Mantenugaiak eskuratzeak eta banaketak intsektuen elikaduraren eta bizitzaren historiaren ezaugarriak integratzen ditu. Bizitza-etapa desberdinetako mantenugai espezifikoen gabeziak konpentsatzeko, intsektuek elikagai horiek lor ditzakete elikadura osagarriaren bidez, adibidez, putzu gisa ezagutzen den prozesu batean ornodunen jariapenez elikatuz.arabiensis behi gernuan elikagaiak eskuratzeko asaldurak bizitza-historiaren ezaugarriak hobetzen ditu.
Ziurtatu segurua dela. Arabiensis behi gernu fresko, 24 orduko, 72 orduko eta 168 orduko usain zaharrek erakarri zuten, eta ostalari bila eta odolez elikatu (48 orduko odol-otorduaren osteko) emeak Y-hodiko usaimetro batean neurtu ziren, eta haurdun dauden emeak analisi elektrokimikoak eta analisi kimikoetarako erabili ziren. behien gernuan konposatu bioaktiboak identifikatzea lau adin-klaseetan. Konposatu bioaktiboen nahasketa sintetikoak ebaluatu ziren Y-hodietan eta landa-saiaketetan. Behien gernua eta nitrogenoa duen urea konposatu nagusia malaria bektoreentzako dieta osagarri potentzial gisa ikertzeko, elikadura-parametroak eta bizi-historiaren ezaugarriak neurtu ziren. biziraupena, hegaldia lotuta eta ugalketa ebaluatu ziren.
Bilatu ostalariaren odola eta elikadura. Laborategiko eta landa-ikerketetan, arabiarrek behi fresko eta zaharren usain natural eta sintetikoak erakarri zituzten. Haurdun dauden emeek axolagabe ziren behien gernuaren erantzunei kume-guneetan. Ostalariaren bila eta odola zurgatzen duten emeek aktiboki xurgatzen zuten behiaren gernua eta urea eta biziraupen-funtzio horiek biziraupen-funtzio horiek biziraupen-egoeraren arabera esleitzen dituzte. , edo ugalketa.
Anopheles arabinis-ek behi-gernua eskuratzea eta banatzea, bizitza-historiaren ezaugarriak hobetzeko. Behi-gernuaren elikadura osagarriak zuzenean eragiten dio bektore-ahalmenari, eguneroko biziraupena eta bektore-dentsitatea handituz, eta zeharka hegaldi-jarduera aldatuz eta, beraz, etorkizuneko ereduetan kontuan hartu beharko litzateke.
Mantenugaiak eskuratzeak eta banaketak intsektuen bazka eta bizi-historiaren ezaugarriak integratzen ditu [1,2,3].Intsektuak elikagaiak hautatu eta eskuratzeko eta elikagaien erabilgarritasunaren eta mantenugaien eskakizunen arabera konpentsazio-elikadura egiteko gai dira [1, 3]. Mantenugaien banaketa bizitza-prozesuaren araberakoa da eta elikagaien kalitate eta kantitate eskakizun desberdinak sor ditzake intsektuen bizi-etapa desberdinetan. elikadura osagarria, hala nola, lokatza, hainbat gorotz eta ornodunen jariaketa eta harrazkia, putzu izenez ezagutzen den prozesu bat [2].Nahiz eta tximeleta eta sits espezie asko deskribatzen diren, beste intsektu-ordena batzuetan ere ureztatze-zuloak gertatzen dira, eta baliabide mota horiek erakartzeak eta elikatzeak eragin handia izan dezake osasunean eta beste bizi-ezaugarri batzuetan [5, 7] . nopheles gambiae sensu lato (sl) heldu "desnutritua" gisa agertzen da [8], beraz, ureztatzeak zeresan handia izan dezake bere bizitzaren ezaugarrietan, baina portaera hori orain arte alde batera utzi da. Ibilgailu garrantzitsu honetan mantenugaien kontsumoa areagotzeko bide gisa asaldura erabiltzeak arreta merezi du horrek ondorio epidemiologiko garrantzitsuak izan ditzakeelako.
Anopheles eltxo eme helduen nitrogeno-kontsumoa mugatua da larba-fasetik eramandako kaloria-erreserba baxuengatik eta odol-otorduaren erabilera ez-eraginkorragatik [9].Ann.gambiae sl emeak normalean hori konpentsatzen du odol-otordu osagarriekin osatuz [10, 11], eta, horrela, pertsona gehiago gaixotasuna hartzeko arriskua jarriz eta gaixotasuna hartzeko arrisku handiagoarekin eta prebentzio handiagoarekin erabiltzeko. ornodunen gorozkien elikadura osagarria, egokitzapena eta hegaldiaren maniobragarritasuna hobetzen duten konposatu nitrogenatuak eskuratzeko, beste intsektu batzuek frogatzen duten moduan [2].Ildo horretan, An.Gambian sl espezie konplexua, Anopheles arabinis, behi fresko eta zahartua [12,13,14] interesgarri ezaguna da anai-espezieetako baten erakarpen indartsua eta bereizia. Behiekin eta ganaduaz elikatzen da.Behi gernua konposatu nitrogenatuetan aberatsa den baliabidea da, urea gernu freskoko nitrogeno osoaren % 50-95 hartzen baitu [15, 16]. horietatik eltxoentzako toxikoak diren konposatuak sortzen dituzte) hazten dira [15], emeak izan daitezke.
Azterketa honetan, ostalari eta odolez elikatzen diren Ans bilatu ziren. Bere lehen gonadotropina-zikloan arabiensis konposatu nitrogenatuak eskuratzea ebaluatu zen, urea barne, gernuaren nahasketa bidez. Ondoren, eltxo emeek elikagai-baliabide potentzial hori nola esleitzen zuten ebaluatzeko esperimentu batzuk egin ziren, biziraupen, ugalketa eta ugalketa gehiago hobetzeko. Odolez elikatzen den An ostalariaren eta odolez elikatzen diren arrasto fidagarriak ote ziren zehazteko. Baliabide nutrizional potentzial honen bila, arabiensis-ek ikusitako erakargarritasun diferentzialaren atzean korrelazio kimikoak aurkitu zituen.Eltxoen erakarpena.Lortutako emaitzek baieztatzen dute An.arabiensis-ek ornodunen gernuan aurkitzen diren konposatu nitrogenatuak eskuratzen eta banatzen ditu, bizitzaren historiaren ezaugarrietan eragiteko. Emaitza hauek balizko ondorio epidemiologikoen testuinguruan eztabaidatzen dira eta bektoreen zaintza eta kontrolerako nola erabil daitezkeen.
Anopheles arabicans (Dongola tentsioa) 25 ± 2 °C, 65 ± 5% RH eta 12:12 orduko argi-ilun zikloan mantendu ziren. Larbak plastikozko erretiluetan hazi ziren (20 cm × 18 cm × 7 cm) ur destilatuz beteta eta Tetramin® ® arrain janariarekin elikatu ziren (M30 ml, DERKE). lato Hertila, Åstorp, SE) eta gero Bugdorm kaioletara eraman (30 cm × 30 cm × 30 cm; MegaView Science, Taichung, Taiwan) helduen agerpena ahalbidetzeko. Helduei % 10eko sakarosa disoluzio bat eman zieten ad libitum, agerraldiaren ondorengo 4 egun arte (dpe), eta une horretan, emeak gauean esperimentatu aurretik, ostalariarekin esperimentatu edo esperimentatu aurretik emeekin esperimentatu egin ziren. Behean deskribatzen den bezala. Hegaldi-hodien esperimentuetarako erabilitako emeei 4-6 orduz bakarrik gosetu zitzaien ad libitum urarekin. Odola xurgatzen duten eltxoak ondorengo bioentseguetarako prestatzeko, 4 dpe emeei ardi odol defibrotikoz hornitu zitzaien (Håtunalab, Bro, SE) mintz elikatzeko sistema erabiliz (Hemotek Discovery Workshops, Accrington, Accrington, Erresuma Batuko emeetara zuzenean banatu eta zuzenean banatu ziren). behean, edo % 10 sakarosa ad libitum behean deskribatzen diren esperimentuen aurretik 3 egunetan.Azken eme hauek hegaldi-hodiaren biosaioetarako erabili eta laborategira eraman zituzten, eta, ondoren, ad libitum ur destilatu zuten esperimentua baino 4-6 orduz.
Elikadura-saiakuntzak erabili ziren gernu- eta urea-kontsumoa kuantifikatzeko eme helduen An.Arab. Ostalari bila eta odolez elikatzen diren emeei %1 diluitutako behi gernu fresko eta zahartua, hainbat urea-kontzentrazio eta bi kontrol (%10 sakarosa eta ura) 48 orduz. 1; Sigma-Aldrich, Stockholm, SE) dietara gehitu eta 4 × 4 matrize batean hornitu zen 250 µl mikrozentrifuga-hodietan (Axygen Scientific, Union City, CA, AEB; 1A irudia) Bete ertzera (~ 300 µl). diametroa eta 6 cm-ko altuera; Semadeni, Ostermundigen, CH; 1A irudia) iluntasun osoz 25 ± 2 cm °C-tan eta % 65 ± 5eko hezetasun erlatiboan.Esperientzia hauek 5 eta 10 aldiz errepikatu ziren.Dietan jarri ondoren, eltxoak -20 °C-tan jarri zituzten azterketa gehiago egin arte.
Anopheles arabianus emeak xurgatutako behi-gernua eta urea bilatu. Elikadura-saiakeran (A), eltxo emeei behi-gernu fresko eta zaharrez osatutako dieta, urea, sakarosa (% 10) eta ur destilatua (H2O) kontzentrazio ezberdinez osatua zegoen. -eme bilatzaileek 72 orduko behiaren gernua xurgatzen zuten 168 orduko behiaren gernua baino gutxiago (B).Gurnuaren batez besteko nitrogeno-edukia (± desbideratze estandarra) txertatzean irudikatzen da. Ostalariaren bila (D, F) eta odola zurgatzen duten (E, G) emeek urea hartzen dute dosi-menpekoa den modu batean. ANOVA Tukeyren post hoc analisia erabiliz; p < 0,05).Errore-barrak batez bestekoaren errore estandarra adierazten du (BE).Marra eten zuzenak erregresio-lerro log-lineala adierazten du (F, G)
Xurgatutako janaria askatzeko, eltxoak banan-banan jarri ziren 230 µl ur distilatu zuten 1,5 ml-ko mikrozentrifuga-hodietan eta ehuna botatzeko eta haririk gabeko motor batekin eten zen (VWR International, Lund, SE), eta ondoren zentrifugazioa egin zen 10 krpm-ra 10 minutuz (20µ-90µl-ra transferitu). gma-Aldrich) eta absorbantzia (λ620) espektrofotometroan oinarritutako mikroplaken irakurgailu baten bidez (SPECTROStar® Nano, BMG Labtech, Ortenberg, DE) nm zehaztu ziren. Bestela, eltxoak 1 ml ur destilatutan ehotzen ziren, eta horietatik 900 µl kubeta-analisi batera transferitu ziren. ista, SE).Elikadura-ingesta kuantifikatzeko, serieko diluzioaren bidez kurba estandar bat prestatu zen, 1 mg ml-1 xileno zianuro 0,2 µl eta 2,4 µl lortzeko. Ondoren, eltxo bakoitzak irensten zuen janari-kopurua zehazteko koloratzaileen kontzentrazio ezagunen dentsitate optikoa erabili zen.
Bolumen-datuak norabide bakarreko bariantza-analisia (ANOVA) erabiliz aztertu ziren, eta ondoren, Tukey-ren post hoc bikoteka konparatuz (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc., Cary, NC, US, 1989–2007). Erregresio linealeko analisiek kontzentrazio-menpeko urea ingesta deskribatu zuten eta ostalari-sake-sakeren arteko erantzunak alderatu zituzten (Odol-suntsi-paketekin). 0 Mac, GraphPad Software, San Diego, CA, AEB).
Adin-talde bakoitzeko 20 µl gernu-lagin gutxi gorabehera Chromosorb® W/AW-n lotu ziren (10 mg 80/100 sare, Sigma Aldrich) eta eztainu-kapsuletan (8 mm × 5 mm) kapsulatu ziren. Kapsulak CHNS/O analizatzaile baten errekuntza-ganberan sartu ziren (Flash 2000. errea fabrikatzailearen protokoloaren arabera.Nitrogeno osoa (g N l-1) kuantifikatu zen estandar gisa erabilitako urea-kontzentrazio ezagunetan oinarrituta.
Dietak ostalariaren bila eta odola zurrupatzen duten emakumezkoen biziraupenean duen eragina ebaluatzeko, eltxoak banaka jarri ziren Petri plater handietan (12 cm-ko diametroa eta 6 cm-ko altuera; Semadeni) estalkian sarez estalitako zulo batekin (3 cm-ko diametroa) aireztapena eta elikagaiak hornitzeko. , eta bi kontrol, % 10eko sakarosa eta ura. Dieta bakoitza hortz tanpoi batean pipetatu zen (DAB Dental AB, Upplands Väsby, SE) 5 ml-ko xiringa batean sartuta (Thermo Fisher Scientific, Gothenburg, SE), enmboloia kendu eta Petri plaka baten gainean jarri zen (1. irudia). egunean bi aldiz zenbatu ziren, eta hildako eltxoak, berriz, azken eltxoa hil arte baztertzen ziren (n = 40 tratamendu bakoitzeko).Hainbat dietarekin elikatzen ziren eltxoen biziraupena estatistikoki aztertu zen Kaplan-Meyer-en biziraupen-kurbak eta log-rank testen bidez, dieten arteko biziraupen-banaketa konparaketak alderatzeko (IBM SPSS Estatistika.004.0.004).
Attisano et al.[17] oinarritutako eltxo hegalari pertsonalizatua, 5 mm-ko lodierako panel akriliko garbiz (10 cm zabal x 10 cm luze x 10 cm altu) aurreko eta atzeko panelik gabe (3. irudia: goian). Pibota-multzoa, gas-kromatografia-zutabe batez osatutako hodi bertikal batekin (0,25 mm-ko ident.) intsektu pare bat zintzilik 5 cm-ko muturretatik zintzilik dagoena. um imanak 9 cm-ko distantzian.Material bereko hodi horizontal batek (6,5 cm L) hodi bertikala erdibanatu zuen, loturiko beso bat eta argia eteteko seinale gisa aluminiozko paper zati txiki bat zeraman beso bat osatzeko.
24 orduko goseak zeuden emeei aurreko dieta eman zieten eustea baino 30 minutuz. Guztiz elikatzen ziren eltxo emeak banan-banan izotzez anestesiatu zituzten 2-3 minutuz eta intsektu-pinetan erle-argizarekin lotzen ziren (Joel Svenssons Vaxfabrik AB, Munka Ljungby, SE) eta, ondoren, hodi horizontaletara lotzen ziren. -Eraikitako datu-erregistratzailea, ondoren PC-Lab 2000™ softwarea erabiliz gorde eta bistaratu (v4.01; Velleman, Gavere, BE). Hegaldi-errota klima-erregulaturiko gela batean jarri zen (12 h:12 h, argia: iluna, 25 ± 2 °C, 65 ± 5 % RH).
Hegaldi-jardueraren eredua ikusteko, hegazkinaren distantzia totala (m) eta ondoz ondoko hegaldi-jardueren kopurua kalkulatu ziren 24 orduko aldian. Horrez gain, emakumezkoek egindako batez besteko distantziak alderatu ziren tratamenduen artean eta norabide bakarreko ANOVA eta Tukey-ren post hoc analisia erabiliz aztertu ziren (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc. tratamenduaren batez besteko distantzia independentea den bitartean). txanda 10 minutuko gehikuntzatan kalkulatzen da.
Dietak An.arabiensis-en ugalketa-errendimenduan duen eragina ebaluatzeko, sei eme (4 dpe) zuzenean Bugdorm kaiolara (30 cm × 30 cm × 30 cm) eraman zituzten odola jaso ondoren, eta, ondoren, dieta esperimentala eman zuten goian deskribatu bezala 48 orduz. Ondoren, dietak kendu eta kumatze edalontziak (30 ml; Nolato Hertila 20 ml ur destilatuz hirugarren egunean 4 orduz beteta) eman ziren. 24 ordu. Errepikatu dieta-erregimen bakoitza 20-50 aldiz. Arrautzak zenbatu eta erregistratu ziren kaiola esperimental bakoitzeko. Arrautzen azpilaginak erabili ziren banakako arrautzen batez besteko tamaina eta luzera aldakuntza ebaluatzeko (n ≥ 200 dieta bakoitzeko) Dialux-20 mikroskopioa erabiliz (DM1000; DEN, R2 Lelaritz Weica, DM1000; Ernst Weica) 2;Leica Microsystems Ltd., DE). Gainerako arrautzak klima kontrolatutako gela batean mantendu ziren 24 orduz hazkuntza-baldintza estandarretan, eta duela gutxi sortu ziren lehen faseko larben azpilagin bat (n ≥ 200 dieta bakoitzeko) neurtu ziren, goian azaldu bezala. JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Buru-espazioko lurrunkorren gernu freskoetatik (ordu 1etik aurrera), 24 ordu, 72 ordu eta 168 orduko gernu zaharretatik bildu ziren Zebu behien, Arsi arrazetako laginetatik. Erosotasunerako, gernu-laginak goizean goiz jaso ziren, behiak ukuiluan zeuden bitartean. (Toppits Cofresco, Frischhalteprodukte GmbH and Co., Minden, DE) 3 l-ko poliamida estalkiarekin Binil klorurozko plastikozko bidoietan.Behien gernu-lagin bakoitzeko buru-espazioko hegazkinak zuzenean (freskoak) edo giro-tenperaturan 24 h, 72 h eta 168 hz heltze ondoren bildu ziren, hau da, gernu-lagin bakoitzaren adierazgarria zen.
Buru-espazio lurrunkorrak biltzeko, begizta itxiko sistema bat erabili zen ikatz aktibatuz iragazitako gas-korronte bat (100 ml min-1) poliamida-poltsa baten bidez adsortzio zutabera 2,5 orduz zirkulatzeko, diafragma huts-ponpa baten bidez (KNF Neuberger, Freiburg, DE). Kontrol gisa, buru-espazio-bilketa egin zen 5 cm-ko poliamidozko poltsa baten bidez. x 3 mm id) 35 mg Porapak Q (50/80 sare; Waters Associates, Milford, MA, AEB) beira-artilezko tapoien artean zituena. Erabili aurretik, zutabea 1 ml n-hexano birdistilatuarekin (Merck, Darmstadt, DE) eta 1 ml pentano (% 99,0) disolbatzaile puruarekin garbitu ziren. μl pentano. Buru-espazio bildumak batu eta gero -20°C-tan gorde ziren azterketa gehiago egiteko erabili arte.
Ostalariaren bila eta odola jaten duten An.Headspace gernu freskotik, 72 orduko eta 168 orduko gernutik jasotako estraktu lurrunkorren jokaera-erantzunak Arabidopsis eltxoen extract lurrunkorren bila aztertu ziren, beirazko hodi zuzeneko usaimetro baten bidez [18]. ].Beirazko hodiko olfatometro bat (80 cm × 9,5 cm id) goitik 3 ± 1 lx argi gorrirekin argiztatu zen.Ikatz iragazi eta hezetutako aire-fluxua (25 ± 2 °C, % 65 ± 2 hezetasun erlatiboa) bioassaia gainditu zuen 30 cm s-1. tanpoi-banatzailea (4 cm × 1 cm; L:D; DAB Dental AB), usaimenaren haize-muturrean dagoen 5 cm-ko bobina batetik esekita, 5 minuturo estimulatzaile-aldaketarekin. Aztertzeko, buru-espazio bakoitzeko 10 μl, 1:10 diluitua, estimulu gisa erabili zen. Esperimentua hasi baino 2-3 ordu lehenago kaiolak. Askapen-kaiola usaimetroaren haize-behean jarri zen, eta eltxoak 1 minutuz aklimatatzen utzi ziren, eta gero kaiolaren tximeleta balbula ireki zen askatzeko. Tratamendu edo kontrolarekiko erakarpena aztertu zen eltxoen proportzioa aztertu zen. eta edozein egunen ondorioak saihesteko, tratamendu eta kontrol kopuru bera probatu zen egun esperimental bakoitzean.Ostalari eta odolez elikatzen diren Ans-en erantzunak bilatu ziren.Arabiarren versus buru-espazioen multzoak erregresio logistiko nominala erabiliz aztertu ziren, eta, ondoren, bikoteka konparatuz gero ratio bakoitietarako (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
An-en ugaltze-erantzuna. Behi fresko eta zaharreko gernuaren buru-espazioko laburpenak Bugdorm-eko kaioletan aztertu ziren (30 cm × 30 cm × 30 cm; MegaView Science). Plastikozko edalontziak (30 mL; Nolato Hertila) 20 mL ur distilatuz bete ziren ugaltzeko substratua ematen zuten eta 24 cm-ko izkinetan jarri ziren. 1:10eko diluzioan buru-espazio-estraktu bakoitzeko. Pentano kantitate berdina erabili zen kontrol-kopa doitzeko. Esperimentu bakoitzaren artean tratamendua eta kontrol-kopiak trukatu ziren posizio-efektuak kontrolatzeko. Odol elikatutako hamar eme kaiola esperimentaletan askatu ziren ZT 9-11n eta edalontzietako arrautzak zenbatu ziren 24 ordu beranduago kalkulatzeko tratamenduaren formula: kontrol-ontzian jarritako arrautza-kopurua)/(Errondutako arrautza kopurua guztira).Tratamendu bakoitza 8 aldiz errepikatu zen.
An.arabiensis emearen gas kromatografikoa eta elektroi-antenen ereduaren detekzioa (GC-EAD) analisia egin zen lehen deskribatu bezala [20].Laburbilduz, buru-espazio lurrunkorren laburpen freskoak bereizi ziren HP-5 zutabe batekin (30 m × 0,25 mm lodiera, Agilent Technologies 6890 GC (Santa Clara, CA, US)) erabiliz.eta gernu zahartzea.Hidrogenoa erabili zen fase mugikor gisa 45 cm s-1-ko batez besteko emari linealarekin.Lagin bakoitza (2 μl) 30 segundoz injektatu zen zatiketarik gabeko moduan 225 °C-ko sarrerako tenperaturarekin. GC labearen tenperatura 35 °C-tik (3 minutuko atxikipena) 300 °C-tik 300 °C-ra (100 ºC-ra) programatu zen. zatitzailea, 4 psi nitrogeno gehitu eta 1:1 zatitu zen Gerstel 3D/2 bolumen txikiko gurutze batean (Gerstel, Mülheim, DE) suaren ionizazio detektagailuaren eta EADren artean. EAD-ren GC isuri-kapilarra Gerstel ODP-2 transferentzia-lerro batetik igaro zen, GC labearen tenperatura eta 5 °C-ko karbonoarekin nahastuta nahasten dituena. aire erdikoa (1,5 l min−1).Antena hodiaren irteeratik 0,5 cm-ra jarri zen.Eltxo bakoitzak erreplika bat hartzen zuen, eta ostalariaren bila dauden eltxoei, gutxienez hiru erreplika egin zitzaizkien adin bakoitzeko gernu-laginetan.
Konposatu bioaktiboen identifikazioa behi gernu fresko eta zaharreko buru-espazio-bildumetan GC eta masa espektrometro konbinatu baten bidez (GC-MS; 6890 GC eta 5975 MS; Agilent Technologies) GC-EAD analisian antena-erantzunak lortzeko, 70 eV-tan elektroi-inpaktuaren ionizazio moduan funtzionatuz. 25 mm-ko barne-diametroa, 0,25 μm pelikularen lodiera) helioa fase mugikor gisa erabiliz 35 cm s-1eko batez besteko emari linealarekin. 2 μl lagin bat injektatu zen GC-EAD analisirako labearen ezarpen eta tenperatura berberak erabiliz. Konposatuak beren atxikipen-denboran oinarrituta identifikatu ziren (Kovát spectralist biblioteka pertsonalizatua eta konparaketa pertsonalizatua). dentifikatutako konposatuak benetako estandarrak injektatuz baieztatu ziren (Fitxategi gehigarria 1: S2 taula).Kantifikaziorako, heptilo azetatoa (10 ng, % 99,8 purutasun kimikoa, Aldrich) kanpoko estandar gisa injektatu zen.
Gernu fresko eta zahartuetan identifikatutako konposatu bioaktiboz osatutako usain-nahaste sintetiko baten eraginkortasuna ebaluatzea Ans.arabiensis ostalariaren bila eta odola zurrupatzeko erakartzeko, aurreko olfatometro eta protokolo bera erabiliz. gernu zahartua (5D-G irudia; 1. fitxategi gehigarria: S2 taula). Analisirako, erabili nahasketa guztiz sintetikoaren 1:100 diluzio bateko 10 μl, 140-2400 ng h-1 bitarteko askapen-tasa orokorrarekin, ostalariaren eta odol-zurrupatzeko probaren erakargarritasuna ebaluatzeko. Nahaste osoko konposatu bakarrak kentzen dira. Ostalari eta odolez elikatzen diren Ans-en erantzunak bilatu dira.
Behi gernuak malaria eltxoen ostalari-habitataren seinale gisa balio ote dezakeen ebaluatzeko, behi-gernu freskoa eta zahartua, goian deskribatutako moduan bilduta, eta ura sareko 3 l-ko ontzietan (100 ml) jarri eta ostalariaren beita-tranpetan jarri ziren.(BG-HDT bertsioa; BioGents, Regensburg, DE). Hamar tranpa larreetan 50 m-ko distantziara jarrita, herriko komunitatetik 400 m-ra (Silay, Etiopia, 5°53´24´´N, 37°29´24´´E) eta abererik ez, hazkuntza-gune iraunkorretan eta herrietan. gauero biratu zen guztira bost gauetan. Adin ezberdinetako gernuarekin amuztutako tranpetan harrapatutako eltxoen kopuruak erregresio logistikoa erabiliz alderatu ziren beta banaketa binomial batekin (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Etiopiako Maki herritik gertu dagoen malaria-endemismoko herrixka batean (8° 11′ 08″ N, 38° 81′ 70″ E; 6A. Irudia). Azterketa abuztuaren erdialdera eta irailaren erdialdera bitartean egin zen, urteko barruko hondar ihinztaduraren aurretik, eta euri-denboraldi luze batekin batera. azterketarako hautatua (6A. irudia).Etxeak hautatzeko erabilitako irizpideak hauek izan ziren: etxean animaliarik ez sartzea, ez zen barneko sukaldaritzarik onartzen (egurra edo ikatza ateratzea) (gutxienez proba-aldian), eta gehienez bi biztanleko etxeak, intsektizidarik gabekoetan lo egitea.tratatutako eltxo-sarearen azpian. Onespen etikoa eman du Natur Zientzien Fakultateko (CNS-IRB) Ikerketa Instituzionaleko Ikerketa Batzordeak (IRB/022/2016) Addis Abebako Unibertsitateko Helsinkiko Munduko Mediku Elkartearen Adierazpenak ezarritako jarraibideen arabera. 'kebele') mailan. Diseinu esperimentalak 2 × 2 latindar karratuaren diseinua jarraitu zuen, zeinean nahasketa sintetikoak eta kontrolak parekatuta dauden etxeei esleitu zitzaizkien lehenengo gauean eta etxeen artean trukatzen ziren hurrengo gau esperimentalean. Prozesu hau hamar aldiz errepikatu zen. Gainera, hautatutako etxeetan eltxoen jarduera kalkulatzeko, CDC tranpak egunaren hasierako, erdiko eta amaierako bost ordu segidako gauaren hasierako eta erdiko eremuan segidan ezarri ziren.
Sei konposatu bioaktibo dituen nahasketa sintetikoa disolbatu zen (% 97,0ko disolbatzaile GC kalifikazioa, Sigma Aldrich) eta Wick Discenser-ek. Ention (CDC) Argi Tranpa (John W. Hock Company (FIT (FIT) oinaren ondoan, eta 18: 00 eta 06: 30.mosquito (e) k, haurdunek eta haurdunek harrapatutako boluntarioak (ondorengoak) ed polimerasaren katearen erreakzioa (PCR) analisia A. Gambiae SL-k identifikatutako espezieak identifikatzeko.0. SAS Institute Inc.).Hemen, χ2 eta p-balioen berri ematen dugu probabilitate-erlazioaren probatik.
Ebaluatu segurua den ala ez.arabiensis-ek gernua lortzeko gai izan zen, bere nitrogeno-iturri nagusia, urea, zuzeneko elikaduraz, administrazioaren ondorengo 48 orduko epean (dpe) ostalariaren bila eta odolaz elikatzen diren emeen elikadura-saiakuntzak egiteko (1A. irudia). Bai ostalariaren bila eta baita odol zurrupatzen zuten emeek beste edozeinek baino sakarosa edo sakarosa gehiago xurgatzen zuten beste edozeinek baino (5, 2 p. 0001 eta F(5.299) = 56,00, p < 0,0001, hurrenez hurren; 1B,C irudia).Gainera, ostalariaren bila emeek gernu gutxiago jaten zuten 72 ordutan gernuarekin alderatuta 168 ordutan (1B. irudia). beste kontzentrazio eta ur guztietara, % 10eko sakarosatik bereizten ez den bitartean (F(10,813) = 15,72, p < 0,0001; 1D irudia). Hau odolez elikatzen diren emeen erantzunarekin kontrajartzen zen, normalean urea duten dieta nabarmen gehiago xurgatzen baitzuten ura baino, nahiz eta (% 180 0, 5, 5, 5, 1, 5, 1, 5, 3, 3, 1, 1, 1, 2, 2, 2, 2, 2, 2, 2, 2, 2, 3 ). 5, p < 0,0001; 1. Irudia).1E).Gainera, bi egoera fisiologikoen artean alderatzean, flebotomizatutako emeek ostalari bila zebiltzan emeek baino urea gehiago xurgatzen zuten kontzentrazio baxuenetan, eta eme horiek antzeko urea kantitate xurgatzen zuten kontzentrazio handiagoetan (F(1.953)= 70.00, p < 80.02;1F, G irudia). Urea duen dieta baten ingesta balio optimoak ziruditen arren (1D, E irudia), bi egoera fisiologikoetako emeek urea-kontzentrazioen gama osoan xurgatutako urea-kopurua modu log-linealean modulatzeko gai izan ziren (1F,G irudia).).Era berean, badirudi eltxoek kontrolatzen dutela beren nitrogenoa hartzea xurgatutako gernu kopurua erregulatuz, gernuan dagoen nitrogeno kopurua xurgatutako kantitatean islatzen baita (1B, C eta B irudiak txertaketak).
Gernuak eta ureak ostalariaren bila eta odola xurgatzen duten eltxoen biziraupenean duten eragina ebaluatzeko, emeei lau adinetako gernua (freskoa, 24 h, 72 h eta 168 h) eta urea-kontzentrazio sorta bat elikatu zitzaien, baita ur destilatua eta % 10 sakarosa ere biziraupenaren kontrol esanguratsua izan zela (Irudiak biziraupenaren kontrol esanguratsu gisa). ostalariaren bila dabiltzan emeetan (gernua: χ2 = 108,5, df = 5, p < 0,0001; urea: χ2 = 122,8, df = 5, p < 0,0001; 2B, C. irudia) eta odolez elikatzen diren emeetan (gernua: χ2 = χ0, = p. 2 = 137,9, df = 5, p < 0,0001; 2D, E irudia). Esperimentu guztietan, gernu, urea eta urez elikatzen ziren emeek biziraupen-tasa nabarmen txikiagoak izan zituzten sakarosa-dieta batekin elikatzen ziren emeekin alderatuta (2B-E irudia). 0,016) bizirauteko probabilitate txikiena dutenak (2B. irudia). Gainera, 135 mM urea elikatzen zuten ostalari bila zebiltzan emeek ur-kontrolek baino denbora gehiago iraun zuten (p < 0.04) (Irudia.2C).Urarekin alderatuta, gernu freskoz eta 24 orduko gernuz elikatzen ziren emakumeek denbora gehiago iraun zuten bizirik (p = 0,001 eta p = 0,012, hurrenez hurren; 2D irudia), 72 orduko gernuz elikatzen ziren emakumeek, berriz, gernu fresko labur eta 24 orduko gernu zaharreko emakumeek baino gehiago bizirik iraun zuten (p = 0,00 Wh eta 24 orduko gernu zaharrekin, hurrenez hurren). eu 135 mM ureaz elikatuta, odolez elikatzen diren emeek beste urea eta ur kontzentrazio guztiak baino gehiago iraun zuten bizirik (p < 0,013; 2E Irudia).
Anopheles arabinis eme ostalariaren biziraupena eta behi gernuaz eta ureaz elikatzen ziren. Biosaiakuntzan (A), eltxo emeei behi-gernu fresko eta zaharrez osaturiko dieta bat eman zitzaien, urea, sakarosa (%10) eta ur destilatuaz (H2O). gernuaz (B, D) eta ureaz (C, E) eta kontrolak, sakarosa eta ura, hilda daude.
Hegaldi-errota proban 24 orduko aldian zehaztutako distantzia eta txanda kopurua oso desberdina izan zen ostalariaren bila eta odol-zurgatzen zuten eltxoen artean, hegazkin-jarduera gutxiago erakutsi baitzuten orokorrean (3. irud.). Gernu edo sakarosa eta ura fresko eta zahartua ematen zuten ostalariaren eltxoek hegaldi-eredu desberdinak erakusten zituzten (3. irudia eta emeak egunsentian elikatzen zirenak), emeak aktibatuta elikatzen ziren bitartean. 68 orduko gernuaz elikatzen ziren eltxoek hegaldi-eredu desberdinak erakusten zituzten eta batez ere egunekoak ziren. Sakarosa edo 72 orduko gernua ematen zuten eltxo emeek 24 orduko aldi osoan aktibitatea erakutsi zuten, eta ura ematen zuten emeek, berriz, aktiboagoak ziren erdialdean. ur-adineko gernuak jardueraren beherakada etengabea izan zuen 24 ordutan zehar (3. irudia).
Anopheles arabinis ehiztari bila ari den odol-zurrupatzaile emeen hegaldiaren errendimendua behi gernuaz eta ureaz elikatzen. 24 orduko dieta bakoitzeko orduko distantzia eta hegaldi kopurua erregistratu ziren (iluna: grisa; argia: zuria). Batez besteko distantzia eta batez besteko bolada kopurua aktibitate zirkadianoaren grafikoaren eskuinaldean agertzen dira. Errore-barrak batez bestekoaren errore estandarra adierazten dute. Analisi estatistikoa ikusi testua
Oro har, ostalariaren bila dabiltzan emakumezkoen hegaldi-jarduera orokorrak hegaldiaren distantziaren antzeko eredua jarraitu zuen 24 orduko epean. Batez besteko hegaldiaren distantzia nabarmen eragin zuen irensten den dietak (F(5, 138) = 28,27, p < 0,0001), eta ostalari-bilatzaileek 72 ordu gehiago irentsi zituzten beste distantzia guztiekin alderatuta. Gurutzez elikatzen diren eltxoek freskoek (p = 0,022) eta 24 orduko gernuarekin (p = 0,022) baino luzeago egin zuten hegan. Gernu-dietak deskribatutako hegaldi-jardueraren ereduaren aldean, ureaz elikatzen ziren ostalari bila zebiltzan emeek hegaldi-jarduera iraunkorra izan zuten 24 orduko fasean zehar (24 orduko fase ilunaren antzekoa izan zen). -Urea elikatzen zuten eme bilatzaileek hegaldiaren batez besteko distantzia nabarmen handitu zuten xurgatutako kontzentrazioaren arabera (F(5, 138) = 1310,91, p < 0,0001). Edozein urea-kontzentrazio elikatzen zuten ostalari-emeek ura edo sakarosa elikatzen zuten emeek baino luzeago egin zuten hegan (p < 0,03).
Odola zurgatzen duten eltxoen hegaldi-jarduera orokorra egonkorra izan zen eta 24 orduz mantendu zen dieta guztietan, gernuaren jarduera areagotu zen aldi ilunaren bigarren erdian urarekin elikatzen ziren emeentzat eta baita fresko eta 24 orduko emeentzat ere (3. irudia). Gernu-dietak odolez elikatzen ziren emakumezkoen batez besteko hegaldiaren distantzia nabarmen eragin zuen bitartean (F(5,0,40). ez zuen egin (F(5, 138) = 1,36, p = 0,24). Beste gernu eta kontrol dieta batekin (freskoa, p = 0,0091; 72 ordu, p = 0,0022; 168 ordu, p = 0,001; sakarosa, p = 0,0017; p = 0,0017; dH).
Gernuaren eta urearen elikaduraren ugalketa-parametroen eraginak arrautza erruleen biosaioetan ebaluatu ziren (4A. Irudia) eta eme bakoitzak erruten duen arrautza-kopuruaren, arrautza-tamainaren eta hazi berri den lehen faseko larben arabera ikertu ziren.Errondutako arrautza-kopurua.Giruz elikatzen diren arabiar emeak aldatu egin ziren (5, 420, 20, 20, 20, 20. 4B. Irudia).Emeek 24 orduko gernuaz elikatzen zuten, odol-otorduak emeek beste gernu-dieta batzuekin baino arrautza gehiago erruten zituzten eta sakarosaz elikatzen zirenen antzekoak ziren (4B. Irudia).Era berean, gernuaz elikatzen ziren emeek erruten zituzten arrautzen tamaina dietaren arabera aldatu zen (F(5, 209) = 4B. sakarosaz elikatzen diren emeek urez elikatzen diren emeek baino arrautza nabarmen handiagoak jartzen zituzten, eta 168 orduko gernuz elikatzen ziren emeen arrautzak nabarmen txikiagoak ziren (4C. irudia). Gainera, gernuaren dietak nabarmen eragin zuen larben tamaina (F(5, 187) = 7.86, p < 0.000. 72 orduko gernuaz elikatzen diren emeak, arrautz-larbenetatik errunatutako arrautzetatik baino.
Anopheles arabinis emeen ugalketa-errendimendua behi gernuaz eta ureaz elikatzen den. Odol elikatu emeei behi fresko eta zahartuzko gernuz, urea, sakarosa (% 10) eta ur destilatu (H2O) hainbat kontzentrazioz osatutako dietak elikatzen ziren 48 orduz biosaioetan jarri eta arrautza-orduak (B, E 48) arrautza-tamaina (B, E) eta substratuak lortu aurretik. rvae tamainak (D, G) eragin handia izan zuen emandako dietak (behiaren gernua: BD; urea: EG).Letra-izen desberdinak erabiliz neurtutako parametro bakoitzaren batez bestekoak nabarmen desberdinak ziren bata bestearengandik (modu bakarreko ANOVA Tukeyren post hoc analisia erabiliz; p < 0,05). Errore-barrak batez besteko errore estandarra adierazten dute.
Gernuaren osagai nitrogenatu nagusia den heinean, ureak, odolez elikatzen diren emeei dieta gisa ematen zaienean, ugalketa-parametroak nabarmen eragin ditu ikerketa guztietan. Urea elikatzen duten emeek erruten duten arrautza-kopurua, odol-otordu baten ondoren, urea-kontzentrazioaren arabera (F(11, 360) = 4,69; p < 0,000 µM 3,1 m-m3, emeen kontzentrazioa) arrautza gehiago jarri zituzten (4E. Irudia). 134 µM-ko edo goragoko urea-kontzentrazioz elikatzen diren emeek arrautza handiagoak jartzen dituzte urez elikatzen diren emeek baino (F(10, 4245) = 36,7; p < 0,0001; 4F Irudia), eta larben tamaina, nahiz eta antzeko kontzentrazioen eraginpean egon (3,0, 90, 3, 0, 3, 3, 3, 3, 3, 3, 2, 3, 3, 3, 3, 7, 7). 0001) aldakorragoa zen (4G. irudia).
Erakargarritasun orokorra ostalariaren bila dabiltzan behien gernuaren buru-espazio lurrunkorren erauzkinak. Beirazko hodiaren olfatometroan (5A. irudia) ebaluatutako arabiensis-a gernuaren adinaren eraginpean zegoen nabarmenki (χ2 = 15.9, df = 4, p = 0.0032; 5B. irudia). gainontzeko tratamendu guztiak (72 ordu: p = 0,0060, 168 ordu: p = 0,012, pentanoa: p = 0,00070), gernu freskoaren usaina izan ezik (p = 0,13; 5B irudia).Odola zurgatzen duten eltxoen erakarpen orokorra ez zen gernuarengandik nabarmen desberdina izan arren (2 = 4 8 p. 0,067; 5C. irudia), eme hauek buru-espazioko estraktu lurrunkorrentzako nabarmen erakargarriagoak zirela ikusi zen 72 orduko gernuarekin alderatuta, kontrolekin alderatuta (p = 0.0066; 5C irudia).
Behiaren gernuaren usain natural eta sintetikoekiko jokabide-erantzunak ostalari eta odolez elikatzen diren Anopheles arabanus bilatzean.Birriz hodiaren olfatometroaren eskema (A).Behi fresko eta zahartutako behiaren gernuaren buru-estraktu lurrunkorren erakarpena ostalari (B) eta odol-zurrupatzaileen (C) eltxoen. 72 orduko (F) eta 168 orduko (G) behi-gernua erakusten da. Elektronien antena detektatzeko (EAD) aztarnek tentsio-aldaketak erakusten dituzte gas-kromatografotik ateratako buru-espazioko konposatu bioaktiboei erantzuteko eta suaren ionizazio detektagailu batek (FID) detektatu. konposatuak agertzen dira.Izartxo bakar batek (*) anplitude baxuko erantzun koherentea adierazten du.Izartxo bikoitzek (**) erreproduziezinak diren erantzunak adierazten dituzte.Aurkitu ostalaria (H) eta odol-zurrupatzailea (I). c analisia;p < 0,05).Errore-barrak eskalaren errore estandarra adierazten dute
Ann.arabiensis emeak, 72 h eta 120 h odol-otorduaren ondoren, kumatze garaian, ez zen hobespenik erakutsi behi fresko eta zahartutako behien gernutik ateratako buru-espazio lurrunkorrak pentano-kontrolekin alderatuta (χ2 = 3.07, p > 0.05; 1. fitxategi gehigarria: S1. irudia).
Ann.arabiensis emakumezkoen, GC-EAD eta GC-MS analisietan zortzi, sei, hiru eta hiru konposatu bioaktibo identifikatu zituzten (5D-G irudia). Erantzun elektrofisiologikoak eragiten zituzten konposatu kopuruan desberdintasunak ikusi ziren arren, konposatu horietako gehienak gernu fresko eta zaharretik jasotako estraktu lurrunkor bakoitzean egon ziren. eustea analisi gehiagotan sartu ziren.
Buru-espazio-bildumako konposatu bioaktiboen askatze tasa osoa gernu freskoan 29 µg h-1etik 242 µg h-1 izatera pasa zen 168 orduko gernu zaharrean, batez ere p-kresolaren eta m-formaldehidoaren ondorioz. Fenolaren ondorioz, baita fenolaren ere. Kromatograman (5D irudia)-G ezkerreko panelean ikusitako seinale-intentsitatearen (ugaritasuna) eta konposatu hauen erantzun fisiologikoak (5D-G eskuineko panelean) ikusitako gutxitzearekin lotua.
Orokorrean, nahasketa sintetikoak gernu-buru-espazio fresko eta zaharretako laburpen lurrunkorretan identifikatutako konposatu bioaktiboen antzeko proportzio naturala zuen (5D-G irudia) eta ez omen zuen erakargarritasun handirik sortzen ostalari baten bilaketan (χ2 = 8,15, df = 4, p = 0,083; 5H irud.) edo odola (χ2, 4 df. = 0,30; 5I. irudia).Hala ere, tratamenduen arteko post hoc bikoteka konparatuz gero, ostalariaren bila zebiltzan eltxoak nabarmen erakargarriak zirela 24 orduko gernu zaharren nahasketa sintetikorako, pentano kontrolekin alderatuta (p = 0,0086; 5H irudia).
24 orduko gernuaren nahaste sintetikoetan osagai indibidualek duten eginkizuna ebaluatzeko, sei nahasketa kengarri ebaluatu ziren Y-hodiaren saiakeran nahaste osoen aurka, zeinetan konposatu indibidualak kendu ziren. Ostalariaren bila dabiltzan eltxoentzat, nahaste osotik konposatu indibidualak kentzeak eragin handia izan zuen jokabide-erantzunetan (χ62, 30; 19 = χ63, 19 = 1.20; : S2A irudia), kenketa-nahasketa guztiak erakargarriagoak ziren Txikiagoa baino guztiz nahastuta baino. Aitzitik, nahasketa guztiz sintetikotik konposatu indibidualak kentzeak ez zuen eraginik izan odola zurgatzen duten eltxoen jokabide-erantzunetan (χ2 = 11,38, df = 6, p = 0,077), eta horrek salbuespenarekin alderatuta, nahasketa maila baxuagoarekin alderatuta. 22; 1. fitxategi gehigarria: S2B irudia).
Etiopiako malaria-endemismoko herrixka batean, 24 orduko behi-gernuaren nahasketa sintetiko baten eraginkortasuna landa-baldintzetan eltxoak erakartzeko balio izan zuen hamar gauez (6A. irudia).Guztira 4.861 eltxo harrapatu eta identifikatu ziren, eta horietatik % 45,7 Anthropus , gambiae , gambiae thropus , % 9 , throphales , 1861 ziren. % 35,4 Culex spp. izan ziren (1. fitxategi gehigarria: S1 taula).Anopheles arabinis da PCR analisiaren bidez identifikatutako An.Gambian espezie konplexuko kide bakarra. Batez beste, 320 eltxo harrapatzen ziren gauean, eta denbora horretan nahasketa sintetikoko beitadun tranpak eltxo gehiago harrapatzen zituzten nahasketarik gabe, χ3190(2) tranpa parekatu gabe (χ3190() 0.0001) .Entseguaren hasieran, erdialdean eta amaieran bost kontrol-gauetan beitatu gabeko tranpak ezarri ziren.Eltxo-kopuru antzekoak harrapatu ziren tranpa-pare bakoitzean, etxeen arteko alborapenik ez zegoela adieraziz (χ2(0, 1665) = 9 × 10-13, p > 05-13, p > 05eko kontrol-kopuruaren azterketa, kontrol-kopuruarekin 0.05. Nahasketa sintetikoa zuten tranpetan harrapatutako kitoak nabarmen handitu ziren: ostalariaren bila (χ2(0, 2107) = 138,7, p < 0,0001), azken odol-elikadura (χ2(0, 650) = 32,2, p < 0,0001) eta haurdunaldia (0,6,282) = 1,20, χ282 ;Fitxategi gehigarria 1: S1 taula). Hori harrapatutako eltxoen kopuru osoan ere islatzen da: ostalariaren bila > odola xurgatzea > haurdun > erdi-haurdun > arra.
24 orduko behi-gernu-usain sintetiko baten eraginkortasunaren ebaluazioa eremuan.Eremuko entseguak Etiopiaren hego-erdialdean egin ziren (mapa), Maki herritik gertu (txertatua), Gaixotasunen Kontrolerako Zentroak (CDC) argi-tranpa bat erabiliz (eskuinean), parekatuta dauden etxeetan, diseinu karratu latindar batekin (aerial-argazki-argazki-argazkiarekin (aerial-argazki-argazkia) erabiliz. nopheles arabesques (B), baina ez Anopheles farroes (C), beste modu batean, egoera fisiologikoaren araberako efektu bat. Gainera, tranpa hauek ostalari Culex eltxoen kopurua nabarmen handitu zuten.(D) Kontrolarekin alderatuta. eskuinaldean batez besteko hautapen indizea irudikatu kontrol-tranpa pareetan (irekia; N = 5).).Izartxoek adierazgarritasun estatistiko mailak adierazten dituzte (*p = 0,01 eta ***p < 0,0001)
Hiru espezieak nahasketa sintetikoak zituzten tranpetan modu ezberdinean harrapatu zituzten. Ostalariaren bila (χ2(1, 1345) = 71,7, p < 0,0001), odol-elikadura (χ2(1, 517) = 16,7, p < 0,0001) eta haurdunaldia (χ2(1, 1345) = 6,81, p < 0,0001) .arabiensis tranpan harrapatuta geratu zen nahasketa sintetikoa askatuz (6B. irud.), An-kopurua, berriz, ez zen desberdina izan.Pharoensis egoera fisiologiko ezberdinetan aurkitu zen (6C. irudia).Culexentzat, ostalarien bila zebiltzan eltxoen kopuruaren igoera nabarmena baino ez zen aurkitu nahasketa sintetikoarekin beitatutako tranpetan (1,13χ29). 4; 6D irudia), kontrol-tranpekin alderatuta.
Etiopiako ugaltze-guneen eta landa-komunitateen artean ostalari potentzialetatik kanpo kokatutako ostalarien beita-tranpak erabili ziren malaria-eltxoek behi-gernuaren usaina erabiltzen duten ostalari-habitataren seinale gisa ebaluatzeko. Ostalariaren arrastorik, berorik ezean eta behi-gernu-usainarekin edo gabe, ez zen eltxorik harrapatu (Fitxategi gehigarria 1: tenperatura altua, S3 irudia. behatzak erakarri eta harrapatzen ziren, kopuru txikian bada ere, gernuaren adinaren arabera (χ2(5, 25) = 2,29, p = 0,13; 1. fitxategi gehigarria: S3 irudia).Aitzitik, uraren kontrolak ez zituen malaria eltxoak tenperatura altuetan harrapatu (Fitxategi gehigarria 1: S3 irudia).
Malaria eltxoek nitrogenoa duten konposatuak eskuratzen eta banatzen dituzte behien gernuarekin (hau da, putzuak) elikadura konpentsatiboaren bidez, bizi-historiaren ezaugarriak hobetzeko, beste intsektu batzuen antzera [2, 4, 24, 25, 26]. eltxoek usaimenaren bidez kokatzen dute baliabide hau eta gai dira gernuan konposatu nitrogenatuen hartzailea erregulatzeko, urea barne, gernuaren osagai nitrogenatu nagusia [15, 16]. Eltxo emearen egoera fisiologikoaren arabera, gernuan mantenugaiak esleitzen dira hegaldi-jarduera eta biziraupen-jarduera areagotzeko, eme-izaerak bizirik irauteko eta odol-odola bizirik irauteko. Lehen ziklo gonadotropikoan zehar. Hori dela eta, gernuaren nahasketak nutrizio-funtzio garrantzitsua betetzen du desnutrizio helduak bezala itxita dauden malaria-bektoreentzat [8], eltxo emeei konposatu nitrogenatu garrantzitsuak eskuratzeko gaitasuna ematen baitie arrisku baxuko elikaduran sartuta. Aurkikuntza honek ondorio epidemiologiko garrantzitsuak ditu, emeek bizi-itxaropen-gaitasuna eta portaera hori areagotzen baitute. etorkizuneko bektoreak kudeatzeko programen jomuga izan daiteke.