Go raibh maith agat as cuairt a thabhairt ar Nature.com.Tá tacaíocht teoranta CSS ag an leagan brabhsálaí atá in úsáid agat.Chun an taithí is fearr a fháil, molaimid duit brabhsálaí nuashonraithe a úsáid (nó Mód Comhoiriúnachta a dhíchumasú in Internet Explorer).Idir an dá linn, chun tacaíocht leanúnach a chinntiú, cuirfimid an suíomh gan stíleanna agus JavaScript.
Braitheann torthúlacht na n-éan ar a gcumas go leor sperm inmharthana a stóráil ar feadh tréimhse fada ama sna tubules stórála sperm (SST).Tá an mheicníocht bheacht trína dtéann an spermatozoa isteach, ina gcónaíonn sé agus ina bhfágann sé an SST fós conspóideach.Léirigh sperm na gcearc sharkasi ard-chlaonadh i leith ceirtleán, ag foirmiú cuachta filiméadacha soghluaiste ina raibh go leor cealla.Mar gheall ar an deacracht a bhaineann le motility agus iompar spermatozoa a bhreathnú i bhfeadán fallopian teimhneach, d'úsáideamar gléas micreashreabhach le trasghearradh micreachainéal cosúil leis an spermatozoa chun staidéar a dhéanamh ar glutination agus motility spermatozoa.Pléann an staidéar seo conas a fhoirmíonn cuachta speirm, conas a bhogann siad, agus an ról a d'fhéadfadh a bheith acu maidir le cónaitheacht sperm a leathnú sa SST.Rinneamar imscrúdú ar threoluas speirme agus ar iompar sreabheolaíoch nuair a ghin sreabhadh sreabhán laistigh de chainéal micreasreabhach trí bhrú hidreastatach (ráta sreafa = 33 µm/s).Tá claonadh ag an spermatozoa snámh in aghaidh na reatha (réiteolaíocht dhearfach) agus laghdaítear treoluas an bundle spermatozoa go suntasach i gcomparáid le spermatozoa aonair.Breathnaíodh go n-aistríonn bundles sperm i bíseach agus méadú ar fhad agus tiús de réir mar a earcaítear níos mó sperm aonair. Breathnaíodh cuachta sperm ag druidim agus ag cloí le ballaí taobh na gcainéal micreasreabhach ionas nach scuabfaí iad le treoluas sreafa sreabháin > 33 µm/s. Breathnaíodh cuachta sperm ag druidim agus ag cloí le ballaí taobh na gcainéal micreasreabhach ionas nach scuabfaí iad le treoluas sreafa sreabháin > 33 µm/s. Было замечено, что пучки сперматозоидов приближаются agus прилипают коковым стенкам микрофлюю иблизоидов бежать сметания со скоростью потока жидкости > 33 мкм / с. Tá sé tugtha faoi deara go dtéann cuachtaí sperm i dtreo agus go gcloíonn siad le ballaí taoibh na mbealaí micreashreabhach chun iad a sheachaint ag rátaí sreafa sreabhach >33 µm/s.观察到精子束接近并粘附在微流体通道的侧壁上，以避免被流体流速> 33 流速/33 µm/s 扫过. Было замечено, что пучки сперматозоидов приближаются agus прилипают к боковым стенкам микрожаидидз ежать сметания потоком жидкости со скоростью > 33 мкм/с. Tá sé tugtha faoi deara go dtéann cuachtaí sperm isteach agus go gcloíonn siad le ballaí taoibh an chainéil mhicrea-shreabhach chun iad a sheachaint ag sreabhadh sreabháin ag >33 µm/s.Léirigh scanadh agus micreascópacht leictreoin tarchurtha go raibh neart ábhar dlúth ag tacú leis na cuachtaí speirm.Léiríonn na sonraí a fhaightear soghluaisteacht uathúil spermatozoa sicín Sharkazi, chomh maith le cumas an spermatozoa chun bundles soghluaiste a iompar agus a fhoirmiú, rud a chuireann le tuiscint níos fearr ar stóráil fadtéarmach spermatozoa i SMT.
Chun toirchiú a bhaint amach i ndaoine agus i bhformhór na n-ainmhithe, caithfidh sperm agus uibheacha teacht ar shuíomh an toirchithe ag an am ceart.Dá bhrí sin, ní mór cúpláil tarlú roimh nó ag an am ovulation.Ar an láimh eile, déanann roinnt mamaigh, mar shampla madraí, chomh maith le speicis neamh-mamacha, mar shampla feithidí, iasc, reiptílí, agus éin, sperm a stóráil ina n-orgán atáirgthe ar feadh tréimhse fada ama go dtí go bhfuil a n-uibheacha réidh le haghaidh toirchithe ( toirchiú asincrónach 1 ).Tá éin in ann inmharthanacht an spermatozoa atá in ann uibheacha a toirchiú a choinneáil ar feadh 2-10 seachtaine2.
Is gné uathúil é seo a dhéanann idirdhealú ar éin ó ainmhithe eile, mar go soláthraíonn sé dóchúlacht ard toirchithe tar éis inseamhnú amháin ar feadh roinnt seachtainí gan cúpláil agus ovulation comhuaineach.Tá an príomh-orgán stórála sperm, ar a dtugtar an tubule stórála sperm (SST), suite sna fillteacha mucosal inmheánacha ag an acomhal uterovaginal.Go dtí seo, ní thuigtear go hiomlán na meicníochtaí trína dtéann sperm isteach, a chónaíonn agus a fhágann an banc sperm.Bunaithe ar staidéir roimhe seo, cuireadh go leor hipitéisí ar aghaidh, ach níor deimhníodh aon cheann acu.
Rinne Forman4 hipitéisiú go gcoimeádann spermatozoa a n-áit chónaithe sa chuas SST trí ghluaiseacht ascalach leanúnach i gcoinne treo sreabhadh sreabhach trí bhealaí próitéine atá suite ar chealla epithelial SST (ritheolaíocht).Tá ATP ídithe mar gheall ar ghníomhaíocht bratach leanúnach a theastaíonn chun an sperm a choinneáil sa lumen SST agus laghdaítear motility sa deireadh go dtí go ndéantar an sperm as an mbanc sperm ag sreabhadh sreabhach agus tús a chur le turas nua síos an fheadán fallopian ardaitheach chun an sperm a thorthú.Uibheacha (Forman4).Tacaítear leis an múnla seo de stóráil speirm trí bhrath trí imdhíon-cheimic aquaporins 2, 3 agus 9 atá i láthair i gcealla epithelial SST.Go dtí seo, tá easpa staidéir ar reiteolaíocht seamhan sicín agus a ról i stóráil SST, roghnú sperm faighne, agus iomaíocht sperm.I sicíní, téann sperm isteach sa vagina tar éis cúplála nádúrtha, ach scaoiltear níos mó ná 80% den spermatozoa as an vagina go gairid tar éis cúplála.Tugann sé seo le tuiscint gurb é an vagina an príomhshuíomh le haghaidh roghnú sperm in éin.Ina theannta sin, tá sé tuairiscithe go bhfuil níos lú ná 1% de spermatozoa toirchithe sa vagina deireadh suas i SSTs2.I inseamhnú saorga sicíní sa vagina, is gnách go dtiocfaidh méadú ar líon na spermatozoa a shroicheann SST 24 uair tar éis an inseamhnaithe.Go dtí seo, níl an mheicníocht maidir le roghnú sperm le linn an phróisis seo soiléir, agus d'fhéadfadh ról tábhachtach a bheith ag motility sperm in glacadh sperm SST.Mar gheall ar bhallaí tiubh agus teimhneach na feadáin fallopian, tá sé deacair monatóireacht dhíreach a dhéanamh ar motility sperm i feadáin fallopian na n-éan.Mar sin, níl eolas bunúsach againn ar conas a aistríonn spermatozoa go SST tar éis toirchithe.
Aithníodh le déanaí rheology mar fhachtóir tábhachtach a rialaíonn iompar sperm i baill ghiniúna mamaigh.Bunaithe ar chumas an spermatozoa motile dul ar imirce go frith-reatha, d'úsáid Zaferani et al8 córas micrisreabhach corrach chun spermatozoa gluaisteach a leithlisiú go héighníomhach ó shamplaí seamhan peannáilte.Tá sórtáil seamhan den chineál seo riachtanach le haghaidh cóireáil leighis neamhthorthúlachta agus taighde cliniciúil, agus is fearr é seachas modhanna traidisiúnta atá dian ar am agus ar shaothar agus a fhéadfaidh dochar a dhéanamh do mhoirfeolaíocht speirme agus sláine struchtúrach.Mar sin féin, go dtí seo, ní dhearnadh aon staidéir ar an éifeacht a bhíonn ag táil ó orgáin ghiniúna sicíní ar shoghluaisteacht sperm.
Beag beann ar an meicníocht a chothaíonn sperm atá stóráilte sa SST, thug go leor imscrúdaitheoirí faoi deara go bhfuil spermatozoa cónaitheach agglutinate ceann-le-ceann sa SST de sicíní 9, 10, gearga 2, agus turcaithe 11 a fhoirmiú cuachta sperm agglutinated.Tugann na húdair le fios go bhfuil nasc idir an agglutination seo agus stóráil fadtéarmach spermatozoa sa SST.
Thuairiscigh Tingari agus Lake12 go raibh baint láidir idir an speirmatozoa i bhfaireog a fhaigheann speirm an tsicín agus cheistigh siad an bhfuil an spermatozoa éanúil agglutinate ar an mbealach céanna le spermatozoa mamaigh.Creideann siad go bhféadfadh na naisc dhomhain idir sperm sa vas deferens a bheith mar gheall ar an strus de bharr láithreacht líon mór sperm i spás beag.
Nuair a dhéantar meastóireacht ar iompar spermatozoa ar shleamhnáin ghloine crochta úra, is féidir comharthaí neamhbhuan de agglutination a fheiceáil, go háirithe ag imill na braoiníní seamhan.Mar sin féin, ba mhinic a chuir an gníomh uainíochta a bhaineann le gluaiseacht leanúnach isteach ar agglutination, rud a mhíníonn nádúr neamhbhuan an fheiniméan seo.Thug na taighdeoirí faoi deara freisin, nuair a cuireadh an caolaitheoir leis an seamhan, go raibh comhiomláin cille “cosúil le snáithe” fadaithe le feiceáil.
Rinneadh iarrachtaí luatha chun aithris a dhéanamh ar speirmatozoon trí shreang thanaí a bhaint as braon crochta, rud a d'fhág go raibh vesicle fadaithe cosúil le sperm ag sileadh as braon seamhan.Chuaigh an speirmatozoa i líne láithreach ar bhealach comhthreomhar laistigh den vesicle, ach d'imigh an t-aonad iomlán go tapa mar gheall ar an teorannú 3D.Dá bhrí sin, chun staidéar a dhéanamh ar agglutination spermatozoa, is gá motility agus iompar spermatozoa a urramú go díreach i bhfeadáin stórála sperm scoite, rud atá deacair a bhaint amach.Dá bhrí sin, is gá ionstraim a fhorbairt a dhéanann aithris ar spermatozoa chun tacú le staidéir ar ghluaiseachtaí sperm agus iompar agglutination.Thuairiscigh Brillard et al13 gurb é meánfhad na feadáin stórála speirme i sicíní fásta ná 400–600 µm, ach is féidir le roinnt SSTanna a bheith chomh fada le 2000 µm.Roinn Mero agus Ogasawara14 na faireoga leathmhéanacha i bhfeadáin stórála sperm méadaithe agus neamh-mhéadaithe, agus bhí an dá cheann acu mar an gcéanna ó thaobh fad (~500 µm) agus leithead muiníl (~38 µm), ach ba é meántrastomhas lumen na bhfeadán ná 56.6 agus 56.6 µm.., faoi seach 11.2 μm, faoi seach.Sa staidéar reatha, d'úsáideamar gléas micreashreabhach le méid cainéal de 200 µm × 20 µm (W × H), a bhfuil a thrasghearradh beagán gar do thrasghearradh an SST aimplithe.Ina theannta sin, scrúdaigh muid motility sperm agus iompar agglutination i sreabhach ag sileadh, atá ag teacht le hipitéis Foreman go gcoimeádann sreabhach a tháirgtear ag cealla epithelial SST sperm sa lumen i dtreo frithshrutha (ritheolaíoch).
Bhí sé mar aidhm ag an staidéar seo na fadhbanna a bhaineann le breathnú ar motility spermatozoa sa fheadán fallopian a shárú agus na deacrachtaí a bhaineann le staidéar a dhéanamh ar reiteolaíocht agus iompar spermatozoa i dtimpeallacht dhinimiciúil a sheachaint.Baineadh úsáid as gléas microfluidic a chruthaíonn brú hidreastatach chun insamhail a dhéanamh ar ghluaiseachtaí sperm i baill ghiniúna sicín.
Nuair a lódaíodh titim de shampla sperm caolaithe (1:40) isteach sa ghléas micreachainéal, d’fhéadfaí dhá chineál motility sperm a aithint (speirm leithlisithe agus speirm faoi cheangal).Ina theannta sin, bhí claonadh ag spermatozoa snámh i gcoinne an tsrutha (rieolaíocht dhearfach; físeán 1, 2). Cé go raibh treoluas níos ísle ag cuachta speirm ná mar a bhí ag speirm uaigneach (p < 0.001), mhéadaigh siad céatadán na speirm a thaispeánann reitaxis dearfach (p < 0.001; Tábla 2). Cé go raibh treoluas níos ísle ag cuachta speirm ná mar a bhí ag speirm uaigneach (p < 0.001), mhéadaigh siad céatadán na speirm a thaispeánann reitaxis dearfach (p < 0.001; Tábla 2). Хотя пучки сперматозоидов имели более низкую скорость, чем у одиночных сперматозоидов (p1, 0, 0, 0, 0, 0, 0, 0, 0, 0, 0, 0, 2 ент сперматозоидов, демонстрирующих положительный реотаксис (p < 0,001; таблица 2). Cé go raibh treoluas níos ísle ag na cuachtaí speirmatozoa ná mar a bhí ag speirmatozoa singil (p < 0.001), mhéadaigh siad an céatadán de speirmatozoa a thaispeánann reitaxis dearfach (p < 0.001; Tábla 2).p <0.001）比（p < 0.001；表2）.尽管 精子束的速度低于孤独的速度 (p <0.001）), 但增加了显示阳倾显示阳倾示阳倾显示阳倾示 阳倾示阳倾示阳倾显示 阳倾示阳倾示 阳倾示 阳倾显示阳倾示 阳倾示 阳倾显示 阳倾示 阳倾显示 阳倾示 阧嵁). （p <0.001； 2。。。。。。)）））） Хотя скорость пучков сперматозоидов была ниже, чем у одиночных сперматозоидов (p < 0,001), олничичи зоидов с положительной реологией (p < 0,001; таблица 2). Cé go raibh luas na cuachta speirm níos ísle ná luas na speirmatozoa singil (p < 0.001), mhéadaigh siad céatadán an speirmatozoa le reiteolaíocht dhearfach (p < 0.001; Tábla 2).Meastar go bhfuil thart ar 53% agus 85% faoi seach ar an reieolaíocht dhearfach maidir le spermatozoa aonair agus tufts.
Tá sé faoi deara go bhfuil an spermatozoa sicíní sharkasi díreach tar éis ejaculation foirm bundles líneach, comhdhéanta de iliomad daoine aonair.Méadaíonn fad agus tiús na tufts seo le himeacht ama agus féadfaidh siad fanacht in vitro ar feadh roinnt uaireanta sula scaiptear iad (físeán 3).Tá na bundles filamentous seo múnlaithe cosúil le spermatozoa echidna a fhoirmíonn ag deireadh an epididymis.Fuarthas amach go bhfuil claonadh ard ag seamhan cearc Sharkashi a bheith agglutinate agus bundle reticulate a fhoirmiú i níos lú ná nóiméad amháin tar éis a bhailiú.Tá na bíomaí seo dinimiciúil agus in ann cloí le haon bhallaí nó rudaí statacha in aice láimhe.Cé go laghdaíonn bundles sperm luas na gcealla sperm, tá sé soiléir go méadaíonn siad a n-líneacht go macrascópach.Athraíonn fad na bundles ag brath ar líon na sperm a bhailítear i bundles.Bhí dhá chuid den bundle scoite amach: an chuid tosaigh, lena n-áirítear ceann saor in aisce an sperm agglutinated, agus an chuid críochfoirt, lena n-áirítear an eireaball agus deireadh distal iomlán an sperm.Ag baint úsáide as ceamara ardluais (950 fps), breathnaíodh cinn saor in aisce de spermatozoa glutinated sa chuid tosaigh den bundle, atá freagrach as gluaiseacht an chuachta mar gheall ar a ngluaisne ascalach, ag tarraingt na cinn atá fágtha isteach sa bheart le tairiscint helical (Video 4).Mar sin féin, i dtomáin fhada, tá sé tugtha faoi deara gur chloígh roinnt cloigeann saor-speirm leis an gcorp agus feidhmíonn an chuid deiridh den tuft mar eití chun an tuft a thiomáint.
Agus iad ag sreabhadh sreabhach mall, bogann na bundles sperm comhthreomhar lena chéile, áfach, tosaíonn siad ag forluí agus ag cloí le gach rud atá fós, ionas nach mbeidh an sreabhadh reatha á ní mar a mhéadaíonn an luas sreafa.Cruthaíonn na cuachtaí nuair a thagann dornán de chealla speirm ar a chéile, tosaíonn siad ag bogadh go sioncrónach agus ag dul timpeall ar a chéile, agus ansin cloí le substaint ghreamaitheach.Léiríonn Fíoracha 1 agus 2 conas a théann an speirm i dtreo a chéile, ag cruthú acomhal agus na heireabaill ag dul timpeall ar a chéile.
Chuir na taighdeoirí brú hidreastatach i bhfeidhm chun sreabhadh sreabhán a chruthú i micrichainéal chun staidéar a dhéanamh ar reology sperm.Baineadh úsáid as micreachainéal le méid 200 µm × 20 µm (W × H) agus fad 3.6 µm.Bain úsáid as micreachainéil idir coimeádáin a bhfuil steallairí feistithe orthu ag na foircinn.Baineadh úsáid as dathú bia chun na bealaí a dhéanamh níos sofheicthe.
Ceangail cáblaí agus gabhálais idirnasctha leis an mballa.Tógadh an físeán le micreascóp codarsnachta céime.Le gach íomhá, cuirtear micreascópacht codarsnachta céime agus íomhánna mapála i láthair.(A) Téann an nasc idir dhá shruth i gcoinne an tsreafa de bharr gluaisne héiliceach (saighead dearg).(B) An nasc idir an bundle feadán agus an balla cainéal (saigheada dearga), ag an am céanna tá siad ceangailte le dhá bheart eile (saigheada buí).(C) Tosaíonn bundles sperm sa chainéal microfluidic ag nascadh lena chéile (saigheada dearga), ag cruthú mogalra de bundles sperm.(D) Líonra cuachta speirm a fhoirmiú.
Nuair a luchtaíodh titim de sperm caolaithe isteach sa ghaireas microfluidic agus cruthaíodh sreabhadh, breathnaíodh go raibh an beam sperm ag bogadh i gcoinne treo an tsreafa.Luíonn na cuachtaí go snugly i gcoinne ballaí na micreachainéil, agus luíonn na cinn saor in aisce sa chuid tosaigh de na cuachtaí go snugly ina gcoinne (físeán 5).Cloíonn siad freisin le haon cháithníní seasta ina gcosán, cosúil le smionagar, le seasamh in aghaidh a bheith scuabtha ar shiúl ag an sruth.Le himeacht ama, déantar filiméid fhada de na tuifí seo agus iad ag gabháil do speirmatozoa aonair eile agus do thomáin níos giorra (Físeán 6).De réir mar a thosaíonn an sreabhadh ag moilliú, tosaíonn línte fada sperm ag cruthú líonra de línte sperm (Físeán 7; Fíor 2).
Ag ard-treoluas sreafa (V > 33 µm/s), méadaítear gluaiseachtaí bíseach snáitheanna mar iarracht chun go leor beart aonair sperm a ghabháil chun seasamh in aghaidh níos fearr ar fhórsa sruthaithe an tsreafa. Ag ard-treoluas sreafa (V > 33 µm/s), méadaítear gluaiseachtaí bíseach snáitheanna mar iarracht chun go leor beart aonair sperm a ghabháil chun seasamh in aghaidh níos fearr ar fhórsa sruthaithe an tsreafa. При высокой скорости потока (V > 33 мкм/с) спиралевидные движения нитей усиливаются, посколькуся посколькуся множество отдельных сперматозоидов, образующих пучки, которые лучше противостоят дрейкейюющих. Ag rátaí arda sreafa (V > 33 µm/s), méadaíonn gluaiseachtaí héiliciúla na snáitheanna de réir mar a dhéanann siad iarracht go leor beartán speirmatozoa aonair a ghabháil atá in ann seasamh níos fearr le fórsa sruthaithe an tsreafa.在高流速(V > 33 µm/s) 时，螺纹的螺旋运动增加, 在高流速(V > 33 µm/s)抵抗流动的漂移力。在高流速 (v> 33 µm/s) 时, 的螺旋运动增加, 以试图 许多 形成束单介抵抗的漂移力。。。。。。。。 При высоких скоростях потока (V > 33 мкм/с) спиральное движение нитей увеличивается в попытке попыатке попытке ельных сперматозоидов, образующих пучки, чтобы лучше сопротивляться силам дрейфа потоки. Ag rátaí arda sreafa (V > 33 µm/s), méadaíonn gluaiseacht héiliceach na bhfiliméad mar iarracht a lán beart foirmithe speirmatozoa aonair a ghabháil chun seasamh níos fearr le fórsaí srutha an tsreafa.Rinne siad iarracht freisin micreachainéil a cheangal de na ballaí taobh.
Aithníodh cuachtaí sperm mar bhraislí de chinn speirme agus eireabaill tlú ag baint úsáide as micreascópacht éadrom (LM).Aithníodh cuachtaí sperm le comhiomláin éagsúla freisin mar chinn chasta agus comhiomláin bratacha, eireabaill speirm iolracha, cinn speirme ceangailte le heireaball, agus cinn speirm le núicléis lúbtha mar núicléis iolrach comhleádh.micreascópacht leictreon tarchurtha (TEM).Léirigh scanadh micreascópachta leictreon (SEM) go raibh na cuachtaí speirm mar chomhiomláin de chinn speirm agus léirigh na comhiomláin speirm líonra ceangailte d'eireabaill fillte.
Rinneadh staidéar ar mhoirfeolaíocht agus ultrastruchtúr spermatozoa, foirmiú cuacha spermatozoa ag baint úsáide as micreascópacht éadrom (leath alt), scanadh micreascópachta leictreon (SEM) agus micreascópacht leictreon tarchurtha (TEM), rinneadh smearaidh sperm a dhaite le oráiste acridine agus scrúdaíodh iad ag baint úsáide as micreascópacht epifluorescence.
Léirigh staining smearaidh sperm le oráiste acridine (Fíor 3 B) go raibh na cinnirí sperm greamaithe le chéile agus clúdaithe le hábhar secretory, rud a d'eascair bunú tufts móra (Fig. 3D).Is éard a bhí sna bundles sperm ná comhiomláin sperm le líonra eireabaill ceangailte (Fíor 4A-C).Tá bundles sperm comhdhéanta d'eireabaill go leor spermatozoa greamaithe le chéile (Fíor 4D).Chlúdaigh Rúin (Fíor 4E,F) cinn na mbeart speirmatozoa.
Foirmiú an chuachta spermatozoa Ag baint úsáide as micreascópacht codarsnachta céime agus smearaidh sperm dhaite le oráiste acridine, léirigh go gcloíonn cinn na spermatozoa le chéile.(A) Tosaíonn foirmiú tuft sperm go luath le sperm (ciorcal bán) agus trí sperm (ciorcal buí), agus an bíseach ag tosú ag an eireaball agus ag críochnú ag an ceann.(B) Fótamicrograph de smearaidh speirme daite le oráiste acridine a thaispeánann cinn speirm ghreamaitheacha (saigheada).Clúdaíonn an doirteadh an ceann (na cinn).Formhéadú × 1000. (C) Líoma mór a iompraítear trí shreabhadh i gcainéal micreashreabhach a fhorbairt (ag baint úsáide as ceamara ardluais ag 950 fss).(D) Micreagraf de smearaidh speirme daite le oráiste aicridín a thaispeánann tuftaí móra (saigheada).Méadú: ×200.
Leictreonmhicreagraf a scanadh de léas speirme agus smearaidh speirm dhaite le oráiste acridine.Is éard atá i (A, B, D, E) ná leictreoin leictreoin scanadh digiteacha de spermatozoa, agus is micreagraif iad C agus F de smearaidh speirme dhaite oráiste aicridín a thaispeánann ceangal il-speirmatozoa a chumhdaíonn an ngréasán caudal.(AC) Taispeántar comhiomláin sperm mar líonra d'eireabaill (saigheada) ceangailte.(D) Greamaitheacht roinnt spermatozoa (le substaint ghreamaitheach, imlíne bándearg, saighead) ag fillte ar fud an eireaball.(E agus F) Comhiomláin ceann sperm (treoir) clúdaithe le hábhar greamaitheach (treoir).Chruthaigh an speirmatozoa cuachta le roinnt struchtúr cosúil le vortex (F).(C) ×400 agus (F) ×200 formhéaduithe.
Ag baint úsáide as micreascópacht leictreon tarchurtha, fuair muid amach go raibh eireabaill ceangailte ag bundles sperm (Fíor 6A, C), cinn ceangailte le heireabaill (Fíor 6 B), nó cinnirí ceangailte le heireabaill (Fíor 6 D).Tá cinn an spermatozoa sa bundle cuartha, ag cur i láthair i roinn a dó réigiún núicléach (Fíor 6D).Sa bundle incision, bhí ceann casta ag an spermatozoa le dhá réigiún núicléacha agus réigiúin bratach iolracha (Fíor 5A).
Leictreonmhicreagraf digiteach daite a thaispeánann na heireabaill nasctha sa bheart speirm agus an t-ábhar agglutinating a nascann na cinn speirm.(A) Eireaball Ceangailte de líon mór de spermatozoa.Tabhair faoi deara conas a bhreathnaíonn an t-eireaball i dteilgin portráide (saigheada) agus tírdhreacha (saigheada).(B) Tá ceann (saighead) an speirm ceangailte leis an eireaball (saighead).(C) Tá roinnt eireabaill speirm (saigheada) ceangailte.(D) Ceanglaíonn ábhar agglutination (AS, gorm) ceithre cinn sperm (corcra).
Baineadh úsáid as micreascópacht leictreon scanadh chun cinn sperm a bhrath i bundles sperm clúdaithe le táil nó seicní (Fíor 6B), rud a thugann le fios go raibh na bundles sperm ar ancaire le hábhar extracellular.Bhí an t-ábhar agglutinated comhchruinnithe sa cheann speirm (tionól cosúil le ceann smugairle róin; Fíor. 5B) agus leathnaíodh sé go haoibhinn, rud a thug cuma iontach buí faoi mhicreascópacht fhluaraiseachta nuair a dhaite le oráiste acridine (Fig. 6C).Tá an tsubstaint seo le feiceáil go soiléir faoi mhicreascóp scanadh agus meastar gur ceanglóra í.Léirigh rannóga leath-tanaí (Fíor 5C) agus smearaidh sperm daite le oráiste acridine cuachta speirme ina raibh cinn pacáilte dlúth agus eireabaill cuachta (Fig. 5D).
Fótamicrographs éagsúla a thaispeánann comhiomlán cinn speirme agus eireabaill fillte ag baint úsáide as modhanna éagsúla.(A) Leictreonmhicreagraf tarchurtha datha digiteach trasghearrtha de bheart speirme a thaispeánann ceann speirme coiled le núicléas dhá-pháirt (gorm) agus roinnt codanna suaitheanta (glas).(B) Leictreonmhicreagraf datha scanadh digiteach a thaispeánann braisle de chinn speirme smugairle róin (saigheada) a bhfuil an chuma orthu go bhfuil siad clúdaithe.(C) Alt leath-tanaí a thaispeánann cinn speirme comhiomlán (saigheada) agus eireabaill cuachta (saigheada).(D) Micreagraf de smearaidh speirme daite le oráiste acridine a thaispeánann comhiomláin de chinn speirme (saigheada) agus eireabaill ghreamaithe cuachta (saigheada).Tabhair faoi deara go gclúdaíonn substaint ghreamaitheach (S) ceann an speirmatozoon.(D) × 1000 formhéadú.
Ag baint úsáide as micreascópacht leictreon tarchurtha (Fíor 7A), tugadh faoi deara freisin go raibh na cinn sperm twisted agus bhí cruth bíseach ar na núicléis, mar a dheimhnigh smearaidh sperm a dhaite le oráiste acridine agus a scrúdaíodh ag baint úsáide as micreascópacht fhluaraiseachta (Fíor 7 B).
(A) Leictreonmhicreagraf tarchuir dath digiteach agus (B) smearaidh speirme dhaite oráiste Acridine a thaispeánann cinn chorna agus gceangal cinn agus eireabaill speirme (saigheada).(B) × 1000 formhéadú.
Is é toradh suimiúil ná go gcomhiomlánaíonn sperm Sharkazi chun babhtaí filiméadacha soghluaiste a fhoirmiú.Ligeann airíonna na bundles seo dúinn tuiscint a fháil ar a ról féideartha maidir le hionsú agus stóráil spermatozoa sa SST.
Tar éis cúplála, téann an speirm isteach sa vagina agus téann sé faoi phróiseas dian roghnaithe, rud a fhágann nach dtéann ach líon teoranta sperm isteach sa SST15,16.Go dtí seo, níl na meicníochtaí trína dtéann sperm isteach agus amach as an SST soiléir.In éanlaith chlóis, stóráiltear spermatozoa sa SST ar feadh tréimhse sínte 2 go 10 seachtaine, ag brath ar an speiceas6.Tá conspóid fós ann faoi riocht an tseamhain le linn stórála sa SST.An bhfuil siad ag gluaiseacht nó ag scíth?I bhfocail eile, conas a choimeádann cealla speirm a suíomh sa SST chomh fada sin?
Mhol Forman4 go bhféadfaí áit chónaithe SST agus díshealbhú a mhíniú i dtéarmaí motility sperm.Tugann na húdair hipitéis go gcoimeádann sperm a seasamh trí shnámh i gcoinne an tsreabhadh sreabhach a chruthaíonn an epithelium SST agus go scaoiltear sperm ón SST nuair a thiteann a threoluas faoi bhun an phointe a dtosaíonn siad ag bogadh siar mar gheall ar easpa fuinnimh.Dhearbhaigh Zaniboni5 láithreacht aquaporins 2, 3, agus 9 sa chuid apical de chealla epithelial SST, a d'fhéadfadh tacú go hindíreach le múnla stórála sperm Foreman.Sa staidéar atá ann faoi láthair, fuair muid amach go léiríonn beagnach leath de spermatozoa Sharkashi reology dearfach sa sreabhach ag sileadh, agus go bundles sperm agglutinated méadú ar líon na spermatozoa léiríonn reology dearfach, cé go slows agglutination síos orthu.Ní thuigtear go hiomlán conas a thaistealaíonn cealla speirm suas feadán fallopian an éin go dtí suíomh an toirchithe.I mamaigh, tarraingíonn an sreabhán follicular spermatozoa.Mar sin féin, creidtear go n-ordaíonn ceimeattractóirí an speirmatozoa chun dul i dtreo achair fhada7.Dá bhrí sin, tá meicníochtaí eile freagrach as iompar sperm.Tuairiscíodh go bhfuil cumas sperm chun treoshuíomh agus sreabhadh i gcoinne an sreabhán feadáin fallopian a scaoiltear tar éis cúplála ina fhachtóir mór chun díriú ar sperm i lucha.Mhol Parker 17 go dtrasnódh spermatozoa na huibheacha trí shnámh in aghaidh an tsrutha ciliary in éin agus reiptílí.Cé nach bhfuil sé léirithe go turgnamhach in éin, ba é Adolphi18 an chéad duine a fuair amach go dtugann sperm éanúil torthaí dearfacha nuair a chruthaítear sraith tanaí de leacht idir clúdaigh agus sleamhnán le stiall de pháipéar scagtha.Réalteolaíocht.Chuir Hino agus Yanagimachi [19] coimpléasc ubhagán-feadánach-útarach luiche i bhfáinne perfusion agus instealladh 1 µl de dúch isteach san isthmus chun sreabhadh sreabhach sna feadáin fallopian a shamhlú.Thug siad faoi deara gluaiseacht an-ghníomhach crapadh agus scíthe sa fheadán fallopian, ina raibh na liathróidí dúch go léir ag bogadh go seasta i dtreo ampulla an fheadáin fallopian.Leagann na húdair béim ar an tábhacht a bhaineann le sreabhadh sreabhach tubal ó na feadáin íochtair go dtí na feadáin fallopian uachtaracha le haghaidh ardú agus toirchiú sperm.Thuairiscigh Brillard20 go n-imíonn an spermatozoa i sicíní agus turcaithe trí ghluaiseacht ghníomhach ón mbealach isteach faighne, áit a stóráiltear iad, go dtí an t-acomhal utero- faighne, áit a stóráiltear iad.Mar sin féin, níl an ghluaiseacht seo ag teastáil idir an t-acomhal uterovaginal agus infundibulum toisc go n-iompraítear an spermatozoa trí dhíláithriú éighníomhach.Agus na moltaí seo roimhe seo agus na torthaí a fuarthas sa staidéar reatha ar an eolas, is féidir glacadh leis go bhfuil cumas an spermatozoa chun bogadh suas an sruth (réitheolaíocht) ar cheann de na hairíonna ar a bhfuil an próiseas roghnúcháin bunaithe.Cinneann sé seo gluaiseacht spermatozoa tríd an vagina agus a n-iontráil isteach sa CCT le haghaidh stórála.Mar a mhol Forman4, d’fhéadfadh go n-éascódh sé seo freisin an próiseas ina dtéann speirm ag dul isteach sa SST agus ina ghnáthóg ar feadh tréimhse ama agus ansin ag imeacht nuair a thosaíonn a luas ag moilliú.
Ar an taobh eile de, mhol Matsuzaki agus Sasanami 21 go ndéanfaí athruithe gluaiseachta ar an spermatozoa éanúil ó shuanacht go motility i gconair atáirgthe na bhfear agus na mban.Tá sé molta cosc ​​a chur ar motility sperm cónaitheach sa SST chun am stórála fada sperm a mhíniú agus ansin athnuachan tar éis an SST a fhágáil.Faoi choinníollacha hypoxic, Matsuzaki et al.Thuairiscigh 1 táirgeadh ard agus scaoileadh lachtáit sa SST, rud a d'fhéadfadh cosc ​​​​a chur ar motility sperm cónaitheach.Sa chás seo, léirítear an tábhacht a bhaineann le rheology sperm i roghnú agus ionsú spermatozoa, agus ní ina stóráil.
Meastar gur míniú sochreidte é an patrún agglutination sperm don tréimhse stórála fada sperm sa SST, toisc gur patrún coitianta é seo maidir le coinneáil sperm in éanlaith chlóis2,22,23.Bakst et al.Thug 2 faoi deara gur chloígh an chuid is mó de spermatozoa lena chéile, ag cruthú comhiomláin fascicular, agus is annamh a aimsíodh spermatozoa aonair i CCM gearga.Ar an láimh eile, Wen et al.Thug 24 faoi deara spermatozoa níos scaipthe agus níos lú tufts spermatozoa i lumen SST i sicíní.Bunaithe ar na breathnuithe seo, is féidir glacadh leis go bhfuil difríocht idir an claonadh chun ceirtleánú sperm idir éin agus idir spermatozoa san ejaculate céanna.Ina theannta sin, Van Krey et al.Mhol 9 go bhfuil díthiomsú randamach de spermatozoa ceirtleánaithe freagrach as dul i bhfód de réir a chéile ar spermatozoa isteach i lumen an fheadáin fallopian.De réir an hipitéis seo, ba cheart spermatozoa le cumas agglutination níos ísle a dhíbirt as an SST ar dtús.Sa chomhthéacs seo, d'fhéadfadh go mbeadh tionchar ag cumas an spermatozoa chun agglutinate ar thoradh iomaíochta sperm in éin shalach.Ina theannta sin, dá fhad a dhíscaoileann an speirm ghluasaithe, is ea is faide a chothaítear torthúlacht.
Cé gur breathnaíodh comhiomlánú agus comhiomlánú spermatozoa i mbearta i roinnt staidéar2,22,24, níor cuireadh síos go mion orthu mar gheall ar chastacht a gcuid breathnóireachta cineamatach laistigh den SST.Rinneadh roinnt iarrachtaí staidéar a dhéanamh ar chomhiompar speirm in vitro.Breathnaíodh comhiomlánú fairsing ach neamhbhuan nuair a baineadh an tsreang thanaí den titim síl a bhí ag crochadh.Mar thoradh air seo go n-eascraíonn mboilgeog fadaithe as an titim, ag déanamh aithrise ar an bhfaireog bhunúsach.Mar gheall ar theorainneacha 3D agus amanna gearra triomaithe drip, thit an bloc iomlán in olcas go tapa9.Sa staidéar reatha, ag baint úsáide as sicíní Sharkashi agus sceallóga micreashreabhach, bhíomar in ann cur síos a dhéanamh ar conas a fhoirmíonn na tufts seo agus ar an mbealach a bhogann siad.Cruthaíodh babhtaí sperm díreach tar éis bailiú seamhan agus fuarthas amach go raibh siad ag bogadh i bíseach, rud a léiríonn reology dearfach nuair a bhíonn siad i láthair sa sreabhadh.Ina theannta sin, nuair a bhreathnaítear go macrascópach air, breathnaíodh go n-ardaíonn cuachta sperm líneacht na motility i gcomparáid le spermatozoa scoite.Tugann sé seo le tuiscint go bhféadfadh ceirtleánú speirm a bheith ann roimh dhul i bhfód SST agus nach bhfuil táirgeadh speirm teoranta do limistéar beag mar gheall ar strus mar a moladh roimhe seo (Tingari agus Lake12).Le linn foirmiú tuft, snámhann an speirmatozoa i sioncrónaithe go dtí go ndéanann siad acomhal, ansin fillteann a n-eireabaill timpeall ar a chéile agus fanann ceann an speirmatozoon saor, ach greamaíonn eireaball agus cuid distal an speirmatozoon le substaint greamaitheach le chéile.Dá bhrí sin, tá ceann saor in aisce an ligament freagrach as an ghluaiseacht, ag tarraingt an chuid eile den ligament.Léirigh scanadh micreascópachta leictreon de na bundles sperm cinn sperm ceangailte clúdaithe le go leor ábhar greamaitheach, rud a thugann le tuiscint go raibh na cinn sperm ceangailte i bundles scíthe, rud a d'fhéadfadh a bheith tar éis an suíomh stórála a bhaint amach (SST).
Nuair a dhéantar smearaidh sperm a dhaite le oráiste acridine, is féidir ábhar greamaitheach extracellular timpeall na gcealla sperm a fheiceáil faoi mhicreascóp fluaraiseacha.Ligeann an tsubstaint seo do bheartáin speirm cloí le haon dromchlaí nó cáithníní máguaird agus cloí leo ionas nach sruthóidh siad leis an sreabhadh máguaird.Dá bhrí sin, léiríonn ár gcuid tuairimí an ról atá ag greamaitheacht spermatozoa i bhfoirm bundles soghluaiste.Ligeann a gcumas snámh in aghaidh an tsrutha agus cloí le dromchlaí in aice láimhe don sperm fanacht níos faide sa SST.
D’úsáid Rothschild25 ceamara haemocytiméadracht chun staidéar a dhéanamh ar dháileadh snámhach seamhan buaibheach i mbraon fionraí, ag tógáil fótamicreagraif trí cheamara le hais optúla ingearacha agus cothrománacha araon den mhicreascóp.Léirigh na torthaí go raibh an spermatozoa á mealladh chuig dromchla an tseomra.Tugann na húdair le fios go bhféadfadh idirghníomhaíochtaí hidrodinimiciúla a bheith ann idir an sperm agus an dromchla.Agus é seo á chur san áireamh, chomh maith le cumas seamhan Sharkashi chick tomáin greamaitheacha a fhoirmiú, féadfaidh sé an dóchúlacht go gcloífidh seamhan leis an mballa SST agus go stórálfar é ar feadh tréimhsí fada ama.
Thuairiscigh Bccetti agus Afzeliu26 go bhfuil an glycocalyx sperm ag teastáil le haghaidh aitheantais gaiméití agus ceirtleánú.Thug Forman10 faoi deara go raibh hidrealú bannaí α-glycosidic i bratuithe glycoprotein-glycolipid trí chóireáil seamhan éanúil le neuraminidase mar thoradh ar thorthúlacht laghdaithe gan cur isteach ar motility sperm.Tugann na húdair le fios go gcuireann éifeacht neuraminidase ar an glycocalyx isteach ar fhorlámhú sperm ag an acomhal útarach-fhaighne, rud a laghdaíonn torthúlacht.Ní féidir lena gcuid tuairimí neamhaird a dhéanamh ar an bhféidearthacht go laghdódh cóireáil neuraminidase aithint sperm agus úicítí.Fuair ​​Forman agus Engel10 amach gur laghdaíodh an torthúlacht nuair a bhí cearca á inseamhnú go hinmheánach le seamhan cóireáilte le neuraminidase.Mar sin féin, níor chuir IVF le sperm cóireáilte neuraminidase isteach ar thorthúlacht i gcomparáid le sicíní rialaithe.Tháinig na húdair ar an gconclúid gur laghdaigh athruithe ar an sciath glycoprotein-glycolipid timpeall an membrane sperm cumas na sperm chun toirchiú trí lagú ar leithlisiú sperm ag an acomhal útarach-fhaighne, rud a mhéadaigh caillteanas sperm mar gheall ar luas an acomhal útarach-fhaighne, ach ní chuireann sé isteach ar aitheantas sperm agus uibheacha.
Sna turcaithe fuair Bakst agus Bauchan 11 vesicles beaga agus blúirí membrane i lumen an SST agus tugadh faoi deara go raibh roinnt de na gráinníní seo comhleádh leis an membrane speirme.Tugann na húdair le fios go bhféadfadh na caidrimh seo cur le stóráil fadtéarmach spermatozoa i SST.Mar sin féin, níor shonraigh na taighdeoirí foinse na gcáithníní seo, cibé an bhfuil siad secreted ag cealla epithelial CCT, a tháirgtear agus a secreted ag an gcóras atáirgthe fireann, nó a tháirgtear ag an sperm féin.Chomh maith leis sin, tá na cáithníní seo freagrach as ceirtleánú.Thuairiscigh Grützner et al27 go dtáirgeann agus go secrete cealla epithelial epithelial próitéin ar leith atá ag teastáil chun foirmiú conairí seimineáir aon-pore.Tuairiscíonn na húdair freisin go mbraitheann scaipeadh na bundles seo ar idirghníomhaíocht próitéiní epididymal.Fuair ​​Nixon et al28 amach go bhfuil an adnexa secrete próitéin, an aigéadach cistéin-saibhir osteonectin;Tá baint ag SPARC le cruthú tufts sperm in echidnas gearr-gob agus platypuses.Tá baint ag scaipeadh na bíomaí seo le caillteanas an phróitéin seo.
Sa staidéar reatha, léirigh anailís ultrastructural ag baint úsáide as micreascópacht leictreoin gur chloígh an spermatozoa le méid mór ábhar dlúth.Ceaptar go bhfuil na substaintí seo freagrach as an gcomhdhlúthú a chomhdhlúthaíonn idir na cloigne greamaitheacha agus timpeall orthu, ach ag tiúchan níos ísle i réigiún an eireabaill.Glacaimid leis go bhfuil an tsubstaint agglutinating seo eisfhearadh as an gcóras atáirgthe fireann (epididymis nó vas deferens) chomh maith le seamhan, mar is minic a bhreathnú againn seamhan scaradh ó limfe agus plasma seimineach le linn ejaculation.Tuairiscíodh, de réir mar a théann spermatozoa éanúil tríd an eipidimís agus vas deferens, go dtéann siad faoi athruithe a bhaineann le haibíocht a thacaíonn lena gcumas próitéiní a cheangal agus gliocóphróitéiní plasma a bhaineann le leamaí a fháil.Tugann marthanacht na bpróitéiní seo ar sheicní speirme cónaitheacha san SST le fios go bhféadfadh tionchar a bheith ag na próitéiní seo ar chobhsaíocht membrane speirme 30 a fháil agus a dtorthúlacht a chinneadh 31 .Thuairiscigh Ahammad et al32 gur léirigh an spermatozoa a fhaightear ó chodanna éagsúla den chóras atáirgthe fireann (ó na testes go dtí na vas deferens distal) méadú forásach ar inmharthanacht faoi choinníollacha stórála leachtacha, beag beann ar an teocht stórála, agus méadaíonn inmharthanacht sicíní freisin sna feadáin fallopian tar éis inseamhnú saorga.
Tá tréithe agus feidhmeanna difriúla ag tomáin sperm sicín Sharkashi ná speicis eile cosúil le echidnas, platypuses, lucha adhmaid, francaigh fia, agus muca guine.I sicíní sharkasi, laghdaigh foirmiú bundles spermatozoa a luas snámha i gcomparáid le spermatozoa amháin.Mar sin féin, mhéadaigh na babhtaí seo an céatadán de spermatozoa a bhí dearfach ó thaobh reolaíochta de agus mhéadaigh siad cumas an spermatozoa iad féin a chobhsú i dtimpeallacht dhinimiciúil.Mar sin, deimhníonn ár dtorthaí an moladh roimhe seo go bhfuil baint ag baint le ceirtleánú sperm i SST le stóráil fhadtéarmach sperm.Tugaimid hipitéis freisin go bhféadfadh claonadh speirm chun tufts a fhoirmiú ráta an chaillteanais speirm i SST a rialú, rud a d'fhéadfadh toradh na hiomaíochta speirm a athrú.De réir an toimhde seo, scaoileann spermatozoa le cumas ceirtleánaithe íseal SST ar dtús, agus táirgeann speirmatozoa a bhfuil ardchumas ceirtleánaithe an chuid is mó den sliocht.Tá foirmiú bundles sperm aon-pore tairbheach agus bíonn tionchar aige ar an gcóimheas tuismitheora-leanaí, ach úsáideann meicníocht dhifriúil.I echidnas agus platypuses, socraítear an spermatozoa comhthreomhar lena chéile chun luas tosaigh an bhíoma a mhéadú.Bogann bundles echidnas thart ar thrí huaire níos tapúla ná an spermatozoa aonair.Creidtear gur oiriúnú éabhlóideach é bunú tomáin sperm den sórt sin in echidnas chun ceannas a choinneáil, ós rud é go bhfuil baineannaigh neamhbhríoch agus go hiondúil go mbíonn siad i bpáirt le roinnt fireannaigh.Dá bhrí sin, tá spermatozoa ó ejaculates éagsúla san iomaíocht go dian le haghaidh toirchiú an ubh.
Tá sé éasca spermatozoa agglutinated sicíní sharkasi a shamhlú trí úsáid a bhaint as micreascópacht chodarsnachta céime, a mheastar a bheith buntáisteach toisc go gceadaíonn sé staidéar éasca a dhéanamh ar iompar spermatozoa in vitro.Tá an mheicníocht trína gcuireann foirmiú tuft sperm chun cinn atáirgeadh i sicíní sharkasi difriúil freisin ón meicníocht a fheictear i roinnt mamaigh placental a léiríonn iompar sperm comhoibríoch cosúil le lucha adhmaid, áit a sroicheann roinnt spermatozoa na huibheacha, ag cabhrú le daoine gaolmhara eile a n-uibheacha a bhaint amach agus damáiste a dhéanamh dóibh.a chruthú duit féin.iompar altruistic.Féin-toirchiú 34. Fuarthas sampla eile d'iompar comhoibríoch i spermatozoa i lucha fianna, áit a raibh an spermatozoa in ann an spermatozoa is mó a bhaineann le géiniteach a aithint agus a chomhcheangal agus grúpaí comhoibríocha a fhoirmiú chun a luas a mhéadú i gcomparáid le spermatozoa neamhghaolmhara35.
Ní thagann na torthaí a fuarthas sa staidéar seo salach ar theoiric Foman maidir le stóráil fadtéarmach spermatozoa i SWS.Tuairiscíonn na taighdeoirí go leanann cealla sperm ag gluaiseacht i sreabhadh na gcealla epithelial líneáil an SST ar feadh tréimhse fada ama, agus tar éis tréimhse áirithe ama, ídíonn stór fuinnimh na gcealla sperm, rud a fhágann go laghdaítear luas, rud a fhágann gur féidir substaintí meáchain móilíneacha beaga a dhíbirt.fuinneamh spermatozoa le sreabhadh sreabhach ó lumen an SST Cuas an fheadáin fallopian.Sa staidéar reatha, thugamar faoi deara gur léirigh leath de na sperm aonair an cumas snámh i gcoinne sreabhán sreafa, agus mhéadaigh a n-greamaitheacht sa bheart a gcumas réiteolaíocht dhearfach a thaispeáint.Ina theannta sin, tá ár gcuid sonraí comhsheasmhach le sonraí Matsuzaki et al.1 a thuairiscigh go bhféadfadh méadú ar an secretion lachtáit i SST bac a chur ar motility sperm cónaitheach.Mar sin féin, cuireann ár dtorthaí síos ar fhoirmiú ligaments motile sperm agus a n-iompraíocht sreabheolaíoch i láthair timpeallacht dhinimiciúil laistigh de mhicrichainéil mar iarracht a n-iompraíocht i SST a shoiléiriú.D’fhéadfadh taighde sa todhchaí díriú ar chomhdhéanamh ceimiceach agus tionscnamh an oibreáin agglutinating a chinneadh, rud a chuideoidh gan amhras le taighdeoirí bealaí nua a fhorbairt chun seamhan leachtach a stóráil agus fad na torthúlachta a mhéadú.
Roghnaíodh cúig cinn déag de sharkasi fireann muineal lom 30 seachtaine d'aois (ceannasach homaisigeach; Na Na) mar dheontóirí speirme sa staidéar.Tógadh na héin ag Feirme Éanlaithe Taighde na Dáimhe Talmhaíochta, Ollscoil Ashit, Ashit Governorate, an Éigipt.Cuireadh éin i gcliabháin aonair (30 x 40 x 40 cm), faoi réir clár éadrom (16 uair an chloig solais agus 8 uair an chloig dorchadais) agus chothaigh siad aiste bia ina raibh 160 g de phróitéin amh, 2800 kcal de fhuinneamh in-mheitibileach, 35 g de chailciam an ceann.5 gram de fosfar ar fáil in aghaidh an chileagraim aiste bia.
De réir sonraí 36, 37, bailíodh seamhan ó fhir trí massage bhoilg.Bailíodh 45 sampla seamhan san iomlán ó 15 fear thar 3 lá.Caolaíodh seamhan (n = 15/lá) láithreach 1:1 (v:v) le caolaitheoir seamhan éanlaithe Belsville, ina bhfuil diphosphate potaisiam (1.27 g), glutamate monosodium monohydrate (0.867 g), fruchtós (0.5 d) sóidiam ainhidriúil.aicéatáit (0.43 g), tris (hiodrocsaimeitil) aimínmethán (0.195 g), monaihiodráit chiotráite photaisiam (0.064 g), monafosfáit photaisiam (0.065 g), clóiríd mhaignéisiam (0.034 g) agus H2O (100 ml), pH = 7, 5, osmolarity 333 mOsm/kgScrúdaíodh samplaí seamhan caolaithe ar dtús faoi mhicreascóp solais chun dea-chaighdeán seamhan (taise) a chinntiú agus ansin coinníodh iad i ndabhach uisce ag 37°C go dtí go n-úsáidfí iad laistigh de leath uair an chloig tar éis an bhailiúcháin.
Déantar cur síos ar chinéimeolaíocht agus ar reiteolaíocht an speirmatozoa ag baint úsáide as córas feistí micreasreabhach.Caolaíodh samplaí seamhan a thuilleadh go 1:40 in Beltsville Avian Semen Caolach, lódáilte isteach i bhfeiste micreashreabhach (féach thíos), agus socraíodh paraiméadair chinéiteach trí úsáid a bhaint as córas Anailíse Seamhan Ríomhairithe (CASA) a forbraíodh roimhe seo le haghaidh tréithriú micr-shreabhach.ar shoghluaisteacht spermatozoa i meáin leachta (An Roinn Innealtóireachta Meicniúla, Dámh na hInnealtóireachta, Ollscoil Assiut, an Éigipt).Is féidir an breiseán a íoslódáil ag: http://www.assiutmicrofluidics.com/research/casa39.Tomhaiseadh treoluas cuar (VCL, μm/s), treoluas líneach (VSL, μm/s) agus meántreoluas conaire (VAP, μm/s).Tógadh físeáin de spermatozoa ag baint úsáide as micreascóp codarsnachta céim Optika XDS-3 (le cuspóir 40x) ceangailte le ceamara Tucson ISH1000 ag 30 fss ar feadh 3 s.Bain úsáid as bogearraí CASA chun staidéar a dhéanamh ar thrí réimse ar a laghad agus 500 ruthag speirm in aghaidh an tsampla.Próiseáladh an físeán taifeadta ag baint úsáide as CASA baile.Tá an sainmhíniú ar motility sa breiseán CASA bunaithe ar luas snámha an sperm i gcomparáid leis an ráta sreafa, agus ní chuimsíonn sé paraiméadair eile cosúil le gluaiseacht taobh le taobh, toisc go bhfuarthas amach go bhfuil sé seo níos iontaofa i sreabhadh sreabhach.Déantar cur síos ar thairiscint rheological mar ghluaiseacht cealla sperm i gcoinne treo an tsreafa sreabhach.Roinneadh spermatozoa le hairíonna sreabheolaíocha de réir líon na spermatozoa motile;speirmatozoa a bhí ar fos agus spermatozoa ag gluaiseacht convective a eisiamh ón gcomhaireamh.
Fuarthas na ceimiceáin go léir a úsáideadh ó Elgomhoria Pharmaceuticals (Cairo, an Éigipt) mura sonraítear a mhalairt.Rinneadh an gléas mar a thuairiscigh El-sherry et al.40 le roinnt modhnuithe.I measc na n-ábhar a úsáideadh chun na micreachainéil a dhéanamh bhí plátaí gloine (Howard Glass, Worcester, MA), friotachas diúltach SU-8-25 (MicroChem, Newton, CA), alcól diacetone (Sigma Aldrich, Steinheim, an Ghearmáin), agus polyacetone.-184, Dow Corning, Lár na Tíre, Michigan).Déantar micreachainéil ag baint úsáide as liteagrafaíocht bhog.Ar dtús, rinneadh masc aghaidh cosanta soiléir leis an dearadh microchannel a bhí ag teastáil a phriontáil ar phrintéir ardtaifigh (Prismatic, Cairo, Egypt and Pacific Arts and Design, Markham, ON).Rinneadh na máistrí ag baint úsáide as plátaí gloine mar fhoshraitheanna.Glanadh na plátaí in aicéatón, isopropanol agus uisce dí-ianaithe agus ansin brataithe le ciseal 20 µm de SU8-25 le sciath casadh (3000 rpm, 1 min).Triomaíodh na sraitheanna SU-8 go réidh ansin (65°C, 2 nóim agus 95°C, 10 nóim) agus nochtadh do radaíocht UV ar feadh 50 s.Bácáil iar-nochtadh ag 65°C agus 95°C ar feadh 1 nóiméad agus 4 nóiméad chun sraitheanna SU-8 nochta a thrasnasc, agus ina dhiaidh sin forbraítear alcól diaicéatóin ar feadh 6.5 nóiméad.Bácáil na vaiféil go crua (200°C ar feadh 15 nóiméad) chun an ciseal SU-8 a sholadú tuilleadh.
Ullmhaíodh PDMS tríd an monaiméir agus an cruaiteoir a mheascadh i gcóimheas meáchain 10:1, ansin é a dhígathú i dtriomántóir folúis agus a dhoirteadh ar phríomhfhráma SU-8.Rinneadh an PDMS a leigheas in oigheann (120 ° C, 30 min), ansin gearradh amach na cainéil, scartha ón máistir, agus bréifneach iad chun feadáin a cheangal ag inlet agus asraon an mhicrichainéil.Ar deireadh, bhí micreachainéil PDMS ceangailte go buan le sleamhnáin micreascóp ag baint úsáide as próiseálaí corónach iniompartha (Táirgí Leictreonacha-Teicneolaíocha, Chicago, IL) mar a thuairiscítear in áit eile.Tomhaiseann an micreachainéal a úsáidtear sa staidéar seo 200 µm × 20 µm (W × H) agus tá sé 3.6 cm ar fad.
Baintear amach an sreabhadh sreabhán a tharlódh de bharr brú hidreastatach taobh istigh den mhicreascanal tríd an leibhéal sreabhach sa taiscumar inlet a choinneáil os cionn an difríocht airde Δh39 sa taiscumar asraonta (Fíor 1).
áit arb é f an chomhéifeacht frithchuimilte, a shainmhínítear mar f = C/Re do shreabhadh laminach i gcainéal dronuilleogach, áit a bhfuil C tairiseach ag brath ar chóimheas treoíochta an chainéil, is é L fad an mhicreascainéil, is é Vav an meántreoluas laistigh den mhicreascannail, is é Dh trastomhas hiodrálach an chainéil, g – luasghéarú an domhantarraingthe.Trí úsáid a bhaint as an gcothromóid seo, is féidir an meán-treoluas cainéil a ríomh leis an gcothromóid seo a leanas: