Qida maddələrinin alınması və paylanması həşəratların yem axtarışını və həyat tarixinin xüsusiyyətlərini birləşdirir. Həyatın müxtəlif mərhələlərində xüsusi qida maddələrindəki çatışmazlıqları kompensasiya etmək üçün həşəratlar bu qidaları əlavə qidalanma yolu ilə əldə edə bilərlər, məsələn, gölməçələr kimi tanınan prosesdə onurğalıların ifrazatları ilə qidalanaraq. və reproduksiya. Bu tədqiqatın məqsədi An.Qida əldə etmək üçün inək sidikində arabiensis təşviqi həyat tarixinin xüsusiyyətlərini yaxşılaşdırır.
Təhlükəsiz olduğuna əmin olun.arabiensis təzə, 24 saat, 72 və 168 saatlıq köhnə inək sidiyin qoxusuna cəlb edilib, ev sahibi axtaran və qanla qidalanan (48 saatlıq qandan sonrakı yemək) dişilər Y-boru olfaktometrində ölçüldü, sonra hamilə qadınların bioaktivləşməsi üçün kimyəvi analizdən istifadə edildi və elektrofizik analizdən istifadə edildi. Bütün dörd yaş siniflərində inək sidikindəki birləşmələr. Bioaktiv birləşmələrin sintetik qarışıqları Y-boru və çöl sınaqlarında qiymətləndirilmişdir. İnək sidiyi və onun əsas azot tərkibli sidik cövhərini malyariya daşıyıcıları üçün potensial əlavə pəhriz kimi araşdırmaq üçün qidalanma parametrləri və həyat tarixi xüsusiyyətləri dişi sidiyin udulması və nisbəti ölçüldü. qidalandıqdan sonra dişilər sağ qalma, bağlı uçuş və çoxalma üçün qiymətləndirildi.
Ev sahibinin qanını və qidasını axtarın. Laboratoriya və çöl tədqiqatlarında ərəblər təzə və qocalmış inək sidiyinin təbii və sintetik qoxusuna cəlb olundular. Hamilə qadınlar kürü tökmə yerlərində inək sidiyi reaksiyalarına laqeyd yanaşırdılar. Ev axtaran və qan əmən dişilər inək sidiyini və sidik cövhərini aktiv şəkildə mənimsəyərlər. , sağ qalma və ya çoxalma.
Anopheles arabinis, təkmilləşdirilmiş həyat tarixi xüsusiyyətləri üçün inək sidiyin alınması və paylanması. İnək sidiyəsinin əlavə qidalanması vektor tutumuna birbaşa gündəlik sağ qalma və vektor sıxlığını artırmaqla və dolayı yolla uçuş fəaliyyətini dəyişdirərək təsir edir və buna görə də gələcək modellərdə nəzərə alınmalıdır.
Qida maddələrinin alınması və paylanması həşəratların yem axtarışı və həyat tarixinin xüsusiyyətlərini birləşdirir [1,2,3]. Həşəratlar qidanın mövcudluğu və qida maddələrinə olan tələbat əsasında qida seçib əldə edə və kompensasiyalı qidalanma həyata keçirə bilirlər [1, 3]. Qida maddələrinin paylanması həyat tarixi prosesindən asılıdır və pəhrizin keyfiyyəti və kəmiyyəti üçün müxtəlif tələblərə səbəb ola bilər [1, 3]. spesifik qida maddələrində böcəklər bu qidaları palçıq, onurğalıların müxtəlif ifrazatları və ifrazatları və leş kimi əlavə qidalanma yolu ilə əldə edə bilirlər. Bu proses gölməçələr [2] kimi tanınır. İlk növbədə müxtəlif kəpənək və güvə növləri təsvir edilsə də, suvarma dəlikləri digər həşərat növlərində də baş verir və onların sağlamlığına əhəmiyyətli təsir göstərə bilər. [2, 4, 5, 6] ,7]. Malyariya ağcaqanadları Anopheles gambiae sensu lato (sl) “pis qidalanmış” yetkin bir insan kimi ortaya çıxır [8], buna görə də suvarma onun həyat tarixinin xüsusiyyətlərində mühüm rol oynaya bilər, lakin bu davranış indiyə qədər diqqətdən kənarda qalmışdır.
Yetkin dişi Anopheles ağcaqanadlarında azotun qəbulu sürfə mərhələsindən daşınan aşağı kalorili ehtiyatlara və qan yeməyinin səmərəsiz istifadəsinə görə məhduddur [9]. Dişi Ann.gambiae sl adətən bunu əlavə qan yeməkləri ilə tamamlayaraq kompensasiya edir [10, 11] və bununla da daha çox ağcaqanad və daha çox xəstəliyə yoluxma riski yaradır. ly, ağcaqanadlar digər həşəratlar tərəfindən nümayiş etdirildiyi kimi, uyğunlaşma və uçuş manevr qabiliyyətini artıran azotlu birləşmələr əldə etmək üçün onurğalıların ifrazatının əlavə qidalanmasından istifadə edə bilər [2]. Bu baxımdan, An.The Gambian sl sl., Anopheles arabinis, Anopheles və coğrafya kompleksi [13] maraqlı və fərqli cazibəsidir. Anopheles arabinis ev sahibi üstünlükləri baxımından fürsətçidir və mal-qara ilə əlaqəsi və qidalanması məlumdur. İnək sidiyi azotlu birləşmələrlə zəngin bir resursdur, karbamid təzə sidikdə ümumi azotun 50-95%-ni təşkil edir [15, 16]. İnək sidiyin yaşlandıqca bu ehtiyatların mikrogenləşməsi və ya mikrogenləşməsi azalır24. saat [15].Üzvi azotun azalması ilə əlaqəli ammonyakın sürətlə artması ilə alkalofil mikroorqanizmlər (çoxları ağcaqanadlar üçün zəhərli birləşmələr istehsal edir) inkişaf edir [15], qadın Ann.arabiensis 24 saat və ya daha az yaşlı sidiyə üstünlük verilir [14].
Bu tədqiqatda ev sahibi və qanla qidalanan Ans axtarıldı. İlk gonadotropin dövrü ərzində arabiensis sidik qarışdırmaqla azotlu birləşmələrin, o cümlədən sidik cövhərinin alınması üçün qiymətləndirildi. Sonra, dişi ağcaqanadların bu potensial qida resursunu necə ayırdığını qiymətləndirmək üçün bir sıra eksperimentlər aparıldı. Bu potensial qida mənbəyini axtararkən, arabiensis müşahidə edilən diferensial cəlbediciliyin arxasında kimyəvi korrelyasiya aşkar etdi. 24 saatlıq yaşlı sidikdə müəyyən edilmiş uçucu üzvi birləşmələrin (VOC) sintetik qoxu qarışıqları, sidiyin təsirini tarla şəraitində daha da qiymətləndirdi, sidiyin təsirini tarla şəraitində daha da qiymətləndirdi. müxtəlif fizioloji vəziyyətlərdə.Ağcaqanadların cazibəsi. Əldə edilən nəticələr təsdiqləyir ki, An.arabiensis həyat tarixinin xüsusiyyətlərinə təsir etmək üçün onurğalıların sidikində tapılan azotlu birləşmələri əldə edir və paylayır. Bu nəticələr potensial epidemioloji nəticələr və vektor nəzarəti və nəzarəti üçün onlardan necə istifadə oluna biləcəyi kontekstində müzakirə edilir.
