«Ніколі не сумнявайцеся, што невялікая група ўдумлівых, адданых сваёй справе грамадзян можа змяніць свет.Па сутнасці, ён адзіны там».
Місія Cureus - змяніць даўнюю мадэль медыцынскіх публікацый, у якой прадстаўленне даследаванняў можа быць дарагім, складаным і працаёмкім.
Багатая трамбацытамі плазма/prp, рэгенерацыя тканін, актывацыя трамбацытаў, праліфератыўная тэрапія глюкозай, трамбацыты, праліфератыўная тэрапія
Цытуйце гэты артыкул як: Harrison TE, Bowler J, Reeves K, et al.(17 мая 2022 г.) Уплыў глюкозы на колькасць і аб'ём трамбацытаў: наступствы для рэгенератыўнай медыцыны.Лячэнне 14 (5): e25081.doi:10.7759/cureus.25081
Багатая трамбацытамі плазма (PRP) і гіпертанічныя растворы глюкозы звычайна выкарыстоўваюцца для ін'екцый у рэгенератыўнай медыцыне, часам разам.Пра ўплыў гіпертанічнай глюкозы на лізіс і актывацыю трамбацытаў раней не паведамлялася.Мы пратэставалі ўплыў павышаных канцэнтрацый глюкозы на колькасць трамбацытаў і эрытрацытаў, а таксама аб'ём клетак у PRP і суцэльнай крыві (WB).Хуткае частковае зніжэнне колькасці трамбацытаў адбылося пры ўжыванні ўсіх сумесяў глюкозы, змешаных з PRP або суцэльнай крывёй, што адпавядае частковаму лізісу. Пасля першай хвіліны колькасць трамбацытаў заставалася стабільнай, што сведчыць аб хуткай акамадацыі рэшткавых трамбацытаў да экстрэмальнага (>2000 мОсм) гіпертонусу. Пасля першай хвіліны колькасць трамбацытаў заставалася стабільнай, што сведчыць аб хуткай акамадацыі рэшткавых трамбацытаў да экстрэмальнага (>2000 мОсм) гіпертонусу. Пасля першай хвіліны колькасць трамбацытаў заставалася стабільным, што сведчыць аб хуткай акамадацыі канчаткова трамбацытаў да экстрэмальнага (>2000 мОсм) гіпертануса. Пасля першай хвіліны колькасць трамбацытаў заставалася стабільным, што сведчыць аб хуткай акамадацыі рэшткавых трамбацытаў да экстрэмальнага (>2000 мОсм) гіпертонусу.第一分钟后，血小板计数保持稳定，表明残余血小板迅速适应极端（> 2000 мОсм）高渗状态。2000 мОсм）高渗状态。 Пасля першай хвіліны колькасць трамбацытаў заставалася стабільным, што сведчыць аб хуткай адаптацыі канчаткова трамбацытаў да экстрэмальнага (>2000 мОсм) гиперосмолярному стану. Пасля першай хвіліны колькасць трамбацытаў заставалася стабільным, што сведчыць аб хуткай адаптацыі рэшткавых трамбацытаў да экстрэмальнага (>2000 мОсм) гиперосмолярному стану.Канцэнтрацыя глюкозы 25% і вышэй прывяла да значнага павелічэння сярэдняга аб'ёму трамбацытаў (MPV), што паказвае на раннюю стадыю актывацыі трамбацытаў.Неабходныя дадатковыя даследаванні, каб вызначыць, ці адбываецца лізіс або актывацыя трамбацытаў і ці можа ін'екцыя гіпертанічнай глюкозы асобна або ў спалучэнні з PRP даць дадатковую клінічную карысць.
У 1950-я гады амерыканскі хірург Джордж Хакет выявіў, што ён можа назаўсёды палегчыць боль у суставах і спіне ў многіх пацыентаў, уводзячы праліфератыўны раствор у сухажыллі і звязкі.Яго эксперыменты на трусах паказалі, што лячэнне, якое ён назваў праліфератыўнай тэрапіяй, выклікала павелічэнне і ўмацаванне сухажылляў.Гісталагічныя даследаванні пацвердзілі, што падчас гэтага працэсу выпрацоўваецца новы калаген [1].
На працягу першых некалькіх дзесяцігоддзяў было апрабавана мноства розных рашэнняў для распаўсюджвання.Да 1990-х гадоў большасць практыкуючых лекараў лічылі высокія канцэнтрацыі глюкозы самым бяспечным і эфектыўным метадам.Аднак механізм дзеяння застаецца незразумелым.
Нешматлікія клінічныя даследаванні былі праведзены ў 20 стагоддзі пасля працы Хакетта.Аднак у 2000-х гадах аднавілася цікавасць, і было завершана некалькі паспяховых клінічных выпрабаванняў праліфератыўнай тэрапіі для лячэння болі ў паясніцы [2], артрозу каленнага сустава [3] і бакавога эпикондилита [4].
