"Nunca dubides de que un pequeno grupo de cidadáns reflexivos e dedicados pode cambiar o mundo.De feito, é o único que hai".
A misión de Cureus é cambiar o modelo de publicación médica de longa data, no que o envío de investigacións pode ser caro, complexo e lento.
Plasma/prp rico en plaquetas, rexeneración de tecidos, activación plaquetaria, terapia proliferativa de glicosa, plaquetas, terapia proliferativa
Cita este artigo como: Harrison TE, Bowler J, Reeves K, et al.(17 de maio de 2022) O efecto da glicosa no reconto e volume de plaquetas: implicacións para a medicina rexenerativa.Cura 14 (5): e25081.doi:10.7759/cureus.25081
O plasma rico en plaquetas (PRP) e as solucións de glicosa hipertónica úsanse habitualmente para a inxección na medicina rexenerativa, ás veces xuntos.Non se informou previamente do efecto da glicosa hipertónica na lise e activación plaquetaria.Probamos o efecto das concentracións elevadas de glicosa sobre o reconto de plaquetas e eritrocitos, así como os volumes celulares en PRP e sangue enteiro (WB).Produciuse unha rápida redución parcial do reconto de plaquetas con todas as mesturas de glicosa mesturadas con PRP ou sangue enteiro, consistente coa lise parcial. Despois do primeiro minuto, o reconto de plaquetas mantívose estable, o que suxire unha rápida acomodación das plaquetas residuais a unha hipertonicidade extrema (>2000 mOsm). Despois do primeiro minuto, o reconto de plaquetas mantívose estable, o que suxire unha rápida acomodación das plaquetas residuais a unha hipertonicidade extrema (>2000 mOsm). После первой минуты количество тромбоцитов оставалось стабильным, что указывает на зывает на зывает на ставалось стабильным очных тромбоцитов до экстремального (>2000 мОсм) гипертонуса. Despois do primeiro minuto, o reconto de plaquetas mantívose estable, o que indica unha rápida acomodación das plaquetas residuais a unha hipertonicidade extrema (>2000 mOsm).第一分钟后，血小板计数保持稳定，表明残余血小板迅速适应极端（保持稳定，表明残余血小板迅速适应极端（> 2000 mO sm（ 第一板迅速适应极端（> 2000 m.2000 mOsm）高渗状态。 После первой минуты количество тромбоцитов оставалось стабильным, что указывает на зывает на ставалось стабильным чных тромбоцитов к экстремальному (>2000 мОсм) гиперосмолярному состоянию. Despois do primeiro minuto, o reconto de plaquetas mantívose estable, o que indica unha rápida adaptación das plaquetas residuais ao estado hiperosmolar extremo (>2000 mOsm).As concentracións de glicosa do 25% ou superiores orixinaron un aumento significativo do volume plaquetario medio (MPV), o que indica unha fase inicial de activación plaquetaria.Son necesarios máis estudos para determinar se se produce a lise plaquetaria ou a activación e se a inxección de glicosa hipertónica só ou en combinación con PRP pode proporcionar un beneficio clínico adicional.
Na década de 1950, o cirurxián estadounidense George Hackett descubriu que podía aliviar permanentemente a dor nas articulacións e nas costas en moitos pacientes inxectando unha solución proliferativa nos tendóns e ligamentos.Os seus experimentos con coellos demostraron que o tratamento, que el chamou terapia proliferativa, facía que os tendóns se agrandasen e fortalecesen.Os estudos histolóxicos confirmaron que durante este proceso se produce novo coláxeno [1].
Durante as primeiras décadas probáronse moitas solucións de distribución diferentes.Na década de 1990, a maioría dos profesionais consideraban que as altas concentracións de glicosa eran o método máis seguro e eficaz.Non obstante, o mecanismo de acción segue sen estar claro.
Poucos estudos clínicos realizáronse no século XX despois do traballo de Hackett.Non obstante, na década de 2000 houbo un renovado interese e concluíronse varios ensaios clínicos exitosos de terapia proliferativa para o tratamento da dor lumbar [2], a osteoartrite do xeonllo [3] e a epicondilite lateral [4].
A rexeneración do tecido require a participación de células nai.Polo tanto, altas concentracións de glicosa deben inducir dalgún xeito a migración, replicación e diferenciación das células nai.A hipótese de que as plaquetas poden actuar como mensaxeiros e que as altas concentracións de glicosa poden facer que as plaquetas liberen citocinas e factores de crecemento, promovendo así os procesos de rexeneración, especialmente a migración de células nai a áreas con altas concentracións de glicosa.
A activación plaquetaria sempre precede a un aumento do calcio intracelular [5].Liu et al.en 2008 mostrou que os niveis elevados de glicosa aumentan a actividade das canles canónicas tipo 6 (TRPC6) do receptor transitorio na membrana plasmática, o que leva a un influxo de ións calcio nas plaquetas [6].Outro estudo mostrou que a exposición da zona marxinal dos microtúbulos aos ións de calcio provoca a relaxación, expansión e deformación da zona marxinal, que á súa vez provoca un cambio de forma de disco a esférico, o que resulta no volume plaquetario medio (MPV) [7].
A nosa hipótese neste estudo é que a exposición das plaquetas a altas concentracións de glicosa afecta á zona marxinal dos microtúbulos e ao medio intracelular, o que provoca un aumento do MPV.
Todos os participantes asinaron un formulario de consentimento informado despois de que se explicasen os detalles do estudo e antes de recibir as mostras.Neste estudo, só se utilizaron mostras de PRP cun hematocrito superior ao 2% para que se puidesen incluír o reconto de eritrocitos (eritrocitos) e o volume corpuscular medio de glóbulos vermellos (MCV) para a súa comparación.
O estudo realizouse en catro fases, a primeira fase foi PRP e as fases restantes foron sangue enteiro (táboa 1).Como se describiu anteriormente [8], todas as forzas centrífugas relativas (RCF, forza g) calculáronse a partir do punto medio (Rmid, en cm) da columna de sangue na xiringa centrífuga.Optamos por utilizar o MPV como marcador de sensibilización plaquetaria e o reconto plaquetario como indicador da potencial lise plaquetaria, ambos os cales poden medirse facilmente en analizadores de hematoloxía estándar.
Na primeira fase, 47 voluntarios doaron mostras de sangue: un tubo de ácido etilendiaminotetraacético (EDTA) e unha mostra de sangue enteiro PRP (anticoagulado con citrato de sodio (NaCl, 3%)) (táboa 1).Coloque o balancín no tubo inmediatamente.Realizouse un reconto sanguíneo completo (CBC) en mostras de EDTA por triplicado, e as mostras de NaCl analizáronse por triplicado para a análise de CBC, e despois preparouse PRP mediante varios métodos descritos anteriormente [8].Todas as mostras de PRP preparáronse por centrifugación a 900-1000 g.Mestura cada mostra de PRP nun mesturador de vórtice durante 5-10 segundos, despois divide cinco alícuotas de 0,5 ml en tubos.
Para avaliar o efecto da exposición ás plaquetas nas concentracións elevadas de glicosa, mesturáronse cantidades iguais (0,5 ml) de 0%, 5%, 12,5%, 25% e 50% de glicosa en auga con mostras de plaquetas para obter 0%, 2,5% 6,25%, 12,5% e 25% de concentración de tubos de ensaio para mesturar a mestura de tubos de ensaio durante 25 minutos. .O TAC de cada mestura analizouse por triplicado despois de 15 min.Promediaron o reconto de plaquetas (PLT), o reconto de glóbulos rojos, o MCV e o MPV para cada tubo, e o reconto medio de plaquetas, o reconto de glóbulos rojos, o MCV e o MPV calculáronse para todas as mostras de PRP.
Despois de completar a primeira fase de recollida de datos, observamos un aumento significativo no volume de plaquetas nas plaquetas de PRP despois da adición de D50W.As plaquetas PRP non representan necesariamente todas as plaquetas no sangue, e o medio PRP difire do medio WB.Polo tanto, decidimos realizar unha segunda fase de proba do efecto de engadir D50W ao sangue total.
