«Ποτέ μην αμφιβάλλετε ότι μια μικρή ομάδα σκεπτόμενων, αφοσιωμένων πολιτών μπορεί να αλλάξει τον κόσμο.Στην πραγματικότητα, είναι το μόνο εκεί».
Η αποστολή του Cureus είναι να αλλάξει το μακροχρόνιο μοντέλο ιατρικής δημοσίευσης, στο οποίο η υποβολή έρευνας μπορεί να είναι δαπανηρή, πολύπλοκη και χρονοβόρα.
Πλάσμα πλούσιο σε αιμοπετάλια/prp, αναγέννηση ιστού, ενεργοποίηση αιμοπεταλίων, θεραπεία πολλαπλασιασμού γλυκόζης, αιμοπετάλια, πολλαπλασιαστική θεραπεία
Αναφέρετε αυτό το άρθρο ως: Harrison TE, Bowler J, Reeves K, et al.(17 Μαΐου 2022) Η επίδραση της γλυκόζης στον αριθμό και τον όγκο των αιμοπεταλίων: επιπτώσεις για την αναγεννητική ιατρική.Cure 14(5): e25081.doi:10.7759/cureus.25081
Τα διαλύματα πλάσματος πλούσιου σε αιμοπετάλια (PRP) και υπερτονικής γλυκόζης χρησιμοποιούνται συνήθως για ένεση στην αναγεννητική ιατρική, μερικές φορές μαζί.Η επίδραση της υπερτονικής γλυκόζης στη λύση και ενεργοποίηση των αιμοπεταλίων δεν έχει αναφερθεί προηγουμένως.Δοκιμάσαμε την επίδραση των αυξημένων συγκεντρώσεων γλυκόζης στον αριθμό των αιμοπεταλίων και των ερυθροκυττάρων, καθώς και στους όγκους κυττάρων στο PRP και στο πλήρες αίμα (WB).Μια ταχεία μερική μείωση του αριθμού των αιμοπεταλίων σημειώθηκε με όλα τα μείγματα γλυκόζης αναμεμειγμένα με PRP ή ολικό αίμα, σύμφωνα με τη μερική λύση. Μετά το πρώτο λεπτό, ο αριθμός των αιμοπεταλίων παρέμεινε σταθερός, υποδηλώνοντας ταχεία προσαρμογή των υπολειπόμενων αιμοπεταλίων σε ακραία (>2000 mOsm) υπερτονικότητα. Μετά το πρώτο λεπτό, ο αριθμός των αιμοπεταλίων παρέμεινε σταθερός, υποδηλώνοντας ταχεία προσαρμογή των υπολειπόμενων αιμοπεταλίων σε ακραία (>2000 mOsm) υπερτονικότητα. Τελευταία πρώτη λεπτομέρεια θρομβοκύτωσης παραμένει σταθερή, что указывает на быструю аккомодацию остаточных тромбоцитов до экстремального (>2000 mOsm) υπερτονούσα. Μετά το πρώτο λεπτό, ο αριθμός των αιμοπεταλίων παρέμεινε σταθερός, υποδεικνύοντας μια ταχεία προσαρμογή των υπολειπόμενων αιμοπεταλίων σε ακραία (>2000 mOsm) υπερτονικότητα.第一分钟后，血小板计数保持稳定，表明残余血小板迅速适庉极端（ Om> 200m2000 mOsm）高渗状态. Τελευταία πρώτη λεπτομέρεια θρομβοκύτωσης παραμένει σταθερή, что указывает на быструю адаптацию остаточных тромбоцитов к экстремальному (>2000 mOsm) гиперосмолярному состоянию. Μετά το πρώτο λεπτό, ο αριθμός των αιμοπεταλίων παρέμεινε σταθερός, υποδεικνύοντας μια ταχεία προσαρμογή των υπολειπόμενων αιμοπεταλίων στην ακραία (>2000 mOsm) υπερωσμωτική κατάσταση.Οι συγκεντρώσεις γλυκόζης 25% και άνω οδήγησαν σε σημαντική αύξηση του μέσου όγκου αιμοπεταλίων (MPV), υποδεικνύοντας ένα πρώιμο στάδιο ενεργοποίησης των αιμοπεταλίων.Απαιτούνται περαιτέρω μελέτες για να καθοριστεί εάν συμβαίνει λύση ή ενεργοποίηση αιμοπεταλίων και εάν η υπέρτονη ένεση γλυκόζης μόνη της ή σε συνδυασμό με PRP μπορεί να προσφέρει πρόσθετο κλινικό όφελος.
Στη δεκαετία του 1950, ο Αμερικανός χειρουργός George Hackett ανακάλυψε ότι μπορούσε να ανακουφίσει μόνιμα τον πόνο στις αρθρώσεις και την πλάτη σε πολλούς ασθενείς με την ένεση ενός πολλαπλασιαστικού διαλύματος στους τένοντες και τους συνδέσμους.Τα πειράματά του σε κουνέλια έδειξαν ότι η θεραπεία, την οποία ονόμασε πολλαπλασιαστική θεραπεία, προκάλεσε μεγέθυνση και ενίσχυση των τενόντων.Ιστολογικές μελέτες έχουν επιβεβαιώσει ότι κατά τη διάρκεια αυτής της διαδικασίας παράγεται νέο κολλαγόνο [1].
Τις πρώτες δεκαετίες δοκιμάστηκαν πολλές διαφορετικές λύσεις διανομής.Μέχρι τη δεκαετία του 1990, οι περισσότεροι επαγγελματίες θεωρούσαν ότι οι υψηλές συγκεντρώσεις γλυκόζης ήταν η ασφαλέστερη και πιο αποτελεσματική μέθοδος.Ωστόσο, ο μηχανισμός δράσης παραμένει ασαφής.
Λίγες κλινικές μελέτες διεξήχθησαν τον 20ο αιώνα μετά το έργο του Hackett.Ωστόσο, στη δεκαετία του 2000 υπήρξε ανανεωμένο ενδιαφέρον και ολοκληρώθηκαν αρκετές επιτυχημένες κλινικές δοκιμές πολλαπλασιαστικής θεραπείας για τη θεραπεία της οσφυαλγίας [2], της οστεοαρθρίτιδας του γόνατος [3] και της πλάγιας επικονδυλίτιδας [4].
