Gus dìoladh a dhèanamh airson easbhaidhean ann am beathachadh sònraichte aig diofar ìrean beatha, faodaidh biastagan na beathachadh sin fhaighinn tro bhiadhadh leasachail, mar eisimpleir, le bhith a’ biathadh air secretions cnàimh-droma ann am pròiseas ris an canar maragan.bidh buaireadh arabiensis air fual mairt airson togail mathachaidh a’ leasachadh feartan eachdraidh beatha.
Dèan cinnteach gu bheil e sàbhailte.arabiensis air a tharraing gu fàileadh fual bò ùr, 24-uair, 72-uair, agus 168-uair a dh’ aois, agus sireadh aoigheachd agus biadhadh fala (biadh post-fala 48-uair) chaidh boireannaich a thomhas ann an olfactometer Y-tube, agus chaidh boireannaich a bha trom le leanabh a mheasadh airson deuchainn sìolachaidh bith-eòlasach a chaidh a chleachdadh ann an deuchainn sìolachaidh bith-eòlasach. Chaidh measadh a dhèanamh air measgachadh synthetach de choimeasgaidhean bith-ghnìomhach ann an Y-tube agus deuchainnean achaidh
Seek for the host's blood and nourishment.In laboratory and field studies, Arabs were drawn to the natural and synthetic scent of fresh and aged cow urine.Pregnant females were indifferent to cow urine responses at spawning sites.Host-seeking and blood-sucking females actively absorb cow urine and urea and allocate these resources according to life-history trade-offs as a function of physiological state for flight, survival, or reproduction.
Bidh Anopheles arabinis a’ togail agus a’ cuairteachadh fual mairt airson feartan eachdraidh beatha nas fheàrr. Bidh beathachadh mairt mairt a’ toirt buaidh dhìreach air comas vectar le bhith ag àrdachadh mairsinn làitheil agus dùmhlachd feòir, agus gu neo-dhìreach le bhith ag atharrachadh gnìomhachd itealaich agus mar sin bu chòir beachdachadh air ann am modalan san àm ri teachd.
Tha togail agus cuairteachadh beathachaidh a’ fighe a-steach biathadh bhiastagan agus feartan eachdraidh beatha [1,2,3].Is urrainn do bhiastagan biadh a thaghadh agus fhaighinn agus biadhadh dìolaidh a dhèanamh stèidhichte air na tha ri fhaighinn de bhiadh agus riatanasan beathachaidh [1, 3]. biadhadh leasachail, leithid air eabar, diofar excrement agus secretions de dhruim-altachain, agus carrion, pròiseas ris an canar maragan [2].Although measgachadh de dhealain-dè agus gnèithean leòmainn air a mhìneachadh gu sònraichte, tha tuill uisgeachaidh cuideachd ann an òrdughan biastagan eile, agus faodaidh tarraing agus biadhadh air na stòrasan sin buaidh mhòr a thoirt air slàinte agus beatha eile - a sgeul. Tha Anopheles gambiae sensu lato (sl) a 'nochdadh mar inbheach' le dìth beathachaidh '[8], agus mar sin faodaidh àite cudromach a bhith aig uisgeachadh ann am feartan eachdraidh beatha, ach gu ruige seo chaidh dearmad a dhèanamh air a' ghiùlan seo.
Tha in-ghabhail nitrogen ann am mosgìotothan boireann inbheach Anopheles cuingealaichte air sgàth stòrasan caloric ìosal air an giùlan bho ìre an larbha agus cleachdadh neo-èifeachdach de bhiadh fala [9]. vertebrate excreta gus todhar nitrogenous fhaighinn a leasaicheas atharrachadh agus gluasad itealaich, mar a chithear le biastagan eile [2]. Tha fual mairt na ghoireas làn de choimeasgaidhean nitrogenous, le urea a’ dèanamh suas 50-95% den naitridean iomlan ann am fual ùr [15, 16]. Mar aois fual mairt, bidh meanbh-fhàs-bheairtean a’ cleachdadh nan goireasan sin gus iom-fhillteachd todhar nitrogenous a lughdachadh taobh a-staigh 24 uairean [15]. ve [15], a dh'fhaodadh a bhith boireann Ann.arabiensis air a tharraing gu fàbharach gu fual aois 24 uairean no nas lugha [13, 14].
Rè a' chiad chuairt gonadotropin, chaidh arabiensis a mheasadh airson a bhith a' faighinn todhar nitrogenous, a' gabhail a-steach urea, le measgachadh fual. Nuair a bha iad a’ lorg a’ ghoireas beathachaidh seo a dh’fhaodadh a bhith ann, lorg arabiensis co-dhàimhean ceimigeach air cùl an tarraing eadar-dhealaichte a chaidh fhaicinn.Tarraing mosgìoto.Tha na toraidhean a fhuaireadh a’ dearbhadh gu bheil An.Bidh arabiensis a’ faighinn agus a’ sgaoileadh todhar nitrogenous a lorgar ann am fual vertebrate gus buaidh a thoirt air feartan eachdraidh beatha.
