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Unkontrollierte Blutungen zählen zu den häufigsten Todesursachen. Eine schnelle Blutstillung sichert das Überleben des Patienten und dient als Erste Hilfe bei Kampfeinsätzen, Verkehrsunfällen und tödlichen Unfällen. Ein nanoporöses, faserverstärktes Verbundgerüst (NFRCS), das aus einer einfachen hämostatischen filmbildenden Zusammensetzung (HFFC) als kontinuierlicher Phase gewonnen wird, kann die Blutstillung auslösen und verstärken. Die Entwicklung des NFRCS basiert auf dem Design von Libellenflügeln. Die Libellenflügelstruktur besteht aus Quer- und Längsflügeln, deren Flügelmembranen miteinander verbunden sind, um die Integrität der Mikrostruktur zu erhalten. HFFC überzieht die Faseroberfläche gleichmäßig mit einem nanometerdicken Film und verbindet die zufällig verteilte Baumwollschicht (Ct) (dispergierte Phase) zu einer nanoporösen Struktur. Die Kombination aus kontinuierlicher und dispergierter Phase reduziert die Produktkosten im Vergleich zu handelsüblichen Produkten um das Zehnfache. Modifizierte NFRCS (Tampons oder Armbänder) finden vielfältige Anwendung in der Biomedizin. In-vivo-Studien haben ergeben, dass das entwickelte Cp NFRCS den Gerinnungsprozess an der Applikationsstelle auslöst und verstärkt. NFRCS kann aufgrund seiner nanoporösen Struktur das Mikromilieu modulieren und auf zellulärer Ebene wirken, was zu einer besseren Wundheilung im Exzisionswundmodell führt.
Unkontrollierte Blutungen während Gefechts-, Operations- und Notfallsituationen können eine ernsthafte Bedrohung für das Leben von Verwundeten darstellen1. Diese Zustände führen zudem zu einem allgemeinen Anstieg des peripheren Gefäßwiderstands und in der Folge zu einem hämorrhagischen Schock. Angemessene Maßnahmen zur Blutstillung während und nach Operationen gelten als potenziell lebensbedrohlich2,3. Schäden an großen Gefäßen führen zu massivem Blutverlust, was zu einer Sterblichkeitsrate von ≤ 50 % im Gefecht und 31 % während Operationen führt1. Massiver Blutverlust führt zu einer Abnahme des Körpervolumens, was das Herzzeitvolumen reduziert. Ein Anstieg des totalen peripheren Gefäßwiderstands und eine fortschreitende Beeinträchtigung der Mikrozirkulation führen zu Hypoxie in den lebenserhaltenden Organen. Hält der Zustand ohne wirksame Intervention an, kann ein hämorrhagischer Schock auftreten1,4,5. Weitere Komplikationen sind die fortschreitende Hypothermie und metabolische Azidose sowie eine Gerinnungsstörung, die den Blutgerinnungsprozess behindert. Ein schwerer hämorrhagischer Schock ist mit einem erhöhten Sterberisiko verbunden6,7,8. Bei Schock des Grades III (progressiv) ist eine Bluttransfusion während der intra- und postoperativen Morbidität und Mortalität überlebenswichtig. Um alle oben genannten lebensbedrohlichen Situationen zu bewältigen, haben wir ein nanoporöses, faserverstärktes Verbundgerüst (NFRCS) entwickelt, das eine minimale Polymerkonzentration (0,5 %) unter Verwendung einer Kombination wasserlöslicher hämostatischer Polymere nutzt.
Durch den Einsatz von Faserverstärkungen können kostengünstige Produkte entwickelt werden. Die zufällig angeordneten Fasern ähneln der Struktur eines Libellenflügels, der durch die horizontalen und vertikalen Streifen auf den Flügeln ausgeglichen wird. Die Quer- und Längsadern des Flügels kommunizieren mit der Flügelmembran (Abb. 1). NFRCS besteht aus verstärktem Ct als Gerüstsystem mit besserer physikalischer und mechanischer Festigkeit (Abbildung 1). Aufgrund der Erschwinglichkeit und der handwerklichen Qualität verwenden Chirurgen bei Operationen und Verbänden bevorzugt Baumwollfadenlehren (Ct). Angesichts seiner zahlreichen Vorteile, darunter > 90 % kristalline Zellulose (trägt zur Verbesserung der hämostatischen Aktivität bei), wurde Ct als Skelettsystem von NFRCS9,10 verwendet. Angesichts seiner zahlreichen Vorteile, darunter > 90 % kristalline Zellulose (trägt zur Verbesserung der hämostatischen Aktivität bei), wurde Ct als Skelettsystem von NFRCS9,10 verwendet. In der Folge wurde dieses Jahr mit mehr als 90 % kristallinen Zellen bewertet (wird in der allgemeinen Bevölkerung verwendet). aktivnosti), Ct Wird in den NFRCS9,10-Systemen verwendet. Aufgrund seiner zahlreichen Vorteile, darunter >90 % kristalline Zellulose (die an einer erhöhten hämostatischen Aktivität beteiligt ist), wurde Ct als NFRCS-Skelettsystem verwendet9,10.因此, 考虑到它的多重益处, 包括> 90 %被用作NFRCS9,10 的骨架系统.因此,考虑到它的多重益处,包括> 90 %Aufgrund seiner zahlreichen Vorteile, darunter über 90 % kristalline Zellulose (trägt zur Verbesserung der hämostatischen Aktivität bei), wurde Ct als Gerüst für NFRCS9,10 verwendet.Ct wurde oberflächlich beschichtet (es wurde eine nanodicke Filmbildung beobachtet) und mit einer hämostatischen filmbildenden Verbindung (HFFC) verbunden. HFFC wirkt wie ein Matrigel und hält zufällig platzierte Ct zusammen. Das entwickelte Design überträgt Spannungen innerhalb der dispergierten Phase (Verstärkungsfasern). Es ist schwierig, nanoporöse Strukturen mit guter mechanischer Festigkeit unter Verwendung minimaler Polymerkonzentrationen zu erhalten. Zudem ist es nicht einfach, verschiedene Formen für unterschiedliche biomedizinische Anwendungen anzupassen.
Die Abbildung zeigt ein Diagramm des NFRCS-Designs basierend auf der Flügelstruktur einer Libelle (A). Dieses Bild zeigt eine vergleichende Analogie der Flügelstruktur einer Libelle (die sich kreuzenden und längs verlaufenden Adern des Flügels sind miteinander verbunden) und eine Querschnittsmikrofotografie von Cp NFRCS (B). Schematische Darstellung von NFRCS.
