جاوا اسکریپت در حال حاضر در مرورگر شما غیرفعال است. برخی از ویژگی های این وب سایت در صورت غیرفعال شدن جاوا اسکریپت کار نمی کنند.
با جزئیات خاص خود و داروی خاص مورد علاقه خود ثبت نام کنید و ما اطلاعاتی را که ارائه می کنید با مقالات موجود در پایگاه داده گسترده خود مطابقت می دهیم و فوراً یک نسخه PDF را برای شما ایمیل می کنیم.
作者 Stella S، Vitale SR، Martorana F، Massimino M، Pavone G، Lanzafame K، Bianca S، Barone C، Gorgone C، Fichera M، Manzella L
استفانیا استلا، 1،2 سیلویا ریتا ویتال، 1،2 فدریکا مارتورانا، 1،2 میکله ماسیمینو، 1،2 جولیانا پاوونه، 3 کاتیا لانزافام، 3 سباستیانو بیانکا، 4 کیارا بارون، 5 کریستینا گورگونه، 6 مارکو فیچریال دپارتمان 721 و 6 مارکو فیچریال، اکسپرت ine، دانشگاه کاتانیا، کاتانیا، 95123، ایتالیا؛ 2 مرکز انکولوژی تجربی و هماتولوژی، AOU Policlinico “G.Rodolico – San Marco”, Catania , 95123, Italy;3 انکولوژی پزشکی، AOU Policlinico “G.رودولیکو – سن مارکو، کاتانیا، 95123، ایتالیا؛4 پزشکی ژنتیک، ARNAS Garibaldi، کاتانیا، 95123، ایتالیا;5 Medicine Genetics, ASP, Syracuse, 96100, Italy;6 گروه علوم زیست پزشکی و بیوتکنولوژی، دانشگاه کاتانیا، ژنتیک پزشکی، کاتانیا، ایتالیا، 95123;7 موسسه تحقیقاتی Oasi-IRCCS، Troina، 94018، ایتالیا ارتباطات: Stefania Stella، tel +39 095 378 1946, email [email protected];[email protected] هدف: جهش‌های مولد در BRCA1 و BRCA2 و سرطان پستان ثابت شده (BC)، تخمدان (OC) و سایر موارد مرتبط با خطر ابتلا به سرطان در طول زندگی. آزمایش ژن BRCA برای ارزیابی خطر فردی، و همچنین برای یافتن روش‌های پیشگیری در ناقلین سالم و مناسب‌سازی درمان‌ها در سراسر مناطق مختلف سرطانی، BRCA21 کلیدی است. و اگرچه داده‌هایی در مورد انواع بیماری‌زای BRCA در خانواده‌های سیسیلی وجود دارد، مطالعاتی که به‌طور خاص جمعیت‌ها را در شرق سیسیل مورد هدف قرار می‌دهند، وجود ندارد. هدف مطالعه ما بررسی بروز و توزیع تغییرات مولفه بیماری‌زای BRCA در گروهی از بیماران BC از شرق سیسیل و ارزیابی ارتباط آن‌ها با صفات خاص BC با صفات BC با استفاده از ژن‌های مرتبط با درجه‌بندی تومور و همبستگی بعدی بود. ULTS: به طور کلی، 35 بیمار (9٪) یک نوع بیماریزای BRCA، 17 (49٪) در BRCA1 و 18 (51٪) در BRCA2 داشتند. تغییرات BRCA1 در بیماران BC سه منفی شایع است، در حالی که جهش های BRCA2 در مجرای BC شایع تر است. نتیجه‌گیری: یافته‌های ما مروری بر وضعیت جهش BRCA در بیماران BC از شرق سیسیل ارائه می‌کند و نقش آنالیز NGS را در شناسایی بیماران مبتلا به BC ارثی تأیید می‌کند. به طور کلی، این داده‌ها با شواهد قبلی حمایت از غربالگری BRCA برای پیشگیری و درمان مناسب سرطان در حاملان جهش مطابقت دارد.
