Comhtháthaíonn fáil agus dáileadh cothaitheach tréithe beatha feithidí agus tréithe staire saoil. Chun easnaimh i gcothaithigh shonracha ag céimeanna éagsúla saoil a chúiteamh, is féidir le feithidí na cothaithigh seo a fháil trí bheathú forlíontach, mar shampla, trí bheathú ar rúin veirteabracha i bpróiseas ar a dtugtar locháin. Is cosúil go bhfuil an corrmhíol Anopheles arabiani míchothaithe agus, dá bhrí sin, teastaíonn cothaithigh uaidh le haghaidh meitibileachta agus atáirgthe araon. Ba é aidhm an staidéir seo a mheas an bhfeabhsaíonn corraíl An. arabiensis ar fhual bó chun cothaithigh a fháil tréithe staire saoil.
Déan cinnte go bhfuil sé sábháilte. Mheall boladh úr fual bó 24 uair an chloig, 72 uair an chloig, agus 168 uair an chloig d'aois arabiensis, agus tomhaiseadh baineannaigh a bhí ag lorg óstach agus a chothaigh fuil (48 uair an chloig tar éis béile fola) in olfactóiméadar feadán-Y, agus rinneadh measúnú ar bhaineannaigh torracha le haghaidh tástála sceite. Baineadh úsáid as anailís cheimiceach agus leictrifiseolaíoch chomhcheangailte ansin chun comhdhúile bithghníomhacha a aithint i bhfual bó ag na ceithre rang aoise. Rinneadh meastóireacht ar mheascáin shintéiseacha de chomhdhúile bithghníomhacha i dtrialacha feadán-Y agus allamuigh. Chun fual bó agus a phríomh-chomhdhúil ina bhfuil nítrigin úiré a imscrúdú mar aistí bia forlíontacha féideartha do veicteoirí maláire, tomhaiseadh paraiméadair bheathaithe agus tréithe stair saoil. Rinneadh measúnú ar chion na moscítí baineann agus ar an méid fual bó agus úiré a ionsúíodh. Tar éis beathaithe, rinneadh measúnú ar bhaineannaigh le haghaidh marthanais, eitilt ceangailte, agus atáirgeadh.
Cuardaigh fuil agus cothú an óstaigh. I staidéir saotharlainne agus allamuigh, mheall Arabaigh chuig boladh nádúrtha agus sintéiseach fual bó úr agus aibithe. Bhí baineannaigh torracha neamhshuimiúil i bhfreagairtí fual bó ag láithreáin sceite. Glacann baineannaigh a lorgaíonn óstach agus a shúitear fuil fual bó agus úiré go gníomhach agus leithdháileann siad na hacmhainní seo de réir chomhbhabhtálacha stair saoil mar fheidhm den staid fhiseolaíoch maidir le heitilt, marthanacht, nó atáirgeadh.
Faigheann agus dáileann Anopheles arabinis fual bó chun tréithe saoil a fheabhsú. Bíonn tionchar díreach ag beathú forlíontach fual bó ar chumas veicteoirí trí mharthanas laethúil agus dlús veicteoirí a mhéadú, agus go hindíreach trí ghníomhaíocht eitilte a athrú agus dá bhrí sin ba cheart é a bhreithniú i samhlacha amach anseo.
Comhtháthaíonn fáil agus dáileadh cothaitheach tréithe beatha feithidí agus stair saoil [1,2,3]. Tá feithidí in ann bia a roghnú agus a fháil agus beathú cúiteach a dhéanamh bunaithe ar infhaighteacht bia agus riachtanais chothaitheach [1, 3]. Braitheann dáileadh cothaitheach ar an bpróiseas stair saoil agus d’fhéadfadh sé go mbeadh riachtanais éagsúla ann maidir le cáilíocht agus cainníocht aiste bia i gcéimeanna saoil éagsúla feithidí [1, 2]. Chun easnaimh i gcothaithigh shonracha a chúiteamh, is féidir le feithidí na cothaithigh seo a fháil trí bheathú forlíontach, amhail ar láib, eiscréid agus rúin éagsúla veirteabrach, agus ar charrion, próiseas ar a dtugtar locháin [2]. Cé go ndéantar cur síos ar réimse speiceas féileacán agus leamhan den chuid is mó, bíonn poill uisce ann in orduithe feithidí eile freisin, agus is féidir le mealladh chuig na cineálacha acmhainní seo agus beathú orthu tionchar suntasach a imirt ar shláinte agus ar thréithe eile stair saoil [2, 4, 5, 6], 7]. Tagann an mosquito maláire Anopheles gambiae sensu lato (sl) chun cinn mar dhuine fásta 'míchothaithe' [8], mar sin d’fhéadfadh ról tábhachtach a bheith ag uisce ina thréithe stair saoil, ach tá an t-iompar seo faillithe go dtí seo. Is fiú aird a thabhairt ar úsáid corraithe mar mhodh chun iontógáil cothaitheach a mhéadú sa fheithicil thábhachtach seo mar d’fhéadfadh iarmhairtí tábhachtacha eipidéimeolaíocha a bheith aige seo.
Tá iontógáil nítrigine i moscítí baineann fásta Anopheles teoranta mar gheall ar chúlchistí calracha ísle a iompraítear ón gcéim larbhach agus úsáid neamhéifeachtach min fola [9]. De ghnáth, déanann Ann.gambiae sl baineann cúiteamh as seo trí fhorlíonadh le béilí fola forlíontacha [10, 11], rud a chuireann níos mó daoine i mbaol an galar a tholgadh agus moscítí a chur i mbaol níos mó creiche. Nó, is féidir le moscítí beatha fhorlíontach eisfhearadh veirteabrach a úsáid chun comhdhúile nítrigine a fháil a fheabhsaíonn oiriúnú agus iniomparthacht eitilte, mar a léirítear le feithidí eile [2]. Maidir leis seo, tá an tarraingt láidir agus sainiúil atá ag ceann de na speicis siblíní laistigh de An. Tá an casta speiceas sl Gambian, Anopheles arabinis, fual bó úr agus aibithe [12,13,14], suimiúil. Tá Anopheles arabinis deise ina roghanna óstach agus is eol go mbíonn sé i gcomhlachas le heallach agus go mbeathaíonn sé orthu. Is acmhainn atá saibhir i gcomhdhúile nítrigine é fual bó, agus úiré freagrach as 50-95% den nítrigin iomlán i bhfual úr [15, 16]. De réir mar Le haoiseanna fual bó, úsáideann miocrorgánaigh na hacmhainní seo chun castacht na gcomhdhúl nítrigine a laghdú laistigh de 24 uair an chloig [15]. Leis an méadú tapa ar amóinia, a bhaineann le meath ar nítrigin orgánach, fásann miocrorgánaigh alcalafíleacha (a tháirgeann go leor acu comhdhúile atá tocsaineach do mhoscítí) [15], agus d'fhéadfadh gur Ann.arabiensis baineann iad a mhealltar go roghnach chuig fual atá 24 uair an chloig d'aois nó níos lú [13, 14].
Sa staidéar seo, rinneadh cuardach ar Ans óstach agus Ans a chothaítear le fuil. Le linn a chéad timthriall gonadotropin, rinneadh measúnú ar arabiensis maidir le comhdhúile nítrigineacha, lena n-áirítear úiré, a fháil trí mheascadh fual. Ansin, rinneadh sraith turgnaimh chun measúnú a dhéanamh ar an gcaoi a leithdháileann mosquitos baineann an acmhainn chothaitheach fhéideartha seo chun marthanacht, atáirgeadh agus tuilleadh beathaithe a fheabhsú. Ar deireadh, rinneadh measúnú ar bholadh fual bó úr agus aibithe chun a fháil amach an raibh leideanna iontaofa ar fáil dóibh seo do Ans óstach agus Ans a chothaítear le fuil. Ina gcuardach don acmhainn chothaitheach fhéideartha seo, d'aimsigh arabiensis comhghaolta ceimiceacha taobh thiar den tarraingteacht dhifreálach a breathnaíodh. Rinneadh meastóireacht bhreise ar mheascáin bholadh shintéiseacha de chomhdhúile orgánacha so-ghalaithe (VOCanna) a aithníodh i bhfual aibithe 24 uair an chloig faoi dhálaí allamuigh, ag leathnú na dtorthaí a fuarthas faoi dhálaí saotharlainne agus ag léiriú éifeacht bholadh fual bó ar stáit fhiseolaíocha éagsúla. Mealladh mosquitos. Deimhníonn na torthaí a fuarthas go bhfaigheann agus go ndáileann An. arabiensis comhdhúile nítrigineacha a fhaightear i bhfual veirteabrach chun tionchar a imirt ar shaintréithe stair saoil. Pléitear na torthaí seo i gcomhthéacs iarmhairtí eipidéimeolaíocha féideartha agus conas is féidir iad a úsáid chun faireachas agus rialú veicteoirí.