Anopheles arabicans (Dongola ştammı) 25 ± 2 °C, 65 ± 5% RH və 12:12 saat işıq:qaranlıq dövründə saxlanıldı. Sürfələr distillə edilmiş su ilə doldurulmuş plastik qablarda (20 sm × 18 sm × 7 sm) yetişdirildi və Tetramin ® balıq yemi ilə qidalandı (MelTetramin ® ml 0 ilə qidalandı). fincanlar (Nolato Hertila, Åstorp, SE) və sonra yetkinlərin çıxmasına imkan vermək üçün Bugdorm qəfəslərinə (30 sm × 30 sm × 30 sm; MegaView Science, Taichung, Tayvan) köçürülür. aşağıda təsvir olunduğu kimi, eksperimentdən əvvəl bir gecədə distillə edilmiş su ilə süzüldü. Uçuş borusu təcrübələri üçün istifadə edilən dişilər ad libitum su ilə cəmi 4-6 saat ac qaldılar. Sonrakı bioanalizlər üçün qan əmici ağcaqanadlar hazırlamaq üçün 4 dpe dişilərə defibrotik qoyun qanı verildi (Håtunalab, Bro, SE) işlənmiş qoyun qanı (Håtunalab, Bro, SE). tıkanmış dişilər daha sonra ayrı-ayrı qəfəslərə köçürüldü və aşağıda təsvir olunduğu kimi birbaşa pəhrizlə təmin edildi və ya aşağıda təsvir edilən təcrübələrdən 3 gün əvvəl 10% ad libitum saxaroza ilə təmin edildi. Sonuncu dişilər uçuş borusu bioanalizləri üçün istifadə edildi və laboratoriyaya köçürüldü, sonra eksperimentdən əvvəl 4-6 saat ərzində distillə edilmiş su ad libitum oldu.
Yetkin An.Ərəb qadınında sidik və sidik cövhəri istehlakının kəmiyyətini təyin etmək üçün qidalanma analizlərindən istifadə edilmişdir. Ev sahibi axtaran və qanla qidalanan qadınlara 48 saat ərzində 1% seyreltilmiş təzə və yaşlı inək sidiyi, müxtəlif konsentrasiyalarda karbamid və iki nəzarət (10% saxaroza və su) olan pəhriz verilmişdir. Bundan əlavə, qida boyası ml-FF x17; ; Sigma-Aldrich, Stokholm, SE) pəhrizə əlavə edildi və 250 µl mikrosentrifuqa borularında 4 × 4 matrixdə təchiz edildi (Axygen Scientific, Union City, CA, ABŞ; Şəkil 1A) Kenarına qədər doldurun (~300 µl). sm diametrdə və 6 sm hündürlükdə; Semadeni, Ostermundigen, CH; Şəkil 1A) 25 ± 2 sm °C və 65 ± 5% nisbi rütubətdə tam qaranlıqda.
Ev sahibi və qansoran dişi Anopheles arabianus tərəfindən udulmuş iribuynuzlu sidiyi və sidik cövhərini axtarın. Qidalanma sınağında (A) dişi ağcaqanadlara təzə və yaşlı inək sidiyi, müxtəlif konsentrasiyalarda karbamid, saxaroza (10%) və distillə edilmiş sudan (H2O) ibarət pəhriz verilmişdir. ev sahibi axtaran dişilərin 72 saatlıq inək sidini 168 saatlıq inək sidiyindən (B) az udulmuşdur. Sidikdəki orta ümumi azot miqdarı (± standart sapma) daxildə göstərilir. Ev sahibi axtaran (D, F) və qan əmən (E, G) dişilər karbamid götürürlər. digər (Tukey-in post hoc analizindən istifadə edən birtərəfli ANOVA; p < 0.05). Səhv çubuqları orta (BE) standart xətasını təmsil edir. Düz kəsikli xətt log-xətti reqressiya xəttini (F, G) təmsil edir.
Udulmuş qidanı buraxmaq üçün ağcaqanadlar ayrı-ayrılıqda 230 µl distillə edilmiş su olan 1,5 ml mikrosentrifuqa borularına yerləşdirildi və toxuma birdəfəlik pestle və simsiz mühərrik (VWR International, Lund, SE) istifadə edərək parçalandı, ardınca 10 krpm-də 10 dəqiqə ərzində sentrifuqasiya edildi (supernatant 290 µl-ə ötürüldü). Sigma-Aldrich) və absorbans (λ620) spektrofotometrə əsaslanan mikroplitə oxuyucusu (SPECTROStar® Nano, BMG Labtech, Ortenberg, DE) nm istifadə edərək təyin olundu. Alternativ olaraq, ağcaqanadlar 1 ml distillə edilmiş suda üyüdüldü, 900 µl-i spektrofotometrə (cuvette6V000-a köçürüldü) 1800, Shimadzu, Kista, SE).Pəhriz qəbulunun kəmiyyətini müəyyən etmək üçün 0,2 µl-dən 2,4 µl-ə qədər 1 mq ml-1 ksilen siyanid əldə etmək üçün ardıcıl seyreltmə yolu ilə standart əyri hazırlanmışdır. Sonra hər bir ağcaqanad üçün ən çox qidanın miqdarını müəyyən etmək üçün məlum boya konsentrasiyalarının optik sıxlığından istifadə edilmişdir.
Həcm məlumatları birtərəfli dispersiya təhlilindən (ANOVA) və ardınca Tukey'nin post hoc ikili müqayisələrindən (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc., Cary, NC, ABŞ, 1989-2007) istifadə edilərək təhlil edilmişdir. Xətti reqressiya analizləri konsentrasiyadan asılı olan karbamid qəbulu və qan host-göstəricisi ilə müqayisəli reaksiyalar arasında təsvir edilmişdir. Mac üçün v8.0.0, GraphPad Software, San Diego, CA, US).
Hər yaş qrupundan təqribən 20 µl sidik nümunələri Chromosorb® W/AW (10 mg 80/100 mesh, Sigma Aldrich) üzərinə bağlandı və qalay kapsullara (8 mm × 5 mm) qapaqlandı. MA, ABŞ) istehsalçının protokoluna uyğun olaraq təzə və yaşlı sidikdə azotun miqdarını müəyyən etmək üçün.
Pəhrizin ev sahibi axtaran və qan əmən qadınların sağ qalmasına təsirini qiymətləndirmək üçün ağcaqanadlar ayrı-ayrılıqda böyük Petri qablarına (diametri 12 sm və hündürlüyü 6 sm; Semadeni) qoyulmuşdur. karbamid, və iki nəzarət, 10% saxaroza və su. Hər bir pəhriz 5 ml-lik şprisə (Thermo Fisher Scientific, Göteborq, SE) daxil edilmiş diş tamponuna (DAB Dental AB, Upplands Väsby, SE) pipetlendi, piston çıxarıldı və hər gün pəhrizinizin üstünə qoyuldu. yuxarıda təsvir edildiyi kimi lab. Sağ qalan ağcaqanadlar gündə iki dəfə sayılırdı, ölü ağcaqanadlar isə sonuncu ağcaqanad ölənə qədər atılırdı (müalicə üçün n = 40). Müxtəlif pəhrizlərlə qidalanan ağcaqanadların sağ qalması statistik olaraq Kaplan-Meyer sağ qalma əyriləri və log-rank testlərindən istifadə etməklə təhlil edilmişdir.
