Une honetan Javascript desgaituta dago zure arakatzailean. Webgune honen eginbide batzuek ez dute funtzionatuko javascript desgaituta dagoenean.
Erregistratu zure datu zehatzekin eta interesgarri duzun droga zehatzekin eta ematen duzun informazioa gure datu-base zabaleko artikuluekin lotuko dugu eta berehala bidaliko dizugu PDF kopia bat.
作者 Stella S, Vitale SR, Martorana F, Massimino M, Pavone G, Lanzafame K, Bianca S, Barone C, Gorgone C, Fichera M, Manzella L
Stefania Stella, 1,2 Silvia Rita Vitale, 1,2 Federica Martorana, 1,2 Michele Massimino, 1,2 Giuliana Pavone, 3 Katia Lanzafame, 3 Sebastiano Bianca, 4 Chiara Barone, 5 Cristina Gorgone, 6 Marco Fichera, 6, 7 Livia Manzella Medikuntza Klinika 1,21 Catania, Catania, Catania, 1,21 Unibertsitateko Experimental 9. Saila. Italia;2 Onkologia eta Hematologia Esperimentalerako Zentroa, AOU Policlinico “G.Rodolico – San Marco”, Catania , 95123, Italia;3 Onkologia Medikoa, AOU Policlinico “G.Rodolico – San Marco”, Catania, 95123, Italia;4 Medical Genetics, ARNAS Garibaldi, Catania, 95123, Italia;5 Medicine Genetics, ASP, Syracuse, 96100, Italia;6 Biomedikuntza eta Bioteknologia Zientzien Saila, Cataniako Unibertsitatea, Genetika Medikoa, Catania, Italia, 95123;7Oasi Research Institute-IRCCS, Troina, 94018, Italia Komunikazioak: Stefania Stella, tel +39 095 378 1946, posta elektronikoa [email protected];[email protected] Helburua: BRCA1 eta BRCA2 mutazio germinalak eta bularreko minbizia (BC), obulutegia (OC) eta bizitza osorako minbizia izateko arriskuarekin lotutako beste batzuk. BRCA genearen probak funtsezkoak dira arrisku indibidualak ebaluatzeko, baita eramaile osasuntsuetan prebentzio-metodoak aurkitzeko eta minbizi gaixoen tratamenduak egokitzeko ere. Siziliako familietan aldaera genikoak, Siziliako ekialdeko populazioei zuzendutako ikerketak falta dira. Gure ikerketaren helburua izan zen Sizilia ekialdeko BC gaixoen kohorte batean BRCA germinaleko alterazio patogenoen intzidentzia eta banaketa ikertzea eta BC ezaugarri espezifikoekin duten erlazioa ebaluatzea hurrengo belaunaldiko sekuentziazioa erabiliz. % BRCA aldaera patogeno bat izan zuen, 17 (% 49) BRCA1-en eta 18 (% 51) BRCA2-n. BRCA1-en alterazioak negatibo hirukoitzeko BC pazienteetan nagusitzen dira, BRCA2 mutazioak ohikoagoak dira, aldiz, BC luminaleko pazienteetan. Sizilia ekialdeko pazienteek eta NGS analisiaren eginkizuna berresten dute BC hereditarioa duten pazienteak identifikatzeko. Orokorrean, datu hauek bat datoz mutazio-eramaileetan minbizia prebenitzeko eta tratatzeko BRCA baheketa onartzen duten aurreko ebidentziarekin.
Bularreko minbizia (BC) mundu osoko gaiztotasun ohikoena eta emakumeen minbizirik hilgarriena da.1 BC pronostikoa eta portaera klinikoa zehazten duten ezaugarri biologikoak denboran zehar sakon aztertu eta partzialki argitu dira. Izan ere, gaur egun, BC azpimota molekular ezberdinetan sailkatzeko hainbat markatzaile ordezko erabiltzen dira. Estrogeno-hartzailea (ER) eta/edo giza hazkuntza-faktorea (ERP2) eta/edo epidermal-hazkunde-hartzailea (HERP2) hartzailea dira. Ki-67 ugaltze-indizea eta tumore-maila (G).2 Aldagai hauen konbinazioak honako BC kategoria hauek identifikatu zituen: 1) Tumore luminalak, ER eta/edo PgR adierazpena erakutsiz, BCren % 75 ziren. Tumore hauek Luminal A-n banatu ziren, Ki-67 % 20 azpitik zegoenean eta HER2 negatiboa eta % HER2 2 amplificazioa baino handiagoa zenean, eta Ki-67 Bren presentzia berdina zenean. zioa, ugaltze-indizea gorabehera;2) ER eta PgR negatiboak baina HER2 anplifikazioa erakusten duten HER2+ tumoreak.Talde honek bularreko tumore guztien %10 hartzen du;3) Bularreko minbizi negatibo hirukoitza (TNBC), ER eta PgR adierazpenik eta HER2 anplifikaziorik erakusten ez duena, bularreko minbizien %15 inguru da.2-4
BC azpimota horien artean, tumore-maila eta ugaltze-indizea tumorearen agresibitatearekin eta pronostikoarekin zuzenean eta independentean lotzen diren zeharkako biomarkatzaileak adierazten dituzte.5,6.