سرطان پستان (BC) شایع‌ترین بدخیمی در سراسر جهان و کشنده‌ترین سرطان در زنان است.1 ویژگی‌های بیولوژیکی که پیش‌آگهی BC و رفتار بالینی را تعیین می‌کنند به طور گسترده مورد مطالعه قرار گرفته و تا حدی در طول زمان مشخص شده‌اند. در واقع، چندین نشانگر جایگزین در حال حاضر برای طبقه‌بندی BC به زیرگروه‌های مولکولی مختلف استفاده می‌شوند. HER2) تکثیر، شاخص تکثیر Ki-67 و درجه تومور (G). ترکیب این متغیرها دسته‌های BC زیر را شناسایی کرد: 1) تومورهای لومینال، که بیان ER و/یا PgR را نشان می‌دهند، 75 درصد از BCها را تشکیل می‌دهند. این تومورها بیشتر به Luminal A تقسیم شدند، زمانی که Ki-67 برابر با Ki-20، زیر 20 بود. درصد و در حضور تقویت HER2، صرف نظر از شاخص تکثیر.2) تومورهای HER2+ که ER و PgR منفی هستند اما تقویت HER2 را نشان می دهند. این گروه 10 درصد از کل تومورهای پستان را تشکیل می دهد.3) سرطان پستان سه گانه منفی (TNBC)، که بیان ER و PgR و تقویت HER2 را نشان نمی دهد، حدود 15٪ از سرطان های پستان را تشکیل می دهد. 2-4
در میان این زیرگروه های BC، درجه تومور و شاخص تکثیر نشانگرهای زیستی مقطعی هستند که به طور مستقیم و مستقل با پرخاشگری و پیش آگهی تومور مرتبط هستند.
علاوه بر ویژگی‌های بیولوژیکی فوق، نقش تغییرات ژنتیکی ارثی که منجر به ایجاد BC می‌شود در چند سال گذشته اهمیت فزاینده‌ای پیدا کرده است. 7 از هر 10 تومور پستان، 1 مورد به دلیل تغییرات ژنتیکی در ژن‌های خاص به ارث می‌رسد. BRCA2، CHK2، PALB2، RAD51C و RAD51D) مسئول اصلی BC ارثی هستند. در میان این ژن‌ها، BRCA1 و BRCA2 (از این پس BRCA1/2 نامیده می‌شود) قوی‌ترین همبستگی را با ایجاد تومورهای پستان نشان دادند. از جمله تخمدان، پروستات، لوزالمعده، کولورکتال و ملانوم. از سن 13 تا 80 سالگی، بروز تجمعی BC در زنان با یک نوع بیماریزا BRCA1 (PV) 72 درصد و در زنان با BRCA2 PV 69 درصد است.
شایان ذکر است، انتشار اخیر نشان می‌دهد که خطر BC به نوع PV بستگی دارد. در واقع، در مقایسه با انواع کوتاه‌کننده بیماری‌زا، انواع بدمعنای آشکار، به‌ویژه در ژن BRCA1، با کاهش خطر BC، به‌ویژه در زنان مسن‌تر همراه است.
وجود BRCA1 یا BRCA2 PV با ویژگی‌های بیولوژیکی و آسیب‌شناسی بالینی متفاوتی همراه بود. BC‌های مرتبط با BRCA1 از نظر بالینی تهاجمی هستند، تمایز ضعیفی دارند و به شدت تکثیر می‌شوند. شاخص های تکثیری توانا. این تومورها در لومن B شایع تر هستند و معمولاً در افراد مسن رخ می دهند. 16-18 قابل توجه، جهش در BRCA1 و BRCA2 حساسیت به درمان های خاص، از جمله نمک های پلاتین و داروهای هدفمند مانند مهارکننده های پلی (ADP-ribose) پلیمراز (PARPi) را افزایش می دهد.
طی چند سال گذشته، اجرای توالی یابی نسل بعدی (NGS) در عمل بالینی، تعداد فزاینده ای از بیماران BC را قادر ساخته است که تحت آزمایشات مولکولی برای سندرم های استعداد ابتلا به سرطان، از جمله BRCA1/2.21 قرار گیرند. همزمان، تعاریف مبتنی بر معیارهای دقیق در مورد سابقه خانوادگی، جمعیت شناختی، و ویژگی های بالینی2 برای شناسایی بهتر ویژگی های فردی BRCA2 ارزش دارد. بررسی غربالگری BRCA1/2 در جمعیت های خاص، برجسته کردن تفاوت ها در مناطق جغرافیایی.
ما در اینجا نتایج غربالگری BRCA1/2 را در بیماران پیش از میلاد مسیح از شرق سیسیل توصیف می‌کنیم، و حضور جهش‌های BRCA1 یا BRCA2 را با ویژگی‌های بالینی آسیب‌شناسی اصلی این تومورها مرتبط می‌کنیم.
این مطالعه گذشته نگر در "مرکز انکولوژی تجربی و هماتولوژی" در بیمارستان Policlinico انجام شد. Rodolico - San Marco در کاتانیا. از ژانویه 2017 تا مارس 2021، در مجموع 455 بیمار مبتلا به سرطان سینه و تخمدان، ملانوم، سرطان پانکراس یا پروستات در حال آزمایش ژنی BR به آزمایشگاه ما مراجعه کردند. مطابق با اعلامیه هلسینکی انجام شد و همه شرکت کنندگان قبل از تجزیه و تحلیل مولکولی رضایت آگاهانه کتبی ارائه کردند.