Para a segunda quenda, escollemos un tamaño de mostra de 30 en función dos resultados da primeira serie, tal e como se describe na sección Análise.Nesta serie, 20 voluntarios doaron mostras de sangue (táboa 1).O sangue enteiro (1,8 ml) foi extraído nunha xeringa de 3 ml e anticoagulado con 0,2 ml de NaCl ao 40%.Mesturouse a xeringa de sangue enteiro durante cinco segundos cun mesturador de vórtice e analizouse o CBC por triplicado.Despois da análise, engadiuse sangue anticoagulado a 2 ml de glicosa ao 50 % nunha xiringa de 5 ml (a concentración final de glicosa foi de aproximadamente o 25 % (D25) e colocouse nun tubo de axitación durante 30 minutos. Despois de 30 minutos, analizouse por triplicado D25/CBC en xiringas WB. O reconto de plaquetas, RBC, RBC e PLT, media de plaquetas, RBC e RBC foron por triplicado. Calculáronse o reconto, MCV e MPV para cada mostra antes e despois de engadir glicosa.
Dado que as plaquetas do sangue enteiro adoitan estar expostas á glicosa hipertónica durante a terapia con glicosa proliferativa debido á inxección mínimamente invasiva, e non é común combinar PRP con glicosa hipertónica xusto antes da inxección, decidimos estudar a glicosa hipertónica en combinación co WB na sección 1. Pasos tres e catro.En cada etapa, 20 voluntarios doaron 7-8 ml de ACD-A (ácido que contén citrato trisódico (22,0 g/l), ácido cítrico (8,0 g/l) e glicosa (24,5 g/l), solución de citrato de dextrosa) para anticoagulantes sanguíneos (táboa 1).Só se utilizaron mesturas de glicosa superiores ao 12,5% para determinar a porcentaxe de limiar asociada a un aumento do MPV.Na terceira etapa, colócase 1 ml de sangue nun tubo de ensaio.A continuación, mestura o sangue nun mesturador de vórtice durante 10 segundos engadindo 1 ml de glicosa ao 30%, glicosa ao 40% ou glicosa ao 50% ao tubo para obter unha concentración final de glicosa do 15%, 20% e 25%, respectivamente.As mostras de glicosa en sangue foron analizadas para CBC inmediatamente despois da mestura e repetidas cada dous minutos durante 30 minutos.
Durante a mestura inicial, a adición de glicosa hipertónica 1:1 e WB ou PRP expón as plaquetas a concentracións superiores ao 25% durante varios segundos.No cuarto paso, para avaliar o efecto da glicosa hipertónica con concentracións máximas mínimas e probar o límite superior do efecto da glicosa, engadimos só unha pequena cantidade de sangue a D25W ou D50W.Coloque 1 ml de D25W ou D50W nun tubo e engade 0,2 ml de WB mentres agita a mostra durante 10 segundos.Nestes casos, o sangue estivo exposto á glicosa a unha concentración aproximadamente un 20 % por encima da concentración final, en lugar dun 50 % por riba da concentración final como na Fase 3, o que resulta en concentracións finais de glicosa do 20,8 % e do 41,6 %.As mostras mixtas analizáronse no mesmo intervalo de tempo que no paso 3.
No primeiro paso de cada serie de dilución de glicosa, tomáronse 30 mostras xa que este era o tamaño de mostra apropiado para o estudo piloto [9].Ao final de cada fase (incluída a primeira fase), avalía a adecuación do tamaño da mostra mediante a fórmula utilizada para determinar o tamaño da mostra necesario para estimar a media da variable de resultado continua nunha poboación.Fórmula n = Z2 x SD2 /E2.Nesta ecuación, Z é a puntuación Z, SD é a desviación estándar e E é o erro desexado [10].O noso alfa é 0,05, o que corresponde a un valor Z de 1,96, e esperamos un erro de 5 (en porcentaxe).Polo tanto, resolvemos para n = (1,962 x SD2)/52.Os resultados mostraron que o tamaño da mostra requirido para cada etapa era menor que o número real recollido.