Η αναγέννηση των ιστών απαιτεί τη συμμετοχή βλαστοκυττάρων.Επομένως, οι υψηλές συγκεντρώσεις γλυκόζης πρέπει με κάποιο τρόπο να προκαλέσουν μετανάστευση, αντιγραφή και διαφοροποίηση των βλαστοκυττάρων.Υποθέτουμε ότι τα αιμοπετάλια μπορεί να λειτουργήσουν ως αγγελιοφόροι και ότι οι υψηλές συγκεντρώσεις γλυκόζης μπορεί να αναγκάσουν τα αιμοπετάλια να απελευθερώσουν κυτοκίνες και αυξητικούς παράγοντες, προάγοντας έτσι τις αναγεννητικές διαδικασίες, ιδιαίτερα τη μετανάστευση βλαστοκυττάρων σε περιοχές με υψηλές συγκεντρώσεις γλυκόζης.
Η ενεργοποίηση των αιμοπεταλίων πάντα προηγείται μιας αύξησης του ενδοκυτταρικού ασβεστίου [5].Οι Liu et al.το 2008 έδειξε ότι τα υψηλά επίπεδα γλυκόζης αυξάνουν τη δραστηριότητα των κανονικών καναλιών τύπου 6 (TRPC6) του δυναμικού παροδικού υποδοχέα στη μεμβράνη πλάσματος, γεγονός που οδηγεί σε εισροή ιόντων ασβεστίου στα αιμοπετάλια [6].Μια άλλη μελέτη έδειξε ότι η έκθεση της οριακής ζώνης του μικροσωληνίσκου σε ιόντα ασβεστίου προκαλεί χαλάρωση, επέκταση και παραμόρφωση της οριακής ζώνης, η οποία με τη σειρά της προκαλεί αλλαγή στο σχήμα από δίσκο σε σφαιρικό, με αποτέλεσμα τον μέσο όγκο αιμοπεταλίων (MPV) [7].
Η υπόθεσή μας σε αυτή τη μελέτη είναι ότι η έκθεση των αιμοπεταλίων σε υψηλές συγκεντρώσεις γλυκόζης επηρεάζει την οριακή ζώνη του μικροσωληνίσκου και το ενδοκυτταρικό περιβάλλον, οδηγώντας σε αύξηση του MPV.
Όλοι οι συμμετέχοντες υπέγραψαν μια ενημερωμένη φόρμα συγκατάθεσης αφού επεξηγηθούν οι λεπτομέρειες της μελέτης και πριν λάβουν τα δείγματα.Σε αυτή τη μελέτη, χρησιμοποιήθηκαν μόνο δείγματα PRP με αιματοκρίτη μεγαλύτερο από 2%, έτσι ώστε ο αριθμός των ερυθρών (ερυθροκυττάρων) και ο μέσος σωματιδιακός όγκος των ερυθρών αιμοσφαιρίων (MCV) να μπορούν να συμπεριληφθούν για σύγκριση.
Η μελέτη διεξήχθη σε τέσσερις φάσεις, η πρώτη φάση ήταν PRP και οι υπόλοιπες φάσεις ήταν ολικό αίμα (Πίνακας 1).Όπως περιγράφηκε προηγουμένως [8], όλες οι σχετικές φυγόκεντρες δυνάμεις (RCF, g-force) υπολογίστηκαν από το μέσο σημείο (Rmid, σε cm) της στήλης αίματος στη φυγοκεντρική σύριγγα.Επιλέξαμε να χρησιμοποιήσουμε το MPV ως δείκτη ευαισθητοποίησης των αιμοπεταλίων και τον αριθμό των αιμοπεταλίων ως δείκτη της πιθανής λύσης των αιμοπεταλίων, τα οποία μπορούν να μετρηθούν εύκολα σε τυπικούς αιματολογικούς αναλυτές.
Στην πρώτη φάση, 47 εθελοντές έδωσαν δείγματα αίματος—ένας σωλήνας αιθυλενοδιαμινοτετραοξικού οξέος (EDTA) και ένα δείγμα πλήρους αίματος PRP (αντιπηκτικό με κιτρικό νάτριο (NaCl, 3%)) (Πίνακας 1).Τοποθετήστε αμέσως τον βραχίονα στο σωλήνα.Ο πλήρης αριθμός αίματος (CBC) πραγματοποιήθηκε σε δείγματα EDTA εις τριπλούν και τα δείγματα NaCl αναλύθηκαν εις τριπλούν για ανάλυση CBC και στη συνέχεια παρασκευάστηκε το PRP με διάφορες μεθόδους που περιγράφονται παραπάνω [8].Όλα τα δείγματα PRP παρασκευάστηκαν με φυγοκέντρηση στα 900-1000 g.Αναμείξτε κάθε δείγμα PRP σε έναν αναμικτήρα vortex για 5–10 δευτερόλεπτα και, στη συνέχεια, διαιρέστε πέντε κλάσματα των 0,5 ml σε σωληνάρια.
Για να αξιολογηθεί η επίδραση της έκθεσης των αιμοπεταλίων στις αυξημένες συγκεντρώσεις γλυκόζης, ίσες ποσότητες (0,5 ml) 0%, 5%, 12,5%, 25% και 50% γλυκόζης σε νερό αναμίχθηκαν με δείγματα αιμοπεταλίων για να ληφθούν 0%, 2,5% 6,25%, 12,5% και 25% σε συγκεντρώσεις του μίγματος glucose του μίγματος σωληναρίου 25%.Το TAC κάθε μίγματος αναλύθηκε εις τριπλούν μετά από 15 λεπτά.Ο αριθμός αιμοπεταλίων (PLT), ο αριθμός RBC, MCV και MPV υπολογίστηκαν κατά μέσο όρο για κάθε σωληνάριο και ο μέσος αριθμός αιμοπεταλίων, ο αριθμός RBC, MCV και MPV υπολογίστηκαν για όλα τα δείγματα PRP.
