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Plasma riche en plaquettes/prp, régénération tissulaire, activation plaquettaire, thérapie proliférative du glucose, plaquettes, thérapie proliférative
Citer cet article comme suit : Harrison TE, Bowler J, Reeves K, et al.(17 mai 2022) L'effet du glucose sur la numération et le volume plaquettaires : implications pour la médecine régénérative.Cure 14(5) : e25081.doi:10.7759/cureus.25081
Le plasma riche en plaquettes (PRP) et les solutions de glucose hypertonique sont couramment utilisés pour l'injection en médecine régénérative, parfois ensemble.L'effet du glucose hypertonique sur la lyse et l'activation des plaquettes n'a pas été signalé auparavant.Nous avons testé l'effet de concentrations élevées de glucose sur le nombre de plaquettes et d'érythrocytes, ainsi que sur les volumes de cellules dans le PRP et le sang total (WB).Une réduction partielle rapide du nombre de plaquettes s'est produite avec tous les mélanges de glucose mélangés avec du PRP ou du sang total, compatible avec une lyse partielle. Après la première minute, le nombre de plaquettes est resté stable, suggérant une adaptation rapide des plaquettes résiduelles à une hypertonicité extrême (> 2000 mOsm). Après la première minute, le nombre de plaquettes est resté stable, suggérant une adaptation rapide des plaquettes résiduelles à une hypertonicité extrême (> 2000 mOsm). После первой минуты количество тромбоцитов оставалось стабильным, что указывает н а быструю аккомодацию остаточных тромбоцитов до экстремального (>2000 мОсм) гипертон oui. Après la première minute, le nombre de plaquettes est resté stable, indiquant une adaptation rapide des plaquettes résiduelles à une hypertonicité extrême (> 2000 mOsm).。2000 mOsm）高渗状态。 После первой минуты количество тромбоцитов оставалось стабильным, что указывает н а быструю адаптацию остаточных тромбоцитов к экстремальному (>2000 мОсм) гиперосмол ярному состоянию. Après la première minute, la numération plaquettaire est restée stable, indiquant une adaptation rapide des plaquettes résiduelles à l'état hyperosmolaire extrême (>2000 mOsm).Des concentrations de glucose de 25 % et plus ont entraîné une augmentation significative du volume plaquettaire moyen (MPV), indiquant un stade précoce de l'activation plaquettaire.D'autres études sont nécessaires pour déterminer si la lyse ou l'activation des plaquettes se produit et si l'injection de glucose hypertonique seule ou en combinaison avec le PRP peut apporter un bénéfice clinique supplémentaire.
Dans les années 1950, le chirurgien américain George Hackett a découvert qu'il pouvait soulager de façon permanente les douleurs articulaires et dorsales chez de nombreux patients en injectant une solution proliférative dans les tendons et les ligaments.Ses expériences sur des lapins ont montré que le traitement, qu'il appelait thérapie proliférative, provoquait l'élargissement et le renforcement des tendons.Des études histologiques ont confirmé que du nouveau collagène est produit au cours de ce processus [1].
Au cours des premières décennies, de nombreuses solutions de distribution différentes ont été essayées.Dans les années 1990, la plupart des praticiens considéraient que des concentrations élevées de glucose étaient la méthode la plus sûre et la plus efficace.Cependant, le mécanisme d'action reste incertain.
Peu d'études cliniques ont été menées au XXe siècle à la suite des travaux de Hackett.Cependant, dans les années 2000, il y a eu un regain d'intérêt et plusieurs essais cliniques réussis de thérapie proliférative ont été achevés pour le traitement de la lombalgie [2], de l'arthrose du genou [3] et de l'épicondylite latérale [4].
La régénération tissulaire nécessite la participation de cellules souches.Par conséquent, des concentrations élevées de glucose doivent induire d'une manière ou d'une autre la migration, la réplication et la différenciation des cellules souches.Nous émettons l'hypothèse que les plaquettes peuvent agir comme messagers et que des concentrations élevées de glucose peuvent amener les plaquettes à libérer des cytokines et des facteurs de croissance, favorisant ainsi les processus de régénération, en particulier la migration des cellules souches vers des zones à fortes concentrations de glucose.
