”Tvivl aldrig på, at en lille gruppe af betænksomme, dedikerede borgere kan ændre verden.Faktisk er det den eneste der.”
Cureus' mission er at ændre den langvarige model for medicinsk publicering, hvor forskningsindsendelse kan være dyrt, komplekst og tidskrævende.
Blodpladerigt plasma/prp, vævsregenerering, blodpladeaktivering, glukoseproliferativ terapi, blodplader, proliferativ terapi
Citer denne artikel som: Harrison TE, Bowler J, Reeves K, et al.(17. maj 2022) Effekten af ​​glukose på blodpladetal og volumen: implikationer for regenerativ medicin.Kur 14(5): e25081.doi:10.7759/cureus.25081
Blodpladerigt plasma (PRP) og hypertoniske glukoseopløsninger bruges almindeligvis til injektion i regenerativ medicin, nogle gange sammen.Effekten af ​​hypertonisk glucose på blodpladelyse og aktivering er ikke tidligere blevet rapporteret.Vi testede effekten af ​​forhøjede glukosekoncentrationer på blodplade- og erytrocyttal, samt cellevolumen i PRP og fuldblod (WB).En hurtig delvis reduktion i trombocyttallet forekom med alle glukoseblandinger blandet med PRP eller fuldblod, i overensstemmelse med delvis lysis. Efter det første minut forblev trombocyttallet stabilt, hvilket tyder på en hurtig tilpasning af resterende blodplader til ekstrem (>2000 mOsm) hypertonicitet. Efter det første minut forblev trombocyttallet stabilt, hvilket tyder på en hurtig tilpasning af resterende blodplader til ekstrem (>2000 mOsm) hypertonicitet. После первой минуты количество тромбоцитов оставалось стабильным, что указывает на быструю аккомоцитов до экстремального (>2000 мОсм) гипертонуса. Efter det første minut forblev blodpladetallet stabilt, hvilket indikerer en hurtig akkommodation af de resterende blodplader til ekstrem (>2000 mOsm) hypertonicitet.第一分钟后，血小板计数保持稳定，表明残余血小板迅速适应极端（竁s.2000 m.2000 mOsm）高渗状态. После первой минуты количество тромбоцитов оставалось стабильным, что указывает на быструю адаптацицов экстремальному (>2000 мОсм) гиперосмолярному состоянию. Efter det første minut forblev blodpladetallet stabilt, hvilket indikerer en hurtig tilpasning af de resterende blodplader til den ekstreme (>2000 mOsm) hyperosmolære tilstand.Glucosekoncentrationer på 25 % og derover resulterede i en signifikant stigning i middel blodpladevolumen (MPV), hvilket indikerer et tidligt stadium af blodpladeaktivering.Yderligere undersøgelser er nødvendige for at bestemme, om blodpladelyse eller aktivering forekommer, og om hypertonisk glucoseinjektion alene eller i kombination med PRP kan give yderligere klinisk fordel.
I 1950'erne opdagede den amerikanske kirurg George Hackett, at han permanent kunne lindre led- og rygsmerter hos mange patienter ved at injicere en proliferativ opløsning i sener og ledbånd.Hans eksperimenter på kaniner viste, at behandlingen, som han kaldte proliferativ terapi, fik senerne til at forstørre og styrke.Histologiske undersøgelser har bekræftet, at der produceres nyt kollagen under denne proces [1].
I løbet af de første årtier blev mange forskellige distributionsløsninger afprøvet.I 1990'erne anså de fleste praktiserende læger, at høje koncentrationer af glucose var den sikreste og mest effektive metode.Virkningsmekanismen er dog stadig uklar.
Få kliniske undersøgelser blev udført i det 20. århundrede efter Hacketts arbejde.Men i 2000'erne var der fornyet interesse, og adskillige vellykkede kliniske forsøg med proliferativ terapi blev afsluttet til behandling af lænderygsmerter [2], slidgigt i knæet [3] og lateral epicondylitis [4].