Coinníodh Anopheles arabicans (strain Dongola) ag 25 ± 2 °C, 65 ± 5% RH agus timthriall solais:dorchadas 12:12 uair an chloig. Tógadh na larbhaí i dtráidirí plaisteacha (20 cm × 18 cm × 7 cm) líonta le huisce driogtha agus beathaíodh bia éisc Tetramin® (Tetra Werke, Melle, DE) leo. Bailíodh pupae i gcupáin 30 ml (Nolato Hertila, Åstorp, SE) agus ansin aistríodh iad chuig cageanna Bugdorm (30 cm × 30 cm × 30 cm; MegaView Science, Taichung, Taiwan) chun ligean do na daoine fásta teacht chun cinn. Tugadh tuaslagán siúcróis 10% ad libitum do na baineannaigh a bhí ag lorg óstach go dtí 4 lá tar éis teacht chun cinn (dpe), agus ag an bpointe sin tairgeadh aiste bia do bhaineannaigh a bhí ag lorg óstach díreach roimh an turgnamh, nó cuireadh ocras orthu thar oíche le huisce driogtha roimh an turgnamh, mar a thuairiscítear thíos. Níor cuireadh ocras ach ar feadh 4-6 uair an chloig ar na baineannaigh a úsáideadh le haghaidh turgnaimh feadán eitilte. le huisce ad libitum. Chun moscítí a shúitear fola a ullmhú le haghaidh bith-asaí ina dhiaidh sin, tugadh fuil caorach dífhibrotach (Håtunalab, Bro, SE) do 4 bhaineannach dpe ag baint úsáide as córas beathaithe membrane (Hemotek Discovery Workshops, Accrington, an Ríocht Aontaithe). Ansin aistríodh baineannaigh lánphlódaithe chuig cageanna aonair agus tugadh aiste bia dóibh go díreach, mar a thuairiscítear thíos, nó 10% siúcrós ad libitum ar feadh 3 lá roimh na turgnaimh a thuairiscítear thíos. Baineadh úsáid as na baineannaigh dheireanacha sin le haghaidh bith-asaí feadán eitilte agus aistríodh chuig an tsaotharlann iad, agus ansin fuair siad uisce driogtha ad libitum ar feadh 4-6 uair an chloig roimh an turgnamh.
Baineadh úsáid as measúnuithe beathaithe chun tomhaltas fuail agus úiré a chainníochtú i measc baineannach fásta An.Arab. Tugadh aiste bia ina raibh 1% fuail bó úr agus aibithe caolaithe, tiúchain éagsúla úiré, agus dhá rialú (10% siúcrós agus uisce) ar feadh 48 uair an chloig do bhaineannaigh a bhí ag lorg óstach agus a chothaigh fuil. Ina theannta sin, cuireadh dathú bia (1 mg ml-1 ciainíd xiléine FF; CAS 2650-17-1; Sigma-Aldrich, Stócólm, SE) leis an aiste bia agus soláthraíodh é i maitrís 4 × 4 i bhfeadáin micrea-lártheifneoir 250 µl (Axygen Scientific, Union City, CA, US; Fíor 1A) Líon go dtí an imeall (~300 µl). Chun iomaíocht idir corrmhíolta agus éifeachtaí féideartha dath ruaime a sheachaint, cuir 10 corrmhíolta i mias Petri mór (12 cm ar trastomhas agus 6 cm ar airde; Semadeni, Ostermundigen, CH; Fíor 1A) i ndorchadas iomlán ag 25 ± 2 cm °C agus 65 ± 5% coibhneasta. taise. Rinneadh na turgnaimh seo arís 5 go 10 n-uaire. Tar éis nochtadh don aiste bia, cuireadh na mosquitos ag -20 °C go dtí go ndearnadh anailís bhreise orthu.
Lorg fual agus úiré bó a ionsúnn an t-óstach agus an baineannach Anopheles arabianus atá ag sú fola. I dtriail beathaithe (A), tugadh aiste bia do mhoscíteanna baineanna ina raibh fual bó úr agus aibithe, tiúchain éagsúla úiré, siúcrós (10%), agus uisce driogtha (H2O). Ghlac baineannaigh a bhí ag lorg óstach (B) agus a chothaigh fuil (C) níos mó siúcrós ná aon aiste bia eile a tástáladh. Tabhair faoi deara gur ionsúnn baineannaigh a bhí ag lorg óstach fual bó 72 uair an chloig níos lú ná fual bó 168 uair an chloig (B). Léirítear meánábhar iomlán nítrigine (± diall caighdeánach) an fhuail sa chur isteach. Ghlac baineannaigh a bhí ag lorg óstach (D, F) agus a bhí ag sú fola (E, G) úiré ar bhealach dáileog-spleách. Bhí difríocht shuntasach idir meánmhéideanna ionanálaithe (D, E) le hainmneacha litreacha éagsúla (ANOVA aontreo ag baint úsáide as anailís iar-hoc Tukey; p < 0.05). Léiríonn barraí earráide earráid chaighdeánach an mheáin (BE). Léiríonn an líne dhíreach poncaithe an líne aischéimnithe log-líneach (F, G)
Chun bia ionsúite a scaoileadh, cuireadh na moscítí ina n-aonar i bhfeadáin mhicrea-lártheifneoir 1.5 ml ina raibh 230 µl d'uisce driogtha agus briseadh an fíochán ag baint úsáide as pestle indiúscartha agus mótar gan sreang (VWR International, Lund, SE), agus ina dhiaidh sin rinneadh lártheifneoiriú ag 10 krpm ar feadh 10 nóiméad. Aistríodh an forshnáithín (200 µl) chuig micreaphláta 96-tobar (Sigma-Aldrich) agus cinneadh an ionsú (λ620) ag baint úsáide as léitheoir micreaphláta bunaithe ar speictreafótaiméadar (SPECTROStar® Nano, BMG Labtech, Ortenberg, DE) nm). Nó, meilteadh na moscítí i 1 ml d'uisce driogtha, agus aistríodh 900 µl de sin chuig cuvette le haghaidh anailíse speictreafótaiméadraigh (λ 620 nm; UV 1800, Shimadzu, Kista, SE). Chun iontógáil aiste bia a chainníochtú, ullmhaíodh cuar caighdeánach trí chaolú sraitheach chun 0.2 µl go 2.4 µl de 1 mg ml-1 xiléin a thabhairt. ciainíd. Ansin, úsáideadh dlús optúil tiúchan ruaime aitheanta chun an méid bia a shlog gach corrmhíol a chinneadh.
Rinneadh anailís ar shonraí toirte ag baint úsáide as anailís athraitheas aontreo (ANOVA) agus ina dhiaidh sin comparáidí péireála iar-hoc Tukey (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc., Cary, NC, SAM, 1989–2007). Rinne anailísí aischéimniúcháin líneacha cur síos ar iontógáil úiré atá ag brath ar thiúchan agus rinne siad comparáid idir freagairtí idir moscítí a lorgaíonn óstach agus moscítí a shúigh fuil (GraphPad Prism v8.0.0 do Mac, GraphPad Software, San Diego, CA, SAM).
Ceanglaíodh thart ar 20 µl de shamplaí fuail ó gach aoisghrúpa ar Chromosorb® W/AW (10 mg mogalra 80/100, Sigma Aldrich) agus cuireadh i gcapsúil stáin iad (8 mm × 5 mm). Cuireadh na capsúil isteach i seomra dócháin anailíseora CHNS/O (Flash 2000, Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, SAM) chun cion nítrigine i bhfual úr agus aibithe a chinneadh de réir phrótacal an mhonaróra. Rinneadh cainníochtú ar an nítrigin iomlán (g N l-1) bunaithe ar thiúchain úiré aitheanta a úsáideadh mar chaighdeán.
