কিছু LC সমস্যা সমাধানের বিষয় কখনই পুরনো হয় না, কারণ LC অনুশীলনে সমস্যা রয়েছে, এমনকি সময়ের সাথে সাথে যন্ত্র প্রযুক্তির উন্নতি হলেও। LC সিস্টেমে সমস্যা দেখা দিতে পারে এবং খারাপ পিক শেপে শেষ হতে পারে এমন অনেক উপায় রয়েছে। যখন পিক শেপ সম্পর্কিত সমস্যা দেখা দেয়, তখন এই ফলাফলগুলির সম্ভাব্য কারণগুলির একটি সংক্ষিপ্ত তালিকা আমাদের সমস্যা সমাধানের অভিজ্ঞতাকে সহজ করতে সাহায্য করে।
এই "LC Troubleshooting" কলামটি লেখা এবং প্রতি মাসে বিষয়গুলি নিয়ে চিন্তা করা মজাদার, কারণ কিছু বিষয় কখনও স্টাইলের বাইরে যায় না। ক্রোমাটোগ্রাফি গবেষণার ক্ষেত্রে কিছু বিষয় বা ধারণা অপ্রচলিত হয়ে যায় কারণ সেগুলি নতুন এবং উন্নত ধারণা দ্বারা প্রতিস্থাপিত হয়, সমস্যা সমাধানের ক্ষেত্রে, যেহেতু প্রথম সমস্যা সমাধানের নিবন্ধটি এই জার্নালে প্রকাশিত হয়েছিল (সেই সময়ে LC জার্নাল) কারণ কিছু বিষয় এখনও প্রাসঙ্গিক) 1983 সালে। গত কয়েক বছর ধরে, আমি তরল ক্রোমাটোগ্রাফি (LC) কে প্রভাবিত করে এমন সমসাময়িক প্রবণতাগুলির উপর বেশ কয়েকটি LC Troubleshooting বিভাগ ফোকাস করেছি (উদাহরণস্বরূপ, ধরে রাখার উপর চাপের প্রভাব সম্পর্কে আমাদের বোঝার আপেক্ষিক তুলনা [2] নতুন অগ্রগতি) LC ফলাফলের আমাদের ব্যাখ্যা এবং আধুনিক LC যন্ত্রগুলির সাথে কীভাবে সমস্যা সমাধান করা যায়। এই মাসের কিস্তিতে, আমি আমার সিরিজ (3) চালিয়ে যাচ্ছি, যা 2021 সালের ডিসেম্বরে শুরু হয়েছিল, যা LC Troubleshooting এর কিছু "জীবন এবং মৃত্যু" বিষয়ের উপর ফোকাস করেছিল — যে উপাদানগুলি যে কোনও সমস্যা সমাধানকারীর জন্য দুর্দান্ত, তা অপরিহার্য, আমরা যে সিস্টেমটি ব্যবহার করছি তার বয়স নির্বিশেষে। এই সিরিজের মূল বিষয় হল অনেক ল্যাবরেটরিতে ঝুলন্ত LCGC-এর বিখ্যাত "LC ট্রাবলশুটিং গাইড" ওয়াল চার্ট (4) এর সাথে অত্যন্ত প্রাসঙ্গিক। এই সিরিজের তৃতীয় অংশের জন্য, আমি পিক শেপ বা পিক বৈশিষ্ট্য সম্পর্কিত বিষয়গুলিতে ফোকাস করার সিদ্ধান্ত নিয়েছি। অবিশ্বাস্যভাবে, ওয়াল চার্টটি দুর্বল পিক শেপের 44 টি বিভিন্ন সম্ভাব্য কারণ তালিকাভুক্ত করেছে! আমরা একটি নিবন্ধে এই সমস্ত সমস্যাগুলি বিস্তারিতভাবে বিবেচনা করতে পারি না, তাই এই বিষয়ের প্রথম কিস্তিতে, আমি প্রায়শই দেখা কিছু বিষয়ের উপর ফোকাস করব। আমি আশা করি তরুণ এবং বৃদ্ধ LC ব্যবহারকারীরা এই গুরুত্বপূর্ণ বিষয়ে কিছু সহায়ক টিপস এবং অনুস্মারক খুঁজে পাবেন।