Μετά την ολοκλήρωση της πρώτης φάσης συλλογής δεδομένων, παρατηρήσαμε σημαντική αύξηση στον όγκο των αιμοπεταλίων στα αιμοπετάλια PRP μετά την προσθήκη του D50W.Τα αιμοπετάλια PRP δεν αντιπροσωπεύουν απαραίτητα όλα τα αιμοπετάλια στο αίμα και το μέσο PRP διαφέρει από το μέσο WB.Ως εκ τούτου, αποφασίσαμε να διεξαγάγουμε μια δοκιμή δεύτερης φάσης για την επίδραση της προσθήκης D50W στο πλήρες αίμα.
Για τον δεύτερο γύρο, επιλέξαμε ένα μέγεθος δείγματος 30 με βάση τα αποτελέσματα από την πρώτη σειρά, όπως περιγράφεται στην ενότητα Ανάλυση.Σε αυτή τη σειρά, 20 εθελοντές έδωσαν δείγματα αίματος (Πίνακας 1).Ολικό αίμα (1,8 ml) τραβήχτηκε σε σύριγγα των 3 ml και αντιπηκτικό με 0,2 ml 40% NaCl.Η σύριγγα ολικού αίματος αναμίχθηκε για πέντε δευτερόλεπτα με έναν αναμικτήρα vortex και το CBC αναλύθηκε εις τριπλούν.Μετά την ανάλυση, προστέθηκε αντιπηκτικό αίμα σε 2 ml γλυκόζης 50% σε σύριγγα των 5 ml (η τελική συγκέντρωση γλυκόζης ήταν περίπου 25% (D25) και τοποθετήθηκε σε αναδευόμενο σωλήνα για 30 λεπτά. Μετά από 30 λεπτά, οι σύριγγες D25/CBC σε WB αναλύθηκαν εις τριπλούν. Το T, ο αριθμός RBC, το MCV και το MPV υπολογίστηκαν για κάθε δείγμα πριν και μετά την προσθήκη γλυκόζης.
Επειδή τα αιμοπετάλια στο πλήρες αίμα εκτίθενται συνήθως σε υπερτονική γλυκόζη κατά τη διάρκεια της θεραπείας πολλαπλασιαστικής γλυκόζης λόγω ελάχιστα επεμβατικής ένεσης και δεν είναι συνηθισμένο να συνδυάζεται PRP με υπερτονική γλυκόζη ακριβώς πριν από την ένεση, αποφασίσαμε να μελετήσουμε την υπερτονική γλυκόζη σε συνδυασμό με το WB στην Ενότητα 1. Βήμα τρία και τέσσερα.Σε κάθε στάδιο, 20 εθελοντές δώρησαν 7-8 ml ACD-A (οξύ που περιέχει κιτρικό τρινάτριο (22,0 g/l), κιτρικό οξύ (8,0 g/l) και γλυκόζη (24,5 g/l), διάλυμα κιτρικής δεξτρόζης) για αντιπηκτικά αίματος (Πίνακας 1).Μόνο μείγματα γλυκόζης άνω του 12,5% χρησιμοποιήθηκαν για τον προσδιορισμό του ποσοστού ορίου που σχετίζεται με την αύξηση του MPV.Στο τρίτο στάδιο, 1 ml αίματος τοποθετείται σε δοκιμαστικό σωλήνα.Στη συνέχεια, αναμείξτε το αίμα σε έναν αναδευτήρα στροβιλισμού για 10 δευτερόλεπτα προσθέτοντας 1 ml γλυκόζης 30%, γλυκόζης 40% ή 50% γλυκόζης στο σωληνάριο για να λάβετε μια τελική συγκέντρωση γλυκόζης 15%, 20% και 25%, αντίστοιχα.Τα δείγματα αίματος γλυκόζης αναλύθηκαν για CBC αμέσως μετά την ανάμειξη και επαναλαμβάνονταν κάθε δύο λεπτά για 30 λεπτά.
Κατά την αρχική ανάμιξη, η προσθήκη υπερτονικής γλυκόζης 1:1 και WB ή PRP εκθέτει τα αιμοπετάλια σε συγκεντρώσεις πάνω από 25% για αρκετά δευτερόλεπτα.Στο τέταρτο βήμα, για να αξιολογήσουμε την επίδραση της υπερτονικής γλυκόζης με ελάχιστες αρχικές μέγιστες συγκεντρώσεις και να ελέγξουμε το ανώτερο όριο της επίδρασης της γλυκόζης, προσθέσαμε μόνο μια μικρή ποσότητα αίματος στο D25W ή D50W.Τοποθετήστε 1 ml D25W ή D50W σε ένα σωληνάριο και προσθέστε 0,2 ml WB ενώ ανακατεύετε το δείγμα για 10 δευτερόλεπτα.Σε αυτές τις περιπτώσεις, το αίμα εκτέθηκε σε γλυκόζη σε συγκέντρωση περίπου 20% πάνω από την τελική συγκέντρωση, αντί 50% πάνω από την τελική συγκέντρωση όπως στη Φάση 3, με αποτέλεσμα τελικές συγκεντρώσεις γλυκόζης 20,8% και 41,6%.Τα μικτά δείγματα αναλύθηκαν στο ίδιο χρονικό διάστημα όπως στο βήμα 3.
Στο πρώτο βήμα κάθε σειράς αραιώσεων γλυκόζης, ελήφθησαν 30 δείγματα καθώς αυτό ήταν το κατάλληλο μέγεθος δείγματος για την πιλοτική μελέτη [9].Στο τέλος κάθε φάσης (συμπεριλαμβανομένης της πρώτης φάσης), αξιολογήστε την επάρκεια του μεγέθους του δείγματος χρησιμοποιώντας τον τύπο που χρησιμοποιείται για τον προσδιορισμό του μεγέθους του δείγματος που απαιτείται για την εκτίμηση του μέσου όρου της μεταβλητής συνεχούς έκβασης σε έναν πληθυσμό.Τύπος n = Z2 x SD2 /E2.Σε αυτήν την εξίσωση, το Z είναι το Z-score, το SD είναι η τυπική απόκλιση και το E είναι το επιθυμητό σφάλμα [10].Το άλφα μας είναι 0,05, που αντιστοιχεί σε τιμή Z 1,96 και αναμένουμε σφάλμα 5 (σε τοις εκατό).Επομένως λύνουμε για n = (1,962 x SD2)/52.Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι το μέγεθος του δείγματος που απαιτείται για κάθε στάδιο ήταν μικρότερο από τον πραγματικό αριθμό που συλλέχτηκε.