ویژگی‌های بافت‌شناسی و بیولوژیکی (وضعیت ER، PgR، HER2، Ki-67، و درجه) BC بر روی نمونه‌های بیوپسی هسته یا جراحی، تنها با در نظر گرفتن اجزای تومور تهاجمی مورد ارزیابی قرار گرفت. Ki-67≥20%)، B-HER2+ مجرا (ER و/یا PgR+، HER2+)، HER2+ (ER و PgR-، HER2+) یا منفی سه گانه (ER و PgR-، HER2-).
قبل از ارزیابی وضعیت جهش BRCA1 و BRCA2، یک تیم چند رشته ای شامل یک متخصص سرطان، یک متخصص ژنتیک و یک روانشناس یک مشاوره ژنتیک تومور برای هر بیمار برای تعیین وجود BRCA1 و/یا BRCA1 انجام دادند.یا افراد با خطر بالای PV در ژن BRCA2. انتخاب بیمار بر اساس دستورالعمل های انجمن انکولوژی پزشکی ایتالیا (AIOM) و توصیه های محلی سیسیلی انجام شد.(ii) نرهای قبل از میلاد.(iii) کسانی که BC و OC دارند.(IV) زنان مبتلا به BC <36 سال، TNBC <60 سال، یا دو طرف قبل از میلاد <50 سال.(v) سابقه پزشکی شخصی قبل از میلاد <50 سال و حداقل یکی از بستگان درجه اول: (الف) قبل از میلاد <50 سال.(ب) OC غیر مخاطی و غیرمرزی در هر سنی.ج) دو طرفه قبل از میلاد.(د) مرد قبل از میلاد.(ه) سرطان پانکراس؛(و) سرطان پروستات؛(vi) دو یا چند سابقه شخصی قبل از میلاد بیش از 50 سال و سابقه خانوادگی سرطان BC، OC یا سرطان لوزالمعده برای بستگانی که بستگان درجه اول یکدیگر هستند (از جمله بستگانی که او با آنها فامیل درجه یک است).(vii) سابقه شخصی OC و حداقل یکی از بستگان درجه اول: (الف) قبل از میلاد <50 سال.(ب) NOC;ج) دو طرفه قبل از میلاد.(د) مرد قبل از میلاد.(vii) ماده با OC سروز درجه بالا.
یک نمونه خون محیطی 20 میلی‌لیتری از هر بیمار گرفته شد و در لوله‌های EDTA (BD Biosciences) جمع‌آوری شد. DNA ژنومی از 0.7 میلی‌لیتر نمونه خون کامل با استفاده از کیت Isolation DNA Midi QIAsymphony DSP (QIAGEN, Hilden, Italy) طبق دستورالعمل‌های سازنده و وال‌متر F. , MA, USA) کمی سازی را انجام دهید.غنی‌سازی هدف و آماده‌سازی کتابخانه توسط سرآشپز سنجش تحقیقاتی Oncomine™ BRCA انجام می‌شود، آماده بارگیری در کیت Ion AmpliSeq™ Chef Reagents DL8 برای آماده‌سازی خودکار کتابخانه طبق دستورالعمل‌های سازنده. این کیت از دو مخزن پرایمر مالتی پلکس PCR تشکیل شده است که می‌تواند برای مطالعه تمام 10.000.001. 059.3) ژن ها. به طور خلاصه، 15 میکرولیتر از هر DNA نمونه رقیق شده (10 نانوگرم) برای آماده سازی کتابخانه به صفحات بارکد شده اضافه شد و همه معرف ها و مواد مصرفی بر روی ابزار Ion Chef بارگذاری شدند. آماده سازی کتابخانه خودکار و ادغام کتابخانه نمونه بارکد شده تهیه شد. سپس توسط دستگاه Quef 3 با دستگاه Ion numbero ™ ارزیابی شد. (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA) طبق دستورالعمل سازنده. در نهایت، کتابخانه‌ها در نسبت‌های هم مولار در لوله‌های نمونه کتابخانه Ion Chef™ (لوله‌های بارکد) ترکیب شده و بر روی ابزار Ion Chef™ بارگذاری می‌شوند. توالی‌یابی با استفاده از Ion Torrent S5 (Thermo Scientificrp) انجام شد. mo Fisher Scientific). تجزیه و تحلیل داده ها توسط Amplicon Suite (SmartSeq srl) و نرم افزار Ion Reporter انجام شد.
همه نام‌گذاری انواع از دستورالعمل‌های کنونی کنسرسیوم تنوع ژنوم انسانی پیروی می‌کنند که به صورت آنلاین در دسترس است (HGVS، http://www.hgvs.org/mutnomen). اهمیت بالینی انواع BRCA1/2 با استفاده از طبقه‌بندی کنسرسیوم بین‌المللی ENIGMA (شبکه مبتنی بر شواهد برای تفسیر همه پایگاه‌داده‌های مختلف Muinterpreting Germlines. مانند ARUP، BRCAEXCHANGE، ClinVar، IARC_LOVD، و UMD. این طبقه بندی شامل پنج دسته خطر متمایز است: خوش خیم (دسته I)، احتمالاً خوش خیم (رده II)، نوع با اهمیت نامشخص (VUS، رده III)، احتمال بیماری زا (دسته IV)، بیماریزای احتمالی (دسته IV) و همچنین بیماری زا (تجزیه و تحلیل عملکرد اطلاعاتی بر ساختار ابزار V و V). دسترسی به 30 پایگاه داده.32
برای تخصیص اهمیت بالینی بالقوه به هر VUS، از الگوریتم‌های پیش‌بینی پروتئین محاسباتی زیر استفاده شد: MUTATION TASTER، 33 PROVEAN-SIFT (http://provean.jcvi.org/index.php)، POLYPHEN-2 (http:// /genetics.bwh.harvard.edu.edu/pph2.VhvgvG) و Al gd_input.php). انواع طبقه بندی شده به عنوان کلاس 1 و 2 نوع وحشی در نظر گرفته شدند.
توالی یابی سانگر وجود هر یک از واریانت های بیماری زا را تایید کرد. به طور خلاصه، یک جفت آغازگر اختصاصی برای هر گونه شناسایی شده با استفاده از توالی های مرجع ژن BRCA1 و BRCA2 طراحی شد (NG_005905.2، NM_007294.3 و NG_012772.3، به ترتیب هدف، NM012772.3، NM59). توالی سانگر.
بیمارانی که برای ژن BRCA1/2 منفی بودند، با تقویت پروب وابسته به بستن چندگانه (MLPA) مطابق دستورالعمل سازنده برای ارزیابی حضور بازآرایی‌های ژنومی بزرگ (LGR) آزمایش شدند. به طور خلاصه، نمونه‌های DNA دناتوره شده و تا 60 BRCA1 و BRCA2 تقریباً در طول ژن مورد استفاده قرار می‌گیرند. محصولات تقویت، متشکل از مجموعه ای منحصر به فرد از آمپلیکون های PCR، سپس توسط الکتروفورز مویرگی و توسط نرم افزار Cofalyser.Net در ارتباط با جداول Cofalyser مخصوص دسته ای مناسب (www.mrcholland.com) آنالیز شدند.
متغیرهای بالینی آسیب شناسی منتخب (درجه بافت شناسی و شاخص تکثیر Ki-67٪) با حضور BRCA1/2 PV، با استفاده از نرم افزار Prism v. 8.4 با استفاده از آزمون دقیق فیشر با فرض معنی دار بودن p-value <0.05، همراه بود.
بین ژانویه 2017 و مارس 2021، 455 بیمار برای جهش‌های BRCA1/2 مورد غربالگری قرار گرفتند. آزمایش جهش در مرکز آزمایشی انکولوژی و هماتولوژی بیمارستان Policlinico انجام شد. طبق دستورالعمل سیسیلی (http://www.gurs.regione.Indice. 0 Gennaio 2020)، Rodolico of Catania – San Marco» به طور کلی، 389 بیمار سرطان سینه، 37 سرطان تخمدان، 16 سرطان پانکراس، 8 سرطان پروستات و 5 ملانوم وجود داشت.توزیع بیماران بر اساس نوع سرطان و نتایج آنالیز در شکل 1 نشان داده شده است.
شکل 1 نمودار جریانی را نشان می دهد که نمای کلی از مطالعه را نشان می دهد. بیماران مبتلا به تومورهای سینه، ملانوم، پانکراس، پروستات یا تخمدان برای جهش در ژن های BRCA1 و BRCA2 مورد آزمایش قرار گرفتند.
اختصارات: PVs، نوع بیماریزا.VUS، نوع با اهمیت نامشخص؛WT، توالی BRCA1/2 نوع وحشی.
ما بطور انتخابی مطالعات خود را بر روی گروه‌های سرطان پستان متمرکز کردیم. میانگین سنی بیماران 49 سال (محدوده 89-23) و عمدتاً زن بودند (n=376 یا 97%).
از این افراد، 64 نفر (17%) دارای جهش BRCA1/2 و همگی مونث بودند. سی و پنج نفر (9%) دارای PV و 29 نفر (7.5%) دارای VUS بودند. هفده (48.6%) از 35 گونه بیماری زا در BRCA1 و 18 (51.4%) (51.4%) در BRCA22 و 1.8% در BRCA21 و 21.7% در 5 BRCAUS2 رخ داد. درصد در BRCA2 (شکل 1 و 2). LGR در آنالیز MLPA وجود نداشت.
شکل 2. تجزیه و تحلیل جهش‌های BRCA1 و BRCA2 در 389 بیمار مبتلا به سرطان پستان.(ب) 389 بیمار مبتلا به سرطان پستان، سی و پنج بیمار (9%) دارای انواع بیماری زا BRCA1/2 (PVs) بودند. در میان آنها، 17 نفر (48.6%) ناقل BRCA1 PV (قرمز تیره) و 18 (51.4%) ناقل BRCA2 (قرمز روشن) بودند.(C) 29 (7.5%) از 389 نفر دارای ژن VUS، 5 (17.2%) ژن BRCA1 (نارنجی تیره) و 24 (82.8%) ژن BRCA2 (نارنجی روشن) بودند.
اختصارات: PVs، نوع بیماریزا.VUS، نوع با اهمیت نامشخص؛WT، توالی BRCA1/2 نوع وحشی.
ما در مرحله بعد شیوع زیرگروه های مولکولی BC را در بیماران مبتلا به BRCA1/2 PV بررسی کردیم. توزیع شامل 2 (5.7%) A مجرای A، 15 (42.9%) مجرای B، 3 (8.6%) مجرا B-HER2+، 2 (5.7%) HER2+، 13 (37.1%) بیماران TBM2+، 13.4 (37.1%) بیماران TBM مثبت (37.1%) بود. دارای مجرای B BC، 2 (11.8%) دارای بیماری HER2+، و 10 (58.8%) دارای TNBC بودند. تومورهای بدون جهش BRCA1 یا لومینال A یا B-HER2+ لومینال بودند (شکل 3). در زیرگروه BRCA2 مثبت، 10 تومور لومینال (55.1%، 2-3-H3) لومینال بودند (55.1%) 16.7٪ TNBC و 2 (11.1٪) لومنال A بودند (شکل 3). هیچ تومور HER2+ در این گروه وجود نداشت. بنابراین، جهش های BRCA1 در بیماران TNBC شایع است، در حالی که تغییرات BRCA2 در افراد لومن B غالب است.
شکل 3 شیوع زیرگروه‌های سرطان پستان در بیماران دارای انواع بیماری‌زا در BRCA1 و BRCA2. هیستوگرام‌هایی که توزیع BRCA1- (قرمز تیره) و BRCA2- (قرمز روشن) PV را در بین زیرگروه‌های مولکولی بیماران سرطان پستان نشان می‌دهد.
اختصارات: PVs، نوع بیماریزا.HER2+، گیرنده فاکتور رشد اپیدرمی انسانی 2 مثبت.TNBC، سرطان سینه سه گانه منفی.
متعاقباً، ما نوع و مکان‌یابی ژن PVs BRCA1 و BRCA2 را ارزیابی کردیم. در BRCA1 PV، 7 نوع تک نوکلئوتیدی (SNVs)، 6 حذف، 3 تکرار و 1 درج مشاهده کردیم. فقط یک جهش (c.5522delG) هر دو نشان‌دهنده یک کشف جدید c.5522delG بود. 039delCTAAT. این تغییر شامل حذف پنج نوکلئوتید (CTAAT) در اگزون 15 BRCA1 است که منجر به جایگزینی اسید آمینه لوسین با تیروزین در کدون 1679 می‌شود، و به دلیل تغییر چارچوب ترجمه با کدون توقف جایگزین پیش‌بینی‌شده، تنها یک مورد دیگر در یک مورد برش پروتئین مشاهده نشد. منطقه اجماع سایت splice (c.4357+1G>T) (جدول 1).
با توجه به BRCA2 PV، ما 6 حذف، 6 SNV و 2 تکرار مشاهده کردیم. هیچ یک از تغییرات یافت شده جدید نیستند. سه جهش در جمعیت ما تکرار شد، c.428dup و c.8487+1G>A در 3 مورد مشاهده شد، و به دنبال آن c.5851-2 مورد تکرار در 2 مورد AG23 تکرار شد. جهش c.8487+1G>A در ناحیه اینترون BRCA2 اینترون 19 (2/1 ±) رخ می دهد و بر روی توالی اجماع اتصال تأثیر می گذارد. واریانت بیماریزای TT به دلیل حذف 4 نوکلئوتیدی از موقعیت های نوکلئوتیدی 5851 تا 5854 در اگزون کد کننده 10 ژن BRCA2 است و منجر به تغییر چارچوب ترجمه با کدون توقف جایگزین پیش بینی شده می شود. جهش اول شامل جایگزینی آدنوزین (A) در اگزون 7 BRCA2 با یک گوانین (G) حاوی نوکلئوتید است که منجر به تغییر والین به ایزولوسین در کدون 211 می‌شود، اسید آمینه ایزولوسین یک اسید آمینه با خواص بسیار مشابه است. این تغییر در ناحیه mRNA واریتی مین دو برابر است. جایگزینی قبل از اگزون 13 ژن کد کننده BRCA2. تغییر c.7008-2A>T ممکن است رونوشت های متعددی با طول های مختلف ایجاد کند. علاوه بر این، در گروه PVs BRCA2، 4 مورد از 18 تغییر (22.2٪) اینترونیک بود.
سپس ما جهش‌های مضر BRCA1/2 را در حوزه‌های عملکردی و نواحی اتصال به پروتئین ترسیم کردیم (شکل 4). در ژن BRCA1، 50 درصد از PVها در منطقه خوشه‌ای سرطان پستان (BCCR) قرار داشتند، در حالی که 22 درصد جهش‌ها در منطقه خوشه‌ای سرطان تخمدان (OCCR) قرار داشتند (شکل 35، در BRCA4 درصد، در متغیرهای BRCA2). ناحیه BCCR و 42.8 درصد از جهش ها در OCCR قرار داشتند (شکل 4B). در مرحله بعد، موقعیت PV را در حوزه پروتئین BRCA1 و BRCA2 ارزیابی کردیم. برای پروتئین BRCA1، سه PV در حوزه حلقه و سیم پیچ پیچ خورده، و دو جهش در دامنه پروتئین BRCA2 و دو جهش در دامنه پروتئین BRCA2، تکرار شد. 3 تغییر اینترونیک و 3 تغییر اگزونیک در حوزه های اتصال الیگو/الیگوساکارید (OB) و برج (T) شناسایی شد (شکل 4B).
شکل 4 نمایش شماتیک پروتئین‌های BRCA1 و BRCA2 و محلی‌سازی واریانت‌های بیماری‌زا. این شکل توزیع واریانت‌های بیماری‌زای BRCA1 (A) و BRCA2 (B) را در بیماران مبتلا به سرطان پستان نشان می‌دهد. جهش‌های اگزونیک با رنگ آبی نشان داده شده‌اند، در حالی که واریانت‌های اینترونیک به رنگ نارنجی نشان داده شده‌اند. ارتفاع نوار نشان‌دهنده تعداد پروتئین‌های BRCA2 و موارد BRCA2 است. پروتئین BRCA1 شامل یک دامنه حلقه (RING) و یک توالی محلی سازی هسته ای (NLS)، یک دامنه سیم پیچی، یک دامنه خوشه ای SQ/TQ (SCD) و یک دامنه C ترمینال BRCA1 (BRCT) است. یک دامنه برج (T)، و یک NLS در سمت C. مناطقی به نام منطقه خوشه سرطان پستان (BCCR) و منطقه خوشه سرطان تخمدان (OCCR) در پایین نشان داده شده است.*نماینده جهش هایی است که کدون های توقف را تعیین می کند.
سپس ویژگی‌های بالینی پاتولوژیک قبل از میلاد را بررسی کردیم که ممکن است با حضور BRCA1/2 PV مرتبط باشد. سوابق بالینی کامل برای 181 بیمار BRCA1/2 منفی (غیر ناقل) و همه ناقلین (n = 35) در دسترس بود. بین میزان تکثیر تومور و درجه همبستگی وجود داشت.
ما توزیع Ki-67 را بر اساس میانه گروه خود (25٪، دامنه <10-90٪) محاسبه کردیم. افراد با Ki-67 <25٪ به عنوان "Ki-67 پایین" تعریف شدند، در حالی که افراد با مقادیر ≥ 25٪ "Ki-67 بالا" در نظر گرفته شدند. P1 خودروهای Ki-67 غیر قابل توجه و غیر قابل توجه بود. ریرز (شکل 5A).
شکل 5 همبستگی Ki-67 با توزیع درجه در زنان مبتلا به سرطان پستان با و بدون PV BRCA1 و BRCA2. (A) Boxplot نشان دهنده مقادیر متوسط ​​Ki-67 در 181 بیمار غیر ناقل BC در مقابل BRCA1 (18) یا BRCA2 (17) PV بیماران PV. بیماران سرطانی قبل از میلاد به گروه‌های درجه بافت‌شناسی (G2 و G3) بر اساس وضعیت جهش BRCA1 و BRCA2 (آزمودنی‌های WT، حامل‌های BRCA1 و BRCA2 PVs).
به همین ترتیب، ما بررسی کردیم که آیا درجه تومور با حضور BRCA1/2 PV همبستگی دارد یا خیر. از آنجایی که G1 BC در جمعیت ما وجود نداشت، بیماران را به دو گروه (G2 یا G3) تقسیم کردیم. مطابق با نتایج Ki-67، تجزیه و تحلیل ارتباط آماری معنی‌داری را بین درجه تومور و جهش BRCA1 غیرقابل‌تومور. 005) (شکل 5B).
پیشرفت‌ها در فناوری توالی‌یابی DNA، پیشرفت‌های بی‌سابقه‌ای را در آزمایش‌های ژنتیکی BRCA1/2 با پیامدهای حیاتی برای بیماران با سابقه خانوادگی سرطان ممکن کرده است. تا به امروز، تقریباً 20000 نوع BRCA1/2 بر اساس انجمن آمریکایی ژنتیک پزشکی شناسایی و طبقه‌بندی شده است. رام به طور گسترده در مناطق جغرافیایی متفاوت است. 37 در ایتالیا، نرخ PV BRCA1/2 از 8٪ تا 37٪ متغیر بود که تنوع گسترده ای را در داخل کشور نشان می دهد. قسمت شرقی جزیره
مطالعه ما یکی از اولین گزارش‌ها در مورد بروز BRCA1/2 PV در بیماران قبل از میلاد در سیسیل شرقی است. ما تجزیه و تحلیل خود را بر قبل از میلاد متمرکز کردیم، زیرا این شایع‌ترین بیماری در گروه ما است.
هنگام آزمایش 389 بیمار قبل از میلاد، 9% حامل BRCA1/2 PV بودند که به طور مساوی بین BRCA1 و BRCA2 توزیع شده است. این نتایج با نتایجی که قبلاً در جمعیت ایتالیا گزارش شده بود مطابقت دارد.28 جالب توجه است که 3% (13/389) از جمعیت ما مرد بودند. این نرخ بر اساس BRCA1% همه سرطان‌های پستان مردانه (1 BRCA1) بالاتر از حد انتظار است. خطر جهش. با این حال، هیچ یک از این مردان PV BRCA1/2 ایجاد نکردند، بنابراین آنها کاندیدای تجزیه و تحلیل مولکولی بیشتر برای رد وجود جهش‌های کمتر رایج مانند PALB2، RAD51C و D، در میان دیگران بودند. متغیرهایی با اهمیت نامشخص در 7٪ از افراد که در آنها BRCA2E21 با شواهدی مشابه وجود داشت، بازیابی شد.
هنگامی که توزیع زیرگروه های مولکولی BC را در زنان جهش یافته BRCA1/2 تجزیه و تحلیل کردیم، ارتباط شناخته شده بین TNBC و BRCA1 PV (58.8٪) و بین B BC و BRCA2 PV (55.6٪) مجرا را تأیید کردیم.
سپس بر روی نوع و محل PV BRCA1/2 تمرکز می‌کنیم. در گروه ما، رایج‌ترین PV BRCA1 c.5035_5039delCTAAT بود. اگرچه Incorvaia و همکارانش.این گونه را در گروه سیسیلی خود توصیف نکرده‌اند، نویسندگان دیگر آن را به‌عنوان یک رده زایا BRCA1 PV گزارش کرده‌اند. 34 چندین PV BRCA1 در گروه ما یافت شد - به عنوان مثال c.181T>G، c.514del، c.3253dupA و c.5266dupC - که دو مورد از این موارد مشاهده شده است. G و c.5266dupC) معمولاً در یهودیان اشکنازی اروپای شرقی و مرکزی (لهستان، چک)، اسلوونیایی، اتریشی، مجارستانی، بلاروسی و آلمانی) یافت می‌شوند، 44،45 و در ایالات متحده و آرژانتین اخیراً به‌عنوان یک «نوع ژرمینال عودکننده» در بیماران ایتالیایی مبتلا به سرطان پستان BC و OC تعریف شده است. در پالرمو و مسینا. جالب توجه است، حتی Incorvaia و همکاران.نوع c.3253dupA را در برخی خانواده‌ها در کاتانیا پیدا کرد. 28 معرف‌ترین PV‌های BRCA2 عبارتند از c.428dup، c.5851_5854delAGTT و نوع اینترونیک c.8487+1G>A، که با جزئیات بیشتر گزارش شده است. خانواده‌ها در شمال غربی سیسیل، عمدتاً در مناطق تراپانی و پالرمو، در حالی که c.5851_5854delAGTT PV در خانواده‌های شمال غربی سیسیل مشاهده شد. نوع 8487+1G>A در افراد مسینا، پالرمو و کالتانی‌ستا رایج‌تر بود.قبلاً تغییر c.5851_5854delAGTT در کلمبیا شرح داده شد. 37 PV دیگری BRCA2، c.631+1G>A، در بیماران BC و OC از سیسیل (آگریجنتو، سیراکوزا و راگوزا) یافت شده است. ) در همان بیمار، که فرض کردیم در حالت cis جدا شده است، همانطور که قبلاً گزارش شده بود. 34،46 این جهش‌های uble BRCA2 در واقع اغلب در منطقه ایتالیا مشاهده می‌شوند و مشخص شده است که کدون‌های توقف زودرس را معرفی می‌کنند که بر پیوند RNA پیام‌رسان تأثیر می‌گذارد و باعث از کار افتادن پروتئین BRCA2،48 می‌شود.
ما همچنین PVهای BRCA1 و BRCA2 را در مناطق احتمالی OCCR و BCCR از دامنه‌ها و ژن‌های پروتئینی ترسیم کردیم. این مناطق توسط Rebbeck و همکارانش توصیف شدند.به‌ترتیب به‌عنوان مناطق پرخطر برای ابتلا به سرطان تخمدان و پستان.49 با این حال، شواهد مربوط به ارتباط بین مکان‌های ژرمینال و خطر سرطان سینه یا تخمدان بحث‌برانگیز است. نواحی OCCR و BCCR و ویژگی‌های BC. این ممکن است به دلیل تعداد محدودی از بیماران مبتلا به جهش‌های BRCA1/2 باشد. از دیدگاه دامنه پروتئین، PV‌های BRCA1 در طول کل پروتئین توزیع شده‌اند و تغییرات BRCA2 ترجیحاً در دامنه تکرار BRC یافت می‌شوند.
در نهایت، ما ویژگی‌های بالینی آسیب‌شناسی BC را با BRCA1/2 PV مرتبط کردیم. با توجه به تعداد محدودی از بیماران شامل، ما فقط یک ارتباط معنی‌دار بین Ki-67 و درجه تومور پیدا کردیم. اگرچه ارزیابی و تفسیر Ki-67 تا حدودی بحث‌برانگیز است، مسلم است که نرخ‌های تکثیر بالا با افزایش خطر ابتلا به بیماری و کاهش تاریخ عود بیماری مرتبط است. Ki-67 20% است. با این حال، این آستانه در مورد جمعیت بیماران جهش BRCA1/2 ما که دارای میانگین Ki-67 25% است، صدق نمی کند. این روند در نرخ بالای Ki-67 را می توان با شیوع در گروه های B و TNBC مجرای ما توضیح داد، که از این میان، تعداد کمی از تومورهای A مجرای B و TNBC ممکن است نشان دهند که برخی از تومورهای A مجرای 27-30، شواهد بهتری وجود دارد. طبقه بندی بیماران بر اساس پیش آگهی آنها. 53،54 از نتایج تجزیه و تحلیل ما، یک همبستگی قابل توجهی تعجب آور نیست. بین Ki-67 بالا و درجات و وجود BRCA1 PV رخ می دهد. در واقع، تومورهای مرتبط با BRCA1 نمونه TNBC هستند و ویژگی های تهاجمی تری را نشان می دهند.16،17
در نتیجه، این مطالعه گزارشی در مورد وضعیت جهش BRCA1/2 در یک گروه BC از شرق سیسیل ارائه می‌کند. به طور کلی، یافته‌های ما با شواهد موجود، هم از نظر شیوع جهش و هم از نظر ویژگی‌های بالینی آسیب‌شناسی در BC، مطابقت دارد. که متمایز و کمتر از BRCA1/2 هستند. این امکان شناسایی و مدیریت صحیح تعداد فزاینده ای از افراد در معرض خطر ابتلا به سرطان به دلیل جهش های ژنتیکی را فراهم می کند.
ما تأیید کردیم که بیماران رضایت آگاهانه برای انتشار نمونه‌های تومور خود را به‌صورت ناشناس برای اهداف تحقیقاتی امضا کردند. همه بیماران رضایت آگاهانه کتبی را طبق اعلامیه هلسینکی امضا کردند. طبق خط‌مشی AOU Policlinico "G.Rodolico - S.Marco"، این مطالعه از بررسی اخلاقی مستثنی شد، زیرا رضایت کتبی BRCA1/2 بالینی انجام شد. داده های آنها برای اهداف تحقیقاتی.
ما از پروفسور پائولو ویگنری برای کمک در مراقبت از بیماران مبتلا به سرطان پستان به درخواست کمیته اخلاق تشکر می کنیم.
فدریکا مارتورانا افتخاری را از Istituto Gentili، Eli Lilly، Novartis، Pfizer گزارش می‌کند. سایر نویسندگان هیچ تضاد منافعی در این اثر اعلام نمی‌کنند.
1. Sung H, Ferlay J, Siegel RL, et al.Global Cancer Statistics 2020: GLOBOCAN میزان بروز و مرگ و میر 36 سرطان را در 185 کشور در سراسر جهان تخمین می زند.CA Cancer J Clin.2021;71(3):209-249.332210.doi: