Riamh roinnt topaicí fabhtcheartú LC as dáta, mar go bhfuil saincheisteanna i gcleachtas LC, fiú amháin mar a fheabhsaíonn teicneolaíocht ionstraim le himeacht ama.Tá go leor bealaí inar féidir fadhbanna a thagann chun cinn i gcóras LC agus deireadh suas i droch-buaic shape.When saincheisteanna a bhaineann le cruth buaic thagann chun cinn, cuidíonn liosta gearr de na cúiseanna féideartha do na torthaí seo a shimpliú ár dtaithí fabhtcheartaithe.
Bhí sé an-spraoi ag scríobh an cholúin “Fabhtcheartú LC” seo agus ag smaoineamh ar thopaicí gach mí, mar ní théann roinnt topaicí as stíl riamh. Cé go n-éiríonn topaicí nó smaointe áirithe i réimse an taighde crómatagrafaíochta de réir mar a chuirtear smaointe níos nuaí agus níos fearr ina n-ionad, i réimse na fabhtcheartaithe, ó tháinig an chéad alt fabhtcheartaithe chun cinn san iris seo (an LC Journal ag an am) ós rud é193 tá roinnt topaicí fós ag baint le roinnt blianta anuas. LC Fabhtcheartú ailt ar threochtaí comhaimseartha a dhéanann difear crómatagrafaíocht leacht (LC) (mar shampla, an chomparáid choibhneasta ár dtuiscint ar an éifeacht brú ar choinneáil [2] Dul Chun Cinn Nua) Ár léirmhíniú ar thorthaí LC agus conas fabhtcheartú le hionstraimí LC nua-aimseartha.In tráthchuid na míosa seo, tá mé ag leanúint ar aghaidh le mo shraith (3), a thosaigh i mí na Nollag 2021, a dhírigh ar” roinnt de na gnéithe “saoil agus bás fabhtcheartaithe riachtanacha le haghaidh aon ábhar.” an córas atá á úsáid againn. Tá ábhar lárnach na sraithe seo thar a bheith ábhartha do chairt bhalla cáiliúil an LCGC "Treoir Fabhtcheartú LC" (4) atá ar crochadh i go leor saotharlanna.For an tríú cuid den tsraith seo, roghnaigh mé díriú ar shaincheisteanna a bhaineann le cruth buaic nó tréithe buaic.Incredibly, liostaíonn an chairt balla 44 cúiseanna féideartha éagsúla a bhaineann le cruth buaic bocht!Ní féidir linn a mheas go mion ar an ábhar seo ar fad ar an ábhar seo go léir, mar sin ní féidir liom an t-alt seo ar fad a mheas go mion, ar an ábhar seo go léir ar an gcéad dul síos. na cinn is minice a fheicim.Tá súil agam go bhfaighidh úsáideoirí LC idir óg agus aosta roinnt leideanna cabhracha agus meabhrúcháin ar an ábhar tábhachtach seo.
Faighim níos mó agus níos mó ag freagairt ceisteanna fabhtcheartaithe le “tá rud ar bith indéanta”. D'fhéadfadh an freagra seo a bheith éasca nuair a bhíonn breathnuithe atá deacair a léirmhíniú á mbreithniú agam, ach is minic a fheictear dom é. Le go leor cúiseanna féideartha le buaicchruth lag, tá sé tábhachtach aigne oscailte a choinneáil agus an fhadhb a bhreithniú, agus a bheith in ann tosaíocht a thabhairt do chúiseanna féideartha chun tús a chur lenár n-iarrachtaí fabhtcheartaithe, ag díriú ar na féidearthachtaí is coitianta, tá an pointe seo an-tábhachtach.