Vævsregenerering kræver deltagelse af stamceller.Derfor skal høje koncentrationer af glucose på en eller anden måde inducere migration, replikation og differentiering af stamceller.Vi antager, at blodplader kan fungere som budbringere, og at høje glucosekoncentrationer kan få blodplader til at frigive cytokiner og vækstfaktorer, og derved fremme regenerative processer, især stamcellemigration til områder med høje glucosekoncentrationer.
Blodpladeaktivering går altid forud for en stigning i intracellulært calcium [5].Liu et al.i 2008 viste, at høje glucoseniveauer øger aktiviteten af ​​transient receptor potential canonical type 6 (TRPC6) kanaler i plasmamembranen, hvilket fører til en tilstrømning af calciumioner til blodplader [6].En anden undersøgelse viste, at eksponering af mikrotubulus marginalzone for calciumioner forårsager afslapning, udvidelse og deformation af marginalzonen, hvilket igen forårsager en ændring i form fra disk til sfærisk, hvilket resulterer i middel blodpladevolumen (MPV) [7].
Vores hypotese i denne undersøgelse er, at eksponering af blodplader for høje koncentrationer af glucose påvirker mikrotubulus marginale zone og intracellulære miljø, hvilket fører til en stigning i MPV.
Alle deltagere underskrev en informeret samtykkeformular, efter at detaljerne i undersøgelsen blev forklaret, og før de modtog prøverne.I denne undersøgelse blev kun PRP-prøver med en hæmatokrit større end 2% brugt, således at erytrocyttal (erythrocytter) og gennemsnitlig korpuskulær volumen af ​​røde blodlegemer (MCV) kunne inkluderes til sammenligning.
Undersøgelsen blev udført i fire faser, den første fase var PRP og de resterende faser var fuldblod (tabel 1).Som beskrevet tidligere [8] blev alle relative centrifugalkræfter (RCF, g-kraft) beregnet ud fra midtpunktet (Rmid, i cm) af blodsøjlen i centrifugalsprøjten.Vi valgte at bruge MPV som en markør for blodpladesensibilisering og trombocyttal som en indikator for potentiel blodpladelysis, som begge nemt kan måles på standard hæmatologianalysatorer.
I den første fase donerede 47 frivillige blodprøver - et rør med ethylendiamintetraeddikesyre (EDTA) og en PRP fuldblodsprøve (antikoaguleret med natriumcitrat (NaCl, 3%)) (tabel 1).Placer vippen i røret med det samme.Komplet blodtælling (CBC) blev udført på EDTA-prøver i tre eksemplarer, og NaCl-prøver blev analyseret i tre eksemplarer til CBC-analyse, og derefter blev PRP fremstillet ved forskellige metoder beskrevet ovenfor [8].Alle PRP-prøver blev fremstillet ved centrifugering ved 900-1000 g.Bland hver PRP-prøve på en vortexmixer i 5-10 sekunder, og del derefter fem 0,5 ml alikvoter i rør.
For at evaluere effekten af ​​blodpladeeksponering på forhøjede glukosekoncentrationer blev lige store mængder (0,5 ml) af 0 %, 5 %, 12,5 %, 25 % og 50 % glukose i vand blandet med blodpladeprøver for at opnå 0 %, 2,5 % 6,25 %, 12,5 % glucose-koncentration i et glas og 25 % glukose i et glas og 25 % glukose i et glas. minutter.TAC'en for hver blanding blev analyseret i tre eksemplarer efter 15 min.Blodpladetal (PLT), RBC-tal, MCV og MPV blev beregnet som gennemsnit for hvert rør, og gennemsnitlig blodpladetal, RBC-tal, MCV og MPV blev beregnet for alle PRP-prøver.
Efter den første fase af dataindsamlingen var afsluttet, bemærkede vi en signifikant stigning i blodpladevolumen i PRP-blodplader efter tilsætning af D50W.PRP-blodplader repræsenterer ikke nødvendigvis alle blodplader i blodet, og PRP-medium adskiller sig fra WB-medium.Derfor besluttede vi at gennemføre en anden fase-undersøgelse af effekten af ​​at tilsætte D50W til fuldblod.
