Akiro kaj distribuado de nutraĵoj integras insektajn furaĝojn kaj vivhistoriajn trajtojn. Por kompensi mankojn en specifaj nutraĵoj en malsamaj vivfazoj, insektoj povas akiri ĉi tiujn nutraĵojn per suplementa nutrado, ekzemple per nutrado de vertebrulsekrecioj en procezo konata kiel flakoj. La moskito Anopheles arabiani ŝajnas esti subnutrata kaj, tial, ĉu ĉi tiu metabolo kaj reproduktado postulas studadon de nutraĵoj.arabiensis agitado sur bovina urino por nutra akiro plibonigas vivhistoriajn trajtojn.
Certiĝu ke ĝi estas sekura.arabiensis estis altirita de la odoro de freŝa, 24-hora, 72-hora, kaj 168-hora malnova bovina urino, kaj gast-serĉanta kaj sang-manĝita (48-hora post-sanga manĝo) inoj estis mezuritaj en Y-tuba olfatometro, kaj gravedaj testoj kaj kombinitaj inoj estis kombinitaj por elektrofiziologia analizo. identigi bioaktivajn komponaĵojn en bovina urino ĉe ĉiuj kvar aĝklasoj. Sintezaj miksaĵoj de bioaktivaj komponaĵoj estis taksitaj en Y-tubo kaj kampaj provoj. Por esplori bovinan urinon kaj ĝian ĉefan nitrogen-enhavantan komponaĵon ureon kiel eblajn suplementajn dietojn por malariaj vektoroj, oni mezuris nutrajn parametrojn kaj vivhistoriajn trajtojn. La proporcio de inaj moskitoj absorbis kvanton de bovino kaj inaj nutraĵoj absorbitaj. estis taksitaj por supervivo, ligita flugo, kaj reproduktado.
Serĉu la sangon kaj nutraĵon de la gastiganto. En laboratorio kaj kampaj studoj, araboj estis altiritaj al la natura kaj sinteza odoro de freŝa kaj aĝa bovina urino. Gravedaj inoj estis indiferentaj al bovinurino-respondoj ĉe ovulokoj. Gastigantoj kaj sangsuĉaj inoj aktive sorbas bovinan urinon kaj ureon kaj atribuas ĉi tiujn resursojn por vivo-stato por vivstato por transvivo-funkcio. , aŭ reproduktado.
Anopheles arabinis akiro kaj distribuado de bovina urino por plibonigitaj vivhistoriaj trajtoj. Suplementa nutrado de bovina urino influas vektoran kapablon rekte per pliigo de ĉiutaga supervivo kaj vektora denseco, kaj nerekte per ŝanĝado de flugagado kaj tial devus esti konsiderata en estontaj modeloj.
Akiro kaj distribuo de nutraĵoj integras insektajn furaĝojn kaj vivhistoriajn karakterizaĵojn [1,2,3].Insektoj kapablas elekti kaj akiri manĝaĵon kaj plenumi kompensan nutradon bazitan sur manĝhavebleco kaj nutraj postuloj [1, 3].La distribuado de nutraĵoj dependas de la vivhistoria procezo kaj povas konduki al malsamaj postuloj por dieto-kvalito kaj kvanto en malsamaj vivfazoj de insektoj, por kompensi ĉi tiujn mankojn per specifaj nutraĵoj. suplementa nutrado, kiel ekzemple sur koto, diversaj ekskrementoj kaj sekrecioj de vertebruloj, kaj kadavraĵo, procezo konata kiel flakoj [2].Kvankam diversaj papiliaj kaj tineospecioj estas ĉefe priskribitaj, akvumaj truoj ankaŭ okazas en aliaj insektaj ordoj, kaj altiro kaj nutrado de ĉi tiuj specoj de resursoj povas havi signifajn efikojn sur sano kaj aliaj vivhistorioj [5, 6] . nopheles gambiae sensu lato (sl) aperas kiel "subnutrita" plenkreskulo [8], do akvumado povas ludi gravan rolon en siaj vivhistoriaj trajtoj, sed tiu konduto ĝis nun estis neglektita. La uzo de agitado kiel rimedo por pliigi nutrajn konsumadon en ĉi tiu grava veturilo meritas atenton ĉar tio povas havi gravajn epidemiologiajn sekvojn.
Nitrogena konsumado en plenkreskaj inaj Anopheles moskitoj estas limigita pro malaltaj kaloriaj rezervoj portitaj de la larva stadio kaj malefika utiligo de sangomanĝo [9]. Female Ann.gambiae sl tipe kompensas tion per suplementaj sangaj manĝoj [10, 11], tiel metante pli da homoj en risko de kontrakti la malsanon kaj pli grandan uzon de malsanoj kaj pligrande uzado de medikamentoj. suplementa nutrado de vertebrulaj ekskrementoj akiri nitrogenajn komponaĵojn kiuj plibonigas adaptadon kaj flugmanoveblecon, kiel pruvis aliaj insektoj [2].Ĉi-rilate, la forta kaj distinga altiro de unu el la gefrataj specioj ene de An.La Gambian sl specio komplekso, Anopheles arabinis, freŝa kaj aĝa bovino urino [12,13,14 estas konata al gastiganto preferoj kaj arabini estas oportunaj preferoj. e kun kaj manĝas bovojn.Bova urino estas rimedo riĉa je nitrogenaj komponaĵoj, kun ureo respondecas pri 50-95% de la totala nitrogeno en freŝa urino [15, 16].Kiel bova urino maljuniĝas, mikroorganismoj utiligas ĉi tiujn rimedojn por redukti la kompleksecon de nitrogenaj komponaĵoj ene de 24 horoj [15].Kun la rapida kresko de nitrogeno de amonio-organiko asociita kun amonia deklinacio de azoto ene de 24 horoj [15]. el kiuj produktas kunmetaĵojn toksajn por moskitoj) prosperas [15], kiu povas esti ino Ann.arabiensis estas prefere altirita al urino aĝa 24 horoj aŭ malpli [13, 14].
En ĉi tiu studo, gastiganto kaj sangomanĝita Ans estis serĉita.Dum ĝia unua gonadotropina ciklo, arabiensis estis taksita por la akiro de nitrogenaj komponaĵoj, inkluzive de ureo, per urina miksado. Poste, serio de eksperimentoj estis faritaj por taksi kiel inaj moskitoj asignas ĉi tiun eblan nutran rimedon por plibonigita postvivado, reproduktado kaj plia supervivo, reproduktado kaj freŝa nutrado de la reproduktado kaj freŝa manĝo. por determini ĉu ĉi tiuj provizis fidindajn indicojn por gastiganto kaj sango-manĝita An. En ilia serĉo por ĉi tiu ebla nutra rimedo, arabiensis malkovris kemiajn korelaciojn malantaŭ la observita diferenciga allogeco. Sintezaj odoraj miksaĵoj de volatilaj organikaj komponaĵoj (COV) identigitaj en 24-hora aĝa urino estis plue taksitaj sub kampaj kondiĉoj, etendante la rezultojn akiritajn en la laboratorio-kondiĉoj kaj pruvante la malsamajn efikojn de bova stato.Moskitologaĵo.La rezultoj akiritaj konfirmas ke An.arabiensis akiras kaj distribuas nitrogenajn kunmetaĵojn trovitajn en vertebrulurino por influi vivhistoriajn trajtojn. Ĉi tiuj rezultoj estas diskutitaj en la kunteksto de eblaj epidemiologiaj sekvoj kaj kiel ili povas esti uzitaj por vektora gvatado kaj kontrolo.
