”Älä koskaan epäile, että pieni joukko ajattelevia, omistautuneita kansalaisia ​​voi muuttaa maailmaa.Itse asiassa se on ainoa siellä."
Cureuksen missiona on muuttaa lääketieteellisen julkaisun pitkäaikainen malli, jossa tutkimusten tekeminen voi olla kallista, monimutkaista ja aikaa vievää.
Verihiutalerikas plasma/prp, kudosten regeneraatio, verihiutaleiden aktivaatio, glukoosiproliferatiivinen hoito, verihiutaleet, proliferatiivinen hoito
Lainaa tätä artikkelia seuraavasti: Harrison TE, Bowler J, Reeves K, et ai.(17. toukokuuta 2022) Glukoosin vaikutus verihiutaleiden määrään ja tilavuuteen: vaikutukset regeneratiiviseen lääketieteeseen.Cure 14(5): e25081.doi: 10.7759/cureus.25081
Verihiutalerikasta plasmaa (PRP) ja hypertonista glukoosiliuosta käytetään yleisesti injektiona regeneratiivisessa lääketieteessä, joskus yhdessä.Hypertonisen glukoosin vaikutusta verihiutaleiden hajoamiseen ja aktivaatioon ei ole aiemmin raportoitu.Testasimme kohonneiden glukoosipitoisuuksien vaikutusta verihiutaleiden ja punasolujen määrään sekä solutilavuuksiin PRP:ssä ja kokoveressä (WB).Trombosyyttimäärän nopea osittainen lasku tapahtui, kun kaikki glukoosiseokset sekoitettiin PRP:hen tai kokovereen, mikä on yhdenmukainen osittaisen hajoamisen kanssa. Ensimmäisen minuutin jälkeen verihiutalemäärät pysyivät vakaina, mikä viittaa siihen, että jäljellä olevat verihiutaleet mukautuivat nopeasti äärimmäiseen (>2000 mOsm) hypertonisuuteen. Ensimmäisen minuutin jälkeen verihiutalemäärät pysyivät vakaina, mikä viittaa siihen, että jäljellä olevat verihiutaleet mukautuivat nopeasti äärimmäiseen (>2000 mOsm) hypertonisuuteen. После первой минуты количество тромбоцитов оставалось стабильным, что указывает на быструю аккомоданыцитою аккомоданыцитов экстремального (>2000 мОсм) гипертонуса. Ensimmäisen minuutin jälkeen verihiutaleiden määrä pysyi vakaana, mikä osoitti jäljellä olevien verihiutaleiden nopeaa mukautumista äärimmäiseen (> 2000 mOsm) hypertonisuuteen.第一分钟后，血小板计数保持稳定，表明残余血小板迅速适应极端（> 2000 m（m（2000 mOsm）高渗状态. После первой минуты количество тромбоцитов оставалось стабильным, что указывает на быструю адаптацитю адаптацитмокоствоцитою стремальному (>2000 мОсм) гиперосмолярному состоянию. Ensimmäisen minuutin jälkeen verihiutaleiden määrä pysyi vakaana, mikä osoitti jäännösverihiutaleiden nopeaa sopeutumista äärimmäiseen (> 2000 mOsm) hyperosmolaariseen tilaan.Glukoosipitoisuudet 25 % tai enemmän johtivat merkittävään keskimääräisen verihiutaleiden tilavuuden (MPV) nousuun, mikä viittaa verihiutaleiden aktivoitumisen varhaiseen vaiheeseen.Lisätutkimuksia tarvitaan sen määrittämiseksi, tapahtuuko verihiutaleiden hajoamista tai aktivaatiota ja voiko hypertoninen glukoosin injektio yksinään tai yhdessä PRP:n kanssa tuottaa kliinistä lisähyötyä.
1950-luvulla amerikkalainen kirurgi George Hackett huomasi, että hän pystyi lievittämään pysyvästi nivel- ja selkäkipuja monilla potilailla ruiskuttamalla proliferatiivista liuosta jänteisiin ja nivelsiteisiin.Hänen kokeensa kanilla osoittivat, että hoito, jota hän kutsui proliferatiiviseksi terapiaksi, sai jänteet suurentumaan ja vahvistumaan.Histologiset tutkimukset ovat vahvistaneet, että tämän prosessin aikana muodostuu uutta kollageenia [1].
Ensimmäisten vuosikymmenten aikana kokeiltiin monia erilaisia ​​jakeluratkaisuja.1990-luvulla useimmat lääkärit pitivät korkeita glukoosipitoisuuksia turvallisimpana ja tehokkaimpana menetelmänä.Vaikutusmekanismi on kuitenkin edelleen epäselvä.
Harvoja kliinisiä tutkimuksia suoritettiin 1900-luvulla Hackettin työn jälkeen.Kuitenkin 2000-luvulla kiinnostus herätti uutta, ja useita onnistuneita kliinisiä tutkimuksia proliferatiivisesta terapiasta saatiin päätökseen alaselkäkivun [2], polven nivelrikon [3] ja lateraalisen epikondyliitin [4] hoidossa.