Til anden runde valgte vi en stikprøvestørrelse på 30 baseret på resultaterne fra den første serie, som beskrevet i afsnittet Analyse.I denne serie donerede 20 frivillige blodprøver (tabel 1).Fuldblod (1,8 ml) blev trukket ind i en 3 ml sprøjte og antikoaguleret med 0,2 ml 40% NaCl.Fuldblodssprøjten blev blandet i fem sekunder med en vortex-mixer, og CBC'en blev analyseret i tre eksemplarer.Efter analyse blev antikoaguleret blod tilsat til 2 ml 50% glukose i en 5 ml sprøjte (endelig glukosekoncentration var ca. 25% (D25) og anbragt i et rysterør i 30 minutter. Efter 30 minutter blev D25/CBC i WB sprøjter analyseret i tre eksemplarer. Blodplade-MP-tal, RBC-tal, PV-tal, PV-tal, og RBC-tal, og RBC-tal var gennemsnitligt. , MCV og MPV blev beregnet for hver prøve før og efter tilsætning af glucose.
Fordi blodplader i fuldblod almindeligvis udsættes for hypertonisk glukose under proliferativ glukosebehandling på grund af minimalt invasiv injektion, og det ikke er almindeligt at kombinere PRP med hyperton glukose lige før injektion, besluttede vi at undersøge hypertonisk glukose i kombination med WB i afsnit 1. Trin tre og fire.På hvert trin donerede 20 frivillige 7-8 ml ACD-A (syre indeholdende trinatriumcitrat (22,0 g/l), citronsyre (8,0 g/l) og glucose (24,5 g/l), opløsning af dextrosecitrat) til blodantikoagulanter (tabel 1).Kun blandinger af glukose på mere end 12,5% blev brugt til at bestemme tærskelprocenten forbundet med en stigning i MPV.I tredje fase anbringes 1 ml blod i et reagensglas.Bland derefter blodet på en vortexmixer i 10 sekunder ved at tilsætte 1 ml 30% glucose, 40% glucose eller 50% glucose til røret for at opnå en endelig glucosekoncentration på henholdsvis 15%, 20% og 25%.Glukoseblodprøver blev analyseret for CBC umiddelbart efter blanding og gentaget hvert andet minut i 30 minutter.
Under den indledende blanding udsætter tilsætningen af ​​1:1 hypertonisk glucose og WB eller PRP blodplader for koncentrationer over 25 % i adskillige sekunder.I det fjerde trin tilsatte vi kun en lille mængde blod til D25W eller D50W for at evaluere effekten af ​​hypertonisk glukose med minimale indledende spidskoncentrationer og teste den øvre grænse for virkningen af ​​glukose.Anbring 1 ml D25W eller D50W i et rør og tilsæt 0,2 ml WB, mens prøven vortexes i 10 sekunder.I disse tilfælde blev blodet udsat for glukose i en koncentration ca. 20 % over slutkoncentrationen i stedet for 50 % over slutkoncentrationen som i fase 3, hvilket resulterede i endelige glukosekoncentrationer på 20,8 % og 41,6 %.Blandede prøver blev analyseret med samme tidsinterval som i trin 3.
I det første trin af hver glukosefortyndingsserie blev der udtaget 30 prøver, da dette var den passende prøvestørrelse til pilotundersøgelsen [9].Ved slutningen af ​​hver fase (inklusive den første fase), evaluer stikprøvestørrelsens tilstrækkelighed ved hjælp af den formel, der bruges til at bestemme den stikprøvestørrelse, der er nødvendig for at estimere gennemsnittet af den kontinuerlige udfaldsvariabel i én population.Formel n = Z2 x SD2/E2.I denne ligning er Z Z-score, SD er standardafvigelsen, og E er den ønskede fejl [10].Vores alfa er 0,05, hvilket svarer til en Z-værdi på 1,96, og vi forventer en fejl på 5 (i procent).Derfor løser vi for n = (1,962 x SD2)/52.Resultaterne viste, at den nødvendige stikprøvestørrelse for hvert trin var mindre end det faktisk indsamlede antal.
Under periode 1, 3 og 4 under anvendelse af mere end én glukosekoncentration blev effekten af ​​forskellige glukosekoncentrationer analyseret ved at sammenligne fraktionsændringen mellem tid 0 og hver efterfølgende tid (fase 1 efter 15 minutter, periode 3 efter 15 minutter).og fire ved 15 sekunder, derefter hvert andet minut.) Ændringshastigheder for hver tidsperiode blev sammenlignet ved hjælp af Mann-Whitney U-testen, fordi dataene ikke fulgte en normalfordeling som bestemt af Shapiro-Wilk normalitetstesten.Da en 1-til-1-analyse af flere grupper (fem) blev udført i det første, tredje og fjerde trin (fem i alt), blev der udført en Bonferroni-korrektion for at justere den ønskede alfaværdi til ≤0,01, men ikke ≤0,05.
Reduktion af trombocyttal med alle koncentrationer af hypertonisk dextrose og en stigning i MPV i PRP-blodplader ved >12,5 % dextrosekoncentration: PRP-blodpladetal steg fra en til fem gange koncentration sammenlignet med baseline fuldblod, varierende efter metoden (ikke afbildet). Reduktion af blodpladetal med alle koncentrationer af hypertonisk dextrose og en stigning i MPV i PRP-blodplader ved >12,5 % dextrosekoncentration: PRP-blodpladetal steg fra en til fem gange koncentrationen sammenlignet med baseline fuldblod, varierende efter metoden (ikke afbildet). Уменьшение количества тромбоцитов при всех концентрациях гипертонической декстрозы и увеличение MPV процвц в RP рации декстрозы > 12,5 %: количество тромбоцитов PRP увеличилось в 1-5 раз по сравнению с исходной цельвиз исходной цельвиз етода (nе показано). Nedsat blodpladetal ved alle hypertoniske dextrosekoncentrationer og øget MPV i PRP-blodplader ved >12,5 % dextrosekoncentration: PRP-blodpladetal steg 1-5 gange sammenlignet med baseline fuldblod, afhængig af metode (ikke vist). ).在> 12,5% 的葡萄糖浓度下，所有浓度的高渗葡萄糖降低血小板计数，MP线全血相比，PRP 血小板计数从浓度的1 倍上升到5 倍，因方法而异（未／艏 Ved >12,5 % glukosekoncentration reducerer den høje koncentration af glukose blodtallet, PRP blod MPV stiger: sammenlignet med 与基线全血 stiger PRP blodtallet fra 1 til 5 gange koncentrationen (ikke beskrevet). При концентрациях глюкозы >12,5% все концентрации гипертонической глюкозы снижали количество MP, тромбоцитах PRP: количество тромбоцитов PRP увеличивалось от 1- til 5-кратных концентраций по сравниц и цельной крови, в зависимости от метода (nе описано ). Ved glukosekoncentrationer >12,5 % reducerede alle hypertensive glukosekoncentrationer trombocyttallet og øgede MPV i PRP-blodplader: PRP-blodpladetallet steg 1- til 5 gange sammenlignet med baseline fuldblodskoncentrationer, afhængigt af metoden (som beskrevet).Figur 1 viser, at antallet af blodplader faldt med næsten 75% efter fortynding i vand og med 20-30% efter 15 minutters fortynding med forskellige koncentrationer af glukose sammenlignet med baseline PRP og en 1:1 fortynding justeret for volumen (1-k1 med volumen korrektion).k -1 avl).1 avl).
Antallet af celler i hver fortynding er udtrykt som en brøkdel af det oprindelige antal før fortynding.
MPV faldt minimalt under PRP-produktion, uden yderligere ændring i fortyndingskoncentrationer til 12,5 % i vand eller glukose (inklusive 25 % PRP-glucoseblandinger) og steg med mere end 20 % efter fortynding i 50 % glukoseopløsning (fig. .2).).I modsætning hertil viste erytrocytter ingen signifikant ændring i volumen ved nogen anden fortynding end H2O.
Det gennemsnitlige volumen af ​​celler i hver fortynding er udtrykt som en procentdel af det oprindelige volumen før fortynding.
En lignende, men mindre udtalt reduktion i trombocyttal og stigning i CVR blev observeret i BC udsat for 50% glucose (for at formulere med 25% glucose).Tabel 2 sammenligner celletal og cellevolumener i fuldblod fortyndet i 50 % dextrose med fase 1 PRP-data fortyndet i 50 % dextrose.Ændringer i RBC-tal og RBC MCV var ikke indlysende og var ikke i fokus for vores opmærksomhed.