Aipatutako ezaugarri biologikoez gain, BC garatzeko herentziazko alterazio genetikoen paperak gero eta garrantzi handiagoa hartu du azken urteotan.7 Bularreko 10 tumoreetatik 1 inguru gene zehatzetan germinaleen alterazioengatik heredatzen da.8 Bi ikerketa epidemiologiko handi 180.000 emakume baino gehiago inplikatuta (azkenaldian identifikatu dute ATM, BRCA, BRCA) K2, PALB2, RAD51C eta RAD51D) BC hereditarioaren erantzule nagusiak. Gene hauen artean, BRCA1 eta BRCA2 (aurrerantzean BRCA1/2 deitzen dena) bularreko tumoreen garapenarekin korrelaziorik sendoena erakutsi zuten. tic, kolorektala eta melanoma.13 urtetik 80 urtera bitartean, BCren intzidentzia metatua % 72koa da BRCA1 aldaera patogenoa (PV) duten emakumeengan eta % 69koa BRCA2 PV duten emakumeengan.14
Nabarmentzekoa, berriki argitaratutako argitalpen batek iradokitzen du BC arriskua PV motaren araberakoa dela. Izan ere, aldaera moztu patogenoekin alderatuta, missense aldaera nabarmenak, batez ere BRCA1 genean, BC arriskua murriztearekin lotzen dira, batez ere adineko emakumeetan.15
BRCA1 edo BRCA2 PV-ren presentzia ezaugarri biologiko eta klinikopatologiko desberdinekin lotzen zen.16,17 BRCA1-ekin lotutako BCak klinikoki oldarkorrak izan ohi dira, gaizki bereiziak eta oso ugariak izan ohi dira. Tumore hauek negatibo hirukoitzak izan ohi dira eta hasierako adin goiztiarra izaten dute. n B eta adineko helduengan gertatzen da normalean.16-18 Nabarmentzekoa, BRCA1 eta BRCA2-en mutazioek tratamendu espezifikoekiko sentikortasuna areagotzen dute, besteak beste, platino-gatzak eta poli(ADP-ribosa) polimerasa inhibitzaileak (PARPi) bezalako sendagai zuzenduak.19,20.
Azken urteotan, praktika klinikoan hurrengo belaunaldiko sekuentziazioa (NGS) ezartzeak BC paziente gehiagori minbiziaren suszeptibilitate sindromeen azterketa molekularra egin ahal izan dio, BRCA1/2.21 barne. Aldi berean, familia-historia, demografia eta ezaugarri klinikopatologikoei buruzko irizpide zehatzetan oinarritutako definizioak BRCA21/223 testuinguruan hobeto identifikatzeko gizabanakoak probatzeko merezi du. 1/2 baheketa populazio zehatzetan, eskualde geografikoen arteko desberdintasunak nabarmenduz.24–27 Siziliaren mendebaldean BC kohorteari buruzko txostenak badaude ere, datu gutxiago daude eskuragarri BRCA1/2 baheketari buruzko Sizilia ekialdeko populazioan.28,29.
Hemen BRCA1/2 germinaleko BRCA1/2 baheketaren emaitzak deskribatzen ditugu Siziliaren ekialdeko BC pazienteetan, BRCA1 edo BRCA2 mutazioen presentzia tumore horien ezaugarri klinikopatologiko nagusiekin erlazionatuz.
Atzera begirako azterketa bat egin zen Policlinico Ospitaleko "Onkologia eta Hematologia Esperimentaleko Zentroan".Rodolico - Kataniako San Marco-n. 2017ko urtarriletik 2021eko martxora, guztira, bularreko eta obario, melanoma, pankrea edo prostatako minbizia zuten 455 paziente bidali zituzten gure diagnostiko molekularreko laborategiko Helki TRS2 azterketa genetikoaren arabera. , eta parte-hartzaile guztiek idatzizko baimen informatua eman zuten azterketa molekularraren aurretik.
