Javascript està actualment desactivat al vostre navegador. Algunes funcions d'aquest lloc web no funcionaran quan javascript està desactivat.
Registreu-vos amb les vostres dades específiques i el medicament específic d'interès i relacionarem la informació que proporcioneu amb els articles de la nostra àmplia base de dades i us enviarem una còpia en PDF de seguida per correu electrònic.
作者 Stella S, Vitale SR, Martorana F, Massimino M, Pavone G, Lanzafame K, Bianca S, Barone C, Gorgone C, Fichera M, Manzella L
Stefania Stella, 1,2 Silvia Rita Vitale, 1,2 Federica Martorana, 1,2 Michele Massimino, 1,2 Giuliana Pavone, 3 Katia Lanzafame, 3 Sebastiano Bianca, 4 Chiara Barone, 5 Cristina Gorgone, 6 Marco Fichera, 6, 7 Livia Manzella, Clínica de Medicina1,2, Universitat de Catania5, Departament de Medicina de Catania1,2, Experimental Itàlia;2 Centre d'Oncologia Experimental i Hematologia, AOU Policlinico “G.Rodolico – San Marco”, Catània , 95123, Itàlia;3 Oncologia Mèdica, AOU Policlinico “G.Rodolico – San Marco”, Catània, 95123, Itàlia;4 Medical Genetics, ARNAS Garibaldi, Catània, 95123, Itàlia;5 Medicine Genetics, ASP, Syracuse, 96100, Itàlia;6 Departament de Ciències Biomèdiques i Biotecnològiques, Universitat de Catània, Genètica Mèdica, Catània, Itàlia, 95123;7Oasi Research Institute-IRCCS, Troina, 94018, Itàlia Comunicacions: Stefania Stella, tel +39 095 378 1946, correu electrònic [email protected];[email protected] Propòsit: mutacions germinals en BRCA1 i BRCA2 i càncer de mama establert (BC), ovari (OC) i altres associats amb un risc de càncer de per vida. Les proves del gen BRCA són clau per avaluar el risc individual, així com per trobar mètodes de prevenció en portadors sans i adaptar tractaments en pacients amb càncer. L'objectiu del nostre estudi va ser investigar la incidència i distribució d'alteracions patògenes de la línia germinal BRCA en una cohort de pacients amb BC de l'est de Sicília i avaluar la seva associació amb trets específics de BC mitjançant la seqüenciació de la propera generació. %) tenien una variant patògena de BRCA, 17 (49%) en BRCA1 i 18 (51%) en BRCA2. Les alteracions de BRCA1 són freqüents en pacients amb BC triple negatiu, mentre que les mutacions de BRCA2 són més freqüents en pacients amb BC luminal. pacients de l'est de Sicília i confirmen el paper de l'anàlisi NGS en la identificació de pacients amb BC hereditària. En general, aquestes dades són coherents amb evidències prèvies que recolzen el cribratge de BRCA per a la prevenció i el tractament adequats del càncer en portadors de mutacions.
El càncer de mama (BC) és la malignitat més freqüent a tot el món i el càncer més mortal en les dones.1 Les característiques biològiques que determinen el pronòstic i el comportament clínic de la BC s'han estudiat àmpliament i s'han dilucidat parcialment al llarg del temps. De fet, actualment s'utilitzen diversos marcadors substituts per classificar BC en diferents subtipus moleculars. Són el receptor d'estrògens (ER) i/o el receptor d'estrògens (ER) i/o el receptor d'amplificació d'epidèrmica (FARF2) índex de proliferació Ki-67 i grau tumoral (G).2 La combinació d'aquestes variables va identificar les següents categories de BC: 1) Els tumors luminals, que mostraven expressió ER i/o PgR, representaven el 75% dels BC. Aquests tumors es van dividir a més en Luminal A, quan Ki-67 estava per sota del 20% i HER2 negatiu, i HER2 negatiu i per sobre de la presència de Ki-HER2720, i la presència de Ki-HER272 per sobre ció, independentment de l'índex de proliferació;2) Tumors HER2+ que són ER i PgR negatius però mostren amplificació de HER2. Aquest grup representa el 10% de tots els tumors de mama;3) El càncer de mama triple negatiu (TNBC), que no mostra expressió ER i PgR ni amplificació de HER2, representa al voltant del 15% dels càncers de mama.2-4
Entre aquests subtipus de BC, el grau tumoral i l'índex de proliferació representen biomarcadors transversals que estan directament i independentment associats amb l'agressivitat i el pronòstic del tumor.5,6.
A més de les característiques biològiques esmentades anteriorment, el paper de les alteracions genètiques hereditàries que condueixen al desenvolupament de BC ha adquirit cada vegada més importància durant els darrers anys.7 Al voltant d'1 de cada 10 tumors de mama s'hereten a causa d'alteracions de la línia germinal en gens específics.8 Dos grans estudis epidemiològics amb més de 180.000 dones han identificat recentment un grup de gens ATM, BRCA1 K2, PALB2, RAD51C i RAD51D) són els principals responsables de la BC hereditari. Entre aquests gens, BRCA1 i BRCA2 (d'ara endavant, BRCA1/2) van mostrar la correlació més forta amb el desenvolupament de tumors de mama. tic, colorectal i melanoma. Des dels 13 als 80 anys, la incidència acumulada de BC és del 72% en dones amb una variant patògena (PV) de BRCA1 i del 69% en dones amb PV BRCA2.14
En particular, una publicació recent suggereix que el risc de BC depèn del tipus de PV. De fet, en comparació amb les variants truncants patògenes, les variants de sentit equivocat flagrants, especialment en el gen BRCA1, s'associen amb un risc reduït de BC, especialment en dones grans.15
La presència de BRCA1 o BRCA2 PV es va associar a diferents característiques biològiques i clinicopatològiques.16,17 Els BC associats a BRCA1 solen ser clínicament agressius, poc diferenciats i altament proliferatius. Aquests tumors solen ser triple negatius i tenen una edat primerenca d'inici. n B i solen aparèixer en adults grans.16-18 En particular, les mutacions en BRCA1 i BRCA2 augmenten la sensibilitat a tractaments específics, com ara sals de platí i fàrmacs dirigits com els inhibidors de la poli(ADP-ribosa) polimerasa (PARPi)19,20.
Durant els darrers anys, la implementació de la seqüenciació de nova generació (NGS) a la pràctica clínica ha permès que un nombre creixent de pacients amb BC es sotmetin a proves moleculars per a síndromes de susceptibilitat al càncer, incloent BRCA1/2.21 Al mateix temps, definicions basades en criteris precisos sobre antecedents familiars, característiques demogràfiques i clinicopatològiques per identificar millor els individus que mereixen aquesta prova en el context BRCA21/22. 1/2 cribratge en poblacions específiques, destacant les diferències entre regions geogràfiques.24–27 Tot i que hi ha informes sobre la cohort BC a l'oest de Sicília, hi ha menys dades disponibles sobre el cribratge BRCA1/2 a la població de l'est de Sicília.28,29.
Descrivim aquí els resultats del cribratge de la línia germinal BRCA1/2 en pacients amb BC de l'est de Sicília, correlacionant encara més la presència de mutacions BRCA1 o BRCA2 amb les principals característiques clinicopatològiques d'aquests tumors.
Es va realitzar un estudi retrospectiu al "Centre d'Oncologia Experimental i Hematologia" del Policlinico Hospital.Rodolico – San Marco de Catània. De gener de 2017 a març de 2021, un total de 455 pacients amb càncer de mama i d'ovari, melanoma, pàncrees o pròstata van ser derivades al nostre laboratori de diagnòstic molecular per a la realització de la prova de diagnòstic molecular BRCA2 d'acord amb Helki. , i tots els participants van proporcionar el consentiment informat per escrit abans de l'anàlisi molecular.