Рэгенерацыя тканін патрабуе ўдзелу ствалавых клетак.Такім чынам, высокія канцэнтрацыі глюкозы павінны нейкім чынам выклікаць міграцыю, рэплікацыю і дыферэнцыявання ствалавых клетак.Мы мяркуем, што трамбацыты могуць дзейнічаць як мессенджеры і што высокія канцэнтрацыі глюкозы могуць прымусіць трамбацыты вызваляць цітокіны і фактары росту, тым самым спрыяючы рэгенератыўным працэсам, асабліва міграцыі ствалавых клетак у вобласці з высокай канцэнтрацыяй глюкозы.
Актывацыя трамбацытаў заўсёды папярэднічае павышэнню ўнутрыклеткавага кальцыя [5].Лю і інш.у 2008 г. паказалі, што высокія ўзроўні глюкозы павялічваюць актыўнасць каналаў транзістарнага рэцэптарнага патэнцыялу кананічнага тыпу 6 (TRPC6) у плазматычнай мембране, што прыводзіць да прытоку іёнаў кальцыя ў трамбацыты [6].Іншае даследаванне паказала, што ўздзеянне іёнаў кальцыя на краёвую зону мікратрубачкі выклікае паслабленне, пашырэнне і дэфармацыю маргінальнай зоны, што, у сваю чаргу, выклікае змену формы з дыскавай на сферычную, што прыводзіць да сярэдняга аб'ёму трамбацытаў (MPV) [7].
Наша гіпотэза ў гэтым даследаванні заключаецца ў тым, што ўздзеянне высокіх канцэнтрацый глюкозы на трамбацыты ўплывае на краявую зону мікратрубачак і ўнутрыклеткавае асяроддзе, што прыводзіць да павелічэння MPV.
Усе ўдзельнікі падпісалі форму інфармаванай згоды пасля тлумачэння дэталяў даследавання і перад атрыманнем узораў.У гэтым даследаванні выкарыстоўваліся толькі ўзоры PRP з гематокрітом больш за 2%, каб можна было ўключыць для параўнання колькасць эрытрацытаў (эрытрацытаў) і сярэдні карпускулярны аб'ём эрытрацытаў (MCV).
Даследаванне праводзілася ў чатыры фазы, першая фаза была PRP, а астатнія фазы - суцэльная кроў (табліца 1).Як было апісана раней [8], усе адносныя цэнтрабежныя сілы (RCF, g-сіла) былі разлічаны ад сярэдняй кропкі (Rmid, у см) слупка крыві ў цэнтрабежным шпрыцы.Мы вырашылі выкарыстаць MPV як маркер сенсібілізацыі трамбацытаў і колькасць трамбацытаў у якасці індыкатара патэнцыйнага лізісу трамбацытаў, абодва з якіх можна лёгка вымераць на стандартных гематалагічных аналізатараў.
На першым этапе 47 добраахвотнікаў здавалі ўзоры крыві — адну прабірку з этилендиаминтетрауксусной кіслатой (ЭДТА) і адзін узор суцэльнай крыві PRP (антыкаагулянт цытрат натрыю (NaCl, 3%)) (табліца 1).Неадкладна змесціце качалку ў трубку.Поўны аналіз крыві (CBC) быў выкананы на узорах ЭДТА ў трох паўторах, і ўзоры NaCl былі прааналізаваны ў трох паўторах для аналізу CBC, а затым PRP быў падрыхтаваны рознымі метадамі, апісанымі вышэй [8].Усе ўзоры PRP былі падрыхтаваны цэнтрыфугаваннем пры 900-1000 g.Змяшайце кожны ўзор PRP на віхравым міксеры на працягу 5-10 секунд, затым падзяліце пяць аліквотаў па 0,5 мл у прабіркі.
Каб ацаніць уплыў уздзеяння трамбацытаў на павышаныя канцэнтрацыі глюкозы, роўныя колькасці (0,5 мл) 0%, 5%, 12,5%, 25% і 50% глюкозы ў вадзе змешвалі з узорамі трамбацытаў для атрымання 0%, 2,5% 6,25%, 12,5% і 25% канцэнтрацый сумесі глюкозы і змешвалі прабіркі на шейкере для прабірак на працягу 15 хвілін.TAC кожнай сумесі аналізавалі ў трох паўторах праз 15 хвілін.Колькасць трамбацытаў (PLT), колькасць эрытрацытаў, MCV і MPV былі асераднёныя для кожнай прабіркі, а сярэдняя колькасць трамбацытаў, колькасць эрытрацытаў, MCV і MPV былі разлічаны для ўсіх узораў PRP.
Пасля завяршэння першага этапу збору даных мы заўважылі значнае павелічэнне аб'ёму трамбацытаў у трамбацытах PRP пасля дадання D50W.Трамбацыты PRP неабавязкова ўяўляюць сабой усе трамбацыты ў крыві, а асяроддзе PRP адрозніваецца ад асяроддзя WB.Такім чынам, мы вырашылі правесці другую фазу выпрабаванняў эфекту дадання D50W да суцэльнай крыві.
Для другога раунда мы абралі памер выбаркі 30 на аснове вынікаў першай серыі, як апісана ў раздзеле "Аналіз".У гэтай серыі 20 добраахвотнікаў здавалі ўзоры крыві (табл. 1).Суцэльную кроў (1,8 мл) набіралі ў шпрыц аб'ёмам 3 мл і антикоагулировали 0,2 мл 40% NaCl.Шпрыц з суцэльнай крывёю змешвалі на працягу пяці секунд віхравым міксерам і CBC аналізавалі ў трох паўторах.Пасля аналізу антыкаагулянтную кроў дадаюць да 2 мл 50% глюкозы ў шпрыцы аб'ёмам 5 мл (канчатковая канцэнтрацыя глюкозы была прыблізна 25% (D25) і змяшчаюць у прабірку для ўстрэсвання на 30 хвілін. Праз 30 хвілін D25/CBC ў шпрыцах WB аналізуюць у трох паўторах. Колькасць трамбацытаў, колькасць эрытрацытаў, MCV і MPV на шпрыц усярэдніяюць і сярэдняе PLT , колькасць эрытрацытаў, MCV і MPV былі разлічаны для кожнага ўзору да і пасля дадання глюкозы.
Паколькі трамбацыты ў суцэльнай крыві звычайна падвяргаюцца ўздзеянню гіпертанічнай глюкозы падчас праліфератыўнай тэрапіі глюкозай з-за малаінвазіўнай ін'екцыі, і гэта не звычайная камбінацыя PRP з гіпертанічнай глюкозай непасрэдна перад ін'екцыяй, мы вырашылі вывучыць гіпертанічную глюкозу ў спалучэнні з ВБ у раздзеле 1. Крок трэці і чацвёрты.На кожным этапе 20 добраахвотнікаў здавалі па 7-8 мл АЦД-А (кіслата, якая змяшчае тринатрийцитрат (22,0 г / л), цытрынавую кіслату (8,0 г / л) і глюкозу (24,5 г / л), раствор декстрозы цытрат) для антыкаагулянтаў крыві (табл. 1).Толькі сумесі глюкозы больш за 12,5% выкарыстоўваліся для вызначэння парогавага адсотка, звязанага з павелічэннем MPV.На трэцім этапе ў прабірку змяшчаюць 1 мл крыві.Затым змешвайце кроў на віхравым міксеры на працягу 10 секунд, дадаючы ў прабірку 1 мл 30% глюкозы, 40% глюкозы або 50% глюкозы, каб атрымаць канчатковую канцэнтрацыю глюкозы адпаведна 15%, 20% і 25%.Узоры крыві з глюкозай аналізавалі на CBC адразу пасля змешвання і паўтаралі кожныя дзве хвіліны на працягу 30 хвілін.
Падчас пачатковага змешвання даданне гіпертанічнай глюкозы 1:1 і WB або PRP падвяргае трамбацыты ўздзеянню канцэнтрацыі вышэй за 25% на працягу некалькіх секунд.На чацвёртым этапе, каб ацаніць эфект гіпертанічнай глюкозы з мінімальнымі пачатковымі пікавымі канцэнтрацыямі і праверыць верхнюю мяжу эфекту глюкозы, мы дадалі толькі невялікую колькасць крыві ў D25W або D50W.Змесціце 1 мл D25W або D50W у прабірку і дадайце 0,2 мл WB, узбіваючы ўзор на вортексе на працягу 10 секунд.У гэтых выпадках кроў падвяргалася ўздзеянню глюкозы ў канцэнтрацыі прыблізна на 20% вышэй канчатковай канцэнтрацыі, а не на 50% вышэй канчатковай канцэнтрацыі, як у фазе 3, у выніку чаго канчатковая канцэнтрацыя глюкозы складала 20,8% і 41,6%.Змешаныя ўзоры аналізавалі ў той жа прамежак часу, што і на этапе 3.
На першым этапе кожнай серыі развядзення глюкозы было ўзята 30 узораў, паколькі гэта быў адпаведны памер выбаркі для пілотнага даследавання [9].У канцы кожнай фазы (уключаючы першую) ацаніце адэкватнасць памеру выбаркі, выкарыстоўваючы формулу, якая выкарыстоўваецца для вызначэння памеру выбаркі, неабходнага для ацэнкі сярэдняга значэння бесперапыннай зменнай выніку ў адной сукупнасці.Формула n = Z2 x SD2 /E2.У гэтым раўнанні Z - Z-паказчык, SD - стандартнае адхіленне, а E - патрэбная памылка [10].Наш альфа роўны 0,05, што адпавядае значэнню Z роўнаму 1,96, і мы чакаем, што памылка роўная 5 (у працэнтах).Такім чынам, мы вырашаем для n = (1,962 x SD2)/52.Вынікі паказалі, што памер выбаркі, неабходны для кожнага этапу, быў меншы за фактычную сабраную колькасць.