Chun tionchar an aiste bia ar mharthanas baineannach a lorgaíonn óstach agus a shúitear fuil a mheas, cuireadh moscítí ina n-aonar i miasa Petri móra (12 cm ar trastomhas agus 6 cm ar airde; Semadeni) le poll clúdaithe le mogalra sa chlúdach (3 cm ar trastomhas) le haghaidh aerála agus soláthair bia. Soláthraíodh aistí bia díreach tar éis 4 dpe agus áiríodh iontu 1% fual bó úr agus aibithe caolaithe, ceithre thiúchan úiré, agus dhá rialú, 10% siúcrós agus uisce. Pípéadaíodh gach aiste bia ar thampón fiaclóireachta (DAB Dental AB, Upplands Väsby, SE) a cuireadh isteach i steallaire 5 ml (Thermo Fisher Scientific, Gothenburg, SE), baineadh an loine, agus cuireadh ar bharr mias Petri é (figiúr 1).1A). Athraigh d'aiste bia gach lá. Coinnigh an saotharlann mar a thuairiscítear thuas. Comhairíodh moscítí a mhair dhá uair sa lá, agus caitheadh ​​moscítí marbha amach go dtí gur bhásaigh an moscít deireanach (n = 40 in aghaidh na cóireála). Rinneadh anailís staitistiúil ar mharthanas moscítí a chothaíodh ar aistí bia éagsúla ag baint úsáide as cuar marthanais Kaplan-Meyer agus tástálacha log-rang. chun comparáidí dáileadh marthanais idir aistí bia a chur i gcomparáid (IBM SPSS Statistics 24.0.0.0).
Muileann eitilte mosquito saincheaptha bunaithe ar Attisano et al.[17], déanta as painéil aicrileach soiléire 5 mm ar tiús (10 cm ar leithead x 10 cm ar fhad x 10 cm ar airde) gan painéil tosaigh agus cúil (Fíor 3: barr). Tionól pivot le feadán ingearach déanta as colún crómatagrafaíochta gáis (0.25 mm id; 7.5 cm L) le foircinn greamaithe le snáthaid feithidí ar crochadh idir péire maighnéid neoidimiam 9 cm óna chéile. Roinn feadán cothrománach déanta den ábhar céanna (6.5 cm L) an feadán ingearach ina dhá leath chun lámh ceangailte agus lámh a d'iompair píosa beag scragall alúmanaim mar chomhartha cur isteach solais a fhoirmiú.
Tugadh an aiste bia thuasluaite do bhaineannaigh a bhí ocrach ar feadh 24 uair an chloig ar feadh 30 nóiméad sular cuireadh srian orthu. Ansin, rinneadh moscítí baineannacha lánchothaithe a ainéistéisiú ina n-aonar ar oighear ar feadh 2-3 nóiméad agus ceanglaíodh iad le bioráin feithidí le céir bheach (Joel Svenssons Vaxfabrik AB, Munka Ljungby, SE) agus ansin ceanglaíodh iad le hairm na bhfeadán cothrománach. Muileann Eitilte. Taifeadadh réabhlóidí in aghaidh an eitilte le logálaí sonraí saincheaptha, agus ansin stóráladh agus taispeánadh iad ag baint úsáide as bogearraí PC-Lab 2000™ (v4.01; Velleman, Gavere, BE). Cuireadh an muileann eitilte i seomra aeráide-rialaithe (12 h:12 h, solas: dorchadas, 25 ± 2 °C, 65 ± 5% RH).
Chun patrún na gníomhaíochta eitilte a léirshamhlú, ríomhadh an fad iomlán a eitilíodh (m) agus líon iomlán na ngníomhaíochtaí eitilte as a chéile in aghaidh na huaire thar thréimhse 24 uair an chloig. Ina theannta sin, rinneadh comparáid idir na meánfhaid a eitil mná aonair trasna na gcóireálacha agus rinneadh anailís orthu ag baint úsáide as ANOVA aontreo agus anailís iar-hoc Tukey (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.), áit ar measadh gur athróg spleách an meánfhad, agus gur fachtóir neamhspleách í an chóireáil. Ina theannta sin, ríomhtar meánlíon na mbabhtaí i méaduithe 10 nóiméad.
Chun measúnú a dhéanamh ar éifeacht an aiste bia ar fheidhmíocht atáirgthe An.arabiensis, aistríodh sé bhaineannach (4 dpe) go díreach chuig cageanna Bugdorm (30 cm × 30 cm × 30 cm) tar éis bhailiú fola agus ansin cuireadh an aiste bia turgnamhach ar fáil dóibh ar feadh 48 uair an chloig mar a thuairiscítear thuas. Baineadh na haistí bia ansin agus cuireadh cupáin sceite (30 ml; Nolato Hertila) líonta le 20 ml d'uisce driogtha ar fáil ar an tríú lá ar feadh 48 uair an chloig, ag athrú gach 24 uair an chloig. Déan gach réimeas aiste bia arís 20-50 uair. Comhaireamh agus taifeadadh uibheacha do gach cage turgnamhach. Baineadh úsáid as foshamplaí uibheacha chun meánmhéid agus athrú faid uibheacha aonair (n ≥ 200 in aghaidh an aiste bia) a mheas ag baint úsáide as micreascóp Dialux-20 (DM1000; Ernst Leitz Wetzlar, Wetzlar, DE) atá feistithe le Ceamara Leica (DFC) 320 R2; Leica Microsystems Ltd., an Ghearmáin). Coinníodh na huibheacha a bhí fágtha i seomra rialaithe aeráide faoi choinníollacha caighdeánacha tógála ar feadh 24 uair an chloig, agus tomhaiseadh foshampla de larbhaí den chéad instar a tháinig chun cinn le déanaí (n ≥ 200 in aghaidh an aiste bia), mar a thuairiscítear thuas. Rinneadh comparáid idir líon na n-uibheacha agus méid na n-uibheacha agus na larbhaí idir chóireálacha agus ag baint úsáide as ANOVA aontreo agus anailís iar-hoc Tukey (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Bailíodh so-ghalaithe spáis chinn ó fhual úr (1 uair an chloig tar éis samplála), 24 uair an chloig, 72 uair an chloig agus 168 uair an chloig ó shamplaí a bailíodh ó eallach Zebu, rásaí Arsi. Ar mhaithe le caoithiúlacht, bailíodh samplaí fuail go moch ar maidin agus na ba fós sa scioból. Bailíodh samplaí fuail ó 10 nduine aonair agus aistríodh 100-200 ml de gach sampla chuig málaí bácála polaimíde aonair (Toppits Cofresco, Frischhalteprodukte GmbH and Co., Minden, an Ghearmáin) i ndrumaí plaisteacha clóiríd vinile 3 l. Bailíodh so-ghalaithe spáis chinn ó gach sampla fuail bó go díreach (úr) nó tar éis aibithe ag teocht an tseomra ar feadh 24 uair an chloig, 72 uair an chloig agus 168 uair an chloig, i.e. bhí gach sampla fuail ionadaíoch do gach aoisghrúpa.
Chun so-ghalaithe sa spás ceann a bhailiú, úsáideadh córas lúb dúnta chun sruth gáis scagtha le carbón gníomhachtaithe (100 ml nóim-1) a chur i gcúrsaíocht trí mhála polaimíde chuig an gcolún ionsúcháin ar feadh 2.5 uair an chloig trí chaidéal folúis scairt (KNF Neuberger, Freiburg, an Ghearmáin) a úsáid. Mar rialú, rinneadh bailiú sa spás ceann ó mhála polaimíde folamh. Rinneadh an colún ionsúcháin as feadánra Teflon (5.5 cm x 3 mm id) ina raibh 35 mg de Porapak Q (mogalra 50/80; Waters Associates, Milford, MA, SAM) idir plocóidí olann gloine. Roimh úsáid, sruthlaíodh an colún le 1 ml n-heacsán athdhriogadh (Merck, Darmstadt, an Ghearmáin) agus 1 ml peantán (tuaslagóir 99.0% íon grád GC, Sigma Aldrich). Scaoileadh na so-ghalaithe ionsúcháin le 400 μl de pheantán. Comhthiomsaíodh bailiúcháin sa spás ceann agus stóráladh iad ansin ag -20°C go dtí go n-úsáidfí iad le haghaidh anailíse breise.