SD = standardafvigelse, MD = gennemsnitlig forskel mellem grupper, SE = standardafvigelse af gennemsnitlig forskel, RBC = erytrocytter, PLT = blodplader, PRP = blodpladerigt plasma, WB = fuldblod
Efter tilsætning af D50W til WB var det procentvise fortyndingsjusterede blodpladetab 7,7% (310±73 vs. 286±96) sammenlignet med 17,8% for PRP-fortynding i D50W (664±348 vs. 544±277).MPV WB steg med 16,8 % (fra 10,1 ± 0,5 til 11,8 ± 0,6), mens MPV PRP steg med 26 % (9,2 ± 0,8 vs. 11,6 ± 0,7). Selvom de gennemsnitlige forskelle i både blodpladereduktion og MPV-stigning var signifikant mere med PRP, var ændringerne i blodpladetalsreduktion inden for WB næsten signifikante (310 ± 73 til 286 ± 96 (-7,7 %); p = 0,06), og stigningen i MPV var signifikant (10,1 ± 0,5 til 1,08 p) < ± 0,1 (± 0,8) (± 0,8) (+1). Selvom de gennemsnitlige forskelle i både blodpladereduktion og MPV-stigning var signifikant mere med PRP, var ændringerne i blodpladetalsreduktion inden for WB næsten signifikante (310 ± 73 til 286 ± 96 (-7,7 %); p = 0,06), og stigningen i MPV var signifikant (10,1 ± 0,5 til 1,08 p) < ± 0,1 (± 0,8) (± 0,8) (+1).Selvom de gennemsnitlige forskelle i både blodpladereduktion og CVR-stigning var signifikant større med PRP, var ændringer i blodpladetalsfald inden for WB næsten signifikante (310 ± 73 til 286 ± 96 (-7,7 %); p = 0,06).увеличение MPV было значительным (от 10,1 ± 0,5 til 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001). stigningen i MPV var signifikant (fra 10,1 ± 0,5 til 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001).尽管PRP 在血小板计数减少和MPV 增加方面的平均差异显着更大，但WB 内谄叏几乎是显着的（310 ± 73 至286 ± 96 (-7,7%)；p = .06）和MPV 的增加是显着的（10.51 刈10.51 ± 10.51 ± 10.51 ± 10.51 ± 001).尽管 PRP.的 几乎 是 显着 的 （（（（310 ± 73 至 286 ± 96 (-7.7%) ； p = .06）和MPV 的增加睈睯昚1.（1. ± 0,6 (+16,8) p < 0,001）.Ændringen i blodpladetalsreduktion inden for WB var næsten signifikant (fra 310 ± 73 til 286 ± 96 (-7,7 %); p = 0,06), selvom PRP havde signifikant større gennemsnitlige forskelle i blodpladetalsfald og MPV-stigning.og stigningen i MPV var signifikant.(от 10,1 ± 0,5 til 11,8 ± 0,6 (+16,8) р < 0,001). (fra 10,1 ± 0,5 til 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001).
En slutkoncentration på 20 % glucose var påkrævet for at se en signifikant ændring i MPV, men ændringen i MPV var mere udtalt ved den endelige koncentration på 25 %.Blodpladetab stabiliserede sig efter det indledende fald.Vi bemærkede et initialt kraftigt fald i CVR, men CVR blev hurtigt genoprettet ved den endelige glukosekoncentration på 25 %, hvilket var signifikant højere end de CVR-niveauer, der blev observeret ved de endelige glukosekoncentrationer på 20 % og 15 % (Fig. 3 og til venstre for Tabel 3; skraverede kasser).angive p-værdier ≤ alfa med en Bonferroni-korrektion på 0,01).Der var også et indledende kraftigt fald i antallet af PLT, observeret i den indledende fase på 0-15 s, og forblev derefter stabilt (fra 15 s til 30 min; til venstre for tabel 4).