Падчас перыядаў 1, 3 і 4 з выкарыстаннем больш чым адной канцэнтрацыі глюкозы эфект розных канцэнтрацый глюкозы аналізаваўся шляхам параўнання дробавых змяненняў паміж часам 0 і кожным наступным часам (фаза 1 праз 15 хвілін, перыяд 3 праз 15 хвілін).і чатыры праз 15 секунд, потым кожныя дзве хвіліны.) Хуткасці змяненняў для кожнага перыяду часу параўноўвалі з дапамогай U-тэсту Мана-Уітні, таму што дадзеныя не адпавядалі нармальнаму размеркаванню, вызначанаму тэстам нармальнасці Шапіра-Уілка.Паколькі на першым, трэцім і чацвёртым этапах (усяго пяць) быў праведзены аналіз 1-да-1 некалькіх груп (пяці), была праведзена карэкцыя Банфероні, каб наладзіць патрэбнае значэнне альфа да ≤0,01, але не да ≤0,05.
Зніжэнне колькасці трамбацытаў пры ўсіх канцэнтрацыях гіпертанічнай декстрозы і павышэнне MPV у трамбацытах PRP пры канцэнтрацыі декстрозы >12,5%: колькасць трамбацытаў PRP вырасла ад канцэнтрацыі ў адзін да пяці разоў у параўнанні з зыходнай канцэнтрацыяй суцэльнай крыві, вар'іруючыся ў залежнасці ад метаду (не паказана). Зніжэнне колькасці трамбацытаў пры ўсіх канцэнтрацыях гіпертанічнай декстрозы і павышэнне MPV у трамбацытах PRP пры канцэнтрацыі декстрозы >12,5 %: колькасць трамбацытаў PRP вырасла ад канцэнтрацыі ў адзін да пяці разоў у параўнанні з зыходнай канцэнтрацыяй суцэльнай крыві, вар'іруючыся ў залежнасці ад метаду (не паказана). Памяншэнне колькасці трамбацытаў пры ўсіх канцэнтрацыях гіпертанічнай дэкстрозы і павышэнне MPV ў трамбацытах PRP пры канцэнтрацыі дэкстрозы > 12,5%: колькасць трамбацытаў PRP павялічылася ў 1-5 раз у параўнанні з зыходнай цельнай крывёю, у залежнасці ад метаду (не паказана). Зніжэнне колькасці трамбацытаў пры ўсіх гіпертанічных канцэнтрацыях декстрозы і павелічэнне MPV у трамбацытах PRP пры канцэнтрацыі декстрозы> 12,5%: колькасць трамбацытаў PRP павялічылася ў 1-5 разоў у параўнанні з зыходным узроўнем суцэльнай крыві, у залежнасці ад метаду (не паказана). ).在> 12,5% 的葡萄糖浓度下，所有浓度的高渗葡萄糖降低血小板计数，PRP 血小板中MPV 增加：与基线全血相比，PRP 血小板计数从浓度的1 倍上升到5 倍，因方法而异（未描述）。 Пры канцэнтрацыі глюкозы >12,5% высокая канцэнтрацыя глюкозы зніжае колькасць крыві, PRP у крыві MPV павялічваецца: у параўнанні з 与基线全血 колькасць PRP у крыві павялічваецца ад 1 да 5 разоў у параўнанні з канцэнтрацыяй (не апісана). Пры канцэнтрацыі глюкозы >12,5% усе канцэнтрацыі гіпертанічнай глюкозы зніжалі колькасць трамбацытаў, а MPV павялічвалі ў трамбацытах PRP: колькасць трамбацытаў PRP павялічвалася ад 1- да 5-кратных канцэнтрацый у параўнанні з зыходнымі канцэнтрацыямі цэльнай крыві, у залежнасці ад метаду (неапісана ). Пры канцэнтрацыі глюкозы >12,5% усе канцэнтрацыі глюкозы пры гіпертаніі зніжаюць колькасць трамбацытаў і павялічваюць MPV у трамбацытах PRP: колькасць трамбацытаў PRP павялічваецца ў 1-5 разоў у параўнанні з зыходнымі канцэнтрацыямі ў суцэльнай крыві, у залежнасці ад метаду (як апісана).На малюнку 1 паказана, што колькасць трамбацытаў знізілася амаль на 75% пасля развядзення ў вадзе і на 20-30% пасля 15 хвілін развядзення рознымі канцэнтрацыямі глюкозы ў параўнанні з зыходным PRP і развядзеннем 1:1 з папраўкай на аб'ём (1-k1 з карэкцыяй аб'ёму).k -1 развядзенне).1 развядзенне).
Колькасць клетак у кожным развядзенні выяўляецца ў долях ад зыходнага ліку да развядзення.
MPV мінімальна зніжаўся падчас вытворчасці PRP, без далейшага змены канцэнтрацыі развядзення да 12,5% у вадзе або глюкозе (уключаючы 25% сумесі глюкозы PRP) і павялічваўся больш чым на 20% пасля развядзення ў 50% растворы глюкозы (мал. .2).).Наадварот, эрытрацыты не паказалі істотных змяненняў у аб'ёме пры любым развядзенні, акрамя H2O.