Anopheles arabicans (Dongola trostreĉiĝo) estis konservitaj je 25 ± 2 °C, 65 ± 5% RH kaj 12:12 h lumo:malluma ciklo.Larvoj estis breditaj en plastaj pletoj (20 cm × 18 cm × 7 cm) plenigitaj per distilita akvo kaj nutritaj kun Tetramin® fiŝomanĝaĵo (Neniaj tetramin® fiŝoj manĝitaj, Ni kolektis 3 ml). lato Hertila, Åstorp, SE) kaj poste transdonita al Bugdorm-kaĝoj (30 cm × 30 cm × 30 cm; MegaView Science, Taichung, Tajvano) por permesi plenkreskan aperon. Plenkreskuloj estis provizitaj per 10% sukrozosolvo ad libitum ĝis 4 tagoj post apero (dpe), ĉe kiu punkto estis proponita gastiganto-serĉanta akvon antaŭ ol la eksperimento estis proponita antaŭ la gastiganto-serĉanta akvon, aŭ tuj antaŭ la eksperimento de la inoj estis distilataj. kiel priskribite sube.Inoj uzataj por flugtubaj eksperimentoj estis malsatigitaj dum nur 4-6 horoj kun akvo ad libitum.Por prepari sangosuĉajn moskitojn por postaj biotestoj, 4 dpe-inoj estis provizitaj per defibrota ŝafsango (Håtunalab, Bro, SE) uzante membranmanĝigan sistemon (Hemotek Discovery Workshops, Accrington, Accrington, tiam estis rekte transdonitaj al individuoj al UK). malsupre, aŭ 10% sakarozo ad libitum dum 3 tagoj antaŭ la eksperimentoj priskribitaj malsupre.La lastaj inoj estis uzitaj por flugtuba bioanalizo kaj transdonitaj al la laboratorio, kaj tiam distilita akvo laŭvole dum 4-6 horoj antaŭ la eksperimento.
Nutraj analizoj estis uzataj por kvantigi urinon kaj ureokonsumon en plenkreska An.Arab ino.Host-serĉantaj kaj sang-manĝitaj inoj ricevis dieton enhavantan 1% diluitan freŝan kaj aĝan bovinurinon, diversajn koncentriĝojn de ureo, kaj du kontrolojn (10% sakarozo kaj akvo) dum 48 h. Krome, nutraĵa koloraro (mg CAS-170170; 1; Sigma-Aldrich, Stokholmo, SE) estis aldonita al la dieto kaj provizita en 4 × 4 matrico en 250 µl mikrocentrifugaj tuboj (Axygen Scientific, Union City, CA, Usono; Figuro 1A) Plenigu ĝis la rando (~300 µl). en diametro kaj 6 cm en alteco; Semadeni, Ostermundigen, CH; Figuro 1A) en kompleta mallumo je 25 ± 2 cm °C kaj 65 ± 5% relativa humideco.Ĉi tiuj eksperimentoj estis ripetitaj 5 ĝis 10 fojojn.Post eksponiĝo al dieto, moskitoj estis metitaj je -20 °C ĝis plua analizo.
Serĉu bovan urinon kaj ureon absorbitan de la gastiganto kaj sangosuĉanta ino Anopheles arabianus.En manĝprovo (A), inaj moskitoj estis provizitaj per dieto konsistanta el freŝa kaj aĝa bovina urino, diversaj koncentriĝoj de ureo, sakarozo (10%) kaj distilita akvo (H2O). -serĉantaj inoj sorbis 72-horan bovinuron malpli ol 168-hora bovina urino (B).La averaĝa totala nitrogena enhavo (± norma devio) de urino estas reprezentita en la enigaĵo.Gastiganto-serĉanta (D, F) kaj sangosuĉado (E, G) inoj prenas ureon en dozo-dependa maniero. ANOVA uzante la post-hoc-analizon de Tukey; p < 0.05).Eraraj stangoj reprezentas norman eraron de la meznombro (BE).La rekta strekita linio reprezentas la log-linian regresan linion (F, G)
Por liberigi sorbitan manĝaĵon, moskitoj estis individue metitaj en 1.5 ml mikrocentrifugajn tubojn enhavantajn 230 µl da distilita akvo kaj la histo estis interrompita per unu-uza pistilo kaj sendrata motoro (VWR International, Lund, SE), sekvita per centrifugado je 10 krpm dum 10 min. gma-Aldrich) kaj sorbado (λ620) estis determinitaj per spektrofotometro-bazita mikroplata leganto (SPECTROStar® Nano, BMG Labtech, Ortenberg, DE) nm).Alterne, la moskitoj estis muelitaj en 1 ml da distilita akvo, 900 µl el kiuj estis transdonitaj al kuveto-analizo de 1000 µl por 1000 µl (Kuveto, λ, 800 µl). ista, SE).Por kvantigi manĝingon, norma kurbo estis preparita per seria diluo por doni 0,2 µl ĝis 2,4 µl da 1 mg ml-1 xilen-cianido. Tiam, la optika denseco de konataj tinkturfarbkoncentriĝoj estis uzita por determini la kvanton de manĝaĵo ĉiu moskito ingestita.
Volumendatenoj estis analizitaj uzante unudirektan analizon de varianco (ANOVA) sekvita de la post hoc duopaj komparoj de Tukey (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc., Cary, NC, Usono, 1989–2007). Lineara regresanalizo priskribis koncentriĝ-dependan urean konsumon kaj komparitajn respondojn inter sangaj konsumoj kaj sangaj konsumoj (Prikvitoj) 0 por Mac, GraphPad Software, San-Diego, CA, Usono).
Proksimume 20 µl da urinprovaĵoj de ĉiu aĝoklaso estis ligitaj sur Chromosorb® W/AW (10 mg 80/100 mesh, Sigma Aldrich) kaj enkapsuligitaj en stanaj kapsuloj (8 mm × 5 mm). Kapsuloj estis enigitaj en la brulkameron de CHNS/O-analizilo (Flash 2000, 2000-2000, 2000-2000, 2000-2000). rino laŭ la protokolo de la fabrikanto.Tuma nitrogeno (g N l-1) estis kvantigita surbaze de konataj ureaj koncentriĝoj uzataj kiel normo.
Por taksi la efikon de dieto sur gastiganta kaj sangosuĉanta ina supervivo, moskitoj estis individue metitaj en grandajn Petri-pladojn (12 cm en diametro kaj 6 cm en alteco; Semadeni) kun retkovrita truo en la kovrilo (3 cm en diametro) kun Por ventolado kaj nutraĵo. , Kaj du kontroloj, 10% sakarozo kaj akvo.Ĉiu dieto estis pipetita sur denta tampono (DAB Dental AB, Upplands Väsby, SE) enigita en 5 ml injektilo (Thermo Fisher Scientific, Gothenburg, SE), la plonĝanto forigita, kaj metita sur la supro de Petri plado ( figuro 1.Vivas priskribita kiel via disvastiĝo ĉiutage). estis kalkulitaj dufoje tage, dum mortintaj moskitoj estis forĵetitaj ĝis la lasta moskito mortis (n = 40 per traktado).Supravivado de moskitoj manĝataj per diversaj dietoj estis statistike analizita uzante Kaplan-Meyer-supervivajn kurbojn kaj log-rangajn testojn por kompari supervivajn distribuajn komparojn inter dietoj (IBM SPSS-Statistiko.0.004.0).
Kutima moskito flugmuelejo bazita sur Attisano et al.[17], farita el 5 mm dikaj klaraj akrilaj paneloj (10 cm larĝa x 10 cm longa x 10 cm altaj) sen antaŭaj kaj malantaŭaj paneloj (Fig. 3: supro).Pivota aro kun vertikala tubo farita el gaskromatografikolumno (0,25 mm mm L; kun fino de 5 cm ad. um magnetoj 9 cm dise.Horizontala tubo farita el la sama materialo (6,5 cm L) bisekcis la vertikalan tubon por formi ligitan brakon kaj brakon, kiuj portis malgrandan pecon da aluminia folio kiel luminterrompa signalo.
24-hora malsataj inoj ricevis la ĉi-supran dieton dum 30 minutoj antaŭ reteno. Plene nutritaj inaj moskitoj estis poste individue anestezitaj sur glacio dum 2-3 minutoj kaj alfiksitaj al insektaj pingloj kun abelvakso (Joel Svenssons Vaxfabrik AB, Munka Ljungby, SE) kaj poste ligitaj per la horizontala tubo al Muelilo. -konstruita datumregistrilo, tiam konservita kaj montrita per la programaro PC-Lab 2000™ (v4.01; Velleman, Gavere, BE).La flugmuelejo estis metita en klimat-reguligitan ĉambron (12 h:12 h, lumo: malhela, 25 ± 2 °C, 65 ± 5% RH).
Por bildigi la ŝablonon de fluga agado, la totala distanco flugita (m) kaj la totala nombro de sinsekvaj flugaktivecoj estis kalkulitaj je horo dum 24-hora periodo. Krome, la mezaj distancoj flugitaj de individuaj inoj estis komparitaj tra traktadoj kaj analizitaj per unudirekta ANOVA kaj la post hoc analizo de Tukey (JMP Pro, v14.0.0, SAS, SAS Institute Inc.), kie averaĝa distanco estis konsiderata kiel sendependa faktoro, kie la mezuma distanco estis konsiderata kiel sendependa faktoro. de ĉirkaŭvojoj estas kalkulita en 10-minutaj pliigoj.
Por taksi la efikon de dieto sur reprodukta agado de An.arabiensis, ses inoj (4 dpe) estis transdonitaj rekte al Bugdorm-kaĝoj (30 cm × 30 cm × 30 cm) post sangokolekto kaj tiam provizis la eksperimentan dieton dum 48 horoj kiel supre priskribite. Dietoj tiam estis forigitaj kaj generaj tasoj (30 ml; Nolato Hertila estis plenigitaj 4 horojn da distilita akvo dum 20 ml de la triaj horoj) 24 horoj.Ripetu ĉiun dietan reĝimon 20-50 fojojn.Ovoj estis nombritaj kaj registritaj por ĉiu eksperimenta kaĝo.Subspecimenoj de ovoj estis uzataj por taksi averaĝan grandecon kaj longon de individuaj ovoj (n ≥ 200 per dieto) uzante mikroskopon Dialux-20 (DM1000; Ernst Weica) (DM1000; Ernst Weica) ; 2;Leica Microsystems Ltd., DE).La ceteraj ovoj estis konservitaj en klimatkontrolita ĉambro sub normaj bredadaj kondiĉoj dum 24 h, kaj subspecimeno de lastatempe aperintaj larvoj de la unua etapo (n ≥ 200 per dieto) estis mezurita, kiel priskribite supre. La nombro da ovoj kaj la grandeco de ovoj estis komparitaj inter traktadoj kaj NOVAKaj unuvojaj analizoj. JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Kapspacaj volatiloj el freŝaj (1 h post-specimena), 24 h, 72 h kaj 168 h aĝa urino estis kolektitaj de provaĵoj kolektitaj de Zebu-brutaro, Arsi-rasoj. Por oportuno, urinospecimenoj estis kolektitaj frue en la mateno dum la bovinoj ankoraŭ estis en la garbejo. Urinospecimenoj estis kolektitaj de 100-200 ml de polimidaj individuoj estis translokitaj el 100-200 ml de polimidaj individuoj. (Toppits Cofresco, Frischhalteprodukte GmbH and Co., Minden, DE) en 3 l poliamido kun kovrilo En vinilklorida plasta tamburoj.Headspace volatiloj de ĉiu bova urino specimeno estis kolektitaj aŭ rekte (freŝa) aŭ post maturiĝo ĉe ĉambra temperaturo dum 24 h, 72 h kaj 168 h, te ĉiu aĝgrupo specimeno estis reprezenta de ĉiu urino specimeno.
Por kapspaca kolektado de volatiloj, fermitcikla sistemo estis uzata por cirkuli aktivigitan karbon-filtritan gasfluon (100 ml min-1) tra poliamida sako al la adsorba kolumno dum 2,5 h uzante diafragman vakupumpilon (KNF Neuberger, Freiburg, DE).Kiel kontrolo, kapspaca kolekto estis farita el poliamido-kolumno de 5 cm. x 3 mm id) enhavanta 35 mg de Porapak Q (50/80 mesh; Waters Associates, Milford, MA, Usono) inter vitraj lanaj ŝtopiloj.Antaŭ uzo, la kolono estis flulavita per 1 ml redistilita n-heksano (Merck, Darmstadt, DE) kaj 1 ml pentano (99.0% La puraj solviloj adsorbitaj kun 99.0% de la solvilo estis adsorbitaj per Sigmao-riĉaĵo). μl da pentano.Kolektoj de kapspaco estis kunigitaj kaj poste konservitaj je -20°C ĝis uzataj por plia analizo.
Kondutismaj respondoj de gastiganto-serĉanta kaj sangomanĝanta An.Headspace volatilaj eltiraĵoj kolektitaj el freŝa, 24-h, 72-h, kaj 168-h-aĝa urino estis analizitaj por volatilaj eltiraĵoj de Arabidopsis moskitoj uzante rektan vitrotuban olfatometron [18]. ].Olfaktometro de vitrotubo (80 cm × 9,5 cm id) estis lumigita per 3 ± 1 lx de ruĝa lumo de supre.Karbo filtrita kaj humidigita aerfluo (25 ± 2 °C, 65 ± 2% relativa humideco) trapasis la bioanalizon je 30 cm s-1.Aero estas pasita tra neoksidebla ŝtalo kaj unuforma fluo de neoksidebla ŝtalo. tampondissendilo (4 cm × 1 cm; L:D; DAB Dental AB), pendigita de 5 cm bobeno sur la alventa fino de la olfaktometro, kun stimulilo ŝanĝas ĉiujn 5 minutojn. Por analizo, 10 μl de ĉiu kapspacekstraktaĵo, diluita 1:10, estis uzata kiel stimulo. Egala kvanto de pentano estis uzata kiel individua kontrolo de sango-kontrolo. kaĝoj 2-3 horojn antaŭ la komenco de la eksperimento.La eldonkaĝo estis metita sur la ventoflanko de la olfaktometro, kaj la moskitoj estis permesitaj alklimatiĝi dum 1 minuto, kaj tiam la papilia valvo de la kaĝo estis malfermita por liberigi.Alogaĵo al traktado aŭ kontrolo estis analizita kiel la proporcio de moskitoj kiuj venis en kontakton kun la kaploko 3 fojoj estis en kontakto kun la libera eltiraĵo 3 fojojn ene de 5 minutoj de la libera eltira fonto estis reproduktita ene de 5 minutoj de la libera eltiraĵo. kaj por eviti la efikojn de iu ajn tago, la sama nombro da traktadoj kaj kontroloj estis provita en ĉiu eksperimenta tago.Serĉu respondojn de gastiganto kaj sango-manĝitaj Ans.Araba kontraŭ kapspaco aroj estis analizitaj uzante nominalan loĝistikan regreson sekvitan per parkomparaj komparoj por neparaj proporcioj (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
La genera respondo de An.Headspace-ekstraktoj de freŝa kaj aĝa bovina urino estis analizitaj en Bugdorm-kaĝoj (30 cm × 30 cm × 30 cm; MegaView Science).Plastaj tasoj (30 mL; Nolato Hertila) plenigitaj per 20 mL da distilita akvo provizis la generan substraton kaj estis metitaj en kontraŭajn angulojn de la 24 cm alĝustigitaj ĉ 10 cm dise. de ĉiu kapspacekstraktaĵo je 1:10 diluo.Egala kvanto da pentano estis uzata por ĝustigi la kontroltason.Traktado kaj kontroltasoj estis interŝanĝitaj inter ĉiu eksperimento por kontroli pozicion-efektojn.Dek sangomanĝitaj inoj estis liberigitaj en eksperimentajn kaĝojn ĉe ZT 9-11 kaj ovoj en tasoj estis kalkulitaj 24 horojn poste la nombro de kalkulo de la traktado. la nombro da ovoj demetitaj en la kontrola taso)/(la totala nombro da ovoj demetitaj).Ĉiu traktado estis ripetita 8 fojojn.
Gaskromatografia kaj elektrona antena ŝablono detekto (GC-EAD) analizo de ino An.arabiensis estis farita kiel antaŭe priskribite [20].Mallonge, freŝa kapspaco volatilaj eltiraĵoj estis apartigitaj uzante Agilent Technologies 6890 GC (Santa Clara, CA, Usono) ekipita per HP-5 kolumno (30 m × 0.25 mm dika filmo Agilent Technologies).kaj maljuniĝanta urino.Hidrogeno estis uzata kiel la movebla fazo kun averaĝa lineara flukvanto de 45 cm s-1.Ĉiu specimeno (2 μl) estis injektita dum 30 sekundoj en sendivida reĝimo kun enirtemperaturo de 225 °C.La GC-forntemperaturo estis programita de 35 °C (3-minuta tenado) ĝis 300 °C (teno de 3 minutoj) ĝis 300 °C-100 °C. spliter, 4 psio da nitrogeno estis aldonita kaj dividita 1:1 en Gerstel 3D/2 malalta morta volumo kruco (Gerstel, Mülheim, DE) inter la flamo joniga detektilo kaj la EAD. midigita aero (1,5 l min−1).La anteno estis metita 0,5 cm de la elirejo de la tubo.Ĉiu individua moskito konsistigis unu kopion, kaj por gastigant-serĉantaj moskitoj, almenaŭ tri kopioj estis faritaj sur urinprovaĵoj de ĉiu aĝo.
Identigo de bioaktivaj komponaĵoj en kapspackolektoj de freŝa kaj aĝa bova urino uzante kombinitan GC kaj mas-spektrometron (GC-MS; 6890 GC kaj 5975 MS; Agilent Technologies) por ellogi antenalajn respondojn en GC-EAD-analizo, funkciante en elektrona efiko joniga reĝimo ĉe 70 eV. 25 mm interna diametro, 0,25 μm filmo dikeco) uzante heliumon kiel la moveblan fazon kun meza lineara flukvanto de 35 cm s-1. 2 μl specimeno estis injektita uzante la samajn injektilajn agordojn kaj forntemperaturon kiel por la GC-EAD-analizo. Kunmetaĵoj estis identigitaj surbaze de sia retentempo (Kovát spektristo) kaj komparitaj al la Biblioteko de Kovát (Kovát spektra1) kaj komparitaj al la libretoko N. dentigitaj komponaĵoj estis konfirmitaj per injektado de aŭtentaj normoj (Aldona Dosiero 1: Tabelo S2).Por kvantigo, heptilacetato (10 ng, 99.8% kemia pureco, Aldrich) estis injektita kiel ekstera normo.
Taksante la efikecon de sinteza odormiksaĵo konsistanta el bioaktivaj komponaĵoj identigitaj en freŝa kaj aĝa urino por altiri gastigantajn kaj sangsuĉajn Ans.arabiensis, uzante la saman olfaktometron kaj protokolon kiel supre. Sintezaj miksaĵoj imitis la konsiston kaj proporciojn de komponaĵoj en miksitaj kapspacaj volatilaj eltiraĵoj de freŝaj, 248-ho 248-hour, 24-18-18-18-2014. ur aĝa urino (Figuro 5D-G; Plia Dosiero 1: Tabelo S2). Por analizo, uzu 10 μl de 1:100 diluo de la tute sinteza miksaĵo, kun totala eliriga indico intervalanta de proksimume 140-2400 ng h-1, por taksi allogecon al gastiganto kaj sangosuĉado. unuopaj kunmetaĵoj de la kompleta miksaĵo estas forigitaj.Serĉu respondojn de gastiganto kaj sang-manĝitaj Ans.Arab vs sintezaj kaj subtraktaj miksaĵoj estis analizitaj uzante nominalan loĝistikan regreson sekvitan per parkomparaj komparoj por neparaj proporcioj (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Por taksi ĉu bovina urino povus funkcii kiel gastiga habitato-indiko por malariaj moskitoj, freŝa kaj aĝa bovina urino, kolektita kiel priskribite supre, kaj akvo estis metita en retigitaj 3 l siteloj (100 ml) kaj metita en gastigantajn logilkaptilojn.(Versio BG-HDT; BioGents, Regensburg, DE). Dek kaptiloj metitaj 50 m dise en paŝtejo, 400 m de vilaĝa komunumo (Silay, Etiopio, 5°53´24´´N, 37°29´24´´E) kaj neniu brutaro, sur konstantaj reproduktejoj kaj vilaĝoj. rotaciis nokte dum entute kvin noktoj.Moskito-nombroj kaptitaj en kaptiloj logitaj kun urino de malsamaj aĝoj estis komparitaj uzante loĝistikan regreson kun beta-binoma distribuo (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
En malario-endemia vilaĝo proksime de la urbo Maki, Oromio-regiono, Etiopio (8° 11′ 08″ N, 38° 81′ 70″ E; Figuro 6A). La studo estis farita inter mez-aŭgusto kaj mez-septembro antaŭ la ĉiujara endoma resta ŝprucigado, kune kun longa pluvsezono el la tuta vilaĝo (2000) aparte troviĝis paroj de vilaĝoj. elektitaj por la studo (Fig. 6A).La kriterioj uzataj por elekti la domojn estis: neniuj bestoj permesitaj en la domo, neniu endoma kuirado (tiri brullignon aŭ lignokarbo) estis permesita (almenaŭ dum la provperiodo), kaj domoj kun maksimume du loĝantoj, dormantaj en neinsekticidoj.sub la traktita moskitoreto.Etika aprobo estis donita de la Institucia Esplora Etiko-Revizio-Estraro (IRB/022/2016) de la Fakultato de Naturaj Sciencoj (CNS-IRB), Addis-Abeba Universitato, konforme al la gvidlinioj establitaj de la Deklaracio de la Monda Medicina Asocio de Helsinko.Konsento de ĉiu estro de la domanaro estas akirita kun la loka administracio kaj la tuta distrikto sanprocezo estas aprobita de la loka administracio. 'kebele'). La eksperimenta dezajno sekvis 2 × 2 latinan kvadratan dezajnon, en kiu sintezaj miksaĵoj kaj kontroloj estis asignitaj al parigitaj domoj en la unua nokto kaj interŝanĝitaj inter domoj en la sekva eksperimenta nokto. Ĉi tiu procezo estis ripetita dek fojojn. Aldone, por taksi moskitan agadon en elektitaj domoj, la CDC-kaptiloj estis fiksitaj por funkcii je la sama komenco de la sama tago kaj meznoktaj tempoj en la sama tempo, meznokte.
Sinteza miksaĵo enhavanta ses bioaktivajn komponaĵojn estis dissolvita en heptano (97.0% solventa GC-grado, Sigma Aldrich) kaj liberigita je 140 ng h-1 uzante kotonan vikon Antaŭzorgo (CDC) Light Trap (John W. Hock Company, Gainesville, FL, Usono; Figuro 6A). La kaptiloj estis pendigitaj 0,8-1 m super la tero, proksime al la piedo de la lito, kaj volontulo dormis sub netraktita moskito kaj estis pli ola kaj pli ola, kaj pli ol mi ne traktis, ke mi ne traktis kaj ne estis pli kaj pli ola, kaj pli ol mi estis, ke mi ne traktas minante, ke mi ne traktas minante, ke mi ne traktas min. Analizo de Rase Chain Reaction (PCR) por identigi la specion morfologie identigitan kiel A. gambiae sl. Membroj de la komplekso [23]. En la kampo -studo, kaptilo de kaptilo de parigitaj domoj estis analizita uzante nominalan logistikan taŭgan modelon, kie la altiro estis la dependa variablo kaj kuracado (sinteza miksaĵo VS -kontrolo) estis la fiksa efiko (JMP 14.0.0. SAS Institute Inc.).Ĉi tie, ni raportas la χ2 kaj p-valorojn de la provo de probabla proporcio.
Taksi ĉu ĝi estas sekura.arabiensis povis akiri urinon, ĝian ĉefan nitrogenfonton, ureon, per rekta nutrado, ene de 48 h de administrado dum 4 tagoj post (dpe) gastiganto-serĉado kaj sang-manĝita ina nutrado provoj (Fig. 1A).Kaj gastigant-serĉantaj kaj sangosuĉantaj inoj sorbis signife pli da sakarozo ol iu ajn alia akvo (p. 0001 kaj F (5,299) = 56.00, p < 0.0001, respektive; Fig. 1B, C).Plue, gastigantaj inoj manĝis malpli en urino je 72 horoj kompare kun urino je 168 horoj (Fig. 1B).Kiam proponita dieto enhavis gastiganton enhavantan ureon pli grandan kvanton de urea 92M signifa kompare 9M ino. ed al ĉiuj aliaj koncentriĝoj kaj akvo, dum nedistingebla de 10% sakarozo (F(10,813) = 15,72, p < 0,0001; Figuro 1D).Tio estis kontraste al la respondo de sangomanĝitaj inoj, kiuj tipe absorbis signife pli da ureo-enhavantaj dietojn ol akvon, kvankam signife (1870% malpli da sukrozo) 5, p < 0.0001; Figuro 1).1E).Ketere, kiam oni komparas inter la du fiziologiaj statoj, flebotomigitaj inoj sorbis pli da ureo ol gastigantaj inoj ĉe la plej malaltaj koncentriĝoj, kaj ĉi tiuj inoj sorbis similajn kvantojn da ureo ĉe pli altaj koncentriĝoj (F(1,953)= 70,802, p < 70.Fig. 1F, G). Dum konsumado de ureo-enhava dieto ŝajnis havi optimumajn valorojn (Fig. 1D, E), inoj en ambaŭ fiziologiaj statoj povis moduli la kvanton de ureo sorbita super la tuta gamo de ureaj koncentriĝoj laŭ log-linea modo (Fig. 1F, G).).Simile, moskitoj ŝajnas kontroli sian nitrogenan konsumadon per reguligo de la kvanto de urino sorbita, ĉar la kvanto de nitrogeno en urino reflektiĝas en la kvanto sorbita (Figuro 1B, C kaj B enmetoj).
Por taksi la efikojn de urino kaj ureo sur gastiganto-serĉanta kaj sangosuĉanta moskitosupervivon, inoj estis manĝitaj urino de ĉiuj kvar aĝoj (freŝa, 24 h, 72 h, kaj 168 h post-deponado) kaj gamo da ureokoncentriĝoj, same kiel distilita akvo kaj 10% sakarozo servis kiel 2-a analizo de supervivo entute montris signifan efikon al supervivo. ĉe gast-serĉantaj inoj (urino: χ2 = 108,5, df = 5, p < 0,0001; ureo: χ2 = 122,8, df = 5, p < 0,0001; Fig. 2B, C) kaj sangmanĝitaj inoj (urino: χ, χ0, = p 93 = χ0, χ0; 2 = 137.9, df = 5, p < 0.0001; Figuro 2D, E).En ĉiuj eksperimentoj, inoj manĝis dieton de urino, ureo kaj akvo havis signife pli malaltajn postvivoprocentojn kompare kun inoj manĝitaj sakaroza dieto (Figuro 2B-E). 0.016) havanta la plej malaltan postvivan probablecon (Fig. 2B). Krome, gastigantaj inoj nutritaj 135 mM ureo pluvivis pli longe ol akvokontroloj (p < 0.04) (Fig.2C).Kompare kun akvo, virinoj nutritaj per freŝa urino kaj 24-hora urino pluvivis pli longe (p = 0,001 kaj p = 0,012, respektive; Figuro 2D), dum virinoj manĝitaj per 72-hora urino travivis pli longe ol tiuj nutritaj Ina mallonga freŝa urino kaj 24-hora aĝa urino (p = 0,001 0,010 0,010 0,0 0,0 0,0 0,0 0,2 0,0 0,2 0,0 0,0 10,0 0,0 0,0 0,0 10,0 0,0 0,0 0,0 0,2 0,2 ​​0,0 0,0 10 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,01 0,010 0,010). eo nutritaj kun 135 mM de ureo, sangmanĝitaj inoj pluvivis pli longe ol ĉiuj aliaj koncentriĝoj de ureo kaj akvo (p < 0.013; Figuro 2E).
Supervivo de gastiganto kaj sangosuĉa ino Anopheles arabinis manĝanta bovinan urinon kaj ureon.En la biotesto (A), inaj moskitoj ricevis dieton konsistantan el freŝa kaj aĝa bovina urino, diversaj koncentriĝoj de ureo, sakarozo (10%) kaj distilita akvo (H2O). inoj manĝitaj per urino (B, D) kaj ureo (C, E), kaj kontroloj, Sakarozo kaj akvo, estas mortaj
La totala distanco kaj nombro da ĉirkaŭvojoj determinitaj en la flugmueleja testo dum 24-hora periodo diferencis inter gast-serĉantaj kaj sangsuĉaj moskitoj, kiuj montris malpli da flugaktiveco entute (Fig. 3). Gastiganto-serĉantaj moskitoj, kiuj disponigis freŝan kaj aĝan urinon aŭ sakarozon kaj akvon, montris malsamajn flugajn ŝablonojn (Fig. 3 kaj 2-2), dum freŝaj inoj manĝis je freŝaj matenoj. 68-horaj aĝaj Moskitoj, kiuj nutris sin per urino, elmontris malsamajn flugajn ŝablonojn kaj estis ĉefe tagaj. Inaj moskitoj, kiuj provizis sakarozon aŭ 72-horan urinon, montris agadon dum la 24-hora periodo, dum inoj, kiuj provizis akvon, estis pli aktivaj dum la meza periodo. Moskitoj manĝis per sakarozo dum la plej alta mateno kaj matene montris agadon je la 7-a horo matene. ur-aĝa urino spertis konstantan malkreskon en agado dum 24 horoj (Figuro 3).
Flug-agado de ĉas-serĉanta sangosuĉa ino Anopheles arabinis manĝanta bovinan urinon kaj ureon.En la flugmuelejtesto, inaj moskitoj nutriĝis per freŝa kaj aĝa bovina urino, diversaj koncentriĝoj de ureo, sakarozo (10%) kaj distilita akvo (H2O) estis ligitaj al horizontalaj, libere rotaciantaj brakoj (por tutaj brakoj, totalaj sangaj kaj sangaj brakoj). distanco kaj nombro da flugoj hore por ĉiu dieto dum 24-hora periodo estis registritaj (malhela: griza; hela: blanka).Averaĝa distanco kaj averaĝa nombro da atakoj estas montritaj dekstre de la cirkadia agadgrafiko. Eraraj stangoj reprezentas norman eraron de la meznombro.Statistika analizo vidu tekston.
Ĝenerale, totala flugagado de gastigant-serĉantaj inoj sekvis padronon similan al tiu de flugdistanco dum 24-hora periodo. Meza flugdistanco estis signife tuŝita de dieto ingestita (F(5, 138) = 28.27, p < 0.0001), kaj gastigant-serĉantaj inoj ingestitaj 72 horoj da urino kaj malpli ol 100 horoj da urino, komparite kun signife al ĉiuj aliaj distancoj. Kroze nutritaj moskitoj flugis pli longe ol freŝaj (p = 0,022) kaj 24-h-aĝaj urino (p = 0,022)-manĝitaj moskitoj. Kontraste al la flugaktiveca ŝablono priskribita de la urina dieto, ureo-manĝitaj gastigant-serĉantaj inoj elmontris persistan flugan aktivecon dum 24-h-agado dum la dua periodo de fig. -serĉantaj inoj nutritaj de ureo signife pliigis averaĝan flugdistancon depende de la sorbita koncentriĝo (F(5, 138) = 1310.91, p < 0.0001).Gastiganto-serĉantaj inoj nutritaj ajna koncentriĝo de ureo flugis pli longe ol inoj nutritaj aŭ akvo aŭ sakarozo (p < 0.03).
Ĝenerale flugagado de sangosuĉaj moskitoj estis stabila kaj daŭrigita dum 24 horoj tra ĉiuj dietoj, kun pliigita urina agado dum la dua duono de la malhela periodo por inoj manĝitaj per akvo kaj ankaŭ ĉe inoj manĝitaj freŝaj kaj 24 horojn (bildo 3). ne faris (F(5, 138) = 1.36, p = 0.24) .kun alia urino kaj kontrola dieto (freŝa, p = 0.0091; 72 horoj, p = 0.0022; 168 horoj, p = 0.001; sakarozo, p = 0.0017; p = 0.0017; dH).
La efikoj de urino kaj ureo nutrado sur reproduktaj parametroj estis taksitaj en ovodemetado de bioanalizoj (Figuro 4A) kaj estis esploritaj laŭ la nombro da ovoj demetitaj de ĉiu ino, ovograndeco kaj lastatempe eloviĝintaj unuaj enstaraj larvoj. Fig. 4B).Inoj nutris 24-horan urinon, sangomanĝo demetis signife pli da ovoj ol inoj nutris aliajn urinajn dietojn kaj estis similaj al tiuj nutritaj sakarozo (Fig. 4B).Same, la grandeco de ovoj demetitaj de urino-manĝitaj inoj variis laŭ dieto (F(5, 209,0,0,0,0,1,0,0,1,0,1,0,1,0,1,1,1,1,1,1,2,2,2,2,2,2,2,2,2,2,2,2,2,2,2,2,2,2,2,2,2,2,2,2,2,2,2,2,2,2,2,2,2,2,2,2,2,2,2,2,2,2,2,2,2,2,2,2,2,2,2,2,2,2,2,2,2,2,2,4, sakarozo-manĝitaj inoj demetas signife pli grandajn ovojn ol akvo-manĝitaj inoj , dum la ovoj de inoj manĝitaj kun 168 h da urino estis signife pli malgrandaj (Fig. 4C). Krome, urina dieto grave influis larvograndecon (F (5, 187) = 7.86, p < 0.000000000000000000000000 72-horaj urine manĝitaj inoj ol el ovoj demetitaj el ovoj larvoj.Akvomanĝitaj kaj 168-h urinemanĝitaj inoj (Figuro 4D).
Reprodukta agado de ino Anopheles arabinis nutrante bovinan urinon kaj ureon.Sangomanĝitaj inaj moskitoj estis nutritaj dietoj konsistantaj el freŝa kaj aĝa bovina urino, diversaj koncentriĝoj de ureo, sakarozo (10%), kaj distilita akvo (H2O) dum 48 horoj antaŭ ol meti en biotestojn kaj akiri ovo-nombre (F, E48) kaj ovodemetado (F, E48) horoj (F, E4). rvae-grandeco (D, G) estis signife tuŝita de la dieto provizita (bova urino: BD; ureo: EG). Rimedoj por ĉiu parametro mezurita uzante malsamajn liternomojn estis signife malsamaj unu de la alia (unudirekta ANOVA uzante la post hoc-analizon de Tukey; p < 0.05). Eraraj stangoj reprezentas norman eraron de la meznombro.
Kiel la plej grava nitrogena komponanto de urino, ureo, kiam provizita kiel dieto al sang-manĝitaj inoj, signife influis generajn parametrojn en ĉiuj studoj. La nombro da ovoj demetitaj de inoj nutritaj de ureo, post sangomanĝo, depende de ureokoncentriĝo (F(11, 360) = 4,69; p < 0,000 µM3 µM, inoj-koncentriĝo inter 0,000 µM3 µM kaj 360, 360, inoj. demetis pli da ovoj (Figuro 4E).Inoj nutritaj per ureokoncentriĝoj de 134 µM aŭ pli demetas pli grandajn ovojn ol inoj manĝitaj per akvo (F(10, 4245) = 36.7; p < 0.0001; Figuro 4F), kaj larva grandeco, kvankam tuŝita de similaj koncentriĝoj de ureo (3.0, 4245) = 36.7; 0001) estis pli varia (Fig. 4G).
Ĝenerale allogeco al gastiganto-serĉanta bova urina kapspaco volatilaj eltiraĵoj.La arabiensis taksita en la vitrotuba olfatometro (Fig. 5A) estis signife tuŝita de urina aĝo (χ2 = 15.9, df = 4, p = 0.0032; Fig. 5B). Post hoc urina analizo montris ke signifa alloga nivelo 24-analizo montris, ke signifa alloga nivelo 24-analizo montris, ke signifa alloga nivelo 24 4. ĉiuj aliaj traktadoj (72 horoj: p = 0,0060, 168 horoj: p = 0,012, pentano: p = 0,00070), Krom la odoro de freŝa urino (p = 0,13; Figuro 5B).Kvankam la totala altiro de sangosuĉaj moskitoj ne estis signife malsama al urino (p = 0.13, fig. 5B). 0.067; Fig. 5C), ĉi tiuj inoj estis trovitaj signife pli allogaj al kapspacaj volatilaj eltiraĵoj kompare kun 72-hora aĝa urino kompare kun kontroloj (p = 0.0066; Figuro 5C).
Kondutismaj respondoj al naturaj kaj sintezaj bovinaj urino odoroj en la serĉo de gastiganto kaj sango-manĝita Anopheles arabianus.Skematiko de la vitrotuba olfaktometro (A).Altiro de kapspaco volatilaj eltiraĵoj de freŝa kaj aĝa bovino urino al gastiganto (B) kaj sangosuĉanta (C) moskitoj.Trovu la tentaklo reakcio de HeadhoD, izolita tentaklo el 2-a, freŝa E-Spaco. 72-hora (F), kaj 168-hora (G) aĝa bovina urino estas montrita. Elektrona antena detekto (EAD) spuroj montras tensiajn ŝanĝojn en respondo al bioaktivaj kunmetaĵoj en la kapspaco eluzita de la gaskromatografo kaj detektita per flama joniga detektilo (FID). kunmetaĵoj estas montritaj.Ununura steleto (*) indikas konsekvencan malalt-amplitudan respondon.Duoblaj steletoj (**) indikas nereprodukteblajn respondojn.Trovu la gastiganton (H) kaj la sangosuĉan (I). c analizo;p < 0.05).Eraraj stangoj reprezentas norman eraron de la skalo
Ino Ann.arabiensis, 72 h kaj 120 h post sangomanĝo, dum generado, neniu prefero estis montrita por kapspacaj volatilaj eltiraĵoj de freŝa kaj aĝa bovina urino kompare kun pentanaj kontroloj (χ2 = 3.07, p> 0.05; Plia dosiero 1: Fig. S1).
Por inaj analizoj de Ann.arabiensis, GC-EAD kaj GC-MS identigis ok, ses, tri kaj tri bioaktivajn komponaĵojn (Figuro 5D-G). Kvankam diferencoj en la nombro da komponaĵoj, kiuj ellogis elektrofiziologiajn respondojn, estis observitaj, la plej multaj el ĉi tiuj komponaĵoj ĉeestis en ĉiu kapspaco volatila eltiraĵo kolektita el freŝa kaj aĝa urino. Sekve, por ĉiu ĉi-antaŭa komponaĵo eltiris la supran inan respondon. hold estis inkluditaj en pliaj analizoj.
La totala volatila eliriga indico de bioaktivaj komponaĵoj en la kapspackolekto pliiĝis de 29 µg h-1 en freŝa urino al 242 µg h-1 en 168-hora aĝa urino, ĉefe pro p-kresolo kaj m-formaldehido Fenolo pliiĝas same kiel fenolo. Kontraste, la eldonprocentoj de aliaj kunmetaĵoj, kiel malpliiĝas kun aĝo de 2-1-ciklono, malpliiĝas kun dekan 2-1-ciklono. late kun la observita malkresko en signala intenseco (abundo) en la kromatogramo (Fig. 5D) -G maldekstra panelo) kaj fiziologiaj respondoj al ĉi tiuj komponaĵoj (Fig. 5D-G dekstra panelo).
Ĝenerale, la sinteza miksaĵo havis similan naturan rilatumon de bioaktivaj komponaĵoj identigitaj en volatilaj ekstraktoj de freŝaj kaj aĝaj urinaj kapspacoj (Fig. 5D-G) kaj ne ŝajnis ellogi signifan allogon en la serĉo de gastiganto (χ2 = 8.15, df = 4, p = 0.083; Fig. 5H) aŭ sangosucking (Fig. 5H) aŭ p. = 0.30; Fig. 5I).Tamen, post hoc duopaj komparoj inter traktadoj montris, ke gastigantaj moskitoj estis signife allogaj al la sinteza miksaĵo de 24-h aĝa urino kompare kun pentanaj kontroloj (p = 0.0086; Figuro 5H).
Por taksi la rolon de individuaj komponantoj en sintezaj miksaĵoj de 24-h-aĝaj urino, ses subtraktaj miksaĵoj estis taksitaj kontraŭ kompletaj miksaĵoj en la analizo de Y-tubo, en kiu unuopaj komponaĵoj estis forigitaj.Por gastigant-serĉantaj moskitoj, subtrahi individuajn komponaĵojn el la kompleta miksaĵo havis signifan efikon al kondutismaj respondoj (χ62, 30, 19 = χ63, 19 = 1, 19 = 0, 1 0, 1 0, 1). : Figuro S2A), ĉiuj subtraktaj miksaĵoj estis pli allogaj ol Pli Malgrandaj ol plene miksitaj. En kontrasto, forigo de individuaj komponaĵoj el la tute sinteza miksaĵo ne influis la kondutismajn respondojn de sangosuĉaj moskitoj (χ2 = 11.38, df = 6, p = 0.077), kun la escepto de komparita dekanto en la pli malalta nivelo, kun la escepto de la komparita dekanto al la pli malalta nivelo. 22; Plia Dosiero 1: Figuro S2B).
En malario-endemia vilaĝo en Etiopio, la efikeco de sinteza miksaĵo de 24-hora bovina urino en altirado de moskitoj sub kampaj kondiĉoj estis taksita dum dek noktoj (Fig. 6A). Entute 4,861 moskitoj estis kaptitaj kaj identigitaj, el kiuj 45.7% estis Anthrophes. 35,4% estis Culex spp.(Kroma dosiero 1: Tabelo S1).Anopheles arabinis estas la nura membro de An.Gambian speciokomplekso identigita per PCR-analizo.Averaĝe, 320 moskitoj estis kaptitaj nokte, dum kiu tempo kaptiloj kun sintezaj miksaj logiloj kaptis pli da moskitoj ol miksaĵo, χ319(60) = χ319(60) = 320 moskitoj. 0.0001) .Ne-logitaj kaptiloj estis metitaj sur ĉiu el la kvin kontrolnoktoj ĉe la komenco, mezo kaj fino de la provo.Similaj nombroj da moskitoj estis kaptitaj en ĉiu paro de kaptiloj, indikante neniun antaŭjuĝon inter domoj (χ2(0, 1665) = 9 × 10-13, p > 0.005-13, p> la studo de la nombro de la populacio malpliigo, p > 0. kvitoj kaptitaj en la kaptiloj enhavantaj la sintezan miksaĵon estis signife pliigita: serĉado de gastiganto (χ2(0, 2107) = 138.7, p < 0.0001), lastatempa sangonutrado (χ2(0, 650) = 32.2, p < 0.0001) kaj gravedeco (0.0001) = 1.220, χ2. ;Plia dosiero 1: Tabelo S1). Ĉi tio ankaŭ reflektiĝas en la totala nombro da kaptitaj moskitoj: gastiganto serĉanta > sangosuĉado > graveda > duongrava > masklo.
Kampo-taksado de la efikeco de 24-hora sinteza bovina urina odormiksaĵo. Kampaj provoj estis faritaj en sud-centra Etiopio (mapo), proksime de la urbo Maki (enmeto), uzante malpezan kaptilon de Centroj por Malsankontrolo (CDC) (dekstre) en parigitaj domoj, kun latina kvadrata dezajno (aera bildo kaptita kaj fotokaptilo). nopheles arabesques (B), sed ne Anopheles farroes (C), alimaniere, fiziologia stato-dependa efiko.Krome, tiuj kaptiloj kaptis signife pligrandigitajn nombrojn de la gastigantaj Culex-moskitoj.(D) Kompare kun kontrolo.La stangoj maldekstre reprezentas la averaĝan elektindekson de moskitoj kaptitaj en paroj de grenejoj kaj regado de moskitoj (d) (D) = (D) = 0,000. dekstre reprezentas la averaĝan elektindekson en paroj de kontrolkaptiloj (malfermaj; N = 5).).Asteriskoj indikas statistikajn signifonivelojn (*p = 0,01 kaj ***p < 0,0001)
La tri specioj estis kaptitaj malsame en kaptiloj enhavantaj sintezajn miksaĵojn.Serĉante gastiganton (χ2(1, 1345) = 71.7, p < 0.0001), sangonutradon (χ2(1, 517) = 16.7, p < 0.0001) kaj gravedecon (χ2(1, 1345) =, χ81.1() =, χ81. .arabiensis estis kaptita en la kaptilo liberigante la sintezan miksaĵon (Fig. 6B), dum la kvanto de An ne diferencis.Pharoensis en malsamaj fiziologiaj statoj estis trovita (Fig. 6C).Por Culex, nur signifa pliiĝo en la nombro da moskitoj serĉantaj gastigantojn estis trovita en kaptiloj logitaj kun la sinteza miksaĵo (10,13129). 4; Fig. 6D), kompare kun kontrolkaptiloj.
Gastigaj kaptiloj situantaj ekstere de eblaj gastigantoj inter reproduktejoj kaj kamparaj komunumoj en Etiopio estis uzataj por taksi ĉu malariaj moskitoj uzas bovinurina odoron kiel gastigan vivejo signalo. En foresto de gastigaj signaloj, varmego, kaj kun aŭ sen la ĉeesto de bovinurino odoro, neniuj moskitoj estis kaptitaj (Aldona dosiero 1: Figuro de alta temperaturo, S3 en la ĉeesto de alta temperaturo). piedfingroj estis altiritaj kaj kaptitaj, kvankam en malgrandaj nombroj, sendepende de urina aĝo (χ2 (5, 25) = 2.29, p = 0.13; Plia dosiero 1: Figuro S3). Kontraste, akvokontroloj ne kaptis malariajn moskitojn ĉe altaj temperaturoj (Aldona Dosiero 1: Figuro S3).
Malariaj moskitoj akiras kaj distribuas nitrogenajn komponaĵojn per kompensa nutrado per bovina urino (t.e., flakoj) por plibonigi vivhistoriajn trajtojn, similajn al aliaj insektoj [2, 4, 24, 25, 26]. Bova urino estas facile havebla renovigebla rimedo proksime asociita kun ripozlokoj por malariaj vektoroj kaj bredejoj proksime de vegetaĵaj vektoroj kaj bredejoj en kamparaj ejoj kaj bredejoj. moskitoj lokalizas ĉi tiun rimedon per odoro kaj kapablas reguligi la konsumadon de nitrogenaj komponaĵoj en urino, inkluzive de ureo, la plej grava nitrogena komponento en urino [15, 16]. Depende de la fiziologia stato de la ina moskito, nutraĵoj en la urino estas asignitaj por plibonigi la flugaktivecon kaj la supervivon de la ina reproduktado kaj la transvivado de la sangaj karakteroj de la ina moskito. dum la unua gonadotropa ciklo. Sekve, urina miksado ludas gravan nutran rolon por malariaj vektoroj, kiuj estas fermitaj kiel subnutritaj plenkreskuloj [8], ĉar ĝi provizas al inaj moskitoj la kapablon akiri gravajn nitrogenajn komponaĵojn per okupado de malaltriska nutrado. Ĉi tiu trovo havas signifajn epidemiologiajn sekvojn, ĉar ĉi tiu vivotenda produktaĵo pliigas la vektoron kaj pliigas sian vivtendan produktaĵon de inoj, pligrandigante sian vivkapablon kaj plian agadon de inoj. povas esti la celo de estontaj vektoradministradprogramoj.