Príomhchéim in aon chleachtadh fabhtcheartaithe — ach ceann is dóigh liom go bhfuil tearcráiteach — í a aithint go bhfuil fadhb ann nach mór a réiteach. Aithnítear go bhfuil fadhb ann go minic ciallaíonn sé a aithint go bhfuil cad a tharlaíonn don uirlis difriúil ónár n-ionchais, atá múnlaithe ag teoiric, eolas eimpíreach, agus taithí (5). Tagraíonn an “buaic-chruth” dá dtagraítear anseo ní hamháin do chruth siméadrach, siméadrach, siméadrach, siméadrach, siméadrach, imeall tosaigh, siméadrach, siméadrach. chomh maith leis an leithead.Tá ár n-ionchais maidir le cruth buaic iarbhír simple.Theory (6) tacaíonn go maith leis an ionchas téacsleabhar, i bhformhór na gcásanna, ba chóir na beanna crómatagrafaíochta a bheith siméadrach agus cloí leis an cruth dáileadh Gaussach, mar a thaispeántar i bhFíor 1a.What muid ag súil ó leithid buaic ceist níos casta, agus beidh muid ag plé an ábhar seo in alt sa todhchaí. an chuid eile den tráthchuid seo, caithfimid am ag plé roinnt samplaí sonracha de chásanna a bhféadfadh na cineálacha cruthanna seo a bheith mar thoradh orthu.
Uaireanta ní bhreathnaítear beanna ar chor ar bith sa chromatogram áit a bhfuiltear ag súil go mbeidh siad eluted.Léiríonn an chairt balla thuas go bhfuil easpa buaic (ag glacadh leis go bhfuil an t-anailísít sprice sa sampla i ndáiríre ag tiúchan ba chóir go mbeadh freagra an bhrathadóra leordhóthanach chun é a fheiceáil os cionn an torainn) go hiondúil bainteach le saincheist éigin ionstraime nó le coinníollacha míchearta céime soghluaiste (má breathnaítear ar chor ar bith).buaiceanna, go hiondúil “lag”). Tá liosta gearr d’fhadhbanna agus de réitigh fhéideartha sa chatagóir seo le fáil i dTábla I.
Mar a luadh thuas, is ábhar casta í an cheist maidir le cé mhéad buaic-leathnú a chur suas sula dtabharfar aird agus iarracht a shocrú é a phlé in alt sa todhchaí.Is é an taithí atá agam ná go mbíonn athrú suntasach ar chruth buaic ag gabháil le leathnú buaic suntasach go minic, agus bíonn buaic-eireaball níos coitianta ná réamhbhuaic nó scoilteadh.
Pléadh gach ceann de na saincheisteanna seo go mion in eagráin roimhe seo de Fabhtcheartú LC, agus is féidir le léitheoirí a bhfuil suim acu sna hábhair seo tagairt a dhéanamh do na hailt roimhe seo chun faisnéis a fháil ar na bunchúiseanna agus na réitigh fhéideartha ar na saincheisteanna seo.Tuilleadh sonraí.
Is féidir le feiniméin cheimiceacha nó fhisiceacha a bheith ina gcúis le fuíoll buaic, tosaigh buaic, agus scoilteadh, agus athraíonn an liosta réitigh fhéideartha ar na fadhbanna seo go forleathan, ag brath ar cibé an bhfuil muid ag déileáil le fadhb ceimiceach nó fisiceach.Go minic, trí chomparáid a dhéanamh idir na beanna éagsúla i crómatogram, is féidir leat leideanna tábhachtacha a fháil faoi cé acu an culprit.Má tá gach beanna i crómatogram mura bhfeiceann ach cruthanna den chineál céanna is dócha, is dócha nach bhfuil an chuma ar an gcuid eile ach cruthanna den chineál céanna, is dócha nach bhfuil an chuma ar an gcuid eile ach cruthanna den chineál céanna, is dócha nach bhfuil an chuma ar an gcuid eile ach cruthanna den chineál céanna. is dócha go ceimiceach.
Tá na cúiseanna ceimiceacha a bhaineann le buaic-eireaball ró-chasta le plé go hachomair anseo.Déantar tagairt don léitheoir spéisiúil don eagrán le déanaí de “Fabhtcheartú LC” le haghaidh plé níos doimhne (10). Mar sin féin, is é an rud atá éasca le hiarracht a dhéanamh mais an anailítí insteallta a laghdú agus féachaint an dtagann feabhas ar an mbuaicchruth. ní mór coinníollacha crómatagrafaíochta a athrú ionas gur féidir buaicchruthanna maithe a fháil fiú nuair a chuirtear maiseanna níos mó isteach.
Tá go leor cúiseanna fisiceacha féideartha le haghaidh fuíll buaic.Déantar léitheoirí a bhfuil suim acu i bplé mionsonraithe ar na féidearthachtaí a tharchur chuig saincheist eile le déanaí de “Fabhtcheartú LC” (11).Is é ceann de na cúiseanna fisiceacha is coitianta a bhaineann le buaic-srónbheannach ná nasc lag ag pointe idir an injector agus an brathadóir (12).Tá sampla an-mhór léirithe i bhFíor 1d, a fuarthas i mo shaotharlann cúpla seachtain ó shin, níor chuir muid comhla instealladh nua isteach, agus níor chuir muid isteach córas toirte beag roimhe seo. ferrule a bhí múnlaithe ar ribeach cruach dhosmálta.Tar éis roinnt turgnaimh fabhtcheartaithe tosaigh, thuig muid go raibh an doimhneacht calafoirt sa stator comhla insteallta i bhfad níos doimhne ná mar a bhí in úsáid againn chun, a eascraíonn i líon mór marbh ag bun an port.This fhadhb a réiteach go héasca trí ionad an lúb insteallta le feadán eile, is féidir linn a choigeartú an ferrule go dtí an suíomh ceart chun deireadh a chur leis an toirt marbh ag bun an port.
Féadann fadhbanna fisiceacha nó ceimiceacha a bheith ina gcúis le buaic-aghaidheanna cosúil leis na cinn a léirítear i bhFíor 1e freisin.Is cúis choitianta fhisiciúil an chiumhais tosaigh é nach bhfuil leaba na gcáithníní sa cholún pacáilte go maith, nó go bhfuil na cáithníní atheagrú le himeacht ama. Mar is amhlaidh le buaic-sracadh de bharr an fheiniméan fisiceach seo, is é an bealach is fearr chun é seo a shocrú ná an colún a athsholáthar agus leanúint ar aghaidh. Go bunúsach, is minic a éiríonn an buaiclíne tosaigh de bharr na gcoinníollacha ceimiceacha. Tá baint líneach le tiúchan an anailíte sa cholún. Ciallaíonn sé seo mar a mhéadaíonn mais anailíte a instealladh isteach sa cholún, go n-éireoidh an buaic níos airde, ach ní níos leithne. beanna, a eascraíonn i rá nó trailing edges.As le ró-ualach mais is cúis eireaball buaic (10), is féidir buaic le rá de bharr coinneáil nonlinear a dhiagnóiseadh freisin trí laghdú a instealladh mais anailíte.
Uaireanta breathnaimid ar bhuaic “scoilte” mar a léirítear i bhFíor 1f.Is é an chéad chéim chun an fhadhb seo a réiteach ná a chinneadh an bhfuil an buaicchruth mar gheall ar chomh-eiteachas páirteach (ie, láithreacht dhá chomhdhúil ar leith ach go dlúth eluting). an colún féin.Go minic, is é an leid is tábhachtaí leis an gcinneadh seo cibé an léiríonn gach beanna sa chromatogram cruthanna scoilte, nó díreach ceann amháin nó dhó.Más rud é nach bhfuil ann ach ceann amháin nó dhó, is dócha gur saincheist comh-elution í;má scoiltear gach buaic, is ceist fhisiciúil í, is dócha, a bhaineann leis an gcolún féin.
Is gnách go mbíonn beanna scoilte a bhaineann le hairíonna fisiceacha an cholúin féin mar gheall ar fhrící ionraoin nó asraonta atá blocáilte go páirteach, nó atheagrú na gcáithníní sa cholún, rud a ligeann don chéim soghluaiste sreabhadh níos tapúla ná an chéim soghluaiste i réimsí áirithe den fhoirmiú cainéal colún .i réigiúin eile (11).áfach, i mo thaithí, tá sé seo de ghnáth gearrthéarmach seachas fadtéarmach réiteach.This minic marfach le colúin nua-aimseartha má recombine na cáithníní laistigh den column.At an bpointe seo, is fearr a chur in ionad an colún agus leanúint ar aghaidh.
