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Unkontrollierte Blutungen sind eine der häufigsten Todesursachen.Das Erreichen einer schnellen Blutstillung sichert das Überleben des Patienten als Erste Hilfe bei Kampfhandlungen, Verkehrsunfällen und Einsätzen zur Todesreduzierung.Nanoporöses faserverstärktes Verbundgerüst (NFRCS), das aus einer einfachen hämostatischen filmbildenden Zusammensetzung (HFFC) als kontinuierliche Phase gewonnen wird, kann die Hämostase auslösen und verbessern.Die Entwicklung des NFRCS basiert auf dem Design des Flügels der Libelle.Die Flügelstruktur der Libelle besteht aus Quer- und Längsflügeln, und die Flügelmembranen sind miteinander verbunden, um die Integrität der Mikrostruktur aufrechtzuerhalten.HFFC überzieht die Oberfläche der Faser gleichmäßig mit einem nanometerdicken Film und verbindet die zufällig verteilte Baumwolldicke (Ct) (dispergierte Phase) zu einer nanoporösen Struktur.Die Kombination aus kontinuierlichen und dispergierten Phasen reduziert die Produktkosten um das Zehnfache im Vergleich zu kommerziell erhältlichen Produkten.Modifizierte NFRCS (Tampons oder Armbänder) können in einer Vielzahl biomedizinischer Anwendungen eingesetzt werden.In-vivo-Studien kamen zu dem Schluss, dass das entwickelte Cp NFRCS den Gerinnungsprozess an der Applikationsstelle auslöst und verstärkt.NFRCS kann aufgrund seiner nanoporösen Struktur die Mikroumgebung modulieren und auf zellulärer Ebene wirken, was zu einer besseren Wundheilung im Exzisionswundenmodell führt.
Unkontrollierte Blutungen während Kampfhandlungen, intraoperativen Situationen und in Notfallsituationen können eine ernsthafte Gefahr für das Leben der Verwundeten darstellen1.Diese Erkrankungen führen außerdem zu einem allgemeinen Anstieg des peripheren Gefäßwiderstands, was zu einem hämorrhagischen Schock führt.Geeignete Maßnahmen zur Blutungskontrolle während und nach der Operation gelten als potenziell lebensbedrohlich2,3.Schäden an großen Gefäßen führen zu massivem Blutverlust, was zu einer Sterblichkeitsrate von ≤ 50 % im Kampf und 31 % bei Operationen führt1.Ein massiver Blutverlust führt zu einer Verringerung des Körpervolumens, was zu einer Verringerung der Herzleistung führt.Ein Anstieg des gesamten peripheren Gefäßwiderstands und eine fortschreitende Beeinträchtigung der Mikrozirkulation führen zu einer Hypoxie in den lebenserhaltenden Organen.Ein hämorrhagischer Schock kann auftreten, wenn der Zustand ohne wirksame Intervention anhält1,4,5.Weitere Komplikationen sind das Fortschreiten einer Unterkühlung und einer metabolischen Azidose sowie eine Gerinnungsstörung, die den Gerinnungsprozess behindert.Ein schwerer hämorrhagischer Schock ist mit einem höheren Sterberisiko verbunden6,7,8.Bei einem (progressiven) Schock Grad III ist eine Bluttransfusion für das Überleben des Patienten während der intraoperativen und postoperativen Morbidität und Mortalität von wesentlicher Bedeutung.Um alle oben genannten lebensbedrohlichen Situationen zu überwinden, haben wir ein nanoporöses faserverstärktes Verbundgerüst (NFRCS) entwickelt, das eine minimale Polymerkonzentration (0,5 %) unter Verwendung einer Kombination wasserlöslicher blutstillender Polymere nutzt.
Durch den Einsatz von Faserverstärkung können kostengünstige Produkte entwickelt werden.Die zufällig angeordneten Fasern ähneln der Struktur der Flügel einer Libelle, ausgeglichen durch die horizontalen und vertikalen Streifen auf den Flügeln.Die Quer- und Längsadern des Flügels kommunizieren mit der Flügelmembran (Abb. 1).NFRCS besteht aus verstärktem Ct als Gerüstsystem mit besserer physikalischer und mechanischer Festigkeit (Abbildung 1).Aufgrund der Erschwinglichkeit und Handwerkskunst bevorzugen Chirurgen bei Operationen und Verbänden die Verwendung von Baumwollfadenlehren (Ct). Aufgrund seiner vielfältigen Vorteile, einschließlich > 90 % kristalliner Cellulose (trägt zur Verbesserung der hämostatischen Aktivität bei), wurde Ct als Skelettsystem von NFRCS9,10 verwendet. Aufgrund seiner vielfältigen Vorteile, einschließlich > 90 % kristalliner Cellulose (trägt zur Verbesserung der hämostatischen Aktivität bei), wurde Ct als Skelettsystem von NFRCS9,10 verwendet. In der Folge wurde dieses Jahr mit mehr als 90 % kristallinen Zellen bewertet (wird im Rahmen der allgemeinen Wirksamkeitsbestimmungen berücksichtigt). ), Ct wurde in NFRCS9,10-Systemen verwendet. Aufgrund seiner vielen Vorteile, einschließlich >90 % kristalliner Zellulose (die an einer erhöhten hämostatischen Aktivität beteiligt sind), wurde Ct als NFRCS-Skelettsystem verwendet9,10.因此, 考虑到它的多重益处, 包括> 90% 的结晶纤维素（有助于增强止血活性），Ct 被用作NFRCS9,10的骨架系统.因此,考虑到它的多重益处,包括> 90 %Aufgrund seiner vielen Vorteile, einschließlich über 90 % kristalliner Cellulose (hilft, die hämostatische Aktivität zu verbessern), wurde Ct als Gerüst für NFRCS9,10 verwendet.Ct wurde oberflächlich beschichtet (es wurde eine nanodicke Filmbildung beobachtet) und mit einer blutstillenden filmbildenden Zusammensetzung (HFFC) verbunden.HFFC wirkt wie ein Matrigel, das zufällig platzierte Ct zusammenhält.Das entwickelte Design überträgt Spannungen innerhalb der dispergierten Phase (Verstärkungsfasern).Es ist schwierig, mit minimalen Polymerkonzentrationen nanoporöse Strukturen mit guter mechanischer Festigkeit zu erhalten.Darüber hinaus ist es nicht einfach, verschiedene Formen für verschiedene biomedizinische Anwendungen anzupassen.
Die Abbildung zeigt ein Diagramm des NFRCS-Designs basierend auf der Libellenflügelstruktur (A).Dieses Bild zeigt eine vergleichende Analogie der Flügelstruktur einer Libelle (die sich kreuzenden und längs verlaufenden Adern des Flügels sind miteinander verbunden) und eine Querschnitts-Mikrofotografie von Cp NFRCS (B).Schematische Darstellung von NFRCS.