Um die oben genannten Einschränkungen zu beheben, wurden NFRCs unter Verwendung von HFFC als kontinuierlicher Phase entwickelt. HFFC besteht aus verschiedenen filmbildenden hämostatischen Polymeren, darunter Chitosan (als wichtigstes hämostatisches Polymer) mit Methylcellulose (MC), Hydroxypropylmethylcellulose (HPMC 50 cp) und Polyvinylalkohol (PVA) (125 kDa) als Stützpolymer, das die Thrombusbildung fördert. Die Zugabe von Polyvinylpyrrolidin K30 (PVP K30) verbesserte die Feuchtigkeitsaufnahmekapazität der NFRCS. Polyethylenglykol 400 (PEG 400) wurde hinzugefügt, um die Polymervernetzung in gebundenen Polymermischungen zu verbessern. Drei verschiedene hämostatische HFFC-Zusammensetzungen (Cm HFFC, Ch HFFC und Cp HFFC), nämlich Chitosan mit MC (Cm), Chitosan mit HPMC (Ch) und Chitosan mit PVA (Cp), wurden auf Ct aufgetragen. Verschiedene In-vitro- und In-vivo-Charakterisierungsstudien haben die hämostatische und wundheilende Wirkung von NFRCS bestätigt. Die von NFRCS angebotenen Verbundwerkstoffe ermöglichen die individuelle Anpassung verschiedener Gerüstformen an spezifische Anforderungen.
Darüber hinaus kann das NFRCS als Verband oder Rolle modifiziert werden, um den gesamten Verletzungsbereich der unteren Extremitäten und anderer Körperteile abzudecken. Speziell für Kampfverletzungen kann das NFRCS-Design auf einen halben Arm oder ein ganzes Bein angepasst werden (Ergänzende Abbildung S11). Mit Gewebekleber kann das NFRCS zu einem Armband verarbeitet werden, das Blutungen bei schweren, suizidalen Handgelenksverletzungen stillen kann. Unser Hauptziel ist die Entwicklung eines NFRCS mit möglichst geringem Polymeranteil, das einer großen Bevölkerung (unterhalb der Armutsgrenze) zur Verfügung gestellt und in Erste-Hilfe-Kästen untergebracht werden kann. Das einfache, effiziente und wirtschaftliche Design des NFRCS kommt lokalen Gemeinden zugute und kann globale Auswirkungen haben.
Chitosan (Molekulargewicht 80 kDa) und Amaranth wurden von Merck, Indien, bezogen. Hydroxypropylmethylcellulose 50 Cp, Polyethylenglykol 400 und Methylcellulose wurden von Loba Chemie Pvt. LLC, Mumbai, bezogen. Polyvinylalkohol (Molekulargewicht 125 kDa) (87–90 % hydrolysiert) wurde von National Chemicals, Gujarat, bezogen. Polyvinylpyrrolidin K30 wurde von Molychem, Mumbai, bezogen. Sterile Tupfer wurden von Ramaraju Surgery Cotton Mills Ltd., Tamil Nadu, bezogen, mit Milli-Q-Wasser (Direct-Q3-Wasseraufbereitungssystem, Merck, Indien) als Träger.
NFRCS wurde mithilfe eines Lyophilisationsverfahrens entwickelt11,12. Alle HFFC-Zusammensetzungen (Tabelle 1) wurden mithilfe eines mechanischen Rührers hergestellt. Bereiten Sie eine 0,5%ige Chitosanlösung mit 1% Essigsäure in Wasser durch kontinuierliches Rühren bei 800 U/min auf einem mechanischen Rührer zu. Das genaue Gewicht des in Tabelle 1 angegebenen beladenen Polymers wurde der Chitosanlösung hinzugefügt und gerührt, bis eine klare Polymerlösung entstand. PVP K30 und PEG 400 wurden der resultierenden Mischung in den in Tabelle 1 angegebenen Mengen hinzugefügt und das Rühren wurde fortgesetzt, bis eine klare viskose Polymerlösung entstand. Das resultierende Bad aus Polymerlösung wurde 60 Minuten lang mit Ultraschall behandelt, um eingeschlossene Luftblasen aus der Polymermischung zu entfernen. Wie in ergänzender Abbildung S1(b) gezeigt, war Ct gleichmäßig in jeder Vertiefung einer 6-Well-Platte (Form) verteilt, die mit 5 ml HFFC ergänzt wurde.
Die Sechs-Well-Platte wurde 60 Minuten lang beschallt, um eine gleichmäßige Benetzung und Verteilung der HFFC im CT-Netzwerk zu erreichen. Anschließend wurde die Sechs-Well-Platte 8–12 Stunden bei -20 °C eingefroren. Die Gefrierplatten wurden 48 Stunden lang lyophilisiert, um verschiedene NFRCS-Formulierungen zu erhalten. Das gleiche Verfahren wird verwendet, um verschiedene Formen und Strukturen wie Tampons, zylindrische Tampons oder andere Formen für unterschiedliche Anwendungen herzustellen.
Genau abgewogenes Chitosan (80 kDa) (3 %) wird mit einem Magnetrührer in 1 % Essigsäure gelöst. Der resultierenden Chitosanlösung wird 1 % PEG 400 zugesetzt und 30 Minuten gerührt. Die resultierende Lösung wird in einen quadratischen oder rechteckigen Behälter gegeben und 12 Stunden bei -80 °C eingefroren. Gefrorene Proben werden 48 Stunden lang lyophilisiert, um poröses Cs13 zu erhalten.
Das entwickelte NFRCS wurde mittels Fourier-Transformations-Infrarotspektroskopie (FTIR) (Shimadzu 8400 s FTIR, Tokio, Japan) experimentell untersucht, um die chemische Kompatibilität von Chitosan mit anderen Polymeren zu bestätigen14,15. Die FTIR-Spektren (Breite des Spektralbereichs von 400 bis 4000 cm-1) aller getesteten Proben wurden durch die Durchführung von 32 Scans ermittelt.
