Toitainete hankimine ja jaotus ühendab putukate toiduotsimise ja eluloo tunnused. Konkreetsete toitainete puuduste kompenseerimiseks erinevatel eluetappidel saavad putukad neid toitaineid hankida täiendava söötmise kaudu, näiteks toitudes selgroogsete eritistest protsessis, mida tuntakse lompidena. Sääsk Anopheles arabiani on vajalik, et hinnata, kas see uuring vajab toitainete ainevahetust ja oli seega nii halb kui ka taastootmine. An.arabiensise segamine lehma uriinil toitainete omandamiseks parandab eluloo omadusi.
Veenduge, et see on ohutu.arabiensis meelitas värske, 24-tunnise, 72-tunnise ja 168-tunnise lehma uriini lõhn ning peremeesorganismi otsivate ja verega toidetud (48-tunnise verejahu) emasloomade mõõdeti Y-toru olfaktomeetriga ning tiinete emaste kombineeritud elektrofüsioloogiline analüüs ja seejärel tiinete emaste keemiline analüüs ja test. lehma uriin kõigis neljas vanuseklassis. Bioaktiivsete ühendite sünteetilisi segusid hinnati Y-torus ja välikatsetes. Lehma uriini ja selle peamise lämmastikku sisaldava uureaühendi uurimiseks malaaria vektorite võimaliku lisatoiduna mõõdeti söötmisparameetreid ja eluloo tunnuseid. Emassääskede osakaalu ja söötmissääskede kogust ja uriinist hinnati. hinnatakse ellujäämist, lõastatud lendu ja paljunemist.
Otsige peremehe verd ja toitu. Laboratoorsetes ja väliuuringutes tõmbas araablasi värske ja vananenud lehma uriini loomulik ja sünteetiline lõhn. Tiinetele naistele ei suhtunud kudemispaikades lehma uriiniga reaktsioon. Peremeest otsivad ja verd imevad emased imendavad aktiivselt lehma uriini ning vastavalt nende füsioloogilisele seisundile ja eluloolistele omadustele. lend, ellujäämine või paljunemine.
Anopheles arabinis lehma uriini hankimine ja jaotamine eluloo omaduste parandamiseks. Lehma uriini täiendav söötmine mõjutab otseselt vektori suutlikkust, suurendades igapäevast ellujäämist ja vektorite tihedust, ning kaudselt, muutes lennuaktiivsust, mistõttu tuleks seda tulevastes mudelites arvesse võtta.
Toitainete omandamine ja jaotus ühendab putukate toiduotsimise ja eluloo tunnused [1, 2, 3]. Putukad on võimelised valima ja hankima toitu ning teostama kompenseerivat söötmist lähtuvalt toidu kättesaadavusest ja toitainete vajadusest [1, 3]. Toitainete jaotumine sõltub elukäigu protsessist ning võib põhjustada erinevaid nõudeid toitumise kvaliteedile ja kvantiteedile erinevatel putukate eluetappidel. saada neid toitaineid täiendava söötmise kaudu, näiteks muda, selgroogsete loomade erinevate väljaheidete ja eritiste ning raipega, mida nimetatakse lompideks [2]. Ehkki peamiselt kirjeldatakse mitmesuguseid liblika- ja ööliblikaliike, esineb jootmiskohti ka teistes putukate liikides ning seda tüüpi ressursside külgetõmbamine ja nendest toitumine võib avaldada märkimisväärset mõju tervisele ja muudele omadustele,6. malaariasääsk Anopheles gambiae sensu lato (sl) ilmub alatoidetud täiskasvanuna [8], seega võib jootmine mängida olulist rolli tema eluloo omadustes, kuid seda käitumist on seni tähelepanuta jäetud. Tähelepanu väärib segamise kasutamine toitainete tarbimise suurendamiseks selles olulises sõidukis, kuna sellel võivad olla olulised epidemioloogilised tagajärjed.
Täiskasvanud emaste Anopheles sääskede lämmastiku tarbimine on piiratud vastsete staadiumist kantud madalate kalorivarude ja verejahu ebatõhusa kasutamise tõttu [9]. Emane Ann.gambiae sl kompenseerib seda tavaliselt täiendava verejahuga [10, 11], seades seeläbi rohkem inimesi ohtu haigestuda sääskedesse ja haigestuda sääskedesse. kasutage selgroogsete väljaheidete täiendavat söötmist, et omandada lämmastikuühendeid, mis parandavad kohanemist ja lennumanööverdusvõimet, nagu on näidanud ka teised putukad [2].Sellega seoses on ühe An.The Gambia sl liigikompleksi, Anopheles arabinis, värske ja vana lehma arabiinist,13, oma ophelesunes13, An.ophelunes13, An. ophelesunesistlik tugev ja selge atraktsioon. s ja on teada, et see seostub veistega ja toitub veistest.Lehma uriin on lämmastikuühendite rikas ressurss, kusjuures uurea moodustab 50–95% värske uriini kogulämmastikust [15, 16].Lehma uriini vananedes kasutavad mikroorganismid neid ressursse, et vähendada nitrogeenide kiireloomuliste ühendite keerukust. orgaanilise lämmastiku sisalduse vähenemine, alkalofiilsed mikroorganismid (millest paljud toodavad sääskedele mürgiseid ühendeid) arenevad [15], mis võivad olla emased Ann.arabiensis meelitab eelistatavalt 24-tunnise või noorema uriin [13, 14].
Selles uuringus otsiti peremeesorganismi ja verega toidetud anusid. Esimese gonadotropiini tsükli ajal hinnati arabiensist lämmastikuühendite, sealhulgas uurea omandamiseks uriini segamisel. Järgmisena viidi läbi rida katseid, et hinnata, kuidas emased sääsed eraldavad seda potentsiaalset toitaineressurssi, et parandada ellujäämist ja edasist urineerimist ning edasist sigimist. et teha kindlaks, kas need andsid usaldusväärseid vihjeid peremeesorganismi ja verega toidetava An kohta. Seda potentsiaalset toitaineressurssi otsides avastas arabiensis täheldatud erineva atraktiivsuse taga keemilised korrelatsioonid. 24 tundi vananenud uriinis tuvastatud lenduvate orgaaniliste ühendite (LOÜ) sünteetilisi lõhnasegusid hinnati täiendavalt välitingimustes, laiendades laboratoorsete uuringute tulemusi ja demonstreerides uriini erinevatel olekutel saadud tulemusi.Sääse atraktsioon.Saadud tulemused kinnitavad, et An.arabiensis omandab ja jaotab selgroogsete uriinis leiduvaid lämmastikuühendeid, et mõjutada eluloo tunnuseid. Neid tulemusi arutatakse võimalike epidemioloogiliste tagajärgede kontekstis ja selle kohta, kuidas neid saab kasutada vektorite seireks ja tõrjeks.
