કેટલાક LC મુશ્કેલીનિવારણ વિષયો ક્યારેય જૂના નથી હોતા, કારણ કે LC પ્રેક્ટિસમાં સમસ્યાઓ હોય છે, ભલે સમય જતાં ઇન્સ્ટ્રુમેન્ટ ટેકનોલોજીમાં સુધારો થાય છે. LC સિસ્ટમમાં સમસ્યાઓ ઊભી થવાની અને ખરાબ પીક આકારમાં સમાપ્ત થવાની ઘણી રીતો છે. જ્યારે પીક આકાર સંબંધિત સમસ્યાઓ ઊભી થાય છે, ત્યારે આ પરિણામો માટેના સંભવિત કારણોની ટૂંકી સૂચિ અમારા મુશ્કેલીનિવારણ અનુભવને સરળ બનાવવામાં મદદ કરે છે.
આ “LC મુશ્કેલીનિવારણ” કોલમ લખવાની અને દર મહિને વિષયો વિશે વિચારવાની મજા આવી છે, કારણ કે કેટલાક વિષયો ક્યારેય શૈલીની બહાર જતા નથી. જ્યારે ક્રોમેટોગ્રાફી સંશોધનના ક્ષેત્રમાં કેટલાક વિષયો અથવા વિચારો અપ્રચલિત થઈ જાય છે કારણ કે તેમને નવા અને સારા વિચારો દ્વારા બદલવામાં આવે છે, મુશ્કેલીનિવારણના ક્ષેત્રમાં, કારણ કે પહેલો મુશ્કેલીનિવારણ લેખ આ જર્નલમાં (તે સમયે LC જર્નલ) 1983 (1) માં પ્રકાશિત થયો હતો. છેલ્લા કેટલાક વર્ષોમાં, મેં પ્રવાહી ક્રોમેટોગ્રાફી (LC) ને અસર કરતા સમકાલીન વલણો પર ઘણા LC મુશ્કેલીનિવારણ વિભાગો પર ધ્યાન કેન્દ્રિત કર્યું છે (ઉદાહરણ તરીકે, રીટેન્શન પર દબાણની અસરની અમારી સમજણની સંબંધિત સરખામણી [2] નવી પ્રગતિઓ) LC પરિણામોનું અમારું અર્થઘટન અને આધુનિક LC સાધનો સાથે કેવી રીતે મુશ્કેલીનિવારણ કરવું. આ મહિનાના હપ્તામાં, હું મારી શ્રેણી (3) ચાલુ રાખી રહ્યો છું, જે ડિસેમ્બર 2021 માં શરૂ થઈ હતી, જે LC મુશ્કેલીનિવારણના કેટલાક “જીવન અને મૃત્યુ” વિષયો પર ધ્યાન કેન્દ્રિત કરતી હતી - કોઈપણ મુશ્કેલીનિવારણ માટે ઉત્તમ તત્વો આવશ્યક છે, ભલે આપણે જે સિસ્ટમનો ઉપયોગ કરી રહ્યા છીએ તેની ઉંમર ગમે તે હોય. આ શ્રેણીનો મુખ્ય વિષય છે ઘણી પ્રયોગશાળાઓમાં લટકાવેલા LCGC ના પ્રખ્યાત “LC મુશ્કેલીનિવારણ માર્ગદર્શિકા” વોલ ચાર્ટ (4) સાથે ખૂબ જ સુસંગત. આ શ્રેણીના ત્રીજા ભાગ માટે, મેં પીક આકાર અથવા પીક લાક્ષણિકતાઓ સંબંધિત મુદ્દાઓ પર ધ્યાન કેન્દ્રિત કરવાનું પસંદ કર્યું. અદ્ભુત રીતે, વોલ ચાર્ટ નબળા પીક આકારના 44 વિવિધ સંભવિત કારણોની યાદી આપે છે! આપણે આ બધા મુદ્દાઓને એક લેખમાં વિગતવાર ધ્યાનમાં લઈ શકતા નથી, તેથી વિષય પરના આ પ્રથમ હપ્તામાં, હું કેટલીક સમસ્યાઓ પર ધ્યાન કેન્દ્રિત કરીશ જે હું મોટાભાગે જોઉં છું. મને આશા છે કે યુવાન અને વૃદ્ધ LC વપરાશકર્તાઓને આ મહત્વપૂર્ણ વિષય પર કેટલીક મદદરૂપ ટિપ્સ અને રીમાઇન્ડર્સ મળશે.
