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Composition et caractérisation de la nanoémulsion de chlorhexidine en tant qu'irrigant antibactérien prometteur du canal radiculaire : études in vitro et ex vivo
Avec Abdelmonem R., Younis MK, Hassan DH, El-Sayed Ahmed MAEG, Hassanien E., El-Batuti K., Elfaham A.
Rehab Abdelmonem, 1 Mona K. Younis, 1 Doaa H. Hassan, 1 Mohamed Abd El-Gawad El-Sayed Ahmed, 2 Ehab Hassanein, 3 Kariem El-Batuti, 3 Alaa Elfaham 31 Science et technologie, Faculté de pharmacie et de pharmacie industrielle, Université Misr, Ville du 6 octobre, Égypte ;2 Département de microbiologie et d'immunologie, Faculté de pharmacie, Université des sciences et technologies Misr, 6 octobre, Égypte ;3 Département d'endodontie, Université Ain Shams, Le Caire, Égypte Introduction et objectif : Le chlorhydrate d'hexidine [Chx.HCl] a une activité antibactérienne à large spectre, une action prolongée et une faible toxicité, il est donc recommandé comme irriguant potentiel du canal radiculaire.Le but de cette étude était d'utiliser une nouvelle composition de nanoémulsion Chx.HCl pour augmenter le pouvoir pénétrant, l'action nettoyante et antibactérienne du Chx.HCl et de l'utiliser comme irrigant canalaire.Méthodes : Des nanoémulsions de Chx.HCl ont été préparées à l'aide de deux huiles différentes : l'acide oléique et le Labrafil M1944CS, deux tensioactifs, le Tween 20 et le Tween 80, et un co-tensioactif, le propylène glycol.Tracez un diagramme de phase pseudo-ternaire pour indiquer le système optimal.Les formulations de nanoémulsion préparées ont été évaluées pour la teneur en médicament, le temps d'émulsification, la dispersibilité, la taille des gouttelettes, la libération de médicament in vitro, la stabilité thermodynamique, l'activité antibactérienne in vitro et les études in vitro de formulations sélectionnées.L'action pénétrante, nettoyante et antibactérienne de la nanoémulsion Chx.HCl 0,75 % et 1,6 % a été comparée à la taille normale des particules en tant qu'irrigant canalaire.Résultats.La formulation choisie était F6 avec 2% de Labrafil, 12% de Tween 80 et 6% de propylène glycol.Petite taille de particules (12,18 nm), temps d'émulsification court (1,67 secondes) et dissolution rapide après 2 minutes.Il s'est avéré être un système thermodynamiquement/physiquement stable.Par rapport à la taille de particule de Chx.HCl conventionnelle, la concentration plus élevée de nanoémulsion de Chx.HCl à 1,6 % a montré une meilleure pénétration en raison de la taille de particule plus petite.Par rapport à un matériau de granulométrie normale (2609,56 µm2), la nanoémulsion 1,6% Chx.HCl a la plus petite surface moyenne de débris résiduels (2001,47 µm2).Conclusion : La composition de la nanoémulsion Chx.HCl a une meilleure capacité de nettoyage et une action antibactérienne.Il a une action bactéricide très efficace contre Enterococcus faecalis, et le taux de contraction des cellules bactériennes est élevé ou complètement détruit.Mots clés : chlorhydrate de chlorhexidine, nanoémulsion, irrigant canalaire, pénétration, effet nettoyant, irrigant antibactérien.
Les nanoémulsions, une classe d'émulsions dont la taille des gouttelettes est comprise entre 50 et 500 nm, ont suscité beaucoup d'attention ces dernières années en raison de leurs propriétés uniques.Bonnes propriétés de nettoyage, ils ne sont pas affectés par la dureté de l'eau, dans la plupart des cas, ils ont une faible toxicité et l'absence d'interactions électrostatiques.2 La nanotechnologie a une taille de particules ultra-petite, un grand rapport surface/masse et des propriétés physiques et chimiques uniques par rapport à des produits en vrac similaires, et ouvre également de nouvelles perspectives dans le traitement et la prévention des infections dentaires.3 Le chlorhydrate de chlorhexidine (Chx.HCl) est peu soluble dans l'eau, très peu soluble dans l'alcool et se colore progressivement à la lumière.4,5 SH.HCl a une action antibactérienne à large spectre, une action prolongée et une faible toxicité.En raison de ces propriétés, il est également recommandé comme irriguant potentiel du canal radiculaire.Les principaux avantages du Chx.HCl sont sa faible cytotoxicité, son absence d'odeur et son absence de goût désagréable.6-9 Plusieurs types de lasers ont été utilisés pour améliorer la désinfection du canal radiculaire.L'effet bactéricide des lasers dépend de la longueur d'onde et de l'énergie, ainsi que de l'exposition thermique, qui provoque des modifications de la paroi cellulaire bactérienne, ce qui entraîne une modification du gradient osmotique jusqu'à la mort cellulaire.L'interaction entre les lasers et les irrigateurs de canal radiculaire ouvre de nouveaux horizons dans la désinfection de la pulpe.10 L'énergie ultrasonique produit des fréquences élevées mais de faibles amplitudes. Les fichiers sont conçus pour osciller à des fréquences ultrasonores de 25 à 30 kHz, qui dépassent la limite de la perception auditive humaine (> 20 kHz). Les fichiers sont conçus pour osciller à des fréquences ultrasonores de 25 à 30 kHz, qui dépassent la limite de la perception auditive humaine (> 20 kHz). Файлы предназначены для колебаний на ультразвуковых частотах 25–30 mois, plus tard аходятся за пределами слухового восприятия человека (> 20 кГц). Les limes sont conçues pour vibrer à des fréquences ultrasonores de 25 à 30 kHz, qui dépassent la portée de l'audition humaine (> 20 kHz).。这些文件被设计成在 25–30 kHz Файлы рассчитаны на колебания на ультразвуковых частотах 25–30 кГц, что выходит за пределы слухового восприятия человека (>20 кГц). Les limes sont conçues pour des vibrations à des fréquences ultrasonores de 25 à 30 kHz, ce qui dépasse les limites de l'audition humaine (> 20 kHz).Ils fonctionnent en oscillation transversale, fixant les modes caractéristiques des nœuds et des ventres sur leur longueur.Le terme « irrigation passive par ultrasons » (PUI) est un protocole d'irrigation dans lequel aucun instrument ou paroi n'entre en contact avec des limes ou des instruments endodontiques.Pendant le PUI, l'énergie ultrasonore est transférée de la lime vibrante à la solution d'irrigation dans le canal radiculaire.Ce dernier peut provoquer un écoulement sonique et une cavitation de l'agent de rinçage.11 Sur la base des données ci-dessus, il est jugé approprié d'utiliser la nanotechnologie pour évaluer l'action pénétrante et nettoyante améliorée du Chx.HCl.