Chaidh Anopheles arabicans (srann Dongola) a chumail aig 25 ± 2 ° C, 65 ± 5% RH agus cearcall dorcha 12: 12 h. Chaidh larbha a thogail ann am treallaich plastaig (20 cm × 18 cm × 7 cm) air a lìonadh le uisge grùide agus biadh èisg Tetramin® a bhiadhadh, chaidh biadh èisg Tetramin® a bhiadhadh (Tetramin® Werkeup3), chaidh biadh èisg Tetramin® a bhiadhadh. Hertila, Åstorp, SE) agus an uairsin ghluais e gu cèidsichean Bugdorm (30 cm × 30 cm × 30 cm; MegaView Science, Taichung, Taiwan) gus leigeil le inbheach nochdadh. Bha an t-acras air boireannaich a chaidh a chleachdadh airson deuchainnean tiùb itealaich airson dìreach 4-6 uairean le uisge ad libitum. Gus mosgìotothan suirghe fala ullachadh airson bith-mheasaidhean às deidh sin, fhuair boireannaich 4 dpe fuil chaorach defibrotic (Håtunalab, Bro, SE) a’ cleachdadh siostam biadhaidh membran (Bùthan-obrach Lorg Hemotek, Accrington, UK chaidh iomradh a thoirt air na daitheadan fa leth agus chaidh an toirt seachad gu dìreach gu h-ìosal, no cnully boireann). 10% sucrose ad libitum airson 3 latha ro na deuchainnean a tha air am mìneachadh gu h-ìosal. Chaidh na boireannaich mu dheireadh a chleachdadh airson bith-mheasaidhean tiùb itealaich agus an gluasad chun obair-lann, agus an uairsin bha iad air uisge a tharraing ad libitum airson 4-6 uairean ron deuchainn.
Chaidh measaidhean biadhaidh a chleachdadh gus caitheamh fual agus urea a thomhas ann am boireannaich inbheach An.Arabach. Chaidh daithead a thoirt do bhoireannaich a bha a’ sireadh fuil agus a bha air am biathadh le fuil anns an robh 1% fual mairt ùr is sean, diofar cho-chruinneachaidhean urea, agus dà smachd (10% sucrose agus uisge) airson 48 h. ma-Aldrich, Stockholm, SE) a chur ris an daithead agus a thoirt seachad ann am matrix 4 × 4 ann an tiùban microcentrifuge 250 µl (Axygen Scientific, Union City, CA, SA; Figear 1A) Lìon chun oir (~ 300 µl). , Ostermundigen, CH; Figear 1A) ann an dorchadas iomlan aig 25 ± 2 cm ° C agus 65 ± 5% taiseachd coimeasach.Chaidh na deuchainnean seo ath-aithris 5 gu 10 tursan.
Coimhead airson fual crodh agus urea air a ghabhail a-steach leis an òstair agus boireann Anopheles arabianus a tha a’ suirghe fala. Ann an deuchainn beathachaidh (A), chaidh daithead a thoirt dha mosgìotothan boireann anns an robh fual mairt ùr is aois, diofar cho-chruinneachaidhean urea, sucrose (10%), agus uisge grùide (H2O). s gabhail a-steach fual mairt 72-uair nas lugha na fual mairt 168-uair (B).Tha an tomhas cuibheasach iomlan de nitrigin (± claonadh àbhaisteach) fual air a riochdachadh anns an inset.Host-sireadh (D, F) agus suirghe fala (E, G) bidh boireannaich a’ gabhail urea ann an dòigh a tha an urra ri dòs. mion-sgrùdadh; p <0.05).Tha bàraichean mearachd a’ riochdachadh mearachd àbhaisteach a’ mheadhan (BE).
Gus biadh a chaidh a ghabhail a-steach a leigeil ma sgaoil, chaidh mosgìotothan a chuir leotha fhèin ann an tiùban microcentrifuge 1.5 ml anns an robh 230 µl de uisge grùide agus chaidh an clò a bhriseadh le bhith a’ cleachdadh motair pestle cuidhteasach agus gun sreang (VWR International, Lund, SE), air a leantainn le centrifugation aig 10 krpm airson 10 min . beairteach) agus sùghadh (λ620) air a dhearbhadh le bhith a’ cleachdadh leughadair microplate stèidhichte air spectrophotometer (SPECTROStar® Nano, BMG Labtech, Ortenberg, DE) nm). Air an làimh eile, chaidh na mosgìotothan a ghlanadh ann an 1 ml de dh’ uisge grùide, agus chaidh 900 µl dheth a ghluasad gu cuvette airson mion-sgrùdadh speactrophotometric (λ, λsta, 6 nm). in-ghabhail daithead, chaidh lùb àbhaisteach ullachadh le caolachadh sreathach gus 0.2 µl gu 2.4 µl de 1 mg ml-1 xylene cyanide a thoirt a-mach.
Chaidh dàta tomhas-lìonaidh a sgrùdadh a’ cleachdadh mion-sgrùdadh aon-shligheach air caochlaidheachd (ANOVA) agus an uairsin coimeasan post hoc pairwise aig Tukey (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc., Cary, NC, US, 1989–2007). , San Diego, CA, na SA).
Chaidh timcheall air 20 µl de shamhlaichean fual bho gach buidheann aoise a cheangal air Chromosorb® W / AW (10 mg 80/100 mogaill, Sigma Aldrich) agus air an cuairteachadh ann an capsalan staoin (8 mm × 5 mm). Chaidh susbaint iomlan ann am fual ùr agus sean a rèir protocol an neach-dèanamh.
Gus measadh a dhèanamh air buaidh daithead air mairsinn boireannaich a bha a’ sireadh aoigheachd agus a’ suirghe fala, chaidh mosgìotothan a chuir leotha fhèin ann an soithichean mòra Petri (12 cm ann an trast-thomhas agus 6 cm ann an àirde; Semadeni) le toll còmhdaichte le mogal anns a’ mhullach (3 cm ann an trast-thomhas) le fionnarachadh agus solar bìdh. ròs agus uisge. ed gus an do bhàsaich am mosgìoto mu dheireadh (n = 40 gach làimhseachadh).
Muileann itealaich àbhaisteach mosgìoto stèidhichte air Attisano et al.[17], air a dhèanamh de phannalan acrylic soilleir 5 mm de thighead (10 cm de leud x 10 cm fada x 10 cm a dh'àirde) às aonais panalan aghaidh is cùil (Fig. 3: mullach). ium magnets 9 cm bho chèile.Chaidh tiùb còmhnard air a dhèanamh den aon stuth (6.5 cm L) a-steach don phìob dhìreach gus gàirdean ceangailte agus gàirdean a chruthachadh a bhiodh a’ giùlan pìos beag de pholl alùmanum mar chomharra eadar-sholais.
Chaidh an daithead gu h-àrd a thoirt do bhoireannaich leis an acras 24 uair a thìde airson 30 mionaidean mus deach an cumail. Chaidh mosgìotothan boireann làn-bhiadh a chuir air deigh leotha fhèin airson 2-3 mionaidean agus an ceangal ri prìneachan biastagan le cèir-sheillein (Joel Svenssons Vaxfabrik AB, Munka Ljungby, SE) agus an uairsin chaidh na gàirdeanan a chlàradh le bhith a’ ceangal an itealain gu Mill. Logger dàta a chaidh a thogail a dh’aona-ghnothach, an uairsin air a stòradh agus air a thaisbeanadh le bhith a’ cleachdadh bathar-bog PC-Lab 2000 ™ (v4.01; Velleman, Gavere, BE).
Gus pàtran gnìomhachd itealain fhaicinn, chaidh an t-astar iomlan a chaidh a sgèith (m) agus an àireamh iomlan de ghnìomhachd itealaich leantainneach obrachadh a-mach gach uair thar ùine 24 uair. Tha an àireamh de chuairtean air a thomhas ann an àrdachaidhean 10-mionaid.
Gus measadh a dhèanamh air buaidh daithead air coileanadh gintinn An.arabiensis, chaidh sia boireannaich (4 dpe) a ghluasad gu dìreach gu cèidsichean Bugdorm (30 cm × 30 cm × 30 cm) às deidh cruinneachadh fala agus an uairsin thug iad seachad an daithead deuchainneach airson 48 h mar a chaidh a mhìneachadh gu h-àrd. Chaidh uighean a chunntadh agus a chlàradh airson gach cèidse deuchainneach.Chaidh uighean a chleachdadh gus eadar-dhealachadh meud agus fad uighean fa leth a mheasadh (n ≥ 200 gach daithead) a’ cleachdadh miocroscop Dialux-20 (DM1000; Ernst Leitz Wetzlar, Wetzlar a 23);Leica Microsystems Ltd., DE). ).
Chaidh luaineachdan headspace bho ùr (1 hr post-sampling), 24 hr, 72 hr agus 168 hr a dh’ aois fual a chruinneachadh bho shamhlaichean a chaidh a chruinneachadh bho chrodh Zebu, Arsi races. Airson goireasachd, chaidh sampallan fual a chruinneachadh tràth sa mhadainn fhad ‘s a bha crodh fhathast anns an t-sabhal. teprodukte GmbH and Co., Minden, DE) ann an 3 l polyamide le mullach Ann an drumaichean plastaig vinyl cloride.Headspace volatiles bho gach sampall fual bà air a chruinneachadh gu dìreach (ùr) no às deidh aibidh aig teòthachd an t-seòmair airson 24 h, 72 h agus 168 h, ie bha gach sampall fual a’ riochdachadh gach buidheann aoise.
Airson cruinneachadh luaineachd headspace, chaidh siostam lùb dùinte a chleachdadh gus sruth gas sìolaichte gualain gnìomhaichte (100 ml min-1) a chuairteachadh tro phoca polyamide chun cholbh assorption airson 2.5 h le bhith a’ cleachdadh pumpa falamh diaphragm (KNF Neuberger, Freiburg, DE). 3 mm id). μl de pentane.Chaidh cruinneachaidhean Headspace a chur còmhla agus an uairsin a stòradh aig -20 ° C gus an deach an cleachdadh airson tuilleadh sgrùdaidh.
Chaidh freagairtean giùlain bho bhith a’ sireadh aoigheachd agus ag ithe fala An.Headspace earrannan so-leònte a chaidh a chruinneachadh bho fhual ùr, 24-h, 72-h, agus 168-h-aois a sgrùdadh airson earrannan so-ruigsinneach bho mosgìotothan Arabidopsis a’ cleachdadh olfactometer tiùb glainne dìreach [18]. olfactometer tiùb glainne (80 cm × 9.5 cm id) air a shoilleireachadh le 3 ± 1 lx de sholas dearg bho above.Charcoal sìoladh agus taiseachd sruth adhair (25 ± 2 ° C, 65 ± 2% taiseachd coimeasach) seachad air a 'bhith-mheasadh aig 30 cm s-1.Air a' dol seachad air an t-sreath èideadh de stàilinn a 'sruthadh tro shreath plume. inneal-sgaoilidh tampon ental (4 cm × 1 cm; L:D; DAB Dental AB), crochte bho choil 5 cm air ceann gaoithe an olfactometer, le atharrachaidhean brosnachaidh gach 5 mionaid. cèidse 2-3 uairean ro thoiseach an deuchainn.Chaidh an cèidse fuasglaidh a chuir air taobh sìos na gaoithe den olfactometer, agus chaidh cead a thoirt dha na mosgìotothan a dhol an sàs airson 1 mionaid, agus an uairsin chaidh falbhas dealan-dè a’ chèidse fhosgladh airson a leigeil ma sgaoil. Buaidhean aon latha, chaidh an aon àireamh de leigheasan agus smachdan a dhearbhadh air gach latha deuchainneach.
Freagairt sìolachaidh An.Chaidh earrannan headspace bho fhual mairt ùr is sean a sgrùdadh ann an cèidsichean Bugdorm (30 cm × 30 cm × 30 cm; MegaView Science). Lìon cupannan plastaig (30 mL; Nolato Hertila) le 20 mL de dh’ uisge grùide a ’toirt seachad an t-substrate sìolachaidh agus chaidh an cur ann an oiseanan mu choinneamh a’ chupa 1 μ. l de gach earrann headspace aig caolachadh 1:10.Chaidh tomhas co-ionann de pheantane a chleachdadh gus an cupa smachd atharrachadh.Chaidh làimhseachadh agus cupannan smachd atharrachadh eadar gach deuchainn gus smachd a chumail air buaidhean suidheachaidh. àireamh iomlan de uighean air an cur). Chaidh gach làimhseachadh ath-aithris 8 tursan.
Chaidh mion-sgrùdadh lorg pàtran cromatagrafach gas agus antenna dealanach (GC-EAD) de An.arabiensis boireann a dhèanamh mar a chaidh a mhìneachadh roimhe seo [20].agus urine a tha a’ fàs nas sine.Hydrogen air a chleachdadh mar an ìre gluasadach le ìre sruth loidhneach cuibheasach de 45 cm s-1.Chaidh gach sampall (2 μl) a chuir a-steach airson 30 diogan ann am modh gun sgaradh le teòthachd inlet de 225 ° C. Chaidh 4 psi de nitrigin a chur ris agus roinneadh 1: 1 ann an crois meud marbh ìosal Gerstel 3D/2 (Gerstel, Mülheim, DE) eadar an lorgaire ionization lasair agus an EAD. .5 l min−1).Chaidh an antenna a chuir 0.5 cm bho ar-a-mach an tiùba.Bha gach mosgìoto fa leth a’ toirt cunntas air aon mhac-samhail, agus airson mosgìotothan a bha a’ sireadh aoigheachd, chaidh co-dhiù trì mac-samhail a dhèanamh air sampallan fual de gach aois.
Comharrachadh choimeasgaidhean bith-ghnìomhach ann an cruinneachaidhean headspace de fhual crodh ùr is aois a’ cleachdadh GC agus mòr-speactrometer (GC-MS; 6890 GC agus 5975 MS; Agilent Technologies) gus freagairtean antenna fhaighinn ann am mion-sgrùdadh GC-EAD, ag obair ann am modh ionachaidh buaidh dealanach aig 70 eV. mm trast-thomhas a-staigh, tighead film 0.25 μm) a’ cleachdadh helium mar an ìre gluasadach le ìre sruth loidhneach cuibheasach de 35 cm s-1.A 2 μl sampall air a stealladh a’ cleachdadh na h-aon shuidheachaidhean in-stealladh agus teòthachd àmhainn ri mion-sgrùdadh GC-EAD. inbhean (Faidhle a bharrachd 1: Clàr S2). Airson àireamhachadh, chaidh heptyl acetate (10 ng, purity ceimigeach 99.8%, Aldrich) a chuir a-steach mar ìre a-muigh.
A’ measadh èifeachd measgachadh fàileadh synthetach anns a bheil todhar bith-ghnìomhach air an comharrachadh ann am fual ùr is sean gus Ans.arabiensis a tha a’ sireadh aoigheachd agus a’ suirghe fala a thàladh, a’ cleachdadh an aon olfactometer agus protocol ris na tha gu h-àrd. (Figear 5D-G; Faidhle a bharrachd 1: Clàr S2). Airson mion-sgrùdadh, cleachd 10 μl de lagachadh 1:100 den mheasgachadh làn-shintéiseach, le ìre fuasglaidh iomlan eadar timcheall air 140-2400 ng h-1, airson measadh a dhèanamh air tarraingeachd mosgìotothan aoigheachd agus fuil. -fed Ans.Arab vs measgachaidhean synthetigeach agus toirt air falbh chaidh mion-sgrùdadh a dhèanamh a’ cleachdadh ais-thionndadh logistic ainmichte agus an uairsin coimeasan pairwise airson co-mheasan neònach (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Gus measadh a dhèanamh am faodadh fual bò a bhith na àite aoigheachd airson mosgìotothan malaria, fual mairt ùr is sean, air a chruinneachadh mar a chaidh a mhìneachadh gu h-àrd, agus chaidh uisge a chuir ann am bucaidean mogal 3 l (100 ml) agus a chuir ann an ribeachan biathadh aoigheachd.(dreach BG-HDT; BioGents, Regensburg, DE).Deich ribe air an cur 50 m bho chèile ann an ionaltradh, 400 m bho choimhearsnachd baile (Silay, Ethiopia, 5 ° 53’24’N, 37 ° 29’24’E) agus gun chrodh, air raointean briodachaidh maireannach agus bailtean beaga. Chaidh coimeas a dhèanamh eadar àireamhan mosgìoto a chaidh an glacadh ann an ribeachan air am biathadh le fual de dhiofar aoisean a’ cleachdadh ais-thionndadh loidsigeach le cuairteachadh beta binomial (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Ann am baile beag le malaria faisg air baile Maki, sgìre Oromia, Etiòpia (8° 11′ 08″ N, 38° 81′ 70″ E; Figear 6A). Chaidh am baile a thaghadh airson an sgrùdaidh (Fig. 6A). B’ iad na slatan-tomhais a chaidh a chleachdadh airson na taighean a thaghadh: cha robh cead aig beathaichean san taigh, cha robh còcaireachd a-staigh (a’ tarraing connadh no gual-fhiodha) ceadaichte (co-dhiù rè na h-ùine deuchainn), agus taighean le suas ri dithis luchd-còmhnaidh, a’ cadal ann an unsecticides.fon lìon mosgìoto air a làimhseachadh. Chaidh am pròiseas seo ath-aithris deich tursan.
Chaidh measgachadh synthetach anns an robh sia coimeasgaidhean bith-ghnìomhach a sgaoileadh ann an heptane (97.0% ìre fuasgladh GC, Sigma Aldrich) agus a leigeil ma sgaoil aig 140 ng h-1 a' cleachdadh inneal-sgaoilidh cotain [20]. Companaidh Hock, Gainesville, FL, SA; Figear 6A).Chaidh na ribeachan a chrochadh 0.8 – 1 m os cionn na talmhainn, faisg air bonn na leapa, agus chaidil neach saor-thoileach fo lìon mosgìoto gun làimhseachadh agus dh’ obraich e eadar 18:00 agus 06:30. Chaidh mosgìotothan a chaidh an glacadh le gnè agus inbhe eòlas-inntinn (mion-sgrùdadh gun bhiadh, biathadh, agus an dèidh sin le bhith a’ cleachdadh mion-sgrùdadh polymer, a’ cleachdadh sèine 1, agus an dèidh làimhe le bhith a’ cleachdadh mion-sgrùdadh polymer 1 trom) comharraich an gnè a chaidh a chomharrachadh gu morf-eòlach mar A. gambiae sl Buill den iom-fhillte [23]. Anns an sgrùdadh làraich, chaidh sgrùdadh a dhèanamh air glacadh ribe de thaighean càraideach a’ cleachdadh modal iomchaidh loidsistigs ainmichte, far an robh tàladh na chaochladair eisimeileach agus làimhseachadh (measgachadh synthetach vs smachd) mar a’ bhuaidh stèidhichte (JMP® 14.0.0. SAS Institute Inc.).An seo, bidh sinn ag aithris air na luachan χ2 agus p bhon deuchainn co-mheas coltas.
Dèan measadh a bheil e safe.arabiensis comasach air fual fhaighinn, a phrìomh thùs nitrigin, urea, le bhith a’ biathadh gu dìreach, taobh a-staigh 48 h de rianachd airson 4 latha às deidh (dpe) deuchainnean beathachaidh boireann sireadh aoigheachd agus fuil (Fig. 1A). 1 agus F (5,299) = 56.00, p <0.0001, fa leth; Fig. 1B, C). A bharrachd air an sin, dh’ ith boireannaich a bha a’ sireadh aoigheachd nas lugha ann am fual aig 72 uairean an taca ri fual aig 168 uairean (Fig. 1B). eadar-dhealaichte bho 10% sucrose (F(10,813) = 15.72, p <0.0001; Figear 1D). A bharrachd air an sin, nuair a bha iad a’ dèanamh coimeas eadar an dà stàit eòlas-inntinn, ghabh boireannaich flebotomized barrachd urea na boireannaich a bha a’ sireadh aoigheachd aig na h-ìrean as ìsle, agus ghabh na boireannaich sin a-steach meudan co-chosmhail de urea aig dùmhlachdan nas àirde (F (1,953) = 78.82, p <0.0001;Fig. 1F, G).Ged a bha coltas gu robh na luachan as fheàrr aig in-ghabhail bho daithead anns an robh urea (Fig. 1D, E), b’ urrainn do bhoireannaich anns an dà stàit eòlas-inntinn atharrachadh a dhèanamh air an ìre de urea a chaidh a ghabhail a-steach thairis air an raon iomlan de cho-chruinneachaidhean urea ann an dòigh sreathach (Fig. 1F, G).San aon dòigh, tha e coltach gu bheil mosgìotothan a’ cumail smachd air na tha iad a’ gabhail naitridean le bhith a’ riaghladh na tha de dh’fhuaal air a ghabhail a-steach, leis gu bheil na tha de nitrigin ann am fual ri fhaicinn anns an t-suim a tha air a ghabhail a-steach (Figear 1B, C agus B insets).
Gus buaidh fual agus ure a mheasadh air surday aoighean-aoigheachd agus bha boireannaich maireannach a 'tighinn gu crìch agus raon de dh' uisge a chaidh a thasgadh, a bharrachd air an t-àm a th 'ann an UCHET 108.5, DF = 5, P <0.0001; χ2 = χ2 = χ2 = χ2 = χ2 = 1.8, de dhaithead de fhura, Bha ullachadh maireannach ann an Urea, agus uisge air a bhith a 'nochdadh daolagan soirbheachail (Fig an fheadhainn a tha a' telecing-aoighean do cheòl mairsinneach (p <0.04) (Fig .2C).An coimeas ri uisge, mhair boireannaich a bha air am biathadh le fual ùr agus fual 24 uair a thìde nas fhaide (p = 0.001 agus p = 0.012, fa leth; Figear 2D), fhad ‘s a bha boireannaich a bha a’ biathadh le fual 72-uair a’ mairsinn nas fhaide na an fheadhainn a bha air am biathadh le fual ùr boireann agus fual 24-uair aig aois (p. 0. air a bhiadhadh 135 mM urea, mhair boireannaich a bha air am biathadh le fuil nas fhaide na a h-uile cruinneachadh eile de urea agus uisge (p <0.013; Figear 2E).
Anns a 'bhith-mheasadh (A), chaidh daithead a thoirt dha mosgìotothan boireann a' gabhail a-steach fual bà ùr agus aois, diofar chruinneachaidhean urea, sucrose (10%) agus uisge grùide (H2O). air a bhiadhadh le fual (B, D) agus urea (C, E), agus smachdan, Sucrose agus uisge, marbh
Bha an t-astar iomlan agus an àireamh de chuairtean a chaidh a dhearbhadh ann an deuchainn muileann itealaich thar ùine 24 uair eadar-dhealaichte eadar mosgìotothan a bha a’ sireadh aoigheachd agus a’ suirghe fala, a sheall nas lugha de ghnìomhachd itealaich san fharsaingeachd (Fig. 3). Sheall mosgìotothan a bha a’ toirt seachad sucrose no fual 72-uair gnìomhachd fad na h-ùine 24-uair, fhad ‘s a bha boireannaich a thug seachad uisge nas gnìomhaiche ann am meadhan na h-ùine. 24 uairean (Figear 3).
Ann an deuchainn muileann itealaich, bha mosgìotothan boireann a’ biathadh air fual bà ùr is sean, chaidh diofar chruinneachaidhean urea, sucrose (10%), agus uisge grùide (H2O) a cheangal ri fùirneis bà agus urea gu còmhnard, a’ gluasad gu saor bho ghlùinean (gu h-àrd), a’ toirt aoigheachd don àireamh iomlan de bhuill-adhair (gu h-àrd). s san uair airson gach daithead thar ùine 24 uair a thìde air an clàradh (dorcha: liath; solas: geal).Tha astar cuibheasach agus àireamh chuibheasach de bhuillean air an sealltainn air taobh deas graf gnìomhachd circadian.
San fharsaingeachd, lean gnìomhachd itealain boireannaich a bha a’ sireadh aoigheachd pàtran coltach ri astar itealaich thar ùine 24-uair. Thug daithead a chaidh a shlaodadh gu mòr buaidh air astar itealaich meadhanach (F (5, 138) = 28.27, p <0.0001), agus boireannaich a bha a’ sireadh aoigheachd a’ faighinn 72 uair de dh’fhuaal thairis air ùine 24 uair. es air itealaich nas fhaide na fual ùr (p = 0.022) agus fual 24-h-aois (p = 0.022) air a bhiadhadh le mosgìotothan.An taca ris a’ phàtran gnìomhachd itealaich a chaidh a mhìneachadh leis an daithead fual, bha boireannaich a bha a’ sireadh aoigheachd le biadh urea a’ taisbeanadh gnìomhachd itealaich leantainneach thar ùine 24-h, a’ tighinn gu àirde san dàrna leth den ghnìomhachd dhorch F.3. àrdachadh gu mòr air astar cuibheasach itealaich a rèir an dùmhlachd a chaidh a ghabhail a-steach (F (5, 138) = 1310.91, p <0.0001).
Bha gnìomhachd itealaich iomlan de mosgìotothan suirghe fala seasmhach agus air a chumail suas thar 24 uairean thar gach daithead, le barrachd gnìomhachd fual anns an dàrna leth den ùine dhorcha airson boireannaich air am biathadh air uisge a bharrachd air boireannaich air am biadhadh às ùr agus 24 uairean a dh’ aois (dealbh 3). 138) = 1.36, p = 0.24).with eile urine agus daithead smachd (ùr, p = 0.0091; 72 hours, p = 0.0022; 168 hours, p = 0.001; sucrose, p = 0.0017; dH2O, p = 0.).
Chaidh buaidh biadhadh urine agus urea air paramadairean gintinn a mheasadh ann am bith-mheasaidhean breith uighean (Figear 4A) agus chaidh an sgrùdadh a rèir an àireamh uighean a chuir gach boireannach, meud ugh, agus ciad larbha instar a rugadh às ùr. Fual 4-uair, bha biadh fala a’ breith mòran a bharrachd uighean na bha boireannaich a’ biathadh daithead fual eile agus bha iad coltach ris an fheadhainn a bha air am biathadh le sucrose (Fig. 4B). Mar an ceudna, bha meud uighean bhoireann a bha air am biathadh le fual ag atharrachadh a rèir daithead (F (5, 209) = 12.85, p <0.0001), le 24-uair boireann a’ breith uighean a bha air am biathadh le fual, le 24-uair a’ breith uighean a bha air am biathadh le fual. A bharrachd air an sin, thug daithead fual buaidh mhòr air meud larbha (F(5, 187) = 7.86, p <0.0001), le larbha mòran nas motha a’ nochdadh bho uighean air an cur le uighean bhoireann 24 agus 72 uair a thìde air am biadhadh le fual (F(5, 187) = 7.86, p <0.0001), le larbha mòran nas motha a’ nochdadh bho uighean air an cur sìos le uighean boireann 24- agus 72 uair a thìde air am biadhadh le fual. 4D).
Coileanadh gintinn boireann Anopheles arabinis a’ biathadh air fual mairt agus urea.Chaidh mosgìotothan boireann le biadhadh a thoirt do dhaithead anns an robh fual bà ùr is sean, diofar chruinneachaidhean urea, sucrose (10%), agus uisge grùide (H2O) airson 48 uair mus deach a chuir ann am bith-mheasadh agus faighinn fo-thalamh ugh, àireamh 4C agus àireamhachadh F. Thug an daithead a chaidh a thoirt seachad buaidh mhòr air meud larbha (D, G). (urine mairt: BD; urea: EG).
Mar am prìomh phàirt nitrogenous de urine, urea, nuair a chaidh a thoirt seachad mar dhaithead do bhoireannaich air am biathadh le fuil, thug e buaidh mhòr air paramadairean gintinn anns a h-uile sgrùdadh. E). Bidh boireannaich a bha a’ biathadh air cuibhreannan urea de 134 µM no nas àirde a’ breith uighean nas motha na boireannaich air am biathadh air uisge (F(10, 4245) = 36.7; p <0.0001; Figear 4F), agus meud larbha, ged a bha buaidh aig dùmhlachdan urea coltach ris ann am màthraichean (F (10, 330.0). 4G).
Bha an arabiensis a chaidh a mheasadh anns an olfactometer tiùb glainne (Fig. 5A) gu mòr fo bhuaidh aois fual (χ2 = 15.9, df = 4, p = 0.0032; Fig. 5B). Sheall mion-sgrùdadh post hoc gun do dh’ adhbhraich fàilidhean fual gu mòr an coimeas ri 2 uairean làimhseachaidh fual an coimeas ri uairean làimhseachaidh fual 2 uair nas àirde: 0.0060, 168 uair: p = 0.012, pentane: p = 0.00070), Ach a-mhàin fàileadh fual ùr (p = 0.13; Figear 5B). a bhith gu math nas tarraingiche do earrannan luaineach headspace an coimeas ri fual aois 72-uair an taca ri smachdan (p = 0.0066; Figear 5C).
Freagairtean giùlain do fàilidhean fual mairt nàdarrach agus synthetigeach ann a bhith a’ lorg Anopheles arabianus le biathadh agus fuil.Sgeama an olfactometer tiùb glainne (A). Thathas a’ sealltainn fual bò aois 72-uair (F), agus 168-uair (G). rionnag shingilte (*) a’ comharrachadh freagairt ìosal cunbhalachd.p <0.05).Tha bàraichean mearachd a’ riochdachadh mearachd àbhaisteach na sgèile
Boireann Ann.arabiensis, 72 h agus 120 h às deidh biadh fala, nuair a bha iad a’ sìolachadh, cha deach roghainn sam bith a nochdadh airson earrannan luaineach bho cheann-uidhe bho fhual bò ùr is aois an taca ri smachdan pentane (χ2 = 3.07, p> 0.05; Faidhle a bharrachd 1: Fig. S1).
Airson boireannaich Ann.arabiensis, chomharraich mion-sgrùdaidhean GC-EAD agus GC-MS ochd, sia, trì agus trì todhar bith-ghnìomhach (Figear 5D-G).
Mheudaich an ìre fuasglaidh iomlan de choimeasgaidhean bith-ghnìomhach anns a’ chruinneachadh headspace bho 29 µg h-1 ann am fual ùr gu 242 µg h-1 ann am fual aois 168-uair, gu h-àraidh air sgàth p-cresol agus m-formaldehyde bidh phenol ag àrdachadh a bharrachd air phenol. leis an lùghdachadh a chaidh fhaicinn ann an dian chomharran (pailteas) anns a’ phanal chromatogram (Fig. 5D) -G air an taobh chlì) agus freagairtean fios-eòlasach dha na todhar sin (Fig. 5D-G panal deas).
Uile gu lèir, bha co-mheas nàdarrach co-chosmhail aig a’ mheasgachadh synthetigeach de choimeasgaidhean bith-ghnìomhach air an comharrachadh ann an earrannan luaineach de raointean fual ùr is sean (Fig. 5D–G) agus cha robh coltas ann gun robh iad a’ tarraing mòran ùidh ann a bhith a’ lorg òstair (χ2 = 8.15, df = 4, p = 0.083; Fig. 5H), no fuil a’ suirghe = χ; 30; Fig. 5I).