Les característiques histològiques i biològiques (ER, PgR, estat HER2, Ki-67 i grau) del BC es van avaluar en mostres de biòpsia central o quirúrgiques, considerant només components tumorals agressius. En funció d'aquestes característiques, els BC es van classificar de la següent manera: luminal A (ER+ i/o PgR+, HER+, HER2-, HER2+-R672-, HER2+-R672-, ER2-, HER2-, ER2+-R6). -, Ki-67≥20%), B-HER2+ luminal (ER i/o PgR+, HER2+), HER2+ (ER i PgR-, HER2+) o triple negatiu (ER i PgR-, HER2-).
Abans d'avaluar l'estat de mutació BRCA1 i BRCA2, un equip multidisciplinari que inclou un oncòleg, un genetista i un psicòleg va realitzar una consulta de genètica tumoral per a cada pacient per determinar la presència de BRCA1 i/o BRCA1.o individus amb un alt risc de PV en el gen BRCA2. La selecció de pacients es va realitzar d'acord amb les directrius de la Societat Italiana d'Oncologia Mèdica (AIOM) i les recomanacions locals sicilianes.30,31 Aquests criteris inclouen: (i) antecedents familiars de variants patògenes conegudes en gens de susceptibilitat (per exemple, BRCA1, BRCA2, TP53, PTEN);(ii) mascles amb BC;(iii) els que tenen BC i OC;(iv) dones amb BC <36 anys, TNBC <60 anys o BC bilateral <50 anys;(v) antecedents mèdics personals de BC <50 anys i almenys un familiar de primer grau: (a) BC <50 anys;(b) OC no mucinos i no límit de qualsevol edat;(c) BC bilateral;(d) BC masculí;(e) càncer de pàncrees;(f) càncer de pròstata;(vi) dos o més antecedents personals de BC > 50 anys i antecedents familiars de BC, OC o càncer de pàncrees per als familiars que són parents de primer grau entre ells (inclosos els familiars amb els quals és familiar de primer grau);(vii) Antecedents personals d'OC i almenys un familiar de primer grau: (a) BC <50 anys;(b) NOC;(c) BC bilateral;(d) BC masculí;(vii) femella amb OC serós d'alt grau.
Es va obtenir una mostra de sang perifèrica de 20 ml de cada pacient i es va recollir en tubs EDTA (BD Biosciences). L’ADN genòmic es va aïllar a partir de mostres de sang sencera de 0,7 ml utilitzant el kit d’aïllament de DNA Qiasymfonia DNA ) Realitzar quantificació.L'enriquiment de la diana i la preparació de biblioteques els realitza l'Oncomine™ BRCA Research Assay Chef, a punt per carregar-se al kit Ion AmpliSeq™ Chef Reagents DL8 per a la preparació automatitzada de biblioteques d'acord amb les instruccions del fabricant. El kit consta de dos grups d'imprimació de PCR multiplex que es poden utilitzar per estudiar tots els cebadors BRCA1 (NM_007300. A continuació, es van afegir 15 µL de cada mostra diluïda d'ADN (10 ng) a plaques de codi de barres per a la preparació de la biblioteca i es van carregar tots els reactius i consumibles a l'instrument Ion Chef™. A continuació, es va realitzar la preparació automatitzada de la biblioteca i l'agrupació de la biblioteca de mostres amb codi de barres a l'instrument Ion Chef™. A continuació, es va avaluar el nombre de biblioteques preparades per Walorometer (MA3.0. d'acord amb les instruccions del fabricant. Finalment, les biblioteques es combinen en proporcions equimolars en tubs de mostres de biblioteca Ion Chef™ (tubs amb codi de barres) i es carreguen a l'instrument Ion Chef™. La seqüenciació es va realitzar amb un instrument Ion Torrent S5 (Thermo Fisher Scientific) (Thermo Fisher Scientific) mitjançant una anàlisi Ion 510 Fisher Scientific (Thermo Fisher Scientific). srl) i Ion Reporter Software.
Tota la nomenclatura de variants seguia les directrius actuals del Human Genome Variation Consortium, disponible en línia (HGVS, http://www.hgvs.org/mutnomen). La significació clínica de les variants BRCA1/2 es va definir mitjançant la classificació de l'International Consortium ENIGMA (Evidence-Based Network for Interpreting Germline Mutant Alleles), consultant diferents bases de dades com ara https://eni. CHANGE , ClinVar, IARC_LOVD i UMD. La classificació inclou cinc categories de risc diferents: benigne (categoria I), probable benigne (categoria II), variant de significació incerta (VUS, categoria III), probable patògena (categoria IV) i patògena (categoria V).
Per assignar una significació clínica potencial a cada VUS, es van utilitzar els següents algorismes de predicció de proteïnes computacionals: MUTATION TASTER, 33 PROVEAN-SIFT (http://provean.jcvi.org/index.php), POLYPHEN-2 (http:///genetics.bwh.harvard.edu/pph2/) i Align-GVGD. Els ariants classificats com a classe 1 i 2 es consideraven de tipus salvatge.
La seqüenciació de Sanger va confirmar la presència de cada variant patògena. Breument, es va dissenyar un parell d'encebadors específics per a cada variant detectada utilitzant les seqüències de referència dels gens BRCA1 i BRCA2 (NG_005905.2, NM_007294.3 i NG_012772.3, NM_0000059, NM_000005, respectivament). .
Els pacients que van resultar negatius per al gen BRCA1/2 van ser provats mitjançant l'amplificació de sondes dependents de la lligadura múltiple (MLPA) segons les instruccions del fabricant per avaluar la presència de grans reordenaments genòmics (LGR). Breument, les mostres d'ADN es desnaturalitzen i s'utilitzen fins a 60 sondes específiques del gen BRCA1 i BRCA2, cadascuna de les quals consisteix en una seqüència de seqüència d'ADN específica de longitud d'amplificació de pro-60. d'un conjunt únic d'amplicons de PCR, es van analitzar després mitjançant electroforesi capil·lar i el programari Cofalyser.Net juntament amb les taules Cofalyser específiques del lot (www.mrcholland.com).
Les variables clinicopatològiques seleccionades (grau histològic i índex de proliferació Ki-67%) es van associar amb la presència de BRCA1/2 PV, calculades mitjançant el programari Prism v. 8.4 mitjançant la prova exacta de Fisher assumint que el valor p <0,05 és significatiu.
Entre gener de 2017 i març de 2021, 455 pacients van ser examinats per mutacions BRCA1/2 de la línia germinal. Es van realitzar proves de mutació al Centre d'Oncologia i Hematologia Experimentals de l'Hospital Policlinico. Segons la guia siciliana (http://www.gurs.regione.sicilia.it/Indicep1.ht020m, Rogendì 2020), dolico de Catània – San Marco” en total, 389 pacients Hi havia càncer de mama, 37 càncer d'ovari, 16 càncer de pàncrees, 8 càncer de pròstata i 5 melanoma.La distribució dels pacients segons el tipus de càncer i els resultats de l'anàlisi es mostra a la figura 1.
La figura 1 mostra un diagrama de flux que mostra una visió general de l'estudi. En pacients amb tumors de mama, melanoma, pàncrees, pròstata o ovari es van provar mutacions en els gens BRCA1 i BRCA2.
Abreviatures: PVs, variant patògena;VUS, variant de significació incerta;WT, seqüència BRCA1/2 de tipus salvatge.
Hem centrat selectivament els nostres estudis en cohorts de càncer de mama. Les pacients tenien una edat mitjana de 49 anys (rang 23-89) i eren predominantment dones (n=376, o 97%).
D'aquests subjectes, 64 (17%) tenien mutacions BRCA1/2 i eren tots femenins. Trenta-cinc (9%) tenien PV i 29 (7,5%) tenien VUS. Disset (48,6%) de les 35 variants patògenes es van produir en BRCA1 i 18 (51,4%) en BRCA2, mentre que 5 (51,4%) en BRCA2, mentre que 5 (BRCA2817%) (BRCA2817%) i BRCA. 2 (Figures 1 i 2). LGR no estava present a l'anàlisi MLPA.
Figura 2. Anàlisi de les mutacions BRCA1 i BRCA2 en 389 pacients amb càncer de mama.(A) Distribució de variants patògenes (PV) (vermell), variants de significació incerta (VUS) (taronja) i WT (blau) en 389 pacients amb càncer de mama;(B) 389 pacients amb càncer de mama Trenta-cinc (9%) tenien variants patògenes (PV) BRCA1/2. Entre elles, 17 (48,6%) eren portadores de BRCA1 PV (vermell fosc) i 18 (51,4%) eren portadores de BRCA2 (vermell clar);(C) 29 (7,5%) de 389 subjectes portaven VUS, 5 (17,2%) gens BRCA1 (taronja fosc) i 24 (82,8%) gens BRCA2 (taronja clar).
Abreviatures: PVs, variant patògena;VUS, variant de significació incerta;WT, seqüència BRCA1/2 de tipus salvatge.
A continuació, es va investigar la prevalença dels subtipus moleculars de BC en pacients amb BRCA1/2 PV. La distribució incloïa 2 (5,7%) luminal A, 15 (42,9%) luminal B, 3 (8,6%) luminal B-HER2+, 2 (5,7%) HER2+ i 13 (37,1%) pacients TNBC (entre 92,41%) pacients TNBC (entre 92,415 positius). L'1,8%) tenia malaltia HER2+ i 10 (58,8%) tenien TNBC. Els tumors sense mutacions BRCA1 eren luminal A o luminal B-HER2+ (Figura 3). En el subgrup BRCA2 positiu, 10 (55,6%) tumors eren luminal B, 3 (16,7%) eren luminal B-HER16+, luminal B-HER16 %) i luminal B-HER1. Figura 3). No hi havia tumors HER2+ en aquest grup. Així, les mutacions de BRCA1 són freqüents en pacients amb TNBC, mentre que les alteracions de BRCA2 són predominants en individus de lumen B.
Figura 3 Prevalència dels subtipus de càncer de mama en pacients amb variants patògenes en BRCA1 i BRCA2. Histogrames que mostren la distribució dels PV BRCA1- (vermell fosc) i BRCA2- (vermell clar) entre els subtipus moleculars de pacients amb càncer de mama. Els números indicats dins de cada quadre representen el percentatge de pacients amb PV BRCA1 i BRCA2 per a cada subtipus de càncer de mama.
Abreviatures: PVs, variant patògena;HER2+, receptor 2 del factor de creixement epidèrmic humà positiu;TNBC, càncer de mama triple negatiu.
Posteriorment, es va avaluar el tipus i la localització gènica dels PV BRCA1 i BRCA2. En el PV BRCA1, es van observar 7 variants de nucleòtids únics (SNV), 6 delecions, 3 duplicacions i 1 inserció. Només una mutació (c.5522delG) representa un nou descobriment. TAAT. Aquesta alteració implica una supressió de cinc nucleòtids (CTAAT) a l'exó 15 de BRCA1, donant lloc a la substitució de l'aminoàcid leucina per tirosina al codó 1679, i a causa d'un canvi de marc de traducció amb un codó d'aturada alternatiu previst, condueix a un truncament prematur de la proteïna. regió dels EUA (c.4357+1G>T) (Taula 1).