Die Blutabsorptionsrate (BAR) für alle Formulierungen wurde mit der von Chen et al. 16 beschriebenen Methode mit leichten Modifikationen ermittelt. Die entwickelten NFRKs aller Zusammensetzungen wurden über Nacht in einem Vakuumofen bei 105 °C getrocknet, um Lösungsmittelreste zu entfernen. 30 mg NFRCS (anfängliches Probengewicht – W0) und 30 mg Ct (positive Kontrolle) wurden in separate Schalen mit einer Vormischung aus 3,8 % Natriumcitrat gegeben. In festgelegten Zeitabständen, d. h. nach 5, 10, 20, 30, 40 und 60 Sekunden, wurden die NFRCS entfernt und ihre Oberflächen von nicht absorbiertem Blut gereinigt, indem die Proben 30 Sekunden lang auf Ct gelegt wurden. Das Endgewicht des von NFRCS 16 absorbierten Blutes wurde zu jedem Zeitpunkt berücksichtigt (W1). Berechnen Sie den BAR-Prozentsatz mit der folgenden Formel:
Die Blutgerinnungszeit (BCT) wurde wie von Wang et al. 17 berichtet bestimmt. Die Zeit, die Vollblut (Rattenblut vorgemischt mit 3,8 % Natriumcitrat) zum Gerinnen in Gegenwart von NFRCS benötigt, wurde als BCT der Testprobe berechnet. Die verschiedenen NFRCS-Komponenten (30 mg) wurden in 10-ml-Fläschchen mit Schraubverschluss gegeben und bei 37 °C inkubiert. Blut (0,5 ml) wurde in das Fläschchen gegeben und 0,3 ml 0,2 M CaCl2 wurden hinzugefügt, um die Blutgerinnung zu aktivieren. Schließlich wird das Fläschchen alle 15 Sekunden umgedreht (bis zu 180°), bis sich ein festes Gerinnsel bildet. Die BCT der Probe wird anhand der Anzahl der Umdrehungen geschätzt vails17,18. Basierend auf der BCT wurden zwei optimale Zusammensetzungen aus NFRCS Cm, Ch und Cp für weitere Charakterisierungsstudien ausgewählt.
Die BCT von Ch NFRCS- und Cp NFRCS-Zusammensetzungen wurde durch Implementierung der von Li et al. 19 beschriebenen Methode bestimmt. 15 x 15 mm2 Ch NFRCS, Cp NFRCS und Cs (positive Kontrolle) wurden in separate Petrischalen (37 °C) gegeben. Blut mit 3,8 % Natriumcitrat wurde mit 0,2 M CaCl2 in einem Volumenverhältnis von 10:1 gemischt, um den Blutgerinnungsprozess zu starten. 20 µl der 0,2 M CaCl2-Rattenblutmischung wurde auf die Probenoberfläche aufgetragen und in eine leere Petrischale gegeben. Die Kontrolle bestand aus Blut, das ohne Ct in leere Petrischalen gegossen wurde. In festgelegten Abständen von 0, 3 und 5 Minuten wurde die Gerinnung durch Zugabe von 10 ml deionisiertem (DI) Wasser zur Probe in der Schale gestoppt, ohne das Gerinnsel zu stören. Nicht koagulierte Erythrozyten (Erythrozyten) werden in Gegenwart von deionisiertem Wasser hämolysiert und setzen Hämoglobin frei. Der Hämoglobinwert zu verschiedenen Zeitpunkten (HA(t)) wurde bei 540 nm (λmax Hämoglobin) mit einem UV-Vis-Spektrophotometer gemessen. Die absolute Hämoglobinabsorption (AH(0)) in 0 min von 20 µl Blut in 10 ml deionisiertem Wasser diente als Referenzwert. Die relative Hämoglobinaufnahme (RHA) des geronnenen Blutes wurde aus dem Verhältnis HA(t)/HA(0) unter Verwendung derselben Blutprobe berechnet.
Mithilfe eines Texturanalysators (Texture Pro CT V1.3 Build 15, Brookfield, USA) wurden die Hafteigenschaften von NFRK an geschädigtem Gewebe bestimmt. Eine zylindrische Schale mit offenem Boden wurde gegen die Innenseite der Schweinehaut (ohne Fettschicht) gedrückt. Proben (Ch NFRCS und Cp NFRCS) wurden mittels einer Kanüle in zylindrische Formen gegeben, um eine Haftung an der Schweinehaut zu erzeugen. Nach 3-minütiger Inkubation bei Raumtemperatur (25 °C) wurde die Haftfestigkeit von NFRCS mit einer konstanten Rate von 0,5 mm/s gemessen.
Die Hauptfunktion chirurgischer Versiegelungen besteht darin, die Blutgerinnung zu erhöhen und gleichzeitig den Blutverlust zu verringern. Die verlustfreie Gerinnung bei NFRCS wurde anhand einer zuvor veröffentlichten Methode mit leichten Modifikationen bewertet 19. Stellen Sie ein Mikrozentrifugenröhrchen (2 ml) (Innendurchmesser 10 mm) mit einem 8 × 5 mm² großen Loch auf einer Seite des Zentrifugenröhrchens her (das eine offene Wunde darstellt). Die Öffnung wird mit NFRCS verschlossen und die Außenkanten werden mit Klebeband abgedichtet. Geben Sie 20 µl 0,2 M CaCl² in das Mikrozentrifugenröhrchen, das die 3,8%ige Natriumcitrat-Vormischung enthält. Nach 10 Minuten wurden die Mikrozentrifugenröhrchen aus den Schalen entfernt, und die Zunahme der Masse der Schalen aufgrund des Blutausflusses aus den NFRK (n = 3) bestimmt. Blutverlust Ch NFRCS und Cp NFRCS wurden mit Cs verglichen.
Die Nassintegrität von NFRCS wurde anhand der von Mishra und Chaudhary21 beschriebenen Methode mit geringfügigen Modifikationen bestimmt. Die NFRCS wurden in einen 100-ml-Erlenmeyerkolben mit 50 ml Wasser gegeben und 60 s lang geschwenkt, ohne dass sich ein Bodensatz bildete. Visuelle Prüfung und Priorisierung der Proben hinsichtlich ihrer physikalischen Integrität erfolgte nach der Entnahme.
Die Bindungsstärke von HFFC an Ct wurde mit geringfügigen Modifikationen unter Verwendung zuvor veröffentlichter Methoden untersucht. Die Integrität der Oberflächenbeschichtung wurde beurteilt, indem NFRK in Gegenwart von Milliq-Wasser (Ct) akustischen Wellen (externer Reiz) ausgesetzt wurde. Die entwickelten NFRCS Ch NFRCS und Cp NFRCS wurden in einen mit Wasser gefüllten Becher gegeben und 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 bzw. 30 Minuten lang beschallt. Nach dem Trocknen wurde die prozentuale Differenz zwischen dem Anfangs- und Endgewicht des NFRCS verwendet, um den prozentualen Materialverlust (HFFC) zu berechnen. In-vitro-BCT unterstützte die Bindungsstärke bzw. den Verlust von Oberflächenmaterialien weiter. Die Effizienz der HFFC-Bindung an Ct sorgt für die Blutgerinnung und eine elastische Beschichtung auf der Oberfläche von Ct22.
Die Homogenität des entwickelten NFRCS wurde durch die BCT von Proben (30 mg) bestimmt, die an zufällig ausgewählten Standorten des NFRCS entnommen wurden. Befolgen Sie das zuvor beschriebene BCT-Verfahren, um die NFRCS-Konformität zu bestimmen. Die Nähe aller fünf Proben zueinander gewährleistet eine gleichmäßige Oberflächenbedeckung und HFFC-Ablagerung im Ct-Netz.