Durante os períodos 1, 3 e 4 usando máis dunha concentración de glicosa, analizouse o efecto das diferentes concentracións de glicosa comparando o cambio fraccionario entre o tempo 0 e cada tempo posterior (fase 1 aos 15 minutos, período 3 aos 15 minutos).e catro aos 15 segundos, despois cada dous minutos.) Comparáronse as taxas de cambio para cada período de tempo mediante a proba U de Mann-Whitney porque os datos non seguían unha distribución normal determinada pola proba de normalidade de Shapiro-Wilk.Dado que se realizou unha análise 1 a 1 de varios grupos (cinco) no primeiro, terceiro e cuarto pasos (cinco en total), realizouse unha corrección de Bonferroni para axustar o valor alfa desexado a ≤0,01 pero non ≤0,05.
Redución do reconto de plaquetas con todas as concentracións de dextrosa hipertónica e un aumento do MPV en plaquetas de PRP a >12,5% da concentración de dextrosa: o reconto de plaquetas de PRP aumentou de unha a cinco veces a súa concentración en comparación co sangue total inicial, variando segundo o método (non representado). Redución do reconto de plaquetas con todas as concentracións de dextrosa hipertónica e un aumento do MPV en plaquetas de PRP a > 12,5% da concentración de dextrosa: o reconto de plaquetas de PRP aumentou de unha a cinco veces a concentración en comparación co sangue total inicial, variando segundo o método (non representado). Уменьшение количества тромбоцитов при всех концентрациях гипертонической декстроцитов при всех концентрациях гипертонической para MP3 MP3 цитах PRP при концентрации декстрозы > 12,5%: количество тромбоцитов PRP увеличилось в соличество тромбоцитов PRP увеличилось в соличество тромбоцитов PRP увеличилось в соличество тромбоцитов PRP ой цельной кровью, в зависимости от метода (не показано). Diminución do reconto de plaquetas en todas as concentracións hipertónicas de dextrosa e aumento do MPV en plaquetas de PRP a > 12,5% da concentración de dextrosa: o reconto de plaquetas de PRP aumentou de 1 a 5 veces en comparación co sangue total inicial, dependendo do método (non mostrado). ).在> 12,5 % 的葡萄糖浓度下，所有浓度的高渗葡萄糖降低血小板计数，中度度下，中度度下 PRP：线全血相比，PRP 血小板计数从浓度的1 倍上升到5 倍，因方法而异（未揉迂 A concentración de glicosa > 12,5%, a alta concentración de glicosa reduce o reconto sanguíneo, o MPV sanguíneo PRP aumenta: en comparación co 与基线全血, o reconto sanguíneo PRP aumenta de 1 a 5 veces a concentración (non descrita). При концентрациях глюкозы >12,5% все концентрации гипертонической глюкозы снижтали снижтали кослиточ контрации MPV повышали в тромбоцитах PRP: количество тромбоцитов PRP увеличивалось от 1- до 5-кратрнац пистрнац повышали PRP ю с исходными концентрациями цельной крови, в зависимости от метода (не описано ). En concentracións de glicosa > 12,5%, todas as concentracións de glicosa hipertensiva diminuíron o reconto de plaquetas e aumentaron o MPV nas plaquetas de PRP: o reconto de plaquetas de PRP aumentou de 1 a 5 veces en comparación coas concentracións de base en sangue enteiro, dependendo do método (como se describe).A figura 1 mostra que o número de plaquetas diminuíu case un 75% despois da dilución en auga e un 20-30% despois de 15 minutos de dilución con diferentes concentracións de glicosa en comparación co PRP inicial e unha dilución 1:1 axustada para o volume (1- k1 con corrección de volume).k -1 cría).1 cría).
O número de células en cada dilución exprésase como unha fracción do número orixinal antes da dilución.
O MPV diminuíu mínimamente durante a produción de PRP, sen máis cambios nas concentracións de dilución ata o 12,5% en auga ou glicosa (incluídas as mesturas de glicosa PRP do 25%) e aumentou máis dun 20% despois da dilución en solución de glicosa ao 50% (Fig. .2).).Pola contra, os eritrocitos non mostraron cambios significativos no volume en ningunha dilución que non fose H2O.
O volume medio de células en cada dilución exprésase como unha porcentaxe do volume orixinal antes da dilución.
Observouse unha redución similar, pero menos pronunciada, do reconto de plaquetas e un aumento da CVR en BC expostos a 50% de glicosa (para formular con 25% de glicosa).A Táboa 2 compara o número de células e os volumes de células en sangue enteiro diluído en dextrosa ao 50% cos datos de PRP da fase 1 diluídos en dextrosa ao 50%.Os cambios no reconto de eritrocitos e no MCV de eritrocitos non eran obvios e non foron o foco da nosa atención.
SD = desviación estándar, MD = diferenza media entre os grupos, SE = desviación estándar da diferenza media, RBC = eritrocitos, PLT = plaquetas, PRP = plasma rico en plaquetas, WB = sangue total
Despois de engadir D50W a WB, a porcentaxe de perda de plaquetas axustada pola dilución foi do 7,7% (310±73 fronte a 286±96) en comparación co 17,8% da dilución de PRP en D50W (664±348 fronte a 544±277).MPV WB aumentou un 16,8 % (de 10,1 ± 0,5 a 11,8 ± 0,6), mentres que o MPV PRP aumentou un 26 % (9,2 ± 0,8 fronte a 11,6 ± 0,7). Aínda que as diferenzas medias tanto na redución do número de plaquetas como no aumento de MPV foron significativamente máis con PRP, os cambios na redución do número de plaquetas dentro de WB foron case significativos (310 ± 73 a 286 ± 96 (-7,7%); p = 0,06) e o aumento de MPV foi significativo (10,1 ± 0,5 a 11,8 ± 0,6 (+16,8) p <.001). Aínda que as diferenzas medias tanto na redución do número de plaquetas como no aumento de MPV foron significativamente máis con PRP, os cambios na redución do número de plaquetas dentro de WB foron case significativos (310 ± 73 a 286 ± 96 (-7,7%); p = 0,06) e o aumento de MPV foi significativo (10,1 ± 0,5 a 11,8 ± 0,6 (+16,8) p <.001).Aínda que as diferenzas medias tanto na redución do reconto de plaquetas como no aumento da CVR foron significativamente maiores co PRP, os cambios no descenso do reconto de plaquetas dentro do WB foron case significativos (310 ± 73 a 286 ± 96 (-7,7%); p = 0,06).увеличение MPV было значительным (de 10,1 ± 0,5 ata 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001). o aumento do MPV foi significativo (de 10,1 ± 0,5 a 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001).尽管PRP 在血小板计数减少和MPV 增加方面的平均差异显着更大，但WB 内血尡氏的平均差异显着更大，彆WB几乎是显着的（310 ± 73 至286 ± 96 (-7,7%)；p = ,06）和MPV 的增加是显着的（10,1 ± 10,5 ± 6 ± 1,5 ± 8 (10,1 ± 6) 001).尽管 PRP 在 血小板 计数 和 和 增加 方面 的 平均 差异 显着 大 ， 但 和 和 增加 平均 差异的 几乎 是 显着 的 （（（310 ± 73 至 286 ± 96 (-7,7 %) ； p = ,06）和MPV 的增加 的增加 的增加 的增加是1..（1 加 的增加 是显1. ± 0,6 (+16,8) p < .001）。O cambio na redución do reconto de plaquetas dentro do WB foi case significativo (de 310 ± 73 a 286 ± 96 (-7,7%); p = 0,06), aínda que o PRP tivo diferenzas medias significativamente maiores no descenso do reconto de plaquetas e no aumento do MPV.e o aumento do MPV foi significativo.(de 10,1 ± 0,5 ata 11,8 ± 0,6 (+16,8) р < 0,001). (de 10,1 ± 0,5 a 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001).
Requiriuse unha concentración final do 20% de glicosa para ver un cambio significativo no MPV, pero o cambio no MPV foi máis pronunciado na concentración final do 25%.A perda de plaquetas estabilizouse despois do descenso inicial.Observamos unha forte diminución inicial da CVR, con todo, a CVR restableceuse rapidamente na concentración final de glicosa do 25%, que foi significativamente superior aos niveis de CVR observados nas concentracións finais de glicosa do 20% e do 15% (Fig. 3 e á esquerda da táboa 3; caixas sombreadas).indicar valores p ≤ alfa cunha corrección de Bonferroni de 0,01).Tamén houbo unha forte caída inicial no número de PLT, observada na fase inicial de 0-15 s, e despois mantívose estable (de 15 s a 30 min; á esquerda da táboa 4).
A adición de varias concentracións de glicosa ao sangue enteiro deu lugar a unha rápida diminución inicial do MPV seguida dunha recuperación dependente da concentración de máis do 20%.A lenda mostra a concentración de glicosa despois da dilución.D15, D20 e D25 realizáronse nunha dilución 1:1.D21 e D41 realizáronse nunha dilución 1:5.
A táboa 4 mostra o cambio no reconto de plaquetas cando se dilúe en glicosa hipertónica.Observamos unha relación dependente da dose entre a caída inmediata dos números de PLT na dilución 1:1 e na dilución 1:5.Comparando as dilucións 1:1 como un único grupo coas dilucións 1:5, o grupo 1:1 tivo unha diminución inmediata do reconto de plaquetas menor que o grupo 1:5 66±48.000 (23%) fronte a 99±69.000 (37%)., p = 0,014) no grupo 1:5.Despois dunha caída inicial no primeiro punto de medición, o reconto de plaquetas como porcentaxe de glicosa estabilizouse (Fig. 4).
Cando se engade sangue enteiro á glicosa nunha proporción de 1:1, o reconto de plaquetas redúcese nun 25%.Non obstante, cando se engade sangue enteiro nunha proporción de 1:5, a redución foi moito maior: preto do 50%.
O 41% de glicosa aumentou o MPV máis rápido e máis dramáticamente que un 25% ou 21%.Os resultados do MPV móstranse na Figura 3. En todas as outras dilucións, non se observou unha diminución inicial inmediata do MPV despois da adición de glicosa ao 50%.Ao usar 25% de glicosa (concentración de glicosa 20,8% na dilución final), o cambio no MPV foi comparable ao cambio no 20% de glicosa nunha dilución 1:1 (Fig. 3).Aínda que os cambios no MPV foron inicialmente maiores na concentración mixta do 41% que no 25%, a diferenza no MPV entre o 41% e o 25% despois de 16 minutos xa non era significativa (táboa 3, dereita).Tamén é interesante que o 25% de glicosa aumentou o MPV con máis eficacia que o 20,8%.
Este estudo in vitro confirmou parcialmente a nosa hipótese. Mostrou unha potencial lise plaquetaria parcial por mestura de dextrosa, unha rápida acomodación das plaquetas á hipertonicidade extrema e un aumento significativo do MPV en resposta a concentracións > 25% de dextrosa hipertónica. Mostrou unha potencial lise plaquetaria parcial por mestura de dextrosa, unha rápida acomodación das plaquetas á hipertonicidade extrema e un aumento significativo do MPV en resposta a concentracións > 25% de dextrosa hipertónica. Он показал потенциальный частичный лизис тромбоцитов примесью декстрозы, быструцодатроцодобоцитов примесью декстрозы в до экстремального гипертонуса e значительное повышение MPV в ответ на гипертоничеструц нкоз 2 значительное повышение MPV 5%. Mostrou unha potencial lise plaquetaria parcial con dextrosa, unha rápida acomodación plaquetaria a unha hipertonicidade extrema e un aumento significativo do MPV en resposta a niveis hipertónicos de dextrosa > 25%.它显示出通过葡萄糖混合物潜在的部分血小板溶解，血小板快速适应极潜在的部分血小板溶解，血小板快速适应枫師应极渫应极渫帗应极板252 % 浓度的高渗葡萄糖时MPV 显着上升。它 显示 出 通过 葡萄糖 潜在 的 部分 血小板 溶解 血小板 快速 适应 在 的 部分 血小板 溶解 血小板 快速 适庯 在 适庯 在 适庯 垫 枫经应> 25% 浓度 高渗 葡萄糖 时 时 mpv 显着。。。。。 Он показывает потенциальный частичный лизис томцоцитов смесями с гкозой .... ыыыт .... пертонусánt и значительное уеличение mpv в ответ на концентрацию гипертоническоййозы> 25%. Mostra unha potencial lise plaquetaria parcial por mesturas de glicosa, unha rápida adaptación plaquetaria á hipertonicidade extrema e un aumento significativo do MPV en resposta á glicosa hipertónica > 25%.O aumento inicial foi máximo cunha exposición á glicosa do 41,6 %, pero o aumento do MPV achegouse ao 25 ​​% da exposición á glicosa uns 20 minutos despois da exposición.
A concentración de plaquetas está afectada pola glicosa.Observamos que a cantidade de PLT diminuíu en todas as dilucións de glicosa.Unha forte caída no número de plaquetas en dilucións de H2O (0%) da serie PRP pode estar asociada á lise osmótica.Alternativamente, este podería ser un artefacto causado pola acumulación de plaquetas, pero isto contrasta coa falta de cambio de MPV nesta dilución.Este achado significa que algunhas plaquetas son moi sensibles á hipoosmolaridade.
En todas as dilucións 1:1 de glicosa, a cantidade de PLT diminuíu nun 20-30%, incluso por D5W (hipotónico a 252 mOsm), o que pode indicar un efecto específico non osmótico da glicosa, xa que tanto PLT como MPV permaneceron inalterados cun aumento de tres veces na concentración.glicosa.de D5W a D25W.De feito, as concentracións de PLT tendían a aumentar lixeiramente co aumento da osmolaridade.
A diminución do PLT entre as dilucións 1:1 e 1:5 significa que o efecto de disolución depende da concentración inicial e final de glicosa.Se dependese só da concentración inicial, entón cabería esperar unha diferenza na redución de PLT entre concentracións 1:1.Pero nós non.Se o efecto de lise depende só da concentración final de glicosa, entón non esperamos moita diferenza entre unha dilución do 20% 1:1 e unha dilución do 20,8% 1:5.E aínda así o fixemos.
Se se produce a perda de plaquetas debido á lise plaquetaria, fórmase un lisado parcial, despois do cal as citocinas e os factores de crecemento son liberados ao medio extracelular.Varios estudos demostraron que o lisado de plaquetas é case tan efectivo como o PRP como unha solución de proliferación [11].O propio PRP demostrou ser unha solución eficaz para o tratamento da proliferación [12-14].
As plaquetas inactivas circulan en forma de disco reforzado con varias estruturas internas.Durante a activación, adquiren unha forma máis esférica ou de ameba, dando lugar a un aumento de volume.O aumento de volume require un aumento da superficie, que é o resultado da extrusión do sistema de túbulos abertos (OCS) e da adición de gránulos exocíticos á membrana.Queda por determinar se o aumento do MPV inducido pola glicosa hipertónica implica un destes mecanismos ou ambos, pero se este último, un aumento do MPV indicaría unha desgranulación.
Este estudo mostrou que a exposición a altas concentracións de glicosa en PRP ou plaquetas de sangue enteiro deu lugar a un aumento do MPV en 15 minutos cunha concentración de glicosa do 25% e do 41,6%, respectivamente.
O aumento do MPV plaquetario pode deberse á dilatación dos enredos dos microtúbulos circundantes en resposta ao influxo de calcio.Liu et al.Demostrouse que a glicosa media o fluxo de calcio a través da canle TRPC6 das plaquetas [6].A nosa hipótese é que a glicosa induce a relaxación dos enredos dos microtúbulos, o que leva a un aumento da sensibilización e/ou activación plaquetaria e MPV.Non obstante, a xulgar polos nosos resultados, esta é só unha parte da historia.Nas nosas probas, ningunha concentración inferior a D25W provocou un aumento do MPV.Dado que non probamos a exposición a concentracións de glicosa entre o 12,5% e o 25%, os nosos resultados da fase 1 suxiren que pode haber un limiar neste rango de concentracións de glicosa que leva a un aumento do MPV.Probas posteriores nas etapas 3 e 4 mostraron que o 20-25% de glicosa parece ser o limiar para iso, pero aínda non está claro por que.
Tamén observamos unha diminución de ~ 9% no MPV despois da centrifugación.Non está claro se esta diminución do MPV se debe a plaquetas máis grandes e densas atrapadas na capa de glóbulos rojos da centrífuga.Esta observación pode ser importante para os médicos xa que pode implicar que as plaquetas PRP son un subconxunto máis pequeno e menos denso de plaquetas WB.
Nun estudo anterior, demostramos que a preparación de PRP por métodos manuais é barata [8].Se a glicosa sensibiliza as plaquetas do tecido ou o PRP, facéndoas máis susceptibles á activación, ou se o PRP se produce con propiedades de lisado parcial, isto pode mellorar a rexeneración e reducir a necesidade de terapia.Polo tanto, a combinación de PRP e glicosa altamente concentrada pode ser máis rendible que o PRP ou a glicosa só.
O noso estudo ten varias deficiencias.En primeiro lugar, usamos PRP obtido de varios métodos diferentes.Isto pode levar a resultados conflitivos.En segundo lugar, non puidemos realizar unha análise bioquímica de ningunha das nosas mostras para determinar con máis precisión se se produciu a activación plaquetaria.Gustaríanos medir a P-selectina, o factor plaquetario 4, os agregados plaquetarios monocíticos ou outros marcadores de activación plaquetaria para comprender mellor o grao ou a presenza da desgranulación do gránulo alfa, pero isto está fóra do alcance deste estudo.En terceiro lugar, non puidemos confirmar mediante microscopía electrónica ou outros métodos que o aumento do MPV nas plaquetas expostas á glicosa fose debido ao efecto sobre os enredos dos microtúbulos.
As mesturas de WB ou PRP cun 25% de glicosa aumentaron o MPV, indicando o inicio da activación plaquetaria, aínda que este estudo non demostrou a progresión da agregación ou desgranulación.A mestura hipertónica de glicosa provocou a perda de plaquetas, posiblemente representando un efecto lítico.A activación ou lise parcial das plaquetas pode provocar a rexeneración do tecido despois da inxección de plaquetas.Non está claro que consecuencias clínicas poden levar a estes cambios.Estudos posteriores demostraron medicións máis precisas de activación ou lise e avaliaron os diferentes efectos clínicos das mesturas hipertónicas de glicosa con WB ou PRP.
A terapia proliferativa de glicosa é unha terapia rexenerativa sinxela e barata que se está a expandir rapidamente e apoia a investigación clínica.Este estudo suxire un mecanismo fisiolóxico que, de confirmarse, podería axudarnos a comprender parte do mecanismo rexenerativo da terapia proliferativa.
Informática Biomédica e Saúde na Universidade de Missouri, Facultade de Medicina de Kansas City, Kansas City, EUA
Suxeitos humanos: todos os participantes neste estudo deron ou non o seu consentimento.A Sociedade Internacional de Medicina Celular emitiu a aprobación ICMS-2017-003.O seguinte protocolo foi aprobado para o seu uso posterior polo Comité de Revisión Institucional da Sociedade Internacional de Medicina Celular: Título: Cálculo do rendemento de fármacos plasmáticos ricos en plaquetas baseado no reconto de plaquetas CBC de referencia.Suxeitos animais: todos os autores confirmaron que ningún animal ou tecido estivo implicado neste estudo.Conflitos de intereses: de acordo co formulario de divulgación uniforme do ICMJE, todos os autores declaran o seguinte: Información de pago/servizo: Todos os autores declaran que non recibiron apoio financeiro de ningunha organización para o traballo enviado.Relacións financeiras: Todos os autores declaran que non teñen actualmente nin nos últimos tres anos relación financeira con ningunha organización que poida estar interesada no traballo presentado.Outras relacións: Todos os autores declaran que non existen outras relacións ou actividades que poidan afectar o traballo presentado.
Harrison TE, Bowler J, Reeves K et al.(17 de maio de 2022) O efecto da glicosa no reconto e volume de plaquetas: implicacións para a medicina rexenerativa.Cura 14 (5): e25081.doi:10.7759/cureus.25081
© Copyright 2022 Harrison et al.Este é un artigo de acceso aberto distribuído baixo os termos da licenza Creative Commons Attribution CC-BY 4.0.Permítese o uso, distribución e reprodución ilimitados en calquera medio, sempre que se acredite o autor e a fonte orixinais.