BCren ezaugarri histologikoak eta biologikoak (ER, PgR, HER2 egoera, Ki-67 eta gradua) nukleoko biopsian edo lagin kirurgikoetan ebaluatu ziren, tumorearen osagai oldarkorrak soilik kontuan hartuta. Ezaugarri hauen arabera, BCak honela sailkatu ziren: A luminala (ER+ eta/edo PgR+, HER2-2-, HER+K+R672/, HER+2, HER2/K+R2, HER2/K+R2). -, Ki-67≥20%), B-HER2+ luminala (ER eta/edo PgR+, HER2+), HER2+ (ER eta PgR-, HER2+) edo negatibo hirukoitza (ER eta PgR-, HER2-).
BRCA1 eta BRCA2 mutazio-egoera ebaluatu aurretik, diziplina anitzeko talde batek onkologo bat, genetista bat eta psikologo batek tumore-genetika-kontsulta bat egin zuen paziente bakoitzarentzat, BRCA1 eta/edo BRCA1-en presentzia zehazteko.edo BRCA2 genean PV izateko arrisku handia duten pertsonak.Pazienteen hautaketa Italiako Onkologia Medikoko Elkartearen (AIOM) jarraibideen eta tokiko Siziliako gomendioen arabera egin zen.30,31 Irizpide horien artean daude: (i) suszeptibilitate-geneen aldaera patogeno ezagunen familia-historia (adibidez, BRCA1, BRCA2, TP53, PTEN);(ii) BC duten gizonezkoak;(iii) BC eta OC dutenak;(iv) BC <36 urte, TNBC <60 urte edo aldebiko BC <50 urte dituzten emakumeak;(v) BC <50 urteko mediku-historia pertsonala eta gutxienez lehen mailako senide bat: (a) BC <50 urte;(b) edozein adinetako OC ez-mukinosoa eta mugarik gabekoa;(c) aldebiko BC;(d) gizonezkoa BC;(e) pankreako minbizia;(f) prostatako minbizia;(vi) Bi edo gehiago BC-ko aurrekari pertsonalak > 50 urte eta BC, OC edo pankreako minbiziaren aurrekari familiarrak elkarren artean lehen mailako ahaide diren senideentzat (lehen mailako ahaide diren senideak barne);(vii) OCren historia pertsonala eta gutxienez lehen mailako senide bat: (a) BC <50 urte;b) NOC;(c) aldebiko BC;(d) gizonezkoa BC;(vii) gradu altuko OC serosa duten emea.
20 ml-ko odol lagin periferiko bat lortu zen eta EDTA hodiak (BD Biozientziak). HEGENOMIC DNA-k 3,7 ml-ko odol-kit isolatu zuen. A) Egin kuantifikazioa.Helburua aberastea eta liburutegia prestatzea Oncomine™ BRCA Research Assay Chef-ek egiten du, Ion AmpliSeq™ Chef Reagents DL8 Kit-an kargatzeko prest, fabrikatzailearen argibideen arabera liburutegi automatizatua prestatzeko. Kitak BRCA1 (NM_0073002) eta BRCA1 (NM_0073002)gen (NM_0073002)3002. Batez ere, diluitutako DNA lagin bakoitzeko 15 µL (10 ng) barra-kodeko plaketan gehitu ziren liburutegia prestatzeko eta erreaktibo eta kontsumigarri guztiak Ion Chef™ tresnan kargatu ziren. Liburutegien prestaketa automatizatua eta barra-kodeen liburutegiaren bilketa egin ziren gero Ion Chef™ tresnan. Prestatutako liburutegien kopurua ebaluatu zen. Fabrikatzailearen argibideen arabera. Azkenik, liburutegiak proportzio ekimolarretan konbinatzen dira Ion Chef™ liburutegiko lagin-hodietan (barra-kodedun hodietan) eta Ion Chef™ tresnan kargatzen dira. Sekuentziazioa Ion Torrent S5 (Thermo Fisher Scientific) tresna bat erabiliz egin da (Thermo Fisher Scientific) Ion 510 Fisher Scientific (Thermo Fisher Scientific) analisi bat erabiliz (Thermo Fisher Scientific) (Thermo Fisher Scientific) analisia egin zuen (ThermoDqconSemplific S. srl) eta Ion Reporter Software.
Aldaera-nomenklatura guztiak Human Genome Variation Consortium-ren egungo jarraibideak jarraitu zituen, sarean (HGVS, http://www.hgvs.org/mutnomen). CHANGE , ClinVar, IARC_LOVD eta UMD. Sailkapenak bost arrisku-kategoria bereizten ditu: onbera (I kategoria), ziurrenik onbera (II kategoria), esangura eza den aldaera (VUS, III kategoria), litekeena da patogenoa (IV kategoria) eta patogenoa (V kategoria).