NFRCs wurden unter Verwendung von HFFC als kontinuierlicher Phase entwickelt, um die oben genannten Einschränkungen zu beseitigen.HFFC besteht aus verschiedenen filmbildenden hämostatischen Polymeren, darunter Chitosan (als wichtigstes hämostatisches Polymer) mit Methylcellulose (MC), Hydroxypropylmethylcellulose (HPMC 50 cp) und Polyvinylalkohol (PVA) (125 kDa) als Trägerpolymer, das die Thrombusbildung fördert.Formation.Der Zusatz von Polyvinylpyrrolidin K30 (PVP K30) verbesserte die Feuchtigkeitsaufnahmefähigkeit des NFRCS.Zur Verbesserung der Polymervernetzung in gebundenen Polymermischungen wurde Polyethylenglykol 400 (PEG 400) zugesetzt.Drei verschiedene hämostatische HFFC-Zusammensetzungen (Cm HFFC, Ch HFFC und Cp HFFC), nämlich Chitosan mit MC (Cm), Chitosan mit HPMC (Ch) und Chitosan mit PVA (Cp), wurden auf Ct aufgetragen.Verschiedene In-vitro- und In-vivo-Charakterisierungsstudien haben die hämostatische und wundheilende Wirkung von NFRCS bestätigt.Die von NFRCS angebotenen Verbundmaterialien können verwendet werden, um verschiedene Formen von Gerüsten an spezifische Anforderungen anzupassen.
Darüber hinaus kann NFRCS als Bandage oder Rolle modifiziert werden, um den gesamten Verletzungsbereich der unteren Extremitäten und anderer Körperteile abzudecken.Speziell für Kampfverletzungen an Gliedmaßen kann das entworfene NFRCS-Design in einen halben Arm oder ein ganzes Bein geändert werden (ergänzende Abbildung S11).Das NFRCS kann mit Gewebekleber zu einem Armband verarbeitet werden, mit dem Blutungen bei schweren suizidalen Handgelenksverletzungen gestillt werden können.Unser Hauptziel ist die Entwicklung eines NFRCS mit möglichst wenig Polymer, das an eine große Bevölkerung (unterhalb der Armutsgrenze) abgegeben und in einen Erste-Hilfe-Kasten gelegt werden kann.Durch sein einfaches, effizientes und wirtschaftliches Design kommt NFRCS den lokalen Gemeinschaften zugute und kann globale Auswirkungen haben.
Chitosan (Molekulargewicht 80 kDa) und Amaranth wurden von Merck, Indien, bezogen.Hydroxypropylmethylcellulose 50 Cp, Polyethylenglykol 400 und Methylcellulose wurden von Loba Chemie Pvt. bezogen.LLC, Mumbai.Polyvinylalkohol (Molekulargewicht 125 kDa) (87–90 % hydrolysiert) wurde von National Chemicals, Gujarat, bezogen.Polyvinylpyrrolidin K30 wurde von Molychem, Mumbai, gekauft, sterile Tupfer wurden von Ramaraju Surgery Cotton Mills Ltd., Tamil Nadu, mit Milli-Q-Wasser (Direct-Q3-Wasseraufbereitungssystem, Merck, Indien) als Träger gekauft.
NFRCS wurde mithilfe einer Lyophilisierungsmethode entwickelt11,12.Alle HFFC-Zusammensetzungen (Tabelle 1) wurden unter Verwendung eines mechanischen Rührers hergestellt.Bereiten Sie eine 0,5 %ige Lösung von Chitosan mit 1 % Essigsäure in Wasser durch kontinuierliches Rühren bei 800 U/min auf einem mechanischen Rührer vor.Das genaue Gewicht des in Tabelle 1 angegebenen beladenen Polymers wurde der Chitosanlösung zugesetzt und gerührt, bis eine klare Polymerlösung erhalten wurde.PVP K30 und PEG 400 wurden der resultierenden Mischung in den in Tabelle 1 angegebenen Mengen zugesetzt und das Rühren wurde fortgesetzt, bis eine klare viskose Polymerlösung erhalten wurde.Das resultierende Bad aus Polymerlösung wurde 60 Minuten lang mit Ultraschall behandelt, um eingeschlossene Luftblasen aus der Polymermischung zu entfernen.Wie in der ergänzenden Abbildung S1(b) gezeigt, war Ct gleichmäßig in jeder Vertiefung einer 6-Well-Platte (Form) verteilt, die mit 5 ml HFFC ergänzt war.
Die Platte mit sechs Vertiefungen wurde 60 Minuten lang beschallt, um eine gleichmäßige Benetzung und Verteilung von HFFC im Ct-Netzwerk zu erreichen.Anschließend die Sechs-Well-Platte 8-12 Stunden lang bei -20 °C einfrieren.Gefrierplatten wurden 48 Stunden lang lyophilisiert, um verschiedene NFRCS-Formulierungen zu erhalten.Mit dem gleichen Verfahren werden unterschiedliche Formen und Strukturen hergestellt, beispielsweise Tampons oder zylindrische Tampons, oder jede andere Form für unterschiedliche Anwendungen.
Genau abgewogenes Chitosan (80 kDa) (3 %) wird mit einem Magnetrührer in 1 % Essigsäure gelöst.Zu der resultierenden Chitosanlösung wurde 1 % PEG 400 gegeben und 30 Minuten lang gerührt.Gießen Sie die resultierende Lösung in einen quadratischen oder rechteckigen Behälter und frieren Sie sie 12 Stunden lang bei -80 °C ein.Gefrorene Proben wurden 48 Stunden lang lyophilisiert, um poröses Cs13 zu erhalten.
Das entwickelte NFRCS wurde Experimenten mit Fourier-Transformations-Infrarotspektroskopie (FTIR) (Shimadzu 8400 s FTIR, Tokio, Japan) unterzogen, um die chemische Kompatibilität von Chitosan mit anderen Polymeren zu bestätigen14,15.Die FTIR-Spektren (Breite des Spektralbereichs von 400 bis 4000 cm-1) aller getesteten Proben wurden durch die Durchführung von 32 Scans erhalten.
Die Blutabsorptionsrate (BAR) für alle Formulierungen wurde mit der von Chen et al. beschriebenen Methode bewertet.16 mit leichten Änderungen.Die entwickelten NFRKs aller Zusammensetzungen wurden über Nacht in einem Vakuumofen bei 105 °C getrocknet, um restliches Lösungsmittel zu entfernen.30 mg NFRCS (anfängliches Probengewicht – W0) und 30 mg Ct (Positivkontrolle) wurden in separate Schalen gegeben, die eine Vormischung aus 3,8 % Natriumcitrat enthielten.In vorgegebenen Zeitintervallen, dh 5, 10, 20, 30, 40 und 60 Sekunden, wurden die NFRCS entfernt und ihre Oberflächen von nicht absorbiertem Blut gereinigt, indem die Proben 30 Sekunden lang auf Ct gelegt wurden.Das Endgewicht des von NFRCS 16 absorbierten Blutes wurde zu jedem Zeitpunkt berücksichtigt (W1).Berechnen Sie den BAR-Prozentsatz mit der folgenden Formel:
Die Blutgerinnungszeit (BCT) wurde gemäß den Angaben von Wang et al. bestimmt.17 .Die Zeit, die Vollblut (Rattenblut, vorgemischt mit 3,8 % Natriumcitrat) benötigt, um in Gegenwart von NFRCS zu gerinnen, wurde als BCT der Testprobe berechnet.Die verschiedenen NFRCS-Komponenten (30 mg) wurden in 10-ml-Fläschchen mit Schraubverschluss gegeben und bei 37 °C inkubiert.Blut (0,5 ml) wurde in das Fläschchen gegeben und 0,3 ml 0,2 M CaCl2 wurden hinzugefügt, um die Blutgerinnung zu aktivieren.Zum Schluss drehen Sie das Fläschchen alle 15 Sekunden um (bis zu 180°), bis sich ein festes Gerinnsel bildet.Der BCT der Stichprobe wird anhand der Anzahl der Flip-Vails geschätzt17,18.Basierend auf BCT wurden zwei optimale Zusammensetzungen aus NFRCS Cm, Ch und Cp für weitere Charakterisierungsstudien ausgewählt.
Der BCT von Ch NFRCS- und Cp NFRCS-Zusammensetzungen wurde durch Implementierung der von Li et al. beschriebenen Methode bestimmt.19 .Legen Sie 15 x 15 mm2 Ch NFRCS, Cp NFRCS und Cs (Positivkontrolle) in separate Petrischalen (37 °C).Blut mit 3,8 % Natriumcitrat wurde mit 0,2 M CaCl2 in einem Volumenverhältnis von 10:1 gemischt, um den Blutgerinnungsprozess zu starten.20 µl einer 0,2 M CaCl2-Rattenblutmischung wurden auf die Probenoberfläche aufgetragen und in eine leere Petrischale gegeben.Die Kontrolle bestand aus Blut, das in leere Petrischalen ohne Ct gegossen wurde.Stoppen Sie die Gerinnung in festgelegten Abständen von 0, 3 und 5 Minuten, indem Sie der Probe mit der Schale 10 ml entionisiertes (DI) Wasser hinzufügen, ohne das Gerinnsel zu stören.Nicht koagulierte Erythrozyten (Erythrozyten) unterliegen in Gegenwart von entionisiertem Wasser einer Hämolyse und setzen Hämoglobin frei.Hämoglobin zu verschiedenen Zeitpunkten (HA(t)) wurde bei 540 nm (λmax Hämoglobin) mit einem UV-Vis-Spektrophotometer gemessen.Als Referenzstandard diente die absolute Absorption von Hämoglobin (AH(0)) in 0 Minuten von 20 µl Blut in 10 ml entionisiertem Wasser.Die relative Hämoglobinaufnahme (RHA) von geronnenem Blut wurde aus dem Verhältnis HA(t)/HA(0) unter Verwendung derselben Blutcharge berechnet.
Mit einem Texturanalysator (Texture Pro CT V1.3 Build 15, Brookfield, USA) wurden die Hafteigenschaften von NFRK an beschädigtem Gewebe bestimmt.Drücken Sie eine zylindrische Form mit offenem Boden gegen die Innenseite der Schweinehaut (ohne die Fettschicht).Proben (Ch NFRCS und Cp NFRCS) wurden über eine Kanüle in zylindrische Formen aufgetragen, um eine Haftung auf der Haut des Schweins zu erzeugen.Nach einer 3-minütigen Inkubation bei Raumtemperatur (RT) (25 °C) wurde die NFRCS-Haftfestigkeit mit einer konstanten Geschwindigkeit von 0,5 mm/Sek. aufgezeichnet.
Das Hauptmerkmal chirurgischer Versiegelungen besteht darin, die Blutgerinnung zu erhöhen und gleichzeitig den Blutverlust zu verringern.Die verlustfreie Koagulation bei NFRCS wurde mit einer zuvor veröffentlichten Methode mit geringfügigen Modifikationen bewertet 19 .Machen Sie ein Mikrozentrifugenröhrchen (2 ml) (Innendurchmesser 10 mm) mit einem 8 × 5 mm2 großen Loch auf einer Seite des Zentrifugenröhrchens (das eine offene Wunde darstellt).NFRCS wird zum Verschließen der Öffnung und Klebeband zum Abdichten der Außenkanten verwendet.Geben Sie 20 µl 0,2 M CaCl2 in das Mikrozentrifugenröhrchen mit der 3,8 %igen Natriumcitrat-Vormischung.Nach 10 Minuten wurden die Mikrozentrifugenröhrchen aus den Schalen entfernt und die Zunahme der Masse der Schalen aufgrund des Blutausflusses aus dem NFRK bestimmt (n = 3).Blutverlust Ch NFRCS und Cp NFRCS wurden mit Cs verglichen.
Die Nassintegrität von NFRCS wurde auf der Grundlage der von Mishra und Chaudhary21 beschriebenen Methode mit geringfügigen Modifikationen bestimmt.Geben Sie das NFRCS in einen 100-ml-Erlenmeyerkolben mit 50 ml Wasser und schwenken Sie es 60 Sekunden lang, ohne dass sich ein Deckel bildet.Visuelle Inspektion und Priorisierung von Proben auf körperliche Unversehrtheit basierend auf der Sammlung.
Die Bindungsstärke von HFFC an Ct wurde mit zuvor veröffentlichten Methoden mit geringfügigen Modifikationen untersucht.Die Integrität der Oberflächenbeschichtung wurde beurteilt, indem NFRK in Gegenwart von MilliQ-Wasser (Ct) akustischen Wellen (externer Reiz) ausgesetzt wurde.Die entwickelten NFRCS Ch NFRCS und Cp NFRCS wurden in ein mit Wasser gefülltes Becherglas gegeben und jeweils 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 und 30 Minuten lang beschallt.Nach dem Trocknen wurde der prozentuale Unterschied zwischen dem Anfangs- und Endgewicht des NFRCS zur Berechnung des prozentualen Materialverlusts (HFFC) verwendet.In-vitro-BCT unterstützte zusätzlich die Bindungsstärke bzw. den Verlust von Oberflächenmaterialien.Die Effizienz der HFFC-Bindung an Ct sorgt für eine Blutgerinnung und eine elastische Beschichtung auf der Oberfläche von Ct22.
Die Homogenität des entwickelten NFRCS wurde durch die BCT von Proben (30 mg) bestimmt, die an zufällig ausgewählten allgemeinen Standorten des NFRCS entnommen wurden.Befolgen Sie das zuvor erwähnte BCT-Verfahren, um die NFRCS-Konformität festzustellen.Die Nähe zwischen allen fünf Proben gewährleistet eine gleichmäßige Oberflächenbedeckung und HFFC-Ablagerung im Ct-Netz.
Die nominale Blutkontaktfläche (NBCA) wurde mit einigen Änderungen wie zuvor berichtet bestimmt.Koagulieren Sie das Blut, indem Sie 20 µl Blut zwischen die beiden Oberflächen von Ct, Ch NFRCS, Cp NFRCS und Cs klemmen.Nach einer Stunde wurden die beiden Teile des Stents getrennt und die Fläche des Gerinnsels manuell gemessen.Der Durchschnittswert von drei Wiederholungen wurde als NBCA NFRCS19 betrachtet.
Die Analyse der dynamischen Dampfsorption (DVS) wurde verwendet, um die Wirksamkeit von NFRCS bei der Absorption von Wasser aus der äußeren Umgebung oder von der Verletzungsstelle, die für die Auslösung der Koagulation verantwortlich ist, zu bewerten.Das DVS wertet bzw. zeichnet die Dampfaufnahme und -verluste einer Probe gravimetrisch mit einer hochempfindlichen Waage mit einer Massenauflösung von ±0,1 µg auf.Ein elektronischer Massendurchflussregler erzeugt um die Probe herum einen Partialdampfdruck (relative Luftfeuchtigkeit), indem er gesättigte und trockene Trägergase mischt. Gemäß den Richtlinien des Europäischen Arzneibuchs wurden die Proben basierend auf dem Prozentsatz der Feuchtigkeitsaufnahme durch die Proben in vier Kategorien eingeteilt (0–0,012 % w/w – nicht hygroskopisch, 0,2–2 % w/w leicht hygroskopisch, 2–15 % mäßig hygroskopisch und > 15 % sehr hygroskopisch)23. Gemäß den Richtlinien des Europäischen Arzneibuchs wurden die Proben basierend auf dem Prozentsatz der Feuchtigkeitsaufnahme durch die Proben in vier Kategorien eingeteilt (0–0,012 % w/w – nicht hygroskopisch, 0,2–2 % w/w leicht hygroskopisch, 2–15 % mäßig hygroskopisch und > 15 % sehr hygroskopisch)23.Gemäß den Empfehlungen des Europäischen Arzneibuchs wurden die Proben je nach prozentualer Feuchtigkeitsaufnahme der Proben in 4 Kategorien eingeteilt (0–0,012 % w/w – nicht hygroskopisch, 0,2–2 % w/w leicht hygroskopisch, 2–15 %).% умеренно гигроскопичен и > 15 % очень гигроскопичен)23. % mäßig hygroskopisch und > 15 % sehr hygroskopisch)23.根据欧洲药典指南, 根据样品吸收水分的百分比, 样品分为4 类（0-0.012% w/w- 非吸湿性、0.2-2% w/w 轻微吸湿湿性、2-15 % 适度吸湿，> 15% 非常吸湿）23.根据 欧洲 药典 指南, 根据 吸收 水分 的 百分比 样品 分为 分为 分为 类 (0-0,012 % W/w- 吸湿). 、 、 、 、 0,2-2% W/w gewicht 、 2-15% gewicht gewicht 、 15% gewicht gewicht 23.Gemäß den Empfehlungen des Europäischen Arzneibuchs werden Proben in 4 Klassen eingeteilt, abhängig vom Prozentsatz der von der Probe aufgenommenen Feuchtigkeit (0–0,012 Gew.-% – nicht hygroskopisch, 0,2–2 Gew.-% leicht hygroskopisch, 2–15 Gew.-%).% умеренно гигроскопичен, > 15 % очень гигроскопичен) 23. % mäßig hygroskopisch, > 15 % sehr hygroskopisch) 23.Die hygroskopische Effizienz von NFCS X NFCS und TsN NFCS wurde auf einem Analysator DVS TA TGA Q5000 SA bestimmt.Während dieses Prozesses wurden die Laufzeit, die relative Luftfeuchtigkeit (RH) und das Probengewicht in Echtzeit bei 25 °C24 ermittelt.Der Feuchtigkeitsgehalt wird durch eine genaue NFRCS-Massenanalyse unter Verwendung der folgenden Gleichung berechnet:
MC ist NFRCS-Feuchtigkeit.m1 – Trockengewicht von NSAIDs.m2 ist die Echtzeit-NFRCS-Masse bei einer bestimmten relativen Luftfeuchtigkeit.
Die Gesamtoberfläche wurde mithilfe eines Stickstoffadsorptionsexperiments mit flüssigem Stickstoff nach 10-stündigem Entleeren der Proben bei 25 °C (< 7 × 10–3 Torr) geschätzt. Die Gesamtoberfläche wurde mithilfe eines Stickstoffadsorptionsexperiments mit flüssigem Stickstoff nach 10-stündigem Entleeren der Proben bei 25 °C (< 7 × 10–3 Torr) geschätzt. Die Leistung wurde im Rahmen eines Tests zur Adsorption von Wasser nach der Temperaturmessung bei 25 °C in der 10. Woche geprüft ч (< 7 × 10–3 Torr). Die Gesamtoberfläche wurde mithilfe eines Stickstoffadsorptionsexperiments mit flüssigem Stickstoff geschätzt, nachdem die Proben 10 Stunden lang bei 25 °C (< 7 × 10–3 Torr) entleert wurden.Bei 25 °C bis 10 °C (< 7 × 10-3 Torr) können Sie die Temperatur bei 10 °C (< 7 × 10-3 Torr) erhöhen.Bei 25°C Die Leistung der Verbraucher wurde innerhalb von 10 Tagen mit der Verwendung von Tests zur Adsorbierung dieser Produkte nach 10 Tagen durchgeführt Bei 25°C (< 7 × 10-3 Torr). Die Gesamtoberfläche wurde mithilfe von Stickstoffadsorptionsexperimenten mit flüssigem Stickstoff geschätzt, nachdem die Proben 10 Stunden lang bei 25 °C (< 7 x 10-3 Torr) entleert wurden.Gesamtoberfläche, Porenvolumen und NFRCS-Porengröße wurden mit einem Quantachrome von NOVA 1000e, Österreich, unter Verwendung der RS ​​232-Software bestimmt.
Bereiten Sie 5 % Erythrozyten (Kochsalzlösung als Verdünnungsmittel) aus Vollblut vor.Übertragen Sie dann ein Aliquot HFFC (0,25 ml) auf eine 96-Well-Platte und 5 % RBC-Masse (0,1 ml).Inkubieren Sie die Mischung 40 Minuten lang bei 37 °C.Als Positivkontrolle wurde eine Mischung aus roten Blutkörperchen und Serum und als Negativkontrolle eine Mischung aus Kochsalzlösung und roten Blutkörperchen angesehen.Die Hämagglutination wurde nach der Stajitzky-Skala bestimmt.Die vorgeschlagenen Maßstäbe sind wie folgt: + + + + dichte körnige Aggregate;+ + + glatte Bodenpolster mit gebogenen Kanten;+ + glatte Bodenpolster mit eingerissenen Kanten;+ schmale rote Ringe an den Rändern der glatten Polster;– (negativ) diskreter roter Knopf 12 in der Mitte der unteren Vertiefung.
Die Hämokompatibilität von NFRCS wurde nach der Methode der International Organization for Standardization (ISO) (ISO10993-4, 1999)26,27 untersucht.Die von Singh et al. beschriebene gravimetrische Methode.Es wurden geringfügige Änderungen vorgenommen, um die Thrombusbildung in Gegenwart oder auf der Oberfläche von NFRCS zu beurteilen.500 mg Cs, Ch NFRCS und Cp NFRCS wurden in phosphatgepufferter Kochsalzlösung (PBS) 24 Stunden lang bei 37 °C inkubiert.Nach 24 Stunden wurde PBS entfernt und NFRCS mit 2 ml Blut behandelt, das 3,8 % Natriumcitrat enthielt.Geben Sie auf der Oberfläche des NFRCS 0,04 ml 0,1 M CaCl2 zu den inkubierten Proben hinzu.Nach 45 Minuten wurden 5 ml destilliertes Wasser zugegeben, um die Koagulation zu stoppen.Geronnenes Blut auf der Oberfläche von NFRK wurde mit 36–38 %iger Formaldehydlösung behandelt.Die mit Formaldehyd fixierten Klumpen wurden getrocknet und gewogen.Der Prozentsatz der Thrombose wurde durch Berechnung des Gewichts des Glases ohne Blut und Probe (Negativkontrolle) und des Glases mit Blut (Positivkontrolle) abgeschätzt.
Als erste Bestätigung wurden die Proben unter einem optischen Mikroskop sichtbar gemacht, um die Fähigkeit der HFFC-Oberflächenbeschichtung, der Ct-Verbindung und des Ct-Netzwerks zur Porenbildung zu verstehen.Dünne Schnitte von Ch und Cp aus NFRCS wurden mit einer Skalpellklinge zugeschnitten.Der resultierende Schnitt wurde auf einen Objektträger gelegt, mit einem Deckglas abgedeckt und die Kanten wurden mit Klebstoff fixiert.Die vorbereiteten Objektträger wurden unter einem optischen Mikroskop betrachtet und es wurden Fotos in verschiedenen Vergrößerungen gemacht.
Die Polymerablagerung in Ct-Netzwerken wurde mithilfe der Fluoreszenzmikroskopie basierend auf der von Rice et al.29 beschriebenen Methode sichtbar gemacht. Die für die Formulierung verwendete HFFC-Zusammensetzung wurde mit einem Fluoreszenzfarbstoff (Amaranth) gemischt und NFRCS (Ch & Cp) wurden gemäß der zuvor erwähnten Methode hergestellt. Die für die Formulierung verwendete HFFC-Zusammensetzung wurde mit einem Fluoreszenzfarbstoff (Amaranth) gemischt und NFRCS (Ch & Cp) wurden gemäß der zuvor erwähnten Methode hergestellt.Die zur Formulierung verwendete HFFC-Zusammensetzung wurde mit einem Fluoreszenzfarbstoff (Amaranth) gemischt und NFRCS (Ch und Cp) wurde gemäß der zuvor genannten Methode erhalten.将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料（苋菜）混合, 并按照前面提到的方法制备NFRCS（Ch & Cp）.将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料（苋菜）混合, 并按照前面提到的方法制备NFRCS（Ch & Cp）.Die in der Formulierung verwendete HFFC-Zusammensetzung wurde mit einem Fluoreszenzfarbstoff (Amaranth) gemischt und erhielt, wie bereits erwähnt, NFRCS (Ch und Cp).Aus den erhaltenen Proben wurden dünne NFRK-Schnitte geschnitten, auf Objektträger gelegt und mit Deckgläsern abgedeckt.Beobachten Sie die vorbereiteten Objektträger unter einem Fluoreszenzmikroskop mit einem Grünfilter (310–380 nm).Die Bilder wurden mit 4-facher Vergrößerung aufgenommen, um die Ct-Beziehungen und die überschüssige Polymerablagerung im Ct-Netzwerk zu verstehen.
Die Oberflächentopographie von NFRCS Ch und Cp wurde unter Verwendung eines Rasterkraftmikroskops (AFM) mit einem ultrascharfen TESP-Ausleger im Klopfmodus bestimmt: 42 N/m, 320 kHz, ROC 2–5 nm, Bruker, Taiwan.Die Oberflächenrauheit wurde durch den quadratischen Mittelwert (RMS) mithilfe einer Software (Scanning Probe Image Processor) bestimmt.Verschiedene NFRCS-Standorte wurden auf 3D-Bildern gerendert, um die Gleichmäßigkeit der Oberfläche zu überprüfen.Die Standardabweichung der Bewertung für einen bestimmten Bereich wird als Oberflächenrauheit definiert.Zur Quantifizierung der Oberflächenrauheit von NFRCS31 wurde die RMS-Gleichung verwendet.
FESEM-basierte Studien wurden unter Verwendung von FESEM, SU8000, HI-0876-0003, Hitachi, Tokio, durchgeführt, um die Oberflächenmorphologie von Ch NFRCS und Cp NFRCS zu verstehen, die eine bessere BCT als Cm NFRCS zeigten.Die FESEM-Studie wurde nach der von Zhao et al. beschriebenen Methode durchgeführt.32 mit geringfügigen Änderungen.NFRCS 20 bis 30 mg Ch NFRCS und Cp NFRCS wurden mit 20 µl 3,8 %igem Natriumcitrat, vorgemischt mit Rattenblut, vorgemischt.Den mit Blut behandelten Proben wurden 20 μl 0,2 M CaCl2 zugesetzt, um die Gerinnung einzuleiten, und die Proben wurden 10 Minuten lang bei Raumtemperatur inkubiert.Darüber hinaus wurden überschüssige Erythrozyten durch Spülen mit Kochsalzlösung von der NFRCS-Oberfläche entfernt.
Nachfolgende Proben wurden mit 0,1 % Glutaraldehyd behandelt und dann in einem Heißluftofen bei 37 °C getrocknet, um Feuchtigkeit zu entfernen.Die getrockneten Proben wurden beschichtet und analysiert 32 .Weitere während der Analyse erhaltene Bilder waren Gerinnselbildung auf der Oberfläche einzelner Baumwollfasern, Polymerablagerung zwischen Ct, Erythrozytenmorphologie (Form), Gerinnselintegrität und Erythrozytenmorphologie in Gegenwart von NFRCS.Unbehandelte NFRCS-Bereiche und mit Ch und Cp behandelte NFRCS-Bereiche, die mit Blut inkubiert wurden, wurden auf Elementarionen (Natrium, Kalium, Stickstoff, Kalzium, Magnesium, Zink, Kupfer und Selen) gescannt33.Vergleichen Sie den Anteil elementarer Ionen zwischen behandelten und unbehandelten Proben, um die Ansammlung elementarer Ionen während der Gerinnselbildung und der Gerinnselhomogenität zu verstehen.