Le chlorhydrate de chlorhexidine Chx.HCl a été gracieusement fourni par Arab Drug Company for Pharmaceuticals (Le Caire, Égypte).Le Labrafil M 1944 CS (oléoylpolyoxy-6-glycéride) a été généreusement fourni par Gattefosse (Saint Priest, France).Tween 20 (monolaurate de polyoxyéthylène (20) sorbitan), Tween 80 (monooléate de polyoxyéthylène (80) sorbitan), acide oléique, propylène glycol de Gomhorya Company (Le Caire, Egypte)).Extraction de dents à racine unique non cariées pour traitement parodontal ou orthodontique, Département des sciences maxillo-faciales, Faculté de médecine dentaire, Université Ain Shams, Le Caire, Égypte.Culture pure d'Enterococcus faecalis (souche ATCC 29212) cultivée dans un bouillon d'extrait de cœur de cerveau (BHI) (RC CLEANER, IIchung Dental Ltd., Séoul, Corée).
La solubilité de Chx.HCl dans différents milieux (acide oléique, Labrafil M 1944CS, Tween 20, Tween 80, propylène glycol et eau) a été étudiée.Un grand excès de Chx.HCl (50 mg) est placé dans un tube à centrifuger et 5,0 g de la phase moyenne sont ajoutés.Le mélange a été secoué dans un mélangeur vortex pendant 15 minutes puis stocké à température ambiante.Après 24 heures, le culot de médicament insoluble dans le tube a été centrifugé à 3 000 tr/min pendant 5 minutes pour obtenir un surnageant clair.Recueillir suffisamment de solution d'échantillon et la diluer avec du n-butanol.Les échantillons dilués ont été filtrés à travers du papier filtre Whatman 102, puis dilués de manière appropriée avec du n-butanol pour déterminer la concentration de médicament dans la solution saturée.Les échantillons ont été analysés avec un spectrophotomètre UV à 260 nm avec du n-butanol comme témoin.12.13
Un pseudo-diagramme de phase triple a été construit pour déterminer le rapport exact de chaque composant requis dans la formulation pour obtenir les paramètres optimaux d'une nanoémulsion idéale.14 La formulation a été formulée à l'aide d'huiles (c.-à-d. acide oléique et Labrafil M1944CS), de tensioactifs (c.-à-d. Tween 20 et Tween 80) et d'un tensioactif supplémentaire, c.-à-d. propylène glycol.Tout d'abord, des mélanges séparés de tensioactifs (sans cotensioactifs) et d'huiles ont été préparés dans différents rapports volumiques (de 1:9 à 9:1).Lorsque le mélange est titré avec de l'eau (en ajoutant de l'eau goutte à goutte), surveiller de près le mélange de clair à trouble comme point final.Ces extrémités sont ensuite repérées sur un pseudo-diagramme de phase triple.L'ensemble du processus a été répété pour des mélanges de tensioactif et de tensioactif secondaire (Smix) préparés dans des rapports 2:1 et 3:1 et mélangés avec des huiles sélectionnées15,16 une.
Des systèmes de nanoémulsion contenant Chx.HCl ont été préparés en utilisant du Labrafil M 1944 CS comme phase huileuse et du tensioactif Tween 80 ou 20 et du propylène glycol comme tensioactif supplémentaire et enfin de l'eau, tableau 1. Le médicament a été dissous dans du Labrafil M 1944 CS et l'eau combinée du tensioactif et du tensioactif secondaire a été ajoutée à une vitesse lente avec un mélange progressif.La quantité de tensioactif et de co-tensioactif ajouté, ainsi que le pourcentage de phase huileuse pouvant être ajouté, est déterminé à l'aide d'un diagramme de phase pseudo-ternaire.Un générateur d'ultrasons (Ultrasonic LC 60 H, Elma, Allemagne) a été utilisé pour atteindre la plage de taille souhaitée pour la dispersion des granulés.Puis équilibrez-le.17
Le test de dispersibilité a été effectué en utilisant un appareil de dissolution (Dr. Schleuniger Pharmaton, modèle Diss 6000, Thun, Suisse) dans lequel 1 ml de chaque préparation a été ajouté à 500 ml d'eau à 37 ± 0,5°C.Une agitation douce est assurée par des palettes de dissolution standard en acier inoxydable tournant à 50 tr/min.L'émulsion résultante a été déterminée visuellement et classée comme claire, translucide avec une teinte bleuâtre, laiteuse ou trouble.Choisissez une formule claire pour une recherche plus approfondie.18.19
L'extraction de Chx.HCl à partir de compositions de nanoémulsion optimisées basées sur un pseudo-diagramme de phase triple conduit à la production de n-butanol à l'aide de la technologie ultrasonique.Après dilution appropriée, les extraits ont été analysés par spectrophotométrie à une longueur d'onde de 260 nm pour la teneur en Chx.HCl.vingt
Pour tester le temps d'auto-émulsification, 1 ml de chaque composition a été ajouté dans un bêcher rempli de 250 ml d'eau distillée et maintenu à 37 ± 1°C sous agitation constante à 50 tr/min.Le temps d'auto-émulsification est pris comme le temps pendant lequel le préconcentré forme un mélange homogène après dilution.vingt-et-un
Pour l'analyse de la taille des gouttelettes, diluer 50 mg de la formulation optimisée à 1000 ml avec de l'eau dans un flacon et mélanger doucement à la main.La distribution de la taille des gouttelettes a été déterminée à l'aide d'un instrument Malvern Zetasizer 2000 (Malvern Instruments Ltd., Malvern, Royaume-Uni) dans des conditions de détection de rétrodiffusion de 173 °, une température de 25 ° C et un indice de réfraction de 1,330.vingt-deux
Des études de dissolution in vitro ont été réalisées en utilisant un appareil USP Type II (palette) (Dr. Schleuniger Pharmaton, Diss Model 6000) à 50 tr/min.De l'eau distillée (500 ml) maintenue à une température de 37 ± 0,5°C a été utilisée comme milieu de dissolution, et 5 ml de la composition préparée ont été ajoutés goutte à goutte au milieu de dissolution.Ensuite, à divers intervalles, 5 ml du milieu de dissolution ont été prélevés et la quantité de médicament libéré a été déterminée par spectrophotométrie à 254 nm.Les expériences ont été réalisées en triple.vingt-trois
Ensuite, les paramètres cinétiques de libération de Chx.HCl in vitro à partir de nanoémulsions préparées à sa base ont été mesurés.La cinétique du zéro, du premier et du second ordre et les modèles de diffusion de Higuchi ont été testés pour sélectionner la séquence cinétique la mieux adaptée à la libération de Chx.HCl.
2 ml de chaque formulation ont été stockés à température ambiante pendant 48 heures avant d'observer la séparation des phases.Des échantillons de 1 ml de chaque formulation de nanoémulsion Chx.HCl ont ensuite été dilués à 10 ml et 100 ml avec de l'eau distillée à 25°C et stockés pendant 24 heures.Ensuite, une séparation de phase a été observée.vingt-et-un
Ensuite, des échantillons de 2 ml de chaque composition ont été transférés séparément dans des bouteilles transparentes avec un bouchon à vis et conservés au réfrigérateur à 2°C pendant 24 heures.Ensuite, ils ont été retirés et stockés à 25°C et 40°C.Un seul cycle de refroidissement-décongélation a été réalisé.Les échantillons ont ensuite été observés pour la séparation des phases et la précipitation du médicament.vingt-et-un
Un échantillon de 5 ml de chaque formulation de nanoémulsion Chx.HCl a été transféré dans un tube en verre et placé dans une centrifugeuse de laboratoire (Shanghai Surgical Instrument Factory Microcentrifuge Model 800, Shanghai, République populaire de Chine) et centrifugé à 4000 tr/min pendant 5 minutes.Les échantillons ont ensuite été observés pour la séparation des phases et la précipitation du médicament.vingt-et-un
Toutes les expériences ont été approuvées par le Comité d'éthique institutionnelle de l'Université Ain Shams, en Égypte.50 dents humaines à racine unique non cariées avec un apex formé ont été sélectionnées.Les dents extraites ont été utilisées après obtention d'un consentement éclairé écrit signé par le patient.Les dents comprennent les incisives maxillaires et mandibulaires et les prémolaires mandibulaires.Les surfaces externes des racines ont été traitées avec une curette et toutes les dents ont été soumises à une stérilisation de surface dans du NaOCl à 0,5 % pendant 24 heures, puis stockées dans une solution saline stérile jusqu'à leur utilisation.La couronne a été retirée avec un disque diamanté Safe Side et la longueur de la dent a été normalisée à 16 mm de l'apex au bord coronaire.24,25 Selon la solution de rinçage, les dents sont réparties dans les groupes suivants :
(A) Les échantillons du groupe (n = 24) ont été lavés avec une nanoémulsion Chx.HCl.Sous-groupe (I) (n = 12) échantillons rincés avec 5 ml de nanoémulsion Chx.HCl à une concentration de 0,75 %.Le sous-groupe (II) (n = 12) a rincé les échantillons avec 5 ml de nanoémulsion Chx.HCl à 1,6 %.(B) Un groupe (n = 24) d'échantillons sera lavé avec 5 ml de taille normale de particules de Chx.HCl à 2 %.Groupe témoin : (n = 2) lavé avec 5 ml de solution saline sans activation.
Ont été sélectionnées 44 dents humaines à racine unique non cariées avec une pointe formée.Les dents comprennent les incisives maxillaires et mandibulaires et les prémolaires mandibulaires.Les surfaces externes des racines ont été traitées avec une curette et toutes les dents ont été soumises à une stérilisation de surface dans du NaOCl à 0,5 % pendant 24 heures, puis stockées dans une solution saline stérile jusqu'à leur utilisation.Les couronnes ont été retirées avec un disque diamanté de sécurité et la longueur de la dent a été normalisée à 16 mm de l'apex au bord coronaire.24,25,29
Préparation mécanique de la lime apicale principale taille 50 selon les méthodes standards.Utilisez une solution saline stérile comme irrigant pendant la chirurgie.Enfin, le canal radiculaire a été rincé avec 2 ml d'EDTA à 17 % pendant 1 minute pour éliminer la boue dentinaire.Toute la surface de la racine, y compris le foramen apical de chaque spécimen, a été recouverte de deux couches de vernis à ongles (colle cyanoacrylate) pour éviter les fuites.Les dents sont ensuite placées verticalement dans un bloc de tartre pour faciliter la manipulation et l'identification.29-33 Les échantillons ont ensuite été autoclavés à 121 °C et 15 psi pendant 20 minutes.Après stérilisation, tous les échantillons ont été transportés et traités dans des conditions stériles à l'aide d'instruments stériles.Les canaux radiculaires ont été contaminés avec une culture pure d'Enterococcus faecalis (souche ATCC 29212) cultivée dans un bouillon d'extrait de coeur-cervelle (BHI) pendant 24 heures à 37°C.À l'aide d'une micropipette stérile, injecter une suspension claire d'inoculum d'E. faecalis dans les canaux radiculaires préparés de toutes les dents.Les blocs ont ensuite été placés dans des béchers stériles et incubés à 37°C pendant 24 heures.31, 34, 35
(A) Les échantillons du groupe (n = 24) ont été lavés avec une nanoémulsion Chx.HCl.Les échantillons du sous-groupe (I) (n = 12) ont été rincés avec 5 ml de nanoémulsion Chx.HCl à 0,75 %.Le sous-groupe (II) (n = 12) a rincé les échantillons avec 5 ml de nanoémulsion Chx.HCl à 1,6 % de concentration.
Groupe témoin : témoin positif, (n = 4) le canal radiculaire contaminé a été rincé avec 5 ml de solution saline et conservé comme témoin positif.Contrôle négatif : (n = 4) Les échantillons n'ont pas reçu d'injection de suspension, c'est-à-dire que le canal radiculaire n'était pas contaminé par E. faecalis, et a été maintenu stérile comme contrôle négatif pour confirmer la stérilisation et la fiabilité de la procédure.Utiliser 5 ml de solution de lavage test dans chaque échantillon.Chaque échantillon a ensuite été soumis à un lavage final avec 1 ml de solution saline stérile.
Un embout en papier stérile de taille 35 est utilisé pour prélever des échantillons de canaux radiculaires.La pointe en papier a été insérée dans le tube à la longueur de travail, laissée pendant 10 secondes, puis transférée sur des plaques de gélose pour déterminer le nombre d'unités formant colonies (UFC) par plaque.Les plaques ont été incubées à 37 °C pendant 24 heures, puis évaluées visuellement pour la croissance bactérienne.La plaque transparente montre une stérilisation complète.Les plaques floues sont considérées comme présentant une croissance positive.Le nombre moyen d'UFC dans la zone de croissance bactérienne par plat a été déterminé et le nombre d'UFC a été calculé.Les survivants sont principalement mesurés avec des comptes viables sur des plaques d'égouttement.De plus, un gobelet verseur a été utilisé pour compter les UFC faibles, et une dilution à 106 a été utilisée pour compter les UFC élevées.36.37
Préparer des tubes contenant 15 ml de milieu gélosé décongelé pré-stérilisé à l'autoclave le même jour que pour l'expérience.Enterococcus faecalis est un coccus anaérobie à Gram positif facultatif qui peut survivre à un pH, une acidité et des températures très élevés.39 Des échantillons de bactéries (Enterococcus faecalis ATCC 29212) ont été préparés en mélangeant des cellules de colonies avec une solution saline stérile.Les échantillons bactériens ont ensuite été dilués avec une solution saline pour correspondre à McFarland 0,5, équivalent à 108 UFC/mL.Le volume d'échantillon ajouté était de 10 ul.39 Un étalon de turbidité (McFarland 0,5)40 a été préparé en versant 0,6 ml d'une solution de dihydrate de chlorure de baryum à 1 % (10 g/l) dans une éprouvette graduée de 100 ml et en remplissant à 100 ml avec de l'acide sulfurique à 1 % (10 g/l).Les étalons de turbidité ont été placés dans les mêmes tubes que les échantillons de bouillon et conservés à température ambiante pendant 6 mois dans l'obscurité et scellés pour empêcher l'évaporation.Ouvrez le couvercle de la boîte de Pétri vide et versez l'échantillon au milieu de la boîte.Si la gélose est complètement solidifiée, retourner la plaque et incuber à 37°C pendant 24 heures.
Toutes les données ont été recueillies, tabulées et soumises à une analyse statistique.L'analyse statistique a été effectuée à l'aide d'IBM® SPSS® Statistical Version 17 pour Windows (SPSS Inc., IBM Corporation, Armonk, NY, USA).
La solubilité de Chx.HCl dans diverses phases huileuses, des solutions de surfactant, des solutions de co-surfactant et de l'eau a été étudiée.Chx.Hcl a la solubilité la plus élevée dans le Labrafil M et la solubilité la plus faible dans l'acide oléique.Une solubilité plus élevée du médicament dans la phase huileuse est importante pour les nanoémulsions car les nanoémulsions sont capables de maintenir le médicament sous forme dissoute, ce qui signifie qu'une solubilité plus élevée du médicament dans l'huile entraîne moins d'huile dans la formulation et donc moins de médicament.chargement Une certaine quantité de tensioactif et de co-tensioactif est nécessaire pour émulsionner les gouttelettes d'huile.
Un diagramme de phase pseudo-triple a été construit pour définir les régions de nanoémulsion et optimiser les concentrations d'huiles sélectionnées, de tensioactifs et de tensioactifs supplémentaires (Labrafil M, Tween 80, Tween 20 et propylène glycol, respectivement).Chx.Hcl montre une très faible solubilité dans l'acide oléique, ce qui entraîne un trouble lorsque l'acide oléique est titré avec la première goutte d'eau.Par conséquent, le système d'acide oléique a été exclu de cette étude.D'autres formulations ont été préparées en utilisant un mélange 1:9 d'huile et de tensioactif.plage de pH et de force ionique, c'est pourquoi ces tensioactifs ont été choisis.
Toutes les formulations préparées étaient claires à l'exception du Système F2, qui semblait trouble et a donc été exclu des études d'évaluation ultérieures.
La formulation de nanoémulsion idéale doit pouvoir se disperser complètement et rapidement lorsqu'elle est diluée avec une agitation douce.Les formulations de nanoémulsion Chx.HCl ont montré des temps d'émulsification courts, de 1,67 à 12,33 secondes.Le Tween 80 a le temps d'émulsification le plus court.Ceci peut s'expliquer par la plus grande capacité de solubilisation du Tween 80. Le temps d'auto-émulsification augmente avec l'augmentation de la concentration en tensioactif, ce qui peut être dû à l'augmentation de la viscosité du système sous l'action du tensioactif.
La taille des gouttelettes de l'émulsion détermine la vitesse et l'étendue de la libération du médicament.Une taille de gouttelette d'émulsion plus petite entraîne un temps d'émulsification plus court et une plus grande surface pour l'absorption du médicament.La taille moyenne des gouttelettes des compositions sélectionnées de la nanoémulsion Chx.HCl était de 711 ± 0,44, 587 ± 15,3, 10,97 ± 0,11, 16,43 ± 4,55 et 12,18 ± 2,48, et le PDI était de 0,76, 0,19, 0,61, 0,47 et 0,76 pour F1, F2., F3 et 0,16 respectivement F4, F5 et F6.Les formulations contenant du Tween 80 en tant que tensioactif présentaient des sphérolites plus petites.Cela peut être dû à son pouvoir émulsifiant plus élevé.Une valeur PDI inférieure indique une distribution de taille de système plus étroite.Ces formulations ont un aspect propre parce que leurs rayons de gouttelettes sont plus petits que la longueur d'onde optique de la lumière visible (390-750 nm) à laquelle se produit une diffusion minimale de la lumière.41
Sur la fig.2 montre le pourcentage de Chx.HCl libéré de la formulation formulée.La libération complète du médicament à partir des formulations préparées de la nanoémulsion Chx.HCl variait de 2 à 7 minutes.Il a été observé que le taux de libération de médicament le plus élevé a été obtenu dans le cas de la formulation de nanoémulsion Chx.HCl F6 (2 min), ce qui peut être dû à la présence de Tween 80, qui a montré un degré d'émulsification plus élevé, et à la nanoémulsion résultante.fournit une grande surface pour la libération de médicament, permettant des taux de libération de médicament accrus.Dans le même temps, les propriétés de solubilité du propylène glycol permettent de dissoudre une grande quantité de tensioactifs hydrophiles dans l'huile.40
La libération de Chx.HCl in vitro s'est avérée suivre un ordre cinétique différent, et aucun ordre cinétique clair ne peut refléter la libération de médicament à partir de formulations de nanoémulsion préparées différemment.La libération cinétique des médicaments F4 est une cinétique de premier ordre, ce qui signifie qu'ils sont libérés proportionnellement à la quantité de médicament restant à l'intérieur.42 La libération cinétique d'autres médicaments correspondait au modèle de diffusion de Higuasha, qui indiquait que la quantité de médicament libérée était proportionnelle à la racine carrée du médicament total et à la solubilité du médicament dans la nanoémulsion.42
Les formulations sélectionnées ont été soumises à une stabilité thermodynamique variable par des tests de contrainte utilisant des cycles de chauffage-refroidissement, de centrifugation et de cycles de congélation-décongélation.Il a été observé que les formulations F3 et F4 présentaient une précipitation du médicament après les cycles de décongélation, tandis que F1 présentait un épaississement (gélification).F5 et F6 ont réussi le cycle de centrifugation continue, le test de chauffage-refroidissement et le test de congélation-décongélation.Les nanoémulsions sont des systèmes thermodynamiquement stables formés à certaines concentrations d'huile, de tensioactif et d'eau sans séparation de phases, émulsification ou craquage.C'est la stabilité thermique qui distingue les nanoémulsions des émulsions, qui sont cinétiquement stables et finiront par se séparer en phases.19 F3 a montré une taille de particule plus grande (587 nm) que les autres formulations, ce qui peut expliquer la séparation des phases et la précipitation du médicament dans les tests de stabilité thermodynamique.F4 contenant du Tween 80 et aucun co-tensioactif a montré une précipitation de médicament, cela peut indiquer la nécessité d'utiliser du propylène glycol et du Tween 80 pour améliorer la stabilité des formulations de nanoémulsion.F1 contenant du Tween 20 sans tensioactif supplémentaire a présenté un épaississement (gélification), qui est une augmentation de la viscosité ou de la résistance du gel due à l'agrégation des gouttelettes.
Les résultats de stabilité démontrent l'importance de la présence d'un tensioactif propylène glycol supplémentaire pour augmenter la dispersion des particules et empêcher la précipitation du médicament.43 F6 était la meilleure formulation en raison de la petite taille des particules (12,18 nm), du temps d'émulsification court (1,67 seconde) et de la vitesse de dissolution rapide après 2 minutes.Il s'est avéré qu'il s'agissait d'un système thermodynamiquement/physiquement stable et a donc été sélectionné pour une étude plus approfondie.
Les échecs après traitement radiculaire sont de plus en plus fréquents, ce qui signifie que les patients courent un risque accru de développer des infections plus complexes.44,45 Le biofilm doit être éliminé lors de la désinfection et du remplissage des canaux radiculaires.46,47 En raison de la complexité du système de canal radiculaire, il devient difficile d'éliminer complètement les canaux radiculaires bactériens en utilisant uniquement des instruments et l'irrigation.48 L'efficacité des solutions de rinçage canalaire dépend de la pénétration de l'irrigant dans le DT et de la durée d'exposition aux bactéries.49 Par conséquent, de nouvelles méthodes de stérilisation complète du canal radiculaire ont été essayées et testées.Les rinçages conventionnels n'éliminent pas complètement E. faecalis en raison d'une moindre pénétration du DT.50.
Le pouvoir nettoyant moyen du rinçage à la nanoémulsion était de 2001,47 µm2 et la taille moyenne des particules du produit de rinçage était de 2609,56 µm.La différence moyenne entre le lavage à la nanoémulsion et le lavage à taille de particules normale était de 608,09 µm2. Il y avait une différence statistiquement très significative (P<0,001) entre les irrigants de nanoémulsion et les irrigants de taille de particules normale avec (valeur P 0,00052). Il y avait une différence statistiquement très significative (P<0,001) entre les irrigants de nanoémulsion et les irrigants de taille de particules normale avec (valeur P 0,00052). Между ирригационными растворами наноэмульсии и ирригационными растворами с нормальны м размером частиц наблюдалась статистически высокозначимая (P<0,001) разница (значение P 0,0005 2). Il y avait une différence statistiquement très significative (P<0,001) (valeur P 0,00052) entre les irrigants de nanoémulsion et les irrigants de particules normales.纳米乳液冲洗剂和正常粒径冲洗剂之间存在统计学上高度显着的差异（P<0.001）（P 值0.00052） 。纳米乳液冲洗剂和正常粒径冲洗剂之间存在统计学上高度显着的差异（P<0.001）（P 值0.00052） 。 Между ополаскивателем с наноэмульсией и ополаскивателем с нормальным размером части ц была статистически очень значимая разница (P<0,0001) (значение P 0,00052). Il y avait une différence statistiquement très significative (P<0,0001) entre le rinçage à la nanoémulsion et le rinçage à taille de particules normale (valeur P 0,00052).La nanoémulsion a montré une différence statistiquement très significative par rapport au matériau de taille de particules normale, montrant une surface moyenne de débris résiduels inférieure, c'est-à-dire que le matériau de nanoémulsion avait la meilleure capacité de nettoyage, comme le montre la figure 3.
Figure 3. Comparaison des performances de nettoyage des produits de rinçage : (A) avec le laser Nano CHX activé, (B) avec le laser CHX activé, (C) avec PUI Nano CHX, (D) sans activation Nano CHX, (E) sans activation CHX et (F) ) activation CHX PUI.
La surface moyenne des fragments restants de Chx.HCl 1,6% était de 2320,36 µm2, et la surface moyenne de Chx.HCl 2% était de 2949,85 µm2. Il y avait une différence statistiquement très significative (P < 0,001) entre la concentration plus élevée d'irrigants de nanoémulsion et les irrigants de taille de particule normale (valeur P 0,00000). Il y avait une différence statistiquement très significative (P < 0,001) entre la concentration plus élevée d'irrigants de nanoémulsion et les irrigants de taille de particule normale (valeur P 0,00000). Наблюдалась статистически высокозначимая (P<0,001) разница между более высокой концент рацией наноэмульсионных ирригационных растворов и ирригационными растворами с нормальны м размером частиц (значение P 0,00000). Il y avait une différence statistiquement très significative (P <0,001) entre la concentration plus élevée d'irrigants de nanoémulsion et les irrigants de taille de particules normales (valeur P 0,00000).P<0.001）（P<0.001）（ P 值0.00000）。（P<0.001）（P 0 0.0 Наблюдалась статистически очень значимая разница (P<0,001) между более высокими концент рациями ополаскивателя с наноэмульсией и ополаскивателя с нормальным размером частиц ( значение P 0,00000). Il y avait une différence statistiquement très significative (P < 0,001) entre les concentrations plus élevées de rinçage de nanoémulsion et le rinçage de taille de particules normale (valeur P 0,00000).Bien que la concentration de l'irrigant de nanoémulsion soit inférieure à celle de l'irrigant de taille de particules normale, cette concentration inférieure était significativement plus efficace pour éliminer les débris et plus efficace pour nettoyer les canaux radiculaires.
Le PUI présentait une différence statistiquement très significative (p<0,001) par rapport aux autres méthodes d'activation. Le PUI présentait une différence statistiquement très significative (p<0,001) par rapport aux autres méthodes d'activation. PUI имел статистически высокозначимую разницу (p<0,001) по сравнению с другими методами ак тивации. PUI avait une différence statistiquement très significative (p<0,001) par rapport aux autres méthodes d'activation.与其他激活方法相比，PUI 具有统计学上非常显着的差异(p<0.001)。与其他激活方法相比，PUI 具有统计学上非常显着的差异(p<0.001)。 По сравнению с другими методами активации PUI имел статистически очень значимую разницу ( p<0,001). Par rapport aux autres méthodes d'activation, PUI avait une différence statistiquement très significative (p<0,001).Avec l'activation de l'ISP, la surface moyenne de la surface résiduelle des débris était de 1695,31 µm2. La différence moyenne entre PUI et Laser était de 987,89929 montrant une différence hautement statistiquement significative (P <0,001) avec (valeur de p 0,00000). La différence moyenne entre PUI et Laser était de 987,89929 montrant une différence hautement statistiquement significative (P <0,001) avec (valeur de p 0,00000). Средняя разница между PUI et Laser составила 987,89929, демонстрируя высокостатистически значим ую (P<0,001) разницу с (p-значение 0,00000). La différence moyenne entre PUI et Laser était de 987,89929, montrant une différence hautement statistiquement significative (P<0,001) par rapport à (valeur p 0,00000). PUI 和 Laser 之间的平均差异为987.89929，显示出高度统计学显着性(P<0.001) 差异(p 值0.00000)。PUI 和Laser Средняя разница между PUI et Laser составила 987,89929, что свидетельствует о высокой статистич еской значимости (P<0,001) разницы (p-значение 0,00000). La différence moyenne entre PUI et Laser était de 987,89929, indiquant une différence de signification statistique élevée (P < 0,001) (valeur de p 0,00000). La différence moyenne entre le PUI et l'absence d'activation était de 712,40643, montrant une différence hautement statistiquement significative (P<0,001) avec une valeur p de 0,00098). L'utilisation de l'activation laser ou de l'absence d'activation n'était pas statistiquement significative (P>0,05) différente avec une valeur P de 0,451211. La différence moyenne entre le PUI et l'absence d'activation était de 712,40643 montrant une différence hautement statistiquement significative (P<0,001) avec une valeur de p de 0,00098).une valeur P de 0,451211. Средняя разница между PUI et отсутствием активации составила 712,40643, демонстрируя высо костатистически значимую (P<0,001) разницу с p-значением 0,00098). La différence moyenne entre le PUI et l'absence d'activation était de 712,40643, montrant une différence hautement statistiquement significative (P<0,001) avec une valeur de p de 0,00098).Valeur P 0,451211. PUI 和未激活之间的平均差异为712.40643，显示高度统计学显着性差异(P<0.001)，p 值为0.00098)。PUI Средняя разница между PUI et инактивацией составила 712,40643, что свидетельствует о высок ой статистической значимости разницы (P<0,001, p-значение 0,00098). La différence moyenne entre le PUI et l'inactivation était de 712,40643, indiquant une signification statistique élevée de la différence (P<0,001, valeur de p 0,00098).使用激光激活或不激活在统计学上没有显着差异(P>0.05) P 值为0.451211。使用激光激活或不激活在统计学上没有显着差异(P>0.05) P 值为0.451211。 Статистически значимой разницы (P>0,05) с лазерной активацией или без нее не было со значен voir P 0,451211. Il n'y avait pas de différence statistiquement significative (P>0,05) avec ou sans activation laser avec une valeur P de 0,451211.La surface moyenne des fragments restants lors de l'activation au laser était de 2683,21 µm2.La surface moyenne des fragments restants sans activation était de 2407,72 µm2.Par rapport à l'activation ou à l'absence d'activation par laser, le PUI avait une surface de puce moyenne statistiquement plus petite, c'est-à-dire la meilleure puissance de nettoyage.
Le pouvoir nettoyant moyen du rinçage à la nanoémulsion était de 2001,47 µm2 et la taille moyenne des particules du produit de rinçage était de 2609,56 µm.La différence moyenne entre le lavage à la nanoémulsion et le lavage à taille de particules normale était de 608,09 µm2. Il y avait une différence statistiquement très significative (P<0,001) entre les irrigants de nanoémulsion et les irrigants de taille de particules normale avec (valeur P 0,00052). Il y avait une différence statistiquement très significative (P<0,001) entre les irrigants de nanoémulsion et les irrigants de taille de particules normale avec (valeur P 0,00052). Между ирригационными растворами наноэмульсии и ирригационными растворами с нормальны м размером частиц была статистически высокозначимая (P<0,001) разница (значение P 0,00052). Il y avait une différence statistiquement très significative (P<0,001) (valeur P 0,00052) entre les irrigants de nanoémulsion et les irrigants de particules normales.纳米乳液冲洗剂与正常粒径冲洗剂之间存在统计学上高度显着的差异（P<0.001）（P值0.00052） 。 P<0.001）（P值0.00052）。 Между ополаскивателем с наноэмульсией и ополаскивателем с нормальным размером части ц была статистически очень значимая разница (P<0,0001) (значение P 0,00052). Il y avait une différence statistiquement très significative (P<0,0001) entre le rinçage à la nanoémulsion et le rinçage à taille de particules normale (valeur P 0,00052).Par rapport à un matériau de taille de particules normale, la nanoémulsion présente une différence statistiquement très significative, montrant une surface moyenne de débris résiduels inférieure, c'est-à-dire que le matériau de nanoémulsion a une meilleure capacité de nettoyage, comme le montre la figure 3.
La surface moyenne des fragments restants de Chx.HCl 1,6% était de 2320,36 µm2, et la surface moyenne de Chx.HCl 2% était de 2949,85 µm2. Il y avait une différence statistiquement très significative (P <0,001) entre la concentration plus élevée d'irrigants de nanoémulsion et les irrigants de taille de particules normales (valeur P 0,00000). Il y avait une différence statistiquement très significative (P < 0,001) entre la concentration plus élevée d'irrigants de nanoémulsion et les irrigants de taille de particule normale (valeur P 0,00000). Имелась статистически высокодостоверная (P<0,001) разница между более высокой концентра цией наноэмульсионных ирригационных средств и ирригационными растворами с нормальным ра змером частиц (значение P 0,00000). Il y avait une différence statistiquement significative (P <0,001) entre la concentration plus élevée d'irrigants de nanoémulsion et les irrigants de taille de particules normales (valeur P 0,00000).P<0.001）（P<0.001）（ P值0.00000）。P<0.001）（P<0.001）（ P000 Наблюдалась статистически высокозначимая разница (P <0,001) рациями ополаскивателя с наноэмульсией и ополаскивателем с нормальным размером частиц (значение P 0,00000). Il y avait une différence statistiquement très significative (P < 0,001) entre les concentrations plus élevées de rinçage de nanoémulsion et le rinçage de taille de particules normale (valeur P 0,00000).Bien que la concentration de l'irrigant de nanoémulsion soit inférieure à celle de l'irrigant de taille de particules normale, cette concentration inférieure était significativement plus efficace pour éliminer les débris et plus efficace pour nettoyer les canaux radiculaires.
Le PUI présentait une différence significative statistiquement élevée (p<0,001) par rapport aux autres méthodes d'activation. Le PUI présentait une différence significative statistiquement élevée (p<0,001) par rapport aux autres méthodes d'activation. PUI имел статистически высокую значимую разницу (p<0,001) по сравнению с другими методами активации. PUI avait une différence statistiquement significative (p<0,001) par rapport aux autres méthodes d'activation.与其他激活方法相比，PUI 具有统计学上的显着差异(p<0.001)。 Par rapport aux autres méthodes d'activation, le PUI présente une différence statistiquement significative (p<0,001). PUI статистически значимо отличался (p<0,001) по сравнению с другими методами активации. Le PUI était statistiquement significativement différent (p<0,001) par rapport aux autres méthodes d'activation.Lors de l'activation du PUI, la surface moyenne des débris superficiels résiduels était de 1695,31 μm2. La différence moyenne entre le PUI et le laser était de 987,89929 montrant une différence hautement statistiquement significative (P<0,001) avec (valeur p 0,00000). La différence moyenne entre le PUI et l'absence d'activation était de 712,40643 montrant une différence hautement statistiquement significative (P<0,001) avec (valeur p 0,00098). avec (valeur P 0,451211). La différence moyenne entre PUI et Laser était de 987,89929 montrant une différence hautement statistiquement significative (P <0,001) avec (valeur de p 0,00000).La différence moyenne entre PUI et aucune activation était de 712,40643 montrant une différence hautement statistiquement significative (P <0,001) avec (p -valeur 0,00098).L'utilisation de l'activation laser ou de l'absence d'activation n'était statistiquement pas significativement différente (P> 0,05) avec (valeur P 0,451211). Средняя разница между PUI et лазером составила 987,89929, демонстрируя высокостатистически значимую (P<0,001) разницу с (p-значение 0,00000). La différence moyenne entre le PUI et le laser était de 987,89929, démontrant une différence hautement statistiquement significative (P<0,001) avec (valeur de p 0,00000). - значение 0,00098). тически значимой разницы (P>0,05) с (P-значение 0,451211). - valeur 0,00098).L'utilisation de l'activation au laser ou de l'absence d'activation avait une différence statistiquement significative (P>0,05) avec (P-valeur 0,451211). PUI ; La différence moyenne entre le PUI et le laser est de 987,89929, et la différence (p 值0,00000) a une signification statistique élevée (P<0,001). Средняя разница между PUI et лазером составила 987,89929, что было высоко статистически зна чимым (P<0,001) с (значение p 0,00000). La différence moyenne entre le PUI et le laser était de 987,89929, ce qui était statistiquement très significatif (P<0,001) avec (valeur de p 0,00000). PUI ? La différence moyenne entre PUI et inactif est de 712,40643, et la différence (p) a une signification statistique élevée (P<0,001) – valeur 0,00098. Средняя разница между PUI et инактивацией составила 712,40643, что было высоко статистическ и значимым с разницей (p) (P<0,001 - значение 0,00098). La différence moyenne entre le PUI et l'inactivation était de 712,40643, ce qui était statistiquement très significatif avec la différence (p) (P<0,001 - valeur 0,00098).使用激光激活或不激活没有显着统计学差异(P>0.05) 与(P 值0.451211)。 Il n'y avait pas de différence statistique significative entre l'activation et la non-activation du laser (P>0,05) et (P 值0,451211). Не было статистически значимой разницы (P>0,05) по сравнению с (значение P 0,451211) avec лазерной а ктивацией или без нее. Il n'y avait pas de différence statistiquement significative (P> 0,05) par rapport à (valeur P 0,451211) avec ou sans activation laser.La surface moyenne des fragments restants lors de l'activation laser était de 2683,21 μm2.La surface moyenne des fragments restants sans activation était de 2407,72 μm2.Par rapport à l'activation laser ou à l'absence d'activation, le PUI a une surface moyenne de la puce statistiquement plus petite, c'est-à-dire une meilleure capacité de nettoyage.
L'effet moyen du rinçage à la nanoémulsion sur l'élimination des débris était statistiquement significativement plus élevé que celui du rinçage à la taille normale des particules.Chx.HCl 1.6%, PUI 1938.77 µm2, 2510.96 µm2 avec laser.Sans activation, la valeur moyenne est de 2511,34 µm2.Lorsque 2% Chx.HCl a été utilisé et activé avec un laser, les résultats étaient les pires et la quantité de débris était maximale.Les mêmes résultats ont été obtenus lorsque le Chx.HCl à 0,75 % n'était pas activé.De toute évidence, les meilleurs résultats ont été obtenus en utilisant des concentrations plus élevées de produit de rinçage dans la nanoémulsion.PUI était plus efficace dans l'activation de l'irrigant et le rinçage des débris, comme le montre la figure 3A-F)).
Comme le montre le tableau 2, la nanoémulsion Chx.HCl a obtenu de meilleurs résultats que les particules de taille normale en termes de nombre de micro-organismes viables et a eu une bonne corrélation avec la pénétration de la formulation et l'effet nettoyant selon les paramètres suivants : taille, concentration de l'agent de rinçage et méthode d'activation.
Les bactéries peuvent être complètement détruites en utilisant une concentration plus élevée de liquide de rinçage.Même avec l'activation du PUI, 0,75 % de Chx.HCl a eu le pire effet antibactérien.L'activation laser a un effet négatif sur les rinçages à la nano-émulsion.Comme on peut le voir sur tous les résultats précédents, l'utilisation d'un laser réduit l'efficacité de la nanoémulsion Chx.HCl 0,75%, où le CFU de nanoChx.HCl 0,75% est de 195, ce qui est une valeur très élevée, indiquant que les réactifs à cette concentration sont comparables à l'activation laser.Les lasers à diode sont photothermiques, de sorte que la lumière ou la chaleur peuvent faire perdre à la nanoémulsion son effet antibactérien.Le résultat de fortes concentrations est la destruction complète des bactéries.Nano Chx.HCl 1,6 % a montré une croissance bactérienne négative en présence d'activation laser, ce qui signifie que le laser n'a pas affecté la capacité antibactérienne de nano Chx.HCl 1,6 %.On peut en conclure que le matériau de nanoémulsion avec une concentration plus élevée a un meilleur effet antibactérien.
Dans ce travail, des nanoémulsions Chx.HCl ont été préparées en utilisant deux huiles différentes, deux tensioactifs et un co-tensioactif, la formulation optimale (F6) avec une petite taille de particules, un temps d'émulsification court et un taux de dissolution élevé) a été choisie.De plus, (F6) a été testé pour la stabilité thermodynamique/physique.Dans la nanoémulsion Chx.HCl à une concentration de 1,6%, la nanoémulsion Chx.HCl a montré la meilleure perméabilité dans les tubules dentinaires par rapport au Chx.HCl traditionnel comme fluide de rinçage, et le PUI comme méthode d'activation avait une capacité de nettoyage.De plus, des études antibactériennes de la nanoémulsion Chx.HCl ont montré une élimination complète des bactéries.Les résultats l'ont confirmé.La nanoémulsion Chx.HCl peut être considérée comme un liquide de lavage prometteur.
Nous sommes très reconnaissants au personnel du laboratoire de recherche de l'Université des sciences et technologies Misr pour leur grand soutien.