મુશ્કેલીનિવારણના પ્રશ્નોના જવાબ હું "કંઈપણ શક્ય છે" સાથે વધુને વધુ આપું છું. જ્યારે અવલોકનોનું અર્થઘટન કરવું મુશ્કેલ હોય ત્યારે આ પ્રતિભાવ સરળ લાગે છે, પરંતુ મને તે ઘણીવાર યોગ્ય લાગે છે. નબળા શિખર આકારના ઘણા સંભવિત કારણો સાથે, સમસ્યા શું હોઈ શકે છે તે ધ્યાનમાં લેતી વખતે ખુલ્લું મન રાખવું મહત્વપૂર્ણ છે, અને સંભવિત કારણોને પ્રાથમિકતા આપવા માટે સક્ષમ બનવું, અમારા મુશ્કેલીનિવારણ પ્રયાસો શરૂ કરવા માટે, તે સૌથી સામાન્ય શક્યતાઓ પર ધ્યાન કેન્દ્રિત કરવું, આ મુદ્દો ખૂબ જ મહત્વપૂર્ણ છે. શક્ય છે.
કોઈપણ મુશ્કેલીનિવારણ કવાયતમાં એક મુખ્ય પગલું - પરંતુ જે મને લાગે છે કે ઓછું આંકવામાં આવે છે - તે ઓળખવું છે કે એક સમસ્યા છે જેને ઉકેલવાની જરૂર છે. સમસ્યા છે તે ઓળખવાનો અર્થ એ છે કે સાધન સાથે શું થાય છે તે આપણી અપેક્ષાઓથી અલગ છે, જે સિદ્ધાંત, પ્રયોગમૂલક જ્ઞાન અને અનુભવ દ્વારા આકાર પામે છે (5). અહીં ઉલ્લેખિત "શિખર આકાર" વાસ્તવમાં ફક્ત શિખરના આકાર (સપ્રમાણ, અસમપ્રમાણ, સરળ, ફ્લફી, લીડિંગ એજ, ટેઇલિંગ, વગેરે) નો જ નહીં, પણ પહોળાઈનો પણ ઉલ્લેખ કરે છે. વાસ્તવિક શિખર આકાર માટેની અમારી અપેક્ષાઓ સરળ છે. સિદ્ધાંત (6) પાઠ્યપુસ્તકની અપેક્ષાને સારી રીતે સમર્થન આપે છે કે, મોટાભાગના કિસ્સાઓમાં, ક્રોમેટોગ્રાફિક શિખરો સપ્રમાણ હોવા જોઈએ અને ગૌસીયન વિતરણના આકારને અનુરૂપ હોવા જોઈએ, જેમ કે આકૃતિ 1a માં બતાવ્યા પ્રમાણે. શિખર પહોળાઈઓથી આપણે શું અપેક્ષા રાખીએ છીએ તે વધુ જટિલ મુદ્દો છે, અને આપણે ભવિષ્યના લેખમાં આ વિષય પર ચર્ચા કરીશું. આકૃતિ 1 માં અન્ય શિખર આકાર કેટલીક અન્ય શક્યતાઓ દર્શાવે છે જે અવલોકન કરી શકાય છે - બીજા શબ્દોમાં કહીએ તો, કેટલીક રીતો કેવી રીતે વસ્તુઓ ખોટી થઈ શકે છે. આ હપ્તાના બાકીના ભાગમાં, આપણે કેટલીક ચોક્કસ આ પ્રકારના આકાર તરફ દોરી શકે તેવી પરિસ્થિતિઓના ઉદાહરણો.
કેટલીકવાર ક્રોમેટોગ્રામમાં શિખરો બિલકુલ જોવા મળતા નથી જ્યાં તેમને એલ્યુટ કરવાની અપેક્ષા રાખવામાં આવે છે. ઉપરોક્ત દિવાલ ચાર્ટ સૂચવે છે કે શિખરની ગેરહાજરી (ધારી લઈએ કે નમૂનામાં ખરેખર એકાગ્રતા પર લક્ષ્ય વિશ્લેષક છે જે ડિટેક્ટર પ્રતિભાવને અવાજની ઉપર જોવા માટે પૂરતો બનાવવો જોઈએ) સામાન્ય રીતે કોઈ સાધન સમસ્યા અથવા ખોટી મોબાઇલ ફેઝ પરિસ્થિતિઓ (જો બિલકુલ જોવામાં આવે તો) સાથે સંબંધિત હોય છે. શિખરો, સામાન્ય રીતે ખૂબ "નબળા"). આ શ્રેણીમાં સંભવિત સમસ્યાઓ અને ઉકેલોની ટૂંકી સૂચિ કોષ્ટક I માં મળી શકે છે.
ઉપર જણાવ્યા મુજબ, ધ્યાન આપતા પહેલા અને તેને ઠીક કરવાનો પ્રયાસ કરતા પહેલા કેટલી શિખર પહોળાઈ સહન કરવી જોઈએ તે પ્રશ્ન એક જટિલ વિષય છે જેની ચર્ચા હું ભવિષ્યના લેખમાં કરીશ. મારો અનુભવ એ છે કે નોંધપાત્ર શિખર પહોળાઈ ઘણીવાર શિખર આકારમાં નોંધપાત્ર ફેરફાર સાથે હોય છે, અને શિખર પૂંછડી પ્રી-શિખર અથવા વિભાજન કરતાં વધુ સામાન્ય છે. જો કે, નામાંકિત સપ્રમાણ શિખરો પણ પહોળા થાય છે, જે કેટલાક અલગ અલગ કારણોસર થઈ શકે છે:
આ દરેક મુદ્દાઓની ચર્ચા ટ્રબલશૂટિંગ એલસીના અગાઉના અંકોમાં કરવામાં આવી છે, અને આ વિષયોમાં રસ ધરાવતા વાચકો આ મુદ્દાઓના મૂળ કારણો અને સંભવિત ઉકેલો વિશે માહિતી માટે આ અગાઉના લેખોનો સંદર્ભ લઈ શકે છે. વધુ વિગતો.
પીક ટેઇલિંગ, પીક ફ્રન્ટિંગ અને સ્પ્લિટિંગ એ બધું રાસાયણિક અથવા ભૌતિક ઘટનાને કારણે થઈ શકે છે, અને આ સમસ્યાઓના સંભવિત ઉકેલોની સૂચિ વ્યાપકપણે બદલાય છે, જે આપણે રાસાયણિક અથવા ભૌતિક સમસ્યાનો સામનો કરી રહ્યા છીએ તેના પર આધાર રાખે છે. ઘણીવાર, ક્રોમેટોગ્રામમાં વિવિધ શિખરોની તુલના કરીને, તમે મહત્વપૂર્ણ સંકેતો શોધી શકો છો કે ગુનેગાર કોણ છે. જો ક્રોમેટોગ્રામમાં બધા શિખરો સમાન આકાર દર્શાવે છે, તો કારણ મોટે ભાગે ભૌતિક નથી. જો ફક્ત એક અથવા થોડા શિખરો પ્રભાવિત થાય છે, પરંતુ બાકીના બરાબર દેખાય છે, તો કારણ મોટે ભાગે રાસાયણિક છે.
પીક ટેઇલિંગના રાસાયણિક કારણો એટલા જટિલ છે કે અહીં ટૂંકમાં ચર્ચા કરી શકાતી નથી. રસ ધરાવતા વાચકને વધુ ઊંડાણપૂર્વક ચર્ચા માટે "LC ટ્રબલશૂટિંગ" ના તાજેતરના અંકનો સંદર્ભ આપવામાં આવે છે (10). જો કે, એક સરળ વસ્તુ એ છે કે ઇન્જેક્ટેડ એનાલિટના માસને ઘટાડવો અને જુઓ કે પીક આકાર સુધરે છે કે નહીં. જો એમ હોય, તો આ એક સારો સંકેત છે કે સમસ્યા "માસ ઓવરલોડ" છે. આ કિસ્સામાં, પદ્ધતિ નાના વિશ્લેષક માસને ઇન્જેક્ટ કરવા સુધી મર્યાદિત હોવી જોઈએ, અથવા ક્રોમેટોગ્રાફિક પરિસ્થિતિઓ બદલવી જોઈએ જેથી મોટા માસ ઇન્જેક્ટેડ હોવા છતાં પણ સારા પીક આકાર મેળવી શકાય.
પીક ટેઇલિંગ માટે ઘણા સંભવિત ભૌતિક કારણો પણ છે. શક્યતાઓની વિગતવાર ચર્ચામાં રસ ધરાવતા વાચકોને "LC ટ્રબલશૂટિંગ" (11) ના તાજેતરના અંકનો સંદર્ભ આપવામાં આવે છે. પીક ટેઇલિંગના વધુ સામાન્ય ભૌતિક કારણોમાંનું એક ઇન્જેક્ટર અને ડિટેક્ટર (12) વચ્ચેના બિંદુ પર નબળું જોડાણ છે. થોડા અઠવાડિયા પહેલા મારી લેબમાં મેળવેલ આકૃતિ 1d માં એક આત્યંતિક ઉદાહરણ બતાવવામાં આવ્યું છે. આ કિસ્સામાં, અમે એક નવા ઇન્જેક્શન વાલ્વ સાથે એક સિસ્ટમ બનાવી જેનો અમે પહેલાં ઉપયોગ કર્યો ન હતો, અને સ્ટેનલેસ સ્ટીલ કેશિલરી પર મોલ્ડ કરવામાં આવેલા ફેરુલ સાથે એક નાનો વોલ્યુમ ઇન્જેક્શન લૂપ ઇન્સ્ટોલ કર્યો. કેટલાક પ્રારંભિક મુશ્કેલીનિવારણ પ્રયોગો પછી, અમને સમજાયું કે ઇન્જેક્શન વાલ્વ સ્ટેટરમાં પોર્ટ ડેપ્થ અમે ટેવાયેલા હતા તેના કરતા ઘણી ઊંડી હતી, જેના પરિણામે પોર્ટના તળિયે એક મોટો ડેડ વોલ્યુમ જોવા મળ્યો. ઇન્જેક્શન લૂપને બીજી ટ્યુબથી બદલીને આ સમસ્યા સરળતાથી ઉકેલી શકાય છે, અમે પોર્ટના તળિયે ડેડ વોલ્યુમને દૂર કરવા માટે ફેરુલને યોગ્ય સ્થિતિમાં ગોઠવી શકીએ છીએ.
આકૃતિ 1e માં બતાવેલ પીક ફ્રન્ટ્સ ભૌતિક અથવા રાસાયણિક સમસ્યાઓને કારણે પણ થઈ શકે છે. લીડિંગ એજનું એક સામાન્ય ભૌતિક કારણ એ છે કે કોલમનો કણ પથારી સારી રીતે ભરેલો નથી, અથવા સમય જતાં કણો ફરીથી ગોઠવાયા છે. આ ભૌતિક ઘટનાને કારણે પીક ટેઇલિંગની જેમ, આને ઠીક કરવાનો શ્રેષ્ઠ માર્ગ એ છે કે કોલમને બદલવો અને ચાલુ રાખવું. મૂળભૂત રીતે, રાસાયણિક મૂળ સાથે લીડિંગ એજ પીક આકાર ઘણીવાર આપણે જેને "નોન-રેખીય" રીટેન્શન પરિસ્થિતિઓ કહીએ છીએ તેમાંથી ઉદ્ભવે છે. આદર્શ (રેખીય) પરિસ્થિતિઓ હેઠળ, સ્થિર તબક્કા (તેથી, રીટેન્શન ફેક્ટર) દ્વારા જાળવી રાખવામાં આવેલા વિશ્લેષકનું પ્રમાણ સ્તંભમાં વિશ્લેષકની સાંદ્રતા સાથે રેખીય રીતે સંબંધિત છે. ક્રોમેટોગ્રાફિકલી, આનો અર્થ એ છે કે જેમ જેમ કોલમમાં ઇન્જેક્ટ કરાયેલ વિશ્લેષકનો સમૂહ વધે છે, તેમ તેમ શિખર ઊંચો થાય છે, પરંતુ પહોળો થતો નથી. જ્યારે રીટેન્શન વર્તણૂક બિન-રેખીય હોય છે ત્યારે આ સંબંધ તૂટી જાય છે, અને શિખરો માત્ર ઊંચા જ નહીં પણ વધુ માસ ઇન્જેક્ટ થતાં પહોળા પણ થાય છે. વધુમાં, નોન-રેખીય આકારો ક્રોમેટોગ્રાફિક શિખરોનો આકાર નક્કી કરે છે, જેના પરિણામે લીડિંગ અથવા ટ્રેલિંગ એજ થાય છે. માસ ઓવરલોડની જેમ જે પીકનું કારણ બને છે ટેઇલિંગ (10), નોનલાઇનર રીટેન્શનને કારણે પીક લીડિંગનું નિદાન ઇન્જેક્ટેડ એનાલિટ માસ ઘટાડીને પણ કરી શકાય છે. જો પીકનો આકાર સુધરે છે, તો પદ્ધતિમાં ફેરફાર કરવો આવશ્યક છે જેથી ઇન્જેક્શન ગુણવત્તા કરતાં વધુ ન થાય જે લીડિંગ એજનું કારણ બને છે, અથવા આ વર્તણૂકને ઘટાડવા માટે ક્રોમેટોગ્રાફિક પરિસ્થિતિઓ બદલવી આવશ્યક છે.