Gus measadh a dhèanamh air àite cho-phàirtean fa leth ann am measgachaidhean sintéise de urine 24-h-aois, chaidh sia measgachaidhean toirt air falbh a mheasadh an aghaidh mheasgachaidhean iomlan ann am measadh Y-tube, anns an deach coimeasgaidhean fa leth a thoirt air falbh. An coimeas ri sin, cha tug toirt air falbh todhar fa leth bhon mheasgachadh làn-shintéiseach buaidh air freagairtean giùlain mosgìotothan suirghe fala (χ2 = 11.38, df = 6, p = 0.077), ach a-mhàin decanal, a lean gu ìrean nas ìsle an taca ris a’ mheasgachadh iomlan Tarraing 0: p.2; Faidhle a bharrachd.
Ann am baile beag malaria-endemic ann an Etiòpia, chaidh èifeachd measgachadh synthetach de urine bò 24-uair ann a bhith a’ tàladh mosgìotothan fo chumhachan achaidh a mheasadh airson deich oidhcheannan (Fig. 6A). Faidhle a bharrachd 1: Clàr S1).Is e Anopheles arabinis an aon bhall de iom-fhillte gnè An.Gambian a chaidh a chomharrachadh le mion-sgrùdadh PCR. Gu cuibheasach, chaidh 320 mosgìoto a ghlacadh gach oidhche, agus rè na h-ùine sin ghlac ribeachan le biathadh measgachadh sintéise barrachd mosgìotothan na ribeachan càraideach gun mheasgachadh (χ2(0, 3196) = 170.0, p <-1) cha deach na còig ribe a shuidheachadh air gach fear <- 1 0. Chaidh àireamhan coltach ri mosgìotothan a ghlacadh anns gach paidhir ribe, a’ nochdadh nach robh claonadh ann eadar taighean (χ2(0, 1665) = 9 × 10-13, p> 0.05) agus gun chrìonadh san àireamh-sluaigh rè ùine an sgrùdaidh. 7) = 138.7, p <0.0001), biathadh fala o chionn ghoirid (χ2(0, 650) = 32.2, p <0.0001) agus torrachas (χ2(0, 228) = 6.27, p = 0.0123;Faidhle a bharrachd 1: Clàr S1).
Chaidh deuchainnean achaidh a dhèanamh ann an ceann a deas meadhan Etiòpia (mapa), faisg air baile Maki (cuir a-steach), a’ cleachdadh ribe solais Ionadan airson Smachd Galar (CDC) (deas) ann an taighean le paidhir, le dealbhadh ceàrnagach Laideann (dealbh adhair) (A). Bidh fàileadh synthetach a’ tàladh ar n-antraabophele agus dealbhan boireann Antraabele a ghlacadh. oes (C), ann an dòigh eadar-dhealaichte, buaidh fios-eòlais a tha an urra ris an stàit.).Tha rionnagan a’ nochdadh ìrean cudromachd staitistigeil (*p = 0.01 agus ***p <0.0001)
Chaidh na trì gnèithean a ghlacadh ann an dòigh eadar-dhealaichte ann an ribeachan anns an robh measgachaidhean synthetigeach. A’ coimhead airson òstair (χ2(1, 1345) = 71.7, p <0.0001), biathadh fala (χ2(1, 517) = 16.7, p <0.0001) agus torrachas (χ2(1, 6 . n = ara). glaiste anns an ribe a' leigeil a-mach am measgachadh synthetach (Fig. 6B), fhad 's nach robh an t-suim de An eadar-dhealaichte. Lorgadh Pharoensis ann an diofar stàitean eòlas-eòlais (Fig. 6C).
Chaidh ribeachan biathadh aoigheachd a tha taobh a-muigh luchd-aoigheachd a dh’ fhaodadh a bhith eadar làraich briodachaidh agus coimhearsnachdan dùthchail ann an Etiòpia a chleachdadh gus measadh a dhèanamh a bheil mosgìotothan malaria a’ cleachdadh fàileadh fual mart mar chue àrainn aoigheachd. , ged a bha e ann an àireamhan beaga, neo-eisimeileach bho aois urine (χ2(5, 25) = 2.29, p = 0.13; faidhle a bharrachd 1: Figear S3 ). An coimeas ri sin, cha do ghlac smachdan uisge mosgìotothan malaria aig teòthachd àrd (Faidhle a bharrachd 1: Figear S3).
Bidh mosgìotothan malaria a’ faighinn agus a’ sgaoileadh todhar anns a bheil nitrogen tro bhith a’ biathadh dìolaidh air fual mairt (ie, maragan) gus feartan eachdraidh-beatha a neartachadh, coltach ri biastagan eile [2, 4, 24, 25, 26]. lorgaidh quitoes an goireas seo le fàileadh agus is urrainn dhaibh smachd a chumail air gabhail ri todhar nitrogenous ann am fual, a’ gabhail a-steach urea, am prìomh phàirt nitrogenous ann am fual [15, 16]. Tha àite beathachaidh cudromach aig vectaran malaria a tha dùinte mar inbhich le dìth beathachaidh [8], leis gu bheil e a’ toirt comas dha mosgìotothan boireann todhar nitrogenous cudromach fhaighinn le bhith a’ dol an sàs ann am biadhadh le cunnart ìosal.