Pel que fa a BRCA2 PV, hem observat 6 supressions, 6 SNV i 2 duplicacions. Cap dels canvis trobats és nou. Tres mutacions es van repetir a la nostra població, c.428dup i c.8487+1G>A observades en 3 subjectes, seguides de c.5851_5854del AGTT en dos casos recuperats. el 5 de BRCA2, es preveu que codifica una proteïna truncada i no funcional. La mutació c.8487+1G>A es produeix a la regió intrònica de l'intró 19 de BRCA2 (± 1,2) i afecta la seqüència de consens d'empalmament, donant lloc a un empalmament alterat que resulta en una variant anormal o absent de la proteïna anormal o absent a causa de la ruta c. la supressió de nucleòtids de les posicions de nucleòtids 5851 a 5854 a l'exó codificant 10 del gen BRCA2 i dóna lloc a un canvi de marc translacional amb un codó d'aturada alternatiu previst (p.S1951WfsTer). substitució de l'adenosina (A) a l'exó 7 de BRCA2 per una guanina (G) que conté nucleòtids que resulta en un canvi de valina a isoleucina al codó 211, isoleucina L'aminoàcid és un aminoàcid amb propietats molt similars. Aquest canvi afecta l'empalmament normal de l'ARNm. ding BRCA2. El canvi c.7008-2A>T pot generar múltiples transcripcions de diferents longituds. A més, en el grup de PV BRCA2, 4 de 18 canvis (22,2%) eren intrònics.
A continuació, vam cartografiar mutacions nocives de BRCA1/2 en dominis funcionals i regions d'unió a proteïnes (Fig. 4). Al gen BRCA1, el 50% dels PV es van localitzar a la regió del clúster del càncer de mama (BCCR), mentre que el 22% de les mutacions es van localitzar a la regió del clúster del càncer d'ovari (OCCR) (Fig. 4A). El 8% de les mutacions es van localitzar a l'OCCR (Fig. 4B). A continuació, vam avaluar la ubicació de la PV dins dels dominis de proteïnes BRCA1 i BRCA2. Per a la proteïna BRCA1, vam trobar tres PV als dominis de bucle i bobina en espiral i dues mutacions al domini BRCT (Fig. 4A). Es van detectar canvis exònics als dominis d'unió a oligo/oligosacàrids (OB) i torre (T) (figura 4B).
Figura 4 Representació esquemàtica de les proteïnes BRCA1 i BRCA2 i localització de les variants patògenes. Aquesta figura mostra la distribució de les variants patògenes BRCA1 (A) i BRCA2 (B) en pacients amb càncer de mama. Les mutacions exòniques es mostren en blau, mentre que les variants intròniques es mostren en taronja. L'alçada de la barra representa el nombre de casos. domini de bucle (RING) i una seqüència de localització nuclear (NLS), un domini de bobina enrotllada, un domini de clúster SQ/TQ (SCD) i un domini C-terminal BRCA1 (BRCT). ), i un NLS a la cara C. A la part inferior es mostren les àrees anomenades Breast Cancer Cluster Region (BCCR) i Ovarian Cancer Cluster Region (OCCR).*Representa mutacions que determinen els codons stop.
A continuació, es van investigar les característiques clinicopatològiques del BC que podrien correlacionar-se amb la presència de BRCA1/2 PV. Hi havia registres clínics complets disponibles per a 181 pacients BRCA1/2 negatius (no portadors) i tots els portadors (n = 35). Hi va haver una correlació entre la taxa de proliferació tumoral i el grau.
Hem calculat la distribució de Ki-67 a partir de la mediana de la nostra cohort (25%, rang <10-90%). Els subjectes amb Ki-67 < 25% es van definir com a "Ki-67 baix", mentre que els individus amb valors ≥ 25% es van considerar "Ki-67 alt". ers (Fig. 5A).
Figura 5 Correlació de Ki-67 amb la distribució de graus en dones amb càncer de mama amb i sense BRCA1 i BRCA2 PVs. grups (G2 i G3) segons l'estat de mutació BRCA1 i BRCA2 (subjectes WT, portadors de PV BRCA1 i BRCA2).
Així mateix, es va examinar si el grau del tumor es correlacionava amb la presència de BRCA1/2 PV. Atès que G1 BC estava absent a la nostra població, vam dividir els pacients en dos grups (G2 o G3). D'acord amb els resultats de Ki-67, l'anàlisi va revelar una correlació estadísticament significativa entre el grau del tumor i la mutació BRCA1, amb una proporció més alta de portadors de tumors BRCA1 (Fig. 50). ure 5B).
Els avenços en la tecnologia de seqüenciació de l'ADN han permès avenços sense precedents en les proves genètiques BRCA1/2, amb implicacions crucials per als pacients amb antecedents familiars de càncer. Fins ara, aproximadament 20.000 variants de BRCA1/2 s'han identificat i classificat segons la Societat Americana de Genètica Mèdica35 i el sistema ENIGMA35,36. la taxa de PV BRCA1/2 va oscil·lar entre el 8% i el 37%, mostrant una gran variabilitat intra-país.38,39 Amb una població de gairebé 5 milions, Sicília és la cinquena regió més gran d'Itàlia pel que fa al nombre d'habitants. Tot i que existeixen dades sobre la distribució de BRCA1/2 a l'oest de Sicília, no hi ha cap evidència extensa a l'illa oriental.
El nostre estudi és un dels primers informes sobre la incidència de BRCA1/2 PV en pacients amb BC a l'est de Sicília.28 Hem centrat la nostra anàlisi en BC, ja que aquesta és, amb diferència, la malaltia més freqüent de la nostra cohort.
Quan es van provar 389 pacients BC, el 9% portaven BRCA1/2 PV, distribuïts uniformement entre BRCA1 i BRCA2. Aquests resultats són coherents amb els reportats anteriorment a la població italiana. , cap d'aquests homes va desenvolupar un BRCA1/2 PV, per la qual cosa eren candidats a una anàlisi molecular més profunda per descartar la presència de mutacions menys comunes com PALB2, RAD51C i D, entre d'altres. Es van recuperar variants de significació incerta en un 7% dels subjectes en què era evident BRCA2 VUS. Fins i tot aquest resultat és coherent amb l'evidència preexistent428,41.
Quan vam analitzar la distribució dels subtipus moleculars de BC en dones mutants de BRCA1/2, vam confirmar associacions conegudes entre TNBC i BRCA1 PV (58,8%) i entre luminal B BC i BRCA2 PV (55,6%).16,43.
A continuació, ens centrem en el tipus i la ubicació del PV BRCA1/2. A la nostra cohort, el PV BRCA1 més comú va ser c.5035_5039delCTAAT.Tot i que Incorvaia et al.No van descriure aquesta variant a la seva cohort siciliana, altres autors l'han informat com una línia germinal BRCA1 PV.34 A la nostra cohort es van trobar diversos PV BRCA1, p. 266dupC) es troben habitualment en jueus asquenazis d'Europa de l'Est i Central (Polònia, Txeca), eslovè, austríac, hongarès, bielorús i alemany), 44,45 i, als Estats Units i l'Argentina, es va definir recentment com una "variant de línia germinal recurrent" en pacients italians amb BC i OC. El càncer 34c. , fins i tot Incorvaia et al.va trobar la variant c.3253dupA en algunes famílies de Catània.28 Els PV BRCA2 més representatius són c.428dup, c.5851_5854delAGTT i la variant intrònica c.8487+1G>A, que s'han informat amb més detall 28 en un pacient de Palerm amb c.428dup a casa del nord-oest observada a Palerm, c.428dup, c. Sicília, principalment a les regions de Trapani i Palerm, mentre que c.5851_5854delAGTT PV es va observar a les llars del nord-oest de Sicília. La variant 8487+1G>A era més freqüent en subjectes de Messina, Palerm i Caltanissetta.28 Rebbeck et al.descriure anteriorment l'alteració c.5851_5854delAGTT a Colòmbia.37 S'ha trobat un altre PV BRCA2, c.631+1G>A, en pacients BC i OC de Sicília (Agrigent, Siracusa i Ragusa).28 Cal destacar la coexistència de dues variants de BRCA2 (BRCA22>A, 631+1G>A i el mateix pacient que assumim en el mateix pacient BRCA70T0>A, 6>A1700>A, 6, 3). d per ser segregada en mode cis, com s'ha informat anteriorment així.34,46 Aquestes mutacions BRCA2 uble s'observen de fet amb freqüència a la regió italiana i s'ha trobat que introdueixen codons d'aturada prematurs, afectant l'empalmament de l'ARN missatger i fent que la proteïna BRCA2 falli.47,48.
També vam mapejar els PV BRCA1 i BRCA2 en regions putatives OCCR i BCCR de dominis proteics i gens. Aquestes regions van ser descrites per Rebbeck et al.Com a àrees de risc per desenvolupar càncer d'ovari i de mama, respectivament.49 No obstant això, l'evidència sobre l'associació entre la localització de variants de la línia germinal i el risc de càncer de mama o d'ovari segueix sent controvertida.28,50-52 A la nostra població, els PV BRCA1 es van localitzar predominantment a la regió BCCR, mentre que els PV BRCA2 es van localitzar predominantment a la regió OCCR i OCCR. i característiques de BC. Això pot ser degut al nombre limitat de pacients amb mutacions BRCA1/2. Des de la perspectiva del domini proteic, els PV BRCA1 es distribueixen al llarg de tota la proteïna, i les alteracions de BRCA2 es troben preferentment en el domini de repetició BRC.
Finalment, vam correlacionar les característiques clinicopatològiques de BC amb BRCA1/2 PV. A causa del nombre limitat de pacients inclosos, només vam trobar una correlació significativa entre Ki-67 i el grau del tumor. Tot i que la valoració i interpretació de Ki-67 segueix sent una mica controvertida, és segur que les altes taxes de proliferació s'associen amb un augment del risc de recurrència i una disminució de la supervivència de la malaltia. 20%. No obstant això, aquest llindar no s'aplica a la nostra població de pacients amb mutació BRCA1/2, que té un valor mitjà de Ki-67 del 25%. Aquesta tendència a les altes taxes de Ki-67 es pot explicar per la prevalença en les nostres cohorts luminals B i TNBC, de les quals hi havia pocs tumors luminals A. 53,54 Dels resultats de la nostra anàlisi, una correlació significativa no és sorprenent. Es produeix entre Ki-67 i graus elevats i la presència de BRCA1 PV. De fet, els tumors relacionats amb BRCA1 són típics del TNBC i presenten característiques més agressives.16,17.
En conclusió, aquest estudi proporciona un informe sobre l'estat mutacional de BRCA1/2 en una cohort de BC de l'est de Sicília. En general, les nostres troballes són coherents amb evidències preexistents, tant pel que fa a la prevalença de la mutació com a les característiques clinicopatològiques a la BC. més freqüent que BRCA1/2. Això permetrà identificar i gestionar correctament el nombre creixent de subjectes amb major risc de càncer a causa de mutacions genètiques.
Vam confirmar que els pacients van signar el consentiment informat per alliberar les seves mostres de tumor de manera anònima amb finalitats d'investigació. Tots els pacients van signar el consentiment informat per escrit d'acord amb la Declaració d'Hèlsinki. D'acord amb la política de l'AOU Policlinico "G.Rodolico - S.Marco", aquest estudi va estar exempt de la revisió ètica perquè l'anàlisi BRCA1/2 es va realitzar d'acord amb les dades de la pràctica clínica i el consentiment dels pacients també van donar el seu consentiment per a la pràctica clínica. .
Agraïm al Prof. Paolo Vigneri la seva assistència en l'atenció de pacients amb càncer de mama tal com ha sol·licitat el Comitè d'Ètica.
Federica Martorana reporta honoraris d'Istituto Gentili, Eli Lilly, Novartis, Pfizer. Els altres autors declaren que no hi ha conflictes d'interès en aquest treball.
1. Sung H, Ferlay J, Siegel RL, et al.Global Cancer Statistics 2020: GLOBOCAN estima la incidència i la mortalitat de 36 càncers a 185 països del món.CA Cancer J Clin.2021;71(3):209-249.doi: 10.3326/caac.212