ક્યારેક આપણે "વિભાજીત" શિખર જેવું દેખાય છે તે અવલોકન કરીએ છીએ, જેમ કે આકૃતિ 1f માં બતાવ્યા પ્રમાણે. આ સમસ્યાને ઉકેલવા માટેનું પ્રથમ પગલું એ નક્કી કરવાનું છે કે શું શિખર આકાર આંશિક સહ-ઉત્સર્જન (એટલે ​​\u200b\u200bકે, બે અલગ પરંતુ નજીકથી ઉત્સર્જન કરતા સંયોજનોની હાજરી) ને કારણે છે. જો ખરેખર બે અલગ અલગ વિશ્લેષકો એકબીજાની નજીક ઉત્સર્જન કરતા હોય, તો તે તેમના રિઝોલ્યુશનને સુધારવાની બાબત છે (ઉદાહરણ તરીકે, પસંદગી, રીટેન્શન અથવા પ્લેટ ગણતરી વધારીને), અને દેખીતી "વિભાજીત" શિખરો ભૌતિક સાથે સંબંધિત છે પ્રદર્શનનો સ્તંભ સાથે કોઈ સંબંધ નથી. ઘણીવાર, આ નિર્ણયનો સૌથી મહત્વપૂર્ણ સંકેત એ છે કે ક્રોમેટોગ્રામમાં બધા શિખરો વિભાજીત આકાર દર્શાવે છે, અથવા ફક્ત એક કે બે. જો તે ફક્ત એક કે બે હોય, તો તે કદાચ સહ-ઉત્સર્જનનો મુદ્દો છે; જો બધા શિખરો વિભાજીત હોય, તો તે કદાચ ભૌતિક સમસ્યા છે, મોટે ભાગે સ્તંભ સાથે સંબંધિત છે.
સ્તંભના ભૌતિક ગુણધર્મો સાથે સંબંધિત વિભાજીત શિખરો સામાન્ય રીતે આંશિક રીતે અવરોધિત ઇનલેટ અથવા આઉટલેટ ફ્રિટ્સ, અથવા સ્તંભમાં કણોના પુનર્ગઠનને કારણે હોય છે, જે અન્ય પ્રદેશોમાં (11) કોલમ ચેનલ રચનાના ચોક્કસ વિસ્તારોમાં મોબાઇલ ફેઝ કરતાં મોબાઇલ ફેઝને વધુ ઝડપથી વહેવા દે છે. આંશિક રીતે ભરાયેલા ફ્રિટને ક્યારેક કોલમ દ્વારા પ્રવાહને ઉલટાવીને સાફ કરી શકાય છે; જો કે, મારા અનુભવમાં, આ સામાન્ય રીતે લાંબા ગાળાના ઉકેલને બદલે ટૂંકા ગાળાનો ઉકેલ છે. જો કણો કોલમની અંદર ફરીથી જોડાય છે તો આધુનિક સ્તંભો સાથે આ ઘણીવાર ઘાતક હોય છે. આ બિંદુએ, સ્તંભને બદલવો અને ચાલુ રાખવું શ્રેષ્ઠ છે.
આકૃતિ 1g માં ટોચ, મારી પોતાની પ્રયોગશાળામાં તાજેતરના ઉદાહરણમાંથી પણ, સામાન્ય રીતે સૂચવે છે કે સિગ્નલ એટલું ઊંચું છે કે તે પ્રતિભાવ શ્રેણીના ઉચ્ચતમ છેડા સુધી પહોંચી ગયું છે. ઓપ્ટિકલ શોષક ડિટેક્ટર્સ (આ કિસ્સામાં યુવી-વિઝ), જ્યારે વિશ્લેષક સાંદ્રતા ખૂબ ઊંચી હોય છે, ત્યારે વિશ્લેષક ડિટેક્ટર ફ્લો સેલમાંથી પસાર થતા મોટાભાગના પ્રકાશને શોષી લે છે, જેનાથી ખૂબ જ ઓછો પ્રકાશ શોધી શકાય છે. આ પરિસ્થિતિઓમાં, ફોટોડિટેક્ટરમાંથી વિદ્યુત સિગ્નલ અવાજના વિવિધ સ્ત્રોતો, જેમ કે છૂટાછવાયા પ્રકાશ અને "ડાર્ક કરંટ" દ્વારા ભારે પ્રભાવિત થાય છે, જે સિગ્નલને દેખાવમાં ખૂબ જ "અસ્પષ્ટ" બનાવે છે અને વિશ્લેષક સાંદ્રતાથી સ્વતંત્ર બનાવે છે. જ્યારે આવું થાય છે, ત્યારે સમસ્યા ઘણીવાર વિશ્લેષકના ઇન્જેક્શન વોલ્યુમ ઘટાડીને - ઇન્જેક્શન વોલ્યુમ ઘટાડીને, નમૂનાને પાતળું કરીને, અથવા બંને દ્વારા સરળતાથી ઉકેલી શકાય છે.
ક્રોમેટોગ્રાફી સ્કૂલમાં, આપણે નમૂનામાં વિશ્લેષણાત્મક સાંદ્રતાના સૂચક તરીકે ડિટેક્ટર સિગ્નલ (એટલે ​​કે, ક્રોમેટોગ્રામમાં y-અક્ષ) નો ઉપયોગ કરીએ છીએ. તેથી શૂન્યથી નીચે સિગ્નલ સાથે ક્રોમેટોગ્રામ જોવું વિચિત્ર લાગે છે, કારણ કે સરળ અર્થઘટન એ છે કે આ નકારાત્મક વિશ્લેષણાત્મક સાંદ્રતા સૂચવે છે - જે અલબત્ત ભૌતિક રીતે શક્ય નથી. મારા અનુભવમાં, ઓપ્ટિકલ શોષક ડિટેક્ટર (દા.ત., UV-vis) નો ઉપયોગ કરતી વખતે નકારાત્મક શિખરો મોટાભાગે જોવા મળે છે.
આ કિસ્સામાં, નકારાત્મક શિખરનો અર્થ એ છે કે સ્તંભમાંથી નીકળતા પરમાણુઓ શિખર પહેલા અને પછી તરત જ મોબાઇલ તબક્કા કરતાં ઓછો પ્રકાશ શોષી લે છે. ઉદાહરણ તરીકે, પ્રમાણમાં ઓછી શોધ તરંગલંબાઇ (<230 nm) અને આ તરંગલંબાઇ પર મોટાભાગના પ્રકાશને શોષી લેનારા મોબાઇલ તબક્કાના ઉમેરણોનો ઉપયોગ કરતી વખતે આ થઈ શકે છે. આવા ઉમેરણો મિથેનોલ જેવા મોબાઇલ તબક્કાના દ્રાવક ઘટકો અથવા એસિટેટ અથવા ફોર્મેટ જેવા બફર ઘટકો હોઈ શકે છે. ખરેખર કેલિબ્રેશન વળાંક તૈયાર કરવા અને સચોટ જથ્થાત્મક માહિતી મેળવવા માટે નકારાત્મક શિખરોનો ઉપયોગ કરી શકાય છે, તેથી તેમને ટાળવાનું કોઈ મૂળભૂત કારણ નથી (આ પદ્ધતિને ક્યારેક "પરોક્ષ યુવી શોધ" તરીકે ઓળખવામાં આવે છે) (13). જો કે, જો આપણે ખરેખર નકારાત્મક શિખરોને સંપૂર્ણપણે ટાળવા માંગતા હોઈએ, તો શોષક શોધના કિસ્સામાં, શ્રેષ્ઠ ઉકેલ એ છે કે અલગ શોધ તરંગલંબાઇનો ઉપયોગ કરવો જેથી વિશ્લેષક મોબાઇલ તબક્કા કરતાં વધુ શોષી લે, અથવા મોબાઇલ તબક્કાની રચનામાં ફેરફાર કરવો જેથી તેઓ વિશ્લેષકો કરતાં ઓછો પ્રકાશ શોષી લે.
જ્યારે નમૂનામાં વિશ્લેષક સિવાયના ઘટકો, જેમ કે દ્રાવક મેટ્રિક્સ, નો રીફ્રેક્ટિવ ઇન્ડેક્સ મોબાઇલ ફેઝના રીફ્રેક્ટિવ ઇન્ડેક્સથી અલગ હોય છે, ત્યારે રીફ્રેક્ટિવ ઇન્ડેક્સ (RI) શોધનો ઉપયોગ કરતી વખતે નકારાત્મક શિખરો પણ દેખાઈ શકે છે. આ UV-vis શોધ સાથે પણ થાય છે, પરંતુ આ અસર RI શોધની તુલનામાં ઓછી થવાનું વલણ ધરાવે છે. બંને કિસ્સાઓમાં, નમૂના મેટ્રિક્સની રચનાને મોબાઇલ ફેઝ સાથે વધુ નજીકથી મેચ કરીને નકારાત્મક શિખરો ઘટાડી શકાય છે.
LC મુશ્કેલીનિવારણના મૂળભૂત વિષય પરના ભાગમાં, મેં એવી પરિસ્થિતિઓની ચર્ચા કરી જેમાં અવલોકન કરાયેલ ટોચનો આકાર અપેક્ષિત અથવા સામાન્ય ટોચના આકારથી અલગ પડે છે. આવી સમસ્યાઓનું અસરકારક મુશ્કેલીનિવારણ અપેક્ષિત ટોચના આકારોના જ્ઞાનથી શરૂ થાય છે (સિદ્ધાંત અથવા હાલની પદ્ધતિઓ સાથેના અગાઉના અનુભવ પર આધારિત), તેથી આ અપેક્ષાઓથી વિચલનો સ્પષ્ટ છે. ટોચના આકારની સમસ્યાઓમાં ઘણા જુદા જુદા સંભવિત કારણો હોય છે (ખૂબ પહોળા, ટેઇલિંગ, લીડિંગ એજ, વગેરે). આ હપ્તામાં, હું કેટલાક કારણોની વિગતવાર ચર્ચા કરું છું જે હું મોટાભાગે જોઉં છું. આ વિગતો જાણવાથી મુશ્કેલીનિવારણ શરૂ કરવા માટે એક સારું સ્થાન મળે છે, પરંતુ બધી શક્યતાઓને કેપ્ચર કરવામાં આવતી નથી. કારણો અને ઉકેલોની વધુ ઊંડાણપૂર્વકની સૂચિમાં રસ ધરાવતા વાચકો LCGC "LC મુશ્કેલીનિવારણ માર્ગદર્શિકા" વોલ ચાર્ટનો સંદર્ભ લઈ શકે છે.
(૪) LCGC “LC મુશ્કેલીનિવારણ માર્ગદર્શિકા” વોલ ચાર્ટ. https://www.chromatographyonline.com/view/troubleshooting-wallchart (૨૦૨૧).
(6) એ. ફેલિન્જર, ડેટા એનાલિસિસ એન્ડ સિગ્નલ પ્રોસેસિંગ ઇન ક્રોમેટોગ્રાફી (એલ્સેવિયર, ન્યૂ યોર્ક, એનવાય, 1998), પૃષ્ઠ 43-96.
(૮) વહાબ એમએફ, દાસગુપ્તા પીકે, કડજો એએફ અને આર્મસ્ટ્રોંગ ડીડબ્લ્યુ, એનલ.ચિમ.જર્નલ.રેવ. ૯૦૭, ૩૧–૪૪ (૨૦૧૬).https://doi.org/10.1016/j.aca.2015.11.043.