Chan eil cuid de chuspairean fuasglaidh LC a-riamh sean, oir tha cùisean ann an cleachdadh LC, eadhon mar a bhios teicneòlas ionnstramaidean a’ fàs nas fheàrr thar ùine.
Bha e spòrsail a bhith a’ sgrìobhadh a’ cholbh “LC Troubleshooting” seo agus a’ smaoineachadh air cuspairean gach mìos, leis nach eil cuid de chuspairean a’ dol a-mach à stoidhle. LC Fuasgladh earrannan air gluasadan co-aimsireil a’ toirt buaidh air cromatagrafaidheachd liùlach (LC) (mar eisimpleir, an coimeas coimeasach eadar ar tuigse air buaidh cuideam air gleidheadh ​​[2] Adhartasan Ùra) Ar mìneachadh air toraidhean LC agus mar as urrainn dhut fuasgladh fhaighinn air ionnstramaidean LC an latha an-diugh. Tha prìomh chuspair an t-sreath seo gu math buntainneach don chlàr-balla ainmeil “LC Troubleshooting Guide” aig LCGC (4) a tha crochte ann am mòran deuchainn-lannan. Airson an treas pàirt den t-sreath seo, thagh mi fòcas a chuir air cùisean co-cheangailte ri cumadh stùc no prìomh fheartan. Tha mi an dòchas gum faigh luchd-cleachdaidh LC òg is sean molaidhean feumail agus cuimhneachain air a’ chuspair chudromach seo.
Tha mi a’ faighinn mi fhìn a’ sìor fhàs a’ freagairt cheistean fuasglaidh le “tha rud sam bith comasach”. Faodaidh am freagairt seo a bhith furasta nuair a thathar a’ beachdachadh air beachdan a tha doirbh a mhìneachadh, ach tha mi ga fhaicinn gu tric iomchaidh.
Is e prìomh cheum ann an eacarsaich fuasglaidh thrioblaidean sam bith - ach aon a tha mi a 'smaoineachadh nach eil cho measail - a bhith ag aithneachadh gu bheil duilgheadas ann a dh' fheumar a fhuasgladh. Tha aithneachadh gu bheil duilgheadas ann gu tric a 'ciallachadh a bhith ag aithneachadh gu bheil na thachras don inneal eadar-dhealaichte bho na tha sinn a' sùileachadh, a tha air a chumadh le teòiridh, eòlas empirigeach, agus eòlas (5). cuideachd ris an leud.Tha na dùilean againn airson cumadh stùc fìor sìmplidh.Tha teòiridh (6) a’ toirt taic mhath don dùil leabhar-teacsa gum bu chòir, sa mhòr-chuid, na stùcan cromatagrafach a bhith co-chothromach agus a rèir cumadh cuairteachadh Gaussian, mar a chithear ann am Figear 1a.Tha na tha sinn a’ dùileachadh bho àirdean leud na chùis nas iom-fhillte, agus bruidhnidh sinn air a’ chuspair seo ann an artaigil san àm ri teachd. An còrr den chuibhreann seo, caithidh sinn ùine a’ beachdachadh air eisimpleirean sònraichte de shuidheachaidhean a dh’ fhaodadh leantainn gu na seòrsaichean cumaidhean sin.
Aig amannan chan eilear a’ cumail sùil air stùcan anns a’ chromatogram far a bheilear an dùil gum bi iad air am fuadach.stùcan, mar as trice ro “lag”). Gheibhear liosta ghoirid de dhuilgheadasan agus fhuasglaidhean san roinn seo ann an Clàr I.
Mar a chaidh a ràdh gu h-àrd, tha a’ cheist air dè an ìre de leudachadh stùc a bu chòir gabhail ris mus toirear aire agus feuchainn ri a chàradh na chuspair iom-fhillte air am bi mi a’ bruidhinn ann an artaigil san àm ri teachd.Is e an t-eòlas a th’ agam gu bheil leudachadh mòr stùc gu tric an cois atharrachadh mòr ann an cumadh stùc, agus gu bheil earball stùc nas cumanta na ro-stùcan no sgoltadh.
Chaidh beachdachadh gu mionaideach air gach aon de na cùisean sin ann an cùisean roimhe seo de Troubleshooting LC, agus faodaidh luchd-leughaidh le ùidh anns na cuspairean sin iomradh a thoirt air na h-artaigilean roimhe seo airson fiosrachadh mu na h-adhbharan bunaiteach agus fuasglaidhean a dh’fhaodadh a bhith ann do na cùisean sin.Tuilleadh mion-fhiosrachaidh.
Faodaidh uinneanan ceimigeach no fiosaigeach adhbhrachadh le stùc earbaill, aghaidh stùc, agus sgoltadh, agus tha an liosta de fhuasglaidhean comasach air na duilgheadasan sin ag atharrachadh gu farsaing, a rèir a bheil sinn a’ dèiligeadh ri duilgheadas ceimigeach no corporra. Tha e nas coltaiche gu bheil e ceimigeach.
Tha na h-adhbharan ceimigeach airson stùc earbaill ro iom-fhillte airson beachdachadh orra an seo. Thathas a’ toirt iomradh air an leughadair le ùidh anns an iris o chionn ghoirid de “LC Troubleshooting” airson deasbad nas doimhne (10). Ach, is e rud furasta feuchainn ri meud an anailis stealladh a lughdachadh agus faicinn a bheil an cumadh stùc a’ fàs nas fheàrr. feumar suidheachaidhean cromatagrafach atharrachadh gus am faighear cumaidhean stùc math eadhon le tomadan nas motha air an stealladh.
Tha luchd-leughaidh aig a bheil ùidh ann an deasbad mionaideach mu na cothroman air an toirt gu iris eile o chionn ghoirid de “LC Troubleshooting” (11).Is e aon de na h-adhbharan fiosaigeach as cumanta airson àrd-earbaill droch cheangal aig puing eadar an inneal-stealladh agus an lorgaire (12). Às deidh cuid de dheuchainnean fuasglaidh trioblaidean tùsail, thuig sinn gu robh doimhneachd a’ phuirt anns an stator bhalbhaichean stealladh mòran nas doimhne na bha sinn cleachdte ris, agus mar thoradh air sin bha meud mòr marbh aig bonn a’ phuirt.
Faodaidh duilgheadasan fiosaigeach no ceimigeach adhbhrachadh cuideachd air aghaidhean stùc mar an fheadhainn a chithear ann am Figear 1e. Is e adhbhar corporra cumanta an fhìor thoiseach nach eil leabaidh gràin a’ cholbh air a phacadh gu math, no gu bheil na mìrean air ath-eagrachadh thar ùine.As a’ phrìomh earbaill a dh’ adhbhraich an t-iongantas fiosaigeach seo, is e an dòigh as fheàrr air seo a chàradh a bhith a’ dol an àite na colbh agus a’ cumail a’ dol. Tha an ìre de mhion-sgrùdadh air a ghleidheadh ​​​​leis an ìre pàipearachd (mar sin, am bàillidh gleidhidh) co-cheangailte gu sreathach ri dùmhlachd an anailis anns a’ cholbh. Mar le cus cuideim a dh’ adhbhraicheas earbaill stùc (10), faodar a’ phrìomh thoiseach a dh’ adhbhraicheas gleidheadh ​​neo-loidhneach a dhearbhadh cuideachd le bhith a’ lughdachadh meud anailit stealladh.
Aig amannan bidh sinn a’ faicinn na tha coltach ri stùc “sgoltadh”, mar a chithear ann am Figear 1f. Is e a’ chiad cheum ann am fuasgladh na duilgheadas seo faighinn a-mach a bheil an cumadh stùc mar thoradh air co-fhuasgladh pàirt (ie, làthaireachd dà choimeasgaidhean sònraichte ach dlùth eluting). an colbh fhèin.Often, is e an rud as cudromaiche don cho-dhùnadh seo a bheil a h-uile stùc anns a’ chromatogram a’ taisbeanadh cumaidhean sgoltadh, no dìreach aon no dhà.Ma tha e dìreach aon no dhà, is dòcha gur e cùis co-elution a th’ ann;ma tha a h-uile stùc air a roinn, is dòcha gur e cùis chorporra a th’ ann, is dòcha co-cheangailte ris a’ cholbh fhèin.
Mar as trice bidh stùcan roinnte co-cheangailte ri feartan fiosaigeach a’ cholbh fhèin mar thoradh air frits a-steach no a-mach a tha air am bacadh gu ìre, no ath-eagrachadh mìrean sa cholbh, a’ leigeil leis an ìre gluasadach sruthadh nas luaithe na an ìre gluasadach ann an raointean sònraichte de chruthachadh seanail colbh .ann an roinnean eile (11).ge-tà, nam eòlas-sa, mar as trice is e fuasgladh geàrr-ùine a tha seo seach fuasgladh fad-ùine. Bidh seo gu tric marbhtach le colbhan an latha an-diugh ma bhios na mìrean a’ tighinn còmhla taobh a-staigh a’ cholbh. Aig an ìre seo, tha e nas fheàrr an colbh a chuir na àite agus leantainn air adhart.
Tha an stùc ann am Figear 1g, cuideachd bho eisimpleir o chionn ghoirid anns an obair-lann agam fhìn, mar as trice a’ nochdadh gu bheil an comharra cho àrd is gu bheil e air ceann àrd an raoin freagairt a ruighinn. Airson lorgairean sùghaidh optigeach (UV-vis sa chùis seo), nuair a tha an dùmhlachd anailit glè àrd, bidh an anailit a’ gabhail a’ mhòr-chuid den t-solas a’ dol tro chill sruth an lorgaire, a’ fàgail glè bheag de sholas ri lorg, lorgar na comharran de dh’ fhuaim bho na diofar thùsan de dh’ fhuaim bho na diofar thùsan de dh’ fhuaim a lorgar. aotrom agus “sruth dorcha”, a’ dèanamh a’ chomharra gu math “fuzzy” ann an coltas agus neo-eisimeileach bho cho-chruinneachadh anailis.Nuair a thachras seo, gu tric faodar an duilgheadas fhuasgladh gu furasta le bhith a’ lughdachadh meud in-stealladh an anailit - a’ lughdachadh meud an in-stealladh, a’ lagachadh an sampall, no an dà chuid.
Ann an sgoil chromatography, bidh sinn a’ cleachdadh an comharra lorgaire (ie, an y-axis anns a’ chromatogram) mar thaisbeanair air a’ cho-chruinneachadh anailit anns an t-sampall.Mar sin tha e neònach cromatogram fhaicinn le comharra fo neoni, oir is e am mìneachadh sìmplidh gu bheil seo a’ comharrachadh dùmhlachd anailis àicheil - rud nach eil comasach gu corporra. Nam eòlas-sa, thathas gu tric a’ cumail sùil air stùcan àicheil nuair a bhios iad a’ cleachdadh sùghaidh optigeach.
Anns a’ chùis seo, tha stùc àicheil dìreach a’ ciallachadh gu bheil na moileciuilean a tha a’ tighinn a-mach às a’ cholbh a’ gabhail a-steach nas lugha de sholas na an ìre gluasadach fhèin dìreach ro agus às deidh an stùc. lùb agus faigh fiosrachadh cainneachdail ceart, agus mar sin chan eil adhbhar bunaiteach ann airson an seachnadh (bidh an dòigh seo uaireannan air ainmeachadh mar “lorg UV neo-dhìreach”) (13). Ge-tà, ma tha sinn dha-rìribh ag iarraidh stùcan àicheil a sheachnadh gu tur, a thaobh lorg sùghaidh, is e am fuasgladh as fheàrr tonn-lorg eadar-dhealaichte a chleachdadh gus am bi an anailis a’ gabhail a-steach barrachd air an ìre de shusbaint gluasadach, nas lugha na an ìre gluasadach.
Faodaidh stùcan àicheil nochdadh cuideachd nuair a bhios tu a’ cleachdadh lorg clàr-amais ath-bheòthail (RI) nuair a tha clàr-amais ath-tharraingeach de cho-phàirtean a bharrachd air an anailis anns an t-sampall, leithid matrix fuasglaidh, eadar-dhealaichte bho chlàr-amais ath-bheòthachaidh na h-ìre gluasadach.
Ann am pàirt a trì air cuspair bunaiteach fuasgladh dhuilgheadasan LC, bhruidhinn mi air suidheachaidhean far a bheil an cumadh stùc a chaidh fhaicinn eadar-dhealaichte bhon chumadh stùc ris a bheil dùil no àbhaisteach.Tha fuasgladh èifeachdach air duilgheadasan mar seo a’ tòiseachadh le eòlas air cumaidhean stùc ris a bheil dùil (stèidhichte air teòiridh no eòlas ro-làimh leis na dòighean a th’ ann mar-thà), agus mar sin tha dealachadh bho na dùilean sin follaiseach. àite math airson fuasgladh cheistean a thòiseachadh, ach chan eil e a’ glacadh a h-uile comas. Faodaidh luchd-leughaidh aig a bheil ùidh ann an liosta nas doimhne de dh’ adhbharan agus de fhuasglaidhean iomradh a thoirt air clàr balla “LC Troubleshooting Guide” LCGC.
(4) Clàr balla “Stiùireadh Troubleshooting LC” LCGC.https://www.chromatographyonline.com/view/troubleshooting-wallchart (2021).
(6) A. Felinger, Mion-sgrùdadh Dàta agus Giullachd Chomharran ann an Chromatography (Elevier, New York, NY, 1998), td. 43-96.
(8) Wahab MF, Dasgupta PK, Kadjo AF agus Armstrong DW, Anal.Chim.Journal.Rev.907, 31–44 (2016). https://doi.org/10.1016/j.aca.2015.11.043.