Kudosten uusiutuminen edellyttää kantasolujen osallistumista.Siksi korkeiden glukoosipitoisuuksien on jollain tapaa indusoitava kantasolujen migraatio, replikaatio ja erilaistuminen.Oletamme, että verihiutaleet voivat toimia lähettinä ja että korkeat glukoosipitoisuudet voivat saada verihiutaleet vapauttamaan sytokiineja ja kasvutekijöitä, mikä edistää regeneratiivisia prosesseja, erityisesti kantasolujen migraatiota alueille, joissa glukoosipitoisuus on korkea.
Verihiutaleiden aktivaatio edeltää aina solunsisäisen kalsiumin lisääntymistä [5].Liu et ai.2008 osoitti, että korkeat glukoositasot lisäävät transienttireseptoripotentiaalisten kanonisten tyypin 6 (TRPC6) kanavien aktiivisuutta plasmakalvossa, mikä johtaa kalsiumionien virtaamiseen verihiutaleisiin [6].Toinen tutkimus osoitti, että mikrotubuluksen reunavyöhykkeen altistuminen kalsiumioneille aiheuttaa marginaalivyöhykkeen rentoutumista, laajenemista ja muodonmuutoksia, mikä puolestaan ​​aiheuttaa muodon muuttumisen levystä pallomaiseksi, mikä johtaa verihiutaleiden keskimääräiseen tilavuuteen (MPV) [7].
Hypoteesimme tässä tutkimuksessa on, että verihiutaleiden altistuminen korkeille glukoosipitoisuuksille vaikuttaa mikrotubulusten marginaalialueeseen ja solunsisäiseen ympäristöön, mikä johtaa MPV:n kasvuun.
Kaikki osallistujat allekirjoittivat tietoisen suostumuslomakkeen sen jälkeen, kun tutkimuksen yksityiskohdat oli selitetty ja ennen näytteiden vastaanottamista.Tässä tutkimuksessa käytettiin vain PRP-näytteitä, joiden hematokriitti oli yli 2 %, jotta erytrosyyttien (erytrosyyttien) määrä ja punaisten verisolujen (MCV) keskimääräinen verisolumäärä voitiin sisällyttää vertailuun.
Tutkimus suoritettiin neljässä vaiheessa, ensimmäinen vaihe oli PRP ja loput vaiheet kokoveri (taulukko 1).Kuten aiemmin on kuvattu [8], kaikki suhteelliset keskipakovoimat (RCF, g-force) laskettiin keskipakoisruiskussa olevan veripylvään keskipisteestä (Rmid, cm).Valitsimme käyttää MPV:tä verihiutaleiden herkistymisen merkkinä ja verihiutaleiden määrää mahdollisen verihiutaleiden hajoamisen indikaattorina, jotka molemmat voidaan mitata helposti tavallisilla hematologisilla analysaattoreilla.
Ensimmäisessä vaiheessa 47 vapaaehtoista luovutti verinäytteitä – yhden putken etyleenidiamiinitetraetikkahappoa (EDTA) ja yhden PRP-kokoverinäytteen (antikoaguloitu natriumsitraatilla (NaCl, 3 %)) (taulukko 1).Aseta keinu heti putkeen.Täydellinen verenkuva (CBC) suoritettiin EDTA-näytteistä kolmena rinnakkaisena, ja NaCl-näytteet analysoitiin kolmena rinnakkaisena CBC-analyysiä varten, ja sitten PRP valmistettiin useilla edellä kuvatuilla menetelmillä [8].Kaikki PRP-näytteet valmistettiin sentrifugoimalla 900–1000 g.Sekoita kutakin PRP-näytettä vortex-sekoittimessa 5–10 sekuntia ja jaa sitten viisi 0,5 ml:n alikvoottia putkiin.
Verihiutalealtistuksen vaikutuksen arvioimiseksi kohonneisiin glukoosipitoisuuksiin sekoitettiin yhtä suuret määrät (0,5 ml) 0 %, 5 %, 12,5 %, 25 % ja 50 % glukoosia vedessä verihiutalenäytteiden kanssa, jotta saatiin 0 %, 2,5 % 6,25 %, 12,5 % ja 25 % pitoisuudet 5 minuutin glukoosi- ja 25 %:n koeputkessa.Kunkin seoksen TAC analysoitiin kolmena rinnakkaisena 15 minuutin kuluttua.Verihiutaleiden määrä (PLT), punasolujen määrä, MCV ja MPV laskettiin keskiarvoista jokaiselle putkelle, ja keskimääräinen verihiutaleiden määrä, punasolujen määrä, MCV ja MPV laskettiin kaikille PRP-näytteille.
Kun tiedonkeruun ensimmäinen vaihe oli saatu päätökseen, havaitsimme verihiutaleiden tilavuuden merkittävän kasvun PRP-verihiutaleissa D50W:n lisäämisen jälkeen.PRP-verihiutaleet eivät välttämättä edusta kaikkia veren verihiutaleita, ja PRP-elatusaine eroaa WB-väliaineesta.Siksi päätimme suorittaa toisen vaiheen kokeen D50W:n lisäämisen vaikutuksesta kokovereen.
Toiselle kierrokselle valitsimme otoskoon 30 ensimmäisen sarjan tulosten perusteella, kuten Analyysi-osiossa kuvataan.Tässä sarjassa 20 vapaaehtoista luovutti verinäytteitä (taulukko 1).Kokoveri (1,8 ml) vedettiin 3 ml:n ruiskuun ja antikoaguloitiin 0,2 ml:lla 40 % NaCl:a.Kokoveriruiskua sekoitettiin viiden sekunnin ajan vortex-sekoittimella ja CBC analysoitiin kolmena rinnakkaisena.Analyysin jälkeen antikoaguloitunut veri lisättiin 2 ml:aan 50-prosenttista glukoosia 5 ml:n ruiskussa (lopullinen glukoosipitoisuus oli noin 25 % (D25) ja asetettiin ravistusputkeen 30 minuutiksi. 30 minuutin kuluttua WB-ruiskujen D25/CBC analysoitiin kolmena kappaleena. Verihiutaleiden keskimäärä, RBC- ja keskimääräinen verihiutalemäärä, MLT-arvo , RBC-määrä, MCV ja MPV laskettiin jokaiselle näytteelle ennen glukoosin lisäämistä ja sen jälkeen.
Koska kokoveren verihiutaleet altistuvat yleensä hypertoniselle glukoosille proliferatiivisen glukoosihoidon aikana minimaalisen invasiivisen injektion vuoksi, eikä ole yleistä yhdistää PRP:tä hypertoniseen glukoosiin juuri ennen injektiota, päätimme tutkia hypertonista glukoosia yhdessä WB:n kanssa osiossa 1. Vaihe kolme ja neljä.Kussakin vaiheessa 20 vapaaehtoista lahjoitti 7-8 ml ACD-A:ta (happoa sisältävä trinatriumsitraatti (22,0 g/l), sitruunahappo (8,0 g/l) ja glukoosi (24,5 g/l), dekstroosisitraattiliuos) veren antikoagulantteihin (taulukko 1).MPV:n nousuun liittyvän kynnysprosentin määrittämiseen käytettiin vain yli 12,5 %:n glukoosiseoksia.Kolmannessa vaiheessa koeputkeen laitetaan 1 ml verta.Sekoita sitten verta vortex-sekoittimella 10 sekunnin ajan lisäämällä 1 ml 30 % glukoosia, 40 % glukoosia tai 50 % glukoosia putkeen, jotta saadaan lopullinen glukoosipitoisuus 15 %, 20 % ja 25 %.Veriglukoosinäytteet analysoitiin CBC:n suhteen välittömästi sekoittamisen jälkeen ja toistettiin joka toinen minuutti 30 minuutin ajan.
Alkusekoituksen aikana hypertonisen glukoosin ja WB:n tai PRP:n lisääminen suhteessa 1:1 altistaa verihiutaleet yli 25 %:n pitoisuuksille useiden sekuntien ajaksi.Neljännessä vaiheessa, jotta voidaan arvioida hypertonisen glukoosin vaikutus minimaalisilla alkuhuippupitoisuuksilla ja testata glukoosin vaikutuksen ylärajaa, lisäsimme vain pienen määrän verta D25W:hen tai D50W:hen.Laita 1 ml D25W tai D50W putkeen ja lisää 0,2 ml WB samalla sekoittaen näytettä 10 sekunnin ajan.Näissä tapauksissa veri altistettiin glukoosille pitoisuudella, joka oli noin 20 % lopullisen pitoisuuden yläpuolella, eikä 50 % lopullisen pitoisuuden yläpuolella, kuten vaiheessa 3, mikä johti 20,8 % ja 41,6 % lopulliseen glukoosipitoisuuteen.Sekanäytteet analysoitiin samalla aikavälillä kuin vaiheessa 3.
Jokaisen glukoosilaimennussarjan ensimmäisessä vaiheessa otettiin 30 näytettä, koska tämä oli sopiva näytekoko pilottitutkimukselle [9].Arvioi kunkin vaiheen lopussa (mukaan lukien ensimmäinen vaihe) otoskoon riittävyys käyttämällä kaavaa, jolla määritetään otoskoko, joka tarvitaan jatkuvan tulosmuuttujan keskiarvon arvioimiseen yhdessä populaatiossa.Kaava n = Z2 x SD2/E2.Tässä yhtälössä Z on Z-piste, SD on keskihajonta ja E on haluttu virhe [10].Alfamme on 0,05, mikä vastaa Z-arvoa 1,96, ja odotamme virheen 5 (prosentteina).Tästä syystä ratkaisemme n = (1,962 x SD2)/52.Tulokset osoittivat, että kuhunkin vaiheeseen tarvittava otoskoko oli pienempi kuin todellinen kerätty määrä.
Jaksojen 1, 3 ja 4 aikana, kun käytettiin useampaa kuin yhtä glukoosipitoisuutta, eri glukoosipitoisuuksien vaikutus analysoitiin vertaamalla murto-osamuutosta ajankohdan 0 ja jokaisen seuraavan ajan välillä (vaihe 1 15 minuutin kohdalla, jakso 3 15 minuutin kohdalla).ja neljä 15 sekunnin välein, sitten joka toinen minuutti.) Muutosnopeuksia kullakin ajanjaksolla verrattiin käyttäen Mann-Whitneyn U-testiä, koska tiedot eivät noudattaneet normaalijakaumaa Shapiro-Wilk-normaalisuustestillä määritettynä.Koska useiden ryhmien (viisi) 1-1-analyysi suoritettiin ensimmäisessä, kolmannessa ja neljännessä vaiheessa (yhteensä viisi), suoritettiin Bonferroni-korjaus halutun alfa-arvon säätämiseksi arvoon ≤0,01, mutta ei ≤0,05.
Verihiutaleiden määrän vähentäminen kaikilla hypertonisen dekstroosin pitoisuuksilla ja MPV:n lisääntyminen PRP-verihiutaleissa >12,5 %:n dekstroosipitoisuudessa: PRP-verihiutalemäärät nousivat yhdestä viiteen kertaan pitoisuuteen verrattuna kokoveren perustason, menetelmän mukaan (ei kuvattu). Verihiutaleiden määrän vähentäminen kaikilla hypertonisen dekstroosin pitoisuuksilla ja MPV:n lisääntyminen PRP-verihiutaleissa >12,5 %:n dekstroosipitoisuudessa: PRP-verihiutalemäärät nousivat yhdestä viiteen kertaan pitoisuuteen verrattuna kokoveren lähtötilanteeseen, menetelmän mukaan (ei kuvattu). Уменьшение количества тромбоцитов при всех концентрациях гипертонической декстрозы и увеличение MPV вхпцитов ции декстрозы > 12,5 %: количество тромбоцитов PRP увеличилось в 1-5 раз по сравнению с исходьной цельной да (ei показано). Vähentynyt verihiutaleiden määrä kaikilla hypertonisilla dekstroosipitoisuuksilla ja lisääntynyt MPV PRP-verihiutaleissa >12,5 %:n dekstroosipitoisuudessa: PRP-verihiutaleiden määrä lisääntyi 1-5 kertaa verrattuna kokovereen lähtötilanteessa menetelmästä riippuen (ei esitetty). ).在> 12,5 % 的葡萄糖浓度下，所有浓度的高渗葡萄糖降低血小板计数，䝿计数，PRP 血基线全血相比，PRP 血小板计数从浓度的1 倍上升到5 倍，因方法而异／讂未描 Yli 12,5 %:n glukoosipitoisuudessa korkea glukoosipitoisuus alentaa verenkuvaa, PRP-veren MPV kasvaa: 与基线全血:iin verrattuna PRP-verenkuva nousee 1-5 kertaa pitoisuuteen verrattuna (ei kuvattu). При концентрациях глюкозы >12,5% все концентрации гипертонической глюкозы снижали количество тромбо боцитах PRP: количество тромбоцитов PRP увеличивалось от 1- до 5-кратных концентраций по сравненыняю по сравненыныю цельной крови, в зависимости от метода (не описано ). Glukoosipitoisuuksilla > 12,5 %, kaikki hypertensiiviset glukoosipitoisuudet vähensivät verihiutaleiden määrää ja lisäsivät MPV:tä PRP-verihiutaleissa: PRP-verihiutalemäärät nousivat 1-5-kertaisesti verrattuna kokoveren peruspitoisuuksiin menetelmästä riippuen (kuten on kuvattu).Kuva 1 osoittaa, että verihiutaleiden määrä väheni lähes 75 % veteen laimentamisen jälkeen ja 20-30 % 15 minuutin laimentamisen jälkeen erilaisilla glukoosipitoisuuksilla verrattuna lähtötason PRP:hen ja tilavuuteen säädetyllä 1:1 laimennuksella (1- k1 tilavuuskorjauksella).k -1 jalostus).1 jalostus).
Solujen lukumäärä kussakin laimennoksessa ilmaistaan ​​murto-osana alkuperäisestä lukumäärästä ennen laimennusta.
MPV laski minimaalisesti PRP-tuotannon aikana ilman, että laimennuspitoisuudet muuttuivat 12,5 %:iin vedessä tai glukoosissa (mukaan lukien 25 % PRP-glukoosiseokset) ja nousi yli 20 % 50 % glukoosiliuokseen laimentamisen jälkeen (kuva .2).).Sitä vastoin erytrosyytit eivät osoittaneet merkittävää tilavuuden muutosta millään muulla laimennuksella kuin H2O:lla.
Solujen keskimääräinen tilavuus kussakin laimennoksessa ilmaistaan ​​prosentteina alkuperäisestä tilavuudesta ennen laimennusta.
