Eskerrik asko Nature.com bisitatzeagatik.Erabiltzen ari zaren arakatzailearen bertsioak CSS laguntza mugatua du.Esperientzia onena lortzeko, eguneratutako arakatzailea erabiltzea gomendatzen dugu (edo Internet Explorer-en bateragarritasun modua desgaitzea).Bitartean, laguntza etengabea bermatzeko, gunea estilorik eta JavaScript gabe errendatuko dugu.
Kontrolik gabeko odoljarioa heriotza-kausa nagusietako bat da.Hemostasia azkarra lortzeak subjektuaren biziraupena bermatzen du borrokan, trafiko istripuetan eta heriotza murrizteko operazioetan lehen laguntza gisa.Zuntz indartutako aldamio konposatu nanoporosoak (NFRCS) filma osatzeko konposizio hemostatiko sinple batetik (HFFC) eratorritako etengabeko fase batek hemostasia eragin eta hobe dezake.NFRCSren garapena libelularen hegalaren diseinuan oinarritzen da.Libelula-hegoen egitura zeharkako eta luzetarako hegoek osatzen dute, eta hegal-mintzak elkarri lotuta daude mikroegituraren osotasuna mantentzeko.HFFC uniformeki zuntzaren gainazala nanometroko lodiera duen film batekin estaltzen du eta ausaz banatutako kotoiaren lodiera (Ct) (fase sakabanatua) konektatzen du egitura nanoporoso bat osatzeko.Fase jarraituak eta sakabanatuak konbinatzeak produktuaren kostua hamar aldiz murrizten du, merkataritzako produktuekin alderatuta.Aldatutako NFRCS (tampoiak edo eskumuturrekoak) hainbat aplikazio biomedikotan erabil daiteke.In vivo ikerketek ondorioztatu dute garatutako Cp NFRCSak aplikazio-guneko koagulazio-prozesua abiarazten eta hobetzen duela.NFRCS mikroingurunea modulatu eta zelula mailan jardu dezake bere egitura nanoporotsua dela eta, ebakiduraren zauriaren ereduan zauriak sendatzeko hobekuntzan.
Borrokan, ebakuntza barruko eta larrialdi-egoeretan kontrolik gabeko odoljarioak mehatxu larria izan dezake zaurituen bizitzarako1.Baldintza hauek, gainera, erresistentzia baskular periferikoaren gehikuntza orokorra eragiten dute, shock hemorragikoa eraginez.Ebakuntzan zehar eta kirurgia ondoren odoljarioa kontrolatzeko neurri egokiak bizitza arriskuan egon daitezkeen kontsideratzen dira2,3.Ontzi handietan kalteak odol-galera izugarria dakar, borrokan % 50eko hilkortasun-tasa eta ebakuntzan % 31ekoa dela1.Odol-galera handiak gorputzaren bolumena murrizten du, eta horrek bihotz-irteera murrizten du.Erresistentzia baskular periferiko osoaren gehikuntzak eta mikrozirkulazioaren narriadura progresiboak hipoxia eragiten dute bizi-euskarriko organoetan.Shock hemorragikoa gerta daiteke egoerak esku-hartze eraginkorrik gabe jarraitzen badu1,4,5.Beste konplikazio batzuk hipotermiaren eta azidosi metabolikoaren progresioa dira, baita koagulazio-prozesua oztopatzen duen koagulazio-nahasmendua ere.Shock hemorragiko larria heriotza-arrisku handiagoarekin lotzen da6,7,8.III graduko shock (progresiboan), odol-transfusioa ezinbestekoa da pazientearen biziraupenerako ebakuntza barruko eta ebakuntza osteko erikortasun eta hilkortasunean.Goiko bizitza arriskuan dauden egoera guztiak gainditzeko, zuntzez indartutako aldamio konposatu nanoporotsu bat (NFRCS) garatu dugu, polimeroen kontzentrazio minimoa (% 0,5) erabiltzen duena, polimero hemostatikoen konbinazio bat erabiliz ur disolbagarriak diren.
Zuntz errefortzuaren erabilerarekin, produktu errentagarriak garatu daitezke.Ausaz antolatutako zuntzek libelularen hegoaren egituraren antza dute, hegoetako marra horizontal eta bertikalez orekatuta.Hegoaren zeharkako eta luzetarako zainak hegal-mintzarekin komunikatzen dira (1. irudia).NFRCS Ct indartuaz osatuta dago, erresistentzia fisiko eta mekaniko hobea duen aldamio-sistema gisa (1. Irudia).Erosotasuna eta artisautza dela eta, zirujauek nahiago dute kotoizko hariaren neurgailuak (Ct) erabiltzea ebakuntza eta apainketan zehar. Horregatik, bere onura anitz kontuan hartuta, % 90eko zelulosa kristalinoa barne (jarduera hemostikoaren hobekuntzan ematen du), Ct NFRCS-ren hezur-sistema gisa erabili zen9,10. Horregatik, bere onura anitz kontuan hartuta, % 90eko zelulosa kristalinoa barne (jarduera hemostikoaren hobekuntzan ematen du), Ct NFRCS-ren hezur-sistema gisa erabili zen9,10. Следовательно, учитывая его многочисленные преимущества, в том числе > % 90 кристалличестесклой в повышении гемостатической активности), Ct использовали в качестве скелетной системы NFRCS9,10. Hori dela eta, bere onura ugari kontuan hartuta, %90eko zelulosa kristalinoa barne (jarduera hemostatikoa areagotzean parte hartzen duena), Ct NFRCS hezur-sistema gisa erabili zen9,10.因此，考虑到它的多重益处，包括> % 90 ,10 的骨架系统。因此，考虑到它的多重益处，包括> %90Hori dela eta, bere onura ugari kontuan hartuta, zelulosa kristalinoaren % 90 baino gehiago barne (jarduera hemostatikoa hobetzen laguntzen du), Ct NFRCS-ren aldamio gisa erabili zen9,10.Ct azaletik estali zen (film nano-lodiaren eraketa ikusi zen) eta filma osatzeko konposizio hemostatiko batekin (HFFC) elkarlotu zen.HFFC matrigel baten antzera jokatzen du, ausaz jarritako Ct elkarrekin eusten.Garatutako diseinuak tentsioa transmititzen du fase sakabanatuaren barruan (indartzeko zuntzak).Zaila da erresistentzia mekaniko ona duten egitura nanoporotsuak lortzea polimero-kontzentrazio minimoak erabiliz.Gainera, ez da erraza molde desberdinak pertsonalizatzea aplikazio biomediko desberdinetarako.
Irudiak NFRCS diseinuaren diagrama bat erakusten du, dragonfly hegalen egituran (A) oinarrituta.Irudi honek libelula baten hegal-egituraren analogia konparatiboa erakusten du (hegoaren gurutzaketa eta luzetarako zainak elkarri lotuta daude) eta Cp NFRCS (B) sekzioko argazki-mikrografia bat erakusten du.NFRCSren irudikapen eskematikoa.
NFRCak HFFC erabiliz garatu ziren etengabeko fase gisa, goiko mugei aurre egiteko.HFFC hainbat polimero hemostatiko pelikulak osatzen dute, besteak beste, kitosanoa (polimero hemostatiko nagusi gisa) metilzelulosa (MC), hidroxipropil metilzelulosa (HPMC 50 cp) eta alkohol polibiniloa (PVA)) (125 kDa) tronboaren eraketa sustatzen duen euskarri polimero gisa.formakuntza.Polivinilpirrolidina K30 (PVP K30) gehitzeak NFRCSren hezetasuna xurgatzeko ahalmena hobetu zuen.Polietilenglikola 400 (PEG 400) gehitu zen polimeroen arteko lotura hobetzeko polimeroen arteko lotura hobetzeko.Hiru HFFC konposizio hemostatiko ezberdin (Cm HFFC, Ch HFFC eta Cp HFFC), hots, kitosanoa MCrekin (Cm), kitosanoa HPMCrekin (Ch) eta kitosanoa PVArekin (Cp), Ct-i aplikatu zitzaizkion.Hainbat in vitro eta in vivo karakterizazio ikerketek NFRCSren hemostatika eta zauriak sendatzeko jarduera baieztatu dute.NFRCS-k eskaintzen dituen material konposatuak aldamio mota desberdinak pertsonalizatzeko erabil daitezke behar zehatzei erantzuteko.
Horrez gain, NFRCS benda edo erroilu gisa alda daiteke beheko muturren eta gorputzeko beste atalen lesioen eremu osoa estaltzeko.Bereziki borroka-adarraren lesioetarako, diseinatutako NFRCS diseinua beso erdi edo hanka oso batera alda daiteke (S11 irudi osagarria).NFRCS eskumuturreko bat egin daiteke ehun-kolarekin, eskumuturreko lesio suizida larrien odoljarioa gelditzeko erabil daitekeena.Gure helburu nagusia NFRCS bat garatzea da, ahalik eta polimero gutxien duena, populazio handi bati (pobreziaren mugaren azpitik) entregatu ahal izateko eta botikina batean jarri ahal izateko.Diseinu sinplea, eraginkorra eta ekonomikoa, NFRCS tokiko komunitateei mesede egiten die eta eragin globala izan dezake.
Kitosanoa (pisu molekularra 80 kDa) eta amarantoa Merck-en (India) erosi ziren.Hidroxipropil metilzelulosa 50 Cp, polietilenglikol 400 eta metilzelulosa Loba Chemie Pvt-i erosi ziren.LLC, Mumbai.Alkohol polibiniloa (pisu molekularra 125 kDa) (% 87-90 hidrolizatua) National Chemicals-en erosi zen, Gujarat-en.Polivinilpirrolidina K30 Molychem-en, Mumbai-n erosi zen, Ramaraju Surgery Cotton Mills Ltd.-n, Tamil Nadu-n erosi ziren, Milli Q ura (Direct-Q3 ura arazteko sistema, Merck, India) garraiolari gisa.
NFRCS liofilizazio metodo baten bidez garatu zen11,12.HFFC konposizio guztiak (1. taula) irabiagailu mekaniko baten bidez prestatu ziren.Prestatu kitosanoaren % 0,5eko disoluzioa uretan % 1eko azido azetikoa erabiliz 800 rpm-ra etengabe irabiatuz irabiagailu mekaniko batean.1. taulan adierazitako kargatutako polimeroaren pisu zehatza kitosano-disoluzioari gehitu eta irabiatu egin zen polimero-disoluzio argia lortu arte.Lortutako nahasketari PVP K30 eta PEG 400 gehitu ziren 1. Taulan adierazitako kantitateetan, eta irabiatzen jarraitu zen polimero-soluzio likatsu argia lortu arte.Ondorioz, polimero-soluzioko bainua 60 minutuz sonicatu zen polimero-nahastetik harrapatutako aire-burbuilak kentzeko.S1 (b) irudi osagarrian erakusten den moduan, Ct 5 ml HFFCz osaturiko 6 putzuko plaka baten (moldea) putzu bakoitzean banatu zen uniformeki.
Sei putzuko plaka 60 minutuz sonikatu zen Ct sarean HFFC hezetzea eta banatzeko uniformea ​​lortzeko.Ondoren, izoztu sei putzuko plaka -20 °C-tan 8-12 orduz.Izoztu plakak 48 orduz liofilizatu ziren NFRCSren hainbat formulazio lortzeko.Prozedura bera erabiltzen da forma eta egitura desberdinak ekoizteko, hala nola tanpoiak edo tanpoi zilindrikoak, edo aplikazio ezberdinetarako beste edozein forma.
Zehaztasunez pisatutako kitosanoa (80 kDa) (%3) %1eko azido azetikoan disolbatzen da irabiagailu magnetiko baten bidez.Lortutako kitosanoaren disoluzioari %1 PEG 400 gehitu zitzaion eta 30 minutuz irabiatu.Sortutako disoluzioa ontzi karratu edo angeluzuzen batean bota eta izoztu -80 °C-tan 12 orduz.Izoztutako laginak 48 orduz liofilizatu ziren Cs13 porotsua lortzeko.
Garatutako NFRCS esperimentuak egin ziren Fourier transformatutako infragorrien espektroskopia (FTIR) (Shimadzu 8400 s FTIR, Tokio, Japonia) erabiliz, kitosanoaren bateragarritasun kimikoa beste polimero batzuekin baieztatzeko14,15.Probatutako lagin guztien FTIR espektroak (400 eta 4000 cm-1 bitarteko espektro-barrutiaren zabalera) 32 miaketa eginez lortu dira.
Formulazio guztien odol-xurgapen-tasa (BAR) Chen et al-ek deskribatutako metodoaren bidez ebaluatu zen.16 aldaketa txikiekin.Konposizio guztietako NFRK garatuak hutsean lehortu ziren 105 °C-tan gauean, hondar disolbatzailea kentzeko.30 mg NFRCS (hasierako laginaren pisua - W0) eta 30 mg Ct (kontrol positiboa) plater bereizietan jarri ziren, % 3,8ko sodio zitratoko aurrenahasketa bat zuten.Aurrez zehaztutako denbora tarteetan, hau da, 5, 10, 20, 30, 40 eta 60 segundotan, NFRCS kendu eta haien gainazalak xurgatu gabeko odoletik garbitu ziren laginak 30 segundoz Ct gainean jarriz.NFRCS 16k xurgatutako odolaren azken pisua (W1) kontuan hartu zen une bakoitzean.Kalkulatu BAR ehunekoa formula hau erabiliz:
Odolaren koagulazio-denbora (BCT) Wang et al-ek jakinarazitakoaren arabera zehaztu zen.17 .Odol osoak (arratoi odola % 3,8ko sodio zitratoarekin aurrez nahastuta) NFRCSren aurrean koagulatzeko behar den denbora proba laginaren BCT gisa kalkulatu da.NFRCS osagai desberdinak (30 mg) 10 ml-ko torloju-kapaletan jarri eta 37 °C-tan inkubatu ziren.Odola (0,5 ml) gehitu zen poteari eta 0,2 M CaCl2 0,3 ml gehitu zen odolaren koagulazioa aktibatzeko.Azkenik, irauli ontzia 15 segundoro (180°-ra arte) koagulu sendo bat sortu arte.Laginaren BCT flip vails kopuruaren arabera kalkulatzen da17,18.BCTn oinarrituta, NFRCS Cm, Ch eta Cp-ren bi konposizio optimo aukeratu ziren karakterizazio-azterketa gehiago egiteko.
Ch NFRCS eta Cp NFRCS konposizioen BCT Li et al-ek deskribatutako metodoa ezarriz zehaztu zen.19 .Jarri 15 x 15 mm2 Ch NFRCS, Cp NFRCS eta Cs (kontrol positiboa) Petri plaka bereizietan (37 °C).% 3,8ko sodio zitratoa zuen odola 0,2 M CaCl2rekin nahastu zen 10:1 bolumen proportzioan odola koagulatzeko prozesua hasteko.0,2 M CaCl2 arratoien odol nahasketa 20 µl laginaren gainazalean jarri eta Petri kaxa huts batean jarri ziren.Kontrola Ct gabe Petri kaxa hutsetara odola isurtzen zen.0, 3 eta 5 minutuko tarte finkoetan, gelditu koagulazioa 10 ml ur deionizatu (DI) gehituz platera duen laginari, koagulazioa eragotzi gabe.Koagulatu gabeko eritrozitoek (eritrozitoak) hemolisia jasaten dute ur deionizatuaren aurrean eta hemoglobina askatzen dute.Denbora-puntu desberdinetako hemoglobina (HA(t)) 540 nm-an (λmax hemoglobina) neurtu zen UV-Vis espektrofotometro baten bidez.Erreferentzia estandar gisa hartu zen hemoglobinaren (AH(0)) 20 µl odoleko 10 ml ur deionizatutan 0 min-en xurgapen absolutua.Odol koagulatuaren hemoglobina-hartze erlatiboa (RHA) HA(t)/HA(0) erlaziotik kalkulatu zen odol sorta bera erabiliz.
Testura analizatzaile bat erabiliz (Texture Pro CT V1.3 Build 15, Brookfield, AEB), kaltetutako ehunekiko NFRK-ren itsasgarri propietateak zehaztu ziren.Sakatu hondo irekiko plater zilindriko bat txerri-azalaren barrutik (koipe geruzarik gabe).Laginak (Ch NFRCS eta Cp NFRCS) kanula bidez aplikatu ziren molde zilindrikoetan, txerriaren azala atxikitzeko.Giro-tenperaturan (RT) (25°C) 3 minutuko inkubazioa egin ondoren, NFRCS itsasgarri-indarra 0,5 mm/seg-ko abiadura konstantean erregistratu zen.
Zigilatzaile kirurgikoen ezaugarri nagusia odolaren koagulazioa areagotzea da, odol-galera murrizten den bitartean.NFRCSn galerarik gabeko koagulazioa aldez aurretik argitaratutako metodo bat erabiliz ebaluatu zen aldaketa txikiekin 19 .Egin mikrozentrifuga-hodi bat (2 ml) (barruko diametroa 10 mm) zentrifuga-hodiaren alde batean 8 × 5 mm2-ko zulo batekin (zauri ireki bat irudikatzen duena).NFRCS irekiera ixteko erabiltzen da eta zinta kanpoko ertzak zigilatzeko.Gehitu 0,2 M CaCl2-ko 20 µl % 3,8ko sodio zitratoa duen mikrozentrifuga-hodiari.10 minutu igaro ondoren, mikrozentrifuga-hodiak plateretatik kendu eta plateren masaren igoera zehaztu zen NFRK-ko odol-irteeraren ondorioz (n = 3).Odol-galera Ch NFRCS eta Cp NFRCS Cs-ekin alderatu ziren.
NFRCS-ren osotasun hezea Mishra eta Chaudhary-k21-ek deskribatutako metodoan oinarrituta zehaztu zen aldaketa txikiekin.Jarri NFRCS 100 ml-ko Erlenmeyer matraz batean 50 ml-ko urarekin eta bira eman 60 s-tan goiko bat osatu gabe.Bilketan oinarritutako osotasun fisikorako laginen ikuskapen bisuala eta lehentasuna ematea.
HFFC-ren Ct-ren lotura-indarra aldez aurretik argitaratutako metodoak erabiliz aztertu zen, aldaketa txikiekin.Gainazaleko estalduraren osotasuna NFRK uhin akustikoetara (kanpo-estimulua) jasanez ebaluatu zen milliQ uraren (Ct) aurrean.Garatutako NFRCS Ch NFRCS eta Cp NFRCS urez betetako edalontzi batean jarri eta 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 eta 30 minutuz, hurrenez hurren, sonikatu ziren.Lehortu ondoren, NFRCSren hasierako eta azken pisuaren arteko portzentaje-diferentzia erabili zen materialaren ehuneko galera (HFFC) kalkulatzeko.In vitro BCT-k gainazaleko materialen lotura-indarra edo galera gehiago onartzen zuen.HFFC Ct-rekin lotzearen eraginkortasunak odol-koagulazioa eta estaldura elastikoa eskaintzen ditu Ct22-ren gainazalean.
Garatutako NFRCSren homogeneotasuna NFRCSren ausaz hautatutako kokapen orokorretatik hartutako laginen (30 mg) BCTren bidez zehaztu zen.Jarraitu aurretik aipatutako BCT prozedura NFRCS betetzea zehazteko.Bost laginen arteko hurbiltasunak gainazaleko estaldura uniformea ​​eta HFFC deposizioa bermatzen ditu Ct sarean.
Odol-kontaktu-eremu nominala (NBCA) aurretik jakinarazitako moduan zehaztu zen aldaketa batzuekin.Koagulatu odola Ct, Ch NFRCS, Cp NFRCS eta Cs-en bi gainazalen artean 20 µl odol estutuz.Ordubete igaro ondoren, stentaren bi zatiak banandu ziren eta eskuz neurtu zuten koagularen eremua.Hiru errepikapenen batez besteko balioa NBCA NFRCS19 hartu zen.
Dynamic Vapor Sorption (DVS) analisia NFRCSren eraginkortasuna ebaluatzeko erabili zen kanpoko inguruneko ura xurgatzeko edo koagulazioa abiarazteko ardura duen lesio gunetik.DVSk lagin batean lurrun-hartzea eta galera ebaluatzen edo erregistratzen ditu grabimetrikoki ±0,1 µg-ko masa-bereizmena duen balantza ultra-sentikorra erabiliz.Lurrun-presio partziala (hezetasun erlatiboa) laginaren inguruan masa-fluxuaren kontrolagailu elektroniko batek sortzen du gas garraiolari saturatuak eta lehorrak nahastuz. Europako Farmakopearen jarraibideen arabera, laginek hezetasun-hartzearen ehunekoaren arabera, laginak 4 kategoriatan sailkatu ziren (% 0-0,012 p/p- ez-higroskopikoa, 0,2-2% p/p apur bat higroskopikoa, % 2-15 neurrizko higroskopikoa) eta > 155% oso higroskopikoa. Europako Farmakopearen jarraibideen arabera, laginek hezetasun-hartzearen ehunekoaren arabera, laginak 4 kategoriatan sailkatu ziren (% 0-0,012 p/p- ez-higroskopikoa, 0,2-2% p/p apur bat higroskopikoa, % 2-15 neurrizko higroskopikoa, eta > 155) oso higroskopikoa.Europako Farmakopearen gomendioei jarraiki, laginek hezetasunaren xurgapenaren ehunekoaren arabera, laginak 4 kategoriatan banatu ziren (% 0-0,012 p/g - ez-higroskopikoa, 0,2-2% p/p apur bat higroskopikoa, 2-% 15).% умеренно гигроскопичен и > % 15 очень гигроскопичен)23. % moderatu higroskopikoa eta > % 15 oso higroskopikoa)23.根据欧洲药典指南，根据样品吸收水分的百分比，样品分为4 类（這% 0-0,012 w/0,012 水分的百分比，样品分为4 类（這% 0-0,012 w/0,012% w/2 w. /w 轻微吸湿性、% 2-15 适度吸湿，> % 15 非常吸湿）23。根据 欧洲 药典 指南 ， 根据 吸收 水分 的 百分比 样品 分为 分为 分为 分 分为 分为 分 分 0.0（ 0.01（ 0.湿 性 、 、 、 、 % 0,2-2 W/w 轻微 、 % 2-15 适度 吸湿 ，> % 15非常吸湿）23。Europako Farmakopearen gomendioen arabera, laginak 4 klasetan banatzen dira laginak xurgatzen duen hezetasun-ehunekoaren arabera (% 0-0,012 pisuaren arabera - ez-higroskopikoa, 0,2-2% pisua apur bat higroskopikoa, 2-15% pisua).% умеренно гигроскопичен, > % 15 очень гигроскопичен) 23. % moderatu higroskopikoa, > % 15 oso higroskopikoa) 23.NFCS X NFCS eta TsN NFCS-en eraginkortasun higroskopikoa DVS TA TGA Q5000 SA analizatzaile batean zehaztu zen.Prozesu horretan, exekuzio-denbora, hezetasun erlatiboa (HR) eta denbora errealeko laginaren pisua lortu dira 25 °C24-tan.Hezetasun-edukia NFRCS masa-analisi zehatzaren bidez kalkulatzen da ekuazio hau erabiliz:
MC NFRCS hezetasuna da.m1 - AINEen pisu lehorra.m2 denbora errealeko NFRCS masa da RH jakin batean.
Azalera totala nitrogeno likidoarekin zurgatzeko esperimentu baten bidez kalkulatu zen laginak 25 °C-tan hustu ondoren 10 orduz (< 7 × 10-3 Torr). Azalera totala nitrogeno likidoarekin zurgatzeko esperimentu baten bidez kalkulatu zen laginak 25 °C-tan hustu ondoren 10 orduz (< 7 × 10-3 Torr). Общая площадь поверхности оценивалась с помощью эксперимента по адсорбции азотко по спощью ожнения образцов при 25 °С в течение 10 ч (< 7 × 10–3 Торр). Azalera totala nitrogeno likidoarekin zurgatzeko esperimentu baten bidez kalkulatu zen laginak 25 °C-tan hustu ondoren 10 orduz (< 7 × 10-3 Torr).在25°C 清空样品10 小时（< 7 × 10-3 Torr）后，使用液氮的氮吸附实验估计总表靂总表。在 25°C Общая площадь поверхности оценивалась с использованием экспериментов по адсорбтцик по адсорбтцик по Общая площадь оценивалась с использованием ле опорожнения образцов в течение 10 часов при 25 °C (< 7 × 10-3 торр). Azalera osoa kalkulatu zen nitrogeno likidoarekin zurgatzeko esperimentuak erabiliz laginak 10 orduz 25 °C-tan hustu ondoren (< 7 x 10-3 torr).Azalera osoa, poroen bolumena eta NFRCS poroen tamaina NOVA 1000e-ko Quantachrome batekin, Austria, RS 232 softwarearekin zehaztu ziren.
Prestatu 5% RBC (gatz diluitzaile gisa) odol osotik.Ondoren, transferitu HFFC alikuota bat (0,25 ml) 96 putzuko plaka batera eta % 5eko RBC masa (0,1 ml).Inkubatu nahasketa 37 °C-tan 40 minutuz.Globulu gorrien eta serumen nahasketa kontrol positibotzat hartu zen, eta gatz eta globulu gorrien nahasketa kontrol negatibotzat.Hemaglutinazioa Stajitzky eskalaren arabera zehaztu zen.Proposatutako eskalak hauek dira: + + + + agregakin pikor trinkoak;+ + + beheko kuxina leunak ertz kurbatuekin;+ + beheko kuxin leunak ertz urratuak dituztenak;+ eraztun gorri estuak pad leunen ertzetan;– (negatiboa) 12. botoi gorri diskretua beheko putzuaren erdian.
NFRCSren hemobateragarritasuna Normalizaziorako Nazioarteko Erakundearen (ISO) metodoaren arabera aztertu zen (ISO10993-4, 1999)26,27.Singh et al-ek deskribatutako metodo grabimetrikoak.Aldaketa txikiak egin ziren tronboen eraketa ebaluatzeko NFRCSren aurrean edo gainazalean.500 mg Cs, Ch NFRCS eta Cp NFRCS inkubatu ziren fosfato tamponatuko gatz salinoan (PBS) 24 orduz 37 °C-tan.24 ordu igaro ondoren, PBS kendu eta NFRCS % 3,8ko sodio zitratoa zuten 2 ml odolarekin tratatu zen.NFRCSren gainazalean, gehitu 0,1 M CaCl2 0,04 ml inkubatutako laginei.45 minutu igaro ondoren, 5 ml ur destilatu gehitu ziren koagulazioa geldiarazteko.NFRK-ren gainazaleko odol koagulatua % 36-38 formaldehido-soluzioarekin tratatu zen.Formaldehidoarekin finkatutako koaguluak lehortu eta pisatu egin ziren.Tronbosiaren portzentajea kalkulatu da edalontziaren pisua odolik eta laginik gabe (kontrol negatiboa) eta edalontzia odolarekin (kontrol positiboa).
Hasierako baieztapen gisa, laginak mikroskopio optiko baten azpian bistaratu ziren HFFC gainazaleko estaldurak, Ct interkonektatua eta Ct sareak poroak osatzeko duten gaitasuna ulertzeko.NFRCSko Ch eta Cp atal meheak bisturiko xafla batekin moztu ziren.Lortutako atala beirazko diapositiba batean jarri zen, estalki batekin estalita, eta ertzak kolaz finkatu ziren.Prestatutako diapositibak mikroskopio optikoaren pean ikusi ziren eta argazkiak handitze desberdinetan atera ziren.
Ct sareetan polimeroen deposizioa fluoreszentzia-mikroskopia erabiliz ikusi zen Rice et al.29-ek deskribatutako metodoan oinarrituta. Formulaziorako erabilitako HFFC konposizioa koloratzaile fluoreszente batekin (amaranto) nahastu zen eta NFRCS (Ch & Cp) aurretik aipatutako metodoaren arabera prestatu ziren. Formulaziorako erabilitako HFFC konposizioa koloratzaile fluoreszente batekin (amaranto) nahastu zen eta NFRCS (Ch & Cp) aurretik aipatutako metodoaren arabera prestatu ziren.Formulaziorako erabilitako HFFC konposizioa koloratzaile fluoreszente batekin (amaranto) nahastu zen eta NFRCS (Ch eta Cp) lortu zen lehen aipatutako metodoaren arabera.将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的料光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的斶光染料Chp将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的料光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的斶光染料ChpFormulazioan erabilitako HFFC konposizioa koloratzaile fluoreszente batekin (Amaranth) nahastu zen eta NFRCS (Ch eta Cp) jaso zuen, lehen esan bezala.Lortutako laginetatik NFRK-aren atal meheak moztu, beirazko diapositibetan jarri eta estalki-latinaz estali zituzten.Behatu prestatutako diapositibak mikroskopio fluoreszente baten azpian iragazki berde bat erabiliz (310-380 nm).Irudiak 4x handitzearekin hartu ziren Ct sarean Ct erlazioak eta gehiegizko polimeroen deposizioa ulertzeko.
NFRCS Ch eta Cp-ren gainazaleko topografia indar atomikoko mikroskopio bat erabiliz (AFM) zehaztu zen TESP cantilever ultra-zorrotz batekin tapping moduan: 42 N/m, 320 kHz, ROC 2-5 nm, Bruker, Taiwan.Azaleko zimurtasuna root mean square (RMS) bidez zehaztu zen softwarea erabiliz (Scanning Probe Image Processor).NFRCS kokapen desberdinak 3D irudietan errendatu ziren gainazaleko uniformetasuna egiaztatzeko.Eremu jakin baterako puntuazioaren desbideratze estandarra gainazaleko zimurtasun gisa definitzen da.NFRCS31-ren gainazaleko zimurtasuna kuantifikatzeko RMS ekuazioa erabili zen.
FESEM-en oinarritutako azterketak FESEM, SU8000, HI-0876-0003, Hitachi, Tokyo erabiliz egin ziren, Ch NFRCS eta Cp NFRCS-ren gainazaleko morfologia ulertzeko, Cm NFRCS baino BCT hobea erakutsi zutenak.FESEM azterketa Zhao et al-ek deskribatutako metodoaren arabera egin da.32 aldaketa txikiekin.NFRCS 20 eta 30 mg Ch NFRCS eta Cp NFRCS aurrez nahastu ziren 20 µl sodio zitratoaren % 3,8 arratoi odolarekin nahastuta.Odol tratatutako laginei 0,2 M CaCl2 20 μl gehitu zitzaizkien koagulazioa hasteko eta laginak giro-tenperaturan inkubatu ziren 10 minutuz.Gainera, gehiegizko eritrozitoak NFRCS gainazaletik kendu ziren gatzarekin garbituz.
Ondorengo laginak %0,1eko glutaraldehidoarekin tratatu ziren eta, ondoren, aire beroko labean lehortu ziren 37°C-tan, hezetasuna kentzeko.Lehortutako laginak estali eta aztertu 32 .Azterketan lortutako beste irudi batzuk kotoi-zuntzen banakako gainazalean koaguluen eraketa, Ct-ren arteko polimeroen deposizioa, eritrozitoen morfologia (forma), koagularen osotasuna eta eritrozitoen morfologia NFRCSren aurrean izan ziren.Tratatu gabeko NFRCS eremuak eta Ch eta Cp tratatutako NFRCS odolarekin inkubatutako eremuak miatu ziren ioi elementalen bila (sodioa, potasioa, nitrogenoa, kaltzioa, magnesioa, zinka, kobrea eta selenioa)33.Tratatutako eta tratatu gabeko laginen arteko ioi elemental-portzentajeak konparatu koagularen eraketan zehar ioi elementalen metaketa eta koagulazioaren homogeneotasuna ulertzeko.
Cp HFFC gainazaleko estalduraren lodiera Ct gainazalean FESEM erabiliz zehaztu zen.Cp NFRCS-ren sekzioak markotik moztu eta sputter estali zituzten.Sortutako sputter estaldura laginak FESEM-ek behatu zituen eta gainazaleko estalduraren lodiera 34, 35, 36 neurtu zen.
X izpien mikro-CT bereizmen handiko 3D irudi ez-suntsitzaileak eskaintzen ditu eta NFRKren barne egitura-antolamendua aztertzeko aukera ematen du.Mikro-CTk laginaren bidez igarotzen den X izpien izpi bat erabiltzen du laginaren X izpien tokiko atenuazio-koefiziente lineala erregistratzeko, eta horrek informazio morfologikoa lortzen laguntzen du.Ct-ren barne-kokapena Cp NFRCS-en eta odolez tratatutako Cp NFRCS mikro-CT bidez aztertu zen, xurgapen-eraginkortasuna eta odolaren koagulazioa ulertzeko NFRCS-ren presentzian37,38,39.Odol tratatutako eta tratatu gabeko Cp NFRCS laginen 3D egiturak mikro-CT erabiliz berreraiki ziren (V|tome|x S240, Phoenix, Alemania).VG STUDIO-MAX softwarearen 2.2 bertsioa erabiliz, hainbat X izpien irudiak angelu ezberdinetatik hartu ziren (egokiena 360°-ko estaldura) NFRCSrako 3D irudiak garatzeko.Bildutako proiekzio datuak 3Dko irudi bolumetrikoetan berreraiki ziren, dagokion 3D ScanIP Academic software sinplea erabiliz.
Horrez gain, koagulazioaren banaketa ulertzeko, 20 µl odol zitratua aurrez nahastuta eta 0,2 M CaCl2 20 µl gehitu ziren NFRCSra odolaren koagulazioa hasteko.Prestatutako laginak gogortzen uzten dira.NFRK gainazala % 0,5 glutaraldehidoarekin tratatu eta aire beroko labean lehortu zen 30-40 ° C-tan 30 minutuz.NFRCS-n sortutako odol-koagulazioa eskaneatu, berreraiki eta odol-koaguluaren 3D irudi bat ikusi zen.
Bakterioen aurkako saiakuntzak Cp NFRCS-n egin ziren (hobeena Ch NFRCS-rekin alderatuta) aurretik deskribatutako metodoa erabiliz, aldaketa txikiekin.Cp NFRCS eta Cp HFFC-ren bakterioen aurkako aktibitatea zehaztu zen, inkubagailu batean Petri plaketan agar gainean hazten diren hiru mikroorganismo ezberdin erabiliz [S.aureus (bakterio gram-positiboak), E.coli (bakterio gram-negatiboak) eta Candida zuria (C.albicans)].Diluitutako bakterio-kultur esekiduraren 50 ml uniformeki inokulatu 105-106 CFU ml-1-ko kontzentrazioan agar medioan.Bota ertaina Petri kaxa batera eta utzi solidotzen.Agar plakaren gainazalean putzuak egin ziren HFFCz betetzeko (3 putzu HFFCrako eta 1 kontrol negatiborako).Gehitu 200 µl HFFC 3 putzuetan eta 200 µl pH 7,4 PBS 4. putzuan.Petri plakaren beste aldean, jarri 12 mm-ko Cp NFRCS diskoa solidotutako agar gainean eta busti PBSz (pH 7,4).Ciprofloxacin, anpizilina eta flukonazol pilulak Staphylococcus aureus, Escherichia coli eta Candida albicans-en erreferentziazko estandarrak dira.Neurtu eskuz inhibizio-eremua eta hartu inhibizio-eremuaren irudi digitala.
Instituzioen onespen etikoaren ondoren, ikerketa Kasturba Medical College of Education and Research Manipal-en, Karnataka, India hegoaldean egin zen.In vitro TEG protokolo esperimentala berrikusi eta onartu du Kasturba Medical College, Manipal, Karnatakako Instituzio Etika Batzordeak (IEC: 674/2020).Ospitaleko odol-emaile boluntarioetatik (18 eta 55 urte bitartekoak) kontratatu zituzten subjektuak.Horrez gain, odol-laginak biltzeko boluntarioen baimen informatua lortu zuten.Native TEG (N-TEG) ​​Cp HFFC formulazioak sodio zitratoarekin nahastutako odol osoan duen eragina aztertzeko erabili zen.N-TEG oso ezaguna da arreta puntuko susperkuntzan duen eginkizunagatik, eta horrek arazoak sortzen ditu klinikoentzat emaitzetan klinikoki esanguratsua den atzerapenaren potentzialagatik (orrutinazko koagulazio-probak).N-TEG analisia odol osoa erabiliz egin da.Parte-hartzaile guztien adostasun informatua eta historia mediko zehatza lortu zuten.Azterketak ez ditu barne hartu konplikazio hemostatikoak edo tronbotikoak dituzten parte-hartzaileak, hala nola, haurdunaldia / erditze osteko edo gibeleko gaixotasuna.Koagulazio-jauzian eragina duten sendagaiak hartzen zituzten subjektuak ere ikerketatik kanpo geratu ziren.Oinarrizko laborategiko probak (hemoglobina, protrombina-denbora, tronboplastina aktibatua eta plaketen zenbaketa) parte-hartzaile guztiei egin zitzaizkien prozedura estandarren arabera.N-TEG-k odol-koagulazioaren biskoelastizitatea, hasierako koagulazioaren egitura, partikulen elkarrekintza, koagulazioaren indartzea eta koagularen lisia zehazten ditu.N-TEG analisiak hainbat elementu zelularren eta plasmaren eragin kolektiboei buruzko datu grafikoak eta zenbakizkoak eskaintzen ditu.N-TEG analisia Cp HFFCren bi bolumen ezberdinetan egin zen (10 µl eta 50 µl).Ondorioz, azido zitrikoarekin 1 ml odol oso gehitu zen Cp HFFC 10 μl-ri.Gehitu 1 ml (Cp HFFC + odol zitratua), 340 µl odol mistoa 20 µl 0,2 M CaCl2 TEG platerarekin.Hortik aurrera, TEG platerak TEG® 5000-n kargatu ziren, US R, K, alfa angelua, MA, G, CI, TPI, EPL, LY odol laginen % 30 Cp HFFC41 presentzian neurtzeko.