VUS bakoitzari garrantzi kliniko potentziala esleitzeko, proteina konputazionalaren iragarpen algoritmo hauek erabili dira: MUTATION TASTER, 33 PROVEAN-SIFT (http://provean.jcvi.org/index.php), POLYPHEN-2 (http:///genetics.bwh.harvard.edu/pph2/) eta Align-GVGD (http://provean.jcvi.org/index.php). 1. eta 2. klase gisa sailkatutako arioak basatitzat hartzen ziren.
Sanger-en sekuentziazioak aldaera patogeno bakoitzaren presentzia baieztatu zuen. Laburbilduz, detektatutako aldaera bakoitzerako abiarazle espezifiko pare bat diseinatu zen BRCA1 eta BRCA2 geneen erreferentzia-sekuentziak erabiliz (NG_005905.2, NM_007294.3 eta NG_012772.3, NM_0000059, hurrenez hurren). .
BRCA1/2 genea negatiboa izan duten pazienteei multiplex ligation-menpeko zunda anplifikazioaren (MLPA) probatu zitzaien fabrikatzailearen argibideei jarraiki, berrantolaketa genomiko handien presentzia (LGR) ebaluatzeko. Laburbilduz, DNA laginak desnaturalizatu egiten dira eta 60 BRCA1 eta BRCA2 geneen berariazko zunda erabiltzen dira, bakoitzak DNAren sekuentzia bat gutxi gorabehera nukleoen luzera zehatz batean detektatuta. PCR anplikoien multzo berezi baten zioa, elektroforesi kapilarren bidez eta Cofalyser.Net softwarearen bidez aztertu ziren lote espezifikoen Cofalyser taula egokiekin batera (www.mrcholland.com).
Hautatutako aldagai klinikopatologikoak (gradu histologikoa eta Ki-67% ugaltze-indizea) BRCA1/2 PVren presentziarekin erlazionatu ziren, Prism softwarea v. 8.4 erabiliz kalkulatuta, Fisher-en test zehatza erabiliz p-balioa <0,05 esanguratsua dela suposatuz.
2017ko urtarrila eta 2021eko martxoa bitartean, 455 pazienteri BRCA1/2 mutazio germinalak aztertu zituzten. Mutazio-probak Policlinico Ospitaleko Onkologia eta Hematologia Esperimentalerako Zentroan egin ziren. Siziliako gidalerroaren arabera (http://www.gurs.regione.sicilia.it/Indicep1.h020m, Rodicep1.h020m, 1. dolico of Catania – San Marco” oro har, 389 paziente Bularreko minbizia, 37 obario minbizia, 16 pankreako minbizia, 8 prostatako minbizia eta 5 melanoma zeuden.Gaixoen banaketa minbizi motaren eta analisiaren emaitzen arabera 1. irudian ageri da.
1. irudiak ikerketaren ikuspegi orokorra erakusten duen fluxu-diagrama erakusten du. Bularreko, melanoma, pankreako, prostatako edo obulutegiko tumoreak zituzten pazienteei BRCA1 eta BRCA2 geneen mutazioen proba egin zitzaien.
Laburdurak: PVs, aldaera patogenoa;VUS, esangura ziurgabeko aldaera;WT, basati motako BRCA1/2 sekuentzia.
Gaixoek 49 urteko batez besteko adina zuten (23-89 tartea) eta emakumeak ziren nagusiki (n=376, edo %97).
Subjektu horietatik 64 (%17) BRCA1/2 mutazioak zituzten eta guztiak emakumezkoak ziren. Hogeita hamabost (%9) PV zuten eta 29k (%7,5) VUS zuten. 35 aldaera patogenoetatik hamazazpi (%48,6) BRCA1-en gertatu ziren eta 18 (%51,4) BRCA2-n, %5 BRCA2-n (%817) BRCA-n (%4817). 2 (1 eta 2. irudiak).LGR ez zegoen MLPA analisian.
2. Irudia. BRCA1 eta BRCA2 mutazioen analisia bularreko minbizia duten 389 pazientetan.(A) Aldaera patogenoen (PV) (gorria), esangura ziurgabeko aldaerak (VUS) (laranja) eta WT (urdina) bularreko minbiziaren pazienteen banaketa;(B) Bularreko minbizia duten 389 gaixok Hogeita hamabost (%9) BRCA1/2 aldaera patogenoak (PV) zituzten. Horien artean, 17 (%48,6) BRCA1 PV eramaileak ziren (gorri iluna) eta 18 (%51,4) BRCA2 eramaileak (gorri argia);(C) 389 subjektuetatik 29k (%7,5) VUS, 5 (%17,2) BRCA1 geneak (laranja iluna) eta 24 (%82,8) BRCA2 geneak (laranja argia).
Laburdurak: PVs, aldaera patogenoa;VUS, esangura ziurgabeko aldaera;WT, basati motako BRCA1/2 sekuentzia.
Ondoren, BC azpimoten prebalentzia ikertu dugu BRCA1/2 PV duten pazienteetan. Banaketan 2 (%5,7) A luminal, 15 (%42,9) B luminal, 3 (%8,6) B-HER2+ luminal, 2 (%5,7) HER2+ eta 13 (%37,1) TNBC gaixoen artean (% 92,1 BRC15-) TNBC gaixo zeuden. %1,8k HER2+ gaixotasuna zuten, eta 10ek (%58,8k TNBC).BRCA1 mutaziorik gabeko tumoreak A luminala edo B-HER2+ luminala ziren (3. irudia).BRCA2-en azpitalde positiboan, 10 (%55,6) tumore B luminala ziren, 3 (%16,7% 16,7) luminala B-HER16+ eta B-HER16+ luminala (% TN3. 3. Irudia).Talde honetan ez zegoen HER2+ tumorerik.Horrela, BRCA1 mutazioak nagusi dira TNBC pazienteetan, BRCA2 alterazioak nagusitzen dira B lumen banakoetan.
3. irudia Bularreko minbiziaren azpimoten prebalentzia BRCA1 eta BRCA2-n aldaera patogenoak dituzten pazienteetan. BRCA1- (gorri iluna) eta BRCA2- (gorri argia) PV-en banaketa erakusten duten histogramek bularreko minbiziaren gaixoen azpimoten molekularen artean. Lauki bakoitzaren barruan adierazitako zenbakiek BRCA1 eta BRCA2 PV-a duten pazienteen ehunekoa adierazten dute.
Laburdurak: PVs, aldaera patogenoa;HER2+, gizakiaren hazkuntza-faktore epidermikoaren 2 errezeptore positiboa;TNBC, bularreko minbizi hirukoitza negatibo.
Ondoren, BRCA1 eta BRCA2 PVen mota eta gene lokalizazioa ebaluatu genuen.BRCA1 PVn, 7 nukleotido bakarreko aldaera (SNV), 6 ezabaketa, 3 bikoizketa eta txertatze 1 ikusi genituen.Mutazio bakarra (c.5522delG) aurkikuntza berri bat adierazten du.BRCA1 gaietan ohikoena detektatu zen bietan. TAAT. Aldaketa honek bost nukleotido (CTAAT) ezabatzea dakar BRCA1 15. exoian, eta ondorioz leuzina aminoazidoa tirosinaren ordez 1679 kodoian ordezkatuko da, eta iragarpeneko stop kodoi alternatibo batekin itzulpen-markoaren desplazamenduaren ondorioz, proteina mozketa goiztiarra ekarri zuen. us eskualdea (c.4357+1G>T) (1. taula).
BRCA2 PVri dagokionez, 6 ezabaketa, 6 SNV eta 2 bikoizketa ikusi ditugu. Aurkitutako aldaketetatik bat ere ez da berritzailea.Hiru mutazio errepikatu dira gure populazioan, c.428dup eta c.8487+1G>A 3 subjektutan ikusitakoa, eta ondoren c.5851_5854delAGTT bi kasuetan berreskuratutako aldaketak bi kasutan C. BRCA2-ren 5ean, proteina moztu eta ez-funtzionala kodetuko duela aurreikusten da.c.8487+1G>Mutazio bat BRCA2 introiaren 19. eskualde intronikoan gertatzen da (± 1,2) eta splicing adostasun sekuentziari eragiten dio, splicing alteratua eraginez, proteina anormala edo absentea dela medio. BRCA2 genearen 10. exoi kodetzailean 5851tik 5854ra bitarteko nukleotidoen ezabaketak eta translazio-marko-aldaketa bat eragiten du, aurreikusitako stop kodoi alternatibo batekin (S1951WfsTer or.). Nabarmentzekoa da, lehen jakinarazi bezala, bi alterazioak c.631G>A eta c.631G>A eta c.631G>A mutazioan detektatu ziren. BRCA2 7. exoian adenosina (A) ordezkatzea nukleotidoa duen guanina (G) batekin, 211 kodoian valina isoleuzinara aldatzea eraginez, isoleuzina Aminoazidoa propietate oso antzekoak dituen aminoazidoa da. ding BRCA2.c.7008-2A>T aldaketak luzera ezberdineko transkripzio anitz sor ditzake.Gainera, BRCA2 PV taldean, 18 aldaketatik 4 (%22,2) intronikoak izan ziren.
Ondoren, BRCA1/2 mutazio kaltegarriak domeinu funtzionaletan eta proteinak lotzen dituzten eskualdeetan mapatu ditugu (4. irudia).BRCA1 genean, PV-en % 50 bularreko minbiziaren kluster eskualdean (BCCR) kokatzen ziren, mutazioen % 22, berriz, obario-minbiziaren kluster eskualdean (OCCR) (4A. irud. 4A). Mutazioen % 8 OCCRn kokatu ziren (4B. Irudia).Ondoren, BRCA1 eta BRCA2 proteina-domeinuen barruan PV-ren kokapena ebaluatu genuen.BRCA1 proteinari dagokionez, hiru PV aurkitu genituen begizta eta bobina bobina domeinuetan, eta bi mutazio BRCT domeinuan (4A. irudia). aldaketa exonikoak oligo/oligosakarido-lotura (OB) eta dorre (T) domeinuetan detektatu ziren (4B irudia).
4. Irudia BRCA1 eta BRCA2 proteinen irudikapen eskematikoa eta aldaera patogenoen lokalizazioa. Irudi honek BRCA1 (A) eta BRCA2 (B) aldaera patogenoen banaketa erakusten du bularreko minbizia duten pazienteetan.Mutazio exonikoak urdinez ageri dira, eta aldaera intronikoak, berriz, laranjaz. Barra altuerak kasu kopurua adierazten du. begizta domeinua (RING) eta lokalizazio nuklearraren sekuentzia (NLS), bobina bobina domeinua, SQ/TQ kluster domeinua (SCD) eta BRCA1 C-terminal domeinua (BRCT). ), eta NLS bat C aldean.Bularreko Minbiziaren Cluster Eskualdea (BCCR) eta Obarioko Minbiziaren Cluster Eskualdea (OCCR) izeneko eremuak ageri dira behealdean.*Stop kodoiak zehazten dituzten mutazioak adierazten ditu.
Ondoren, BRCA1/2 PVren presentziarekin korrelazioa izan dezaketen BC ezaugarri klinikopatologikoak ikertu ditugu. Erregistro kliniko osoak eskuragarri zeuden 181 BRCA1/2 paziente negatiboentzat (eramaile ez direnentzat) eta eramaile guztientzat (n = 35). Korrelazioa zegoen tumorearen ugaltze-tasa eta graduaren artean.
Ki-67-ren banaketa gure kohortearen medianaren arabera kalkulatu dugu (% 25, ​​tartea < 10-90%). Ki-67 <% 25 duten subjektuak "Ki-67 baxua" gisa definitu ziren, eta ≥% 25 balioak dituzten pertsonak, berriz, "Ki-67 altua". ers (5A. irud.).
5. Irudia Ki-67-ren korrelazioa gradu banaketarekin BRCA1 eta BRCA2 PVs dituzten eta BRCA2 emakumezkoetan bularreko minbiziarekin. (A) 181 BC paziente ez-eramaileetan Ki-67 balioen mediana erakusten duten BRCA1 (18) edo BRCA2 (17) PV pazienteen aurrean. taldeak (G2 eta G3) BRCA1 eta BRCA2 mutazio-egoeraren arabera (WT subjektuak, BRCA1 eta BRCA2 PVren eramaileak).
Era berean, tumorearen kalifikazioa BRCA1/2 PVren presentziarekin erlazionatuta dagoen aztertu dugu. Gure populazioan G1 BC ez zegoenez, pazienteak bi taldetan banatu ditugu (G2 edo G3). Ki-67 emaitzekin bat etorriz, analisiak tumorearen graduaren eta BRCA1 mutazioaren arteko korrelazio estatistiko esanguratsu bat agerian utzi du, BRCA-eramaileen (G3-50 irudi) ez diren BRCA eramaileen proportzio handiagoarekin. ure 5B).
DNAren sekuentziazio-teknologiaren aurrerapenek BRCA1/2 proba genetikoetan aurrekaririk gabeko aurrerapenak ahalbidetu dituzte, minbiziaren historia familiarra duten pazienteentzat ondorio erabakigarriak izan dituztenak. Orain arte, 20.000 BRCA1/2 aldaera inguru identifikatu eta sailkatu dira American Society of Medical Genetics 35 eta ENIGMA sistemaren arabera. BRCA1/2 PV-en tasa % 8tik % 37ra bitartekoa zen, herrialde barruko aldakortasun handia erakutsiz.38,39 Ia 5 milioi biztanlerekin, Sizilia Italiako bosgarren eskualderik handiena da biztanle kopuruari dagokionez.Sizilia mendebaldean BRCA1/2-ren banaketari buruzko datuak badaude ere, ez dago uharteko ekialdeko froga zabalik.
Gure ikerketa Sizilia ekialdeko BC pazienteetan BRCA1/2 PVren intzidentziari buruzko lehen txostenetako bat da.28 Gure azterketa BCra bideratu dugu, hori baita gure kohorteko gaixotasun ohikoena.
BC 389 paziente probatzean, % 9k BRCA1/2 PV-ak eraman zituen, BRCA1 eta BRCA2 artean berdin banatuta. Emaitza hauek bat datoz Italiako populazioan aurretik jakinarazitakoekin.28 Interesgarria da gure kohortearen % 3 (13/389) gizonezkoak ziren. , gizon horietako inork ez zuen BRCA1/2 PVrik garatu, beraz, analisi molekular gehiago egiteko hautagaiak ziren, besteak beste, PALB2, RAD51C eta D bezalako mutazio ez hain ohikoen presentzia baztertzeko. Garrantzirik gabeko aldaerak berreskuratu ziren BRCA2 VUS agerikoa zen subjektuetan. Emaitza hau aurreko ebidentziarekin bat dator ere.
BRCA1/2 emakume mutanteetan BC azpimoten molekularen banaketa aztertu genuenean, TNBC eta BRCA1 PV-ren (%58,8) eta B BC luminalaren eta BRCA2 PV-ren (%55,6) arteko asoziazio ezagunak baieztatu genituen.16,43 A eta HER2+ tumore luminalak BRCA1 eta BRCA2 PV PV garraiatzaileen datuekin bat datoz1643.
Ondoren, BRCA1/2 PV mota eta kokapenari erreparatuko diogu.Gure kohortean, BRCA1 PV ohikoena c.5035_5039delCTAAT izan zen.Incorvaia et al.ez zuten aldaera hau deskribatu beren Siziliako kohortean, beste autore batzuek BRCA1 PV germinale gisa jakinarazi dute.34 Gure kohortean BRCA1 PV hainbat aurkitu ziren - adibidez c.181T>G, c.514del, c.3253dupA eta c.5266dupC - Siziliako bi mutazio hauek aurkitu diren (c.181T>G, c.514del, c.5266dupC). 266dupC) Ekialdeko eta Erdialdeko Europako (Polonia, Txekiar), Esloveniako, Austriako, Hungariako, Bielorrusiako eta Alemaniako (Polonia, Txekiar), Austriako, Austriako, Hungariako, Bielorrusiako eta Alemaniako (266dupC) judu askenazietan aurkitu ohi dira, 44,45 eta, Estatu Batuetan eta Argentinan, duela gutxi "germen-aldaera errepikakorra" gisa definitu zen BC eta OC duten italiar pazienteetan. , nahiz eta Incorvaia et al.c.3253dupA aldaera aurkitu zuten Cataniako zenbait familiatan.28 BRCA2 PV adierazgarrienak c.428dup, c.5851_5854delAGTT eta c.8487+1G>A aldaera intronikoa dira, zehaztasun handiagoz jakinarazi direnak 28 Palermoko paziente batean c.428dup etxearen mendebaldean, c.428dup, c.428dup, c.428dup, c.58558 dup-en, c. Sizilian, batez ere Trapani eta Palermoko eskualdeetan, c.5851_5854delAGTT PV Sizilia ipar-mendebaldeko etxeetan ikusi zen bitartean.8487+1G>A aldaera ohikoagoa zen Messina, Palermo eta Caltanissettako subjektuetan.28 Rebbeck et al.aldez aurretik Kolonbiako c.5851_5854delAGTT alterazioa deskribatu da.37 Beste BRCA2 PV bat, c.631+1G>A, aurkitu da Siziliako BC eta OC pazienteetan (Agrigento, Siracusa eta Ragusa).28 Nabarmentzekoa, bi BRCA2 aldaeraren (BRCA2) aldaera (BRCA20>A) eta c.82 c.82 bere gain hartzen ditugun BRCA2 aldaera elkarbizitza ikusi dugu. d cis moduan bereiztea, lehenago horrela jakinarazi zenez.34,46 BRCA2 uble mutazio hauek maiz ikusten dira Italiako eskualdean eta aurkitu da geldialdi kodoi goiztiarrak sartzen dituztela, RNA mezulariaren splicing-a eraginez eta BRCA2 proteina huts egiten dutela47,48.