Freagraí iompraíochta An a lorgaíonn óstach agus a itheann fuil. Rinneadh anailís ar shleachta so-ghalaithe sa spás ceann a bailíodh ó fhual úr, 24 uair an chloig, 72 uair an chloig, agus 168 uair an chloig d'aois le haghaidh sleachta so-ghalaithe ó mhoscító Arabidopsis ag baint úsáide as olfactóiméadar feadán gloine díreach [18]. Rinneadh na turgnaimh le linn ZT 13-15, buaicthréimhse ghníomhaíocht lorg baile An. Arab [19]. Soilsíodh olfactóiméadar feadán gloine (80 cm × 9.5 cm id) le 3 ± 1 lx de sholas dearg ón mbarr. Chuaigh sreabhadh aeir scagtha agus taisithe gualaigh (25 ± 2 °C, 65 ± 2% taiseachas coibhneasta) thar an mbith-asai ag 30 cm s-1. Ritheann aer trí shraith scáileáin mogalra cruach dhosmálta, rud a chruthaíonn sreabhadh laminar agus struchtúr pluma aonfhoirmeach. Dáileoir tampón fiaclóireachta (4 cm × 1 cm; L:D; DAB Dental AB), ar crochadh ó chorna 5 cm ar cheann gaoithe an olfactóiméadar, le hathruithe spreagthóra gach 5 nóiméad. Chun anailíse, úsáideadh 10 μl de gach sliocht spáis chinn, caolaithe 1:10, mar spreagadh. Úsáideadh méid comhionann peantáin mar rialú. Cuireadh moscítí aonair a bhí ag lorg óstach nó ag sú fola i gcliabháin scaoilte aonair 2-3 uair an chloig roimh thús an turgnaimh. Cuireadh an cliabhán scaoilte ar thaobh na gaoithe den olfactóiméadar, agus ligeadh do na moscítí dul i dtaithí ar feadh 1 nóiméad, agus ansin osclaíodh comhla féileacán an chliabháin le scaoileadh. Rinneadh anailís ar mhealladh chuig cóireáil nó rialú mar an cion de na moscítí a tháinig i dteagmháil leis an bhfoinse laistigh de 5 nóiméad ón scaoileadh. Macasamhlaíodh gach sliocht so-ghalaithe agus rialú spáis chinn 30 uair ar a laghad, agus chun éifeachtaí aon lae amháin a sheachaint, tástáladh an líon céanna cóireálacha agus rialuithe ar gach lá turgnamhach. Freagraí cuardaigh ó óstach agus ó Fhreagraí a chothaíodh le fuil. Rinneadh anailís ar shraitheanna Arabacha i gcoinne spáis chinn ag baint úsáide as aischéimniú lóistíochta ainmniúil agus ina dhiaidh sin comparáidí péire le haghaidh cóimheasa corr (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institiúid Teo.).
Freagairt sceite An. Rinneadh anailís ar shleachta spáis chinn ó fhual bó úr agus aibithe i gcliabháin Bugdorm (30 cm × 30 cm × 30 cm; MegaView Science). Chuir cupáin phlaisteacha (30 mL; Nolato Hertila) líonta le 20 mL d'uisce driogtha an tsubstráit sceite ar fáil agus cuireadh iad i gcúinní os coinne an chliabháin, 24 cm óna chéile. Coigeartaíodh cupáin chóireála le 10 μl de gach sliocht spáis chinn ag caolú 1:10. Úsáideadh méid comhionann peantáin chun an cupán rialaithe a choigeartú. Malartaíodh cupáin chóireála agus rialaithe idir gach turgnamh chun rialú a dhéanamh ar éifeachtaí suímh. Scaoileadh deich baineannach a chothaíodh le fuil i gcliabháin turgnamhacha ag ZT 9-11 agus comhairíodh uibheacha sna cupáin 24 uair an chloig ina dhiaidh sin. Is é an fhoirmle chun an t-innéacs sceite a ríomh: (líon na n-uibheacha a leagadh sa chupán cóireála - líon na n-uibheacha a leagadh sa chupán rialaithe)/(líon iomlán na n-uibheacha a leagadh). Rinneadh gach cóireáil arís 8 n-uaire.
Rinneadh anailís crómatagrafaíochta gáis agus braite patrún antenna leictreon (GC-EAD) ar An.arabiensis baineann mar a thuairiscíodh roimhe seo [20]. Go hachomair, scaradh sleachta so-ghalaithe úra sa spás ceann ag baint úsáide as Agilent Technologies 6890 GC (Santa Clara, CA, SAM) a raibh colún HP-5 (30 m × 0.25 mm id, tiús scannáin 0.25 μm, Agilent Technologies) feistithe air. agus fual atá ag dul in aois. Baineadh úsáid as hidrigin mar an chéim shoghluaiste le meánráta sreafa líneach de 45 cm s-1. Instealladh gach sampla (2 μl) ar feadh 30 soicind i mód gan scoilt le teocht ionraoin de 225 °C. Cláraíodh teocht an oighinn GC ó 35 °C (coinneáil 3 nóiméad) go 300 °C (coinneáil 10 nóiméad) ag 10 °C nóim-1. Sa scoilteoir eisilteach GC, cuireadh 4 psi nítrigine leis agus scoilteadh 1:1 é i gcros íseal-toirte marbh Gerstel 3D/2 (Gerstel, Mülheim, DE) idir an brathadóir ianúcháin lasrach agus an EAD. Ritheadh ​​​​an ribeadán eisilteach GC le haghaidh EAD trí líne aistrithe ODP-2 Gerstel, a rianaíonn teocht an oighinn GC móide 5 °C, isteach i bhfeadán gloine (10 cm × 8 mm), áit ar meascadh é le haer scagtha le carbón, taisithe (1.5 l nóim-1). Cuireadh an t-antenna 0.5 cm ó asraon an fheadáin. Bhí macasamhail amháin i ngach corrmhíol aonair, agus i gcás corrmhíoltaí a bhí ag lorg óstach, rinneadh trí mhacasamhail ar a laghad ar shamplaí fuail de gach aois.
Aitheantas comhdhúile bithghníomhacha i mbailiúcháin spáis cheann fuail úr agus aibithe bó ag baint úsáide as GC agus mais-speictriméadar comhcheangailte (GC-MS; 6890 GC agus 5975 MS; Agilent Technologies) chun freagairtí antennacha a spreagadh in anailís GC-EAD, ag feidhmiú i mód ianúcháin tionchair leictreon ag 70 eV. Bhí colún ribeach shilice comhleáite brataithe le HP-5MS UI (trastomhas istigh 60 m × 0.25 mm, tiús scannáin 0.25 μm) feistithe ar an GC ag baint úsáide as héiliam mar an chéim shoghluaiste le meánráta sreafa líneach de 35 cm s-1. Instealladh sampla 2 μl ag baint úsáide as na socruithe insteallóra agus teocht an oighinn chéanna agus a bhí ann don anailís GC-EAD. Aithníodh comhdhúile bunaithe ar a n-am coinneála (innéacs Kovát) agus mais-speictrim i gcomparáid leis an leabharlann saincheaptha agus leabharlann NIST14 (Agilent). Deimhníodh na comhdhúile aitheanta trí chaighdeáin bharántúla a instealladh (Comhad Breise 1: Tábla S2). Chun cainníochtú, aicéatáit heiptile (10 ng, íonacht cheimiceach 99.8%, Aldrich) a instealladh mar chaighdeán seachtrach.
Measúnú a dhéanamh ar éifeachtúlacht meascáin bholadh shintéiseach ina bhfuil comhdhúile bithghníomhacha a aithníodh i bhfual úr agus aibithe chun Ans.arabiensis atá ag lorg óstach agus ag sú fola a mhealladh, ag baint úsáide as an olfactóiméadar agus an prótacal céanna agus atá thuas. Rinne meascáin shintéiseacha aithris ar chomhdhéanamh agus ar chomhréireanna na gcomhdhúl i sleachta so-ghalaithe measctha spáis cheann de fhual úr, 24 uair an chloig, 48 uair an chloig, 72 uair an chloig, agus 168 uair an chloig aibithe (Fíor 5D-G; Comhad Breise 1: Tábla S2). Chun anailíse, bain úsáid as 10 μl de chaolú 1:100 den mheascán lán-shintéiseach, le ráta scaoilte foriomlán idir thart ar 140-2400 ng h-1, chun tarraingteacht do mhoscítí óstacha agus sú fola a mheas. Ina dhiaidh sin, déantar an tástáil ar mheascáin iomlána, ina mbaintear meascáin dhealaitheacha de chomhdhúile aonair den mheascán iomlán. Freagraí cuardaigh ó Ans óstach agus ó Ans a chothaítear le fuil. Rinneadh anailís ar mheascáin Arabacha i gcomparáid le meascáin shintéiseacha agus dhealaitheacha ag baint úsáide as aischéimniú lóistíochta ainmniúil agus ina dhiaidh sin comparáidí péire le haghaidh cóimheasa corr. (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Chun measúnú a dhéanamh ar cibé an bhféadfadh fual bó a bheith ina chomhartha gnáthóige óstach do mhoscítí maláire, cuireadh fual bó úr agus aibithe, a bailíodh mar a thuairiscítear thuas, agus uisce i mbuicéid mogaill 3 l (100 ml) agus socraíodh iad i ngaistí baoite óstacha. (Leagan BG-HDT; BioGents, Regensburg, an Ghearmáin). Deich ngaiste curtha 50 m óna chéile i bhféarach, 400 m ó phobal an tsráidbhaile (Silay, an Aetóip, 5°53´24´´N, 37°29´24´´O) agus gan aon eallach, ar thalamh pórúcháin buan agus i sráidbhailte. Téite cúig ghaiste chun láithreacht óstaigh a insamhladh, agus fágadh cúig ghaiste gan téamh. Déantar gach suíomh cóireála a rothlú gach oíche ar feadh cúig oíche san iomlán. Rinneadh comparáid idir líon na mosquito a gabhadh i ngaistí a raibh fual d'aoiseanna difriúla orthu ag baint úsáide as aischéimniú lóistíochta le dáileadh déthéarmach béite (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
I sráidbhaile ina bhfuil maláire dúchasach gar do bhaile Maki, réigiún Oromia, an Aetóip (8° 11′ 08″ T, 38° 81′ 70″ O; Fíor 6A). Rinneadh an staidéar idir lár mhí Lúnasa agus lár mhí Mheán Fómhair roimh an spraeáil iarmharach bliantúil faoi dhíon, mar aon le séasúr fada báistí. Roghnaíodh cúig phéire tithe (20–50 m óna chéile) atá suite ar imeall an tsráidbhaile don staidéar (Fíor 6A). Ba iad na critéir a úsáideadh chun na tithe a roghnú: gan aon ainmhithe ceadaithe sa teach, gan aon chócaireacht faoi dhíon (ag tarraingt adhmaid tine nó gualaigh) (ar a laghad le linn na tréimhse trialach), agus tithe le huasmhéid beirt áitritheoirí, ag codladh i dtithe neamh-fheithidicídí. faoin líontán mosquito cóireáilte. Deonaíodh ceadú eiticiúil ag an mBord Athbhreithnithe Eitice Taighde Institiúideach (IRB/022/2016) de chuid Dámh na nEolaíochtaí Nádúrtha (CNS-IRB), Ollscoil Addis Ababa, i gcomhréir leis na treoirlínte a bunaíodh le Dearbhú Heilsincí ó Chumann Leighis an Domhain. Fuarthas toiliú ó gach ceann teaghlaigh le cúnamh ó fhoireann síneadh sláinte. Formhuinítear an próiseas iomlán ag riaracháin áitiúla ag leibhéal an cheantair agus an bharda ('kebele'). Lean an dearadh turgnamhach dearadh cearnóg Laidineach 2 × 2, inar sannadh meascáin shintéiseacha agus rialuithe do thithe péireáilte ar an gcéad oíche agus malartaíodh iad idir tithe ar an gcéad oíche turgnamhach eile. Rinneadh an próiseas seo arís deich n-uaire. Ina theannta sin, chun gníomhaíocht mosquito a mheas i dtithe roghnaithe, socraíodh na gaistí CDC le rith cúig oíche as a chéile ag tús, lár agus deireadh na trialach allamuigh ag an am céanna den lá.
Tuaslagadh meascán sintéiseach ina raibh sé chomhdhúil bhithghníomhacha i heptán (grád tuaslagóra GC 97.0%, Sigma Aldrich) agus scaoileadh é ag 140 ng h-1 ag baint úsáide as dáileoir buaic cadáis [20]. Lig an dáileoir buaic do na comhdhúile go léir a bheith scaoilte i gcionmhaireachtaí tairiseacha ar feadh an turgnaimh 12 uair an chloig. Baineadh úsáid as heptán mar rialú. Crochadh an fial in aice le pointe iontrála gaiste solais na nIonad um Rialú agus Cosc Galar (CDC) (John W. Hock Company, Gainesville, FL, SAM; Fíor 6A). Crochadh na gaistí 0.8 – 1 m os cionn na talún, gar do bhun na leapa, agus chodail oibrí deonach faoi líontán mosquito neamhchóireáilte agus d'oibrigh sé idir 18:00 agus 06:30. Rinneadh scagadh ina dhiaidh sin ar na mosquitos a gabhadh de réir inscne agus stádais fhiseolaíoch (neamhbheathaithe, beathaithe, leaththorrach, agus torrach [21] ag baint úsáide as anailís imoibriú slabhra polaiméaráise (PCR) chun na speicis a shainaithnítear go moirfeolaíoch mar A. gambiae sl. Baill den choimpléasc [23]. I Sa staidéar allamuigh, rinneadh anailís ar ghaistí tithe péireáilte ag baint úsáide as samhail oiriúnachta lóistíochta ainmniúil, áit a raibh an tarraingt mar an athróg spleách agus an chóireáil (meascán sintéiseach vs rialú) mar an éifeacht sheasta (JMP® 14.0. 0. SAS Institute Inc.). Anseo, tuairiscímid na luachanna χ2 agus p ón tástáil cóimheas dóchúlachta.
Meastóireacht a dhéanamh ar an sábháilteacht atá ann. Bhí arabiensis in ann fual, a phríomhfhoinse nítrigine, úiré, a fháil trí bheathú díreach, laistigh de 48 uair an chloig ón riarachán ar feadh 4 lá tar éis (dpe) trialacha beathaithe baineannaigh a bhí ag lorg óstach agus a beathaíodh le fuil (Fíor 1A). Ghlac baineannaigh a bhí ag lorg óstach agus a shúigh fuil i bhfad níos mó siúcrós ná aon aiste bia nó uisce eile (F(5,426) = 20.15, p < 0.0001 agus F(5,299) = 56.00, p < 0.0001, faoi seach; Fíor 1B,C). Ina theannta sin, d'ith baineannaigh a bhí ag lorg óstach níos lú san fhual ag 72 uair an chloig i gcomparáid le fual ag 168 uair an chloig (Fíor 1B). Nuair a tairgeadh aiste bia ina raibh úiré dóibh, ghlac baineannaigh a bhí ag lorg óstach méid i bhfad níos mó úiré ag 2.69 mM i gcomparáid le gach tiúchan agus uisce eile, cé nach raibh idirdhealú idir é agus siúcrós 10% (F(10,813)). = 15.72, p < 0.0001; Fíor 1D). Bhí sé seo i gcodarsnacht le freagairt na mban a chothaíodh le fuil, a d’ionsúigh go suntasach níos mó aistí bia ina raibh úiré ná uisce de ghnáth, cé go raibh sé i bhfad níos lú ná 10% siúcrós (F(10,557) = 78.35, p < 0.0001; Fíor 1).1E).Ina theannta sin, agus comparáid á déanamh idir an dá staid fhiseolaíoch, ionsúigh baineannaigh a ndearnadh fleibeatómú orthu níos mó úiré ná baineannaigh a bhí ag lorg óstach ag na tiúchain is ísle, agus ionsúigh na baineannaigh seo méideanna comhchosúla úiré ag tiúchain níos airde (F(1,953)= 78.82, p < 0.0001; Fíor 1F, G).Cé gur chosúil go raibh luachanna optamacha ag iontógáil ó aiste bia ina raibh úiré (Fíor 1D,E), bhí baineannaigh sa dá staid fhiseolaíoch in ann an méid úiré a ionsúíodh thar raon iomlán na dtiúchan úiré a mhodhnú ar bhealach loglíneach (Fíor 1F,G). Ar an gcaoi chéanna, is cosúil go rialaíonn moscítí a n-iontógáil nítrigine trí rialáil a dhéanamh ar an méid fuail a ionsúitear, toisc go léirítear méid an nítrigine san fhual sa mhéid a ionsúitear (íomhánna ionsúite Fíor 1B, C agus B).
Chun measúnú a dhéanamh ar éifeachtaí fuail agus úiré ar mharthanas mosquito a lorgaíonn óstach agus a shúitear fola, tugadh fual de na ceithre aois (úr, 24 uair an chloig, 72 uair an chloig, agus 168 uair an chloig tar éis taiscthe) do bhaineannaigh agus d'fhóin raon tiúchan úiré, chomh maith le huisce driogtha agus 10% siúcrós mar rialú (Fíor 2A). Léirigh an anailís marthanais seo go raibh tionchar suntasach ag an aiste bia ar mharthanas foriomlán i measc baineannach a lorgaíonn óstach (fual: χ2 = 108.5, df = 5, p < 0.0001; úiré: χ2 = 122.8, df = 5, p < 0.0001; Fíor 2B, C) agus baineannaigh a beathaíodh le fuil (fual: χ2 = 93.0, df = 5, p < 0.0001; úiré: χ2 = 137.9, df = 5, p < 0.0001; Fíor 2D,E). I ngach turgnamh, bhí rátaí marthanais i bhfad níos ísle ag baineannaigh a chothaíodh aiste bia fuail, úiré, agus uisce i gcomparáid le baineannaigh a chothaíodh aiste bia siúcróis (Fíor 2B-E). Léirigh baineannaigh a bhí ag lorg óstach agus a chothaíodh fual úr agus sean rátaí marthanais éagsúla, agus an dóchúlacht marthanais is ísle ag na daoine a chothaíodh fual sean 72 uair an chloig (p = 0.016) (Fíor 2B). Ina theannta sin, mhair baineannaigh a bhí ag lorg óstach agus a chothaíodh 135 mM úiré níos faide ná rialuithe uisce (p < 0.04) (Fíor 2C). I gcomparáid le huisce, mhair mná a chothaíodh fual úr agus fual 24 uair an chloig níos faide (p = 0.001 agus p = 0.012, faoi seach; Fíor 2D), agus mhair mná a chothaíodh fual 72 uair an chloig níos faide ná iad siúd a chothaíodh fual úr gearr baineann agus fual 24 uair an chloig d'aois (p < 0.0001 agus p = 0.013, faoi seach; Fíor 2D). Nuair a chothaíodh 135 mM úiré, mhair baineannaigh a chothaíodh fuil... mhair siad níos faide ná aon tiúchan eile úiré agus uisce (p < 0.013; Fíor 2E).
Marthanacht na mban Anopheles arabinis óstaigh agus na mban a shúigh fuil agus a chothaíonn fual bó agus úiré. Sa bhithmheasúnú (A), tugadh aiste bia do na moscítí baineanna ina raibh fual bó úr agus aibithe, tiúchain éagsúla úiré, siúcrós (10%) agus uisce driogtha (H2O). Taifeadadh marthanacht na moscítí a lorgaíonn óstach (B, C) agus a shúigh fuil (D, E) gach 12 uair an chloig go dtí go raibh na baineannaigh go léir a chothaíodh ar fhual (B, D) agus úiré (C, E), agus na rialuithe, siúcrós agus uisce, marbh.
Bhí difríocht idir corrmhíolta a bhí ag lorg óstach agus corrmhíolta a bhí ag sú fola, agus léirigh siad seo níos lú gníomhaíochta eitilte san iomlán (Fíor 3). Léirigh corrmhíolta a bhí ag lorg óstach a sholáthair fual úr agus aosta nó siúcrós agus uisce patrúin eitilte difriúla (Fíor 3), agus baineannaigh a bhí ag beathú ar fhual úr níos gníomhaí ag breacadh an lae, agus iad siúd a raibh fual 24 agus 168 uair an chloig d'aois orthu, léirigh corrmhíolta a bhí ag beathú ar fhual patrúin eitilte éagsúla agus bhí siad gníomhach den chuid is mó sa lá. Léirigh corrmhíolta baineann a sholáthair siúcrós nó fual 72 uair an chloig gníomhaíocht i rith na tréimhse 24 uair an chloig, agus bhí baineannaigh a sholáthair uisce níos gníomhaí i lár na tréimhse. Léirigh corrmhíolta a beathaíodh ar siúcrós na leibhéil ghníomhaíochta is airde go déanach san oíche agus go moch ar maidin, agus bhí meath seasta ar ghníomhaíocht thar 24 uair an chloig ag na cinn a d'ith fual 72 uair an chloig d'aois (Fíor 3).
Feidhmíocht eitilte na mban Anopheles arabinis atá ag lorg fola agus ag beathú ar fhual bó agus úiré. Sa tástáil muileann eitilte, ceanglaíodh mosquitos baineann a chothaíodh ar fhual bó úr agus aibithe, tiúchain éagsúla úiré, siúcrós (10%), agus uisce driogtha (H2O) le hairm chothrománacha, rothlacha go saor (thuas). Maidir le baineannaigh atá ag lorg óstach (ar chlé) agus ag sú fola (ar dheis), taifeadadh an fad iomlán agus líon na n-eitiltí in aghaidh na huaire do gach aiste bia thar thréimhse 24 uair an chloig (dorcha: liath; geal: bán). Taispeántar an meánfhad agus meánlíon na mbabhtaí ar dheis an ghraif ghníomhaíochta circadian. Léiríonn barraí earráide earráid chaighdeánach an mheáin. Féach an téacs ar anailís staitistiúil.
Go ginearálta, lean gníomhaíocht eitilte iomlán na mbaineannach a bhí ag lorg óstach patrún cosúil le patrún an achair eitilte thar thréimhse 24 uair an chloig. Bhí tionchar suntasach ag an aiste bia a ionghabháil siad ar an meánfhad eitilte (F(5, 138) = 28.27, p < 0.0001), agus d'eitil baineannaigh a bhí ag lorg óstach a ionghabháil 72 uair an chloig d'fhual achair i bhfad níos faide i gcomparáid le gach aiste bia eile (p < 0.0001), agus d'eitil moscítí a chothaíodh le siúcrós níos faide ná moscítí a chothaíodh le fual úr (p = 0.022) agus 24 uair an chloig d'aois (p = 0.022). I gcodarsnacht leis an bpatrún gníomhaíochta eitilte a thuairiscítear leis an aiste bia fuail, léirigh baineannaigh a bhí ag lorg óstach a chothaíodh le úiré gníomhaíocht eitilte leanúnach thar thréimhse 24 uair an chloig, ag buaicphointe le linn an dara leath den chéim dhorcha (Fíor 3). Cé go raibh patrúin ghníomhaíochta cosúil, mhéadaigh baineannaigh a bhí ag lorg óstach a chothaíodh le úiré an meánfhad eitilte go suntasach ag brath ar an tiúchan ionsúite (F(5, 138) = 1310.91, p < 0.0001). D’eitil baineannaigh a bhí ag lorg óstach a tugadh d’aon tiúchan úiré níos faide ná baineannaigh a tugadh uisce nó siúcrós dóibh (p < 0.03).
Bhí gníomhaíocht eitilte fhoriomlán na moscítí a shúigh fuil cobhsaí agus leanúnach ar feadh 24 uair an chloig ar fud na n-aistí bia go léir, le méadú ar ghníomhaíocht fuail le linn an dara leath den tréimhse dorcha do bhaineannaigh a beathaíodh ar uisce chomh maith le i mbaineannaigh a beathaíodh úr agus 24 uair an chloig d'aois (íomhá 3). Cé gur chuir aiste bia fuail isteach go suntasach ar an meánfhad eitilte i mbaineannaigh a beathaíodh ar fhuil (F(5, 138) = 4.83, p = 0.0004), ní raibh tionchar suntasach ag aiste bia úiré (F(5, 138) = 1.36, p = 0.24) le fual eile agus aiste bia rialaithe (úr, p = 0.0091; 72 uair an chloig, p = 0.0022; 168 uair an chloig, p = 0.001; siúcrós, p = 0.0017; dH2O, p = 0.036).
Rinneadh measúnú ar éifeachtaí beathaithe fuail agus úiré ar pharaiméadair atáirgthe i mbith-asaí breithe uibheacha (Fíor 4A) agus rinneadh imscrúdú orthu de réir líon na n-uibheacha a leag gach baineannach, méid na n-uibheacha, agus larbhaí an chéad instar nua-ghortha. Líon na n-uibheacha a leagadh. Athraíonn baineannaigh Arabacha a chothaíodh le fual de réir aiste bia (F(5,222) = 4.38, p = 0.0008; Fíor 4B). Leag baineannaigh a chothaíodh béile fola fuail 24 uair an chloig i bhfad níos mó uibheacha ná baineannaigh a chothaíodh aistí bia fuail eile agus bhí siad cosúil leo siúd a chothaíodh siúcrós (Fíor 4B). Mar an gcéanna, athraíonn méid na n-uibheacha a leag baineannaigh a chothaíodh le fual de réir aiste bia (F(5, 209) = 12.85, p <0.0001), agus leag baineannaigh a chothaíodh le fual agus siúcrós 24 uair an chloig uibheacha i bhfad níos mó ná baineannaigh a chothaíodh le huisce, agus bhí uibheacha na mbaineannach a chothaíodh le 168 uair an chloig d'fhual i bhfad níos lú (Fíor 4C). Ina theannta sin, bhí tionchar suntasach ag aiste bia fuail ar mhéid na larbhaí. (F(5, 187) = 7.86, p < 0.0001), le larbhaí i bhfad níos mó ag teacht amach as uibheacha a leagadh ag baineannaigh 24 agus 72 uair an chloig d'aois a chothaíodh le fual ná mar a bhí ag teacht amach as uibheacha a leagadh ó larbhaí uibheacha. Baineannaigh a chothaíodh le huisce agus baineannaigh a chothaíodh le fual 168 uair an chloig d'aois (Fíor 4D).