Сярэдні аб'ём клетак у кожным развядзенні выяўляецца ў працэнтах ад зыходнага аб'ёму да развядзення.
Аналагічнае, але менш выяўленае зніжэнне колькасці трамбацытаў і павышэнне CVR назіраліся ў РМЖ, якія падвяргаліся ўздзеянню 50% глюкозы (у фармулёўцы з 25% глюкозы).У табліцы 2 параўноўваецца колькасць і аб'ём клетак у суцэльнай крыві, разведзенай у 50% растворы декстрозы, з дадзенымі фазы 1 PRP, разведзенымі ў 50% растворы декстрозы.Змены колькасці эрытрацытаў і MCV эрытрацытаў не былі відавочнымі і не былі ў цэнтры нашай увагі.
SD = стандартнае адхіленне, MD = сярэдняя розніца паміж групамі, SE = стандартнае адхіленне сярэдняй розніцы, RBC = эрытрацыты, PLT = трамбацыты, PRP = узбагачаная трамбацытамі плазма, WB = суцэльная кроў
Пасля дадання D50W да WB працэнт страты трамбацытаў з папраўкай на развядзенне склаў 7,7% (310±73 супраць 286±96) у параўнанні з 17,8% для развядзення PRP у D50W (664±348 супраць 544±277).MPV WB павялічыўся на 16,8% (з 10,1 ± 0,5 да 11,8 ± 0,6), а MPV PRP павялічыўся на 26% (9,2 ± 0,8 супраць 11,6 ± 0,7). Нягледзячы на ​​​​тое, што сярэднія адрозненні як у зніжэнні колькасці трамбацытаў, так і ў павелічэнні MPV былі значна большымі пры PRP, змены ў зніжэнні колькасці трамбацытаў у WB былі амаль значнымі (ад 310 ± 73 да 286 ± 96 (-7,7%); p = 0,06), а павелічэнне MPV было значным (ад 10,1 ± 0,5 да 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001). Нягледзячы на ​​​​тое, што сярэднія адрозненні як у зніжэнні колькасці трамбацытаў, так і ў павелічэнні MPV былі значна большымі пры PRP, змены ў зніжэнні колькасці трамбацытаў у WB былі амаль значнымі (ад 310 ± 73 да 286 ± 96 (-7,7%); p = 0,06), а павелічэнне MPV было значным (ад 10,1 ± 0,5 да 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001).Нягледзячы на ​​​​тое, што сярэднія адрозненні як у зніжэнні колькасці трамбацытаў, так і ў павелічэнні CVR былі значна большымі пры PRP, змены ў зніжэнні колькасці трамбацытаў у WB былі амаль значнымі (ад 310 ± 73 да 286 ± 96 (-7,7%); p = 0,06).павелічэнне MPV было значным (ад 10,1 ± 0,5 да 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001). павелічэнне MPV было значным (з 10,1 ± 0,5 да 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001).尽管PRP 在血小板计数减少和MPV 增加方面的平均差异显着更大，但WB 内血小板计数减少的变化几乎是显着的（310 ± 73 至286 ± 96 (-7,7%)；p = 0,06）和MPV 的增加是显着的（10,1 ± 0,5 到11,8 ± 0,6 (+16,8) p <. 001).尽管 PRP 在 血小板 计数 和 和 增加 方面 的 平均 差异 显着 大 ， 但 但 内血小板 计数 减少的 几乎 是 显着 的 （（（310 ± 73 至 286 ± 96 (-7,7%) ； p = 0,06）和MPV 的增加是显着的（10,1 ± 0,5 到11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001).Змены ў зніжэнні колькасці трамбацытаў у WB былі амаль значнымі (ад 310 ± 73 да 286 ± 96 (-7,7%); p = 0,06), хоць PRP меў значна большыя сярэднія адрозненні ў зніжэнні колькасці трамбацытаў і павелічэнні MPV.і павелічэнне MPV было значным.(ад 10,1 ± 0,5 да 11,8 ± 0,6 (+16,8) р < 0,001). (ад 10,1 ± 0,5 да 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001).
Канчатковая канцэнтрацыя 20% глюкозы патрабавалася, каб убачыць істотныя змены MPV, але змяненне MPV было больш выяўленым пры канчатковай канцэнтрацыі 25%.Страта трамбацытаў стабілізавалася пасля першапачатковага зніжэння.Мы адзначылі першапачатковае рэзкае зніжэнне CVR, аднак CVR хутка аднаўляўся пры 25% канчатковай канцэнтрацыі глюкозы, што было значна вышэй, чым узровень CVR, назіраных пры канчатковых канцэнтрацыях глюкозы 20% і 15% (мал. 3 і злева ад табліцы 3; зацененыя рамкі).пакажыце р-значэнні ≤ альфа з карэкцыяй Банфероні 0,01).Адзначалася таксама першапачатковае рэзкае падзенне колькасці PLT, якое назіралася ў пачатковай фазе 0-15 с, а затым заставалася стабільным (ад 15 с да 30 мін; злева ад табліцы 4).
Даданне розных канцэнтрацый глюкозы да суцэльнай крыві прывяло да першапачатковага хуткага зніжэння MPV з наступным аднаўленнем у залежнасці ад канцэнтрацыі больш чым на 20%.Легенда паказвае канцэнтрацыю глюкозы пасля развядзення.D15, D20 і D25 праводзілі ў развядзенні 1:1.D21 і D41 праводзілі ў развядзенні 1:5.
У табліцы 4 паказана змяненне колькасці трамбацытаў пры развядзенні ў гіпертанічнай глюкозы.Мы назіралі дозозависимую залежнасць паміж неадкладным падзеннем лікаў PLT пры развядзенні 1:1 і пры развядзенні 1:5.Параўноўваючы развядзенне 1:1 у адной групе з развядзеннем 1:5, група 1:1 мела неадкладнае зніжэнне колькасці трамбацытаў менш, чым група 1:5, 66±48000 (23%) супраць 99±69000 (37%)., р = 0,014) у групе 1:5.Пасля першапачатковага падзення ў першай кропцы вымярэння колькасць трамбацытаў у працэнтах ад глюкозы стабілізавалася (мал. 4).
Пры даданні суцэльнай крыві да глюкозы ў прапорцыі 1:1 колькасць трамбацытаў зніжаецца прыкладна на 25%.Аднак пры даданні суцэльнай крыві ў суадносінах 1:5 зніжэнне было значна большым - каля 50%.
41% глюкозы павялічвала MPV хутчэй і больш рэзка, чым 25% ці 21%.Вынікі MPV паказаны на малюнку 3. Ва ўсіх іншых развядзеннях пасля дадання 50% глюкозы не назіралася неадкладнага першапачатковага зніжэння MPV.Пры выкарыстанні 25% глюкозы (канцэнтрацыя глюкозы 20,8% у канчатковым развядзенні) змяненне MPV было параўнальна са змяненнем 20% глюкозы пры развядзенні 1: 1 (мал. 3).Нягледзячы на ​​​​тое, што змены MPV першапачаткова былі большыя пры змешанай канцэнтрацыі 41%, чым пры 25%, розніца ў MPV паміж 41% і 25% праз 16 хвілін больш не была значнай (табліца 3 справа).Таксама цікава, што 25% глюкоза павялічвала MPV больш эфектыўна, чым 20,8%.
Гэта даследаванне in vitro часткова пацвердзіла нашу гіпотэзу. Гэта паказала патэнцыйны частковы лізіс трамбацытаў з дапамогай дабаўкі декстрозы, хуткую акамадацыю трамбацытаў да надзвычайнага гіпертонусу і значнае павышэнне MPV у адказ на канцэнтрацыі гіпертанічнай декстрозы > 25%. Гэта паказала патэнцыйны частковы лізіс трамбацытаў з дапамогай дабаўкі декстрозы, хуткую акамадацыю трамбацытаў да надзвычайнага гіпертонусу і значнае павышэнне MPV у адказ на канцэнтрацыі гіпертанічнай декстрозы > 25%. Ён паказаў патэнцыяльны частковы лізіс трамбацытаў прымесі дэкстрозы, быструю аккамадацыю трамбацытаў да экстрэмальнага гіпертануса і значнае павышэнне MPV у адказ на гіпертанічную канцэнтрацыю дэкстрозы > 25%. Гэта паказала патэнцыйны частковы лізіс трамбацытаў з декстрозой, хуткую акамадацыю трамбацытаў да крайняга гіпертонусу і значнае павышэнне MPV у адказ на гіпертанічныя ўзроўні декстрозы >25%.它显示出通过葡萄糖混合物潜在的部分血小板溶解，血小板快速适应极端高渗，以及响应> 25 % 浓度的高渗葡萄糖时MPV 显着上升。它 显示 出 通过 葡萄糖 潜在 的 部分 血小板 溶解 血小板 快速 适应 极端 高渗 ， 以及 响应> 25% 浓度 高渗 葡萄糖 时 时 mpv 显着。。。。 Ён паказвае магчымы частковы лізіс трамбацытаў сумесямі з глюкозай, хуткую адаптацыю трамбацытаў да экстрэмальнага гіпертонусу і значнае павышэнне MPV у адказ на канцэнтрацыю гіпертанічнага глюкозы > 25%. Ён паказвае патэнцыйны частковы лізіс трамбацытаў сумесямі глюкозы, хуткую адаптацыю трамбацытаў да экстрэмальнага гіпертонусу і значнае павелічэнне MPV у адказ на гіпертанічны ўзровень глюкозы >25%.Першапачатковае павелічэнне было максімальным пры ўздзеянні глюкозы 41,6%, але павелічэнне MPV наблізілася да 25% уздзеяння глюкозы прыблізна праз 20 хвілін пасля ўздзеяння.
На канцэнтрацыю трамбацытаў ўплывае глюкоза.Мы заўважылі, што колькасць PLT знізілася пры ўсіх развядзеннях глюкозы.Рэзкае падзенне колькасці трамбацытаў у H2O (0%) развядзенні серыі PRP можа быць звязана з асматычным лізіс.У якасці альтэрнатывы гэта можа быць артэфакт, выкліканы зліпаннем трамбацытаў, але гэта ў адрозненне ад адсутнасці змены MPV пры гэтым развядзенні.Гэта адкрыццё азначае, што некаторыя трамбацыты вельмі адчувальныя да гипоосмолярности.
Ва ўсіх развядзеннях глюкозы 1: 1 колькасць PLT зніжалася на 20-30%, нават на D5W (гіпатанічны пры 252 мОсм), што можа сведчыць аб спецыфічным неосмотический эфекце глюкозы, так як і PLT, і MPV заставаліся нязменнымі пры трохразовым павелічэнні канцэнтрацыі.глюкоза.ад D5W да D25W.Фактычна, канцэнтрацыя PLT мела тэндэнцыю да нязначнага павелічэння з павелічэннем осмолярность.
Зніжэнне PLT паміж развядзеннямі 1:1 і 1:5 азначае, што эфект растварэння залежыць ад пачатковай і канчатковай канцэнтрацыі глюкозы.Калі б гэта залежала толькі ад пачатковай канцэнтрацыі, то можна было б чакаць убачыць розніцу ў зніжэнні PLT паміж канцэнтрацыямі 1:1.Але мы гэтага не робім.Калі эфект лізісу залежыць толькі ад канчатковай канцэнтрацыі глюкозы, то мы не чакаем вялікай розніцы паміж 20% развядзеннем 1:1 і 20,8% развядзеннем 1:5.І ўсё ж мы гэта зрабілі.
Калі страта трамбацытаў адбываецца з-за лізіс трамбацытаў, утворыцца частковы лізат, пасля чаго цітокіны і фактары росту вызваляюцца ва пазаклеткавую сераду.Некалькі даследаванняў паказалі, што лізат трамбацытаў амаль гэтак жа эфектыўны, як PRP, як раствор для праліферацыі [11].PRP сам па сабе апынуўся эфектыўным рашэннем для лячэння праліферацыі [12-14].
Неактыўныя трамбацыты цыркулююць у выглядзе дыска, умацаванага некалькімі ўнутранымі структурамі.Падчас актывацыі яны набываюць больш сферычную форму або форму амёбы, што прыводзіць да павелічэння аб'ёму.Павелічэнне аб'ёму патрабуе павелічэння плошчы паверхні, што з'яўляецца вынікам экструзіі сістэмы адкрытых канальчыкаў (OCS) і дадання экзацытарных гранул да мембраны.Застаецца вызначыць, ці ўдзельнічае павышэнне MPV, выкліканае гіпертанічнай глюкозай, адзін або абодва з гэтых механізмаў, але калі апошні, то павелічэнне MPV будзе паказваць на дегрануляцию.
Гэта даследаванне паказала, што ўздзеянне высокіх канцэнтрацый глюкозы на PRP або трамбацыты суцэльнай крыві прывяло да павелічэння MPV на працягу 15 хвілін з канцэнтрацыяй глюкозы 25% і 41,6% адпаведна.
Павелічэнне MPV трамбацытаў можа быць звязана з пашырэннем навакольных клубкоў мікратрубачак у адказ на прыток кальцыя.Лю і інш.Было паказана, што глюкоза апасродкуе прыток кальцыя праз канал TRPC6 трамбацытаў [6].Наша гіпотэза заключаецца ў тым, што глюкоза выклікае расслабленне клубкоў мікратрубачак, што прыводзіць да павышэння MPV і сенсібілізацыі і/або актывацыі трамбацытаў.Аднак, мяркуючы па нашых выніках, гэта толькі частка гісторыі.У нашых тэстах ніякая канцэнтрацыя ніжэй за D25W не прывяла да павелічэння MPV.Улічваючы, што мы не правяралі ўздзеянне канцэнтрацый глюкозы ад 12,5% да 25%, вынікі нашай фазы 1 паказваюць, што ў гэтым дыяпазоне канцэнтрацый глюкозы можа быць парог, які прыводзіць да павелічэння MPV.Далейшае тэставанне на этапах 3 і 4 паказала, што 20-25% глюкозы, здаецца, з'яўляецца парогам для гэтага, але застаецца незразумелым, чаму.
Мы таксама назіралі зніжэнне MPV пасля цэнтрыфугавання на ~9%.Незразумела, ці звязана гэта зніжэнне MPV з-за больш буйных і шчыльных трамбацытаў, якія трапілі ў пласт эрытрацытаў цэнтрыфугі.Гэта назіранне можа быць важным для клініцыстаў, паколькі можа азначаць, што трамбацыты PRP з'яўляюцца меншай і менш шчыльнай падгрупай трамбацытаў WB.
У папярэднім даследаванні мы паказалі, што падрыхтоўка PRP ручнымі метадамі недарагая [8].Калі глюкоза сенсібілізуе тканкавыя трамбацыты або PRP, робячы іх больш успрымальнымі да актывацыі, або калі PRP вырабляецца з частковымі ўласцівасцямі лізата, гэта можа павысіць рэгенерацыю і паменшыць неабходнасць тэрапіі.Такім чынам, спалучэнне PRP і высокаканцэнтраванай глюкозы можа быць больш эканамічна эфектыўным, чым PRP або глюкоза ў адзіночку.
Наша даследаванне мае некалькі недахопаў.Па-першае, мы выкарыстоўваем PRP, атрыманы з некалькіх розных метадаў.Гэта можа прывесці да супярэчлівых вынікаў.Па-другое, мы не змаглі правесці біяхімічны аналіз ніводнага з нашых узораў, каб больш дакладна вызначыць, ці адбылася актывацыя трамбацытаў.Мы хацелі б вымераць Р-селектын, фактар ​​трамбацытаў 4, манацытарныя агрэгаты трамбацытаў або іншыя маркеры актывацыі трамбацытаў, каб лепш зразумець ступень або наяўнасць дэгрануляцыі альфа-гранул, але гэта выходзіць за рамкі гэтага даследавання.Па-трэцяе, мы не змаглі пацвердзіць з дапамогай электроннай мікраскапіі або іншымі метадамі, што павелічэнне MPV у трамбацытаў, якія падвергліся ўздзеянню глюкозы, было звязана з уздзеяннем на клубкі мікратрубачак.
Сумесі WB або PRP з 25% глюкозай павялічвалі MPV, сігналізуючы аб пачатку актывацыі трамбацытаў, хоць гэта даследаванне не паказала прагрэсавання агрэгацыі або дэгрануляцыі.Гіпертанічная сумесь глюкозы прывяла да страты трамбацытаў, што, магчыма, уяўляе сабой літычны эфект.Частковая актывацыя або лізіс трамбацытаў можа выклікаць рэгенерацыю тканін пасля ін'екцыі трамбацытаў.Незразумела, да якіх клінічных наступстваў могуць прывесці гэтыя змены.Далейшыя даследаванні прадэманстравалі больш дакладныя вымярэнні актывацыі або лізіс і ацанілі розныя клінічныя эфекты гіпертанічных сумесяў глюкозы з WB або PRP.
Праліфератыўная тэрапія глюкозай - гэта простая і недарагая рэгенератыўная тэрапія, якая хутка пашыраецца і падтрымлівае клінічныя даследаванні.Гэта даследаванне мяркуе фізіялагічны механізм, які ў выпадку пацверджання можа дапамагчы нам зразумець частку рэгенератыўнага механізму праліфератыўнай тэрапіі.
Біямедыцынская і медыцынская інфарматыка ў Універсітэце Місуры, Медыцынская школа Канзас-Сіці, Канзас-Сіці, ЗША
Суб'екты-людзі: Усе ўдзельнікі гэтага даследавання далі або не далі згоду.Міжнароднае таварыства клетачнай медыцыны выдала дазвол ICMS-2017-003.Наступны пратакол быў зацверджаны для далейшага выкарыстання Інстытуцыйным аглядальным саветам Міжнароднага таварыства клетачнай медыцыны: Назва: Разлік выхаду лекавага сродку ў багатай трамбацытамі плазме на аснове зыходнага ўзроўню трамбацытаў у CBC.Жывёлы: Усе аўтары пацвердзілі, што ў гэтым даследаванні не ўдзельнічалі жывёлы і тканіны.Канфлікт інтарэсаў: у адпаведнасці з адзінай формай раскрыцця інфармацыі ICMJE, усе аўтары заяўляюць наступнае: Інфармацыя аб аплаце/паслугах: усе аўтары заяўляюць, што яны не атрымлівалі фінансавай падтрымкі ад якой-небудзь арганізацыі за прадстаўленую працу.Фінансавыя ўзаемаадносіны: Усе аўтары заяўляюць, што ў цяперашні час або на працягу апошніх трох гадоў яны не маюць фінансавых адносін з якой-небудзь арганізацыяй, якая можа быць зацікаўлена ў прадстаўленай працы.Іншыя ўзаемаадносіны: Усе аўтары заяўляюць, што няма іншых адносін або дзейнасці, якія могуць паўплываць на прадстаўленую працу.
Harrison TE, Bowler J, Reeves K і інш.(17 мая 2022 г.) Уплыў глюкозы на колькасць і аб'ём трамбацытаў: наступствы для рэгенератыўнай медыцыны.Лячэнне 14 (5): e25081.doi:10.7759/cureus.25081
© Аўтарскае права, 2022 Harrison et al.Гэта артыкул з адкрытым доступам, які распаўсюджваецца на ўмовах ліцэнзіі Creative Commons Attribution License CC-BY 4.0.Дазваляецца неабмежаванае выкарыстанне, распаўсюджванне і прайграванне на любых носьбітах пры ўмове ўказанні першапачатковага аўтара і крыніцы.