L'activation plaquettaire précède toujours une augmentation du calcium intracellulaire [5].Liu et al.en 2008 ont montré qu'une glycémie élevée augmentait l'activité des canaux transient receptor potential canonical type 6 (TRPC6) dans la membrane plasmique, ce qui entraînait un afflux d'ions calcium dans les plaquettes [6].Une autre étude a montré que l'exposition de la zone marginale des microtubules aux ions calcium provoque une relaxation, une expansion et une déformation de la zone marginale, qui à son tour provoque un changement de forme de disque à sphérique, entraînant un volume plaquettaire moyen (MPV) [7].
Notre hypothèse dans cette étude est que l'exposition des plaquettes à des concentrations élevées de glucose affecte la zone marginale des microtubules et l'environnement intracellulaire, entraînant une augmentation du MPV.
Tous les participants ont signé un formulaire de consentement éclairé après que les détails de l'étude ont été expliqués et avant de recevoir les échantillons.Dans cette étude, seuls les échantillons de PRP avec un hématocrite supérieur à 2 % ont été utilisés afin que le nombre d'érythrocytes (érythrocytes) et le volume corpusculaire moyen de globules rouges (MCV) puissent être inclus à des fins de comparaison.
L'étude a été menée en quatre phases, la première phase était le PRP et les phases restantes étaient le sang total (tableau 1).Comme décrit précédemment [8], toutes les forces centrifuges relatives (RCF, g-force) ont été calculées à partir du point médian (Rmid, en cm) de la colonne de sang dans la seringue centrifuge.Nous avons choisi d'utiliser le MPV comme marqueur de la sensibilisation plaquettaire et la numération plaquettaire comme indicateur de la lyse plaquettaire potentielle, qui peuvent tous deux être facilement mesurés sur des analyseurs d'hématologie standard.
Dans la première phase, 47 volontaires ont donné des échantillons de sang - un tube d'acide éthylènediaminetétraacétique (EDTA) et un échantillon de sang total PRP (anticoagulé avec du citrate de sodium (NaCl, 3%)) (tableau 1).Placer immédiatement la bascule dans le tube.Une numération globulaire complète (CBC) a été réalisée sur des échantillons d'EDTA en trois exemplaires, et des échantillons de NaCl ont été analysés en trois exemplaires pour l'analyse CBC, puis le PRP a été préparé par diverses méthodes décrites ci-dessus [8].Tous les échantillons de PRP ont été préparés par centrifugation à 900-1000 g.Mélangez chaque échantillon de PRP sur un mélangeur vortex pendant 5 à 10 secondes, puis divisez cinq aliquotes de 0,5 ml dans des tubes.
Pour évaluer l'effet de l'exposition des plaquettes sur les concentrations élevées de glucose, des quantités égales (0,5 ml) de glucose à 0 %, 5 %, 12,5 %, 25 % et 50 % dans l'eau ont été mélangées avec des échantillons de plaquettes pour obtenir des concentrations de 0 %, 2,5 %, 6,25 %, 12,5 % et 25 % du mélange de glucose et mélanger les tubes sur un agitateur de tubes à essai pendant 15 minutes.Le TAC de chaque mélange a été analysé en triple après 15 min.Le nombre de plaquettes (PLT), le nombre de RBC, le MCV et le MPV ont été moyennés pour chaque tube, et le nombre moyen de plaquettes, le nombre de RBC, le MCV et le MPV ont été calculés pour tous les échantillons de PRP.
Une fois la première phase de collecte de données terminée, nous avons remarqué une augmentation significative du volume plaquettaire dans les plaquettes PRP après l'ajout de D50W.Les plaquettes PRP ne représentent pas nécessairement toutes les plaquettes dans le sang, et le milieu PRP diffère du milieu WB.Par conséquent, nous avons décidé de mener un essai de deuxième phase sur l'effet de l'ajout de D50W au sang total.
Pour le deuxième tour, nous avons choisi une taille d'échantillon de 30 sur la base des résultats de la première série, comme décrit dans la section Analyse.Dans cette série, 20 volontaires ont donné des échantillons de sang (tableau 1).Du sang total (1,8 ml) a été prélevé dans une seringue de 3 ml et anticoagulé avec 0,2 ml de NaCl à 40 %.La seringue de sang total a été mélangée pendant cinq secondes avec un mélangeur vortex et le CBC a été analysé en triple.Après analyse, du sang anticoagulé a été ajouté à 2 ml de glucose à 50 % dans une seringue de 5 ml (la concentration finale en glucose était d'environ 25 % (D25) et placé dans un tube agité pendant 30 minutes. Après 30 minutes, D25/CBC dans des seringues WB ont été analysés en triple.
Parce que les plaquettes dans le sang total sont couramment exposées au glucose hypertonique pendant la glucosothérapie proliférative en raison d'une injection peu invasive, et qu'il n'est pas courant de combiner le PRP avec du glucose hypertonique juste avant l'injection, nous avons décidé d'étudier le glucose hypertonique en combinaison avec WB dans la section 1. Étapes trois et quatre.À chaque étape, 20 volontaires ont donné 7 à 8 ml d'ACD-A (acide contenant du citrate trisodique (22,0 g/l), de l'acide citrique (8,0 g/l) et du glucose (24,5 g/l), solution de dextrose citrate) pour les anticoagulants sanguins (tableau 1).Seuls les mélanges de glucose supérieurs à 12,5% ont été utilisés pour déterminer le pourcentage seuil associé à une augmentation du MPV.Au troisième stade, 1 ml de sang est placé dans un tube à essai.Mélangez ensuite le sang sur un mélangeur vortex pendant 10 secondes en ajoutant 1 ml de glucose à 30 %, de glucose à 40 % ou de glucose à 50 % dans le tube pour obtenir une concentration finale de glucose de 15 %, 20 % et 25 %, respectivement.Les échantillons sanguins de glucose ont été analysés pour le CBC immédiatement après le mélange et répétés toutes les deux minutes pendant 30 minutes.
Lors du mélange initial, l'ajout de glucose hypertonique 1:1 et de WB ou de PRP expose les plaquettes à des concentrations supérieures à 25 % pendant plusieurs secondes.Dans la quatrième étape, pour évaluer l'effet du glucose hypertonique avec des concentrations maximales initiales minimales et tester la limite supérieure de l'effet du glucose, nous n'avons ajouté qu'une petite quantité de sang à D25W ou D50W.Placer 1 ml de D25W ou D50W dans un tube et ajouter 0,2 ml de WB tout en vortexant l'échantillon pendant 10 secondes.Dans ces cas, le sang a été exposé au glucose à une concentration d'environ 20 % au-dessus de la concentration finale, plutôt qu'à 50 % au-dessus de la concentration finale comme dans la phase 3, ce qui a donné des concentrations finales de glucose de 20,8 % et 41,6 %.Les échantillons mélangés ont été analysés au même intervalle de temps qu'à l'étape 3.
Dans la première étape de chaque série de dilutions de glucose, 30 échantillons ont été prélevés car il s'agissait de la taille d'échantillon appropriée pour l'étude pilote [9].À la fin de chaque phase (y compris la première phase), évaluez l'adéquation de la taille de l'échantillon à l'aide de la formule utilisée pour déterminer la taille de l'échantillon nécessaire pour estimer la moyenne de la variable de résultat continue dans une population.Formule n = Z2 x SD2 /E2.Dans cette équation, Z est le score Z, SD est l'écart type et E est l'erreur souhaitée [10].Notre alpha est de 0,05, ce qui correspond à une valeur Z de 1,96, et nous nous attendons à une erreur de 5 (en pourcentage).Par conséquent, nous résolvons pour n = (1,962 x SD2)/52.Les résultats ont montré que la taille de l'échantillon requise pour chaque étape était inférieure au nombre réel collecté.
Pendant les périodes 1, 3 et 4 utilisant plus d'une concentration de glucose, l'effet de différentes concentrations de glucose a été analysé en comparant la variation fractionnelle entre le temps 0 et chaque temps suivant (phase 1 à 15 minutes, période 3 à 15 minutes).et quatre à 15 secondes, puis toutes les deux minutes.) Les taux de changement pour chaque période ont été comparés à l'aide du test U de Mann-Whitney car les données ne suivaient pas une distribution normale telle que déterminée par le test de normalité de Shapiro-Wilk.Étant donné qu'une analyse 1 pour 1 de plusieurs groupes (cinq) a été effectuée dans les première, troisième et quatrième étapes (cinq au total), une correction de Bonferroni a été effectuée pour ajuster la valeur alpha souhaitée à ≤0,01 mais pas ≤0,05.
Réduction du nombre de plaquettes avec toutes les concentrations de dextrose hypertonique et augmentation du MPV dans les plaquettes de PRP à une concentration de dextrose > 12,5 % : le nombre de plaquettes de PRP est passé d'une à cinq fois la concentration par rapport au sang total de base, variant selon la méthode (non représenté). Réduction du nombre de plaquettes avec toutes les concentrations de dextrose hypertonique et augmentation du MPV dans les plaquettes de PRP à une concentration de dextrose > 12,5 % : le nombre de plaquettes de PRP est passé d'une à cinq fois la concentration par rapport au sang total de base, variant selon la méthode (non représenté). Уменьшение количества тромбоцитов при всех концентрациях гипертонической декстроз ы и увеличение MPV в тромбоцитах PRP при концентрации декстрозы > 12,5% : количество тромбоци тов PRP увеличилось в 1-5 раз по сравнению с исходной цельной кровью, в зависимости от мето да (не показано). Diminution du nombre de plaquettes à toutes les concentrations de dextrose hypertonique et augmentation du MPV dans les plaquettes de PRP à une concentration de dextrose > 12,5 % : le nombre de plaquettes de PRP a augmenté de 1 à 5 fois par rapport au sang total de référence, selon la méthode (non illustré). ).在> 12,5 %基线全血相比，PRP 血小板计数从浓度的1 倍上升到5 倍，因方法而异（未描述）。 À une concentration de glucose > 12,5 %, la concentration élevée de glucose réduit la numération sanguine, le MPV sanguin PRP augmente : par rapport à 与基线全血, la numération sanguine du PRP augmente de 1 à 5 fois celle de la concentration (non décrite). При концентрациях глюкозы >12,5% личество тромбоцитов, un MPV повышали в тромбоцитах PRP : количество тромбоцитов PRP увеличи de 1 à 5 -        крови, в зависимости от метода (не описано ). À des concentrations de glucose> 12,5 %, toutes les concentrations de glucose hypertendues ont diminué le nombre de plaquettes et augmenté le MPV dans les plaquettes PRP : le nombre de plaquettes PRP a augmenté de 1 à 5 fois par rapport aux concentrations initiales dans le sang total, selon la méthode (comme décrit).La figure 1 montre que le nombre de plaquettes a diminué de près de 75 % après dilution dans l'eau et de 20 à 30 % après 15 minutes de dilution avec différentes concentrations de glucose par rapport au PRP de base et une dilution 1:1 ajustée au volume (1-k1 avec correction de volume).k -1 élevage).1 élevage).
Le nombre de cellules dans chaque dilution est exprimé en fraction du nombre d'origine avant dilution.
Le MPV a diminué de manière minimale pendant la production de PRP, sans autre modification des concentrations de dilution à 12,5 % dans l'eau ou le glucose (y compris les mélanges de glucose à 25 % de PRP) et a augmenté de plus de 20 % après dilution dans une solution de glucose à 50 % (Fig. 2).).En revanche, les érythrocytes n'ont montré aucun changement significatif de volume à toute dilution autre que H2O.
Le volume moyen de cellules dans chaque dilution est exprimé en pourcentage du volume d'origine avant dilution.
Une réduction similaire mais moins prononcée de la numération plaquettaire et une augmentation de la CVR ont été observées chez les BC exposés à 50 % de glucose (à formuler avec 25 % de glucose).Le tableau 2 compare le nombre de cellules et les volumes de cellules dans le sang total dilué dans du dextrose à 50 % avec les données de PRP de phase 1 diluées dans du dextrose à 50 %.Les changements dans le nombre de RBC et le RBC MCV n'étaient pas évidents et n'étaient pas au centre de notre attention.
SD = écart type, MD = différence moyenne entre les groupes, SE = écart type de la différence moyenne, RBC = érythrocytes, PLT = plaquettes, PRP = plasma riche en plaquettes, WB = sang total
Après avoir ajouté D50W à WB, le pourcentage de perte de plaquettes ajusté à la dilution était de 7,7 % (310 ± 73 contre 286 ± 96) contre 17,8 % pour la dilution de PRP dans D50W (664 ± 348 contre 544 ± 277).MPV WB a augmenté de 16,8 % (de 10,1 ± 0,5 à 11,8 ± 0,6), tandis que MPV PRP a augmenté de 26 % (9,2 ± 0,8 contre 11,6 ± 0,7). Bien que les différences moyennes dans la réduction du nombre de plaquettes et l'augmentation du MPV étaient significativement plus importantes avec le PRP, les changements dans la réduction du nombre de plaquettes dans WB étaient presque significatifs (310 ± 73 à 286 ± 96 (-7,7 % ); p = 0,06) et l'augmentation du MPV était significative (10,1 ± 0,5 à 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001). Bien que les différences moyennes dans la réduction du nombre de plaquettes et l'augmentation du MPV étaient significativement plus importantes avec le PRP, les changements dans la réduction du nombre de plaquettes dans WB étaient presque significatifs (310 ± 73 à 286 ± 96 (-7,7 % ); p = 0,06) et l'augmentation du MPV était significative (10,1 ± 0,5 à 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001).Bien que les différences moyennes dans la réduction du nombre de plaquettes et l'augmentation du CVR étaient significativement plus importantes avec le PRP, les changements dans le déclin du nombre de plaquettes au sein de WB étaient presque significatifs (310 ± 73 à 286 ± 96 (-7,7 % ); p = 0,06).увеличение MPV было значительным (de 10,1 ± 0,5 à 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001). l'augmentation du MPV était significative (de 10,1 ± 0,5 à 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001).PRP 在血小板计数减少和MPV 增加方面的平均差异显着更大，但WB几乎是显着的（310 ± 73 至286 ± 96 (-7.7%)；p = .06）和MPV 的增加是显着的（10.1 ± 0.5 到11.8 ± 0.6 (+16.8) p < .001） 。PRP的 几乎 是 显着 的 （（（310 ± 73 至 286 ± 96 (-7.7%) ； p = .06）和MPV 的增加是显着的（10.1 ± 0.5 到11.8 ± 0. 6 (+16,8) p < 0,001）。Le changement dans la réduction du nombre de plaquettes au sein de la WB était presque significatif (de 310 ± 73 à 286 ± 96 (-7,7 % ); p = 0,06), bien que le PRP ait des différences moyennes significativement plus importantes dans le déclin du nombre de plaquettes et l'augmentation du MPV.et l'augmentation du MPV était significative.(de 10,1 ± 0,5 à 11,8 ± 0,6 (+16,8) р < 0,001). (de 10,1 ± 0,5 à 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001).
Une concentration finale de 20 % de glucose était nécessaire pour voir un changement significatif de MPV, mais le changement de MPV était plus prononcé à la concentration finale de 25 %.La perte de plaquettes s'est stabilisée après la baisse initiale.Nous avons noté une forte diminution initiale de la CVR, cependant, la CVR a été rapidement restaurée à la concentration finale de glucose de 25 %, ce qui était significativement plus élevé que les niveaux de CVR observés aux concentrations finales de glucose de 20 % et 15 % (Fig. 3 et à gauche du tableau 3 ; cases ombrées).indiquent les p-values ​​≤ alpha avec une correction de Bonferroni de 0,01).Il y a également eu une chute initiale brutale du nombre de PLT, observée dans la phase initiale de 0-15 s, puis restée stable (de 15 s à 30 min ; gauche du tableau 4).
L'ajout de diverses concentrations de glucose au sang total a entraîné une diminution initiale rapide du MPV, suivie d'une récupération dépendante de la concentration de plus de 20 %.La légende indique la concentration de glucose après dilution.J15, J20 et J25 ont été réalisés en dilution 1:1.J21 et J41 ont été réalisées à une dilution 1:5.
Le tableau 4 montre l'évolution du nombre de plaquettes lorsqu'il est dilué dans du glucose hypertonique.Nous avons observé une relation dose-dépendante entre la chute immédiate du nombre de PLT à la dilution 1:1 et à la dilution 1:5.En comparant les dilutions 1:1 en un seul groupe avec les dilutions 1:5, le groupe 1:1 a eu une diminution immédiate du nombre de plaquettes inférieure au groupe 1:5 66 ± 48 000 (23 %) contre 99 ± 69 000 (37 %)., p = 0,014) dans le groupe 1:5.Après une première chute au premier point de mesure, la numération plaquettaire en pourcentage de glucose se stabilise (Fig. 4).
Lorsque du sang total est ajouté au glucose dans un rapport de 1:1, le nombre de plaquettes est réduit d'environ 25 %.Cependant, lorsque du sang total a été ajouté dans un rapport de 1: 5, la réduction était beaucoup plus importante - environ 50 %.
41 % de glucose ont augmenté le MPV plus rapidement et de manière plus spectaculaire que 25 % ou 21 %.Les résultats de MPV sont présentés sur la figure 3. À toutes les autres dilutions, aucune diminution initiale immédiate de MPV n'a été observée après addition de 50 % de glucose.Lors de l'utilisation de glucose à 25 % (concentration de glucose de 20,8 % à la dilution finale), le changement de MPV était comparable au changement de glucose à 20 % à une dilution de 1:1 (Fig. 3).Bien que les changements de MPV aient été initialement plus importants à la concentration mixte de 41 % qu'à 25 %, la différence de MPV entre 41 % et 25 % après 16 minutes n'était plus significative (tableau 3, à droite).Il est également intéressant de noter que 25 % de glucose ont augmenté le MPV plus efficacement que 20,8 %.
Cette étude in vitro a partiellement confirmé notre hypothèse. Il a montré une lyse plaquettaire partielle potentielle par un mélange de dextrose, une adaptation rapide des plaquettes à une hypertonicité extrême et une augmentation significative du MPV en réponse à des concentrations > 25 % de dextrose hypertonique. Il a montré une lyse plaquettaire partielle potentielle par un mélange de dextrose, une adaptation rapide des plaquettes à une hypertonicité extrême et une augmentation significative du MPV en réponse à des concentrations > 25 % de dextrose hypertonique. Le cas échéant ю аккомодацию тромбоцитов до экстремального гипертонуса и значительное повышение MPV в > 25 %. Il a montré une lyse plaquettaire partielle potentielle avec du dextrose, une adaptation plaquettaire rapide à une hypertonicité extrême et une augmentation significative du MPV en réponse à des taux de dextrose hypertonique> 25%.25 % 浓度的高渗葡萄糖时MPV 显着上升。它 显示 出 通过 葡萄糖 潜在 的 部分 血小板 溶解 血小板 快速 适应 极端 高渗 ， 以及 响应> 25% 浓度 高渗 葡萄糖 时 时 mpv 显着。。。。。 Le cas échéant рую адаптацию тромбоцитов к экстремальному гипертонусу и значительное увеличение MPV et plus de 25 %. Il montre une lyse plaquettaire partielle potentielle par des mélanges de glucose, une adaptation plaquettaire rapide à une hypertonicité extrême et une augmentation significative du MPV en réponse à un glucose hypertonique> 25%.L'augmentation initiale était maximale à une exposition au glucose de 41,6 %, mais l'augmentation de la MPV a approché une exposition au glucose de 25 % environ 20 minutes après l'exposition.