Feidhmíocht atáirgthe Anopheles arabinis baineann a bhí ag beathú ar fhual bó agus úiré. Tugadh aistí bia do mhoscítí baineann a bhí á gcothú le fuil, ina raibh fual bó úr agus aibithe, tiúchain éagsúla úiré, siúcrós (10%), agus uisce driogtha (H2O) ar feadh 48 uair an chloig sular cuireadh i mbith-asaí iad agus sular fuarthas foshraitheanna breithe uibheacha ar feadh 48 uair an chloig (A). Bhí tionchar suntasach ag an aiste bia a cuireadh ar fáil ar líon na n-uibheacha (B, E), ar mhéid na n-uibheacha (C, F) agus ar mhéid na larbhaí (D, G). Bhí difríocht shuntasach idir na meáin do gach paraiméadar a tomhaiseadh ag baint úsáide as ainmneacha litreacha éagsúla (ANOVA aontreo ag baint úsáide as anailís iar-hoc Tukey; p < 0.05). Léiríonn barraí earráide earráid chaighdeánach an mheáin.
Ós rud é gurb é an príomh-chomhpháirt nítrigineach den fhual é, bhí tionchar suntasach ag úiré, nuair a tugadh é mar aiste bia do bhaineannaigh a chothaíodh le fuil, ar pharaiméadair atáirgthe i ngach staidéar. Ag brath ar thiúchan úiré (F(11, 360) = 4.69; p < 0.0001), leag baineannaigh a chothaíodh le tiúchain úiré idir 134 µM agus 1.34 mM níos mó uibheacha (Fíor 4E). Leag baineannaigh a chothaíodh le tiúchain úiré de 134 µM nó os a chionn uibheacha níos mó ná baineannaigh a chothaíodh le huisce (F(10, 4245) = 36.7; p < 0.0001; Fíor 4F), agus bhí méid na larbhaí, cé go raibh tionchar ag tiúchain chomhchosúla úiré i máithreacha (F(10, 3305) = 37.9; p < 0.0001), níos athraitheach (Fíor 4G).
Mealltacht fhoriomlán i leith sleachta so-ghalaithe spáis chinn fuail bó atá ag lorg óstach. Bhí tionchar suntasach ag aois an fhuail ar an arabiensis a measúnaíodh san olfactóiméadar feadáin ghloine (Fíor 5A) (χ2 = 15.9, df = 4, p = 0.0032; Fíor 5B). Léirigh anailís iar-hoc gur ba chúis le boladh sean-fuail ag 24 uair an chloig leibhéil tarraingteachta i bhfad níos airde i gcomparáid le gach cóireáil eile (72 uair an chloig: p = 0.0060, 168 uair an chloig: p = 0.012, peantán: p = 0.00070), seachas boladh fuail úir (p = 0.13; Fíor 5B). Cé nach raibh difríocht shuntasach idir mealltacht fhoriomlán na mosquitos a shúigh fola i leith boladh fuail (χ2 = 8.78, df = 4, p = 0.067; Fíor 5C), fuarthas amach go raibh na baineannaigh seo i bhfad níos tarraingtí i leith sleachta so-ghalaithe spáis chinn i gcomparáid le fual 72 uair an chloig d'aois i gcomparáid le rialuithe (p = 0.0066; Fíor 5C).
Freagraí iompraíochta ar bholadh fual bó nádúrtha agus sintéiseach agus iad ag cuardach Anopheles arabianus óstach agus fuilteach. Sceitse den olfactóiméadar feadán gloine (A). Mealladh sleachta so-ghalaithe spáis cheann ó fhual bó úr agus aibithe chuig moscítí óstacha (B) agus fuil-shúite (C). Aimsigh imoibriú teanntáin an Tiarna An. Taispeántar sleachta spáis cheann atá scartha ó fhual bó úr (D), 24 uair an chloig (E), 72 uair an chloig (F), agus 168 uair an chloig (G) aibithe. Taispeánann rianta braite antenna leictreon (EAD) athruithe voltais mar fhreagairt ar chomhdhúile bithghníomhacha sa spás ceann a eisítear ón gcrómatagraf gáis agus a bhraitear le brathadóir ianúcháin lasrach (FID). Léiríonn an barra scála aimplitiúid freagartha (mV) i gcoinne am coinneála (s). Taispeántar airíonna agus rátaí scaoilte (µg h-1) na gcomhdhúl bithghníomhach. Léiríonn réalta amháin (*) freagairt chomhsheasmhach íseal-aimplitiúid. Léiríonn réaltaí dúbailte (**) freagairtí neamh-in-atáirgthe. Aimsigh an t-óstach (H) agus Tá tarraingt dhifriúil ag an bhfuail-shúite (I) An.arabiensis i gcomparáid le meascáin shintéiseacha de bholadh úr agus sean-fhuail bó. Bhí difríocht shuntasach idir na meánchionmhaireachtaí de mhoscíteanna a mheall ainmneacha litreacha éagsúla (ANOVA aontreo ag baint úsáide as anailís iar-hoc Tukey; p < 0.05). Léiríonn barraí earráide earráid chaighdeánach an scála.
I gcás Ann.arabiensis baineann, 72 uair agus 120 uair tar éis béile fola, le linn sceite, níor léiríodh aon rogha do shleachta so-ghalaithe sa spás ceann ó fhual bó úr agus aibithe i gcomparáid le rialuithe peantáin (χ2 = 3.07, p > 0.05; Comhad breise 1: Fíor S1).
I gcás Ann.arabiensis baineann, shainaithin anailísí GC-EAD agus GC-MS ocht, sé, trí agus trí chomhdhúil bhithghníomhacha (Fíor 5D-G). Cé gur breathnaíodh difríochtaí i líon na gcomhdhúl a spreag freagairtí leictrifhiseolaíocha, bhí formhór na gcomhdhúl seo i láthair i ngach sliocht so-ghalaithe sa spás ceann a bailíodh ó fhual úr agus aibithe. Dá bhrí sin, i gcás gach sliocht, níor cuireadh san áireamh in anailísí breise ach comhdhúile a tháirg freagairt fhiseolaíoch ó na haeróga baineann os cionn na tairsí.
Mhéadaigh an ráta scaoilte so-ghalaithe iomlán de chomhdhúile bithghníomhacha sa bhailiúchán spáis cheann ó 29 µg h-1 i bhfual úr go 242 µg h-1 i bhfual a bhí aibithe 168 uair an chloig, den chuid is mó mar gheall ar mhéaduithe ar p-créasól agus m-formaildehíd. Feanól chomh maith le feanól. I gcodarsnacht leis sin, laghdaigh rátaí scaoilte comhdhúile eile, amhail 2-cichloheicséin-1-ón agus decanal, de réir mar a mhéadaigh aois an fhuail, rud a bhí comhghaolmhar leis an laghdú a breathnaíodh i ndéine an chomhartha (flúirse) sa chrómatagram (Fíor 5D) -G painéal clé) agus freagairtí fiseolaíocha ar na comhdhúile seo (Fíor 5D-G painéal deas).
Tríd is tríd, bhí cóimheas nádúrtha comhchosúil de chomhdhúile bithghníomhacha a sainaithníodh i sleachta so-ghalaithe de spásanna cinn fuail úra agus aibithe (Fíor 5D–G) ag an meascán sintéiseach agus níor chosúil gur spreag sé achomharc suntasach i gcuardach óstach (χ2 = 8.15, df = 4, p = 0.083; Fíor 5H) ná corrmhíolta a shúigh fuil (χ2 = 4.91, df = 4, p = 0.30; Fíor 5I). Mar sin féin, léirigh comparáidí péireáilte iar-hoc idir cóireálacha go raibh corrmhíolta a bhí ag lorg óstach tarraingteach go suntasach don mheascán sintéiseach d'fhual aibithe 24 uair an chloig i gcomparáid le rialuithe peantáin (p = 0.0086; Fíor 5H).