Anopheles arabicansi (Dongola tüvi) hoiti temperatuuril 25 ± 2 °C, 65 ± 5% suhtelise õhuniiskuse ja 12:12 h valguse-pimeduse tsüklis. Vastseid kasvatati plastalustel (20 cm × 18 cm × 7 cm), mis olid täidetud destilleeritud veega ja neile toideti ml toiduga (Tetramin Werke, Tetramin Wer DE). s (Nolato Hertila, Åstorp, SE) ja viidi seejärel Bugdormi puuridesse (30 cm × 30 cm × 30 cm; MegaView Science, Taichung, Taiwan), et võimaldada täiskasvanud tärkamist. Täiskasvanutele anti ad libitum 10% sahharoosilahust, kuni 4 päeva pärast tärkamist pakuti dieeti, mille jooksul katsetati üle öö (dpe), mille jooksul katsetati veega (dpe). enne katset, nagu allpool kirjeldatud. Lennutoru katsetes kasutatud emaseid näljutati ainult 4–6 tundi veega ad libitum. Verdimevate sääskede ettevalmistamiseks järgmisteks biotestideks varustati 4 dpe emaslooma defibrootilise lambaverega (Håtunalab, Bro, SE), kasutades membraantoitmissüsteemi (Hemotek Accringultonly andis emased toidukojad, Ühendkuningriigi töökojad, konveierid). otse, nagu allpool kirjeldatud, või 10% sahharoosi ad libitum 3 päeva enne allpool kirjeldatud katseid. Viimaseid emasloomi kasutati lennutoru biotestides ja viidi üle laborisse ning seejärel destilleeritud vett ad libitum 4-6 tundi enne katset.
Täiskasvanud araabia emasloomade uriini ja uurea tarbimise kvantifitseerimiseks kasutati söötmisanalüüse. Peremeest otsivatele ja verega toidetud emastele naistele anti 48 tunniks toitumine, mis sisaldas 1% lahjendatud värsket ja vananenud lehma uriini, erinevas kontsentratsioonis karbamiidi ja kahte kontrolli (10% sahharoosi ja vett). 7-1; Sigma-Aldrich, Stockholm, SE) lisati dieedile ja tarniti 4 × 4 maatriksis 250 µl mikrotsentrifuugi katsutites (Axygen Scientific, Union City, CA, USA; joonis 1A) Täitke servani (~300 µl). Sääskede ja sääskede vahelise konkurentsi vältimiseks (sääskede ja võimalike värvimõjude vältimiseks a1 cm2-s) 6 cm kõrgune; Semadeni, Ostermundigen, CH; joonis 1A) täielikus pimeduses temperatuuril 25 ± 2 cm °C ja suhtelise õhuniiskuse juures 65 ± 5%. Neid katseid korrati 5–10 korda. Pärast dieediga kokkupuudet asetati sääsed kuni edasise analüüsini -20 °C.
Otsige veise uriini ja uureat, mis on imendunud peremeesorganismi ja verd imeva emase Anopheles arabianus'e poolt. Söötmiskatses (A) anti emastele sääskedele toitumine, mis koosnes värskest ja vananenud lehma uriinist, erinevates kontsentratsioonides karbamiidist, sahharoosist (10%) ja destilleeritud veest (H2O). Peremeesorganismi testitud toitumine (B) muud vereproovid (B) ja vereproovid. .Pange tähele, et peremeest otsivad emased imasid 72-tunnise lehma uriini vähem kui 168-tunnise lehma uriiniga (B).Uriini keskmine üldlämmastikusisaldus (± standardhälve) on kujutatud sisendis.Peremeest otsivad (D, F) ja vereimejad (E, G) emased võtavad oluliselt erineva annusega (erinev annus, inhalatsiooni maht) erineva nimetusega. üksteisest (ühesuunaline ANOVA, kasutades Tukey post hoc analüüsi; p < 0,05). Vearibad tähistavad keskmise standardviga (BE). Sirge katkendjoon tähistab log-lineaarset regressioonijoont (F, G)
Imendunud toidu vabastamiseks asetati sääsed üksikult 1,5 ml mikrotsentrifuugi tuubidesse, mis sisaldasid 230 µl destilleeritud vett, ja kude purustati ühekordse nuia ja juhtmeta mootoriga (VWR International, Lund, SE), millele järgnes tsentrifuugimine 10 minutit kiirusel 10 krpm. Aldrich) ja neelduvus (λ620) määrati spektrofotomeetril põhineva mikroplaadilugeja (SPECTROStar® Nano, BMG Labtech, Ortenberg, DE) nm abil. Alternatiivina jahvatati sääsed 1 ml destilleeritud vees, millest 900 µl kanti üle küvetti, et analüüsida spektrofotomeetrit (UV8,0,0,0 λ, 0,0 m2; Kista, SE). Toidu kaudu omastamise kvantifitseerimiseks koostati standardkõver seerialahjendusega, et saada 0,2 µl kuni 2,4 µl 1 mg ml-1 ksüleentsüaniidi. Seejärel kasutati iga sääse neelatud toidukoguse määramiseks teadaolevate värvainekontsentratsioonide optilist tihedust.
Mahuandmeid analüüsiti ühesuunalise dispersioonanalüüsi (ANOVA) abil, millele järgnes Tukey post hoc paarivõrdlus (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc., Cary, NC, USA, 1989–2007). Lineaarses regressioonianalüüsis kirjeldati kontsentratsioonist sõltuvat karbamiidi tarbimist ning võrreldi v. .0 Macile, GraphPad Software, San Diego, CA, USA).
Ligikaudu 20 µl uriiniproove igast vanuserühmast seoti Chromosorb® W/AW-ga (10 mg 80/100 mesh, Sigma Aldrich) ja kapseldati tinakapslitesse (8 mm × 5 mm). , USA), et määrata lämmastikusisaldus värskes ja vananenud uriinis vastavalt tootja protokollile. Üldlämmastik (g N l-1) kvantifitseeriti standardina kasutatud uurea teadaolevate kontsentratsioonide põhjal.
Dieedi mõju hindamiseks peremeesorganismi otsivate ja verd imevate emaste ellujäämisele paigutati sääsed ükshaaval suurtele Petri tassidele (läbimõõt 12 cm ja kõrgus 6 cm; Semadeni), mille kaanes oli võrguga kaetud auk (läbimõõt 3 cm), mis sisaldas ventilatsiooni ja toiduga varustamist. Dieedid pakuti vahetult pärast 4 dpe kontsentratsiooni ja sisaldasid 1,4 ja 4 koosuriini. , 10% sahharoosi ja vett.Iga dieet pipeteeriti hambatampoonile (DAB Dental AB, Upplands Väsby, SE), mis sisestati 5 ml süstlasse (Thermo Fisher Scientific, Göteborg, SE), eemaldati kolb ja asetati Petri tassi peale (joonis 1). päevas, samal ajal kui surnud sääsed visati ära, kuni viimane sääsk suri (n = 40 ravi kohta). Erinevate dieetidega toidetud sääskede ellujäämist analüüsiti statistiliselt, kasutades Kaplan-Meyeri ellujäämiskõveraid ja log-rank teste, et võrrelda elulemuse jaotuse võrdlusi dieetide vahel (IBM SPSS Statistics 24.0.0.0).
Kohandatud sääskede lendveski Attisano jt põhjal.[17], mis on valmistatud 5 mm paksustest läbipaistvatest akrüülpaneelidest (10 cm laius x 10 cm pikk x 10 cm kõrge) ilma esi- ja tagapaneelideta (joonis 3: ülemine). Pöördsõlm vertikaalse toruga, mis on valmistatud gaasikromatograafiakolonnist (0,25 mm liimipikkusega L 7,5 cm vahele); neodüümmagnetitest 9 cm kaugusel. Samast materjalist (6,5 cm L) valmistatud horisontaalne toru poolitas vertikaalse toru, moodustades lõastatud käe ja käe, mis kandis valgust katkestava signaalina väikest alumiiniumfooliumitükki.
24 tundi nälginud emasloomadele anti 30 minutit enne ohjeldamist ülaltoodud dieeti. Täistoidetud emased sääsed tuimastati seejärel jääl 2–3 minutiks ja kinnitati mesilasvahaga putukate tihvtide külge (Joel Svenssons Vaxfabrik AB, Munka Ljungby, SE) ning seejärel seoti veskitorud horisontaalsete andmetega relvade külge. logija, seejärel salvestati ja kuvatakse PC-Lab 2000™ tarkvara (v4.01; Velleman, Gavere, BE) abil. Lennuveski paigutati reguleeritud kliimaga ruumi (12 h:12 h, hele: pime, 25 ± 2 °C, 65 ± 5% RH).
Lennutegevuse mustri visualiseerimiseks arvutati kogu lennatud vahemaa (m) ja järjestikuste lennutegevuste koguarv tunni kohta 24-tunnise perioodi jooksul. Lisaks võrreldi üksikute naiste poolt läbitud keskmisi vahemaid erinevate ravimeetodite lõikes ning analüüsiti ühesuunalise ANOVA ja Tukey post hoc analüüsi (JMP Pro, v14.0.0) abil. liitlane, arvutatakse keskmine voorude arv 10-minutilise sammuga.
Et hinnata toitumise mõju An. arabiensis'e reproduktiivsusele, viidi kuus emast (4 dpe) pärast verevõtmist otse Bugdormi puuridesse (30 cm × 30 cm × 30 cm) ja anti seejärel 48 tunniks eksperimentaalne toit, nagu ülalpool kirjeldatud. Dieedid eemaldati ja kudemisnõud (30 ml; Nolato 20 ml) täideti igal 4 tunnil distille 20 ml veega. 24 tundi.Korrake iga toitumisrežiimi 20-50 korda.Munad loendati ja registreeriti iga katsepuuri jaoks.Munade alamproove kasutati üksikute munade keskmise suuruse ja pikkuse varieeruvuse hindamiseks (n ≥ 200 dieedi kohta), kasutades Dialux-20 mikroskoopi (DM1000; Ernst Leitzlar) a2D, Cameraz Wetlar. 0 R2;Leica Microsystems Ltd., DE). Ülejäänud mune hoiti 24 tundi kontrollitud kliimaga ruumis standardsetes kasvatustingimustes ja mõõdeti hiljuti tärganud 1. järgu vastsete alamproov (n ≥ 200 dieedi kohta). 4.0.0, SAS Institute Inc.).
Arsi rassi Zebu veistelt kogutud proovidest koguti värskest (1 tund pärast proovide võtmist), 24 tundi, 72 tundi ja 168 tundi vananenud uriinist õhuruumi lenduvad ained. Mugavuse huvides võeti uriiniproovid varahommikul, kui lehmad olid veel laudas. Uriiniproovid võeti üle 010-10 milliliitrist proovist 010 ml. s (Toppits Cofresco, Frischhalteprodukte GmbH and Co., Minden, DE) 3-liitrises kaanega polüamiidis Vinüülkloriidist plastikust tünnides. Igast veise uriiniproovist koguti pearuumi lenduvad ained kas otse (värsked) või pärast 24-tunnist, 72-tunnist ja 168-tunnist toatemperatuuril laagerdamist, st iga uriiniproov oli esinduslik vanuserühm.
Lenduvate ainete kogumiseks õhuruumis kasutati suletud ahelaga süsteemi, et 2,5 tunni jooksul tsirkuleeriti aktiivsöega filtreeritud gaasivoogu (100 ml min-1) läbi polüamiidkoti adsorptsioonikolonni, kasutades selleks diafragma vaakumpumpa (KNF Neuberger, Freiburg, DE). 5 cm x 3 mm id), mis sisaldas 35 mg Porapak Q-d (50/80 mesh; Waters Associates, Milford, MA, USA) klaasvillakorkide vahel.Enne kasutamist loputati kolonni 1 ml uuesti destilleeritud n-heksaaniga (Merck, Al Darmstadt, DE) ja 1 ml adsorbeeritud või 99 mahuprotsenti lahustatud pentaaniga. Les elueeriti 400 μl pentaaniga. Headspace'i kogud ühendati ja säilitati seejärel -20 °C juures kuni edasiseks analüüsiks.
Peremeest otsivate ja verd söövate An.Headspace lenduvate ekstraktide käitumisreaktsioone, mis koguti värskest, 24-tunnisest, 72-tunnisest ja 168-tunnisest uriinist, analüüsiti Arabidopsis-sääskede lenduvate ekstraktide suhtes, kasutades sirge klaastoru olfaktomeetrit [18]. Katsed viidi läbi. 19].Klaastoru olfaktomeetrit (80 cm × 9,5 cm id) valgustati ülevalt 3 ± 1 lx punase valgusega.Söega filtreeritud ja niisutatud õhuvool (25 ± 2 °C, 65 ± 2% suhteline õhuniiskus) läbis biotesti kiirusega 30 cm ja terasest läbiti vooluhulga a 30 cm a s-1 a mesars. plume struktuur.Hambaravi tampoondosaator (4 cm × 1 cm; L:D; DAB Dental AB), riputatud olfaktomeetri tuulepoolses otsas oleva 5 cm mähise külge, stimulaatorite vahetustega iga 5 minuti järel.Analüüsiks kasutati 10 μl iga pearuumi ekstrakti, lahjendatuna 1:10. Kontrollstiimulina kasutati võrdne kogus verd. quitod paigutati üksikutesse vabastuspuuridesse 2-3 tundi enne katse algust. Vabastuspuur asetati olfaktomeetri allatuule küljele ja sääskedel lasti 1 minut aklimatiseeruda ning seejärel avati puuri liblikklapp, et vabastada. Analüüsiti ravi- või tõrjevahendi külgetõmbejõudu nii, et 5 minuti jooksul sattus sääskede kontroll-ekstrakti allikas ja 5 minuti jooksul. sööti vähemalt 30 korda ja et vältida ühe päeva mõjusid, katsetati igal katsepäeval sama arvu ravi- ja kontrolle. Otsige vastuseid peremeesorganismilt ja verega toidetud Ans.Araabia versus headspace'i komplekte analüüsiti nominaalse logistilise regressiooniga, millele järgnes paaritute suhete paarivõrdlus (JMP Pro, SAS Institute Inc., v14.0.0).
Ani kudemisreaktsioon. Värske ja vananenud lehma uriini peavälja ekstrakte analüüsiti Bugdormi puurides (30 cm × 30 cm × 30 cm; MegaView Science). Plasttopsid (30 ml; Nolato Hertila), mis olid täidetud 20 ml destilleeritud veega, tagasid kudemissubstraadi cm ja asetati kudemissubstraadiga, ja asetati vastasnurkadesse2. μl igast pearuumi ekstraktist lahjenduses 1:10. Kontrolltopsi reguleerimiseks kasutati võrdne kogus pentaani. Iga katse vahel vahetati ravi- ja kontrolltopse, et kontrollida asendimõju. Kümme verega toidetud emast lasti katsepuuridesse ZT 9-11 ja munetud munad loendati 24 tundi hiljem. kontrolltopsi munenud munad)/(munade koguarv).Iga töötlemist korrati 8 korda.
Emaslooma An. arabiensis'e gaasikromatograafiline ja elektronantenni mustri tuvastamise (GC-EAD) analüüs viidi läbi vastavalt eelnevalt kirjeldatule [20]. Lühidalt öeldes eraldati värsked õhuruumi lenduvad ekstraktid, kasutades Agilent Technologies 6890 GC (Santa Clara, CA, USA), mis oli varustatud HP-5 kolonniga (30 mm, 25 mm, 5 mm paksusega kile, 0,5 mm). nooloogiad).ja vananev uriin.Vesinikku kasutati liikuva faasina keskmise lineaarse voolukiirusega 45 cm s-1.Iga proovi (2 μl) süstiti 30 sekundiks jaotuseta režiimis sisselasketemperatuuriga 225 °C. GC ahju temperatuur programmeeriti vahemikus 35 °C (3-minutiline hoidmine) kuni 30 minutini 310 effekti. Fluent splitter, lisati 4 psi lämmastikku ja jagati suhtega 1:1 Gerstel 3D/2 väikese surnud ruumalaga ristis (Gerstel, Mülheim, DE) leekionisatsioonidetektori ja EAD vahel. EAD jaoks mõeldud GC heitvee kapillaar juhiti läbi segatud Gersteli ODP-2 ülekandeliini ahju, 0 °C, mille temperatuur oli klaasi pluss 5 mm, mille temperatuur oli klaasist 5 mm. süsinikfiltreeritud, niisutatud õhk (1,5 l min-1). Antenn asetati 0,5 cm kaugusele toru väljalaskeavast.Iga üksik sääsk moodustas ühe korduse ja peremeest otsivate sääskede puhul tehti iga vanuse uriiniproovidega vähemalt kolm kordust.
Bioaktiivsete ühendite identifitseerimine värske ja vananenud veise uriini pearuumi kogudes, kasutades kombineeritud GC ja massispektromeetrit (GC-MS; 6890 GC ja 5975 MS; Agilent Technologies), et kutsuda esile antennivastused GC-EAD analüüsis, töötades elektronlöökionisatsiooni režiimis temperatuuril 70 C-5V-ga, kasutati a-silikaaderdatud eV-ga. (60 m × 0,25 mm siseläbimõõt, 0,25 μm kile paksus), kasutades liikuva faasina heeliumi keskmise lineaarse voolukiirusega 35 cm s-1. 2 μl proov süstiti, kasutades samu injektori seadistusi ja ahju temperatuuri nagu GC-EAD analüüsis. Ühendeid võrreldi nende raamatukogu retentsiooniaja ja massispektri1 (kohandatud Kovátralent) alusel4. ).Identifitseeritud ühendid kinnitati autentsete standardite süstimisega (lisafail 1: tabel S2). Kvantifitseerimiseks süstiti välisstandardina heptüülatsetaati (10 ng, 99,8% keemilise puhtusega, Aldrich).
Värskes ja vananenud uriinis tuvastatud bioaktiivsetest ühenditest koosneva sünteetilise lõhnasegu efektiivsuse hindamine peremeesorganismi otsiva ja verd imeva Ans.arabiensis'e meelitamiseks, kasutades sama olfaktomeetrit ja protokolli nagu ülal. Sünteetilised segud jäljendasid ühendite koostist ja proportsioone segatud lenduvates ekstraktides 24-tunnise, 24-tunnise, 24-tunnise, 18-tunnise ja 68-tunnine vananenud uriin (joonis 5D-G; lisafail 1: tabel S2). Analüüsiks kasutage 10 μl täissünteetilist segu 1:100 lahjendust, mille üldine vabanemiskiirus on vahemikus 140–2400 ng h-1, et hinnata segu atraktiivsust peremeesorganismi ja vere suhtes. eemaldatakse täieliku segu üksikute ühendite segud. Otsige vastuseid peremeesorganismilt ja verega toidetud ans. Araabia vs sünteetilisi ja lahutavaid segusid analüüsiti nominaalse logistilise regressiooniga, millele järgnes paaritute suhete paarivõrdlus (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Et hinnata, kas lehma uriin võiks olla malaariasääskede peremehe elupaiganäitaja, pandi ülalkirjeldatud viisil kogutud värske ja vana lehma uriin ja vesi 3-liitristesse ämbritesse (100 ml) ja asetati peremeessöödalõksudesse.(BG-HDT versioon; BioGents, Regensburg, DE).Kümme püünist, mis on paigutatud karjamaale üksteisest 50 m kaugusele, 400 m kaugusel külakogukonnast (Silay, Etioopia, 5°53´24´´N, 37°29´24´´E) ja kariloomadeta, alalises pesitsuskohas ja külades. Viis püünist jäid töötlemata. pööratakse igal ööl kokku viis ööd. Erinevas vanuses uriiniga söödaga püütud sääskede arvu võrreldi logistilise regressiooni abil beeta-binoomjaotusega (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Etioopias Oromia piirkonnas Maki linna lähedal asuvas malaaria endeemilises külas (8° 11′ 08″ põhjalaiust, 38° 81′ 70″ idapikkust; joonis 6A). Uuring viidi läbi augusti keskpaigast septembri keskpaigani enne iga-aastast siseruumides esinevat jääkvihmahooaega, mis paiknes 5-5 m2-l (5 m2-l). Uuringu jaoks valiti küla äärealad (joonis 6A).Majade valiku kriteeriumid olid järgmised: majja ei lubatud loomi, siseruumides toiduvalmistamine (küttepuude või söe tõmbamine) ei olnud lubatud (vähemalt katseperioodil) ja majad, kus on maksimaalselt kaks elanikku, magavad putukamürkides.töödeldud sääsevõrgu all.Eetilise heakskiidu andis Addis Abeba ülikooli loodusteaduste teaduskonna (CNS-IRB) institutsionaalne teaduseetika ülevaatusnõukogu (IRB/022/2016) vastavalt Maailma Meditsiiniliidu Helsingi deklaratsioonis kehtestatud juhistele.Kogu leibkonnapea nõusolek saadi kogu ringkonna ja tervishoiutöötajate abiga. .Katsekavandis järgiti 2 × 2 ladina ruudu kujundust, kus sünteetilised segud ja kontrollid määrati paarismajadele esimesel ööl ja vahetati majade vahel järgmisel katseööl. Seda protsessi korrati kümme korda. Lisaks määrati CDC püünised töötama viiel järjestikusel päeval kolmel päeval samal kellaajal.
Kuut bioaktiivset ühendit sisaldav sünteetiline segu lahustati heptaanis (97,0% lahusti, GC puhtus, Sigma Aldrich) ja vabastati 140 ng h-1, kasutades puuvillase tahi dosaatorit [20]. Tahdist jaotur võimaldas kõigil ühenditel vabaneda konstantses proportsioonis järgmise 12-tunnise katse jooksul. Kontrolliks kasutati heptaani. (CDC) valguslõks (John W. Hock Company, Gainesville, FL, USA; joonis 6A). Püünised riputati 0,8–1 m kõrgusele maapinnast voodi jalutsi lähedal ja vabatahtlik magas töötlemata sääsevõrgu all ja teda opereeriti ajavahemikus 18.00–06.30. 1] sõeluti seejärel polümeraasi ahelreaktsiooni (PCR) analüüsiga, et tuvastada liigid, mis on morfoloogiliselt identifitseeritud kui A. gambiae sl. Kompleksi liikmed [23]. Väliuuringus analüüsiti paarismajade lõksu jäämist nominaalse logistilise sobivuse mudeli abil, kus atraktiivsus oli sõltuv muutuja ja ravi (sünteetiline segu vs. 0.0 kontroll)0. SAS Institute Inc.).Siin esitame tõenäosussuhte testi χ2 ja p-väärtused.
Hinnake, kas see on ohutu.arabiensis suutis saada uriini, selle peamise lämmastikuallika, uurea, otsese söötmise teel 48 tunni jooksul pärast manustamist 4 päeva jooksul pärast (dpe) peremeesorganismi otsimise ja verega toidetud emasloomade söötmise katseid (joonis 1A). Nii peremeesorganismi otsivad kui ka verd imevad emased imasid oluliselt rohkem vett kui ükski teine ​​(5)5,0-2 (sahharoosi)2 (sahharoosi)2(5.0)2. p < 0,0001 ja F(5,299) = vastavalt 56,00, p < 0,0001; joonised 1B, C. Lisaks sõid peremeesorganismi otsivad emased 72 tunni pärast uriinist vähem kui 168 tunni pärast (joonis 1B). mM võrreldes kõigi teiste kontsentratsioonide ja veega, kuigi eristamatu 10% sahharoosist (F(10,813) = 15,72, p < 0,0001; joonis 1D). See oli vastupidine verega toidetud emaste reaktsioonile, kes tavaliselt neelasid oluliselt rohkem uureat sisaldavat toitu kui vett, kuigi 10% sahharoosist (5,5% (5,7)1,5) p < 0,0001; joonis 1).1E).Lisaks, kui võrrelda kahte füsioloogilist seisundit, siis flebotoomiga emasloomad absorbeerisid madalaimate kontsentratsioonide juures rohkem uureat kui peremeesorganismi otsivad emased ja need emased imasid samasuguses koguses uureat kõrgemate kontsentratsioonide korral (F(1,953) = p 7010,8).Joonis fig 1F, G). Kuigi uureat sisaldava dieediga tarbimisel näisid olevat optimaalsed väärtused (joonis 1D, E), suutsid mõlemas füsioloogilises seisundis olevad emased uurea kogust kogu karbamiidi kontsentratsioonide vahemikus logaritmiliselt lineaarselt moduleerida (joonis 1F, G).).Samamoodi näivad sääsed kontrollivat oma lämmastiku omastamist, reguleerides imendunud uriini kogust, kuna lämmastiku kogus uriinis kajastub imendunud koguses (joonis 1B, C ja B).
Uriini ja karbamiidi mõju hindamiseks peremeesorganismi otsivate ja verd imevate sääskede ellujäämisele toideti emasloomadele kõigis neljas vanuses uriini (värsket, 24 tundi, 72 tundi ja 168 tundi pärast sadestumist) ja karbamiidi kontsentratsioonide vahemikku, samuti destilleeritud vee ja 10% üldise sahharoosi analüüs (sellel oli oluline kontrollmõju ellujäämisele). ellujäämine peremeest otsivatel emastel (uriin: χ2 = 108,5, df = 5, p < 0,0001; uurea: χ2 = 122,8, df = 5, p < 0,0001; joonis 2B, C) ja verega toidetud emastel (uriin: 9f = 0,0, 0,0 . uurea: χ2 = 137,9, df = 5, p < 0,0001; joonis 2D,E).Kõigis katsetes oli uriini, karbamiidi ja veega toitunud emastel oluliselt madalam ellujäämismäär võrreldes emasloomadega, kellele toideti sahharoosi dieeti (joonis 2B-E). d 72-tunnise aegunud uriiniga (p = 0,016), mille ellujäämise tõenäosus oli madalaim (joonis 2B). Lisaks elasid peremeesorganismi otsivad emased, kellele toideti 135 mM uureat, kauem kui veekontrollid (p < 0,04) (joonis fig. 2B).2C). Võrreldes veega elasid naised, keda toideti värske uriini ja 24-tunnise uriiniga, kauem (vastavalt p = 0,001 ja p = 0,012; joonis 2D), samas kui naised, keda toideti 72-tunnise uriiniga, elasid kauem kui naised, kellele toideti lühikest värsket uriini ja 24-tunnist uriini (vastavalt 0,0 ja 0,3 = 0,0 ja 0.1; 2D). Kui neid toideti 135 mM uureaga, säilisid verega toidetud emased kauem kui kõik muud karbamiidi ja vee kontsentratsioonid (p < 0,013; joonis 2E).
Lehma uriinist ja karbamiidist toituva peremees- ja verdimeva emase Anopheles arabinise ellujäämine.Biotestis (A) pakuti emastele sääskedele toitu, mis koosnes värskest ja vananenud lehma uriinist, erinevates kontsentratsioonides karbamiidist, sahharoosist (10%) ja destilleeritud veest (H2O). 2 tundi, kuni kõik uriiniga (B, D) ja uureaga (C, E) toitunud emased ning sahharoosi ja veega toidetud emased on surnud
Lennuveski testis 24-tunnise perioodi jooksul määratud kogukaugus ja voorude arv erines peremeesorganismi otsivatel ja verd imevatel sääskedel, mis näitasid üldiselt väiksemat lennuaktiivsust (joonis 3). Peremeest otsivatel sääskedel, kes andsid värsket ja vananenud uriini või sahharoosi ja vett, ilmnesid erinevad lennumustrid (joonis 3), kusjuures emased, 2- ja 4-naised olid aktiivsemad. 168-tunnised sääskedel, kes toitusid uriinist, olid erinevad lennumustrid ja nad olid peamiselt ööpäevased. Emased sääsed, kes andsid sahharoosi või 72-tunnist uriini, näitasid aktiivsust kogu 24-tunnise perioodi jooksul, samal ajal kui vett andnud emased olid aktiivsemad perioodi keskpaigas. Sääsed toitusid kõige rohkem varahommikul. 72-tunnise uriini aktiivsus vähenes pidevalt 24 tunni jooksul (joonis 3).
Lehma uriinist ja karbamiidist toituva kütti otsiva verdimeva emase Anopheles arabinise lennujõudlus. Lennuveski testis seoti emased sääsed, kes toitusid värske ja vananenud lehma uriiniga, erineva kontsentratsiooniga karbamiidi, sahharoosi (10%) ja destilleeritud vee (H2O) külge. ) naistel registreeriti iga dieedi puhul 24-tunnise perioodi jooksul kogupikkus ja lendude arv tunnis (tume: hall; hele: valge).Keskmine vahemaa ja keskmine löökide arv on näidatud ööpäevase aktiivsuse graafikust paremal. Vearibad tähistavad keskmise standardviga.Statistilist analüüsi vt teksti
Üldiselt järgis peremeest otsivate naiste üldine lennuaktiivsus mustrit, mis sarnanes lennukaugusega 24-tunnise perioodi jooksul. Keskmist lennukaugust mõjutas märkimisväärselt sissevõetud toit (F(5, 138) = 28,27, p < 0,0001) ja peremeest otsivad naised neelasid 72 tundi uriini, võrreldes kõigi teiste lendudega oluliselt pikema vahemaaga (0.0). ed-sääsed lendasid kauem kui värsked (p = 0,022) ja 24-tunnise uriiniga (p = 0,022) toidetud sääsed. Vastupidiselt uriini dieediga kirjeldatud lennuaktiivsuse mustrile näitasid karbamiidiga toidetud peremeesorganismi otsivad emased püsivat lennuaktiivsust 24-tunnise perioodi jooksul (teise perioodi poolaastal oli sarnane aktiivsus). otsivad emased, kellele toideti uureat, suurendasid oluliselt keskmist lennukaugust sõltuvalt neelduvast kontsentratsioonist (F(5, 138) = 1310,91, p < 0,0001). Peremeest otsivad emased, keda toideti mis tahes kontsentratsiooniga karbamiidiga, lendasid kauem kui emased, kellele toideti vett või sahharoosi (p < 0,03).
Verdimevate sääskede üldine lennuaktiivsus oli stabiilne ja püsis 24 tunni jooksul kõigi dieetide puhul, kusjuures uriini aktiivsus suurenes pimeda perioodi teisel poolel nii veega toidetud emastel kui ka värskelt toidetud ja 24 tunni vanustel emastel (joonis 3). Kuigi uriiniga toit mõjutas oluliselt keskmist lennukaugust verega toidetud emastel (F(3),0,0,413), 0,0 = 413. dieet ei teinud (F(5, 138) = 1,36, p = 0,24) .koos muu uriiniga ja kontrolltoiduga (värske, p = 0,0091; 72 tundi, p = 0,0022; 168 tundi, p = 0,001; sahharoos, p = 0,001,0 .0, 6 ).
Uriini ja uureaga söötmise mõju paljunemisparameetritele hinnati munemise biotestides (Joonis 4A) ja uuriti iga emase munade arvu, muna suuruse ja äsja koorunud esimese järgu vastsete järgi.Mutud munade arv.Uriiniga toidetud araabia emased varieerusid toitumise lõikes (F, 42,30) (F, 42,30) ).Emased, keda toideti 24-tunnise uriini ja verejahuga, munesid oluliselt rohkem kui muud uriiniga toitu saanud emased ja olid sarnased sahharoosiga toidetud emasloomadele (joonis 4B). Samamoodi varieerus uriiniga toidetud emaste munade suurus sõltuvalt dieedist (F(5, 209) = 12,85, .20ed-40-400-400-400-400-200-400). munesid oluliselt suuremaid mune kui veega toidetud emasloomad, samas kui 168 h uriiniga toidetud emaste munad olid oluliselt väiksemad (joonis 4C). Lisaks mõjutas uriinitoit oluliselt vastsete suurust (F(5, 187) = 7,86, p < 0,0001), kusjuures oluliselt suuremad vastsed ja 24-st urineeritud munadest tekkisid kui munavastsetest munetud munadest.Vee- ja 168-tunnise uriiniga toidetud emased (joonis 4D).
Lehma uriinist ja karbamiidist toituva emase Anopheles arabinise reproduktiivsus. Verega toidetud emastele sääskedele toideti 48 tundi toitu, mis koosnes värskest ja vananenud lehma uriinist, erinevatest kontsentratsioonidest karbamiidist, sahharoosist (10%) ja destilleeritud veest (H2O), enne nende asetamist biotestidesse (Egg-substraadid (Egg) 4 tundi (E gg-substraadid, mis saadi biotestidesse). , F) ja vastsete suurust (D, G) mõjutas märkimisväärselt pakutav toit (lehma uriin: BD; uurea: EG).Iga parameetri keskmised, mida mõõdeti erinevate tähtedega nimetustega, erinesid üksteisest oluliselt (ühesuunaline ANOVA, kasutades Tukey post hoc analüüsi; p < 0,05). Vearibad tähistavad keskmise standardviga.
Uriini peamise lämmastikku sisaldava komponendina mõjutas uurea, kui seda anti verega toidetud emasloomadele toiduna, kõigis uuringutes märkimisväärselt paljunemisparameetreid. Karbamiidiga toidetud emaste munade arv pärast veresööki, olenevalt uurea kontsentratsioonist (F(11, 360) = 4,69; p < 0,000,0,0,0,00,1 m3 uurea u1M3 uM). M munes rohkem mune (joonis 4E). Emased, keda toideti karbamiidi kontsentratsiooniga 134 µM või rohkem, munevad suuremaid mune kui veega toidetud emased (F(10, 4245) = 36,7; p < 0,0001; joonis 4F) ja vastsete suurus, kuigi neid mõjutavad sarnased uurea kontsentratsioonid (emastel <3 0,0 0,9). 001) oli muutlikum (joonis 4G).
Üldine külgetõmme peremeesorganismi otsiva veise uriini pearuumi lenduvate ekstraktide vastu. Klaastoru olfaktomeetriga hinnatud arabiensist (joonis 5A) mõjutas oluliselt uriini vanus (χ2 = 15,9, df = 4, p = 0,0032; joonis 5B). kõik muud ravimeetodid (72 tundi: p = 0,0060, 168 tundi: p = 0,012, pentaan: p = 0,00070), välja arvatud värske uriini lõhn (p = 0,13; joonis 5B). Kuigi verdimevate sääskede üldine külgetõmbejõud uriini suhtes ei erinenud oluliselt (χ = 8, χ = 8, p.7 =8 d.) 067; joonis fig 5C), leiti, et need emased on 72-tunnise vananenud uriiniga võrreldes kontrollidega võrreldes märkimisväärselt atraktiivsemad õhuruumi lenduvate ekstraktide jaoks (p = 0,0066; joonis 5C).
Käitumuslikud reaktsioonid lehmade looduslikele ja sünteetilistele uriinilõhnadele peremeesorganismi ja verega toidetud Anopheles arabianus'e otsimisel.Klaastoru olfaktomeetri skeem (A). Värske ja vananenud lehma uriini lenduvate ekstraktide ligitõmbamine peremeesorganismile (B) ja verd imevatele (C) ekstraktidele, isoleeritud sääskedest2. Näidatud on tund (E), 72 tundi (F) ja 168 tundi (G) vananenud lehma uriin. Elektronantenni tuvastamise (EAD) jäljed näitavad pinge muutusi vastuseks bioaktiivsetele ühenditele gaasikromatograafist elueeritud ja leekionisatsioonidetektori (FID) abil tuvastatud pearuumis. Skaalariba tähistab vabanemiskiiruse (reaktsiooniaeg) ja amplituudi (µ-reaktsiooni) omadusi. Näidatud on g h-1) bioloogiliselt aktiivsetest ühenditest.Üks tärn (*) näitab püsivat madala amplituudiga reaktsiooni.Kahekordne tärni (**) tähistab reprodutseerimata reaktsioone.Leia peremees (H) ja vereimeja (I) An.arabiensis meelitab märkimisväärselt sünteetilisi segusid värsketest ja vanadest lehmadest. muu (ühesuunaline ANOVA, kasutades Tukey post hoc analüüsi;p < 0,05). Vearibad tähistavad skaala standardviga
Emane Ann.arabiensis, 72 tundi ja 120 tundi pärast verejahu, kudemise ajal ei eelistatud värske ja vananenud lehma uriini lenduvaid ekstrakte, võrreldes pentaani kontrollidega (χ2 = 3,07, p > 0,05; Täiendav fail 1: joonis S1).
Emaslooma Ann.arabiensis'e puhul tuvastasid GC-EAD ja GC-MS analüüsid kaheksa, kuus, kolm ja kolm bioaktiivset ühendit (joonis 5D-G). Kuigi elektrofüsioloogilisi reaktsioone esile kutsunud ühendite arvus täheldati erinevusi, oli enamik neist ühenditest igas värskest ja vananenud uriinist kogutud lenduva antenni ekstraktis. Seetõttu saadi igast ülaltoodud ekstraktist ainult need ühendid. ootel lisati edasistesse analüüsidesse.
Bioaktiivsete ühendite kogu lenduvate ühendite vabanemise kiirus headspace'i kollektsioonis tõusis 29 µg h-1 värskes uriinis 242 µg h-1-ni 168 tundi vananenud uriinis, peamiselt p-kresooli ja m-formaldehüüdi tõttu. Fenool suureneb, samuti fenool. uriini vanus, mis korreleerus signaali intensiivsuse (külluse) vähenemisega kromatogrammil (joonis 5D)-G vasakpoolne paneel) ja füsioloogiliste reaktsioonidega nendele ühenditele (joonis 5D-G parem paneel).
Üldiselt oli sünteetilisel segul sarnane bioaktiivsete ühendite loomulik suhe, mis tuvastati värske ja vananenud uriini pearuumide lenduvates ekstraktides (joonis 5D–G) ja ei paistnud peremeesorganismi otsimisel märkimisväärset atraktiivsust esile kutsuvat (χ2 = 8,15, df = 4, p = 0,083; joonis 5, χ 9, mossd = 4,2H). 4, p = 0,30; joonis fig 5I). Post hoc paaripõhised ravimeetodite võrdlused näitasid aga, et peremeest otsivad sääsed olid 24 tundi vananenud uriini sünteetilise segu jaoks märkimisväärselt atraktiivsed, võrreldes pentaani kontrollidega (p = 0,0086; joonis 5H).