Die nominale Blutkontaktfläche (NBCA) wurde wie zuvor beschrieben mit einigen Modifikationen bestimmt. Das Blut wurde koaguliert, indem 20 µl Blut zwischen die beiden Oberflächen von Ct, Ch NFRCS, Cp NFRCS und Cs geklemmt wurden. Nach einer Stunde wurden die beiden Stentteile getrennt und die Fläche des Gerinnsels manuell gemessen. Der Durchschnittswert aus drei Wiederholungen wurde als NBCA NFRCS19 bestimmt.
Mithilfe der dynamischen Dampfsorptionsanalyse (DVS) wurde die Wirksamkeit von NFRCS bei der Absorption von Wasser aus der Umgebung oder von der für die Koagulation verantwortlichen Verletzungsstelle bewertet. Die DVS misst bzw. erfasst die Dampfaufnahme und den Dampfverlust einer Probe gravimetrisch mithilfe einer hochempfindlichen Waage mit einer Massenauflösung von ±0,1 µg. Ein elektronischer Massendurchflussregler erzeugt durch die Mischung gesättigter und trockener Trägergase einen Partialdampfdruck (relative Luftfeuchtigkeit) um die Probe. Gemäß den Richtlinien des Europäischen Arzneibuchs wurden die Proben auf Grundlage ihrer prozentualen Feuchtigkeitsaufnahme in vier Kategorien eingeteilt (0 – 0,012 % (w/w) – nicht hygroskopisch, 0,2 – 2 % (w/w) leicht hygroskopisch, 2 – 15 % mäßig hygroskopisch und > 15 % sehr hygroskopisch)23. Gemäß den Richtlinien des Europäischen Arzneibuchs wurden die Proben auf Grundlage der prozentualen Feuchtigkeitsaufnahme der Proben in vier Kategorien eingeteilt (0 – 0,012 % (w/w) – nicht hygroskopisch, 0,2 – 2 % (w/w) leicht hygroskopisch, 2 – 15 % mäßig hygroskopisch und > 15 % sehr hygroskopisch)23.In Übereinstimmung mit den Empfehlungen des Europäischen Arzneibuchs wurden die Proben je nach prozentualer Feuchtigkeitsaufnahme der Proben in vier Kategorien eingeteilt (0–0,012 % w/w – nicht hygroskopisch, 0,2–2 % w/w leicht hygroskopisch, 2–15 %).% умеренно гигроскопичен и > 15 % очень гигроскопичен)23. % mäßig hygroskopisch und > 15 % sehr hygroskopisch)23.根据欧洲药典指南, 根据样品吸收水分的百分比, 样品分为4 类（0-0.012% w/w- 非吸湿湿性、0.2-2% w/w 2-15 % mehr als 15 % mehr als 23 %.根据 欧洲 药典 指南, 根据 吸收 水分 的 百分比 样品 分为 分为 分为 类 （（0-0.012% W/w- Mindestgehalt 、 、 、 、 0,2-2% W/w gewicht 、 2-15% gewicht gewicht 、 15% gewicht gewicht 23.Gemäß den Empfehlungen des Europäischen Arzneibuchs werden die Proben je nach dem Prozentsatz der von der Probe aufgenommenen Feuchtigkeit in vier Klassen eingeteilt (0–0,012 Gewichtsprozent – ​​nicht hygroskopisch, 0,2–2 Gewichtsprozent leicht hygroskopisch, 2–15 Gewichtsprozent).% умеренно гигроскопичен, > 15 % очень гигроскопичен) 23. % mäßig hygroskopisch, > 15 % sehr hygroskopisch) 23.Die hygroskopische Effizienz von NFCS X NFCS und TsN NFCS wurde mit einem Analysegerät DVS TA TGA Q5000 SA ermittelt. Dabei wurden Laufzeit, relative Luftfeuchtigkeit (RH) und Echtzeit-Probengewicht bei 25 °C24 ermittelt. Der Feuchtigkeitsgehalt wird durch eine genaue NFRCS-Massenanalyse nach folgender Gleichung berechnet:
MC ist die NFRCS-Luftfeuchtigkeit. m1 – Trockengewicht der NSAIDs. m2 ist die Echtzeit-NFRCS-Masse bei einer bestimmten relativen Luftfeuchtigkeit.
Die Gesamtoberfläche wurde mithilfe eines Stickstoffadsorptionsexperiments mit flüssigem Stickstoff geschätzt, nachdem die Proben 10 Stunden lang bei 25 °C (< 7 × 10–3 Torr) entleert wurden. Die Gesamtoberfläche wurde mithilfe eines Stickstoffadsorptionsexperiments mit flüssigem Stickstoff geschätzt, nachdem die Proben 10 Stunden lang bei 25 °C (< 7 × 10–3 Torr) entleert wurden. Es wurde festgestellt, dass die Verbraucher bei einer Temperatur von 25 °C bei einer Temperatur von 25 °C ein Problem haben Dauer 10 Stunden (< 7 × 10–3 Torr). Die Gesamtoberfläche wurde mithilfe eines Stickstoffadsorptionsexperiments mit flüssigem Stickstoff geschätzt, nachdem die Proben 10 Stunden lang bei 25 °C (< 7 × 10–3 Torr) entleert wurden.Bei 25 °C bis 10 °C (< 7 × 10-3 Torr) können Sie die Temperatur bei 10 °C (< 7 × 10-3 Torr) erreichen.Bei 25°C Die Verwendung von Dienstleistungen wurde mit der Verwendung von Tests zur Adsorption von Produkten nach der Veröffentlichung von Tests in Woche 10 durchgeführt часов при 25°C (< 7 × 10-3 Torr). Die Gesamtoberfläche wurde mithilfe von Stickstoffadsorptionsexperimenten mit flüssigem Stickstoff geschätzt, nachdem die Proben 10 Stunden lang bei 25 °C (< 7 x 10-3 Torr) entleert wurden.Die Gesamtoberfläche, das Porenvolumen und die NFRCS-Porengröße wurden mit einem Quantachrome von NOVA 1000e, Österreich, unter Verwendung der Software RS 232 bestimmt.
5 % RBCs (Kochsalzlösung als Verdünnungsmittel) aus Vollblut herstellen. Anschließend ein Aliquot HFFC (0,25 ml) und 5 % RBC-Masse (0,1 ml) in eine 96-Well-Platte geben. Die Mischung 40 Minuten bei 37 °C inkubieren. Eine Mischung aus roten Blutkörperchen und Serum diente als positive Kontrolle, eine Mischung aus Kochsalzlösung und roten Blutkörperchen als negative Kontrolle. Die Hämagglutination wurde anhand der Stajitzky-Skala bestimmt. Die vorgeschlagenen Skalen lauten wie folgt: + + + + dichte körnige Aggregate; + + + glatte Bodenpolster mit gewölbten Rändern; + + glatte Bodenpolster mit eingerissenen Rändern; + schmale rote Ringe um die Ränder der glatten Polster; – (negativ) diskreter roter Knopf 12 in der Mitte der unteren Vertiefung.