আমি নিজেকে ক্রমশ সমস্যা সমাধানের প্রশ্নের উত্তর দিতে থাকি "যেকোনো কিছু সম্ভব" দিয়ে। ব্যাখ্যা করা কঠিন পর্যবেক্ষণগুলি বিবেচনা করার সময় এই উত্তরটি সহজ মনে হতে পারে, তবে আমি প্রায়শই এটি উপযুক্ত বলে মনে করি। দুর্বল পিক আকৃতির অনেক সম্ভাব্য কারণের সাথে, সমস্যাটি কী হতে পারে তা বিবেচনা করার সময় খোলা মন রাখা গুরুত্বপূর্ণ, এবং আমাদের সমস্যা সমাধানের প্রচেষ্টা শুরু করার জন্য সম্ভাব্য কারণগুলিকে অগ্রাধিকার দিতে সক্ষম হওয়া, সেই সবচেয়ে সাধারণ সম্ভাবনার উপর মনোযোগ কেন্দ্রীভূত করা, এই বিন্দুটি খুবই গুরুত্বপূর্ণ। সম্ভব।
যেকোনো সমস্যা সমাধানের অনুশীলনের একটি গুরুত্বপূর্ণ ধাপ - কিন্তু আমার মনে হয় যে এটি অবমূল্যায়ন করা হয়েছে - হল এমন একটি সমস্যা আছে যা সমাধান করা প্রয়োজন তা স্বীকার করা। একটি সমস্যা আছে তা স্বীকার করার অর্থ প্রায়শই স্বীকার করা যে টুলের সাথে যা ঘটে তা আমাদের প্রত্যাশা থেকে আলাদা, যা তত্ত্ব, অভিজ্ঞতাগত জ্ঞান এবং অভিজ্ঞতা দ্বারা গঠিত (5)। এখানে উল্লেখিত "শিখর আকৃতি" আসলে কেবল শিখরের আকৃতি (প্রতিসম, অপ্রতিসম, মসৃণ, তুলতুলে, অগ্রণী প্রান্ত, লেজ ইত্যাদি) নয়, বরং প্রস্থকেও বোঝায়। প্রকৃত শিখর আকৃতির জন্য আমাদের প্রত্যাশাগুলি সহজ। তত্ত্ব (6) পাঠ্যপুস্তকের প্রত্যাশাকে সমর্থন করে যে, বেশিরভাগ ক্ষেত্রে, ক্রোমাটোগ্রাফিক শিখরগুলি প্রতিসম হওয়া উচিত এবং গাউসিয়ান বিতরণের আকারের সাথে সঙ্গতিপূর্ণ হওয়া উচিত, যেমন চিত্র 1a-তে দেখানো হয়েছে।শিখর প্রস্থ থেকে আমরা যা আশা করি তা আরও জটিল সমস্যা, এবং আমরা ভবিষ্যতের একটি নিবন্ধে এই বিষয়টি নিয়ে আলোচনা করব।চিত্র 1-এর অন্যান্য শীর্ষ আকারগুলি পর্যবেক্ষণ করা যেতে পারে এমন কিছু অন্যান্য সম্ভাবনা দেখায় - অন্য কথায়, কিছু উপায়ে জিনিসগুলি ভুল হতে পারে। এই কিস্তির বাকি অংশে, আমরা কিছু নির্দিষ্ট বিষয় নিয়ে আলোচনা করার জন্য সময় ব্যয় করব এই ধরণের আকৃতির দিকে পরিচালিত করতে পারে এমন পরিস্থিতির উদাহরণ।
কখনও কখনও ক্রোমাটোগ্রামে যেখানে তাদের এলিউট করা হবে বলে আশা করা হয়, সেখানে পিকের অনুপস্থিতি (ধরে নিচ্ছি যে নমুনাটিতে আসলে লক্ষ্য বিশ্লেষক এমন ঘনত্বে রয়েছে যা ডিটেক্টর প্রতিক্রিয়াকে শব্দের উপরে এটি দেখতে যথেষ্ট করে তুলবে) সাধারণত কিছু যন্ত্রের সমস্যা বা ভুল মোবাইল ফেজ অবস্থার সাথে সম্পর্কিত (যদি আদৌ পর্যবেক্ষণ করা হয়)। পিকের, সাধারণত খুব "দুর্বল")। এই বিভাগের সম্ভাব্য সমস্যা এবং সমাধানগুলির একটি সংক্ষিপ্ত তালিকা সারণি I এ পাওয়া যাবে।
উপরে উল্লিখিত হিসাবে, মনোযোগ দেওয়ার এবং এটি ঠিক করার চেষ্টা করার আগে কতটা পিক ব্রডিং সহ্য করা উচিত এই প্রশ্নটি একটি জটিল বিষয় যা আমি ভবিষ্যতের একটি প্রবন্ধে আলোচনা করব। আমার অভিজ্ঞতা হল যে উল্লেখযোগ্য পিক ব্রডিং প্রায়শই পিক আকৃতিতে একটি উল্লেখযোগ্য পরিবর্তনের সাথে থাকে এবং পিক টেইলিং প্রাক-পিক বা বিভাজনের চেয়ে বেশি সাধারণ। যাইহোক, নামমাত্র প্রতিসম পিকগুলিও প্রশস্ত হয়, যা কয়েকটি ভিন্ন কারণে হতে পারে:
এই প্রতিটি বিষয় নিয়ে ট্রাবলশুটিং এলসি-এর পূর্ববর্তী সংখ্যাগুলিতে বিস্তারিত আলোচনা করা হয়েছে, এবং এই বিষয়গুলিতে আগ্রহী পাঠকরা এই সমস্যাগুলির মূল কারণ এবং সম্ভাব্য সমাধান সম্পর্কে তথ্যের জন্য পূর্ববর্তী এই নিবন্ধগুলি পড়তে পারেন। আরও বিস্তারিত।
পিক টেইলিং, পিক ফ্রন্টিং এবং স্প্লিটিং - এই সবই রাসায়নিক বা ভৌত ঘটনার কারণে হতে পারে, এবং এই সমস্যার সম্ভাব্য সমাধানের তালিকা ব্যাপকভাবে পরিবর্তিত হয়, আমরা রাসায়নিক বা ভৌত সমস্যার সাথে মোকাবিলা করছি কিনা তার উপর নির্ভর করে। প্রায়শই, একটি ক্রোমাটোগ্রামের বিভিন্ন শিখরের তুলনা করে, আপনি গুরুত্বপূর্ণ সূত্র খুঁজে পেতে পারেন যে অপরাধী কে। যদি একটি ক্রোমাটোগ্রামের সমস্ত শিখর একই আকার প্রদর্শন করে, তবে কারণটি সম্ভবত শারীরিক নয়। যদি শুধুমাত্র একটি বা কয়েকটি শিখর প্রভাবিত হয়, কিন্তু বাকিগুলি ঠিক দেখায়, তবে কারণটি সম্ভবত রাসায়নিক।
পিক টেইলিং এর রাসায়নিক কারণগুলি এখানে সংক্ষেপে আলোচনা করার জন্য খুব জটিল। আগ্রহী পাঠককে আরও গভীর আলোচনার জন্য "LC ট্রাবলশুটিং" এর সাম্প্রতিক সংখ্যাটি উল্লেখ করা হচ্ছে (10)। তবে, চেষ্টা করার জন্য একটি সহজ জিনিস হল ইনজেকশন করা বিশ্লেষকের ভর কমানো এবং পিক আকৃতি উন্নত হয় কিনা তা দেখা। যদি তাই হয়, তাহলে এটি একটি ভাল সূত্র যে সমস্যাটি হল "ভর ওভারলোড"। এই ক্ষেত্রে, পদ্ধতিটি ছোট বিশ্লেষক ভর ইনজেকশনের মধ্যে সীমাবদ্ধ রাখতে হবে, অথবা ক্রোমাটোগ্রাফিক অবস্থা পরিবর্তন করতে হবে যাতে বৃহত্তর ভর ইনজেকশনের পরেও ভাল পিক আকার পাওয়া যায়।
পিক টেইলিংয়ের অনেক সম্ভাব্য ভৌত কারণও রয়েছে। সম্ভাবনার বিশদ আলোচনায় আগ্রহী পাঠকদের জন্য "LC ট্রাবলশুটিং" (11) এর আরেকটি সাম্প্রতিক সংখ্যার উল্লেখ করা হয়েছে। পিক টেইলিংয়ের একটি সাধারণ ভৌত কারণ হল ইনজেক্টর এবং ডিটেক্টরের মধ্যে একটি বিন্দুতে দুর্বল সংযোগ (12)। একটি চরম উদাহরণ চিত্র 1d তে দেখানো হয়েছে, যা কয়েক সপ্তাহ আগে আমার ল্যাবে প্রাপ্ত হয়েছিল। এই ক্ষেত্রে, আমরা একটি নতুন ইনজেকশন ভালভ দিয়ে একটি সিস্টেম তৈরি করেছি যা আমরা আগে ব্যবহার করিনি, এবং একটি ছোট ভলিউম ইনজেকশন লুপ ইনস্টল করেছি যার সাথে একটি ফেরুল রয়েছে যা একটি স্টেইনলেস স্টিলের কৈশিকের উপর ঢালাই করা হয়েছিল। কিছু প্রাথমিক সমস্যা সমাধানের পরীক্ষার পর, আমরা বুঝতে পেরেছি যে ইনজেকশন ভালভ স্টেটরে পোর্টের গভীরতা আমাদের আগের চেয়ে অনেক গভীর ছিল, যার ফলে পোর্টের নীচে একটি বড় মৃত ভলিউম তৈরি হয়েছিল। ইনজেকশন লুপটিকে অন্য একটি টিউব দিয়ে প্রতিস্থাপন করে এই সমস্যাটি সহজেই সমাধান করা যায়, আমরা পোর্টের নীচে মৃত ভলিউম দূর করার জন্য ফেরুলটিকে সঠিক অবস্থানে সামঞ্জস্য করতে পারি।
চিত্র 1e-তে দেখানো পিক ফ্রন্টগুলিও ভৌত বা রাসায়নিক সমস্যার কারণে হতে পারে। লিডিং এজের একটি সাধারণ ভৌত কারণ হল কলামের কণা স্তরটি ভালভাবে প্যাক করা হয়নি, অথবা সময়ের সাথে সাথে কণাগুলি পুনর্গঠিত হয়েছে। এই ভৌত ঘটনার কারণে পিক টেইলিংয়ের মতো, এটি ঠিক করার সর্বোত্তম উপায় হল কলামটি প্রতিস্থাপন করা এবং চালিয়ে যাওয়া। মৌলিকভাবে, রাসায়নিক উত্স সহ লিডিং এজ পিক আকারগুলি প্রায়শই "অ-রৈখিক" ধারণ অবস্থা থেকে উদ্ভূত হয়। আদর্শ (রৈখিক) অবস্থার অধীনে, স্থির ফেজ (অতএব, ধারণ ফ্যাক্টর) দ্বারা ধরে রাখা বিশ্লেষকের পরিমাণ কলামে বিশ্লেষকের ঘনত্বের সাথে রৈখিকভাবে সম্পর্কিত। ক্রোমাটোগ্রাফিকভাবে, এর অর্থ হল কলামে ইনজেক্ট করা বিশ্লেষকের ভর বৃদ্ধি পেলে, শিখর লম্বা হয়, কিন্তু প্রশস্ত হয় না। ধারণ আচরণ অ-রৈখিক হলে এই সম্পর্কটি ভেঙে যায় এবং আরও ভর ইনজেক্ট করার সাথে সাথে শিখরগুলি কেবল লম্বা হয় না বরং প্রশস্তও হয়। এছাড়াও, নন-রৈখিক আকারগুলি ক্রোমাটোগ্রাফিক শিখরের আকৃতি নির্ধারণ করে, যার ফলে লিডিং বা ট্রেলিং প্রান্ত তৈরি হয়। ভর ওভারলোডের মতো যা পিক সৃষ্টি করে টেইলিং (১০), নন-লিনিয়ার রিটেনশনের কারণে সৃষ্ট পিক লিডিং ইনজেকশন করা অ্যানালাইট ভর কমিয়েও নির্ণয় করা যেতে পারে। যদি পিক আকৃতি উন্নত হয়, তাহলে পদ্ধতিটি এমনভাবে পরিবর্তন করতে হবে যাতে লিডিং এজ তৈরির জন্য ইনজেকশনের গুণমান অতিক্রম না করে, অথবা এই আচরণ কমাতে ক্রোমাটোগ্রাফিক অবস্থা পরিবর্তন করতে হবে।
কখনও কখনও আমরা লক্ষ্য করি যে "বিভক্ত" শিখর বলে মনে হচ্ছে, যেমন চিত্র 1f-এ দেখানো হয়েছে। এই সমস্যা সমাধানের প্রথম ধাপ হল আংশিক সহ-ইলিউশনের কারণে (অর্থাৎ, দুটি স্বতন্ত্র কিন্তু ঘনিষ্ঠভাবে এলিউটিং যৌগের উপস্থিতি) শীর্ষ আকৃতিটি নির্ধারণ করা। যদি আসলে দুটি ভিন্ন বিশ্লেষক কাছাকাছি এলিউটিং করে, তবে এটি তাদের রেজোলিউশন উন্নত করার বিষয় (উদাহরণস্বরূপ, নির্বাচনীতা, ধারণ, বা প্লেট গণনা বৃদ্ধি করে), এবং আপাত "বিভক্ত" শিখরগুলি শারীরিক পারফরম্যান্সের সাথে সম্পর্কিত, কলামের সাথে এর কোনও সম্পর্ক নেই। প্রায়শই, এই সিদ্ধান্তের সবচেয়ে গুরুত্বপূর্ণ সূত্র হল ক্রোমাটোগ্রামের সমস্ত শিখর বিভক্ত আকার প্রদর্শন করে, নাকি কেবল একটি বা দুটি। যদি এটি কেবল একটি বা দুটি হয়, তবে এটি সম্ভবত একটি সহ-ইলিউশন সমস্যা; যদি সমস্ত শিখর বিভক্ত হয়, তবে এটি সম্ভবত একটি শারীরিক সমস্যা, সম্ভবত কলামের সাথে সম্পর্কিত।
কলামের ভৌত বৈশিষ্ট্যের সাথে সম্পর্কিত স্প্লিট পিকগুলি সাধারণত আংশিকভাবে অবরুদ্ধ ইনলেট বা আউটলেট ফ্রিটগুলির কারণে হয়, অথবা কলামে কণাগুলির পুনর্গঠন, যা অন্যান্য অঞ্চলে (11) কলাম চ্যানেল গঠনের নির্দিষ্ট কিছু অঞ্চলে মোবাইল ফেজকে মোবাইল ফেজের চেয়ে দ্রুত প্রবাহিত করতে দেয়। আংশিকভাবে আটকে থাকা ফ্রিট কখনও কখনও কলামের মধ্য দিয়ে প্রবাহকে বিপরীত করে পরিষ্কার করা যেতে পারে; তবে, আমার অভিজ্ঞতায়, এটি সাধারণত দীর্ঘমেয়াদী সমাধানের চেয়ে স্বল্পমেয়াদী। আধুনিক কলামের ক্ষেত্রে এটি প্রায়শই মারাত্মক যদি কণাগুলি কলামের মধ্যে পুনরায় একত্রিত হয়। এই মুহুর্তে, কলামটি প্রতিস্থাপন করা এবং চালিয়ে যাওয়া ভাল।