Léiríonn an bhuaic i bhFíor 1g, freisin ó shampla le déanaí i mo saotharlann féin, de ghnáth go bhfuil an comhartha chomh hard sin go bhfuil bainte amach an deireadh ard an range.For freagartha brathadóirí ionsúite optúla (UV-vis sa chás seo), nuair a bhíonn an tiúchan anailít an-ard, an anailít absorbs an chuid is mó den solas ag dul tríd an sreabhadh cille braite, ag fágáil an-beag solais a bheith faoi deara, foinsí éagsúla torainn a bhrath ó fhoinsí éagsúla an torainn leictreach a bhrath. éadrom agus “sruth dorcha”, rud a fhágann go bhfuil an comhartha an-"doiléir" ó thaobh cuma agus neamhspleách ar thiúchan anailíte.Nuair a tharlaíonn sé seo, is minic gur féidir an fhadhb a réiteach go héasca trí mhéid insteallta an anailíte a laghdú - méid an insteallta a laghdú, an sampla, nó an dá cheann a chaolú.
Sa scoil crómatagrafaíocht, úsáidimid an comhartha braite (ie, an y-ais sa chromatogram) mar tháscaire ar an tiúchan anailíte sa sampla.Mar sin dealraíonn sé corr a fheiceáil crómatogram le comhartha faoi bhun náid, mar is é an léirmhíniú simplí go léiríonn sé seo tiúchan anailíte diúltach - nach bhfuil ar ndóigh indéanta go fisiciúil.
Sa chás seo, ciallaíonn buaic diúltach go simplí go n-ionsúnn na móilíní eluting as an gcolún níos lú solais ná an chéim shoghluaiste féin díreach roimh agus tar éis an bhuaic. Is féidir é seo a tharlaíonn, mar shampla, nuair a úsáidtear tonnfhaid braite réasúnta íseal (<230 nm) agus breiseáin chéim soghluaiste a ionsúnn an chuid is mó den solas ag na tonnfhaid seo.Is féidir le breiseáin den sórt sin a bheith ina gcomhpháirteanna tuaslagóirí céim soghluaiste cosúil le formáid meatánóil bhuaic. cuar agus faisnéis chainníochtúil chruinn a fháil, mar sin níl aon chúis bhunúsach ann chun iad a sheachaint per se (tugtar “brath UV indíreach” ar an modh seo uaireanta) (13).
Is féidir le beanna diúltacha le feiceáil freisin nuair a úsáidtear braite innéacs athraonta (RI) nuair a bhíonn an t-innéacs athraonta comhpháirteanna seachas an anailít sa sampla, mar shampla an maitrís tuaslagóir, difriúil ó innéacs athraonta an chéim soghluaiste.
I gcuid a trí ar an ábhar bunúsach na fabhtcheartaithe LC, phléigh mé cásanna ina bhfuil an cruth buaic breathnaíodh difriúil ó na buaic ionchais nó gnáth shape.Effective fabhtcheartú fadhbanna den sórt sin a thosaíonn le heolas ar chruthanna buaic ag súil (bunaithe ar theoiric nó taithí roimh ré le modhanna atá ann cheana féin), mar sin tá diallais ó na hionchais evident.Peak fadhbanna cruth bhfuil go leor cúiseanna féideartha éagsúla (ró-leathan, fuíll, an chuid is mó chun tosaigh sonraí a phlé, etc. áit mhaith le fabhtcheartaithe a thosú, ach ní ghlacann sé gach féidearthacht. Is féidir le léitheoirí a bhfuil suim acu i liosta níos doimhne cúiseanna agus réitigh tagairt a dhéanamh do chairt bhalla “Treoir Fabhtcheartú LC” an LCGC.
(4) Cairt bhalla “Treoir Fabhtcheartú LC” LCGC. https://www.chromatographyonline.com/view/troubleshooting-wallchart (2021).
(6) A. Felinger, Anailís Sonraí agus Próiseáil Comhartha i gCrómatagrafaíocht (Elevier, Nua-Eabhrac, NY, 1998), lgh. 43-96.
(8) Wahab MF, Dasgupta PK, Kadjo AF agus Armstrong DW, Anal.Chim.Journal.Rev.907, 31–44 (2016). https://doi.org/10.1016/j.aca.2015.11.043.