Κατά τις περιόδους 1, 3 και 4 χρησιμοποιώντας περισσότερες από μία συγκεντρώσεις γλυκόζης, η επίδραση διαφορετικών συγκεντρώσεων γλυκόζης αναλύθηκε συγκρίνοντας την κλασματική αλλαγή μεταξύ του χρόνου 0 και κάθε επόμενου χρόνου (φάση 1 στα 15 λεπτά, περίοδος 3 στα 15 λεπτά).και τέσσερις στα 15 δευτερόλεπτα, μετά κάθε δύο λεπτά.) Οι ρυθμοί αλλαγής για κάθε χρονική περίοδο συγκρίθηκαν χρησιμοποιώντας το τεστ U Mann-Whitney επειδή τα δεδομένα δεν ακολούθησαν μια κανονική κατανομή όπως καθορίστηκε από τη δοκιμή κανονικότητας Shapiro-Wilk.Εφόσον πραγματοποιήθηκε ανάλυση 1 προς 1 πολλών ομάδων (πέντε) στο πρώτο, τρίτο και τέταρτο βήμα (πέντε συνολικά), πραγματοποιήθηκε διόρθωση Bonferroni για να ρυθμιστεί η επιθυμητή τιμή άλφα σε ≤0,01 αλλά όχι ≤0,05.
Μείωση του αριθμού των αιμοπεταλίων με όλες τις συγκεντρώσεις υπερτονικής δεξτρόζης και αύξηση του MPV στα αιμοπετάλια PRP σε >12,5% συγκέντρωση δεξτρόζης: Ο αριθμός των αιμοπεταλίων του PRP αυξήθηκε από μία έως πέντε φορές τη συγκέντρωση σε σύγκριση με την αρχική τιμή του πλήρους αίματος, που ποικίλλει ανάλογα με τη μέθοδο (δεν απεικονίζεται). Μείωση του αριθμού των αιμοπεταλίων με όλες τις συγκεντρώσεις υπερτονικής δεξτρόζης και αύξηση του MPV στα αιμοπετάλια PRP σε >12,5% συγκέντρωση δεξτρόζης: Ο αριθμός των αιμοπεταλίων του PRP αυξήθηκε από μία έως πέντε φορές τη συγκέντρωση σε σύγκριση με την αρχική τιμή του πλήρους αίματος, που ποικίλλει ανάλογα με τη μέθοδο (δεν απεικονίζεται). Уменьшение количества тромбоцитов при всех центрациях гипертонической декстрозы и овеличение MPV σε θρομβομοκύτες PRP κατά συγκεντρώσεις θρόμβων > 12,5%: колιчество θρομβοτσιτό PRP αυξάνει σε 1-5 μέθοδο σε 1-5 εκ των υστέρων казано). Μειωμένος αριθμός αιμοπεταλίων σε όλες τις υπερτονικές συγκεντρώσεις δεξτρόζης και αυξημένο MPV σε αιμοπετάλια PRP σε >12,5% συγκέντρωση δεξτρόζης: Ο αριθμός αιμοπεταλίων PRP αυξήθηκε 1-5 φορές σε σύγκριση με το αρχικό πλήρες αίμα, ανάλογα με τη μέθοδο (δεν φαίνεται). ).在> 12,5% 的葡萄糖浓度下，所有浓度的高渗葡萄糖降低血小板计数，PRP V线全血相比，PRP 血小板计数从浓度的1 倍上升到5 倍，因方法而异（未漏 Σε >12,5% συγκέντρωση γλυκόζης, η υψηλή συγκέντρωση γλυκόζης μειώνει τον αριθμό του αίματος, το PRP MPV αίματος αυξάνεται: σε σύγκριση με το 与基线全血, ο αριθμός αίματος του PRP αυξάνεται από 1 έως 5 φορές από αυτόν της συγκέντρωσης (δεν περιγράφεται). Με συγκεντρώσεις > 12,5% σε όλες τις συγκεντρώσεις ьной крови, в зависимости от метода (не описано ). Σε συγκεντρώσεις γλυκόζης >12,5%, όλες οι υπερτασικές συγκεντρώσεις γλυκόζης μείωσαν τον αριθμό των αιμοπεταλίων και αύξησαν το MPV στα αιμοπετάλια PRP: ο αριθμός των αιμοπεταλίων PRP αυξήθηκε 1 έως 5 φορές σε σύγκριση με τις βασικές συγκεντρώσεις στο πλήρες αίμα, ανάλογα με τη μέθοδο (όπως περιγράφεται ).Το Σχήμα 1 δείχνει ότι ο αριθμός των αιμοπεταλίων μειώθηκε σχεδόν κατά 75% μετά την αραίωση σε νερό και κατά 20-30% μετά από 15 λεπτά αραίωσης με διαφορετικές συγκεντρώσεις γλυκόζης σε σύγκριση με την αρχική PRP και μια αραίωση 1:1 προσαρμοσμένη για όγκο (1-k1 με διόρθωση όγκου).κ -1 αναπαραγωγή).1 αναπαραγωγή).
Ο αριθμός των κυττάρων σε κάθε αραίωση εκφράζεται ως κλάσμα του αρχικού αριθμού πριν από την αραίωση.
Το MPV μειώθηκε ελάχιστα κατά την παραγωγή PRP, χωρίς περαιτέρω αλλαγή στις συγκεντρώσεις αραίωσης σε 12,5% σε νερό ή γλυκόζη (συμπεριλαμβανομένων 25% μιγμάτων γλυκόζης PRP) και αυξήθηκε κατά περισσότερο από 20% μετά την αραίωση σε διάλυμα γλυκόζης 50% (Εικ. .2).).Αντίθετα, τα ερυθροκύτταρα δεν εμφάνισαν σημαντική αλλαγή στον όγκο σε οποιαδήποτε αραίωση εκτός από το H2O.
Ο μέσος όγκος των κυττάρων σε κάθε αραίωση εκφράζεται ως ποσοστό του αρχικού όγκου πριν από την αραίωση.
Παρόμοια αλλά λιγότερο έντονη μείωση στον αριθμό των αιμοπεταλίων και αύξηση της CVR παρατηρήθηκαν σε BC που εκτέθηκαν σε 50% γλυκόζη (για σύνθεση με 25% γλυκόζη).Ο Πίνακας 2 συγκρίνει τους αριθμούς κυττάρων και τους όγκους κυττάρων σε πλήρες αίμα αραιωμένο σε 50% δεξτρόζη με δεδομένα PRP φάσης 1 αραιωμένα σε δεξτρόζη 50%.Οι αλλαγές στον αριθμό των RBC και του RBC MCV δεν ήταν εμφανείς και δεν ήταν το επίκεντρο της προσοχής μας.
SD = τυπική απόκλιση, MD = μέση διαφορά μεταξύ των ομάδων, SE = τυπική απόκλιση της μέσης διαφοράς, RBC = ερυθροκύτταρα, PLT = αιμοπετάλια, PRP = πλάσμα πλούσιο σε αιμοπετάλια, WB = πλήρες αίμα
Μετά την προσθήκη του D50W στο WB, η ποσοστιαία απώλεια αιμοπεταλίων προσαρμοσμένη στην αραίωση ήταν 7,7% (310±73 έναντι 286±96) σε σύγκριση με 17,8% για την αραίωση PRP σε D50W (664±348 έναντι 544±277).Το MPV WB αυξήθηκε κατά 16,8% (από 10,1 ± 0,5 σε 11,8 ± 0,6), ενώ το MPV PRP αυξήθηκε κατά 26% (9,2 ± 0,8 έναντι 11,6 ± 0, 7). Αν και οι μέσες διαφορές τόσο στη μείωση του αριθμού των αιμοπεταλίων όσο και στην αύξηση του MPV ήταν σημαντικά μεγαλύτερες με το PRP, οι αλλαγές στη μείωση του αριθμού των αιμοπεταλίων εντός του WB ήταν σχεδόν σημαντικές (310 ± 73 έως 286 ± 96 (-7,7%)· p ​​= 0,06) και η αύξηση του MPV ήταν σημαντική (10,1 ± 0,5 έως 1,0 ± 10). Αν και οι μέσες διαφορές τόσο στη μείωση του αριθμού των αιμοπεταλίων όσο και στην αύξηση του MPV ήταν σημαντικά μεγαλύτερες με το PRP, οι αλλαγές στη μείωση του αριθμού των αιμοπεταλίων εντός του WB ήταν σχεδόν σημαντικές (310 ± 73 έως 286 ± 96 (-7,7%)· p ​​= 0,06) και η αύξηση του MPV ήταν σημαντική (10,1 ± 0,5 έως 1,0 ± 10).Αν και οι μέσες διαφορές τόσο στη μείωση του αριθμού των αιμοπεταλίων όσο και στην αύξηση του CVR ήταν σημαντικά μεγαλύτερες με το PRP, οι αλλαγές στη μείωση του αριθμού των αιμοπεταλίων εντός του WB ήταν σχεδόν σημαντικές (310 ± 73 έως 286 ± 96 (-7,7%), p = 0,06).увеличение MPV было значительным (από 10,1 ± 0,5 έως 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001). η αύξηση του MPV ήταν σημαντική (από 10,1 ± 0,5 σε 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001).尽管PRP 在血小板计数减少和MPV 增加方面的平均差异显着更大，但WB 内述尡几乎是显着的（310 ± 73 至286 ± 96 (-7,7%)；p = .06）和MPV 的增加是显着的（10.1±1. 001).尽管 PRP 在 血小板 计数 和 和 增加 方面 的 平均 差异 显着 大 ， 但 佡 叡的 几乎 是 显着 的 （（（310 ± 73 至 286 ± 96 (-7,7%) ； p = .06）和MPV 的增加我110增加是10. ± 0,6 (+16,8) p < ,001）.Η αλλαγή στη μείωση του αριθμού των αιμοπεταλίων εντός του WB ήταν σχεδόν σημαντική (από 310 ± 73 σε 286 ± 96 (-7,7%)· p ​​= 0,06), αν και το PRP είχε σημαντικά μεγαλύτερες μέσες διαφορές στη μείωση του αριθμού των αιμοπεταλίων και στην αύξηση του MPV.και η αύξηση του MPV ήταν σημαντική.(από 10,1 ± 0,5 έως 11,8 ± 0,6 (+16,8) р < 0,001). (από 10,1 ± 0,5 έως 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001).
Απαιτήθηκε μια τελική συγκέντρωση 20% γλυκόζης για να δούμε μια σημαντική αλλαγή στο MPV, αλλά η αλλαγή στο MPV ήταν πιο έντονη στην τελική συγκέντρωση 25%.Η απώλεια αιμοπεταλίων σταθεροποιήθηκε μετά την αρχική πτώση.Παρατηρήσαμε μια αρχική απότομη μείωση στο CVR, ωστόσο, το CVR αποκαταστάθηκε γρήγορα στην τελική συγκέντρωση γλυκόζης 25%, η οποία ήταν σημαντικά υψηλότερη από τα επίπεδα CVR που παρατηρήθηκαν στις τελικές συγκεντρώσεις γλυκόζης 20% και 15% (Εικ. 3 και αριστερά του Πίνακα 3, σκιασμένα κουτιά).υποδεικνύουν τιμές p ≤ alpha με διόρθωση Bonferroni 0,01).Υπήρξε επίσης μια αρχική απότομη πτώση στον αριθμό των PLT, που παρατηρήθηκε στην αρχική φάση των 0-15 δευτερολέπτων, και στη συνέχεια παρέμεινε σταθερή (από 15 δευτερόλεπτα σε 30 λεπτά, αριστερά από τον πίνακα 4).
Η προσθήκη διαφόρων συγκεντρώσεων γλυκόζης στο πλήρες αίμα είχε ως αποτέλεσμα μια αρχική ταχεία μείωση του MPV ακολουθούμενη από ανάκτηση εξαρτώμενη από τη συγκέντρωση άνω του 20%.Το υπόμνημα δείχνει τη συγκέντρωση της γλυκόζης μετά την αραίωση.Τα D15, D20 και D25 πραγματοποιήθηκαν σε αραίωση 1:1.Τα D21 και D41 πραγματοποιήθηκαν σε αραίωση 1:5.
Ο Πίνακας 4 δείχνει την αλλαγή στον αριθμό των αιμοπεταλίων όταν αραιώνεται σε υπερτονική γλυκόζη.Παρατηρήσαμε μια δοσοεξαρτώμενη σχέση μεταξύ της άμεσης πτώσης των αριθμών PLT στην αραίωση 1:1 και στην αραίωση 1:5.Συγκρίνοντας τις αραιώσεις 1:1 ως μεμονωμένη ομάδα με τις αραιώσεις 1:5, η ομάδα 1:1 είχε άμεση μείωση στον αριθμό των αιμοπεταλίων μικρότερη από την ομάδα 1:5 66±48.000 (23%) έναντι 99±69.000 (37%)., p = 0,014) στην ομάδα 1:5.Μετά από μια αρχική πτώση στο πρώτο σημείο μέτρησης, ο αριθμός των αιμοπεταλίων ως ποσοστό γλυκόζης σταθεροποιημένης (Εικ. 4).
Όταν προστίθεται πλήρες αίμα στη γλυκόζη σε αναλογία 1:1, ο αριθμός των αιμοπεταλίων μειώνεται κατά περίπου 25%.Ωστόσο, όταν προστέθηκε πλήρες αίμα σε αναλογία 1:5, η μείωση ήταν πολύ μεγαλύτερη - περίπου 50%.
Η γλυκόζη 41% αύξησε το MPV πιο γρήγορα και πιο δραματικά από το 25% ή το 21%.Τα αποτελέσματα MPV φαίνονται στο Σχήμα 3. Σε όλες τις άλλες αραιώσεις, δεν παρατηρήθηκε άμεση αρχική μείωση του MPV μετά την προσθήκη 50% γλυκόζης.Όταν χρησιμοποιήθηκε γλυκόζη 25% (συγκέντρωση γλυκόζης 20,8% στην τελική αραίωση), η αλλαγή στο MPV ήταν συγκρίσιμη με την αλλαγή στο 20% γλυκόζη σε αραίωση 1:1 (Εικ. 3).Αν και οι αλλαγές στο MPV ήταν αρχικά μεγαλύτερες στη μικτή συγκέντρωση 41% παρά στο 25%, η διαφορά στο MPV μεταξύ 41% και 25% μετά από 16 λεπτά δεν ήταν πλέον σημαντική (Πίνακας 3, δεξιά).Είναι επίσης ενδιαφέρον ότι το 25% γλυκόζη αύξησε το MPV πιο αποτελεσματικά από το 20,8%.
Αυτή η in vitro μελέτη επιβεβαίωσε εν μέρει την υπόθεσή μας. Έδειξε πιθανή μερική λύση των αιμοπεταλίων με πρόσμειξη δεξτρόζης, ταχεία προσαρμογή των αιμοπεταλίων σε ακραία υπερτονικότητα και σημαντική αύξηση του MPV ως απόκριση σε > 25% συγκεντρώσεις υπερτονικής δεξτρόζης. Έδειξε πιθανή μερική λύση των αιμοπεταλίων με πρόσμειξη δεξτρόζης, ταχεία προσαρμογή των αιμοπεταλίων σε ακραία υπερτονικότητα και σημαντική αύξηση του MPV ως απόκριση σε > 25% συγκεντρώσεις υπερτονικής δεξτρόζης. Он показал потенциальный частичный лизис тромбоцитов примесью декстрозы, быструю аккомодацию тромбоцитов до экстремального гипертонуса и значительное повышение MPV в ответ на hypertonicheskuyu concentraciyu 5%. Έδειξε πιθανή μερική λύση των αιμοπεταλίων με δεξτρόζη, ταχεία προσαρμογή των αιμοπεταλίων σε ακραία υπερτονικότητα και σημαντική αύξηση του MPV ως απόκριση σε υπερτονικά επίπεδα δεξτρόζης >25%.它显示出通过葡萄糖混合物潜在的部分血小板溶解，血小板快速适应极> % 浓度的高渗葡萄糖时MPV 显着上升。它 显示 出 通过 葡萄糖 潜在 的 部分 血小板 溶解 血小板 快速 适庯 极的应> 25% 浓度 高渗 葡萄糖 时 时 mpv 显着。。。。。 Он показывает потенциальный частичный лизис тромбоцитов смесями со глюкозой, быструю адаптацию тромбоцитов к экстремальному υπερτονούσυ και значительное увеличение MPV в ответ на концентраций глюкозой 25%. Δείχνει πιθανή μερική λύση αιμοπεταλίων από μείγματα γλυκόζης, ταχεία προσαρμογή των αιμοπεταλίων σε ακραία υπερτονικότητα και σημαντική αύξηση του MPV ως απόκριση σε υπερτονική γλυκόζη >25%.Η αρχική αύξηση ήταν μέγιστη σε 41,6% έκθεση σε γλυκόζη, αλλά η αύξηση στην MPV πλησίασε το 25% έκθεση σε γλυκόζη περίπου 20 λεπτά μετά την έκθεση.
Η συγκέντρωση των αιμοπεταλίων επηρεάζεται από τη γλυκόζη.Παρατηρήσαμε ότι η ποσότητα του PLT μειώθηκε σε όλες τις αραιώσεις γλυκόζης.Μια απότομη πτώση του αριθμού των αιμοπεταλίων σε αραιώσεις H2O (0%) της σειράς PRP μπορεί να σχετίζεται με ωσμωτική λύση.Εναλλακτικά, αυτό θα μπορούσε να είναι ένα τεχνούργημα που προκαλείται από συσσώρευση αιμοπεταλίων, αλλά αυτό έρχεται σε αντίθεση με την έλλειψη αλλαγής MPV σε αυτήν την αραίωση.Αυτό το εύρημα σημαίνει ότι ορισμένα αιμοπετάλια είναι πολύ ευαίσθητα στην υποωσμωτικότητα.
Και σε όλες τις αραιώσεις γλυκόζης 1:1, η ποσότητα της PLT μειώθηκε κατά 20-30%, ακόμη και κατά D5W (υποτονική στα 252 mOsm), γεγονός που μπορεί να υποδηλώνει ειδική μη ωσμωτική επίδραση της γλυκόζης, καθώς τόσο το PLT όσο και το MPV παρέμειναν αμετάβλητα σε τριπλάσια αύξηση της συγκέντρωσης.γλυκόζη.από D5W έως D25W.Στην πραγματικότητα, οι συγκεντρώσεις PLT έτειναν να αυξάνονται ελαφρώς με την αύξηση της ωσμωτικότητας.
Η μείωση του PLT μεταξύ 1:1 και 1:5 αραιώσεων σημαίνει ότι το αποτέλεσμα διάλυσης εξαρτάται από την αρχική και την τελική συγκέντρωση γλυκόζης.Εάν εξαρτιόταν μόνο από την αρχική συγκέντρωση, τότε θα περίμενε κανείς να δει μια διαφορά στη μείωση της PLT μεταξύ συγκεντρώσεων 1:1.Αλλά δεν το κάνουμε.Εάν το αποτέλεσμα λύσης εξαρτάται μόνο από την τελική συγκέντρωση γλυκόζης, τότε δεν αναμένουμε μεγάλη διαφορά μεταξύ μιας αραίωσης 20% 1:1 και μιας αραίωσης 20,8% 1:5.Κι όμως το καταφέραμε.
Εάν συμβεί απώλεια αιμοπεταλίων λόγω λύσης αιμοπεταλίων, σχηματίζεται ένα μερικό προϊόν λύσης, μετά το οποίο απελευθερώνονται κυτοκίνες και αυξητικοί παράγοντες στο εξωκυτταρικό περιβάλλον.Αρκετές μελέτες έχουν δείξει ότι το προϊόν λύσης αιμοπεταλίων είναι σχεδόν εξίσου αποτελεσματικό με το PRP με ένα διάλυμα πολλαπλασιασμού [11].Το ίδιο το PRP έχει αποδειχθεί ότι είναι μια αποτελεσματική λύση για τη θεραπεία του πολλαπλασιασμού [12-14].
Τα ανενεργά αιμοπετάλια κυκλοφορούν με τη μορφή δίσκου ενισχυμένου με πολλές εσωτερικές δομές.Κατά την ενεργοποίηση παίρνουν πιο σφαιρικό σχήμα ή αμοιβάδα, με αποτέλεσμα να αυξάνεται ο όγκος τους.Η αύξηση του όγκου απαιτεί αύξηση της επιφάνειας, η οποία είναι αποτέλεσμα της εξώθησης του συστήματος ανοιχτών σωληναρίων (OCS) και της προσθήκης εξωκυτταρικών κόκκων στη μεμβράνη.Μένει να καθοριστεί εάν η αύξηση του MPV που προκαλείται από την υπερτονική γλυκόζη περιλαμβάνει έναν ή και τους δύο από αυτούς τους μηχανισμούς, αλλά εάν ο τελευταίος, τότε μια αύξηση του MPV θα υποδηλώνει αποκοκκίωση.
Αυτή η μελέτη έδειξε ότι η έκθεση σε υψηλές συγκεντρώσεις γλυκόζης στο PRP ή σε αιμοπετάλια ολικού αίματος είχε ως αποτέλεσμα αύξηση του MPV μέσα σε 15 λεπτά με συγκέντρωση γλυκόζης 25% και 41,6%, αντίστοιχα.
Η αύξηση του MPV των αιμοπεταλίων μπορεί να οφείλεται στη διαστολή των περιβαλλόντων μικροσωληνίσκων ως απόκριση στην εισροή ασβεστίου.Οι Liu et al.Η γλυκόζη έχει αποδειχθεί ότι μεσολαβεί στην εισροή ασβεστίου μέσω του καναλιού TRPC6 των αιμοπεταλίων [6].Η υπόθεσή μας είναι ότι η γλυκόζη προκαλεί χαλάρωση των μπερδέματος των μικροσωληνίσκων, οδηγώντας σε αύξηση του MPV και της ευαισθητοποίησης ή/και ενεργοποίησης των αιμοπεταλίων.Ωστόσο, κρίνοντας από τα αποτελέσματά μας, αυτό είναι μόνο ένα μέρος της ιστορίας.Στις δοκιμές μας, καμία συγκέντρωση κάτω από το D25W δεν οδήγησε σε αύξηση του MPV.Δεδομένου ότι δεν έχουμε δοκιμάσει έκθεση σε συγκεντρώσεις γλυκόζης μεταξύ 12,5% και 25%, τα αποτελέσματα της φάσης 1 υποδηλώνουν ότι μπορεί να υπάρχει ένα όριο σε αυτό το εύρος συγκεντρώσεων γλυκόζης που οδηγεί σε αύξηση του MPV.Περαιτέρω δοκιμή στα στάδια 3 και 4 έδειξε ότι το 20-25% γλυκόζη φαίνεται να είναι το κατώφλι για αυτό, αλλά παραμένει ασαφές το γιατί.
Παρατηρήσαμε επίσης μια μείωση ~ 9% στο MPV μετά τη φυγοκέντρηση.Δεν είναι σαφές εάν αυτή η μείωση του MPV οφείλεται σε μεγαλύτερα και πυκνότερα αιμοπετάλια που έχουν παγιδευτεί στο στρώμα RBC της συσκευής φυγοκέντρησης.Αυτή η παρατήρηση μπορεί να είναι σημαντική για τους κλινικούς ιατρούς καθώς μπορεί να υπονοεί ότι τα αιμοπετάλια PRP είναι ένα μικρότερο και λιγότερο πυκνό υποσύνολο αιμοπεταλίων WB.
Σε μια προηγούμενη μελέτη, δείξαμε ότι η προετοιμασία PRP με χειρωνακτικές μεθόδους είναι φθηνή [8].Εάν η γλυκόζη ευαισθητοποιεί τα αιμοπετάλια των ιστών ή το PRP, καθιστώντας τα πιο ευαίσθητα στην ενεργοποίηση ή εάν το PRP παράγεται με μερικές ιδιότητες λύσης, αυτό μπορεί να ενισχύσει την αναγέννηση και να μειώσει την ανάγκη για θεραπεία.Ως εκ τούτου, ο συνδυασμός PRP και υψηλής συγκέντρωσης γλυκόζης μπορεί να είναι πιο οικονομικός από το PRP ή τη γλυκόζη μόνο.
Η μελέτη μας έχει αρκετές ελλείψεις.Πρώτον, χρησιμοποιούμε PRP που λαμβάνεται από πολλές διαφορετικές μεθόδους.Αυτό μπορεί να οδηγήσει σε αντικρουόμενα αποτελέσματα.Δεύτερον, δεν μπορέσαμε να πραγματοποιήσουμε βιοχημική ανάλυση οποιουδήποτε από τα δείγματά μας για να προσδιορίσουμε με μεγαλύτερη ακρίβεια εάν είχε συμβεί ενεργοποίηση αιμοπεταλίων.Θα θέλαμε να μετρήσουμε την P-σελεκτίνη, τον παράγοντα 4 αιμοπεταλίων, τα συσσωματώματα μονοκυτταρικών αιμοπεταλίων ή άλλους δείκτες ενεργοποίησης των αιμοπεταλίων για να κατανοήσουμε καλύτερα τον βαθμό ή την παρουσία της αποκοκκίωσης των άλφα κοκκίων, αλλά αυτό είναι πέρα ​​από το πεδίο αυτής της μελέτης.Τρίτον, δεν μπορέσαμε να επιβεβαιώσουμε με ηλεκτρονική μικροσκοπία ή άλλες μεθόδους ότι η αύξηση του MPV στα αιμοπετάλια που εκτέθηκαν στη γλυκόζη οφειλόταν στην επίδραση στα μπερδέματα των μικροσωληνίσκων.
Μείγματα WB ή PRP με 25% γλυκόζη αύξησαν το MPV, σηματοδοτώντας την έναρξη της ενεργοποίησης των αιμοπεταλίων, αν και αυτή η μελέτη δεν έδειξε εξέλιξη της συσσώρευσης ή αποκοκκίωσης.Το υπερτονικό μείγμα γλυκόζης είχε ως αποτέλεσμα την απώλεια αιμοπεταλίων, πιθανώς αντιπροσωπεύοντας ένα λυτικό αποτέλεσμα.Η μερική ενεργοποίηση ή λύση των αιμοπεταλίων μπορεί να προκαλέσει αναγέννηση ιστού μετά την ένεση αιμοπεταλίων.Δεν είναι σαφές σε ποιες κλινικές συνέπειες μπορεί να οδηγήσουν αυτές οι αλλαγές.Περαιτέρω μελέτες έχουν δείξει πιο ακριβείς μετρήσεις ενεργοποίησης ή λύσης και έχουν αξιολογήσει τις διαφορετικές κλινικές επιδράσεις των μιγμάτων υπερτονικής γλυκόζης με WB ή PRP.
Η θεραπεία πολλαπλασιασμού γλυκόζης είναι μια απλή και φθηνή αναγεννητική θεραπεία που επεκτείνεται ταχέως και υποστηρίζει την κλινική έρευνα.Αυτή η μελέτη προτείνει έναν φυσιολογικό μηχανισμό που, εάν επιβεβαιωθεί, θα μπορούσε να μας βοηθήσει να κατανοήσουμε μέρος του αναγεννητικού μηχανισμού της πολλαπλασιαστικής θεραπείας.
Βιοϊατρική και Πληροφορική Υγείας στο Πανεπιστήμιο του Μιζούρι, Ιατρική Σχολή του Κάνσας Σίτι, Κάνσας Σίτι, Η.Π.Α.
Ανθρώπινα Υποκείμενα: Όλοι οι συμμετέχοντες σε αυτή τη μελέτη έδωσαν ή δεν συναίνεσαν.Η International Society for Cellular Medicine εξέδωσε την έγκριση ICMS-2017-003.Το ακόλουθο πρωτόκολλο έχει εγκριθεί για περαιτέρω χρήση από το Συμβούλιο Θεσμικής Αναθεώρησης της Διεθνούς Εταιρείας Κυτταρικής Ιατρικής: Τίτλος: Υπολογισμός της απόδοσης φαρμάκου πλάσματος πλούσιου σε αιμοπετάλια με βάση τον αρχικό αριθμό αιμοπεταλίων CBC.Ζώα: Όλοι οι συγγραφείς επιβεβαίωσαν ότι κανένα ζώο ή ιστός δεν συμμετείχαν σε αυτή τη μελέτη.Σύγκρουση συμφερόντων: Σύμφωνα με την Ενιαία Φόρμα Αποκάλυψης του ICMJE, όλοι οι συγγραφείς δηλώνουν τα εξής: Πληροφορίες πληρωμής/υπηρεσίας: Όλοι οι συγγραφείς δηλώνουν ότι δεν έλαβαν οικονομική υποστήριξη από κανέναν οργανισμό για το έργο που υποβλήθηκε.Οικονομικές σχέσεις: Όλοι οι συγγραφείς δηλώνουν ότι δεν έχουν επί του παρόντος ή εντός των τελευταίων τριών ετών οικονομικές σχέσεις με οποιονδήποτε οργανισμό που μπορεί να ενδιαφέρεται για την υποβληθείσα εργασία.Άλλες σχέσεις: Όλοι οι συγγραφείς δηλώνουν ότι δεν υπάρχουν άλλες σχέσεις ή δραστηριότητες που ενδέχεται να επηρεάσουν το έργο που υποβάλλεται.
Harrison TE, Bowler J, Reeves Κ et al.(17 Μαΐου 2022) Η επίδραση της γλυκόζης στον αριθμό και τον όγκο των αιμοπεταλίων: επιπτώσεις για την αναγεννητική ιατρική.Cure 14(5): e25081.doi:10.7759/cureus.25081
© Πνευματικά δικαιώματα 2022 Harrison et al.Αυτό είναι ένα άρθρο ανοιχτής πρόσβασης που διανέμεται σύμφωνα με τους όρους της άδειας αναφοράς Creative Commons CC-BY 4.0.Επιτρέπεται η απεριόριστη χρήση, διανομή και αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση ότι ο αρχικός συγγραφέας και η πηγή αναφέρονται.