In vivo azterketa-protokoloa Animalien Etika Batzorde Instituzionalak (IAEC), Kasturba Medikuntza Eskola, Manipal Goi Mailako Hezkuntza Institutua, Manipal (IAEC/KMC/69/2020) aztertu eta onartu zuen.Animalien esperimentu guztiak Animalien Esperimentazioa Kontrolatzeko eta Gainbegiratzeko Batzordearen (CPCSEA) gomendioen arabera egin ziren.NFRCS in vivo azterketa guztiak (2 × 2 cm2) Wistar arratoi emeetan egin ziren (200 eta 250 g-ko pisua dutenak).Animalia guztiak 24-26 °C-ko tenperaturan aklimatatu ziren, animaliek janari estandarra eta ura ad libitum sarbide librea zuten.Animalia guztiak ausaz banatu ziren talde ezberdinetan, talde bakoitza hiru animaliz osatuta zegoen.Azterketa guztiak Animal Studies-en arabera egin ziren: In Vivo Experiments 43 txostena.Azterketa egin baino lehen, animaliak anestesiatu zituzten 20-50 mg ketamina (gorputzaren 1 kg-ko pisu bakoitzeko) eta 2-10 mg xilazina (gorputzaren 1 kg-ko pisu bakoitzeko) nahasketa intraperitonealaren bidez (ip).Azterketaren ostean, odoljario-bolumena kalkulatu da laginen hasierako eta azken pisuaren arteko aldea ebaluatuz, hiru probetan lortutako batez besteko balioa laginaren odoljario-bolumentzat hartu da.
Arratoi-buztanaren anputazio-eredua NFRCSek trauma, borroka edo trafiko-istripuetan odoljarioa modulatzeko duen potentziala ulertzeko ezarri zen (lesioen eredua).Isatsaren % 50 moztu bisturiko xafla batekin eta jarri airean 15 segundoz odoljario normala ziurtatzeko.Horrez gain, probako laginak arratoi baten buztanean jarri ziren presioa eginez (Ct, Cs, Ch NFRCS eta Cp NFRCS).Odoljarioa eta PCT saiakuntzako laginetarako (n ​​= 3)17,45 jakinarazi ziren.
Borrokan NFRCS presio-kontrolaren eraginkortasuna azaleko arteria femoralaren eredu batean ikertu zen.Arteria femorala agerian geratzen da, 24G-ko trokaro batekin zulatu eta 15 segundotan odola egiten da.Kontrolik gabeko odoljarioa ikusi ondoren, probako alea zulaketa-gunean jartzen da presioa aplikatuta.Proba lagina aplikatu eta berehala, koagulazio-denbora erregistratu zen eta eraginkortasun hemostatikoa ikusi zen hurrengo 5 minutuetan.Prozedura bera errepikatu zen Cs eta Ct46rekin.
Dowling et al.47-k gibeleko lesio-eredu bat proposatu zuen material hemostatikoen potentzial hemostatikoa ebakuntza barruko odoljarioaren testuinguruan ebaluatzeko.BCT Ct laginetarako (kontrol negatiboa), Cs framework (kontrol positiboa), Ch NFRCS laginetarako eta Cp NFRCS laginetarako erregistratu da.Arratoiaren kaba bena suprahepatikoa laparotomia mediana eginez agerian geratu zen.Horren ostean, ezkerreko lobuluaren zati distala guraizeekin moztu zen.Egin ebaki bat gibelean bisturiko xafla batekin eta utzi segundo batzuetan odoletan.Zehaztasunez pisatutako Ch NFRCS eta Cp NFRCS probetako laginak kaltetutako gainazalean jarri ziren presio positiborik gabe eta BCT erregistratu zen.Kontrol-taldeak (Ct) presioa egin zuen ondoren Cs 30 s47 lesioa hautsi gabe.
In vivo zauriak sendatzeko saiakuntzak egin ziren escisional zauriaren eredu bat erabiliz polimeroetan oinarritutako NFRCS garatuen zauriak sendatzeko propietateak ebaluatzeko.Zauri eszisiodunen ereduak aldez aurretik argitaratutako metodoen arabera hautatu eta egin ziren aldaketa txikiekin19,32,48.Animalia guztiak anestesiatu zituzten lehen deskribatu bezala.Erabili biopsia puntzoia (12 mm) bizkarreko azalean ebaki sakon zirkular bat egiteko.Prestatutako zauri-guneak Cs (kontrol positiboa), Ct (kotoizko xaflak sendatzea oztopatzen dutela aintzat hartuta), Ch NFRCS eta Cp NFRCS (talde esperimentala) eta inolako tratamendurik gabeko kontrol negatibo batekin jantzi ziren.Azterketaren egun bakoitzean, zauriaren azalera neurtu zen arratoi guztietan.Erabili kamera digital bat zauriaren eremuaren argazkia ateratzeko eta janzkera berria jarri.Zauriaren itxieraren ehunekoa formula honen bidez neurtu da:
Azterketaren 12. egunean zauriaren itxieraren ehunekoaren arabera, talde onenaren arratoi-azala kendu zen ((Cp NFRCS) eta kontrol-taldea) eta H&E tindaketaz eta Masson-en tindaketa trikromikoaren bidez aztertu zen. Azterketaren 12. egunean zauriaren itxieraren ehunekoaren arabera, talde onenaren arratoi-azala kendu zen ((Cp NFRCS) eta kontrol-taldea) eta H&E tindaketaz eta Masson-en tindaketa trikromikoaren bidez aztertu zen.Azterketaren 12. egunean zauriaren itxieraren portzentajearen arabera, talde onenaren ((Cp NFRCS) eta kontrol-taldearen arratoien azala moztu eta hematoxilina-eosinaz eta Masson-en trikromoz tindatuz aztertu zen.根据研究第12天的伤口闭合百分比，切除最佳组((Cp NFRCS)和对照组)的大鼠百分比，切除最佳组((Cp NFRCS)和对照组)的大鼠百分比根据进鼠皌殉进鼠皌H&Masson三色染色研究。根据研究第12天的伤口闭合百分比，切除最佳组((Cp NFRCS)和对照组)的大鼠百分比，切除最佳组((Cp NFRCS)和对照组)的大鼠百分比根据进鼠皌大远眳组）Talderik onenaren arratoiak ((Cp NFRCS) eta kontrol-taldeak) hematoxilina-eosina tindaketa eta Masson-en trikromo tindaketa egin zituzten azterketaren 12. egunean zaurien itxieraren ehunekoan oinarrituta.Inplementatutako tindaketa-prozedura aurretik deskribatutako metodoen arabera egin zen49,50.Laburbilduz, % 10eko formalinan finkatu ondoren, laginak deshidratatu ziren mailakaturiko alkohol sorta batekin.Erabili mikrotomo bat kendutako ehunaren zati meheak (5 µm-ko lodiera) lortzeko.Kontrolen serie meheak eta Cp NFRCS hematoxilinarekin eta eosinarekin tratatu ziren aldaketa histopatologikoak aztertzeko.Massonen orban trikromoa erabili zen kolageno-fibrilen sorrera detektatzeko.Lortutako emaitzak itsu-itsuan aztertu zituzten patologoek.
Cp NFRCS laginen egonkortasuna giro-tenperaturan (25 °C ± 2 °C/% 60 RH ±% 5) aztertu da 12 hilabetez51.Cp NFRCS (gainazaleko kolorea eta mikrobio-hazkundea) bisualki ikuskatu eta tolesturaren higadura-erresistentzia eta BCT probatu ziren Materialak eta Metodoak atalean adierazitako goiko metodoen arabera.
Cp NFRCSren eskalagarritasuna eta erreproduzigarritasuna 15×15 cm2-ko tamainako Cp NFRCS prestatuz aztertu zen.Horrez gain, 30 mg-ko laginak (n = 5) Cp NFRCS frakzio ezberdinetatik kendu ziren eta aztertutako laginen BCTa metodoak atalean deskribatu bezala ebaluatu zen.
Hainbat forma eta egitura garatzen saiatu gara Cp NFRCS konposizioak erabiliz hainbat aplikazio biomedikoetarako.Forma edo konfigurazio horien artean daude sudur-odoljarioetarako zurtoin konikoak, hortz-prozedurak eta baginako odoljarioetarako zilindrikoak.
Datu-multzo guztiak batez besteko ± desbideratze estandar gisa adierazten dira eta ANOVAren bidez analizatu ziren Prism 5.03 erabiliz (GraphPad, San Diego, CA, AEB), eta, ondoren, Bonferroni-ren konparazio anitzeko proba (*p<0.05).
Giza ikerketetan egindako prozedura guztiak Institutuaren eta Ikerketa Kontseilu Nazionalaren arauekin bat etorri ziren, baita 1964ko Helsinkiko Adierazpenarekin eta ondorengo aldaketekin edo antzeko estandar etikoekin ere.Parte-hartzaile guztiei ikerketaren ezaugarriei eta bere borondatezko izaerari buruz informatu zitzaien.Parte-hartzaileen datuak isilpekoak dira bildutakoan.In vitro TEG protokolo esperimentala berrikusi eta onartu du Kasturba Medical College, Manipal, Karnatakako Instituzio Etika Batzordeak (IEC: 674/2020).Boluntarioek odol-laginak biltzeko baimen informatua sinatu zuten.
Animalien ikerketetan egindako prozedura guztiak Kastuba Medikuntza Fakultatearen, Manipal Goi Mailako Hezkuntza Institutuaren, Manipal (IAEC/KMC/69/2020) arabera egin ziren.Diseinatutako animalien esperimentu guztiak Animalien Esperimentazioa Kontrolatzeko eta Gainbegiratzeko Batzordearen (CPCSEA) jarraibideen arabera egin ziren.Egile guztiek ARRIVE jarraibideak jarraitzen dituzte.
NFRCS guztien FTIR espektroak aztertu eta 2A irudian agertzen den kitosanoaren espektroarekin alderatu ziren.Kitosanoaren gailur espektral ezaugarriak (grabatutakoak) 3437 cm-1 (OH eta NH luzapena, gainjartzea), 2945 eta 2897 cm-1 (CH luzapena), 1660 cm-1 (NH2 tentsioa), 1589 cm-1 (N–H tolestura), 1157 cm-1-ko luzapena, 1157 cm-C-10 (zubiaren luzapena O- cm--1) yl), 993 cm-1 (co luzadura, Bo-OH) 52,53,54.S1 taula osagarriak FTIR NFRCS xurgapen espektroaren balioak erakusten ditu kitosanoaren (erreportaria), kitosano puruaren, Cm, Ch eta Cp-en.NFRCS guztien FTIR espektroek (Cm, Ch eta Cp) kitosano hutsaren xurgapen-banda ezaugarri berdinak erakutsi zituzten aldaketa garrantzitsurik gabe (2A. irudia).FTIR emaitzek NFRCS garatzeko erabilitako polimeroen artean elkarrekintza kimiko edo fisikorik ez dagoela baieztatu dute, erabilitako polimeroak geldoak direla adieraziz.
Cm NFRCS, Ch NFRCS, Cp NFRCS eta Cs-en in vitro karakterizazioa.(A) kitosanoaren eta Cm NFRCS, Ch NFRCS eta Cp NFRCS konposizioen konposizioen FTIR espektro konbinatuak adierazten ditu konpresiopean.(B) a) NFRCS Cm, Ch, Cp eta Cg-ren odol osoa hartzeko tasa (n = 3);Ct laginek BAR altuagoa erakutsi zuten, kotoizko laginak xurgapen-eraginkortasun handiagoa duelako;b) Odola, odola xurgatu ondoren, xurgatutako laginaren ilustrazioa.C saiakuntza-laginaren BCT-aren irudikapen grafikoa (Cp NFRCS-k BCT onena izan zuen (15 s, n = 3)). C, D, E eta G-ko datuak batez besteko ± SD gisa erakutsi ziren, eta errore-barrak SD adierazten dute, ***p <0.0001. C, D, E eta G-ko datuak batez besteko ± SD gisa erakutsi ziren, eta errore-barrak SD adierazten dute, ***p <0.0001. Данные в C, D, E и G представлены как среднее ± стандартное отклонение, а планки погрешноставлены как среднее ± стандартное отклонение, а планки погрешностей прешностей прешностей прешностей онение, ***p <0,0001. C, D, E eta G-ko datuak batez besteko ± desbideratze estandar gisa aurkezten dira, eta errore-barrak desbideratze estandarra adierazten dute, ***p<0,0001. C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD，误差线代表SD，***p < 0,0001。 C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD，误差线代表SD，***p < 0,0001。 Данные в C, D, E и G показаны как среднее значение ± стандартное отклонение, планки погрештносде погрештносде погрештносдестно е отклонение, ***p <0,0001. C, D, E eta G-ko datuak batez besteko ± desbideratze estandar gisa erakusten dira, errore-barrak desbideratze estandarra adierazten dute, ***p<0,0001.