Die Dicke der Cp-HFFC-Oberflächenbeschichtung auf der Ct-Oberfläche wurde mit FESEM bestimmt.Die Querschnitte von Cp NFRCS wurden aus dem Gerüst geschnitten und durch Sputtern beschichtet.Die resultierenden Sputterbeschichtungsproben wurden von FESEM beobachtet und die Dicke der Oberflächenbeschichtung wurde gemessen 34, 35, 36.
Röntgen-Mikro-CT bietet hochauflösende, zerstörungsfreie 3D-Bildgebung und ermöglicht die Untersuchung der internen Strukturanordnung von NFRK.Mikro-CT verwendet einen Röntgenstrahl, der durch die Probe geht, um den lokalen linearen Schwächungskoeffizienten der Röntgenstrahlen in der Probe aufzuzeichnen, was dabei hilft, morphologische Informationen zu erhalten.Die interne Position von Ct in Cp NFRCS und mit Blut behandelten Cp NFRCS wurde mittels Mikro-CT untersucht, um die Absorptionseffizienz und die Blutgerinnung in Gegenwart von NFRCS zu verstehen37,38,39.Die 3D-Strukturen von mit Blut behandelten und unbehandelten Cp-NFRCS-Proben wurden mittels Mikro-CT (V|tome|x S240, Phoenix, Deutschland) rekonstruiert.Mit der VG STUDIO-MAX-Softwareversion 2.2 wurden mehrere Röntgenbilder aus verschiedenen Winkeln (idealerweise 360°-Abdeckung) aufgenommen, um 3D-Bilder für NFRCS zu entwickeln.Die gesammelten Projektionsdaten wurden mit der entsprechenden einfachen 3D ScanIP Academic-Software in 3D-Volumenbilder rekonstruiert.
Um die Verteilung des Gerinnsels zu verstehen, wurden dem NFRCS außerdem 20 µl vorgemischtes Citratblut und 20 µl 0,2 M CaCl2 zugesetzt, um die Blutgerinnung zu initiieren.Die vorbereiteten Proben werden aushärten gelassen.Die NFRK-Oberfläche wurde mit 0,5 % Glutaraldehyd behandelt und 30 Minuten lang in einem Heißluftofen bei 30–40 °C getrocknet.Das auf dem NFRCS gebildete Blutgerinnsel wurde gescannt, rekonstruiert und ein 3D-Bild des Blutgerinnsels visualisiert.
Antibakterielle Tests wurden an Cp NFRCS (am besten im Vergleich zu Ch NFRCS) unter Verwendung der zuvor beschriebenen Methode mit geringfügigen Modifikationen durchgeführt.Die antibakterielle Aktivität von Cp NFRCS und Cp HFFC wurde unter Verwendung von drei verschiedenen Testmikroorganismen [S.aureus (grampositive Bakterien), E.coli (gramnegative Bakterien) und weiße Candida (C.albicans)] bestimmt, die in Petrischalen in einem Inkubator auf Agar wuchsen.50 ml der verdünnten Bakterienkultursuspension in einer Konzentration von 105–106 KBE ml-1 gleichmäßig auf das Agarmedium inokulieren.Gießen Sie das Medium in eine Petrischale und lassen Sie es erstarren.Auf der Oberfläche der Agarplatte wurden Vertiefungen angebracht, um sie mit HFFC zu füllen (3 Vertiefungen für HFFC und 1 für die Negativkontrolle).200 µl HFFC in 3 Vertiefungen und 200 µl pH 7,4 PBS in die 4. Vertiefung geben.Auf der anderen Seite der Petrischale eine 12 mm Cp NFRCS-Scheibe auf den verfestigten Agar legen und mit PBS (pH 7,4) befeuchten.Ciprofloxacin-, Ampicillin- und Fluconazol-Tabletten gelten als Referenzstandards für Staphylococcus aureus, Escherichia coli und Candida albicans.Messen Sie die Hemmzone manuell und machen Sie ein digitales Bild der Hemmzone.
Nach der institutionellen ethischen Genehmigung wurde die Studie am Kasturba Medical College of Education and Research in Manipal, Karnataka, im Süden Indiens durchgeführt.Das In-vitro-TEG-Versuchsprotokoll wurde von der Institutionellen Ethikkommission des Kasturba Medical College, Manipal, Karnataka überprüft und genehmigt (IEC: 674/2020).Die Probanden wurden aus freiwilligen Blutspendern (im Alter von 18 bis 55 Jahren) aus der Blutbank des Krankenhauses rekrutiert.Darüber hinaus wurde von den Freiwilligen eine Einverständniserklärung zur Entnahme von Blutproben eingeholt.Natives TEG (N-TEG) ​​wurde verwendet, um die Wirkung der Cp HFFC-Formulierung auf mit Natriumcitrat vorgemischtes Vollblut zu untersuchen.N-TEG ist weithin für seine Rolle bei der Point-of-Care-Wiederbelebung bekannt, die aufgrund der Möglichkeit einer klinisch signifikanten Verzögerung der Ergebnisse (Routine-Gerinnungstests) zu Problemen für Kliniker führt.Die N-TEG-Analyse wurde mit Vollblut durchgeführt.Von allen Teilnehmern wurden eine Einverständniserklärung und eine detaillierte Krankengeschichte eingeholt.Die Studie umfasste keine Teilnehmer mit hämostatischen oder thrombotischen Komplikationen wie Schwangerschaft/Wochenbett oder Lebererkrankungen.Probanden, die Medikamente einnahmen, die die Gerinnungskaskade beeinflussen, wurden ebenfalls von der Studie ausgeschlossen.Bei allen Teilnehmern wurden nach Standardverfahren grundlegende Labortests (Hämoglobin, Prothrombinzeit, aktiviertes Thromboplastin und Thrombozytenzahl) durchgeführt.N-TEG bestimmt die Viskoelastizität des Blutgerinnsels, die anfängliche Gerinnselstruktur, die Partikelinteraktion, die Gerinnselverstärkung und die Gerinnsellyse.Die N-TEG-Analyse liefert grafische und numerische Daten über die kollektiven Auswirkungen mehrerer Zellelemente und Plasma.Die N-TEG-Analyse wurde mit zwei verschiedenen Volumina Cp HFFC (10 µl und 50 µl) durchgeführt.Als Ergebnis wurde 1 ml Vollblut mit Zitronensäure zu 10 μl Cp HFFC gegeben.1 ml (Cp HFFC + Citratblut), 340 µl Mischblut zu 20 µl 0,2 M CaCl2 enthaltender TEG-Schale hinzufügen.Anschließend wurden TEG-Schalen in das TEG® 5000, US geladen, um R, K, Alpha-Winkel, MA, G, CI, TPI, EPL, LY 30 % der Blutproben in Gegenwart von Cp HFFC41 zu messen.
Das In-vivo-Studienprotokoll wurde vom Institutional Animal Ethics Committee (IAEC), Kasturba School of Medicine, Manipal Institute of Higher Education, Manipal, überprüft und genehmigt (IAEC/KMC/69/2020).Alle Tierversuche wurden gemäß den Empfehlungen des Ausschusses für die Kontrolle und Überwachung von Tierversuchen (CPCSEA) durchgeführt.Alle In-vivo-NFRCS-Studien (2 × 2 cm2) wurden an weiblichen Wistar-Ratten (mit einem Gewicht von 200 bis 250 g) durchgeführt.Alle Tiere wurden bei einer Temperatur von 24–26°C akklimatisiert, die Tiere hatten freien Zugang zu Standardfutter und Wasser nach Belieben.Alle Tiere wurden zufällig in verschiedene Gruppen eingeteilt, jede Gruppe bestand aus drei Tieren.Alle Studien wurden gemäß Animal Studies: Report of In Vivo Experiments 43 durchgeführt.Vor der Studie wurden die Tiere durch intraperitoneale (ip) Verabreichung einer Mischung aus 20–50 mg Ketamin (pro 1 kg Körpergewicht) und 2–10 mg Xylazin (pro 1 kg Körpergewicht) anästhesiert.Nach der Studie wurde das Blutungsvolumen durch Auswertung der Differenz zwischen dem Anfangs- und Endgewicht der Proben berechnet. Der aus den drei Tests erhaltene Durchschnittswert wurde als Blutungsvolumen der Probe herangezogen.
Das Rattenschwanzamputationsmodell wurde implementiert, um das Potenzial von NFRCS zur Modulation von Blutungen bei Traumata, Kampfhandlungen oder Verkehrsunfällen (Verletzungsmodell) zu verstehen.Schneiden Sie 50 % des Schwanzes mit einer Skalpellklinge ab und legen Sie ihn 15 s lang an die Luft, um eine normale Blutung zu gewährleisten.Zusätzlich wurden Testproben durch Druck auf den Schwanz einer Ratte platziert (Ct, Cs, Ch NFRCS und Cp NFRCS).Bei den Testproben wurden Blutungen und PCT gemeldet (n = 3)17,45.
Die Wirksamkeit der NFRCS-Druckkontrolle im Kampf wurde an einem Modell der oberflächlichen Oberschenkelarterie untersucht.Die Oberschenkelarterie wird freigelegt, mit einem 24G-Trokar punktiert und innerhalb von 15 Sekunden entblutet.Nachdem eine unkontrollierte Blutung beobachtet wurde, wird das Prüfpräparat unter Druck an der Einstichstelle platziert.Unmittelbar nach dem Auftragen der Testprobe wurde die Gerinnungszeit aufgezeichnet und die hämostatische Wirksamkeit für die nächsten 5 Minuten beobachtet.Das gleiche Verfahren wurde mit Cs und Ct46 wiederholt.
Dowling et al.47 schlugen ein Leberschädigungsmodell vor, um das hämostatische Potenzial hämostatischer Materialien im Zusammenhang mit intraoperativen Blutungen zu bewerten.BCT wurde für Ct-Proben (Negativkontrolle), Cs-Gerüst (Positivkontrolle), Ch-NFRCS-Proben und Cp-NFRCS-Proben aufgezeichnet.Die suprahepatische Hohlvene der Ratte wurde durch eine mediane Laparotomie freigelegt.Anschließend wurde der distale Teil des linken Lappens mit einer Schere herausgeschnitten.Machen Sie mit einer Skalpellklinge einen Einschnitt in die Leber und lassen Sie die Leber einige Sekunden lang bluten.Genau gewogene Ch NFRCS- und Cp NFRCS-Testproben wurden ohne Überdruck auf die beschädigte Oberfläche gelegt und die BCT aufgezeichnet.Die Kontrollgruppe (Ct) übte dann Druck aus, gefolgt von Cs 30 s47, ohne die Verletzung zu brechen.
In-vivo-Wundheilungstests wurden unter Verwendung eines Exzisionswundenmodells durchgeführt, um die Wundheilungseigenschaften der entwickelten NFRCS auf Polymerbasis zu bewerten.Modelle von Exzisionswunden wurden ausgewählt und nach zuvor veröffentlichten Methoden mit geringfügigen Modifikationen durchgeführt19,32,48.Alle Tiere wurden wie zuvor beschrieben betäubt.Mit einer Biopsie-Stanze (12 mm) einen kreisförmigen, tiefen Einschnitt in die Haut des Rückens vornehmen.Vorbereitete Wundstellen wurden mit Cs (Positivkontrolle), Ct (unter Berücksichtigung der Tatsache, dass Wattepads die Heilung beeinträchtigen), Ch NFRCS und Cp NFRCS (Versuchsgruppe) sowie einer Negativkontrolle ohne jegliche Behandlung versorgt.An jedem Tag der Studie wurde bei allen Ratten die Wundfläche gemessen.Machen Sie mit einer Digitalkamera ein Foto des Wundbereichs und legen Sie einen neuen Verband an.Der Prozentsatz des Wundverschlusses wurde mit der folgenden Formel gemessen:
Basierend auf dem Prozentsatz des Wundverschlusses am 12. Tag der Studie wurde die Rattenhaut der besten Gruppe herausgeschnitten ((Cp NFRCS) und die Kontrollgruppe) und mittels H&E-Färbung und Masson-Trichrom-Färbung untersucht. Basierend auf dem Prozentsatz des Wundverschlusses am 12. Tag der Studie wurde die Rattenhaut der besten Gruppe herausgeschnitten ((Cp NFRCS) und die Kontrollgruppe) und mittels H&E-Färbung und Masson-Trichrom-Färbung untersucht.Basierend auf dem Prozentsatz des Wundverschlusses am 12. Tag der Studie wurde die Haut der Ratten der besten Gruppe ((Cp NFRCS) und der Kontrollgruppe) herausgeschnitten und durch Anfärben mit Hämatoxylin-Eosin und Masson-Trichrom untersucht.Die 12-Jährigen haben sich für H&E und Masson entschieden色染色研究.根据研究第12天的伤口闭合百分比,切除最佳组((Cp NFRCS)和对照组)的大鼠皮肤,进行H&E染色和眳组）Ratten in der besten Gruppe ((Cp NFRCS) und Kontrollgruppen) wurden am 12. Tag der Studie auf Hämatoxylin-Eosin-Färbung und Masson-Trichrom-Färbung basierend auf dem prozentualen Wundverschluss exzidiert.Das implementierte Färbeverfahren wurde gemäß den zuvor beschriebenen Methoden49,50 durchgeführt.Kurz gesagt, nach der Fixierung in 10 % Formalin wurden die Proben mit einer Reihe abgestufter Alkohole dehydriert.Verwenden Sie ein Mikrotom, um dünne Schnitte (5 µm dick) des herausgeschnittenen Gewebes zu erhalten.Dünne Serienschnitte von Kontrollen und Cp-NFRCS wurden mit Hämatoxylin und Eosin behandelt, um histopathologische Veränderungen zu untersuchen.Die Trichromfärbung nach Masson wurde verwendet, um die Bildung von Kollagenfibrillen nachzuweisen.Die erzielten Ergebnisse wurden von Pathologen blind untersucht.
Die Stabilität von Cp NFRCS-Proben wurde 12 Monate lang bei Raumtemperatur (25 °C ± 2 °C/60 % relative Luftfeuchtigkeit ± 5 %) untersucht51.Cp NFRCS (Oberflächenverfärbung und mikrobielles Wachstum) wurde visuell untersucht und gemäß den oben im Abschnitt „Materialien und Methoden“ beschriebenen Methoden auf Faltenverschleißfestigkeit und BCT getestet.
Die Skalierbarkeit und Reproduzierbarkeit von Cp NFRCS wurde durch die Herstellung von Cp NFRCS mit einer Größe von 15×15 cm2 untersucht.Darüber hinaus wurden 30-mg-Proben (n = 5) aus verschiedenen Cp-NFRCS-Fraktionen herausgeschnitten und der BCT der untersuchten Proben wie zuvor im Abschnitt „Methoden“ beschrieben bewertet.
Wir haben versucht, unter Verwendung von Cp-NFRCS-Zusammensetzungen verschiedene Formen und Strukturen für verschiedene biomedizinische Anwendungen zu entwickeln.Zu diesen Formen oder Konfigurationen gehören konische Tupfer für Nasenbluten, Zahnbehandlungen und zylindrische Tupfer für Vaginalblutungen.
Alle Datensätze werden als Mittelwert ± Standardabweichung ausgedrückt und durch ANOVA mit Prism 5.03 (GraphPad, San Diego, CA, USA) analysiert, gefolgt von Bonferronis Mehrfachvergleichstest (*p<0,05).
Alle in Humanstudien durchgeführten Verfahren entsprachen den Standards des Instituts und des Nationalen Forschungsrats sowie der Deklaration von Helsinki von 1964 und ihren nachfolgenden Änderungen oder ähnlichen ethischen Standards.Alle Teilnehmer wurden über die Besonderheiten der Studie und ihren freiwilligen Charakter informiert.Die Daten der Teilnehmer bleiben nach der Erhebung vertraulich.Das In-vitro-TEG-Versuchsprotokoll wurde von der Institutionellen Ethikkommission des Kasturba Medical College, Manipal, Karnataka überprüft und genehmigt (IEC: 674/2020).Die Freiwilligen unterzeichneten eine Einverständniserklärung zur Entnahme von Blutproben.
Alle im Tierversuch durchgeführten Verfahren wurden in Übereinstimmung mit der Kastuba Faculty of Medicine, Manipal Institute of Higher Education, Manipal (IAEC/KMC/69/2020) durchgeführt.Alle geplanten Tierversuche wurden gemäß den Richtlinien des Ausschusses für die Kontrolle und Überwachung von Tierversuchen (CPCSEA) durchgeführt.Alle Autoren befolgen die ARRIVE-Richtlinien.
Die FTIR-Spektren aller NFRCS wurden analysiert und mit dem in Abbildung 2A gezeigten Chitosan-Spektrum verglichen.Charakteristische Spektralpeaks von Chitosan (aufgezeichnet) bei 3437 cm-1 (OH- und NH-Streckung, Überlappung), 2945 und 2897 cm-1 (CH-Streckung), 1660 cm-1 (NH2-Streckung), 1589 cm-1 (N-H-Biegung), 1157 cm-1 (Brückendehnung O-), 1067 cm-1 (Streckung C-O, sekundäres Hydroxyl), 993 cm-1 (Strecke CO, Bo-OH) 52,53,54.Die Ergänzungstabelle S1 zeigt die FTIR-NFRCS-Absorptionsspektrumwerte für Chitosan (Reporter), reines Chitosan, Cm, Ch und Cp.Die FTIR-Spektren aller NFRCS (Cm, Ch und Cp) zeigten die gleichen charakteristischen Absorptionsbanden wie reines Chitosan ohne signifikante Veränderungen (Abb. 2A).Die FTIR-Ergebnisse bestätigten das Fehlen chemischer oder physikalischer Wechselwirkungen zwischen den zur Entwicklung des NFRCS verwendeten Polymeren, was darauf hindeutet, dass die verwendeten Polymere inert sind.
In-vitro-Charakterisierung von Cm NFRCS, Ch NFRCS, Cp NFRCS und Cs.(A) stellt die kombinierten FTIR-Spektren der Zusammensetzungen von Chitosan und Cm NFRCS, Ch NFRCS und Cp NFRCS unter Kompression dar.(B) a) Vollblutaufnahmerate von NFRCS Cm, Ch, Cp und Cg (n = 3);Die Ct-Proben zeigten einen höheren BAR, da das Wattestäbchen eine höhere Absorptionseffizienz aufweist;b) Blut nach der Blutaufnahme. Darstellung der aufgenommenen Probe.Grafische Darstellung des BCT der Testprobe C (Cp NFRCS hatte den besten BCT (15 s, n = 3)). Die Daten in C, D, E und G wurden als Mittelwert ± SD angezeigt, und die Fehlerbalken stellen SD dar, ***p < 0,0001. Die Daten in C, D, E und G wurden als Mittelwert ± SD angezeigt, und die Fehlerbalken stellen SD dar, ***p < 0,0001. In C, D, E und G sind die Standard-Abschaltpläne mit einer Standard-Abschaltdauer verbunden, ***p <0,0001. Die Daten in C, D, E und G werden als Mittelwert ± Standardabweichung dargestellt und Fehlerbalken stellen die Standardabweichung dar, ***p<0,0001. C、D、E 和G 中的数数据显示为平均值± SD，误差线代表SD，***p < 0.0001。 C、D、E 和G 中的数数据显示为平均值± SD，误差线代表SD，***p < 0.0001。 In C, D, E und G sind die Standard-Abschaltpläne mit einer Standard-Abschaltzeit versehen, ***p <0,0001. Die Daten in C, D, E und G werden als Mittelwert ± Standardabweichung angezeigt, Fehlerbalken stellen die Standardabweichung dar, ***p<0,0001.