Tilsætning af forskellige koncentrationer af glucose til fuldblod resulterede i et initialt hurtigt fald i MPV efterfulgt af en koncentrationsafhængig genopretning på mere end 20 %.Forklaringen viser koncentrationen af ​​glucose efter fortynding.D15, D20 og D25 blev udført i en 1:1 fortynding.D21 og D41 blev udført i en 1:5 fortynding.
Tabel 4 viser ændringen i blodpladetal, når det fortyndes i hypertonisk glucose.Vi observerede et dosisafhængigt forhold mellem det øjeblikkelige fald i PLT-tal ved 1:1-fortyndingen og ved 1:5-fortyndingen.Ved at sammenligne 1:1-fortyndingerne som en enkelt gruppe med 1:5-fortyndingerne havde 1:1-gruppen et øjeblikkeligt fald i blodpladetal mindre end 1:5-gruppen 66±48.000 (23%) versus 99±69.000 (37%)., p = 0,014) i 1:5-gruppen.Efter et indledende fald ved det første målepunkt, trombocyttallet som en procentdel af stabiliseret glukose (fig. 4).
Når fuldblod tilsættes glukose i forholdet 1:1, reduceres blodpladetallet med omkring 25 %.Men når fuldblod blev tilsat i forholdet 1:5, var reduktionen meget større – omkring 50 %.
41 % glukose øgede MPV hurtigere og mere dramatisk end 25 % eller 21 %.MPV-resultater er vist i figur 3. Ved alle andre fortyndinger blev der ikke observeret noget øjeblikkeligt initialt fald i MPV efter tilsætning af 50 % glucose.Ved anvendelse af 25% glucose (glucosekoncentration 20,8% ved den endelige fortynding), var ændringen i MPV sammenlignelig med ændringen i 20% glucose ved en 1:1 fortynding (fig. 3).Selvom ændringer i MPV oprindeligt var større ved den blandede koncentration på 41 % end ved 25 %, var forskellen i MPV mellem 41 % og 25 % efter 16 minutter ikke længere signifikant (tabel 3, til højre).Det er også interessant, at 25 % glukose øgede MPV mere effektivt end 20,8 %.
Denne in vitro undersøgelse bekræftede delvist vores hypotese. Det viste potentiel partiel blodpladelyse ved dextroseblanding, en hurtig tilpasning af blodplader til ekstrem hypertonicitet og en signifikant stigning i MPV som reaktion på > 25 % koncentrationer af hypertonisk dextrose. Det viste potentiel partiel blodpladelyse ved dextroseblanding, en hurtig tilpasning af blodplader til ekstrem hypertonicitet og en signifikant stigning i MPV som reaktion på > 25 % koncentrationer af hypertonisk dextrose. Он показал потенциальный частичный лизис тромбоцитов примесью декстрозы, быструю аккомогодацию тромби пертонуса и значительное повышение MPV в ответ på гипертоническую концентрацию декстрозы > 25%. Det viste potentiel partiel blodpladelyse med dextrose, hurtig trombocytackommodation til ekstrem hypertonicitet og en signifikant stigning i MPV som reaktion på hypertone dextroseniveauer >25 %.它显示出通过葡萄糖混合物潜在的部分血小板溶解，血小板快速逓适应极竌2> % 浓度的高渗葡萄糖时MPV 显着上升.它 显示 出 通过 葡萄糖 潜在 的 部分 血小板 溶解 血小板 快速 适庯 极珌应> 25% 浓度 高渗 葡萄糖 时 时 mpv 显着。。。。。 Он показывает потенциальный частичный лизис тромбоцитов смесями с глюкозой, быструю адаптацитовацию гипертонусу и значительное увеличение MPV в ответ на концентрацию гипертонической глюкозы > 25%. Det viser potentiel partiel blodpladelysis af glucoseblandinger, hurtig trombocyttilpasning til ekstrem hypertonicitet og en signifikant stigning i MPV som reaktion på hypertonisk glucose >25%.Den indledende stigning var maksimal ved 41,6 % glucoseeksponering, men stigningen i MPV nærmede sig 25 % glucoseeksponering ca. 20 minutter efter eksponering.
Koncentrationen af ​​blodplader påvirkes af glukose.Vi bemærkede, at mængden af ​​PLT faldt ved alle fortyndinger af glucose.Et kraftigt fald i antallet af blodplader i H2O (0%) fortyndinger af PRP-serien kan være forbundet med osmotisk lysis.Alternativt kan dette være en artefakt forårsaget af blodpladeklumpning, men dette er i modsætning til manglen på MPV-ændring ved denne fortynding.Dette fund betyder, at nogle blodplader er meget følsomme over for hypoosmolaritet.
I alle 1:1 fortyndinger af glucose faldt mængden af ​​PLT med 20-30%, selv med D5W (hypotonisk ved 252 mOsm), hvilket kan indikere en specifik ikke-osmotisk effekt af glucose, da både PLT og MPV forblev uændret ved en tredobling af koncentrationen.glukose.fra D5W til D25W.Faktisk havde PLT-koncentrationer en tendens til at stige lidt med stigende osmolaritet.
Faldet i PLT mellem 1:1 og 1:5 fortyndinger betyder, at opløsningseffekten afhænger af den initiale og endelige glucosekoncentration.Hvis det kun afhang af den initiale koncentration, så ville man forvente at se en forskel i PLT-reduktion mellem 1:1-koncentrationer.Men det gør vi ikke.Hvis lysiseffekten kun afhænger af den endelige glukosekoncentration, så forventer vi ikke den store forskel mellem en 20% 1:1 fortynding og en 20,8% 1:5 fortynding.Og alligevel gjorde vi det.
Hvis der opstår blodpladetab på grund af blodpladelyse, dannes et partielt lysat, hvorefter cytokiner og vækstfaktorer frigives til det ekstracellulære miljø.Adskillige undersøgelser har vist, at blodpladelysat er næsten lige så effektivt som PRP som en spredningsopløsning [11].PRP i sig selv har vist sig at være en effektiv løsning til behandling af proliferation [12-14].
Inaktive blodplader cirkulerer i form af en skive forstærket med flere indre strukturer.Under aktivering antager de en mere sfærisk eller amøbeform, hvilket resulterer i en stigning i volumen.Forøgelsen i volumen kræver en forøgelse af overfladearealet, hvilket er resultatet af ekstruderingen af ​​det åbne tubulisystem (OCS) og tilsætningen af ​​eksocytiske granulat til membranen.Det skal stadig fastslås, om stigningen i MPV induceret af hypertonisk glucose involverer en eller begge af disse mekanismer, men hvis sidstnævnte, så ville en stigning i MPV indikere degranulering.
Denne undersøgelse viste, at eksponering for høje koncentrationer af glukose på PRP eller helblodplader resulterede i en stigning i MPV inden for 15 minutter med en glukosekoncentration på henholdsvis 25 % og 41,6 %.
Stigningen i trombocyt-MPV kan skyldes dilatation af de omgivende mikrotubuli-filtringer som reaktion på calciumtilstrømning.Liu et al.Glukose har vist sig at mediere calciumtilstrømning gennem trombocyt-TRPC6-kanalen [6].Vores hypotese er, at glukose inducerer afslapning af mikrotubulus filtre, hvilket fører til en stigning i MPV og blodpladesensibilisering og/eller aktivering.Men at dømme efter vores resultater er dette kun en del af historien.I vores test resulterede ingen koncentration under D25W i en stigning i MPV.Da vi ikke har testet eksponering for glukosekoncentrationer mellem 12,5 % og 25 %, tyder vores fase 1-resultater på, at der kan være en tærskel i dette interval af glukosekoncentrationer, der fører til en stigning i MPV.Yderligere test i trin 3 og 4 viste, at 20-25 % glukose ser ud til at være tærsklen for dette, men det er stadig uklart hvorfor.
Vi observerede også et ~9% fald i MPV efter centrifugering.Det er ikke klart, om dette fald i MPV skyldes større og tættere blodplader fanget i RBC-laget i centrifugen.Denne observation kan være vigtig for klinikere, da det kan antyde, at PRP-blodplader er en mindre og mindre tæt undergruppe af WB-blodplader.
I en tidligere undersøgelse viste vi, at PRP-fremstilling ved manuelle metoder er billig [8].Hvis glukose sensibiliserer vævsblodplader eller PRP, hvilket gør dem mere modtagelige for aktivering, eller hvis PRP produceres med partielle lysategenskaber, kan dette forbedre regenerering og reducere behovet for terapi.Derfor kan kombinationen af ​​PRP og højkoncentreret glucose være mere omkostningseffektiv end PRP eller glucose alene.
Vores undersøgelse har flere mangler.Først bruger vi PRP opnået fra flere forskellige metoder.Dette kan føre til modstridende resultater.For det andet var vi ikke i stand til at udføre en biokemisk analyse af nogen af ​​vores prøver for mere præcist at bestemme, om blodpladeaktivering havde fundet sted.Vi vil gerne måle P-selektin, trombocytfaktor 4, monocytiske blodpladeaggregater eller andre markører for blodpladeaktivering for bedre at forstå graden eller tilstedeværelsen af ​​alfa-granula-degranulering, men dette ligger uden for denne undersøgelses rammer.For det tredje var vi ikke i stand til ved elektronmikroskopi eller andre metoder at bekræfte, at stigningen i MPV i glukose-eksponerede blodplader skyldtes virkningen på mikrotubulus sammenfiltringer.
Blandinger af WB eller PRP med 25 % glucose øgede MPV, hvilket signalerede begyndelsen af ​​blodpladeaktivering, selvom denne undersøgelse ikke viste progression af aggregering eller degranulering.Den hypertone glucoseblanding resulterede i blodpladetab, hvilket muligvis repræsenterer en lytisk effekt.Delvis aktivering eller lysis af blodplader kan forårsage vævsregenerering efter blodpladeinjektion.Det er ikke klart, hvilke kliniske konsekvenser disse ændringer kan føre til.Yderligere undersøgelser har vist mere nøjagtige målinger af aktivering eller lysis og har evalueret de forskellige kliniske effekter af hypertone glukoseblandinger med WB eller PRP.
Glukoseproliferativ terapi er en enkel og billig regenerativ terapi, der hurtigt udvides og understøtter klinisk forskning.Denne undersøgelse foreslår en fysiologisk mekanisme, der, hvis den bekræftes, kunne hjælpe os med at forstå en del af den regenerative mekanisme af proliferativ terapi.
Biomedicinsk og sundhedsinformatik ved University of Missouri, Kansas City School of Medicine, Kansas City, USA
Mennesker: Alle deltagere i denne undersøgelse gav eller gav ikke samtykke.International Society for Cellular Medicine har udstedt ICMS-2017-003-godkendelse.Følgende protokol er blevet godkendt til yderligere brug af Institutional Review Board for International Society for Cellular Medicine: Titel: Beregning af blodpladerigt plasmalægemiddeludbytte baseret på baseline CBC-trombocyttal.Dyrepersoner: Alle forfattere bekræftede, at ingen dyr eller væv var involveret i denne undersøgelse.Interessekonflikter: I overensstemmelse med ICMJE Uniform Disclosure Form erklærer alle forfattere følgende: Betalings-/serviceoplysninger: Alle forfattere erklærer, at de ikke har modtaget økonomisk støtte fra nogen organisation til det indsendte arbejde.Økonomiske relationer: Alle forfattere erklærer, at de ikke på nuværende tidspunkt eller inden for de seneste tre år har haft økonomiske forhold til nogen organisation, der måtte være interesseret i det indsendte arbejde.Andre relationer: Alle forfattere erklærer, at der ikke er andre relationer eller aktiviteter, der kan påvirke det indsendte arbejde.
Harrison TE, Bowler J, Reeves K et al.(17. maj 2022) Effekten af ​​glukose på blodpladetal og volumen: implikationer for regenerativ medicin.Kur 14(5): e25081.doi:10.7759/cureus.25081
© Copyright 2022 Harrison et al.Dette er en artikel med åben adgang distribueret under vilkårene i Creative Commons Attribution License CC-BY 4.0.Ubegrænset brug, distribution og reproduktion i ethvert medie er tilladt, forudsat at den oprindelige forfatter og kilde krediteres.