Chun ról na gcomhpháirteanna aonair i meascáin shintéiseacha fuail 24 uair an chloig a mheas, rinneadh meastóireacht ar shé mheascán dealaitheacha i gcoinne meascán iomlán sa mheasúnacht feadán-Y, inar baineadh comhdhúile aonair. I gcás corrmhíolta a bhí ag lorg óstach, bhí tionchar suntasach ag baint comhdhúile aonair ón meascán iomlán ar fhreagairtí iompraíochta (χ2 = 19.63, df = 6, p = 0.0032; Comhad Breise 1: Fíor S2A), bhí na meascáin dealaitheacha uile níos tarraingtí ná Níos lú ná measctha go hiomlán. I gcodarsnacht leis sin, ní raibh aon tionchar ag baint comhdhúile aonair ón meascán lán-shintéiseach ar fhreagairtí iompraíochta corrmhíolta a shúigh fuil (χ2 = 11.38, df = 6, p = 0.077), seachas decanal, a raibh leibhéil níos ísle mar thoradh orthu i gcomparáid leis an meascán iomlán Attraction (p = 0.022; Comhad Breise 1: Fíor S2B).
I sráidbhaile san Aetóip ina bhfuil maláire dúchasach, rinneadh meastóireacht ar éifeachtúlacht meascán sintéiseach d'fhual bó 24 uair an chloig chun moscítí a mhealladh faoi dhálaí allamuigh ar feadh deich n-oíche (Fíor 6A). Gabhadh agus aithníodh 4,861 moscít san iomlán, agus ba Anthropus.gambiae sl 45.7% díobh, ba Anopheles pharoensis 18.9% díobh agus ba Culex spp. 35.4% díobh (Comhad breise 1: Tábla S1). Is é Anopheles arabinis an t-aon bhall de choimpléasc speiceas An.Gambian a aithníodh trí anailís PCR. Ar an meán, gabhadh 320 moscít in aghaidh na hoíche, agus le linn an ama sin ghabh gaistí le baoite meascáin shintéiseacha níos mó moscítí ná gaistí péireáilte gan mheascán (χ2(0, 3196) = 170.0, p < 0.0001). Socraíodh gaistí gan bhaoite ar gach ceann de na cúig oíche rialaithe ag tús, lár agus deireadh na trialach. Gabhadh líon comhchosúil moscítí i ngach péire de gaistí, rud a léiríonn nach raibh aon chlaontacht idir tithe (χ2(0, 1665) = 9 × 10-13, p > 0.05) agus nach raibh aon laghdú daonra le linn na tréimhse staidéir. I gcomparáid le gaistí rialaithe, bhí méadú suntasach ar líon na mosquito a gabhadh sna gaistí ina raibh an meascán sintéiseach: cuardach óstach (χ2(0, 2107) = 138.7, p < 0.0001), beathú fola le déanaí (χ2(0, 650) = 32.2, p < 0.0001) agus toircheas (χ2(0, 228) = 6.27, p = 0.0123; Comhad Breise 1: Tábla S1). Léirítear é seo freisin i líon iomlán na mosquito a gabhadh: cuardach óstach > ag sú fola > torrach > leath-thorrach > fireannach.
Measúnú allamuigh ar éifeachtúlacht meascáin bholadh fual bó sintéiseach 24 uair an chloig. Rinneadh trialacha allamuigh i ndeisceart-lár na hAetóipe (léarscáil), in aice le baile Maki (cuir isteach), ag baint úsáide as gaiste solais Lárionad um Rialú Galar (CDC) (ar dheis) i dtithe péireáilte, le dearadh cearnógach Laidineach (íomhá ón aer) (A). Meallann agus gabhann fóta-ghaistí CDC sintéiseacha atá beathú le boladh baineann Anopheles arabesques (B), ach ní Anopheles farroes (C), ar bhealach difriúil, éifeacht atá ag brath ar an staid fhiseolaíoch. Ina theannta sin, ghabh na gaistí seo líon méadaithe go suntasach de na mosquitos óstacha Culex. (D) I gcomparáid leis an rialú. Léiríonn na barraí ar chlé meáninnéacs roghnúcháin na mosquitos a gabhadh i mbeirteanna gaistí beathú boladh (glas) agus rialaithe (oscailte) (N = 10), agus léiríonn na barraí ar dheis meáninnéacs roghnúcháin i mbeirteanna gaistí rialaithe (oscailte; N = 5). Léiríonn réaltaí leibhéil suntasachta staitistiúla (*p = 0.01 agus ***p < 0.0001)
Gabhadh na trí speiceas ar bhealaí difriúla i ngaistí ina raibh meascáin shintéiseacha. Agus óstach á lorg (χ2(1, 1345) = 71.7, p < 0.0001), beathú fola (χ2(1, 517) = 16.7, p < 0.0001) agus toircheas (χ2(1, 180) = 6.11, p = 0.0134), gabhadh .arabiensis sa ghaiste ag scaoileadh an mheascáin shintéisigh (Fíor 6B), agus ní raibh aon difríocht i méid An. Fuarthas Pharoensis i stáit fhiseolaíocha éagsúla (Fíor 6C). I gcás Culex, ní bhfuarthas ach méadú suntasach ar líon na mosquito a bhí ag lorg óstach i ngaistí a raibh an meascán sintéiseach iontu (χ2(1,1319) = 12.6, p = 0.0004; Fíor 6D), i gcomparáid le gaistí rialaithe.
Baineadh úsáid as gaistí baoite óstacha atá suite lasmuigh d'óstach féideartha idir láithreáin pórúcháin agus pobail thuaithe san Aetóip chun measúnú a dhéanamh ar cibé an n-úsáideann corrmhíolta maláire boladh fual bó mar chomhartha gnáthóige óstach. In éagmais comharthaí óstacha, teasa, agus le boladh fual bó nó gan é, níor gabhadh aon corrmhíolta (Comhad Breise 1: Fíor S3). Mar sin féin, i láthair teocht ard agus boladh fual bó, mealladh agus gabhadh corrmhíolta baineann maláire, cé go raibh líon beag acu, neamhspleách ar aois an fhuail (χ2(5, 25) = 2.29, p = 0.13; Comhad Breise 1: Fíor S3). I gcodarsnacht leis sin, níor ghabh rialuithe uisce corrmhíolta maláire ag teochtaí arda (Comhad Breise 1: Fíor S3).
Faigheann agus scaipeann moscítí maláire comhdhúile ina bhfuil nítrigin trí bheathú cúitimh ar fhual bó (i.e., locháin) chun tréithe saoil a fheabhsú, cosúil le feithidí eile [2, 4, 24, 25, 26]. Is acmhainn in-athnuaite atá ar fáil go héasca é fual bó a bhfuil dlúthbhaint aige le háiteanna scíthe do veicteoirí maláire, amhail seideanna bó agus fásra ard gar do thithe tuaithe agus do láithreacha sceite. Aimsigh moscítí baineann an acmhainn seo trí bholadh agus tá siad in ann glacadh comhdhúile nítrigineacha san fhual a rialáil, lena n-áirítear úiré, an phríomh-chomhpháirt nítrigineach san fhual [15, 16]. Ag brath ar staid fhiseolaíoch an moscítí baineann, leithdháiltear cothaithigh san fhual chun gníomhaíocht eitilte agus marthanacht moscítí baineann atá ag lorg óstach a fheabhsú, chomh maith le tréithe marthanais agus atáirgthe daoine aonair a chothaítear le fuil le linn an chéad timthriall gonadotropic. Dá bhrí sin, tá ról cothaitheach tábhachtach ag meascadh fuail do veicteoirí maláire atá dúnta cosúil le daoine fásta míchothaithe [8], toisc go soláthraíonn sé an cumas do moscítí baineann comhdhúile nítrigineacha tábhachtacha a fháil trí bheathú ísealriosca a dhéanamh. Tá iarmhairtí suntasacha eipidéimeolaíocha ag baint leis an bhfionnachtain seo, de réir mar a mhéadaíonn baineannaigh a saolré. ionchas, gníomhaíocht agus aschur atáirgthe, a mbíonn tionchar acu ar fad ar chumas veicteoirí. Ina theannta sin, d'fhéadfadh an t-iompar seo a bheith ina sprioc do chláir bainistíochta veicteoirí amach anseo.