Ön və arxa panelləri olmayan 5 mm qalınlığında şəffaf akril panellərdən (10 sm en x 10 sm uzunluq x 10 sm hündürlükdə) hazırlanmış, Attisano və başqalarına əsaslanan xüsusi ağcaqanad uçan dəyirman (Şəkil 3: yuxarı). bir-birindən 9 sm məsafədə olan bir cüt neodim maqnit. Eyni materialdan (6,5 sm L) hazırlanmış üfüqi boru şaquli borunu iki hissəyə bölərək bağlanmış qol və işığı kəsən siqnal kimi kiçik bir alüminium folqa parçası daşıyan qolu meydana gətirdi.
24 saat ac qalan dişilərə məhdudlaşdırılmadan əvvəl 30 dəqiqə ərzində yuxarıda göstərilən pəhriz verilmişdir. Daha sonra tam qidalanan dişi ağcaqanadlar ayrı-ayrılıqda 2-3 dəqiqə ərzində buz üzərində anesteziya edilib və arı mumu ilə həşərat sancaqlarına bərkidilib (Joel Svenssons Vaxfabrik AB, Munka Ljungby, Horizonts of the Mills. Hər uçuş üçün uçuşlar xüsusi hazırlanmış məlumat qeydiyyatçısı tərəfindən qeydə alınmış, sonra PC-Lab 2000™ proqram təminatı (v4.01; Velleman, Gavere, BE) vasitəsilə saxlanılmış və nümayiş etdirilmişdir. Uçuş dəyirmanı iqlimlə tənzimlənən otaqda yerləşdirilmişdir (12 saat:12 saat, işıq: qaranlıq, 25 ± 2 °C, %65 R).
Uçuş fəaliyyətinin modelini vizuallaşdırmaq üçün ümumi uçuş məsafəsi (m) və ardıcıl uçuş fəaliyyətlərinin ümumi sayı 24 saat ərzində bir saatda hesablandı. Bundan əlavə, ayrı-ayrı qadınlar tərəfindən uçan orta məsafələr müalicələr üzrə müqayisə edildi və birtərəfli ANOVA və Tukey'nin post hoc analizindən (JMP Pro, v14.0.0) istifadə edərək təhlil edildi. əlavə olaraq, raundların orta sayı 10 dəqiqəlik artımlarla hesablanır.
Pəhrizin An.arabiensis-in reproduktiv fəaliyyətinə təsirini qiymətləndirmək üçün altı dişi (4 dpe) qan toplandıqdan sonra birbaşa Buqdorm qəfəslərinə (30 sm × 30 sm × 30 sm) köçürüldü və sonra yuxarıda göstərildiyi kimi 48 saat eksperimental pəhriz təmin edildi. Daha sonra pəhrizlər çıxarıldı və kürü tökmə stəkanları (30 ml; Nolato Hertila 20-ci gün distillə edilmiş su ilə dolduruldu4) Hər 24 saatdan bir. Hər bir pəhriz rejimini 20-50 dəfə təkrarlayın. Hər bir təcrübi qəfəs üçün yumurtalar sayılır və qeydə alınır. Yumurtaların alt nümunələri Dialux-20 mikroskopu (DM1000 (DM1000) ilə təchiz olunmuş (DM1000) istifadə edərək fərdi yumurtaların uzunluğu və uzunluğu dəyişməsini (n ≥ 200) qiymətləndirmək üçün istifadə edilmişdir. 320 R2;Leica Microsystems Ltd., DE).Qalan yumurtalar iqlimə nəzarət edilən otaqda standart yetişdirmə şəraitində 24 saat saxlanıldı və yuxarıda təsvir olunduğu kimi, yaxınlarda ortaya çıxan 1-ci dövr sürfələrinin alt nümunəsi (pəhrizdə n ≥ 200) ölçüldü. Yumurtaların sayı və yumurtaların ölçüsü yumurta və yumurtaların ölçüsü ilə müalicədən sonrakı və Tu-key analizi ilə Tu-NOJ ilə müqayisə edildi. Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Təzə (1 saat postpappappap seçmə), 24 saat postpappappaming), 24 saat, 72 saat və 168 saat yaşlı sidik, Zebu mal-qara, arsi yarışlarından, sidik nümunələri, inəklər də 10 şəxsdən toplanmış nümunələr toplanmışdır. Esco, Frischhalteprodukte GmbH və Co, Minden, De) Vinil xlorid plastik zərb alətləri ilə 3 l poliamiddə, hər bir iribe sidik nümunəsindən olan (təzə), ya da 72 saat və 168 saat, yəni hər yaş qrupunun nümayəndəsi idi.
Baş boşluğunda uçucu maddələrin toplanması üçün, diafraqma vakuum nasosundan (KNF Neuberger, Freiburg, DE) istifadə edərək, aktivləşdirilmiş karbonla süzülmüş qaz axını (100 ml dəq-1) poliamid torbası vasitəsilə 2,5 saat ərzində adsorbsiya sütununa sirkulyasiya etmək üçün qapalı dövrəli sistemdən istifadə edilmişdir. şüşə yun tıxacları arasında 35 mq Porapak Q (50/80 mesh; Waters Associates, Milford, MA, ABŞ) olan flon borusu (5,5 sm x 3 mm id). İstifadədən əvvəl sütun 1 ml yenidən distillə edilmiş n-heksan (Merck, Darmstadt, DE) və rich% GC19 ilə yuyuldu. ).Adsorbsiya edilmiş uçucu maddələr 400 μl pentan ilə elüt edildi. Baş boşluq kolleksiyaları birləşdirildi və sonra sonrakı analiz üçün istifadə olunana qədər -20°C-də saxlanıldı.
Ev sahibi axtaran və qan yeyən An.Headspace uçucu ekstraktlarının təzə, 24 saat, 72 və 168 saatlıq sidikdən toplanmış davranış reaksiyaları düz şüşə borulu olfaktometrdən istifadə edərək Arabidopsis ağcaqanadlarından uçucu ekstraktlar üçün təhlil edilmişdir [18]. Evdə aparılan təcrübələr zamanı təcrübələr aparılmışdır13. .Ərəb [19].Şüşə boru olfaktometri (80 sm × 9,5 sm id) yuxarıdan 3 ± 1 lx qırmızı işıqla işıqlandırıldı. Kömür süzülmüş və nəmləndirilmiş hava axını (25 ± 2 °C, 65 ± 2% nisbi rütubət) bioanalizdən keçmişdir. laminar axın və vahid şleyf quruluşu. Olfaktometrin külək tərəfində 5 sm-lik sarğıdan asılmış diş tampon dispenseri (4 sm × 1 sm; L:D; DAB Dental AB), stimulator hər 5 dəqiqədən bir dəyişir. Təhlil üçün hər bir baş boşluğundan 10 μl, seyreltilmiş 10 μl qıcıqlandırıcı ekstrakt kimi istifadə edilmişdir. Təcrübə başlamazdan 2-3 saat əvvəl ev sahibi axtaran və ya qansoran ağcaqanadlar fərdi sərbəst buraxılan qəfəslərə yerləşdirildi. Buraxılış qəfəsi olfaktometrin küləkdən aşağı tərəfinə yerləşdirildi və ağcaqanadların 1 dəqiqə müddətinə uyğunlaşmasına icazə verildi, sonra qəfəsin kəpənək qapağı açıldı və ağcaqanadla təmasda olan mənbə ilə təmasda olan müalicəyə və ya nəzarətə keçdi5. buraxılış dəqiqələri. Hər bir baş boşluğunun uçucu ekstraktı və nəzarəti ən azı 30 dəfə təkrarlandı və hər hansı bir günün təsirindən qaçmaq üçün hər eksperimental gündə eyni sayda müalicə və nəzarət sınaqdan keçirildi. Ev sahibi və qanla qidalanan Ans.Arabic və headspace dəstlərinin cavablarını axtarın nominal logistik reqressiyadan istifadə edərək təhlil edildi. Inc.).
An'ın kürü tökmə reaksiyası. Təzə və qocalmış inək sidikindən alınan baş boşluq ekstraktları Bugdorm qəfəslərində (30 sm × 30 sm × 30 sm; MegaView Science) təhlil edilmişdir. 20 mL distillə edilmiş su ilə doldurulmuş plastik stəkanlar (30 ml; Nolato Hertila) kürü tökməni təmin etdi və stəkan 2 sm qarşı tərəfə yerləşdirildi. 1:10 nisbətində seyreltmə ilə hər baş boşluğu ekstraktı ilə 10 μl ilə tənzimləndi. Nəzarət fincanını tənzimləmək üçün bərabər miqdarda pentan istifadə edildi. Vəzifə təsirlərinə nəzarət etmək üçün hər təcrübə arasında müalicə və nəzarət fincanları dəyişdirildi. On qanla qidalanan dişi ZT 9-11-də eksperimental qəfəslərə buraxıldı və fincanlardakı yumurtalar daha sonra yumurta sayı 24 saat hesablandı (yumurta sayı 24 saat hesablandı). müalicə qabına qoyulmuş – nəzarət qabına qoyulmuş yumurtaların sayı)/(yumurtaların ümumi sayı).Hər müalicə 8 dəfə təkrar edilmişdir.
Dişi An.arabiensis-in qaz xromatoqrafik və elektron antena nümunəsinin aşkarlanması (GC-EAD) analizi əvvəllər təsvir edildiyi kimi həyata keçirilmişdir [20]. Qısaca olaraq, təzə baş boşluğunun uçucu ekstraktları HP-50 mm qalınlığında filmlə təchiz olunmuş Agilent Technologies 6890 GC (Santa Klara, CA, ABŞ) istifadə edərək ayrılmışdır (Santa Clara, CA, ABŞ). , Agilent Technologies).və qocalma sidiyi.Hidrogen 45 sm s-1 orta xətti axın sürəti ilə mobil faza kimi istifadə edilmişdir. Hər bir nümunə (2 μl) 225 °C giriş temperaturu ilə bölünməz rejimdə 30 saniyəyə enjekte edilmişdir. GC soba temperaturu 35 °C (3 dəqiqə saxlama) ilə 30 °C-də proqramlaşdırılmışdır. luent ayırıcı, 4 psi azot əlavə edildi və alov ionlaşdırma detektoru ilə EAD arasında Gerstel 3D/2 aşağı ölü həcmli çarpazda (Gerstel, Mülheim, DE) 1:1 nisbətində bölündü. EAD üçün GC tullantı kapilyarı Gerstel ODP-2 ötürücü borudan keçirildi, burada temperatur üstəgəl GC1 ovenlik şüşəyə, o, mm8, şüşəyə daxil olur. karbon süzülmüş, nəmləndirilmiş hava (1,5 l dəq−1) ilə qarışdırılmışdır. Antenna borunun çıxışından 0,5 sm məsafədə yerləşdirilmişdir. Hər bir fərdi ağcaqanad bir replikat təşkil etmişdir və ev sahibi axtaran ağcaqanadlar üçün hər yaşda olan sidik nümunələri üzərində ən azı üç təkrarlama aparılmışdır.
GC-EAD analizində antenal reaksiyaları üzə çıxarmaq üçün birləşdirilmiş GC və kütlə spektrometrindən (GC-MS; 6890 GC və 5975 MS; Agilent Technologies) istifadə edərək təzə və yaşlı mal-qara sidiyin baş boşluğu kolleksiyalarında bioaktiv birləşmələrin müəyyən edilməsi GC-EAD analizində elektron təsirli ionlaşma rejimində işləyən HP-7-fu ilə təchiz edilmişdir. Silisium kapilyar sütunu (60 m × 0,25 mm daxili diametr, 0,25 μm plyonka qalınlığı) heliumdan istifadə edərək mobil faza kimi orta xətti axın sürəti 35 sm s-1. GC-EAD üçün olduğu kimi eyni injektor parametrləri və soba temperaturu ilə 2 μl nümunə yeridildi (müəyyən edilmiş vaxt və onların kütləsi təhlili əsasında müəyyən edilmişdir). xüsusi kitabxana və NIST14 kitabxanası (Agilent). Müəyyən edilmiş birləşmələr orijinal standartların yeridilməsi ilə təsdiq edilmişdir (Əlavə Fayl 1: Cədvəl S2). Kəmiyyətin müəyyən edilməsi üçün heptil asetat (10 ng, 99,8% kimyəvi təmizlik, Aldrich) xarici standart kimi yeridildi.
Təzə və yaşlı sidikdə müəyyən edilmiş bioaktiv birləşmələrdən ibarət sintetik qoxu qarışığının effektivliyinin qiymətləndirilməsi, yuxarıdakı kimi eyni olfaktometr və protokoldan istifadə edərək, ev sahibi axtaran və qan əmən Ans.arabiensis-i cəlb edir. saat və 168 saat yaşlı sidik (Şəkil 5D-G; Əlavə Fayl 1: Cədvəl S2). Təhlil üçün, ümumi buraxılış sürəti təxminən 140-2400 ng h-1 arasında dəyişən tam sintetik qarışığın 10 μl 1:100 seyreltməsindən istifadə edin. Tam qarışığın tək birləşmələrinin hansı subtractive qarışıqları çıxarılır. Ev sahibi və qanla qidalanan Ans.Arabdan cavab axtarın. Sintetik və subtractive qarışıqlar nominal logistik reqressiyadan istifadə edərək təhlil edildi, ardınca tək nisbətlər üçün ikili müqayisələr aparıldı (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
İnək sidiyin malyariya ağcaqanadları üçün ev sahibi yaşayış yeri kimi xidmət edə biləcəyini qiymətləndirmək üçün yuxarıda göstərildiyi kimi təzə və yaşlı inək sidiyi toplanmış və su hörülmüş 3 litrlik vedrələrə (100 ml) qoyulmuş və yem tələlərinə qoyulmuşdur.(BG-HDT versiyası; BioGents, Regensburg, DE). Kənd icmasından 400 m məsafədə (Silay, Efiopiya, 5°53´24´´Ş., 37°29´24´´E) otlaqda bir-birindən 50 m məsafədə yerləşdirilən on tələ və heç bir mal-qara, daimi ev sahibliyi edən torpaqlarda və simultasiyalarda saxlanılırdı. beş tələ qızdırılmadan qaldı. Hər müalicə yeri gecə beş gecə ərzində fırlanır. Müxtəlif yaşlarda sidiklə yemlənmiş tələlərdə tutulan ağcaqanadların sayı beta binomial paylanması ilə logistik reqressiyadan istifadə etməklə müqayisə edilmişdir (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Efiopiya, Oromiya bölgəsi, Maki şəhəri yaxınlığındakı malyariya-endemik kənddə (8° 11′ 08″ N, 38° 81′ 70″ E; Şəkil 6A). Tədqiqat avqustun ortaları ilə sentyabrın ortaları arasında illik qapalı qalıq yağışdan əvvəl (20F uzunmüddətli yağışdan əvvəl) aparılmışdır. t) tədqiqat üçün kəndin kənarında yerləşənlər seçilmişdir (şək. 6A).Evləri seçmək üçün istifadə olunan meyarlar bunlar idi: evdə heyvanlara icazə verilmir, qapalı şəraitdə yemək bişirmək (odun və ya kömür çəkmək) icazə verilmir (ən azı sınaq dövründə) və ən çox iki sakini olan, insektisidlərdə yatan evlər.Müalicə olunan ağcaqanad torunun altında. Etik təsdiq Ümumdünya Tibb Assosiasiyasının Helsinki Bəyannaməsi ilə müəyyən edilmiş qaydalara uyğun olaraq, Əddis Əbəbə Universitetinin Təbiət Elmləri Fakültəsinin (CNS-IRB) İnstitusional Tədqiqat Etikasına Nəzarət Şurası (IRB/022/2016) tərəfindən verilmişdir. Evin hər bir rəhbərindən razılıq bütün ev təsərrüfatlarının rəhbərləri tərəfindən yardımla alınmışdır. və palata ('kebele') səviyyəsi. Eksperimental dizayn 2 × 2 Latın kvadrat dizaynını izlədi, burada sintetik qarışıqlar və nəzarətlər ilk gecə qoşalaşmış evlərə təyin edildi və növbəti eksperimental gecədə evlər arasında dəyişdirildi. Bu proses on dəfə təkrarlandı. günün eyni vaxtı.
Tərkibində altı bioaktiv birləşmədən ibarət sintetik qarışıq heptanda (97.0% həlledici GC dərəcəli, Sigma Aldrich) həll edildi və pambıq fitil dispenserindən [20] istifadə edərək 140 ng h-1-də buraxıldı. Fitil dispenseri 12 saat ərzində bütün birləşmələrin sabit nisbətdə sərbəst buraxılmasına imkan verdi. Növbəti sınaq üçün mərkəz dispenser kimi istifadə edildi. ase Nəzarət və Qarşısının Alınması (CDC) işıq tələsi (John W. Hock Company, Gainesville, FL, US; Şəkil 6A). Tələlər yerdən 0,8 – 1 m hündürlükdə, çarpayının ayağının yaxınlığında asılmışdı və bir könüllü təmizlənməmiş ağcaqanad torunun altında yatmış və saat 18:00-dan səhər saat 16:03-ə qədər cinsi əlaqə vəziyyətində işləyirdi. qidalanan, yarı hamilə və hamilə [21] daha sonra morfoloji olaraq A. gambiae sl kimi müəyyən edilmiş növləri müəyyən etmək üçün polimeraza zəncirvari reaksiya (PZR) analizindən istifadə edərək skrininq edildi [23]. Sahə tədqiqatında qoşalaşmış evlərin tələyə tutulması nominal logistika uyğun modeldən istifadə edərək təhlil edildi və qarışıqdan asılı olaraq təsir fiksasiya edildi. MP® 14.0.0. SAS İnstitutu Inc.).Burada, ehtimal nisbəti testindən χ2 və p-dəyərlərini bildiririk.
Təhlükəsiz olub-olmadığını qiymətləndirin.arabiensis sidiyi, əsas azot mənbəyini, sidik cövhərini, birbaşa qidalanma yolu ilə, 4 gün ərzində (dpe) ev sahibi axtaran və qanla qidalanan qadınların qidalanması sınaqları (Şəkil. 1A) ərzində qəbuldan sonra 48 saat ərzində əldə edə bilmişdir. p < 0,0001 və F(5,299) = 56,00, p < 0,0001, müvafiq olaraq; Şəkil 1B,C).Bundan əlavə, ev sahibi axtaran qadınlar 72 saatda sidikdə 168 saatdakı sidiklə müqayisədə (Şəkil 1B) daha az yeyirdilər. Bütün digər konsentrasiyalar və su ilə müqayisədə 2,69 mM, eyni zamanda 10% saxarozadan (F(10,813) = 15,72, p < 0,0001; Şəkil 1D) fərqləndirilə bilməz). 7) = 78,35, p < 0,0001; Şəkil 1).1E).Bundan başqa, iki fizioloji vəziyyət arasında müqayisə aparılarkən, flebotomlaşdırılmış dişilər ən aşağı konsentrasiyalarda sahib axtaran qadınlara nisbətən daha çox sidik cövhəri uddular və bu dişilər daha yüksək konsentrasiyalarda oxşar miqdarda karbamid uddular (F(1=0, p<5.8);Şəkil 1F, G).Tərkibində sidik cövhəri olan pəhrizdən qəbulun optimal dəyərlərə malik olduğu görünsə də (Şəkil 1D,E), hər iki fizioloji vəziyyətdə olan qadınlar sidik cövhəri konsentrasiyalarının bütün diapazonunda udulmuş karbamid miqdarını log-xətti şəkildə modullaşdıra bildilər (Şəkil 1F, G).).Oxşar olaraq, ağcaqanadlar udulan sidiyin miqdarını tənzimləyərək azotun udulmasına nəzarət edirlər, çünki sidikdə azotun miqdarı udulmuş miqdarda əks olunur (Şəkil 1B, C və B əlavələri).
Sidik və sidik cövhərinin ev sahibi axtaran və qan əmən ağcaqanadların sağ qalmasına təsirini qiymətləndirmək üçün dişilər dörd yaşda (təzə, 24 saat, 72 saat və çöküntüdən sonra 168 saat) sidik və bir sıra karbamid konsentrasiyası, həmçinin distillə edilmiş su və 10% saxaroza ilə qidalandılar (təhlil onun pəhriz üzərində əhəmiyyətli təsir göstərdiyini göstərdi2A). ev sahibi axtaran qadınlarda sağ qalma (sidik: χ2 = 108,5, df = 5, p < 0,0001; sidik cövhəri: χ2 = 122,8, df = 5, p < 0,0001; Şəkil 2B, C) və qanla qidalanan qadınlarda (sidik: d = 9, p<0.0; sidik cövhəri: χ2 = 137,9, df = 5, p < 0,0001; Şəkil 2D,E).Bütün təcrübələrdə sidik, sidik cövhəri və su ilə qidalanan dişilər saxaroza pəhrizi ilə qidalanan qadınlarla müqayisədə xeyli aşağı sağ qalma nisbətlərinə malik idilər (Şəkil 2B-E). -h köhnəlmiş sidik (p = 0.016) ən aşağı sağ qalma ehtimalı (Şəkil. 2B). Bundan əlavə, 135 mM karbamid ilə qidalanan ev sahibi axtaran qadınlar su nəzarətindən daha uzun müddət sağ qaldılar (p <0.04) (Şəkil ).2C).Su ilə müqayisədə təzə sidik və 24 saatlıq sidiklə qidalanan qadınlar daha uzun sağ qaldılar (müvafiq olaraq p = 0,001 və p = 0,012; Şəkil 2D), 72 saatlıq sidiklə qidalanan qadınlar isə daha uzun sağ qaldılar. 2D). 135 mM sidik cövhəri ilə qidalandıqda, qanla qidalanan qadınlar bütün digər karbamid və suyun konsentrasiyalarından daha uzun müddət sağ qaldılar (p <0,013; Şəkil 2E).
İnək sidiyi və sidik cövhəri ilə qidalanan ev sahibi və qansoran dişi Anopheles arabinis-in sağ qalması. Bioanalizdə (A), dişi ağcaqanadlara təzə və yaşlı inək sidiyi, müxtəlif konsentrasiyalarda karbamid, saxaroza (10%) və distillə edilmiş sudan (H2O) ibarət pəhriz verilmişdir. sidik (B, D) və sidik cövhəri (C, E) və nəzarət maddələri, saxaroza və su ilə qidalanan bütün dişilər ölənə qədər
24 saat ərzində uçuş dəyirmanı testində müəyyən edilmiş ümumi məsafə və dövrələrin sayı ümumi olaraq daha az uçuş fəaliyyəti göstərən ev sahibi axtaran və qan əmən ağcaqanadlar arasında fərqlənirdi (Şəkil 3). Təzə və yaşlı sidik və ya saxaroza və su ilə təmin edən ev sahibi axtaran ağcaqanadlar, təzə sidik ifraz edərkən fərqli uçuş nümunələri göstərdilər (şəkil 3). Sidiklə qidalanan 24 və 168 saat yaşlı ağcaqanadlar fərqli uçuş nümunələri nümayiş etdirdilər və əsasən sutkalıq idilər. Saxaroza və ya 72 saatlıq sidik təmin edən dişi ağcaqanadlar 24 saat ərzində aktivlik göstərdilər, su verən dişilər isə gecənin ortalarında daha aktiv idilər. 72 saatlıq sidiyi qəbul edən 24 saat ərzində aktivlikdə sabit bir azalma müşahidə edildi (Şəkil 3).
İnək sidiyi və sidik cövhəri ilə qidalanan ovçu qansoran dişi Anopheles arabinis-in uçuş performansı. Uçuş dəyirmanı testində təzə və yaşlı inək sidiyi, müxtəlif konsentrasiyalarda sidik cövhəri, saxaroza (10%) və distillə edilmiş su (H2O) ilə qidalanan dişi ağcaqanadlar üfüqi və sərbəst fırlanan qana bağlanıblar. ing (sağda) qadınlar, 24 saat ərzində hər pəhriz üçün ümumi məsafə və saatda uçuşların sayı qeydə alınıb (tünd: boz; açıq: ağ). Orta məsafə və döyüşlərin orta sayı sirkadiyalı fəaliyyət qrafikinin sağında göstərilir. Səhv çubuqları orta göstəricinin standart səhvini əks etdirir. Statistik təhlil mətnə ​​baxın.
Ümumilikdə, ev sahibi axtaran qadınların ümumi uçuş fəaliyyəti 24 saatlıq müddət ərzində uçuş məsafəsinə bənzər bir model izlədi. Orta uçuş məsafəsi qəbul edilən pəhrizdən əhəmiyyətli dərəcədə təsirləndi (F(5, 138) = 28.27, p < 0.0001) və ev sahibi axtaran dişilərin 72 saat daha uzun sidik qəbul etmələri (digər bütün pəhrizlərlə müqayisədə əhəmiyyətli dərəcədə 0.00s), və saxaroza ilə qidalanan ağcaqanadlar təzə (p = 0.022) və 24 saatlıq sidiklə (p = 0.022) qidalanan ağcaqanadlardan daha uzun uçdu. Sidik pəhrizi ilə təsvir edilən uçuş fəaliyyəti modelindən fərqli olaraq, sidik cövhəri ilə qidalanan ev sahibi axtaran dişilər qaranlıq dövrünün ikinci yarısında davamlı uçuş fəaliyyəti göstərdilər. ough fəaliyyət nümunələri oxşar idi, sidik cövhəri ilə qidalanan ev sahibi axtaran qadınlar udulmuş konsentrasiyadan (F(5, 138) = 1310.91, p <0.0001) asılı olaraq orta uçuş məsafəsini əhəmiyyətli dərəcədə artırdılar.
Qan əmən ağcaqanadların ümumi uçuş fəaliyyəti sabit idi və bütün pəhrizlərdə 24 saat ərzində davam etdi, qaranlıq dövrün ikinci yarısında su ilə qidalanan qadınlarda, eləcə də təzə və 24 saatlıq qidalanan qadınlarda (şəkil 3) sidik aktivliyi artdı. bir pəhriz etmədi (F(5, 138) = 1.36, p = 0.24) .digər sidik və nəzarət pəhrizi ilə (təzə, p = 0.0091; 72 saat, p = 0.0022; 168 saat, p = 0.001; saxaroza, p = 0.0017; saxaroza, p = 0.0017. H = 0.0017; d).
Sidik və sidik cövhəri ilə qidalanmanın reproduktiv parametrlərə təsiri yumurta qoyan bioanalizlərdə qiymətləndirilmişdir (Şəkil 4A) və hər dişinin qoyduğu yumurtaların sayına, yumurta ölçüsünə və yeni çıxmış birinci yaş sürfələrinə görə tədqiq edilmişdir. Yumurtaların sayı. 008; Şəkil 4B). 24 saatlıq sidiklə qidalanan qadınlar, digər sidik pəhrizləri ilə qidalanan qadınlardan əhəmiyyətli dərəcədə daha çox yumurta qoydular və saxaroza ilə qidalananlara bənzədilər (Şəkil 4B). -saatlıq sidik və saxaroza ilə qidalanan dişilər su ilə bəslənən qadınlara nisbətən əhəmiyyətli dərəcədə daha böyük yumurta qoyur, 168 saat sidiklə qidalanan dişilərin yumurtaları isə əhəmiyyətli dərəcədə kiçik idi (Şəkil 4C). Bundan əlavə, sidik pəhrizi sürfə ölçüsünə əhəmiyyətli dərəcədə təsir etdi (F(5, 187) = 7,86, p <000 yumurta ilə daha böyük), 24 və 72 saatlıq sidiklə qidalanan dişilər yumurta sürfələrindən qoyduqları yumurtalardan. Su ilə qidalanan və 168 saat sidiklə qidalanan dişilər (Şəkil 4D).
İnək sidiyi və sidik cövhəri ilə qidalanan dişi Anopheles arabininin reproduktiv performansı. Qanla bəslənən dişi ağcaqanadlar təzə və yaşlı inək sidiyi, müxtəlif konsentrasiyalarda karbamid, saxaroza (10%) və distillə edilmiş sudan (H2O) ibarət pəhrizlərlə qidalanırdılar. ) və sürfələrin ölçüsü (D, G) təmin edilən pəhrizdən əhəmiyyətli dərəcədə təsirlənmişdir (inək sidiyi: BD; sidik cövhəri: EG). Fərqli hərf adları ilə ölçülən hər bir parametr üçün vasitələr bir-birindən əhəmiyyətli dərəcədə fərqli idi (Tukey's post hoc analizindən istifadə edərək birtərəfli ANOVA; p < 0.05). Səhv çubuqları orta göstəricinin standart səhvini təmsil edir.
Sidiyin əsas azotlu komponenti olan sidik cövhəri, qanla qidalanan qadınlara pəhriz kimi verildikdə, bütün tədqiqatlarda reproduktiv parametrlərə əhəmiyyətli dərəcədə təsir göstərmişdir. Karbamid konsentrasiyasından (F(11, 360) = 4.69; p <11, 360) qanda qidalandıqdan sonra qadınların qoyduqları yumurtaların sayı, dişi karbamid konsentrasiyası ilə f < 0 µ0 , p < 110 mk. .34 mM daha çox yumurta qoyub (Şəkil 4E). 134 µM və ya daha çox karbamid konsentrasiyası ilə qidalanan dişilər su ilə qidalanan qadınlardan daha böyük yumurta qoyurlar (F(10, 4245) = 36,7; p < 0,0001; Şəkil 4F) və sürfə ölçüsü (ana F01 təsirinə baxmayaraq, oxşar konsentrasiyalarda F03) 9; p <0,0001) daha çox dəyişkən idi (Şəkil 4G).
Ev sahibi axtaran iribuynuzlu heyvanların sidiyi baş boşluğunun uçucu ekstraktları üçün ümumi cəlbedicilik. Şüşə boru olfaktometrində qiymətləndirilən arabiensis (Şəkil. 5A) sidiyin yaşından əhəmiyyətli dərəcədə təsirləndi (χ2 = 15,9, df = 4, p = 0,0032; Şəkil 5B sidik ifrazının əhəmiyyətli dərəcədə artmasına səbəb oldu. Analizdən sonrakı saatlarda sidik ifrazının daha yüksək səviyyəsini göstərdi). bütün digər müalicə ilə müqayisədə (72 saat: p = 0,0060, 168 saat: p = 0,012, pentan: p = 0,00070), təzə sidik qoxusundan başqa (p = 0,13; Şəkil 5B). Qan əmici ağcaqanadların ümumi cəlb edilməsinə baxmayaraq, sidik üçün əhəmiyyətli dərəcədə fərqli deyil, d = χ 8 (p = χ 8). 0.067; Şəkil 5C), bu dişilərin nəzarətlərlə müqayisədə 72 saat yaşlı sidiklə müqayisədə baş boşluğunun uçucu ekstraktları üçün əhəmiyyətli dərəcədə daha cəlbedici olduğu aşkar edilmişdir (p = 0.0066; Şəkil 5C).
Ev sahibi və qanla qidalanan Anopheles arabianus axtarışında təbii və sintetik inək sidiyin qoxularına davranış reaksiyaları. Şüşə boru olfaktometrinin sxemi (A). Təzə və yaşlı inək sidikindən ev sahibinə (B) və qan əmici (C) baş boşluğunun uçucu ekstraktlarının cəlb edilməsi. ), 24 saatlıq (E), 72 saatlıq (F) və 168 saatlıq (G) yaşlı inək sidiyi göstərilir. Elektron antenanın aşkarlanması (EAD) izləri qaz xromatoqrafından çıxarılan və alov ionlaşma detektoru (V miqyaslı) tərəfindən aşkar edilən bioaktiv birləşmələrə cavab olaraq gərginlik dəyişikliklərini göstərir. bioloji aktiv birləşmələrin xassələri və buraxılma sürətləri (µg h-1) göstərilir. Tək ulduz (*) ardıcıl aşağı amplituda cavabı göstərir. İkiqat ulduzlar (**) təkrar olunmayan cavabları göstərir. Ev sahibini (H) və qan əmici (I) tapın. müxtəlif hərf adları bir-birindən əhəmiyyətli dərəcədə fərqli idi (Tukey-nin post hoc analizindən istifadə edən birtərəfli ANOVA;p < 0.05).Səhv zolağı miqyasın standart xətasını əks etdirir
Dişi Ann.arabiensis, qan yeməkdən 72 saat və 120 saat sonra, yumurtlama zamanı pentan nəzarətləri ilə müqayisədə təzə və yaşlı inək sidikindən baş boşluğunun uçucu ekstraktlarına üstünlük verilməmişdir (χ2 = 3.07, p > 0.05; Əlavə fayl 1: Şəkil S1).
Qadın Ann.arabiensis üçün GC-EAD və GC-MS analizləri səkkiz, altı, üç və üç bioaktiv birləşməni müəyyən etdi (Şəkil 5D-G). Elektrofizioloji reaksiyalara səbəb olan birləşmələrin sayında fərqlər müşahidə olunsa da, bu birləşmələrin əksəriyyəti təzə və yaşlı sidikdən toplanmış uçucu ekstraktın hər bir hissəsində mövcud idi. həddən yuxarı olanlar sonrakı təhlillərə daxil edilmişdir.
Baş boşluğu kolleksiyasında bioaktiv birləşmələrin ümumi uçucu sərbəst buraxılma sürəti təzə sidikdə 29 mkq h-1-dən 168 saat yaşlı sidikdə 242 mkq h-1-ə yüksəldi, bu da əsasən p-krezol və m-formaldehid hesabına fenolun, həmçinin fenolun artmasıdır. d xromatoqrammada siqnal intensivliyinin (bolluğun) müşahidə azalması (Şəkil 5D)-G sol panel) və bu birləşmələrə fizioloji reaksiyalar (Şəkil 5D-G sağ panel) ilə əlaqəli artan sidik yaşı ilə.
Ümumilikdə, sintetik qarışıq təzə və yaşlı sidik boşluqlarının uçucu ekstraktlarında müəyyən edilmiş bioaktiv birləşmələrin oxşar təbii nisbətinə malik idi (Şəkil 5D–G) və ev sahibi axtarışında əhəmiyyətli cəlbedicilik yaratmadığı görünür (χ2 = 8.15, df = 4, p = 0.083; Şəkil 5H = χ2, ya da qan axması) 4, p = 0.30; Fig. 5I).Lakin, müalicələr arasında post hoc ikili müqayisələr göstərdi ki, ev sahibi axtaran ağcaqanadlar pentan nəzarətləri ilə müqayisədə 24 saat yaşlı sidiyin sintetik qarışığı üçün əhəmiyyətli dərəcədə cəlbedici idi (p = 0.0086; Şəkil 5H).
24 saat yaşlı sidiyin sintetik qarışıqlarında fərdi komponentlərin rolunu qiymətləndirmək üçün, ayrı-ayrı birləşmələrin çıxarıldığı Y-boru analizində tam qarışıqlara qarşı altı çıxarıcı qarışıq qiymətləndirildi. Ev sahibi axtaran ağcaqanadlar üçün, tam qarışıqdan fərdi birləşmələrin çıxarılması davranış reaksiyalarına əhəmiyyətli təsir göstərdi (χ2, d = 19 Şəkil: 02. Şəkil : 01). S2A), bütün subtractive qarışıqlar tam qarışıqdan Kiçikdən daha cəlbedici idi. Bunun əksinə olaraq, tam sintetik qarışıqdan fərdi birləşmələrin çıxarılması qansoran ağcaqanadların davranış reaksiyalarına təsir göstərmədi (χ2 = 11.38, df = 6, p = 0.077); əlavə olaraq, dekanal səviyyəsi ilə müqayisədə tam aşağı olan əlavə səviyyələr istisna olmaqla, əlavə 2. : Şəkil S2B).
Efiopiyada malyariya-endemik bir kənddə 24 saatlıq inək sidikinin sintetik qarışığının tarla şəraitində ağcaqanadları cəlb etməkdə effektivliyi on gecə ərzində qiymətləndirilmişdir (Şəkil 6A). Ümumilikdə 4,861 ağcaqanad tutuldu və müəyyən edildi, onlardan 45,7% -i gaarouss.A180% idi. ensis və 35,4%-i Culex spp.(Əlavə fayl 1: Cədvəl S1). Anopheles arabinis, PCR analizi ilə müəyyən edilmiş An.Qambiyalı növlər kompleksinin yeganə üzvüdür. Orta hesabla, bir gecədə 320 ağcaqanad tutulmuşdu, bu müddət ərzində sintetik qarışıq yemləri olan tələlər qarışıqsız tələlərdən daha çox ağcaqanad tutdu (χ6 = 01, 01, cütləşdirilmiş) p < 0,0001) .Sınaqın əvvəlində, ortasında və sonunda beş nəzarət gecəsinin hər birində yemsiz tələlər quruldu. Hər bir tələ cütündə oxşar sayda ağcaqanad tutuldu, bu da evlər arasında heç bir qərəz olmadığını göstərir (χ2(0, 1665) = 9 × 10-1665) tədqiq olunan dövr ərzində tədqiq olunan tələlər və Com >10c. ps, sintetik qarışığı olan tələlərdə tutulan ağcaqanadların sayı əhəmiyyətli dərəcədə artmışdır: ev sahibi axtaran (χ2(0, 2107) = 138,7, p < 0,0001), son qan qidalanma (χ2 (0, 650) = 32,2, p < 0,0001) və hamiləlik = 0,02, p < 0,0002 (0,02, p = 0,02) 3;Əlavə fayl 1: Cədvəl S1). Bu, həmçinin tutulan ağcaqanadların ümumi sayında əks olunur: ev sahibi axtaran > qansoran > hamilə > yarı hamilə > kişi.
24 saatlıq sintetik inək sidiyi qoxusu qarışığının effektivliyinin sahə qiymətləndirilməsi. Sahə sınaqları Efiopiyanın cənub-mərkəzində (xəritə), Maki şəhəri yaxınlığında (daxil edin) Xəstəliklərə Nəzarət Mərkəzlərinin (CDC) işıq tələsindən (sağda) istifadə edərək, qoşalaşmış evlərdə (CDS-ə uyğun kvadrat şəkilli, kvadrat şəkilli) aparılmışdır. və dişi Anopheles arabesques (B) tutmaq, lakin Anopheles farroes (C) deyil, fərqli bir şəkildə, fizioloji vəziyyətdən asılı bir təsir. Bundan əlavə, bu tələlər ev sahibi Culex ağcaqanadlarının sayını əhəmiyyətli dərəcədə artırdı.(D) Nəzarətlə müqayisədə. 10), sağdakı çubuqlar isə nəzarət tələlərinin cütlərində orta seçim indeksini təmsil edir (açıq; N = 5).).Ulduzlar statistik əhəmiyyət səviyyələrini göstərir (*p = 0,01 və ***p < 0,0001)
Üç növ sintetik qarışıqları olan tələlərdə fərqli şəkildə tutuldu. Ev sahibi (χ2(1, 1345) = 71.7, p < 0.0001), qanla qidalanma (χ2(1, 517) = 16.7, p < 0.0001) və hamiləlik (χ2(1, 1, s.13.)) axtarılır. biensis sintetik qarışığı buraxan tələyə düşmüşdü (Şəkil 6B), An miqdarı isə fərqlənməmişdir. Fərqli fizioloji vəziyyətlərdə olan Pharoensis aşkar edilmişdir (Şəkil 6C). Culex üçün yalnız sintetik qarışıqla yemlənmiş tələlərdə ev sahibi axtaran ağcaqanadların sayında əhəmiyyətli artım aşkar edilmişdir (χ29 =10, χ2.0) 04; Şəkil 6D), nəzarət tələləri ilə müqayisədə.
Malyariya ağcaqanadlarının inək sidiyi qoxusundan ev sahibi yaşayış yeri işarəsi kimi istifadə edib-etmədiyini qiymətləndirmək üçün Efiopiyada çoxalma sahələri və kənd icmaları arasında potensial ev sahiblərindən kənarda yerləşən ana yem tələlərindən istifadə edilmişdir. Ev sahibi siqnalları olmadıqda, istilik və inək sidiyin qoxusu olsun və ya olmasın, heç bir ağcaqanad tutulmamışdır (Əlavə Şəkil 1: sidiyin yüksək temperaturu oH). , dişi malyariya ağcaqanadları, sidik yaşından asılı olmayaraq, az sayda olsa da, cəlb edilmiş və tutulmuşdur (χ2(5, 25) = 2.29, p = 0.13; Əlavə fayl 1: Şəkil S3 ).Bunun əksinə olaraq, su nəzarətçiləri malyariya ağcaqanadlarını yüksək temperaturda tutmadı (Əlavə Fayl: Şəkil S3 1).
Malyariya ağcaqanadları digər həşəratlar kimi həyat tarixi xüsusiyyətlərini artırmaq üçün inək sidiyi (yəni, gölməçələr) ilə kompensasiyalı qidalanma yolu ilə azot tərkibli birləşmələri əldə edir və paylayır [2, 4, 24, 25, 26]. İnək sidiyi, malyariya ilə sıx əlaqədə olan və vektorlarla sıx əlaqəli istirahət yerləri üçün asanlıqla əldə edilə bilən bərpa olunan resursdur. Dişi ağcaqanadlar bu resursu qoxuya görə tapır və sidikdə azotlu birləşmələrin, o cümlədən sidikdə əsas azot komponenti olan karbamidin udulmasını tənzimləyə bilirlər [15, 16]. Dişi ağcaqanadların fizioloji vəziyyətindən asılı olaraq, bütün qida maddələri dişi ağcaqanadların sidikdə və uçuşan aktivliyini artırır. ilk gonadotropik dövr ərzində qanla qidalanan fərdlərin yaşaması və reproduktiv xüsusiyyətləri kimi. Buna görə də, sidik qarışığı qidalanmayan böyüklər kimi qapalı olan malyariya daşıyıcıları üçün mühüm qidalanma rolunu oynayır [8], çünki dişi ağcaqanadlara mühüm azotlu birləşmələr əldə etmək qabiliyyətini təmin edir, çünki onların aşağı epidemioloji nəticələrini gözləyirik. cy, fəaliyyət və reproduktiv məhsul, bunların hamısı vektor tutumuna təsir edir. Bundan əlavə, bu davranış gələcək vektor idarəetmə proqramlarının hədəfi ola bilər.