمت الموافقة على البروتوكول التالي للاستخدام الإضافي من قبل مجلس المراجعة المؤسسية للجمعية الدولية للطب الخلوي: العنوان: حساب عائد دواء البلازما الغنية بالصفائح الدموية بناءً على عدد الصفائح الدموية الأساسي في تعداد الدم الكامل. المواضيع الحيوانية: أكد جميع المؤلفين عدم مشاركة أي حيوانات أو أنسجة في هذه الدراسة. تضارب المصالح: وفقًا لنموذج الإفصاح الموحد ICMJE، يصرح جميع المؤلفين بما يلي: معلومات الدفع / الخدمة: يصرح جميع المؤلفين بأنهم لم يتلقوا دعمًا ماليًا من أي منظمة للعمل المقدم. العلاقات المالية: يصرح جميع المؤلفين بأنه ليس لديهم حاليًا أو خلال السنوات الثلاث الماضية علاقات مالية مع أي منظمة قد تكون مهتمة بالعمل المقدم. علاقات أخرى: يصرح جميع المؤلفين بعدم وجود علاقات أو أنشطة أخرى قد تؤثر على العمل المقدم.
هاريسون تي إي، بولر جيه، ريفز كيه وآخرون (١٧ مايو ٢٠٢٢) تأثير الجلوكوز على عدد وحجم الصفائح الدموية: تداعياته على الطب التجديدي. مجلة كيور ١٤(٥): e25081. doi:10.7759/cureus.25081
© حقوق الطبع والنشر ٢٠٢٢ هاريسون وآخرون. هذه المقالة مفتوحة المصدر، وتُوزّع بموجب شروط رخصة المشاع الإبداعي المنسوبة (CC-BY 4.0). يُسمح بالاستخدام والتوزيع وإعادة الإنتاج غير المحدود بأي وسيلة، شريطة ذكر المؤلف الأصلي والمصدر.