Samanlainen mutta vähemmän selvä verihiutaleiden määrän väheneminen ja CVR:n lisääntyminen havaittiin BC:ssä, joka oli altistettu 50 % glukoosille (valmistettaessa 25 % glukoosia).Taulukossa 2 verrataan solujen lukumäärää ja solutilavuuksia kokoveressä, joka on laimennettu 50 % dekstroosiin, faasin 1 PRP-tietoihin, jotka on laimennettu 50 % dekstroosiin.Muutokset punasolujen määrässä ja punasolujen MCV:ssä eivät olleet ilmeisiä eivätkä olleet huomiomme kohteena.
SD = keskihajonta, MD = keskimääräinen ero ryhmien välillä, SE = keskimääräisen eron keskihajonta, RBC = erytrosyytit, PLT = verihiutaleet, PRP = verihiutalerikas plasma, WB = kokoveri
Kun D50W oli lisätty WB:hen, prosentuaalinen laimennuksella säädetty verihiutaleiden hävikki oli 7,7 % (310±73 vs. 286±96) verrattuna 17,8 %:iin PRP-laimennuksella D50W:ssa (664±348 vs. 544±277).MPV WB kasvoi 16,8 % (10,1 ± 0,5:stä 11,8 ± 0,6:een), kun taas MPV PRP kasvoi 26 % (9,2 ± 0,8 vs. 11,6 ± 0,7). Vaikka keskimääräiset erot sekä verihiutaleiden määrän vähenemisessä että MPV:n lisääntymisessä olivat merkitsevästi suuremmat PRP:n kanssa, muutokset verihiutaleiden määrän vähenemisessä valkosolujen sisällä olivat lähes merkitseviä (310 ± 73 - 286 ± 96 (-7,7 %); p = 0,06) ja MPV:n kasvu oli merkitsevää (10,1 ± 0,5 - 11,8 p) (+1,0,8). Vaikka keskimääräiset erot sekä verihiutaleiden määrän vähenemisessä että MPV:n lisääntymisessä olivat merkitsevästi suuremmat PRP:n kanssa, muutokset verihiutaleiden määrän vähenemisessä valkosolujen sisällä olivat lähes merkitseviä (310 ± 73 - 286 ± 96 (-7,7 %); p = 0,06) ja MPV:n kasvu oli merkitsevää (10,1 ± 0,5 - 11,8 p) (+1,0,8).Vaikka keskimääräiset erot sekä verihiutaleiden määrän vähenemisessä että CVR:n lisääntymisessä olivat merkitsevästi suurempia PRP:llä, muutokset verihiutaleiden määrän vähenemisessä WB:ssä olivat lähes merkitseviä (310 ± 73 - 286 ± 96 (-7,7 %); p = 0,06).увеличение MPV было значительным (от 10,1 ± 0,5 до 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001). MPV:n nousu oli merkittävä (10,1 ± 0,5:stä 11,8 ± 0,6:een (+16,8) p < 0,001).尽管PRP 在血小板计数减少和MPV 增加方面的平均差异显着更大眨血小板计数减少和MPV 增加方面的平均差异显着更大眨血小少血尡村菀小(几乎是显着的（310 ± 73 至 286 ± 96 (-7,7 %)；p = 0,06）和MPV 的增加是显着的（. 001).尽管 PRP 在 血小板 计数 和 和 增加 方面 的 平均 差异 显着 大 ， 但 尡 菅 冏的 几乎 是 显着 的 （（（310 ± 73 至 286 ± 96 (-7,7 %) ； p = .06）和MPV 的增加昀 的 增加昀 的 增加昀 的 增加 是 的 增加 是 的 增加 是 的 增加是暄± 0,6 (+16,8) p < ,001）.Muutos verihiutaleiden määrän vähenemisessä valkosolujen sisällä oli lähes merkitsevä (310 ± 73:sta 286 ± 96:een (-7,7 %); p = 0,06), vaikka PRP:llä oli merkittävästi suurempia keskimääräisiä eroja verihiutaleiden määrän laskussa ja MPV:n nousussa.ja MPV:n kasvu oli merkittävää.(от 10,1 ± 0,5 до 11,8 ± 0,6 (+16,8) р < 0,001). (10,1 ± 0,5 - 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001).
20 %:n glukoosin lopullinen konsentraatio vaadittiin merkittävän muutoksen näkemiseksi MPV:ssä, mutta muutos MPV:ssä oli selvempi lopullisella 25 %:n pitoisuudella.Verihiutaleiden menetys vakiintui alkuperäisen laskun jälkeen.Havaitsimme CVR:n alun jyrkän laskun, mutta CVR palautui nopeasti 25 %:n lopullisessa glukoosipitoisuudessa, joka oli merkittävästi korkeampi kuin CVR-tasot, jotka havaittiin lopullisilla glukoosipitoisuuksilla 20 % ja 15 % (kuva 3 ja taulukon 3 vasemmalla puolella; varjostetut ruudut).osoittavat p-arvot ≤ alfa Bonferroni-korjauksella 0,01).PLT:n määrässä oli myös alussa jyrkkä lasku, joka havaittiin alkuvaiheessa 0-15 s, ja pysyi sitten vakaana (15 sekunnista 30 minuuttiin; taulukon 4 vasemmalla).
Erilaisten glukoosipitoisuuksien lisääminen kokovereen johti MPV:n nopeaan laskuun, jota seurasi pitoisuudesta riippuvainen yli 20 %:n palautuminen.Selite näyttää glukoosipitoisuuden laimentamisen jälkeen.D15, D20 ja D25 suoritettiin 1:1-laimennoksella.D21 ja D41 suoritettiin 1:5-laimennoksella.
Taulukossa 4 esitetään muutos verihiutaleiden määrässä laimennettuna hypertonisella glukoosilla.Havaitsimme annoksesta riippuvan suhteen PLT-lukujen välittömän pudotuksen välillä 1:1-laimennoksella ja 1:5-laimennoksella.Verrattaessa 1:1-laimennoksia yhtenä ryhmänä 1:5-laimennoksiin, 1:1-ryhmän verihiutaleiden määrä väheni välittömästi vähemmän kuin 1:5-ryhmässä 66 ± 48 000 (23 %) verrattuna 99 ± 69 000 (37 %)., p = 0,014) 1:5-ryhmässä.Ensimmäisessä mittauspisteessä tapahtuneen alkupudotuksen jälkeen verihiutaleiden määrä prosentteina glukoosista stabiloitui (kuvio 4).
Kun kokoverta lisätään glukoosiin suhteessa 1:1, verihiutaleiden määrä vähenee noin 25 %.Kuitenkin, kun kokoverta lisättiin suhteessa 1:5, vähennys oli paljon suurempi – noin 50 %.
41 % glukoosista lisäsi MPV:tä nopeammin ja dramaattisemmin kuin 25 % tai 21 %.MPV-tulokset on esitetty kuvassa 3. Kaikissa muissa laimennoksissa ei havaittu välitöntä MPV:n alkulaskua 50 % glukoosin lisäämisen jälkeen.Käytettäessä 25 % glukoosia (glukoosipitoisuus 20,8 % lopullisessa laimennoksessa), MPV:n muutos oli verrattavissa 20 %:n glukoosin muutokseen 1:1-laimennoksella (kuvio 3).Vaikka muutokset MPV:ssä olivat alun perin suurempia 41 %:n sekapitoisuudella kuin 25 %:lla, ero MPV:ssä 41 %:n ja 25 %:n välillä 16 minuutin jälkeen ei ollut enää merkitsevä (taulukko 3, oikealla).On myös mielenkiintoista, että 25 % glukoosia lisäsi MPV:tä tehokkaammin kuin 20,8 %.
Tämä in vitro -tutkimus vahvisti osittain hypoteesimme. Se osoitti mahdollista osittaista verihiutaleiden hajoamista dekstroosisekoituksesta, verihiutaleiden nopeaa mukautumista äärimmäiseen hypertonisuuteen ja merkittävää MPV:n nousua vasteena yli 25 % hypertonisen dekstroosin pitoisuuksille. Se osoitti mahdollista osittaista verihiutaleiden hajoamista dekstroosisekoituksesta, verihiutaleiden nopeaa mukautumista äärimmäiseen hypertonisuuteen ja merkittävää MPV:n nousua vasteena yli 25 % hypertonisen dekstroosin pitoisuuksille. Он показал потенциальный частичный лизис тромбоцитов примесью декстрозы, быструю аккомодациальный аккомодациальный частичный лизис тромбоцитов примесью декстрозы, быструю аккомодациальный аккомодациальный частичный лизис тромбоцитов примесью декстрозы ртонуса и значительное повышение MPV в ответ на гипертоническую концентрацию декстрозы > 25%. Se osoitti mahdollista osittaista verihiutaleiden hajoamista dekstroosin kanssa, nopeaa verihiutaleiden mukautumista äärimmäiseen hypertonisuuteen ja merkittävää MPV:n kasvua vasteena hypertonisille dekstroositasoille >25 %.它显示出通过葡萄糖混合物潜在的部分血小板溶解，血小板快速适应枘竓 5 卥应枓竓% 浓度的高渗葡萄糖时MPV 显着上升.它 显示 出 通过 葡萄糖 潜在 的 部分 血小板 溶解 血小板 忼 速 适庯 极 速 适庯 极应> 25% 浓度 高渗 葡萄糖 时 时 mpv 显着。。。。. Он показывает потенциальный частичный лизис тромбоцитов смесями с глюкозой, бымиструю адаптациальный адаптацию пертонусу и значительное увеличение MPV в ответ на концентрацию гипертонической глюкозы > 25%. Se osoittaa mahdollista osittaista verihiutaleiden hajoamista glukoosiseosten vaikutuksesta, nopeaa verihiutaleiden sopeutumista äärimmäiseen hypertonisuuteen ja merkittävää MPV:n kasvua vasteena hypertoniselle glukoosille >25 %.Alkuperäinen lisäys oli maksimaalinen 41,6 %:n glukoosialtistuksessa, mutta MPV:n nousu lähestyi 25 % glukoosialtistusta noin 20 minuuttia altistuksen jälkeen.
Verihiutaleiden pitoisuuteen vaikuttaa glukoosi.Huomasimme, että PLT:n määrä väheni kaikilla glukoosilaimennoksilla.Verihiutaleiden määrän jyrkkä lasku PRP-sarjan H2O (0 %) -laimennoksissa saattaa liittyä osmoottiseen hajoamiseen.Vaihtoehtoisesti tämä voi olla verihiutaleiden paakkuuntumisen aiheuttama artefakti, mutta tämä on päinvastoin kuin MPV-muutoksen puuttuminen tässä laimennuksessa.Tämä havainto tarkoittaa, että jotkut verihiutaleet ovat erittäin herkkiä hypoosmolaariselle.
Kaikissa glukoosilaimennoksissa 1:1 PLT:n määrä laski 20-30 %, jopa D5W:llä (hypotoninen 252 mOsm:ssa), mikä saattaa viitata glukoosin spesifiseen ei-osmoottiseen vaikutukseen, koska sekä PLT että MPV pysyivät muuttumattomina pitoisuuden kolminkertaistuessa.glukoosi.D5W - D25W.Itse asiassa PLT-konsentraatioilla oli taipumus nousta hieman osmolaarisuuden kasvaessa.
PLT:n lasku 1:1-1:5-laimennosten välillä tarkoittaa, että liukenemisvaikutus riippuu glukoosin alku- ja loppupitoisuudesta.Jos se riippuisi vain alkuperäisestä pitoisuudesta, olisi odotettavissa ero PLT:n vähenemisessä 1:1-pitoisuuksien välillä.Mutta me emme.Jos hajoamisvaikutus riippuu vain lopullisesta glukoosipitoisuudesta, emme odota suurta eroa 20-prosenttisen 1:1-laimennoksen ja 20,8-prosenttisen 1:5-laimennoksen välillä.Ja silti teimme sen.
Jos verihiutaleiden häviäminen tapahtuu verihiutaleiden hajoamisen vuoksi, muodostuu osittainen lysaatti, jonka jälkeen sytokiinit ja kasvutekijät vapautuvat solunulkoiseen ympäristöön.Useat tutkimukset ovat osoittaneet, että verihiutalelysaatti on proliferaatioliuoksena lähes yhtä tehokas kuin PRP [11].PRP itsessään on osoitettu olevan tehokas ratkaisu proliferaation hoitoon [12-14].
Inaktiiviset verihiutaleet kiertävät levyn muodossa, joka on vahvistettu useilla sisäisillä rakenteilla.Aktivoinnin aikana ne ottavat enemmän pallomaisen tai ameevan muodon, mikä johtaa tilavuuden kasvuun.Tilavuuden kasvu vaatii pinta-alan lisäystä, joka on seurausta avoimen tubulusjärjestelmän (OCS) ekstruusiosta ja eksosyyttisten rakeiden lisäämisestä kalvoon.On vielä määritettävä, liittyykö hypertonisen glukoosin aiheuttamaan MPV:n nousuun jompikumpi tai molemmat näistä mekanismeista, mutta jos jälkimmäinen, MPV:n kasvu osoittaisi degranulaatiota.
Tämä tutkimus osoitti, että altistuminen korkeille glukoosipitoisuuksille PRP:ssä tai kokoverihiutaleissa johti MPV:n nousuun 15 minuutissa glukoosipitoisuuden ollessa 25 % ja 41,6 %.
Verihiutaleiden MPV:n lisääntyminen voi johtua ympäröivien mikrotubulusten kimppujen laajentumisesta vasteena kalsiumin sisäänvirtaukselle.Liu et ai.Glukoosin on osoitettu välittävän kalsiumin sisäänvirtausta verihiutaleen TRPC6-kanavan kautta [6].Hypoteesimme on, että glukoosi indusoi mikrotubulusten kimppujen rentoutumista, mikä johtaa MPV:n ja verihiutaleiden herkistymisen ja/tai aktivoitumisen lisääntymiseen.Tuloksemme perusteella tämä on kuitenkin vain osa tarinaa.Kokeissamme mikään D25W:n alapuolella oleva pitoisuus ei lisännyt MPV:tä.Koska emme ole testanneet altistumista 12,5–25 %:n glukoosipitoisuuksille, vaiheen 1 tuloksemme viittaavat siihen, että tällä glukoosipitoisuuksien alueella voi olla kynnys, joka johtaa MPV:n nousuun.Vaiheissa 3 ja 4 suoritetut lisätestit osoittivat, että 20-25 % glukoosia näyttää olevan kynnys tälle, mutta jää epäselväksi miksi.
Havaitsimme myös ~ 9 %:n laskun MPV:ssä sentrifugoinnin jälkeen.Ei ole selvää, johtuuko tämä MPV:n lasku suuremmista ja tiheämmistä verihiutaleista, jotka ovat jääneet loukkuun sentrifugin RBC-kerrokseen.Tämä havainto voi olla tärkeä kliinikoille, koska se voi tarkoittaa, että PRP-verihiutaleet ovat pienempi ja vähemmän tiheä WB-verihiutaleiden alajoukko.
Aiemmassa tutkimuksessa osoitimme, että PRP:n valmistus manuaalisilla menetelmillä on edullista [8].Jos glukoosi herkistää kudosten verihiutaleita tai PRP:tä tehden niistä herkempiä aktivaatiolle, tai jos PRP:tä tuotetaan osittaisella lysaattiominaisuuksilla, tämä voi tehostaa regeneraatiota ja vähentää hoidon tarvetta.Siksi PRP:n ja erittäin väkevän glukoosin yhdistelmä voi olla kustannustehokkaampaa kuin PRP tai glukoosi yksinään.
Tutkimuksessamme on useita puutteita.Ensinnäkin käytämme useilla eri menetelmillä saatua PRP:tä.Tämä voi johtaa ristiriitaisiin tuloksiin.Toiseksi emme pystyneet suorittamaan biokemiallista analyysiä millekään näytteestämme määrittääksemme tarkemmin, oliko verihiutaleiden aktivaatio tapahtunut.Haluaisimme mitata P-selektiiniä, verihiutaleiden tekijää 4, monosyyttisiä verihiutaleiden aggregaatteja tai muita verihiutaleiden aktivaation markkereita ymmärtääksemme paremmin alfajyvästen degranulaation asteen tai esiintymisen, mutta tämä ei kuulu tämän tutkimuksen piiriin.Kolmanneksi emme pystyneet vahvistamaan elektronimikroskopialla tai muilla menetelmillä, että MPV:n kasvu glukoosille altistuneissa verihiutaleissa johtui vaikutuksesta mikrotubulusten sotkuihin.
WB:n tai PRP:n ja 25 % glukoosin seokset lisäsivät MPV:tä, mikä merkitsi verihiutaleiden aktivaation alkamista, vaikka tämä tutkimus ei osoittanut aggregaation tai degranulaation etenemistä.Hypertoninen glukoosiseos johti verihiutaleiden menetykseen, mikä mahdollisesti edustaa lyyttistä vaikutusta.Verihiutaleiden osittainen aktivoituminen tai hajoaminen voi aiheuttaa kudoksen uusiutumista verihiutaleiden injektion jälkeen.Ei ole selvää, mihin kliinisiin seurauksiin nämä muutokset voivat johtaa.Lisätutkimukset ovat osoittaneet tarkempia aktivaation tai hajoamisen mittauksia ja ovat arvioineet hypertonisten glukoosiseosten erilaisia ​​kliinisiä vaikutuksia WB:n tai PRP:n kanssa.
Glukoosiproliferatiivinen hoito on yksinkertainen ja edullinen regeneratiivinen hoito, joka laajenee nopeasti ja tukee kliinistä tutkimusta.Tämä tutkimus ehdottaa fysiologista mekanismia, joka, jos se vahvistetaan, voisi auttaa meitä ymmärtämään osaa proliferatiivisen hoidon regeneratiivisesta mekanismista.
Biolääketieteellinen ja terveystietotekniikka Missourin yliopistossa, Kansas City School of Medicine, Kansas City, USA
Ihmiset: Kaikki tämän tutkimuksen osallistujat antoivat tai eivät antaneet suostumuksensa.International Society for Cellular Medicine on myöntänyt ICMS-2017-003 hyväksynnän.Kansainvälisen solulääketieteen järjestön Institutional Review Board on hyväksynyt seuraavan protokollan jatkokäyttöön: Otsikko: Verihiutalerikkaan plasman lääkesaannon laskeminen CBC-verihiutalemäärän perustason perusteella.Eläinkohteet: Kaikki kirjoittajat vahvistivat, että tässä tutkimuksessa ei ollut mukana eläimiä tai kudoksia.Eturistiriidat: ICMJE Uniform Disclosure Form -lomakkeen mukaisesti kaikki kirjoittajat ilmoittavat seuraavat: Maksu-/palvelutiedot: Kaikki kirjoittajat vakuuttavat, etteivät he ole saaneet taloudellista tukea miltään organisaatiolta lähetetylle työlle.Taloudelliset suhteet: Kaikki kirjoittajat vakuuttavat, että heillä ei tällä hetkellä tai viimeisen kolmen vuoden aikana ole taloudellisia suhteita mihinkään organisaatioon, joka saattaisi olla kiinnostunut lähetetystä työstä.Muut suhteet: Kaikki kirjoittajat vakuuttavat, että ei ole muita suhteita tai toimintoja, jotka voivat vaikuttaa lähetettyyn työhön.
Harrison TE, Bowler J, Reeves K et ai.(17. toukokuuta 2022) Glukoosin vaikutus verihiutaleiden määrään ja tilavuuteen: vaikutukset regeneratiiviseen lääketieteeseen.Cure 14(5): e25081.doi: 10.7759/cureus.25081
© Copyright 2022 Harrison et al.Tämä on avoimen pääsyn artikkeli, joka jaetaan Creative Commons Attribution License CC-BY 4.0 -lisenssin ehtojen mukaisesti.Rajoittamaton käyttö, jakelu ja jäljentäminen millä tahansa välineellä on sallittua edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde mainitaan.