Et hinnata üksikute komponentide rolli 24 tundi vananenud uriini sünteetilistes segudes, hinnati Y-toru testis kuut lahutavat segu terviklike segude suhtes, mille käigus eemaldati üksikud ühendid. Peremeest otsivate sääskede puhul mõjutas üksikute ühendite lahutamine terviklikust segust oluliselt käitumisreaktsioone (χ2 = 19.06, 19.06, 3df .63; 2A), olid kõik lahutavad segud atraktiivsemad kui Väiksem kui täielikult segatud. Seevastu üksikute ühendite eemaldamine täielikult sünteetilisest segust ei mõjutanud verdimevate sääskede käitumisreaktsioone (χ2 = 11,38, df = 6, p = 0,077), välja arvatud dekanaal, mille tulemuseks oli segu täielik tõmbe tase S (Joonis 2 = 2) võrreldes S (joonis 2).
Etioopias asuvas malaaria-endeemilises külas hinnati 24-tunnise lehma uriini sünteetilise segu efektiivsust sääskede ligimeelitamisel põllutingimustes kümme ööd (joonis 6A). Kokku 4861 sääskesid jäädvustati ja tuvastati 45,7% -l 45,7% -list aneelt, 18-aastased ANTHOPUS SLO, ANTHOPUS lk (lisafail 1: tabel S1) .anopheles Arabinis on AN.Gambia liikide kompleks ainus liige PCR-analüüsiga. Keskmiselt püüti öö kohta püütud 320 sääske, mille jooksul sünteetilise seguga söödaga püünised püüti rohkem sääskesid kui segudeta paaritud praamid (–0 310). Viis kontrollööd katse alguses, keskel ja lõppu. Sarnaselt süvendati sääskede arv igas püünisepaaris, mis näitab majade vahel kallutatust (χ2 (0, 1665) = 9 × 10-13, p> 0,05) ja ilma uuringuperioodil tekkinud segude arvuga (MOS-id, mis ei olnud olulised, mis oli kokkuvõttes. 0, 2107) = 138,7, p <0,0001), hiljutine veretoitmine (χ2 (0, 650) = 32,2, p <0,0001) ja rasedus (χ2 (0, 228) = 6,27, p = 0,0123;Täiendav fail 1: tabel S1). See kajastub ka tabatud sääskede koguarvus: peremeest otsiv > vereimeja > tiine > pooltiine > isane.
24-tunnise sünteetilise lehma uriini lõhnasegu efektiivsuse välihindamine. Välikatsed viidi läbi Etioopia lõunaosas (kaart), Maki linna lähedal (sisesta), kasutades haiguste tõrje keskuste (CDC) valguslõksu (paremal) paarismajades, ladina ruudukujulise CD-kujutise ja ruudukujulise kujundusega emasloomade kujutisega (Sbaynittthe-Cap). opheles arabesques (B), kuid mitte Anopheles farroes (C), erineval viisil füsioloogilisest seisundist sõltuv toime.Lisaks püüdsid need püünised märkimisväärselt suurema arvu peremeessääski.(D) Võrreldes kontrolliga.Vasakul olevad tulbad tähistavad sääskede keskmist selektsiooniindeksit, mis on püütud paarides lõhnaaine) ja bait (paremal) ps (=opens)1) esindavad keskmist valikuindeksit kontrolllõksude paarides (avatud; N = 5).).Tärnid näitavad statistilist olulisuse taset (*p = 0,01 ja ***p < 0,0001)
Need kolm liiki püüti sünteetilisi segusid sisaldavatesse püünistesse erinevalt. Peremehe otsimine (χ2(1, 1345) = 71,7, p < 0,0001), veretoitmine (χ2(1, 517) = 16,7, p < 0,0001) ja tiinus (χ2(1, 517) = 16,7, p < 0,0001) ja tiinus (χ2(1, 1345)1 = .401ar 1, 68abi1 = . sis oli lõksus lõksus, mis vabastas sünteetilist segu (joonis 6B), samas kui An kogus ei erinenud. Leiti erinevates füsioloogilistes seisundites faroensis (joonis 6C). Culexi puhul leiti sünteetilise seguga söödastatud püünistes peremeest otsivate sääskede arvu märkimisväärne suurenemine (joonis 6B), 6D), võrreldes kontrolllõksudega.
Etioopia sigimiskohtade ja maakogukondade vahel väljaspool potentsiaalseid peremeesorganisme asuvaid söödapüüniseid kasutati selleks, et hinnata, kas malaariasääsed kasutavad lehma uriini lõhna peremeesorganismi elupaiganäidisena. Peremehe näpunäidete puudumisel, kuumuse puudumisel ja lehma uriini lõhnaga või ilma selleta, ei jäädvustatud sääski (Lisa, 3. kaastemperatuuri 1,ow ja H). Emased malaariasääski meelitati ja püüti kinni, kuigi väikeses koguses, sõltumata uriini vanusest (χ2(5, 25) = 2,29, p = 0,13; Täiendav fail 1: joonis S3 ).Seevastu veekontrollid ei püüdnud malaariasääski kõrgel temperatuuril (lisafail 1: joonis S3).
Malaariasääsed omandavad ja levitavad lämmastikku sisaldavaid ühendeid kompenseeriva söötmise kaudu lehma uriiniga (st lompidega), et parandada eluloo tunnuseid, sarnaselt teiste putukatega [2, 4, 24, 25, 26]. Lehma uriin on kergesti kättesaadav taastuv ressurss maapiirkondades sellistele malaariatele, mis on tihedalt seotud kaasmaalaste ja talivektoritega. s ja kudemiskohad.Emassääsed tuvastavad selle ressursi lõhna järgi ja on võimelised reguleerima lämmastikuühendite, sealhulgas uriini peamise lämmastikku sisaldava komponendi uurea omastamist [15, 16].Emassääse füsioloogilisest seisundist olenevalt suurendavad toitained peremeesorganismi lendu ja ellujäämist, kuna see on vajalik. verega toidetud isendite ellujäämis- ja paljunemisomadused esimese gonadotroopse tsükli ajal. Seetõttu mängib uriini segunemine olulist toitumisalast rolli malaaria vektorite puhul, mis on suletud nagu alatoidetud täiskasvanud [8], kuna see annab emastele sääskedele võimaluse omandada olulisi lämmastikuühendeid, osaledes vähese riskiga sigimisel, eluea pikenemisel, eeldataval eluea pikenemisel ja toitmisel. millest mõjutab vektori võimsust.Lisaks võib selline käitumine olla tulevaste vektorite haldamise programmide sihtmärk.