চিত্র ১জি-তে দেখা যায়, সাম্প্রতিক আমার নিজের ল্যাবের একটি উদাহরণ থেকে, সাধারণত সংকেতটি এত বেশি যে এটি প্রতিক্রিয়া পরিসরের সর্বোচ্চ প্রান্তে পৌঁছে গেছে। অপটিক্যাল শোষণকারী ডিটেক্টরগুলির জন্য (এই ক্ষেত্রে UV-vis), যখন বিশ্লেষণকারী ঘনত্ব খুব বেশি থাকে, তখন বিশ্লেষক ডিটেক্টর ফ্লো সেলের মধ্য দিয়ে যাওয়া বেশিরভাগ আলো শোষণ করে, যার ফলে খুব কম আলো সনাক্ত করা যায়। এই পরিস্থিতিতে, ফটোডিটেক্টর থেকে আসা বৈদ্যুতিক সংকেত বিভিন্ন শব্দের উৎস, যেমন বিপথগামী আলো এবং "অন্ধকার প্রবাহ" দ্বারা ব্যাপকভাবে প্রভাবিত হয়, যা সংকেতটিকে "অস্পষ্ট" করে তোলে এবং বিশ্লেষণকারী ঘনত্ব থেকে স্বাধীন করে তোলে। যখন এটি ঘটে, তখন সমস্যাটি প্রায়শই বিশ্লেষকের ইনজেকশন ভলিউম হ্রাস করে - ইনজেকশন ভলিউম হ্রাস করে, নমুনা পাতলা করে, অথবা উভয়ই সহজেই সমাধান করা যেতে পারে।
ক্রোমাটোগ্রাফি স্কুলে, আমরা নমুনায় বিশ্লেষণাত্মক ঘনত্বের সূচক হিসাবে ডিটেক্টর সিগন্যাল (অর্থাৎ, ক্রোমাটোগ্রামে y-অক্ষ) ব্যবহার করি। তাই শূন্যের নিচে সংকেত সহ একটি ক্রোমাটোগ্রাম দেখা অদ্ভুত বলে মনে হয়, কারণ সহজ ব্যাখ্যা হল এটি একটি নেতিবাচক বিশ্লেষণাত্মক ঘনত্ব নির্দেশ করে - যা অবশ্যই শারীরিকভাবে সম্ভব নয়। আমার অভিজ্ঞতায়, অপটিক্যাল শোষণকারী ডিটেক্টর (যেমন, UV-vis) ব্যবহার করার সময় নেতিবাচক শিখরগুলি প্রায়শই পরিলক্ষিত হয়।
এই ক্ষেত্রে, একটি নেতিবাচক শিখর মানে হল যে কলাম থেকে বেরিয়ে আসা অণুগুলি শিখরের ঠিক আগে এবং পরে মোবাইল ফেজের চেয়ে কম আলো শোষণ করে। উদাহরণস্বরূপ, তুলনামূলকভাবে কম সনাক্তকরণ তরঙ্গদৈর্ঘ্য (<230 nm) এবং এই তরঙ্গদৈর্ঘ্যের বেশিরভাগ আলো শোষণকারী মোবাইল ফেজ অ্যাডিটিভ ব্যবহার করার সময় এটি ঘটতে পারে। এই ধরনের সংযোজনগুলি মিথানলের মতো মোবাইল ফেজ দ্রাবক উপাদান বা অ্যাসিটেট বা ফর্মেটের মতো বাফার উপাদান হতে পারে। একটি ক্রমাঙ্কন বক্ররেখা প্রস্তুত করতে এবং সঠিক পরিমাণগত তথ্য পেতে আসলে নেতিবাচক শিখর ব্যবহার করা যেতে পারে, তাই প্রতি সেগুলি এড়ানোর কোনও মৌলিক কারণ নেই (এই পদ্ধতিটিকে কখনও কখনও "পরোক্ষ UV সনাক্তকরণ" বলা হয়) (13)। যাইহোক, যদি আমরা সত্যিই নেতিবাচক শিখরগুলি সম্পূর্ণরূপে এড়াতে চাই, শোষণ সনাক্তকরণের ক্ষেত্রে, সর্বোত্তম সমাধান হল একটি ভিন্ন সনাক্তকরণ তরঙ্গদৈর্ঘ্য ব্যবহার করা যাতে বিশ্লেষক মোবাইল ফেজের চেয়ে বেশি শোষণ করে, অথবা মোবাইল ফেজের গঠন পরিবর্তন করে যাতে তারা বিশ্লেষণকারীদের তুলনায় কম আলো শোষণ করে।
প্রতিসরাঙ্ক (RI) সনাক্তকরণ ব্যবহার করার সময়ও নেতিবাচক শিখর দেখা দিতে পারে যখন নমুনার বিশ্লেষক ব্যতীত অন্যান্য উপাদানের প্রতিসরাঙ্ক, যেমন দ্রাবক ম্যাট্রিক্স, মোবাইল ফেজের প্রতিসরাঙ্ক থেকে আলাদা হয়। এটি UV-vis সনাক্তকরণের ক্ষেত্রেও ঘটে, তবে RI সনাক্তকরণের তুলনায় এই প্রভাবটি হ্রাস পেতে থাকে। উভয় ক্ষেত্রেই, নমুনা ম্যাট্রিক্সের গঠনকে মোবাইল ফেজের সাথে আরও ঘনিষ্ঠভাবে মেলানোর মাধ্যমে নেতিবাচক শিখর হ্রাস করা যেতে পারে।
এলসি সমস্যা সমাধানের মূল বিষয়ের উপর তৃতীয় অংশে, আমি এমন পরিস্থিতি নিয়ে আলোচনা করেছি যেখানে পর্যবেক্ষণ করা পিক শেপ প্রত্যাশিত বা স্বাভাবিক পিক শেপ থেকে আলাদা। এই ধরনের সমস্যার কার্যকর সমস্যা সমাধান প্রত্যাশিত পিক শেপ সম্পর্কে জ্ঞান (তত্ত্ব বা বিদ্যমান পদ্ধতির পূর্ব অভিজ্ঞতার উপর ভিত্তি করে) দিয়ে শুরু হয়, তাই এই প্রত্যাশা থেকে বিচ্যুতি স্পষ্ট। পিক শেপ সমস্যার অনেকগুলি ভিন্ন সম্ভাব্য কারণ রয়েছে (অত্যধিক প্রশস্ত, লেজ, অগ্রণী প্রান্ত, ইত্যাদি)। এই পর্বে, আমি প্রায়শই দেখা কিছু কারণ সম্পর্কে বিস্তারিত আলোচনা করছি। এই বিবরণগুলি জানা সমস্যা সমাধান শুরু করার জন্য একটি ভাল জায়গা প্রদান করে, তবে সমস্ত সম্ভাবনা ধারণ করে না। কারণ এবং সমাধানের আরও গভীর তালিকাতে আগ্রহী পাঠকরা LCGC "LC সমস্যা সমাধান নির্দেশিকা" ওয়াল চার্টটি দেখতে পারেন।
(৪) LCGC “LC সমস্যা সমাধান নির্দেশিকা” ওয়াল চার্ট। https://www.chromatographyonline.com/view/troubleshooting-wallchart (২০২১)।
(৬) এ. ফেলিঙ্গার, ক্রোমাটোগ্রাফিতে ডেটা বিশ্লেষণ এবং সংকেত প্রক্রিয়াকরণ (এলসেভিয়ার, নিউ ইয়র্ক, এনওয়াই, ১৯৯৮), পৃষ্ঠা ৪৩-৯৬।
(৮) ওহাব এমএফ, দাশগুপ্ত পিকে, কাদজো এএফ এবং আর্মস্ট্রং ডিডব্লিউ, অ্যানাল.চিম.জার্নাল.রেভ. ৯০৭, ৩১–৪৪ (২০১৬)। https://doi.org/10.1016/j.aca.2015.11.043।