Proteina-domeinu eta geneetako OCCR eta BCCR eskualde ustezko BRCA1 eta BRCA2 PV-ak ere mapatu genituen. Eskualde hauek Rebbeck et al-ek deskribatu zituzten.obulutegiko eta bularreko minbizia garatzeko arrisku-eremu gisa, hurrenez hurren.49 Hala ere, germinalen aldaeren kokapenaren eta bularreko edo obulutegiko minbiziaren arriskuaren arteko asoziazioaren inguruko ebidentzia polemikoa izaten jarraitzen du.28,50-52 Gure populazioan, BRCA1 PVak BCCR eskualdean kokatzen ziren nagusiki, BRCA2 PVak, berriz, OCCR OCCR eskualdean eta OCCR OCCR eskualdean aurkitu ezinezkoak ziren asoziazioen artean. eta BC ezaugarriak.BRCA1/2 mutazioak dituzten paziente kopuru mugatuagatik izan daiteke hori. Proteina-domeinuaren ikuspegitik, BRCA1 PV-ak proteina osoan zehar banatzen dira, eta BRCA2 alterazioak BRC errepikapen-domeinuan aurkitzen dira lehentasunez.
Azkenik, BC ezaugarri klinikopatologikoak BRCA1/2 PV-rekin erlazionatu ditugu. Sartutako paziente kopuru mugatua dela eta, Ki-67 eta tumore-mailaren arteko korrelazio esanguratsua besterik ez dugu aurkitu. Ki-67-ren balorazioa eta interpretazioa eztabaidagarria izaten jarraitzen badu ere, ziur da proliferazio-tasa altuak gaixotasuna errepikatzeko arriskua areagotzearekin eta gaixotasunaren biziraupena murriztearekin erlazionatuta daudela. % 20, ordea, atalase hori ez da gure BRCA1/2 mutazioko pazienteen populazioari aplikatzen, Ki-67 balioaren mediana 25ekoa baitu. Ki-67 tasa altuen joera hau gure B luminal eta TNBC kohorteen prebalentziagatik azal daiteke, eta horietatik A luminal tumore gutxi zeuden. 53,54 Gure analisiaren emaitzetatik, korrelazio esanguratsu bat ez da harritzekoa.Ki-67 eta gradu altuen eta BRCA1 PVren presentziaren artean gertatzen da.Izan ere, BRCA1-ekin erlazionatutako tumoreak TNBCren tipikoak dira eta ezaugarri oldarkorragoak erakusten dituzte.16,17
Ondorioz, ikerketa honek BRCA1/2-ren mutazio-egoerari buruzko txostena eskaintzen du Sizilia ekialdeko BC kohorte batean. Oro har, gure aurkikuntzak bat datoz aurretik dauden ebidentziarekin, bai mutazio-prebalentziari eta bai BC-ko ezaugarri klinikopatologikoei dagokienez. Ikerketa gehiago BRCA1/2-mutantaren BC pazienteen populazio handiagoetan, hala nola, analisi multigenomaren presentzia eta PV multigenoaren presentzia desberdinetan hedatzen dira. BRCA1/2 baino maiz.Hori esker, mutazio genetikoen ondorioz minbizia izateko arrisku handiagoa duten subjektu gehiago identifikatu eta behar bezala kudeatu ahal izango dira.
Pazienteek beren tumore-laginak modu anonimoan askatzeko baimen informatua sinatu zutela baieztatu genuen ikerketa helburuetarako. Paziente guztiek idatzizko baimen informatua sinatu zuten Helsinkiko Adierazpenaren arabera. AOU Policlinico "G.Rodolico - S.Marco"-ren politikaren arabera, azterketa hau berrikuspen etikotik salbuetsita zegoen, BRCA1/2 analisia pazienteek pazienteek beren datu klinikoen erabilerarako baimena eman baitzuten ikerketaren helburu klinikoetarako eta baimena eman baitzuten. .
Paolo Vigneri irakasleari eskerrak ematen dizkiogu bularreko minbiziaren gaixoen zainketan emandako laguntzagatik Etika Batzordeak eskatu bezala.
Federica Martoranak Istituto Gentili, Eli Lilly, Novartis, Pfizer-en ohorezko txostenak ematen ditu. Gainerako egileek ez dute lan honetan interes-gatazkarik adierazten.
1. Sung H, Ferlay J, Siegel RL, et al.Global Cancer Statistics 2020: GLOBOCANek munduko 185 herrialdetan 36 minbiziren intzidentzia eta hilkortasuna estimatzen ditu.CA Cancer J Clin.2021;71(3):209-249.doi: 10.3326/caac.212