Die Hämokompatibilität von NFRCS wurde entsprechend der Methode der Internationalen Organisation für Normung (ISO) (ISO10993-4, 1999)26,27 untersucht. Die von Singh et al. beschriebene gravimetrische Methode. Es wurden geringfügige Modifikationen vorgenommen, um die Thrombusbildung in Gegenwart von oder auf der Oberfläche von NFRCS zu beurteilen. 500 mg Cs-, Ch-NFRCS und Cp-NFRCS wurden 24 Stunden bei 37 °C in phosphatgepufferter Kochsalzlösung (PBS) inkubiert. Nach 24 Stunden wurde PBS entfernt und NFRCS mit 2 ml Blut behandelt, das 3,8 % Natriumcitrat enthielt. Auf der Oberfläche der NFRCS wurden den inkubierten Proben 0,04 ml 0,1 M CaCl2 hinzugefügt. Nach 45 Minuten wurden 5 ml destilliertes Wasser hinzugefügt, um die Gerinnung zu stoppen. Geronnenes Blut auf der Oberfläche von NFRK wurde mit 36–38 % Formaldehydlösung behandelt. Die mit Formaldehyd fixierten Gerinnsel wurden getrocknet und gewogen. Der Thromboseanteil wurde durch Berechnung des Gewichts des Glases ohne Blut und Probe (Negativkontrolle) und des Glases mit Blut (Positivkontrolle) ermittelt.
Zur ersten Bestätigung wurden die Proben unter einem optischen Mikroskop visualisiert, um die Fähigkeit der HFFC-Oberflächenbeschichtung, der Ct-Verbindungen und des Ct-Netzwerks zur Porenbildung zu untersuchen. Dünne Ch- und Cp-Schnitte aus NFRCS wurden mit einer Skalpellklinge zugeschnitten. Der resultierende Schnitt wurde auf einen Objektträger gelegt, mit einem Deckglas abgedeckt und die Kanten mit Klebstoff fixiert. Die vorbereiteten Objektträger wurden unter einem optischen Mikroskop betrachtet und Fotos mit unterschiedlichen Vergrößerungen aufgenommen.
Die Polymerablagerung in Ct-Netzwerken wurde mithilfe der Fluoreszenzmikroskopie auf Grundlage der von Rice et al.29 beschriebenen Methode visualisiert. Die für die Formulierung verwendete HFFC-Zusammensetzung wurde mit einem fluoreszierenden Farbstoff (Amaranth) gemischt und NFRCS (Ch & Cp) wurden gemäß der zuvor erwähnten Methode hergestellt. Die für die Formulierung verwendete HFFC-Zusammensetzung wurde mit einem fluoreszierenden Farbstoff (Amaranth) gemischt und NFRCS (Ch & Cp) wurden gemäß der zuvor erwähnten Methode hergestellt.Die zur Formulierung verwendete HFFC-Zusammensetzung wurde mit einem fluoreszierenden Farbstoff (Amaranth) gemischt und NFRCS (Ch und Cp) wurde gemäß der zuvor erwähnten Methode erhalten.将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料（苋菜）混合, 并按照前面提到的方法制备NFRCS（Ch & Cp）.将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料（苋菜）混合, 并按照前面提到的方法制备NFRCS（Ch & Cp）.Die in der Formulierung verwendete HFFC-Zusammensetzung wurde mit einem fluoreszierenden Farbstoff (Amaranth) gemischt und erhielt, wie bereits erwähnt, NFRCS (Ch und Cp).Aus den erhaltenen Proben wurden dünne NFRK-Schnitte geschnitten, auf Objektträger gelegt und mit Deckgläsern abgedeckt. Die präparierten Objektträger wurden unter einem Fluoreszenzmikroskop mit einem Grünfilter (310–380 nm) untersucht. Die Bilder wurden mit vierfacher Vergrößerung aufgenommen, um die Ct-Beziehungen und die übermäßige Polymerablagerung im Ct-Netzwerk zu verstehen.
Die Oberflächentopographie von NFRCS Ch und Cp wurde mit einem Rasterkraftmikroskop (AFM) mit ultrascharfem TESP-Cantilever im Tapping-Modus bestimmt: 42 N/m, 320 kHz, ROC 2–5 nm, Bruker, Taiwan. Die Oberflächenrauheit wurde mittels quadratischem Mittelwert (RMS) mithilfe einer Software (Scanning Probe Image Processor) ermittelt. Verschiedene NFRCS-Standorte wurden auf 3D-Bildern dargestellt, um die Oberflächengleichmäßigkeit zu überprüfen. Die Standardabweichung des Wertes für einen bestimmten Bereich wird als Oberflächenrauheit definiert. Die RMS-Gleichung wurde verwendet, um die Oberflächenrauheit von NFRCS31 zu quantifizieren.
Es wurden FESEM-basierte Studien mit FESEM, SU8000, HI-0876-0003, Hitachi, Tokio, durchgeführt, um die Oberflächenmorphologie von Ch NFRCS und Cp NFRCS zu verstehen, die eine bessere BCT als Cm NFRCS zeigten. Die FESEM-Studie wurde gemäß der von Zhao et al. 32 beschriebenen Methode mit geringfügigen Modifikationen durchgeführt. 20 bis 30 mg NFRCS Ch NFRCS und Cp NFRCS wurden mit 20 µl 3,8%igem Natriumcitrat vorgemischt, das mit Rattenblut vorgemischt wurde. Den blutbehandelten Proben wurden 20 µl 0,2 M CaCl2 hinzugefügt, um die Gerinnung einzuleiten, und die Proben wurden 10 Minuten bei Raumtemperatur inkubiert. Zusätzlich wurden überschüssige Erythrozyten durch Spülen mit Kochsalzlösung von der NFRCS-Oberfläche entfernt.
Nachfolgende Proben wurden mit 0,1 % Glutaraldehyd behandelt und dann in einem Heißluftofen bei 37 °C getrocknet, um Feuchtigkeit zu entfernen. Die getrockneten Proben wurden beschichtet und analysiert 32 . Weitere während der Analyse erhaltene Bilder zeigten die Gerinnselbildung auf der Oberfläche einzelner Baumwollfasern, Polymerablagerung zwischen Ct, Erythrozytenmorphologie (Form), Gerinnselintegrität und Erythrozytenmorphologie in Gegenwart von NFRCS. Unbehandelte NFRCS-Bereiche und mit Ch und Cp behandelte NFRCS-Bereiche, die mit Blut inkubiert wurden, wurden auf Elementionen (Natrium, Kalium, Stickstoff, Calcium, Magnesium, Zink, Kupfer und Selen) gescannt 33. Vergleichen Sie die Prozentsätze der Elementionen zwischen behandelten und unbehandelten Proben, um die Ansammlung von Elementionen während der Gerinnselbildung und die Gerinnselhomogenität zu verstehen.
Die Dicke der Cp-HFFC-Oberflächenbeschichtung auf der Ct-Oberfläche wurde mittels FESEM bestimmt. Die Querschnitte der Cp-NFRCS wurden aus dem Gerüst geschnitten und mittels Sputterbeschichtung beschichtet. Die resultierenden Sputterbeschichtungsproben wurden mittels FESEM untersucht und die Dicke der Oberflächenbeschichtung gemessen 34 , 35 , 36 .
Die Röntgen-Mikro-CT liefert hochauflösende 3D-zerstörungsfreie Bilder und ermöglicht die Untersuchung der inneren Struktur von NFRK. Bei der Mikro-CT wird ein Röntgenstrahl durch die Probe geleitet, um den lokalen linearen Dämpfungskoeffizienten der Röntgenstrahlen in der Probe aufzuzeichnen und so morphologische Informationen zu gewinnen. Die innere Lage von Ct in Cp-NFRCS und mit Blut behandelten Cp-NFRCS wurde mittels Mikro-CT untersucht, um die Absorptionseffizienz und Blutgerinnung in Gegenwart von NFRCS37,38,39 zu verstehen. Die 3D-Strukturen von mit Blut behandelten und unbehandelten Cp-NFRCS-Proben wurden mittels Mikro-CT (V|tome|x S240, Phoenix, Deutschland) rekonstruiert. Mit der Software VG STUDIO-MAX Version 2.2 wurden mehrere Röntgenbilder aus verschiedenen Winkeln (idealerweise 360°-Abdeckung) aufgenommen, um 3D-Bilder für NFRCS zu entwickeln. Die gesammelten Projektionsdaten wurden mit der entsprechenden einfachen Software 3D ScanIP Academic zu 3D-Volumenbildern rekonstruiert.
Um die Verteilung des Gerinnsels zu verstehen, wurden zusätzlich 20 µl vorgemischtes Citratblut und 20 µl 0,2 M CaCl2 zum NFRCS gegeben, um die Blutgerinnung zu initiieren. Die vorbereiteten Proben wurden aushärten gelassen. Die NFRK-Oberfläche wurde mit 0,5 % Glutaraldehyd behandelt und 30 Minuten lang in einem Heißluftofen bei 30–40 °C getrocknet. Das auf dem NFRCS gebildete Blutgerinnsel wurde gescannt, rekonstruiert und ein 3D-Bild des Blutgerinnsels visualisiert.
Antibakterielle Tests wurden mit Cp NFRCS (am besten vergleichbar mit Ch NFRCS) unter Verwendung der zuvor beschriebenen Methode mit geringfügigen Modifikationen durchgeführt. Die antibakterielle Aktivität von Cp NFRCS und Cp HFFC wurde unter Verwendung von drei verschiedenen Testmikroorganismen [S. aureus (grampositive Bakterien), E. coli (gramnegative Bakterien) und weiße Candida (C. albicans)] bestimmt, die auf Agar in Petrischalen in einem Inkubator wachsen. 50 ml der verdünnten Bakterienkultursuspension in einer Konzentration von 105–106 KBE/ml werden gleichmäßig auf das Agarmedium geimpft. Das Medium wird in eine Petrischale gegossen und erstarren gelassen. Auf der Oberfläche der Agarplatte werden Vertiefungen zum Füllen mit HFFC gemacht (3 Vertiefungen für HFFC und 1 für die Negativkontrolle). Geben Sie 200 µl HFFC zu 3 Vertiefungen und 200 µl PBS mit einem pH-Wert von 7,4 zur vierten Vertiefung. Auf der anderen Seite der Petrischale wird eine 12 mm große Cp-NFRCS-Scheibe auf den erstarrten Agar gelegt und mit PBS (pH 7,4) befeuchtet. Ciprofloxacin-, Ampicillin- und Fluconazol-Tabletten gelten als Referenzstandards für Staphylococcus aureus, Escherichia coli und Candida albicans. Der Hemmhof wird manuell gemessen und ein digitales Bild des Hemmhofs erstellt.
Nach der institutionellen ethischen Genehmigung wurde die Studie am Kasturba Medical College of Education and Research in Manipal, Karnataka, in Südindien durchgeführt. Das experimentelle In-vitro-TEG-Protokoll wurde vom institutionellen Ethikkomitee des Kasturba Medical College, Manipal, Karnataka, geprüft und genehmigt (IEC: 674/2020). Die Probanden wurden aus freiwilligen Blutspendern (im Alter von 18 bis 55 Jahren) aus der Blutbank des Krankenhauses rekrutiert. Darüber hinaus wurde von den Freiwilligen eine Einverständniserklärung zur Entnahme der Blutproben eingeholt. Natives TEG (N-TEG) ​​wurde verwendet, um die Wirkung der Cp-HFFC-Formulierung auf mit Natriumcitrat vorgemischtes Vollblut zu untersuchen. N-TEG ist weithin anerkannt für seine Rolle bei der Point-of-Care-Wiederbelebung, die für Kliniker aufgrund der Möglichkeit klinisch signifikanter Verzögerungen bei den Ergebnissen (Routine-Gerinnungstests) Probleme aufwirft. Die N-TEG-Analyse wurde mit Vollblut durchgeführt. Von allen Teilnehmern wurden eine Einverständniserklärung und eine detaillierte Anamnese eingeholt. An der Studie nahmen keine Teilnehmer mit hämostatischen oder thrombotischen Komplikationen teil, etwa aufgrund von Schwangerschaft/Wochenbett oder Lebererkrankungen. Auch Personen, die Medikamente einnahmen, die die Gerinnungskaskade beeinflussen, wurden von der Studie ausgeschlossen. Bei allen Teilnehmern wurden grundlegende Laboruntersuchungen (Hämoglobin, Prothrombinzeit, aktiviertes Thromboplastin und Thrombozytenzahl) nach Standardverfahren durchgeführt. N-TEG bestimmt die Viskoelastizität des Blutgerinnsels, die anfängliche Gerinnselstruktur, Partikelinteraktion, Gerinnselverstärkung und Gerinnsellyse. Die N-TEG-Analyse bietet grafische und numerische Daten zu den kollektiven Wirkungen mehrerer zellulärer Elemente und von Plasma. Die N-TEG-Analyse wurde mit zwei unterschiedlichen Volumina Cp HFFC (10 µl und 50 µl) durchgeführt. Dazu wurde 1 ml Vollblut mit Zitronensäure zu 10 μl Cp HFFC hinzugefügt. 1 ml (Cp HFFC + Citratblut), 340 µl Mischblut zu einer TEG-Schale mit 20 µl 0,2 M CaCl2 hinzufügen. Anschließend wurden die TEG-Schalen in TEG® 5000, US geladen, um R, K, Alpha-Winkel, MA, G, CI, TPI, EPL, LY 30 % der Blutproben in Gegenwart von Cp HFFC41 zu messen.
Das In-vivo-Studienprotokoll wurde vom Institutional Animal Ethics Committee (IAEC), Kasturba School of Medicine, Manipal Institute of Higher Education, Manipal (IAEC/KMC/69/2020) geprüft und genehmigt. Alle Tierversuche wurden gemäß den Empfehlungen des Committee for the Control and Supervision of Animal Experimentation (CPCSEA) durchgeführt. Alle In-vivo-NFRCS-Studien (2 × 2 cm2) wurden an weiblichen Wistar-Ratten (mit einem Gewicht von 200 bis 250 g) durchgeführt. Alle Tiere wurden bei einer Temperatur von 24–26 °C akklimatisiert und hatten freien Zugang zu Standardfutter und Wasser ad libitum. Alle Tiere wurden zufällig in verschiedene Gruppen aufgeteilt, jede Gruppe bestand aus drei Tieren. Alle Studien wurden gemäß Animal Studies: Report of In Vivo Experiments 43 durchgeführt. Vor der Studie wurden die Tiere durch intraperitoneale (ip) Verabreichung einer Mischung aus 20–50 mg Ketamin (pro 1 kg Körpergewicht) und 2–10 mg Xylazin (pro 1 kg Körpergewicht) anästhesiert. Nach der Studie wurde das Blutungsvolumen durch Auswertung der Differenz zwischen dem Anfangs- und dem Endgewicht der Proben berechnet. Der aus den drei Tests ermittelte Durchschnittswert wurde als Blutungsvolumen der Probe verwendet.
Das Rattenschwanzamputationsmodell wurde implementiert, um das Potenzial von NFRCS zur Modulation von Blutungen bei Traumata, Kampfhandlungen oder Verkehrsunfällen (Verletzungsmodell) zu verstehen. 50 % des Schwanzes wurden mit einer Skalpellklinge abgeschnitten und 15 Sekunden lang an der Luft gehalten, um eine normale Blutung zu gewährleisten. Zusätzlich wurden Testproben durch Druck auf den Schwanz einer Ratte platziert (Ct, Cs, Ch NFRCS und Cp NFRCS). Blutungen und PCT wurden für die Testproben (n = 3) berichtet17,45.
Die Wirksamkeit der NFRCS-Druckkontrolle im Kampfeinsatz wurde an einem Modell der oberflächlichen Femoralarterie untersucht. Die Femoralarterie wurde freigelegt, mit einem 24G-Trokar punktiert und innerhalb von 15 Sekunden entblutet. Nach der Beobachtung einer unkontrollierten Blutung wurde die Testprobe unter Druck an der Punktionsstelle platziert. Unmittelbar nach der Applikation der Testprobe wurde die Gerinnungszeit aufgezeichnet und die hämostatische Effizienz für die nächsten 5 Minuten beobachtet. Das gleiche Verfahren wurde mit Cs und Ct46 wiederholt.
Dowling et al. 47 schlugen ein Leberverletzungsmodell vor, um das hämostatische Potenzial hämostatischer Materialien im Zusammenhang mit intraoperativen Blutungen zu bewerten. BCT wurde für Ct-Proben (negative Kontrolle), Cs-Framework (positive Kontrolle), Ch NFRCS-Proben und Cp NFRCS-Proben aufgezeichnet. Die suprahepatische Vena cava der Ratte wurde durch eine mediane Laparotomie freigelegt. Danach wurde der distale Teil des linken Lappens mit einer Schere herausgeschnitten. Machen Sie mit einer Skalpellklinge einen Einschnitt in die Leber und lassen Sie sie einige Sekunden bluten. Genau gewogene Ch NFRCS- und Cp NFRCS-Testproben wurden ohne positiven Druck auf die beschädigte Oberfläche gelegt und BCT wurde aufgezeichnet. Die Kontrollgruppe (Ct) übte dann Druck und anschließend Cs 30 s47 aus, ohne die Verletzung zu lösen.
Um die Wundheilungseigenschaften der entwickelten polymerbasierten NFRCS zu bewerten, wurden In-vivo-Wundheilungstests an einem Exzisionswundenmodell durchgeführt. Die Exzisionswundenmodelle wurden nach bereits veröffentlichten Methoden mit geringfügigen Modifikationen ausgewählt und behandelt19,32,48. Alle Tiere wurden wie beschrieben anästhesiert. Mit einer Biopsiestanze (12 mm) wurde eine kreisrunde, tiefe Inzision in die Rückenhaut vorgenommen. Die vorbereiteten Wunden wurden mit Cs (positive Kontrolle), Ct (unter Berücksichtigung der Tatsache, dass Wattepads die Heilung beeinträchtigen), Ch NFRCS und Cp NFRCS (Experimentalgruppe) sowie einer negativen Kontrolle ohne Behandlung verbunden. An jedem Studientag wurde die Wundfläche bei allen Ratten gemessen. Mit einer Digitalkamera wurde ein Bild der Wundfläche aufgenommen und ein neuer Verband angelegt. Der prozentuale Wundverschluss wurde mit der folgenden Formel berechnet:
Basierend auf dem Prozentsatz des Wundverschlusses am 12. Tag der Studie wurde die Rattenhaut der besten Gruppe ((Cp NFRCS) und der Kontrollgruppe) herausgeschnitten und mittels H&E-Färbung und Masson-Trichrom-Färbung untersucht. Basierend auf dem Prozentsatz des Wundverschlusses am 12. Tag der Studie wurde die Rattenhaut der besten Gruppe ((Cp NFRCS) und der Kontrollgruppe) herausgeschnitten und mittels H&E-Färbung und Masson-Trichrom-Färbung untersucht.Basierend auf dem Prozentsatz des Wundverschlusses am 12. Tag der Studie wurde die Haut der Ratten der besten Gruppe ((Cp NFRCS) und der Kontrollgruppe) herausgeschnitten und durch Färbung mit Hämatoxylin-Eosin und Massons Trichrom untersucht.根据研究第12天的伤口闭合百分比，切除最佳组((Cp NFRCS) und die von H&E und Masson angekündigte Veröffentlichung.根据研究第12天的伤口闭合百分比，切除最佳组((Cp NFRCS)和对照组)的大鼠皮肤, 进行H&E染色和眳组）Ratten der besten Gruppe ((Cp NFRCS) und Kontrollgruppen) wurden am 12. Tag der Studie zur Hämatoxylin-Eosin-Färbung und Masson-Trichrom-Färbung basierend auf dem prozentualen Wundverschluss herausgeschnitten.Das implementierte Färbeverfahren wurde gemäß den zuvor beschriebenen Methoden 49,50 durchgeführt. Kurz gesagt: Nach der Fixierung in 10%igem Formalin wurden die Proben mit einer Reihe abgestufter Alkohole dehydriert. Mittels Mikrotom wurden Dünnschnitte (5 µm dick) des exzidierten Gewebes hergestellt. Dünne Serienschnitte von Kontrollproben und Cp-NFRCS wurden mit Hämatoxylin und Eosin behandelt, um histopathologische Veränderungen zu untersuchen. Die Masson-Trichromfärbung diente zum Nachweis der Bildung von Kollagenfibrillen. Die Ergebnisse wurden von Pathologen blind ausgewertet.
Die Stabilität von Cp NFRCS-Proben wurde 12 Monate lang bei Raumtemperatur (25 °C ± 2 °C/60 % RH ± 5 %) untersucht. 51 Cp NFRCS (Oberflächenverfärbung und mikrobielles Wachstum) wurde visuell überprüft und gemäß den oben im Abschnitt „Materialien und Methoden“ beschriebenen Methoden auf Faltenverschleißfestigkeit und BCT getestet.
Die Skalierbarkeit und Reproduzierbarkeit von Cp NFRCS wurde durch die Herstellung von Cp NFRCS mit einer Größe von 15 × 15 cm² untersucht. Zusätzlich wurden 30 mg Proben (n = 5) aus verschiedenen Cp NFRCS-Fraktionen entnommen und der BCT der untersuchten Proben wie zuvor im Abschnitt „Methoden“ beschrieben ausgewertet.
Wir haben versucht, mithilfe von Cp NFRCS-Zusammensetzungen verschiedene Formen und Strukturen für verschiedene biomedizinische Anwendungen zu entwickeln. Zu diesen Formen oder Konfigurationen gehören konische Tupfer für Nasenbluten, zahnärztliche Eingriffe und zylindrische Tupfer für Vaginalblutungen.
Alle Datensätze werden als Mittelwert ± Standardabweichung ausgedrückt und mittels ANOVA unter Verwendung von Prism 5.03 (GraphPad, San Diego, CA, USA) und anschließendem Bonferroni-Test für Mehrfachvergleiche (*p < 0,05) analysiert.
Alle in den Humanstudien durchgeführten Verfahren entsprachen den Standards des Instituts und des Nationalen Forschungsrats sowie der Deklaration von Helsinki 1964 und ihren späteren Änderungen oder ähnlichen ethischen Standards. Alle Teilnehmer wurden über die Besonderheiten der Studie und ihren freiwilligen Charakter informiert. Die Teilnehmerdaten bleiben nach der Erhebung vertraulich. Das In-vitro-TEG-Versuchsprotokoll wurde vom Ethikkomitee des Kasturba Medical College, Manipal, Karnataka, geprüft und genehmigt (IEC: 674/2020). Die Freiwilligen unterzeichneten eine Einverständniserklärung zur Blutprobenentnahme.
Alle in Tierstudien durchgeführten Verfahren wurden gemäß den Richtlinien der Kastuba Faculty of Medicine, Manipal Institute of Higher Education, Manipal (IAEC/KMC/69/2020) durchgeführt. Alle geplanten Tierversuche wurden gemäß den Richtlinien des Committee for the Control and Supervision of Animal Experimentation (CPCSEA) durchgeführt. Alle Autoren befolgen die ARRIVE-Richtlinien.
Die FTIR-Spektren aller NFRCS wurden analysiert und mit dem in Abbildung 2A dargestellten Chitosanspektrum verglichen. Charakteristische Spektralpeaks von Chitosan (aufgezeichnet) bei 3437 cm−1 (OH- und NH-Streckung, Überlappung), 2945 und 2897 cm−1 (CH-Streckung), 1660 cm−1 (NH2-Dehnung), 1589 cm−1 (N–H-Biegung), 1157 cm−1 (Brückenstreckung O-), 1067 cm−1 (Streckung C–O, sekundäres Hydroxy), 993 cm−1 (Streckung CO, Bo-OH) 52,53,54. Ergänzende Tabelle S1 zeigt die FTIR-NFRCS-Absorptionsspektrumwerte für Chitosan (Reporter), reines Chitosan, Cm, Ch und Cp. Die FTIR-Spektren aller NFRCS (Cm, Ch und Cp) zeigten die gleichen charakteristischen Absorptionsbanden wie reines Chitosan ohne signifikante Veränderungen (Abb. 2A). Die FTIR-Ergebnisse bestätigten das Fehlen chemischer oder physikalischer Wechselwirkungen zwischen den zur Entwicklung der NFRCS verwendeten Polymeren, was darauf hindeutet, dass die verwendeten Polymere inert sind.
In-vitro-Charakterisierung von Cm NFRCS, Ch NFRCS, Cp NFRCS und Cs. (A) stellt die kombinierten FTIR-Spektren der Zusammensetzungen von Chitosan und Cm NFRCS, Ch NFRCS und Cp NFRCS unter Kompression dar. (B) a) Vollblutaufnahmerate von NFRCS Cm, Ch, Cp und Cg (n = 3); Die Ct-Proben zeigten eine höhere BAR, da das Wattestäbchen eine höhere Absorptionseffizienz aufweist; b) Blut nach Blutabsorption. Abbildung der absorbierten Probe. Grafische Darstellung der BCT der Testprobe C (Cp NFRCS hatte die beste BCT (15 s, n = 3)). Die Daten in C, D, E und G wurden als Mittelwert ± SD angezeigt und die Fehlerbalken stellen SD dar, ***p < 0,0001. Die Daten in C, D, E und G wurden als Mittelwert ± SD angezeigt und die Fehlerbalken stellen SD dar, ***p < 0,0001. In C, D, E und G sind die Standard-Abschaltpläne mit einer ± Standard-Absperrung ausgestattet, ***p <0,0001. Die Daten in C, D, E und G werden als Mittelwert ± Standardabweichung dargestellt und die Fehlerbalken stellen die Standardabweichung dar, ***p<0,0001. C、D、E 和G 中的数数数据显示为平均值± SD，误差线代表SD，***p < 0.0001。 C、D、E 和G 中的数数数据显示为平均值± SD，误差线代表SD，***p < 0.0001。 In C, D, E und G sind die Standard-Abschaltpläne mit einer Standard-Abschaltgrenze versehen, ***p <0,0001. Die Daten in C, D, E und G werden als Mittelwert ± Standardabweichung angezeigt, Fehlerbalken stellen die Standardabweichung dar, ***p<0,0001.