La concentration des plaquettes est affectée par le glucose.Nous avons remarqué que la quantité de PLT diminuait à toutes les dilutions de glucose.Une chute brutale du nombre de plaquettes dans les dilutions H2O (0%) de la série PRP peut être associée à une lyse osmotique.Alternativement, cela pourrait être un artefact causé par l'agglutination des plaquettes, mais cela contraste avec l'absence de changement de MPV à cette dilution.Cette découverte signifie que certaines plaquettes sont très sensibles à l'hypoosmolarité.
Dans toutes les dilutions 1: 1 de glucose, la quantité de PLT a diminué de 20 à 30%, même par D5W (hypotonique à 252 mOsm), ce qui peut indiquer un effet non osmotique spécifique du glucose, puisque PLT et MPV sont restés inchangés à une concentration multipliée par trois.glucose.de D5W à D25W.En fait, les concentrations de PLT avaient tendance à augmenter légèrement avec l'augmentation de l'osmolarité.
La diminution de PLT entre les dilutions 1:1 et 1:5 signifie que l'effet de dissolution dépend de la concentration initiale et finale en glucose.Si cela ne dépendait que de la concentration initiale, on s'attendrait à voir une différence de réduction de PLT entre des concentrations de 1:1.Mais nous ne le faisons pas.Si l'effet de lyse ne dépend que de la concentration finale en glucose, alors on ne s'attend pas à beaucoup de différence entre une dilution à 20% 1:1 et une dilution à 20,8% 1:5.Et pourtant nous l'avons fait.
Si la perte de plaquettes se produit en raison de la lyse plaquettaire, un lysat partiel se forme, après quoi des cytokines et des facteurs de croissance sont libérés dans l'environnement extracellulaire.Plusieurs études ont montré que le lysat plaquettaire est presque aussi efficace que le PRP comme solution de prolifération [11].Le PRP lui-même s'est avéré être une solution efficace pour le traitement de la prolifération [12-14].
Les plaquettes inactives circulent sous la forme d'un disque renforcé de plusieurs structures internes.Lors de l'activation, ils prennent une forme plus sphérique ou amibienne, ce qui entraîne une augmentation de volume.L'augmentation de volume nécessite une augmentation de la surface, qui est le résultat de l'extrusion du système de tubules ouverts (OCS) et de l'ajout de granules exocytaires à la membrane.Il reste à déterminer si l'augmentation du MPV induite par le glucose hypertonique implique l'un ou les deux de ces mécanismes, mais si ce dernier, alors une augmentation du MPV indiquerait une dégranulation.
Cette étude a montré que l'exposition à des concentrations élevées de glucose sur le PRP ou les plaquettes de sang total entraînait une augmentation du MPV en 15 minutes avec une concentration de glucose de 25% et 41,6%, respectivement.
L'augmentation du MPV plaquettaire peut être due à la dilatation des enchevêtrements de microtubules environnants en réponse à l'afflux de calcium.Liu et al.Il a été démontré que le glucose médie l'afflux de calcium à travers le canal plaquettaire TRPC6 [6].Notre hypothèse est que le glucose induit la relaxation des enchevêtrements de microtubules, conduisant à une augmentation de la MPV et de la sensibilisation et/ou de l'activation des plaquettes.Cependant, à en juger par nos résultats, ce n'est qu'une partie de l'histoire.Dans nos tests, aucune concentration inférieure à D25W n'a entraîné d'augmentation de MPV.Etant donné que nous n'avons pas testé l'exposition à des concentrations de glucose comprises entre 12,5% et 25%, nos résultats de phase 1 suggèrent qu'il peut y avoir un seuil dans cette gamme de concentrations de glucose qui conduit à une augmentation du MPV.Des tests supplémentaires aux stades 3 et 4 ont montré que 20 à 25% de glucose semble être le seuil pour cela, mais on ne sait pas pourquoi.
Nous avons également observé une diminution d'environ 9 % du MPV après centrifugation.Il n'est pas clair si cette diminution du MPV est due à des plaquettes plus grandes et plus denses piégées dans la couche de RBC de la centrifugeuse.Cette observation peut être importante pour les cliniciens car elle peut impliquer que les plaquettes PRP sont un sous-ensemble plus petit et moins dense des plaquettes WB.
Dans une étude précédente, nous avons montré que la préparation de PRP par des méthodes manuelles est peu coûteuse [8].Si le glucose sensibilise les plaquettes tissulaires ou le PRP, les rendant plus sensibles à l'activation, ou si le PRP est produit avec des propriétés de lysat partiel, cela peut améliorer la régénération et réduire le besoin de thérapie.Par conséquent, la combinaison de PRP et de glucose hautement concentré peut être plus rentable que le PRP ou le glucose seul.
Notre étude comporte plusieurs lacunes.Tout d'abord, nous utilisons du PRP obtenu à partir de plusieurs méthodes différentes.Cela peut conduire à des résultats contradictoires.Deuxièmement, nous n'avons pas été en mesure d'effectuer une analyse biochimique de l'un de nos échantillons pour déterminer plus précisément si l'activation plaquettaire s'était produite.Nous aimerions mesurer la P-sélectine, le facteur plaquettaire 4, les agrégats plaquettaires monocytaires ou d'autres marqueurs d'activation plaquettaire pour mieux comprendre le degré ou la présence de dégranulation des granules alpha, mais cela dépasse le cadre de cette étude.Troisièmement, nous n'avons pas été en mesure de confirmer par microscopie électronique ou par d'autres méthodes que l'augmentation du MPV dans les plaquettes exposées au glucose était due à l'effet sur les enchevêtrements de microtubules.
Des mélanges de WB ou de PRP avec 25 % de glucose ont augmenté le MPV, signalant le début de l'activation plaquettaire, bien que cette étude n'ait pas démontré la progression de l'agrégation ou de la dégranulation.Le mélange de glucose hypertonique a entraîné une perte de plaquettes, représentant peut-être un effet lytique.L'activation partielle ou la lyse des plaquettes peut provoquer une régénération tissulaire après l'injection des plaquettes.Les conséquences cliniques de ces changements ne sont pas claires.D'autres études ont démontré des mesures plus précises de l'activation ou de la lyse et ont évalué les différents effets cliniques des mélanges hypertoniques de glucose avec WB ou PRP.
La thérapie proliférative au glucose est une thérapie régénérative simple et peu coûteuse qui se développe rapidement et soutient la recherche clinique.Cette étude suggère un mécanisme physiologique qui, s'il est confirmé, pourrait nous aider à comprendre une partie du mécanisme régénérateur de la thérapie proliférative.
Informatique biomédicale et de la santé à l'Université du Missouri, Kansas City School of Medicine, Kansas City, États-Unis
Sujets humains : Tous les participants à cette étude ont donné ou non leur consentement.La Société internationale de médecine cellulaire a délivré l'approbation ICMS-2017-003.Le protocole suivant a été approuvé pour une utilisation ultérieure par le Comité d'examen institutionnel de la Société internationale de médecine cellulaire : Titre : Calcul du rendement des médicaments plasmatiques riches en plaquettes basé sur la numération plaquettaire CBC de base.Sujets animaux : Tous les auteurs ont confirmé qu'aucun animal ou tissu n'était impliqué dans cette étude.Conflits d'intérêts : conformément au formulaire de divulgation uniforme de l'ICMJE, tous les auteurs déclarent ce qui suit : Informations sur le paiement/service : tous les auteurs déclarent qu'ils n'ont reçu aucun soutien financier d'aucune organisation pour le travail soumis.Relations financières : Tous les auteurs déclarent qu'ils n'ont pas actuellement ou au cours des trois dernières années de relations financières avec une organisation qui pourrait être intéressée par le travail soumis.Autres relations : Tous les auteurs déclarent qu'il n'existe aucune autre relation ou activité susceptible d'affecter le travail soumis.
Harrison TE, Bowler J, Reeves K et al.(17 mai 2022) L'effet du glucose sur la numération et le volume plaquettaires : implications pour la médecine régénérative.Cure 14(5) : e25081.doi:10.7759/cureus.25081
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