Nature.com ની મુલાકાત લેવા બદલ આભાર. તમે જે બ્રાઉઝર વર્ઝનનો ઉપયોગ કરી રહ્યા છો તેમાં મર્યાદિત CSS સપોર્ટ છે. શ્રેષ્ઠ અનુભવ માટે, અમે ભલામણ કરીએ છીએ કે તમે અપડેટેડ બ્રાઉઝરનો ઉપયોગ કરો (અથવા ઇન્ટરનેટ એક્સપ્લોરરમાં સુસંગતતા મોડને અક્ષમ કરો). તે દરમિયાન, સતત સપોર્ટ સુનિશ્ચિત કરવા માટે, અમે સાઇટને સ્ટાઇલ અને JavaScript વિના રેન્ડર કરીશું.
અનિયંત્રિત રક્તસ્ત્રાવ મૃત્યુના મુખ્ય કારણોમાંનું એક છે. ઝડપી હિમોસ્ટેસિસ પ્રાપ્ત કરવાથી યુદ્ધ, ટ્રાફિક અકસ્માતો અને મૃત્યુ ઘટાડવાની કામગીરી દરમિયાન પ્રાથમિક સારવાર તરીકે વ્યક્તિનું અસ્તિત્વ સુનિશ્ચિત થાય છે. નેનોપોરસ ફાઇબર-રિઇનફોર્સ્ડ કમ્પોઝિટ સ્કેફોલ્ડ (NFRCS) એક સરળ હિમોસ્ટેટિક ફિલ્મ-ફોર્મિંગ કમ્પોઝિશન (HFFC) માંથી સતત તબક્કા તરીકે મેળવવામાં આવે છે જે હિમોસ્ટેસિસને ટ્રિગર અને વધારી શકે છે. NFRCS નો વિકાસ ડ્રેગનફ્લાયની પાંખની ડિઝાઇન પર આધારિત છે. ડ્રેગનફ્લાયની પાંખની રચનામાં ટ્રાંસવર્સ અને રેખાંશિક પાંખોનો સમાવેશ થાય છે, અને પાંખના પટલ એકબીજા સાથે જોડાયેલા હોય છે જેથી માઇક્રોસ્ટ્રક્ચરની અખંડિતતા જાળવી શકાય. HFFC ફાઇબરની સપાટીને નેનોમીટર જાડાઈની ફિલ્મ સાથે સમાનરૂપે કોટ કરે છે અને રેન્ડમલી વિતરિત કપાસ જાડાઈ (Ct) (વિખેરાયેલ તબક્કો) ને નેનોપોરસ માળખું બનાવવા માટે જોડે છે. સતત અને વિખેરાયેલા તબક્કાઓનું સંયોજન વ્યાપારી રીતે ઉપલબ્ધ ઉત્પાદનોની તુલનામાં ઉત્પાદનની કિંમત દસ ગણી ઘટાડે છે. સંશોધિત NFRCS (ટેમ્પન અથવા કાંડા બેન્ડ) નો ઉપયોગ વિવિધ બાયોમેડિકલ એપ્લિકેશનોમાં થઈ શકે છે. ઇન વિવો અભ્યાસોએ તારણ કાઢ્યું છે કે વિકસિત Cp NFRCS એપ્લિકેશનના સ્થળે કોગ્યુલેશન પ્રક્રિયાને ઉત્તેજિત કરે છે અને વધારે છે. NFRCS તેના નેનોપોરસ માળખાને કારણે સૂક્ષ્મ પર્યાવરણને મોડ્યુલેટ કરી શકે છે અને સેલ્યુલર સ્તરે કાર્ય કરી શકે છે જેના પરિણામે એક્સિઝન ઘા મોડેલમાં ઘા વધુ સારી રીતે રૂઝાય છે.
યુદ્ધ, શસ્ત્રક્રિયા દરમિયાન અને કટોકટીની પરિસ્થિતિઓ દરમિયાન અનિયંત્રિત રક્તસ્ત્રાવ ઘાયલોના જીવન માટે ગંભીર ખતરો ઉભો કરી શકે છે1. આ પરિસ્થિતિઓ પેરિફેરલ વેસ્ક્યુલર પ્રતિકારમાં એકંદર વધારો તરફ દોરી જાય છે, જેના કારણે હેમોરહેજિક આઘાત થાય છે. શસ્ત્રક્રિયા દરમિયાન અને પછી રક્તસ્ત્રાવને નિયંત્રિત કરવા માટે યોગ્ય પગલાં સંભવિત રીતે જીવલેણ માનવામાં આવે છે2,3. મોટી વાહિનીઓને નુકસાનથી મોટા પ્રમાણમાં રક્ત નુકશાન થાય છે, જેના પરિણામે યુદ્ધમાં મૃત્યુદર ≤ 50% અને શસ્ત્રક્રિયા દરમિયાન 31% થાય છે1. મોટા પ્રમાણમાં રક્ત નુકશાન શરીરના જથ્થામાં ઘટાડો તરફ દોરી જાય છે, જે કાર્ડિયાક આઉટપુટ ઘટાડે છે. કુલ પેરિફેરલ વેસ્ક્યુલર પ્રતિકારમાં વધારો અને માઇક્રોસિરક્યુલેશનમાં પ્રગતિશીલ ક્ષતિ જીવન-સહાયક અંગોમાં હાયપોક્સિયા તરફ દોરી જાય છે. જો સ્થિતિ અસરકારક હસ્તક્ષેપ વિના ચાલુ રહે તો હેમોરહેજિક આંચકો થઈ શકે છે1,4,5. અન્ય ગૂંચવણોમાં હાયપોથર્મિયા અને મેટાબોલિક એસિડોસિસની પ્રગતિ, તેમજ કોગ્યુલેશન ડિસઓર્ડરનો સમાવેશ થાય છે જે કોગ્યુલેશન પ્રક્રિયાને અવરોધે છે. ગંભીર હેમોરહેજિક આંચકો મૃત્યુના ઊંચા જોખમ સાથે સંકળાયેલ છે6,7,8. ગ્રેડ III (પ્રગતિશીલ) આઘાતમાં, શસ્ત્રક્રિયા દરમિયાન અને શસ્ત્રક્રિયા પછીના રોગ અને મૃત્યુદર દરમિયાન દર્દીના અસ્તિત્વ માટે રક્ત તબદિલી જરૂરી છે. ઉપરોક્ત તમામ જીવલેણ પરિસ્થિતિઓને દૂર કરવા માટે, અમે નેનોપોરસ ફાઇબર-રિઇનફોર્સ્ડ કમ્પોઝિટ સ્કેફોલ્ડ (NFRCS) વિકસાવ્યું છે જે પાણીમાં દ્રાવ્ય હેમોસ્ટેટિક પોલિમરના મિશ્રણનો ઉપયોગ કરીને ન્યૂનતમ પોલિમર સાંદ્રતા (0.5%) નો ઉપયોગ કરે છે.
ફાઇબર રિઇન્ફોર્સમેન્ટના ઉપયોગથી, ખર્ચ-અસરકારક ઉત્પાદનો વિકસાવી શકાય છે. રેન્ડમલી ગોઠવાયેલા રેસા ડ્રેગનફ્લાયની પાંખની રચના જેવા હોય છે, જે પાંખો પરના આડા અને ઊભા પટ્ટાઓ દ્વારા સંતુલિત હોય છે. પાંખની ત્રાંસી અને રેખાંશ નસો પાંખના પટલ સાથે સંપર્ક કરે છે (આકૃતિ 1). NFRCS માં વધુ સારી ભૌતિક અને યાંત્રિક શક્તિ સાથે સ્કેફોલ્ડ સિસ્ટમ તરીકે પ્રબલિત Ct હોય છે (આકૃતિ 1). પોષણક્ષમતા અને કારીગરીને કારણે, સર્જનો ઓપરેશન અને ડ્રેસિંગ દરમિયાન કપાસના થ્રેડ ગેજ (Ct) નો ઉપયોગ કરવાનું પસંદ કરે છે. તેથી, તેના બહુવિધ ફાયદાઓને ધ્યાનમાં લેતા, જેમાં 90% થી વધુ સ્ફટિકીય સેલ્યુલોઝ (હેમોસ્ટેટિક પ્રવૃત્તિ વધારવામાં ભાગ લે છે)નો સમાવેશ થાય છે, Ct નો ઉપયોગ NFRCS9,10 ના હાડપિંજર પ્રણાલી તરીકે કરવામાં આવ્યો હતો. તેથી, તેના બહુવિધ ફાયદાઓને ધ્યાનમાં લેતા, જેમાં 90% થી વધુ સ્ફટિકીય સેલ્યુલોઝ (હેમોસ્ટેટિક પ્રવૃત્તિ વધારવામાં ભાગ લે છે)નો સમાવેશ થાય છે, Ct નો ઉપયોગ NFRCS9,10 ના હાડપિંજર પ્રણાલી તરીકે કરવામાં આવ્યો હતો. Следовательно, учитывая его многочисленные преимущества, в том числе > 90% кристаллической целюлозы (участвует в гемостатической активности), Ct использовали в качестве скелетной системы NFRCS9,10. તેથી, તેના ઘણા ફાયદાઓને ધ્યાનમાં રાખીને, જેમાં 90% થી વધુ સ્ફટિકીય સેલ્યુલોઝ (વધતી હિમોસ્ટેટિક પ્રવૃત્તિમાં સામેલ)નો સમાવેશ થાય છે, Ct નો ઉપયોગ NFRCS સ્કેલેટલ સિસ્ટમ 9,10 તરીકે કરવામાં આવ્યો હતો.因此，考虑到它的多重益处，包括> 90%的骨架系统.因此,考虑到它的多重益处，包括> 90%તેથી, 90% થી વધુ સ્ફટિકીય સેલ્યુલોઝ (હેમોસ્ટેટિક પ્રવૃત્તિ વધારવામાં મદદ કરે છે) સહિત તેના ઘણા ફાયદાઓને ધ્યાનમાં રાખીને, Ct નો ઉપયોગ NFRCS9,10 માટે સ્કેફોલ્ડ તરીકે કરવામાં આવ્યો હતો.Ct ને ઉપરછલ્લી રીતે કોટેડ કરવામાં આવ્યું હતું (નેનો-જાડી ફિલ્મ રચના જોવા મળી હતી) અને તે હેમોસ્ટેટિક ફિલ્મ-ફોર્મિંગ કમ્પોઝિશન (HFFC) સાથે એકબીજા સાથે જોડાયેલું હતું. HFFC મેટ્રિજેલની જેમ કાર્ય કરે છે, રેન્ડમલી મૂકવામાં આવેલા Ct ને એકસાથે પકડી રાખે છે. વિકસિત ડિઝાઇન વિખરાયેલા તબક્કામાં તણાવ પ્રસારિત કરે છે (તંતુઓને મજબૂત બનાવે છે). ન્યૂનતમ પોલિમર સાંદ્રતાનો ઉપયોગ કરીને સારી યાંત્રિક શક્તિ સાથે નેનોપોરસ રચનાઓ મેળવવી મુશ્કેલ છે. વધુમાં, વિવિધ બાયોમેડિકલ એપ્લિકેશનો માટે વિવિધ મોલ્ડને કસ્ટમાઇઝ કરવું સરળ નથી.
આકૃતિ ડ્રેગનફ્લાયની પાંખની રચના (A) પર આધારિત NFRCS ડિઝાઇનનો આકૃતિ દર્શાવે છે. આ છબી ડ્રેગનફ્લાયની પાંખની રચના (પાંખની છેદતી અને રેખાંશ નસો એકબીજા સાથે જોડાયેલી છે) ની તુલનાત્મક સામ્યતા અને Cp NFRCS (B) નો ક્રોસ-સેક્શનલ ફોટોમાઇક્રોગ્રાફ દર્શાવે છે. NFRCS નું યોજનાકીય પ્રતિનિધિત્વ.
ઉપરોક્ત મર્યાદાઓને સંબોધવા માટે HFFC નો સતત તબક્કા તરીકે ઉપયોગ કરીને NFRC વિકસાવવામાં આવ્યા હતા. HFFC વિવિધ ફિલ્મ-રચના કરનારા હિમોસ્ટેટિક પોલિમરથી બનેલું છે જેમાં ચિટોસન (મુખ્ય હિમોસ્ટેટિક પોલિમર તરીકે) મિથાઈલસેલ્યુલોઝ (MC), હાઇડ્રોક્સીપ્રોપીલ મિથાઈલસેલ્યુલોઝ (HPMC 50 cp) અને પોલીવિનાઇલ આલ્કોહોલ (PVA)) (125 kDa) સપોર્ટ પોલિમર તરીકે છે જે થ્રોમ્બસ રચનાને પ્રોત્સાહન આપે છે. રચના. પોલીવિનાઇલપાયરોલીડીન K30 (PVP K30) ના ઉમેરાથી NFRCS ની ભેજ શોષણ ક્ષમતામાં સુધારો થયો. બોન્ડેડ પોલિમર મિશ્રણોમાં પોલિમર ક્રોસલિંકિંગને સુધારવા માટે પોલિઇથિલિન ગ્લાયકોલ 400 (PEG 400) ઉમેરવામાં આવ્યું હતું. ત્રણ અલગ અલગ HFFC હેમોસ્ટેટિક રચનાઓ (Cm HFFC, Ch HFFC અને Cp HFFC), એટલે કે MC (Cm) સાથે ચિટોસન, HPMC (Ch) સાથે ચિટોસન, અને PVA (Cp) સાથે ચિટોસન, Ct પર લાગુ કરવામાં આવ્યા હતા. વિવિધ ઇન વિટ્રો અને ઇન વિવો લાક્ષણિકતા અભ્યાસોએ NFRCS ની હિમોસ્ટેટિક અને ઘા હીલિંગ પ્રવૃત્તિની પુષ્ટિ કરી છે. NFRCS દ્વારા ઓફર કરવામાં આવતી સંયુક્ત સામગ્રીનો ઉપયોગ ચોક્કસ જરૂરિયાતોને પૂર્ણ કરવા માટે વિવિધ સ્વરૂપોના સ્કેફોલ્ડિંગને કસ્ટમાઇઝ કરવા માટે કરી શકાય છે.
વધુમાં, NFRCS ને પાટો અથવા રોલ તરીકે બદલી શકાય છે જેથી નીચલા હાથપગ અને શરીરના અન્ય ભાગોના સમગ્ર ઇજા વિસ્તારને આવરી શકાય. ખાસ કરીને લડાઇ અંગોની ઇજાઓ માટે, ડિઝાઇન કરેલી NFRCS ડિઝાઇનને અડધા હાથ અથવા સંપૂર્ણ પગમાં બદલી શકાય છે (પૂરક આકૃતિ S11). NFRCS ને ટીશ્યુ ગુંદર સાથે કાંડા પટ્ટીમાં બનાવી શકાય છે, જેનો ઉપયોગ ગંભીર આત્મહત્યા કાંડા ઇજાઓમાંથી રક્તસ્ત્રાવ રોકવા માટે થઈ શકે છે. અમારું મુખ્ય ધ્યેય શક્ય તેટલું ઓછું પોલિમર ધરાવતું NFRCS વિકસાવવાનું છે જે મોટી વસ્તી (ગરીબી રેખા નીચે) સુધી પહોંચાડી શકાય અને તેને પ્રાથમિક સારવાર કીટમાં મૂકી શકાય. ડિઝાઇનમાં સરળ, કાર્યક્ષમ અને આર્થિક, NFRCS સ્થાનિક સમુદાયોને લાભ આપે છે અને વૈશ્વિક અસર કરી શકે છે.
ચિટોસન (મોલેક્યુલર વજન 80 kDa) અને અમરાંથ મર્ક, ભારત પાસેથી ખરીદવામાં આવ્યા હતા. હાઇડ્રોક્સીપ્રોપીલ મિથાઈલસેલ્યુલોઝ 50 Cp, પોલિઈથિલિન ગ્લાયકોલ 400 અને મિથાઈલસેલ્યુલોઝ લોબા કેમીએ પ્રા. LLC, મુંબઈ પાસેથી ખરીદવામાં આવ્યા હતા. પોલિવિનાઇલ આલ્કોહોલ (મોલેક્યુલર વજન 125 kDa) (87-90% હાઇડ્રોલાઇઝ્ડ) નેશનલ કેમિકલ્સ, ગુજરાત પાસેથી ખરીદવામાં આવ્યો હતો. પોલિવિનાઇલપાયરોલીડીન K30 મોલીકેમ, મુંબઈ પાસેથી ખરીદવામાં આવ્યું હતું, જંતુરહિત સ્વેબ રામરાજુ સર્જરી કોટન મિલ્સ લિમિટેડ, તમિલનાડુ પાસેથી ખરીદવામાં આવ્યા હતા, જેમાં મિલી ક્યુ વોટર (ડાયરેક્ટ-ક્યુ3 વોટર પ્યુરિફિકેશન સિસ્ટમ, મર્ક, ભારત) વાહક તરીકે હતું.
NFRCS ને લ્યોફિલાઇઝેશન પદ્ધતિ 11,12 નો ઉપયોગ કરીને વિકસાવવામાં આવ્યું હતું. બધી HFFC રચનાઓ (કોષ્ટક 1) યાંત્રિક સ્ટિરરનો ઉપયોગ કરીને તૈયાર કરવામાં આવી હતી. યાંત્રિક સ્ટિરર પર 800 rpm પર સતત હલાવીને પાણીમાં 1% એસિટિક એસિડનો ઉપયોગ કરીને ચાઇટોસનનું 0.5% દ્રાવણ તૈયાર કરો. કોષ્ટક 1 માં દર્શાવેલ લોડેડ પોલિમરનું ચોક્કસ વજન ચાઇટોસન દ્રાવણમાં ઉમેરવામાં આવ્યું હતું અને સ્પષ્ટ પોલિમર દ્રાવણ પ્રાપ્ત થાય ત્યાં સુધી હલાવવામાં આવ્યું હતું. કોષ્ટક 1 માં દર્શાવેલ માત્રામાં પરિણામી મિશ્રણમાં PVP K30 અને PEG 400 ઉમેરવામાં આવ્યા હતા, અને સ્પષ્ટ ચીકણું પોલિમર દ્રાવણ પ્રાપ્ત થાય ત્યાં સુધી હલાવવામાં આવ્યું હતું. પોલિમર મિશ્રણમાંથી ફસાયેલા હવાના પરપોટા દૂર કરવા માટે પોલિમર દ્રાવણના પરિણામી સ્નાનને 60 મિનિટ માટે સોનિકેટ કરવામાં આવ્યું હતું. પૂરક આકૃતિ S1(b) માં બતાવ્યા પ્રમાણે, Ct ને 5 મિલી HFFC સાથે પૂરક 6-કુવા પ્લેટ (મોલ્ડ) ના દરેક કૂવામાં સમાનરૂપે વિતરિત કરવામાં આવ્યું હતું.
સીટી નેટવર્કમાં HFFC નું એકસરખું ભીનું થવું અને વિતરણ પ્રાપ્ત કરવા માટે છ-કુવા પ્લેટને 60 મિનિટ માટે સોનિકેટેડ કરવામાં આવી હતી. પછી છ-કુવા પ્લેટને -20°C પર 8-12 કલાક માટે સ્થિર કરો. NFRCS ના વિવિધ ફોર્મ્યુલેશન મેળવવા માટે ફ્રીઝ પ્લેટોને 48 કલાક માટે લ્યોફિલાઇઝ કરવામાં આવી હતી. આ જ પ્રક્રિયાનો ઉપયોગ વિવિધ આકારો અને રચનાઓ, જેમ કે ટેમ્પોન અથવા નળાકાર ટેમ્પોન, અથવા વિવિધ એપ્લિકેશનો માટે અન્ય કોઈપણ આકાર બનાવવા માટે થાય છે.
ચુંબકીય સ્ટિરરનો ઉપયોગ કરીને સચોટ વજનવાળા ચાઇટોસન (80 kDa) (3%) ને 1% એસિટિક એસિડમાં ઓગાળવામાં આવે છે. ચાઇટોસનના પરિણામી દ્રાવણમાં 1% PEG 400 ઉમેરવામાં આવ્યું અને 30 મિનિટ સુધી હલાવવામાં આવ્યું. પરિણામી દ્રાવણને ચોરસ અથવા લંબચોરસ પાત્રમાં રેડો અને -80°C પર 12 કલાક માટે સ્થિર કરો. છિદ્રાળુ Cs13 મેળવવા માટે ફ્રોઝન નમૂનાઓને 48 કલાક માટે લ્યોફિલાઇઝ કરવામાં આવ્યા.
અન્ય પોલિમર સાથે ચાઇટોસનની રાસાયણિક સુસંગતતાની પુષ્ટિ કરવા માટે ફોરિયર ટ્રાન્સફોર્મ ઇન્ફ્રારેડ સ્પેક્ટ્રોસ્કોપી (FTIR) (શિમાડઝુ 8400 s FTIR, ટોક્યો, જાપાન) નો ઉપયોગ કરીને વિકસિત NFRCS પર પ્રયોગો કરવામાં આવ્યા હતા. બધા પરીક્ષણ કરાયેલા નમૂનાઓના FTIR સ્પેક્ટ્રા (400 થી 4000 cm-1 સુધીની સ્પેક્ટ્રલ રેન્જની પહોળાઈ) 32 સ્કેન કરીને મેળવવામાં આવ્યા હતા.
બધા ફોર્મ્યુલેશન માટે રક્ત શોષણ દર (BAR) નું મૂલ્યાંકન ચેન એટ અલ. 16 દ્વારા વર્ણવેલ પદ્ધતિનો ઉપયોગ કરીને થોડા ફેરફારો સાથે કરવામાં આવ્યું હતું. બધા ફોર્મ્યુલેશનના વિકસિત NFRK ને 105°C તાપમાને વેક્યુમ ઓવનમાં રાતોરાત સૂકવવામાં આવ્યા હતા જેથી અવશેષ દ્રાવક દૂર થાય. 30 મિલિગ્રામ NFRCS (પ્રારંભિક નમૂનાનું વજન - W0) અને 30 મિલિગ્રામ Ct (પોઝિટિવ કંટ્રોલ) ને 3.8% સોડિયમ સાઇટ્રેટનું પ્રીમિક્સ ધરાવતી અલગ વાનગીઓમાં મૂકવામાં આવ્યા હતા. પૂર્વનિર્ધારિત સમય અંતરાલો પર, એટલે કે 5, 10, 20, 30, 40 અને 60 સેકન્ડ, NFRCS દૂર કરવામાં આવ્યા હતા અને 30 સેકન્ડ માટે Ct પર નમૂનાઓ મૂકીને તેમની સપાટીઓને અશોષિત રક્તથી સાફ કરવામાં આવી હતી. દરેક સમયે NFRCS 16 દ્વારા શોષિત રક્તનું અંતિમ વજન (W1) ધ્યાનમાં લેવામાં આવ્યું હતું. નીચેના સૂત્રનો ઉપયોગ કરીને BAR ટકાવારીની ગણતરી કરો:
વાંગ એટ અલ. 17 દ્વારા અહેવાલ મુજબ રક્ત ગંઠાઈ જવાનો સમય (BCT) નક્કી કરવામાં આવ્યો હતો. NFRCS ની હાજરીમાં આખા લોહી (ઉંદરના લોહીમાં 3.8% સોડિયમ સાઇટ્રેટ સાથે મિશ્રિત) ને ગંઠાઈ જવા માટે જરૂરી સમય પરીક્ષણ નમૂનાના BCT તરીકે ગણવામાં આવ્યો હતો. વિવિધ NFRCS ઘટકો (30 મિલિગ્રામ) 10 મિલી સ્ક્રુ કેપ શીશીઓમાં મૂકવામાં આવ્યા હતા અને 37°C પર ઉકાળવામાં આવ્યા હતા. શીશીમાં લોહી (0.5 મિલી) ઉમેરવામાં આવ્યું હતું અને રક્ત ગંઠાઈ જવાને સક્રિય કરવા માટે 0.2 M CaCl2 નું 0.3 મિલી ઉમેરવામાં આવ્યું હતું. અંતે, દર 15 સેકન્ડે (180° સુધી) શીશીને ઊંધી કરો જ્યાં સુધી એક મજબૂત ગંઠાઈ ન બને. નમૂનાનો BCT ફ્લિપ્સ વેલ્સ 17,18 ની સંખ્યા દ્વારા અંદાજવામાં આવે છે. BCT ના આધારે, NFRCS Cm, Ch અને Cp માંથી બે શ્રેષ્ઠ રચનાઓ વધુ લાક્ષણિકતા અભ્યાસ માટે પસંદ કરવામાં આવી હતી.
Li et al. 19 દ્વારા વર્ણવેલ પદ્ધતિનો અમલ કરીને Ch NFRCS અને Cp NFRCS રચનાઓનો BCT નક્કી કરવામાં આવ્યો હતો. 15 x 15 mm2 Ch NFRCS, Cp NFRCS, અને Cs (પોઝિટિવ કંટ્રોલ) ને અલગ પેટ્રી ડીશ (37 °C) માં મૂકો. રક્ત ગંઠાઈ જવાની પ્રક્રિયા શરૂ કરવા માટે 3.8% સોડિયમ સાઇટ્રેટ ધરાવતું લોહી 0.2 M CaCl2 સાથે 10:1 વોલ્યુમ રેશિયોમાં મિશ્રિત કરવામાં આવ્યું હતું. 0.2 M CaCl2 ઉંદરના લોહીના મિશ્રણનું 20 µl નમૂનાની સપાટી પર લાગુ કરવામાં આવ્યું હતું અને ખાલી પેટ્રી ડીશમાં મૂકવામાં આવ્યું હતું. નિયંત્રણ માટે Ct વિના ખાલી પેટ્રી ડીશમાં લોહી રેડવામાં આવ્યું હતું. 0, 3 અને 5 મિનિટના નિશ્ચિત અંતરાલે, ગંઠાઈને ખલેલ પહોંચાડ્યા વિના વાનગી ધરાવતા નમૂનામાં 10 મિલી ડીયોનાઇઝ્ડ (DI) પાણી ઉમેરીને ગંઠાઈ જવાનું બંધ કરો. બિન-જડિત લાલ રક્તકણો (લાલ રક્તકણો) ડીયોનાઇઝ્ડ પાણીની હાજરીમાં હેમોલિસિસમાંથી પસાર થાય છે અને હિમોગ્લોબિન મુક્ત કરે છે. UV-Vis સ્પેક્ટ્રોફોટોમીટરનો ઉપયોગ કરીને વિવિધ સમય બિંદુઓ (HA(t)) પર હિમોગ્લોબિન 540 nm (λmax હિમોગ્લોબિન) પર માપવામાં આવ્યું હતું. 10 મિલી ડીઆયોનાઇઝ્ડ પાણીમાં 20 µl રક્તના 0 મિનિટમાં હિમોગ્લોબિન (AH(0)) નું સંપૂર્ણ શોષણ સંદર્ભ ધોરણ તરીકે લેવામાં આવ્યું હતું. રક્તના સમાન બેચનો ઉપયોગ કરીને HA(t)/HA(0) ગુણોત્તરથી કોગ્યુલેટેડ રક્તના સંબંધિત હિમોગ્લોબિન શોષણ (RHA) ની ગણતરી કરવામાં આવી હતી.
ટેક્સચર વિશ્લેષક (ટેક્ષ્ચર પ્રો CT V1.3 બિલ્ડ 15, બ્રુકફિલ્ડ, યુએસએ) નો ઉપયોગ કરીને, ક્ષતિગ્રસ્ત પેશીઓ પર NFRK ના એડહેસિવ ગુણધર્મો નક્કી કરવામાં આવ્યા હતા. ડુક્કરની ચામડીની અંદર (ચરબીના સ્તર વિના) ખુલ્લા તળિયાવાળા નળાકાર વાનગીને દબાવો. ડુક્કરની ચામડી સાથે સંલગ્નતા બનાવવા માટે નમૂનાઓ (Ch NFRCS અને Cp NFRCS) કેન્યુલા દ્વારા નળાકાર મોલ્ડમાં લાગુ કરવામાં આવ્યા હતા. ઓરડાના તાપમાને (RT) (25° C.) 3 મિનિટના ઇન્ક્યુબેશન પછી, NFRCS એડહેસિવ શક્તિ 0.5 mm/sec ના સતત દરે રેકોર્ડ કરવામાં આવી હતી.
સર્જિકલ સીલંટનું મુખ્ય લક્ષણ લોહીના ગંઠાઈ જવાને વધારવાનું છે જ્યારે લોહીનું નુકશાન ઘટાડવું છે. NFRCS માં લોસલેસ કોગ્યુલેશનનું મૂલ્યાંકન પહેલા પ્રકાશિત પદ્ધતિનો ઉપયોગ કરીને થોડા ફેરફારો સાથે કરવામાં આવ્યું હતું 19. સેન્ટ્રીફ્યુજ ટ્યુબની એક બાજુ 8 × 5 mm2 છિદ્ર સાથે માઇક્રોસેન્ટ્રીફ્યુજ ટ્યુબ (2 મિલી) (આંતરિક વ્યાસ 10 મીમી) બનાવો (ખુલ્લા ઘાનું પ્રતિનિધિત્વ કરે છે). NFRCS નો ઉપયોગ ઓપનિંગ બંધ કરવા માટે થાય છે અને ટેપનો ઉપયોગ બાહ્ય કિનારીઓને સીલ કરવા માટે થાય છે. 3.8% સોડિયમ સાઇટ્રેટ પ્રીમિક્સ ધરાવતી માઇક્રોસેન્ટ્રીફ્યુજ ટ્યુબમાં 0.2 M CaCl2 નું 20 µl ઉમેરો. 10 મિનિટ પછી, માઇક્રોસેન્ટ્રીફ્યુજ ટ્યુબને વાનગીઓમાંથી દૂર કરવામાં આવી હતી અને NFRK (n = 3) માંથી લોહીના પ્રવાહને કારણે વાનગીઓના સમૂહમાં વધારો નક્કી કરવામાં આવ્યો હતો. રક્ત નુકશાન Ch NFRCS અને Cp NFRCS ની સરખામણી Cs સાથે કરવામાં આવી હતી.
મિશ્રા અને ચૌધરી દ્વારા વર્ણવેલ પદ્ધતિના આધારે NFRCS ની ભીની અખંડિતતા નક્કી કરવામાં આવી હતી21 જેમાં નાના ફેરફારો કરવામાં આવ્યા હતા. NFRCS ને 100 મિલી એર્લેનમેયર ફ્લાસ્કમાં 50 મિલી પાણી સાથે મૂકો અને ટોચ બનાવ્યા વિના 60 સેકન્ડ માટે ફેરવો. સંગ્રહના આધારે ભૌતિક અખંડિતતા માટે નમૂનાઓનું દ્રશ્ય નિરીક્ષણ અને પ્રાથમિકતા.
HFFC અને Ct ની બંધન શક્તિનો અભ્યાસ અગાઉ પ્રકાશિત પદ્ધતિઓનો ઉપયોગ કરીને નાના ફેરફારો સાથે કરવામાં આવ્યો હતો. સપાટીના આવરણની અખંડિતતાનું મૂલ્યાંકન NFRK ને milliQ પાણી (Ct) ની હાજરીમાં એકોસ્ટિક તરંગો (બાહ્ય ઉત્તેજના) ના સંપર્કમાં લાવીને કરવામાં આવ્યું હતું. વિકસિત NFRCS Ch NFRCS અને Cp NFRCS ને પાણીથી ભરેલા બીકરમાં મૂકવામાં આવ્યા હતા અને અનુક્રમે 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 અને 30 મિનિટ માટે સોનિકેટેડ કરવામાં આવ્યા હતા. સૂકાયા પછી, NFRCS ના પ્રારંભિક અને અંતિમ વજન વચ્ચેના ટકાવારી તફાવતનો ઉપયોગ સામગ્રીના ટકાવારી નુકશાન (HFFC) ની ગણતરી કરવા માટે કરવામાં આવ્યો હતો. ઇન વિટ્રો BCT એ સપાટીના પદાર્થોના બંધન શક્તિ અથવા નુકસાનને વધુ ટેકો આપ્યો. Ct સાથે HFFC બંધનની કાર્યક્ષમતા Ct22 ની સપાટી પર રક્ત કોગ્યુલેશન અને સ્થિતિસ્થાપક આવરણ પ્રદાન કરે છે.
વિકસિત NFRCS ની એકરૂપતા NFRCS ના રેન્ડમલી પસંદ કરેલા સામાન્ય સ્થાનોમાંથી લેવામાં આવેલા નમૂનાઓ (30 મિલિગ્રામ) ના BCT દ્વારા નક્કી કરવામાં આવી હતી. NFRCS પાલન નક્કી કરવા માટે અગાઉ ઉલ્લેખિત BCT પ્રક્રિયાને અનુસરો. પાંચેય નમૂનાઓ વચ્ચેની નિકટતા Ct મેશમાં સમાન સપાટી કવરેજ અને HFFC જમાવટની ખાતરી કરે છે.
નોમિનલ બ્લડ કોન્ટેક્ટ એરિયા (NBCA) અગાઉ જણાવેલા અહેવાલ મુજબ કેટલાક ફેરફારો સાથે નક્કી કરવામાં આવ્યો હતો. Ct, Ch NFRCS, Cp NFRCS અને Cs ની બે સપાટીઓ વચ્ચે 20 µl લોહીને ક્લેમ્પ કરીને લોહીને કોગ્યુલેટ કરો. 1 કલાક પછી, સ્ટેન્ટના બે ભાગોને અલગ કરવામાં આવ્યા અને ગંઠાવાના વિસ્તારને મેન્યુઅલી માપવામાં આવ્યો. ત્રણ પુનરાવર્તનોનું સરેરાશ મૂલ્ય NBCA NFRCS19 ગણવામાં આવ્યું.
બાહ્ય વાતાવરણમાંથી અથવા કોગ્યુલેશન શરૂ કરવા માટે જવાબદાર ઈજા સ્થળમાંથી પાણી શોષવા માટે NFRCS ની અસરકારકતાનું મૂલ્યાંકન કરવા માટે ડાયનેમિક વેપર સોર્પ્શન (DVS) વિશ્લેષણનો ઉપયોગ કરવામાં આવ્યો હતો. DVS ±0.1 µg ના માસ રિઝોલ્યુશન સાથે અતિ-સંવેદનશીલ સંતુલનનો ઉપયોગ કરીને ગુરુત્વાકર્ષણ રીતે નમૂનામાં વરાળ શોષણ અને નુકશાનનું મૂલ્યાંકન અથવા રેકોર્ડ કરે છે. ઇલેક્ટ્રોનિક માસ ફ્લો કંટ્રોલર દ્વારા સંતૃપ્ત અને શુષ્ક વાહક વાયુઓનું મિશ્રણ કરીને નમૂનાની આસપાસ આંશિક વરાળ દબાણ (સાપેક્ષ ભેજ) ઉત્પન્ન થાય છે. યુરોપિયન ફાર્માકોપીયા માર્ગદર્શિકા અનુસાર, નમૂનાઓ દ્વારા ભેજ શોષણની ટકાવારીના આધારે, નમૂનાઓને 4 શ્રેણીઓમાં વર્ગીકૃત કરવામાં આવ્યા હતા (0–0.012% w/w− નોન-હાઇગ્રોસ્કોપિક, 0.2–2% w/w સહેજ હાઇગ્રોસ્કોપિક, 2–15% મધ્યમ હાઇગ્રોસ્કોપિક, અને > 15% ખૂબ જ હાઇગ્રોસ્કોપિક)23. યુરોપિયન ફાર્માકોપીયા માર્ગદર્શિકા અનુસાર, નમૂનાઓ દ્વારા ભેજ શોષણની ટકાવારીના આધારે, નમૂનાઓને 4 શ્રેણીઓમાં વર્ગીકૃત કરવામાં આવ્યા હતા (0–0.012% w/w− નોન-હાઇગ્રોસ્કોપિક, 0.2–2% w/w સહેજ હાઇગ્રોસ્કોપિક, 2–15% મધ્યમ હાઇગ્રોસ્કોપિક, અને > 15% ખૂબ જ હાઇગ્રોસ્કોપિક)23.યુરોપિયન ફાર્માકોપીયાની ભલામણો અનુસાર, નમૂનાઓ દ્વારા ભેજ શોષણની ટકાવારીના આધારે, નમૂનાઓને 4 શ્રેણીઓમાં વિભાજિત કરવામાં આવ્યા હતા (0–0.012% w/w - બિન-હાઇગ્રોસ્કોપિક, 0.2–2% w/w સહેજ હાઇગ્રોસ્કોપિક, 2–પંદર%).% умеренно гигроскопичен и > 15% очень гигроскопичен)23. % મધ્યમ હાઇગ્રોસ્કોપિક અને > 15% ખૂબ જ હાઇગ્રોસ્કોપિક)23.根据欧洲药典指南，根据样品吸收水分的百分比，样品分为4 类（0-0.012% w/w- 202% w/w- 湞典指南w/w 轻微吸湿性、2-15% 适度吸湿，> 15% 非常吸湿）23.根据 欧洲 药典 指南 ， 根据 吸收 水分 的 百分比 样品 分为 分为 分为 分为 分为 类 %0-w.吸湿 性 、 、 、 0.2-2% W/w 轻微 、 2-15% 适度 吸湿 ，> 15 %非常吸湿） 23.યુરોપિયન ફાર્માકોપીયાની ભલામણો અનુસાર, નમૂના દ્વારા શોષાયેલી ભેજની ટકાવારી (વજન દ્વારા 0-0.012% - બિન-હાઇગ્રોસ્કોપિક, વજન દ્વારા 0.2-2% સહેજ હાઇગ્રોસ્કોપિક, વજન દ્વારા 2-15%) ના આધારે નમૂનાઓને 4 વર્ગોમાં વિભાજિત કરવામાં આવે છે.% умеренно гигроскопичен, > 15 % очень гигроскопичен) 23. % મધ્યમ હાઇગ્રોસ્કોપિક, > 15% ખૂબ જ હાઇગ્રોસ્કોપિક) 23.NFCS X NFCS અને TsN NFCS ની હાઇગ્રોસ્કોપિક કાર્યક્ષમતા DVS TA TGA Q5000 SA વિશ્લેષક પર નક્કી કરવામાં આવી હતી. આ પ્રક્રિયા દરમિયાન, રન ટાઇમ, સંબંધિત ભેજ (RH) અને 25°C24 પર રીઅલ-ટાઇમ નમૂના વજન મેળવવામાં આવ્યું હતું. ભેજનું પ્રમાણ નીચેના સમીકરણનો ઉપયોગ કરીને સચોટ NFRCS માસ વિશ્લેષણ દ્વારા ગણવામાં આવે છે:
MC એ NFRCS ભેજ છે. m1 – NSAIDs નું શુષ્ક વજન. m2 એ આપેલ RH પર રીઅલ-ટાઇમ NFRCS દળ છે.
25 °C તાપમાને 10 કલાક (< 7 × 10–3 Torr) માટે નમૂનાઓ ખાલી કર્યા પછી પ્રવાહી નાઇટ્રોજન સાથે નાઇટ્રોજન શોષણ પ્રયોગનો ઉપયોગ કરીને કુલ સપાટી વિસ્તારનો અંદાજ કાઢવામાં આવ્યો હતો. 25 °C તાપમાને 10 કલાક (< 7 × 10–3 Torr) માટે નમૂનાઓ ખાલી કર્યા પછી પ્રવાહી નાઇટ્રોજન સાથે નાઇટ્રોજન શોષણ પ્રયોગનો ઉપયોગ કરીને કુલ સપાટી વિસ્તારનો અંદાજ કાઢવામાં આવ્યો હતો. Общая площадь поверхности оценивалась с помощью эксперимента по адсорбции азота жидким азотом ° с посенивалась с помощью эксперимента течение 10 ч (< 7 × 10–3 Торр). નમૂનાઓને 25°C પર 10 કલાક (< 7 × 10–3 Torr) માટે ખાલી કર્યા પછી પ્રવાહી નાઇટ્રોજન સાથે નાઇટ્રોજન શોષણ પ્રયોગનો ઉપયોગ કરીને કુલ સપાટી વિસ્તારનો અંદાજ કાઢવામાં આવ્યો.25°C25°C પર Общая площадь поверхности оценивалась с использованием экспериментов по адсорбции азота жидким азотом посенивалзованием течение 10 часов при 25°C (< 7 × 10-3 торр). નમૂનાઓને 25°C (<7 x 10-3 ટોર) પર 10 કલાક માટે ખાલી કર્યા પછી, પ્રવાહી નાઇટ્રોજન સાથે નાઇટ્રોજન શોષણ પ્રયોગોનો ઉપયોગ કરીને કુલ સપાટી વિસ્તારનો અંદાજ કાઢવામાં આવ્યો હતો.કુલ સપાટી વિસ્તાર, છિદ્રોનું પ્રમાણ અને NFRCS છિદ્રનું કદ NOVA 1000e, ઑસ્ટ્રિયાના ક્વોન્ટાક્રોમ દ્વારા RS 232 સોફ્ટવેરનો ઉપયોગ કરીને નક્કી કરવામાં આવ્યું હતું.
આખા લોહીમાંથી 5% લાલ રક્તકણો (મંદ તરીકે ખારા) તૈયાર કરો. પછી HFFC (0.25 મિલી) નું એક અંશ 96-કુવાવાળી પ્લેટ અને 5% લાલ રક્તકણો (0.1 મિલી) માં સ્થાનાંતરિત કરો. મિશ્રણને 37°C પર 40 મિનિટ માટે ઉકાળો. લાલ રક્તકણો અને સીરમનું મિશ્રણ હકારાત્મક નિયંત્રણ તરીકે ગણવામાં આવ્યું હતું, અને ખારા અને લાલ રક્તકણોનું મિશ્રણ નકારાત્મક નિયંત્રણ તરીકે ગણવામાં આવ્યું હતું. સ્ટેજિટ્ઝકી સ્કેલ અનુસાર હેમેગ્ગ્લુટિનેશન નક્કી કરવામાં આવ્યું હતું. પ્રસ્તાવિત ભીંગડા નીચે મુજબ છે: + + + ગાઢ દાણાદાર સમૂહ; + + + વક્ર ધારવાળા સરળ તળિયાના પેડ્સ; + + ફાટેલી ધારવાળા સરળ તળિયાના પેડ્સ; + સરળ પેડ્સની ધારની આસપાસ સાંકડા લાલ રિંગ્સ; – (નકારાત્મક) નીચલા કૂવાના મધ્યમાં અલગ લાલ બટન 12.
NFRCS ની હિમોકોમ્પેટિબિલિટીનો અભ્યાસ ઇન્ટરનેશનલ ઓર્ગેનાઇઝેશન ફોર સ્ટાન્ડર્ડાઇઝેશન (ISO) (ISO10993-4, 1999)26,27 ની પદ્ધતિ અનુસાર કરવામાં આવ્યો હતો. સિંઘ અને અન્ય લોકો દ્વારા વર્ણવેલ ગુરુત્વાકર્ષણ પદ્ધતિ. NFRCS ની હાજરીમાં અથવા સપાટી પર થ્રોમ્બસ રચનાનું મૂલ્યાંકન કરવા માટે નાના ફેરફારો કરવામાં આવ્યા હતા. 500 મિલિગ્રામ Cs, Ch NFRCS અને Cp NFRCS ને 37°C પર 24 કલાક માટે ફોસ્ફેટ બફર સલાઇન (PBS) માં ઉકાળવામાં આવ્યા હતા. 24 કલાક પછી, PBS દૂર કરવામાં આવ્યું હતું અને NFRCS ને 3.8% સોડિયમ સાઇટ્રેટ ધરાવતા 2 મિલી લોહીથી સારવાર આપવામાં આવી હતી. NFRCS ની સપાટી પર, ઉકાળેલા નમૂનાઓમાં 0.1 M CaCl2 નું 0.04 મિલી ઉમેરો. 45 મિનિટ પછી, કોગ્યુલેશન રોકવા માટે 5 મિલી નિસ્યંદિત પાણી ઉમેરવામાં આવ્યું હતું. NFRK ની સપાટી પર કોગ્યુલેટેડ લોહીને 36-38% ફોર્માલ્ડિહાઇડ દ્રાવણથી સારવાર આપવામાં આવી હતી. ફોર્માલ્ડીહાઇડથી ફિક્સ કરેલા ગંઠાવાનું સૂકવવામાં આવ્યું અને તેનું વજન કરવામાં આવ્યું. લોહી અને નમૂના વગરના કાચના વજન (નકારાત્મક નિયંત્રણ) અને લોહીવાળા કાચના વજન (સકારાત્મક નિયંત્રણ) ની ગણતરી કરીને થ્રોમ્બોસિસની ટકાવારીનો અંદાજ કાઢવામાં આવ્યો.
પ્રારંભિક પુષ્ટિ તરીકે, HFFC સપાટી કોટિંગ, Ct ઇન્ટરકનેક્ટેડ અને Ct નેટવર્કની છિદ્રો બનાવવાની ક્ષમતાને સમજવા માટે નમૂનાઓને ઓપ્ટિકલ માઇક્રોસ્કોપ હેઠળ વિઝ્યુઅલાઈઝ કરવામાં આવ્યા હતા. NFRCS માંથી Ch અને Cp ના પાતળા ભાગોને સ્કેલ્પેલ બ્લેડથી કાપવામાં આવ્યા હતા. પરિણામી વિભાગને કાચની સ્લાઇડ પર મૂકવામાં આવ્યો હતો, કવરસ્લિપથી ઢાંકવામાં આવ્યો હતો, અને કિનારીઓને ગુંદરથી ઠીક કરવામાં આવી હતી. તૈયાર કરેલી સ્લાઇડ્સને ઓપ્ટિકલ માઇક્રોસ્કોપ હેઠળ જોવામાં આવી હતી અને વિવિધ મેગ્નિફિકેશન પર ફોટોગ્રાફ્સ લેવામાં આવ્યા હતા.
રાઇસ એટ અલ.29 દ્વારા વર્ણવેલ પદ્ધતિના આધારે ફ્લોરોસેન્સ માઇક્રોસ્કોપીનો ઉપયોગ કરીને Ct નેટવર્ક્સમાં પોલિમર ડિપોઝિશનનું વિઝ્યુઅલાઈઝેશન કરવામાં આવ્યું હતું. ફોર્મ્યુલેશન માટે ઉપયોગમાં લેવાતી HFFC રચનાને ફ્લોરોસન્ટ રંગ (અમરાંથ) સાથે મિશ્રિત કરવામાં આવી હતી, અને NFRCS (Ch & Cp) અગાઉ ઉલ્લેખિત પદ્ધતિ અનુસાર તૈયાર કરવામાં આવી હતી. ફોર્મ્યુલેશન માટે ઉપયોગમાં લેવાતી HFFC રચનાને ફ્લોરોસન્ટ રંગ (અમરાંથ) સાથે મિશ્રિત કરવામાં આવી હતી, અને NFRCS (Ch & Cp) અગાઉ ઉલ્લેખિત પદ્ધતિ અનુસાર તૈયાર કરવામાં આવી હતી.ફોર્મ્યુલેશન માટે વપરાયેલ HFFC રચનાને ફ્લોરોસન્ટ રંગ (અમરાંથ) સાથે મિશ્રિત કરવામાં આવી હતી અને અગાઉ ઉલ્લેખિત પદ્ધતિ અનુસાર NFRCS (Ch અને Cp) મેળવવામાં આવ્યું હતું.将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的方法制制。将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的方法制制。ફોર્મ્યુલેશનમાં વપરાયેલ HFFC કમ્પોઝિશનને ફ્લોરોસન્ટ ડાઈ (અમરાંથ) સાથે ભેળવવામાં આવ્યું હતું અને અગાઉ ઉલ્લેખ કર્યા મુજબ NFRCS (Ch અને Cp) પ્રાપ્ત થયું હતું.મેળવેલા નમૂનાઓમાંથી NFRK ના પાતળા ભાગો કાપીને કાચની સ્લાઇડ્સ પર મૂકવામાં આવ્યા હતા અને કવર સ્લિપ્સથી ઢાંકવામાં આવ્યા હતા. લીલા ફિલ્ટર (310-380 nm) નો ઉપયોગ કરીને ફ્લોરોસન્ટ માઇક્રોસ્કોપ હેઠળ તૈયાર કરેલી સ્લાઇડ્સનું અવલોકન કરો. Ct નેટવર્કમાં Ct સંબંધો અને વધારાના પોલિમર ડિપોઝિશનને સમજવા માટે છબીઓ 4x મેગ્નિફિકેશન પર લેવામાં આવી હતી.
NFRCS Ch અને Cp ની સપાટીની ભૂગોળ ટેપીંગ મોડમાં અલ્ટ્રા-શાર્પ TESP કેન્ટીલીવર સાથે પરમાણુ બળ માઇક્રોસ્કોપ (AFM) નો ઉપયોગ કરીને નક્કી કરવામાં આવી હતી: 42 N/m, 320 kHz, ROC 2-5 nm, બ્રુકર, તાઇવાન. સપાટીની ખરબચડીતા સોફ્ટવેર (સ્કેનિંગ પ્રોબ ઇમેજ પ્રોસેસર) નો ઉપયોગ કરીને રુટ મીન સ્ક્વેર (RMS) દ્વારા નક્કી કરવામાં આવી હતી. સપાટીની એકરૂપતા ચકાસવા માટે 3D છબીઓ પર વિવિધ NFRCS સ્થાનો રેન્ડર કરવામાં આવ્યા હતા. આપેલ ક્ષેત્ર માટે સ્કોરના પ્રમાણભૂત વિચલનને સપાટીની ખરબચડી તરીકે વ્યાખ્યાયિત કરવામાં આવે છે. NFRCS31 ની સપાટીની ખરબચડીતાને માપવા માટે RMS સમીકરણનો ઉપયોગ કરવામાં આવ્યો હતો.
FESEM-આધારિત અભ્યાસો FESEM, SU8000, HI-0876-0003, હિટાચી, ટોક્યોનો ઉપયોગ કરીને કરવામાં આવ્યા હતા, જેથી Ch NFRCS અને Cp NFRCS ની સપાટીના આકારવિજ્ઞાનને સમજી શકાય, જેમાં Cm NFRCS કરતાં વધુ સારી BCT દર્શાવવામાં આવી હતી. FESEM અભ્યાસ ઝાઓ એટ અલ. 32 દ્વારા વર્ણવેલ પદ્ધતિ અનુસાર નાના ફેરફારો સાથે કરવામાં આવ્યો હતો. NFRCS 20 થી 30 મિલિગ્રામ Ch NFRCS અને Cp NFRCS ને ઉંદરના લોહી સાથે 20 μl 3.8% સોડિયમ સાઇટ્રેટ સાથે પ્રીમિક્સ કરવામાં આવ્યા હતા. કોગ્યુલેશન શરૂ કરવા માટે લોહીથી સારવાર કરાયેલા નમૂનાઓમાં 0.2 M CaCl2 નું 20 μl ઉમેરવામાં આવ્યું હતું અને નમૂનાઓને ઓરડાના તાપમાને 10 મિનિટ માટે ઉકાળવામાં આવ્યા હતા. વધુમાં, વધારાના લાલ રક્તકણોને ખારાથી કોગળા કરીને NFRCS સપાટી પરથી દૂર કરવામાં આવ્યા હતા.
ત્યારબાદના નમૂનાઓને 0.1% ગ્લુટારાલ્ડીહાઇડથી સારવાર આપવામાં આવી અને પછી ભેજ દૂર કરવા માટે 37°C પર ગરમ હવાના પકાવવાની નાની ભઠ્ઠીમાં સૂકવવામાં આવ્યા. સૂકા નમૂનાઓને કોટેડ કરવામાં આવ્યા અને તેનું વિશ્લેષણ કરવામાં આવ્યું 32. વિશ્લેષણ દરમિયાન મેળવેલી અન્ય છબીઓમાં વ્યક્તિગત કપાસના તંતુઓની સપાટી પર ગંઠાઈ જવાની રચના, Ct વચ્ચે પોલિમર જમાવટ, એરિથ્રોસાઇટ મોર્ફોલોજી (આકાર), ગંઠાઈ જવાની અખંડિતતા અને NFRCS ની હાજરીમાં એરિથ્રોસાઇટ મોર્ફોલોજીનો સમાવેશ થાય છે. સારવાર ન કરાયેલ NFRCS વિસ્તારો અને લોહીથી ઉકાળેલા Ch અને Cp સારવાર કરાયેલ NFRCS વિસ્તારોને તત્વ આયનો (સોડિયમ, પોટેશિયમ, નાઇટ્રોજન, કેલ્શિયમ, મેગ્નેશિયમ, ઝીંક, તાંબુ અને સેલેનિયમ) માટે સ્કેન કરવામાં આવ્યા હતા. ગંઠાઈ જવાની રચના અને ગંઠાઈ જવાની એકરૂપતા દરમિયાન તત્વ આયન સંચયને સમજવા માટે સારવાર ન કરાયેલ અને સારવાર ન કરાયેલ નમૂનાઓ વચ્ચે તત્વ આયન ટકાવારીની તુલના કરો.
Ct સપાટી પર Cp HFFC સપાટી કોટિંગની જાડાઈ FESEM નો ઉપયોગ કરીને નક્કી કરવામાં આવી હતી. Cp NFRCS ના ક્રોસ સેક્શન ફ્રેમવર્કમાંથી કાપીને સ્પટર કોટેડ કરવામાં આવ્યા હતા. પરિણામી સ્પટર કોટિંગના નમૂનાઓ FESEM દ્વારા અવલોકન કરવામાં આવ્યા હતા અને સપાટી કોટિંગની જાડાઈ 34, 35, 36 માપવામાં આવી હતી.
એક્સ-રે માઇક્રો-સીટી ઉચ્ચ-રિઝોલ્યુશન 3D નોન-ડિસ્ટ્રક્ટિવ ઇમેજિંગ પ્રદાન કરે છે અને તમને NFRK ની આંતરિક માળખાકીય ગોઠવણીનો અભ્યાસ કરવાની મંજૂરી આપે છે. માઇક્રો-સીટી નમૂનામાં એક્સ-રેના સ્થાનિક રેખીય એટેન્યુએશન ગુણાંકને રેકોર્ડ કરવા માટે નમૂનામાંથી પસાર થતા એક્સ-રે બીમનો ઉપયોગ કરે છે, જે મોર્ફોલોજિકલ માહિતી મેળવવામાં મદદ કરે છે. NFRCS37,38,39 ની હાજરીમાં શોષણ કાર્યક્ષમતા અને રક્ત ગંઠાઈ જવાને સમજવા માટે માઇક્રો-સીટી દ્વારા Cp NFRCS અને રક્ત-સારવાર કરાયેલ Cp NFRCS માં Ct નું આંતરિક સ્થાન તપાસવામાં આવ્યું હતું. રક્ત-સારવાર કરાયેલ અને સારવાર ન કરાયેલ Cp NFRCS નમૂનાઓની 3D રચનાઓ માઇક્રો-સીટી (V|tome|x S240, ફોનિક્સ, જર્મની) નો ઉપયોગ કરીને ફરીથી બનાવવામાં આવી હતી. VG STUDIO-MAX સોફ્ટવેર સંસ્કરણ 2.2 નો ઉપયોગ કરીને, NFRCS માટે 3D છબીઓ વિકસાવવા માટે વિવિધ ખૂણાઓ (આદર્શ રીતે 360° કવરેજ) થી ઘણી એક્સ-રે છબીઓ લેવામાં આવી હતી. એકત્રિત પ્રોજેક્શન ડેટાને અનુરૂપ સરળ 3D સ્કેનઆઇપી એકેડેમિક સોફ્ટવેરનો ઉપયોગ કરીને 3D વોલ્યુમેટ્રિક છબીઓમાં ફરીથી બનાવવામાં આવ્યો હતો.
વધુમાં, ગંઠાવાનું વિતરણ સમજવા માટે, રક્ત ગંઠાઈ જવાની શરૂઆત કરવા માટે NFRCS માં 20 µl પ્રીમિક્સ્ડ સાઇટ્રેટેડ રક્ત અને 0.2 M CaCl2 નું 20 µl ઉમેરવામાં આવ્યું. તૈયાર કરેલા નમૂનાઓને સખત થવા માટે છોડી દેવામાં આવ્યા. NFRK સપાટીને 0.5% ગ્લુટારાલ્ડીહાઇડથી ટ્રીટ કરવામાં આવી અને 30-40°C પર 30 મિનિટ માટે ગરમ હવાના ઓવનમાં સૂકવવામાં આવી. NFRCS પર બનેલા રક્ત ગંઠાને સ્કેન કરવામાં આવ્યું, ફરીથી બનાવવામાં આવ્યું અને રક્ત ગંઠાવાની 3D છબી વિઝ્યુઅલાઈઝ કરવામાં આવી.
અગાઉ વર્ણવેલ પદ્ધતિનો ઉપયોગ કરીને નાના ફેરફારો સાથે Cp NFRCS (Ch NFRCS ની તુલનામાં શ્રેષ્ઠ) પર એન્ટિબેક્ટેરિયલ પરીક્ષણો કરવામાં આવ્યા હતા. Cp NFRCS અને Cp HFFC ની એન્ટિબેક્ટેરિયલ પ્રવૃત્તિ ત્રણ અલગ અલગ પરીક્ષણ સુક્ષ્મસજીવો [S.aureus (ગ્રામ-પોઝિટિવ બેક્ટેરિયા), E.coli (ગ્રામ-નેગેટિવ બેક્ટેરિયા) અને સફેદ Candida (C.albicans)] નો ઉપયોગ કરીને નક્કી કરવામાં આવી હતી જે ઇન્ક્યુબેટરમાં પેટ્રી ડીશમાં અગર પર ઉગે છે. 105-106 CFU ml-1 ની સાંદ્રતા પર 50 મિલી પાતળા બેક્ટેરિયલ કલ્ચર સસ્પેન્શનને અગર માધ્યમ પર સમાન રીતે ઇનોક્યુલેટ કરો. માધ્યમને પેટ્રી ડીશમાં રેડો અને તેને મજબૂત થવા દો. HFFC (HFFC માટે 3 કુવા અને નકારાત્મક નિયંત્રણ માટે 1) થી ભરવા માટે અગર પ્લેટની સપાટી પર કુવાઓ બનાવવામાં આવ્યા હતા. 3 કુવામાં 200 µl HFFC અને 4થા કુવામાં 200 µl pH 7.4 PBS ઉમેરો. પેટ્રી ડીશની બીજી બાજુ, ઘન અગર પર 12 mm Cp NFRCS ડિસ્ક મૂકો અને PBS (pH 7.4) થી ભીની કરો. સિપ્રોફ્લોક્સાસીન, એમ્પીસિલિન અને ફ્લુકોનાઝોલ ગોળીઓ સ્ટેફાયલોકોકસ ઓરિયસ, એસ્ચેરીચીયા કોલી અને કેન્ડીડા આલ્બિકન્સ માટે સંદર્ભ ધોરણો માનવામાં આવે છે. અવરોધ ઝોનને મેન્યુઅલી માપો અને અવરોધ ઝોનની ડિજિટલ છબી લો.
સંસ્થાકીય નૈતિક મંજૂરી પછી, આ અભ્યાસ દક્ષિણ ભારતમાં કર્ણાટકના મણિપાલમાં કસ્તુરબા મેડિકલ કોલેજ ઓફ એજ્યુકેશન એન્ડ રિસર્ચ ખાતે હાથ ધરવામાં આવ્યો હતો. કર્ણાટકના મણિપાલ સ્થિત કસ્તુરબા મેડિકલ કોલેજની સંસ્થાકીય નૈતિકતા સમિતિ (IEC: 674/2020) દ્વારા ઇન વિટ્રો TEG પ્રાયોગિક પ્રોટોકોલની સમીક્ષા અને મંજૂરી આપવામાં આવી છે. હોસ્પિટલ બ્લડ બેંકમાંથી સ્વયંસેવક રક્તદાતાઓ (18 થી 55 વર્ષની વયના) માંથી વિષયોની ભરતી કરવામાં આવી હતી. વધુમાં, રક્તના નમૂનાઓના સંગ્રહ માટે સ્વયંસેવકો પાસેથી એક જાણકાર સંમતિ ફોર્મ મેળવવામાં આવ્યું હતું. સોડિયમ સાઇટ્રેટ સાથે પ્રીમિક્સ્ડ આખા રક્ત પર Cp HFFC ફોર્મ્યુલેશનની અસરનો અભ્યાસ કરવા માટે મૂળ TEG (N-TEG) ​​નો ઉપયોગ કરવામાં આવ્યો હતો. N-TEG ને પોઈન્ટ-ઓફ-કેર રિસુસિટેશનમાં તેની ભૂમિકા માટે વ્યાપકપણે ઓળખવામાં આવે છે, જે પરિણામોમાં ક્લિનિકલી નોંધપાત્ર વિલંબ (નિયમિત કોગ્યુલેશન પરીક્ષણો) ની સંભાવનાને કારણે ક્લિનિશિયનો માટે સમસ્યાઓ ઊભી કરે છે. N-TEG વિશ્લેષણ આખા રક્તનો ઉપયોગ કરીને કરવામાં આવ્યું હતું. બધા સહભાગીઓ પાસેથી જાણકાર સંમતિ અને વિગતવાર તબીબી ઇતિહાસ મેળવવામાં આવ્યો હતો. આ અભ્યાસમાં ગર્ભાવસ્થા/પ્રસૂતિ પછીના સમયગાળા અથવા યકૃત રોગ જેવી હિમોસ્ટેટિક અથવા થ્રોમ્બોટિક ગૂંચવણો ધરાવતા સહભાગીઓનો સમાવેશ કરવામાં આવ્યો ન હતો. કોગ્યુલેશન કાસ્કેડને અસર કરતી દવાઓ લેતા વિષયોને પણ અભ્યાસમાંથી બાકાત રાખવામાં આવ્યા હતા. મૂળભૂત પ્રયોગશાળા પરીક્ષણો (હિમોગ્લોબિન, પ્રોથ્રોમ્બિન સમય, સક્રિય થ્રોમ્બોપ્લાસ્ટિન અને પ્લેટલેટ ગણતરી) બધા સહભાગીઓ પર પ્રમાણભૂત પ્રક્રિયાઓ અનુસાર કરવામાં આવ્યા હતા. N-TEG લોહીના ગંઠાવાની વિસ્કોઇલાસ્ટીસીટી, પ્રારંભિક ગંઠાઈ જવાની રચના, કણોની ક્રિયાપ્રતિક્રિયા, ગંઠાઈ જવાને મજબૂત બનાવવી અને ગંઠાઈ જવાની પ્રક્રિયા નક્કી કરે છે. N-TEG વિશ્લેષણ અનેક કોષીય તત્વો અને પ્લાઝ્માના સામૂહિક પ્રભાવો પર ગ્રાફિકલ અને આંકડાકીય ડેટા પ્રદાન કરે છે. Cp HFFC (10 µl અને 50 µl) ના બે અલગ અલગ વોલ્યુમો પર N-TEG વિશ્લેષણ કરવામાં આવ્યું હતું. પરિણામે, Cp HFFC ના 10 μl માં સાઇટ્રિક એસિડ સાથે 1 મિલી સંપૂર્ણ રક્ત ઉમેરવામાં આવ્યું. 20 µl 0.2 M CaCl2 ધરાવતા TEG વાનગીમાં 1 મિલી (Cp HFFC + સાઇટ્રેટેડ રક્ત), 340 µl મિશ્ર રક્ત ઉમેરો. ત્યારબાદ, Cp HFFC41 ની હાજરીમાં રક્ત નમૂનાઓના 30% R, K, આલ્ફા એંગલ, MA, G, CI, TPI, EPL, LY માપવા માટે TEG ડીશ TEG® 5000, US માં લોડ કરવામાં આવી.
ઇન વિવો અભ્યાસ પ્રોટોકોલની સમીક્ષા ઇન્સ્ટિટ્યૂશનલ એનિમલ એથિક્સ કમિટી (IAEC), કસ્તુરબા સ્કૂલ ઓફ મેડિસિન, મણિપાલ ઇન્સ્ટિટ્યૂટ ઓફ હાયર એજ્યુકેશન, મણિપાલ (IAEC/KMC/69/2020) દ્વારા કરવામાં આવી હતી અને તેને મંજૂરી આપવામાં આવી હતી. બધા પ્રાણીઓના પ્રયોગો પ્રાણી પ્રયોગ નિયંત્રણ અને દેખરેખ સમિતિ (CPCSEA) ની ભલામણો અનુસાર કરવામાં આવ્યા હતા. બધા ઇન વિવો NFRCS અભ્યાસ (2 × 2 cm2) માદા વિસ્ટાર ઉંદરો (200 થી 250 ગ્રામ વજન) પર કરવામાં આવ્યા હતા. બધા પ્રાણીઓને 24-26°C ના તાપમાને અનુકૂળ કરવામાં આવ્યા હતા, પ્રાણીઓને પ્રમાણભૂત ખોરાક અને પાણીની મફત ઍક્સેસ હતી. બધા પ્રાણીઓને રેન્ડમલી અલગ અલગ જૂથોમાં વિભાજિત કરવામાં આવ્યા હતા, દરેક જૂથમાં ત્રણ પ્રાણીઓનો સમાવેશ થતો હતો. બધા અભ્યાસો એનિમલ સ્ટડીઝ: રિપોર્ટ ઓફ ઇન વિવો એક્સપેરિમેન્ટ્સ 43 અનુસાર કરવામાં આવ્યા હતા. અભ્યાસ પહેલાં, પ્રાણીઓને 20-50 મિલિગ્રામ કેટામાઇન (શરીરના વજનના 1 કિલો દીઠ) અને 2-10 મિલિગ્રામ ઝાયલાઝિન (શરીરના વજનના 1 કિલો દીઠ) ના મિશ્રણના ઇન્ટ્રાપેરીટોનિયલ (આઇપી) વહીવટ દ્વારા એનેસ્થેટાઇઝ કરવામાં આવ્યું હતું. અભ્યાસ પછી, નમૂનાઓના પ્રારંભિક અને અંતિમ વજન વચ્ચેના તફાવતનું મૂલ્યાંકન કરીને રક્તસ્રાવનું પ્રમાણ ગણવામાં આવ્યું હતું, ત્રણ પરીક્ષણોમાંથી મેળવેલ સરેરાશ મૂલ્ય નમૂનાના રક્તસ્રાવના જથ્થા તરીકે લેવામાં આવ્યું હતું.
આઘાત, લડાઇ અથવા ટ્રાફિક અકસ્માત (ઇજા મોડેલ) માં રક્તસ્ત્રાવને નિયંત્રિત કરવા માટે NFRCS ની સંભાવનાને સમજવા માટે ઉંદરની પૂંછડી કાપવાનું મોડેલ લાગુ કરવામાં આવ્યું હતું. સામાન્ય રક્તસ્ત્રાવ સુનિશ્ચિત કરવા માટે પૂંછડીનો 50% ભાગ સ્કેલ્પેલ બ્લેડથી કાપી નાખો અને 15 સેકન્ડ માટે હવામાં મૂકો. વધુમાં, દબાણ લાગુ કરીને ઉંદરની પૂંછડી પર પરીક્ષણ નમૂનાઓ મૂકવામાં આવ્યા હતા (Ct, Cs, Ch NFRCS અને Cp NFRCS). પરીક્ષણ નમૂનાઓ માટે રક્તસ્ત્રાવ અને PCT નો અહેવાલ આપવામાં આવ્યો હતો (n = 3)17,45.
યુદ્ધમાં NFRCS દબાણ નિયંત્રણની અસરકારકતા સુપરફિસિયલ ફેમોરલ ધમનીના મોડેલ પર તપાસવામાં આવી હતી. ફેમોરલ ધમની ખુલ્લી કરવામાં આવે છે, 24G ટ્રોકારથી પંચર કરવામાં આવે છે અને 15 સેકન્ડમાં રક્તસ્ત્રાવ થાય છે. અનિયંત્રિત રક્તસ્રાવ જોવા મળ્યા પછી, પરીક્ષણ નમૂનાને દબાણ સાથે પંચર સાઇટ પર મૂકવામાં આવે છે. પરીક્ષણ નમૂના લાગુ કર્યા પછી તરત જ, ગંઠન સમય રેકોર્ડ કરવામાં આવ્યો હતો અને આગામી 5 મિનિટ માટે હિમોસ્ટેટિક કાર્યક્ષમતા જોવા મળી હતી. Cs અને Ct46 સાથે સમાન પ્રક્રિયાને પુનરાવર્તિત કરવામાં આવી હતી.
ડોવલિંગ અને અન્ય 47 એ ઇન્ટ્રાઓપરેટિવ રક્તસ્રાવના સંદર્ભમાં હેમોસ્ટેટિક સામગ્રીના હેમોસ્ટેટિક સંભવિતતાનું મૂલ્યાંકન કરવા માટે લીવર ઇજા મોડેલનો પ્રસ્તાવ મૂક્યો. Ct નમૂનાઓ (નકારાત્મક નિયંત્રણ), Cs ફ્રેમવર્ક (પોઝિટિવ કંટ્રોલ), Ch NFRCS નમૂનાઓ અને Cp NFRCS નમૂનાઓ માટે BCT રેકોર્ડ કરવામાં આવ્યું હતું. મધ્ય લેપ્રોટોમી કરીને ઉંદરના સુપ્રેહેપેટિક વેના કાવાને બહાર કાઢવામાં આવ્યો હતો. તે પછી, ડાબા લોબનો દૂરનો ભાગ કાતરથી કાપી નાખવામાં આવ્યો હતો. સ્કેલ્પેલ બ્લેડ વડે લીવરમાં ચીરો બનાવો અને તેને થોડી સેકંડ માટે લોહી વહેવા દો. કોઈપણ હકારાત્મક દબાણ વિના ક્ષતિગ્રસ્ત સપાટી પર સચોટ રીતે વજન કરાયેલ Ch NFRCS અને Cp NFRCS પરીક્ષણ નમૂનાઓ મૂકવામાં આવ્યા હતા અને BCT રેકોર્ડ કરવામાં આવ્યું હતું. ત્યારબાદ નિયંત્રણ જૂથ (Ct) એ ઇજાને તોડ્યા વિના દબાણ લાગુ કર્યું અને પછી Cs 30 s47.
વિકસિત પોલિમર-આધારિત NFRCS ના ઘા હીલિંગ ગુણધર્મોનું મૂલ્યાંકન કરવા માટે એક્સિઝનલ ઘા મોડેલનો ઉપયોગ કરીને ઇન વિવો ઘા હીલિંગ પરીક્ષણો કરવામાં આવ્યા હતા. એક્સિઝનલ ઘાના મોડેલો પસંદ કરવામાં આવ્યા હતા અને નાના ફેરફારો સાથે અગાઉ પ્રકાશિત પદ્ધતિઓ અનુસાર કરવામાં આવ્યા હતા19,32,48. અગાઉ વર્ણવ્યા મુજબ બધા પ્રાણીઓને એનેસ્થેટાઇઝ કરવામાં આવ્યા હતા. પીઠની ચામડીમાં ગોળાકાર ઊંડો ચીરો બનાવવા માટે બાયોપ્સી પંચ (12 મીમી) નો ઉપયોગ કરો. તૈયાર કરેલા ઘા સ્થળોને Cs (પોઝિટિવ કંટ્રોલ), Ct (કોટન પેડ્સ હીલિંગમાં દખલ કરે છે તે ઓળખીને), Ch NFRCS અને Cp NFRCS (પ્રાયોગિક જૂથ) અને કોઈપણ સારવાર વિના નકારાત્મક નિયંત્રણથી ડ્રેસ કરવામાં આવ્યા હતા. અભ્યાસના દરેક દિવસે, બધા ઉંદરોમાં ઘાના વિસ્તારનું માપન કરવામાં આવ્યું હતું. ઘા વિસ્તારનો ફોટો લેવા અને નવી ડ્રેસિંગ પહેરવા માટે ડિજિટલ કેમેરાનો ઉપયોગ કરો. ઘા બંધ થવાની ટકાવારી નીચેના સૂત્ર દ્વારા માપવામાં આવી હતી:
અભ્યાસના 12મા દિવસે ઘા બંધ થવાની ટકાવારીના આધારે, શ્રેષ્ઠ જૂથના ઉંદરની ચામડી ((Cp NFRCS) અને નિયંત્રણ જૂથ) કાઢવામાં આવી હતી અને H&E સ્ટેનિંગ અને મેસનના ટ્રાઇક્રોમ સ્ટેનિંગ દ્વારા તેનો અભ્યાસ કરવામાં આવ્યો હતો. અભ્યાસના 12મા દિવસે ઘા બંધ થવાની ટકાવારીના આધારે, શ્રેષ્ઠ જૂથના ઉંદરની ચામડી ((Cp NFRCS) અને નિયંત્રણ જૂથ) કાઢવામાં આવી હતી અને H&E સ્ટેનિંગ અને મેસનના ટ્રાઇક્રોમ સ્ટેનિંગ દ્વારા તેનો અભ્યાસ કરવામાં આવ્યો હતો.અભ્યાસના 12મા દિવસે ઘા બંધ થવાની ટકાવારીના આધારે, શ્રેષ્ઠ જૂથ ((Cp NFRCS) અને નિયંત્રણ જૂથ) ના ઉંદરોની ચામડીને હેમેટોક્સિલિન-ઇઓસિન અને મેસનના ટ્રાઇક્રોમથી સ્ટેનિંગ કરીને એક્સાઇઝ કરવામાં આવી હતી અને તેની તપાસ કરવામાં આવી હતી.根据研究第12天的伤口闭合百分比，切除最佳组((Cp NFRCS)和对照组)的大鼠皮肤，进行H&E染色和Masson三色染色研究.根据研究第12天的伤口闭合百分比，切除最佳组((Cp NFRCS)和对照组)的大鼠皮肤，进行H&E染色和眳组）અભ્યાસના 12મા દિવસે ઘા બંધ થવાના ટકાના આધારે, હેમેટોક્સિલિન-ઇઓસિન સ્ટેનિંગ અને મેસનના ટ્રાઇક્રોમ સ્ટેનિંગ માટે શ્રેષ્ઠ જૂથ ((Cp NFRCS) અને નિયંત્રણ જૂથો) માં ઉંદરોને કાપી નાખવામાં આવ્યા હતા.અમલમાં મુકાયેલી સ્ટેનિંગ પ્રક્રિયા અગાઉ વર્ણવેલ પદ્ધતિઓ 49,50 અનુસાર હાથ ધરવામાં આવી હતી. ટૂંકમાં, 10% ફોર્મેલિનમાં ફિક્સેશન પછી, નમૂનાઓને ગ્રેડેડ આલ્કોહોલની શ્રેણીનો ઉપયોગ કરીને ડિહાઇડ્રેટ કરવામાં આવ્યા હતા. એક્સાઇઝ્ડ પેશીઓના પાતળા વિભાગો (5 µm જાડા) મેળવવા માટે માઇક્રોટોમનો ઉપયોગ કરો. હિસ્ટોપેથોલોજીકલ ફેરફારોનો અભ્યાસ કરવા માટે નિયંત્રણોના પાતળા સીરીયલ વિભાગો અને NFRCS ને હેમેટોક્સિલિન અને ઇઓસિનથી સારવાર આપવામાં આવી હતી. કોલેજન ફાઇબ્રિલ્સની રચના શોધવા માટે મેસનના ટ્રાઇક્રોમ સ્ટેનનો ઉપયોગ કરવામાં આવ્યો હતો. પ્રાપ્ત પરિણામોનો પેથોલોજિસ્ટ્સ દ્વારા આંધળો અભ્યાસ કરવામાં આવ્યો હતો.
Cp NFRCS નમૂનાઓની સ્થિરતાનો અભ્યાસ 12 મહિના માટે ઓરડાના તાપમાને (25°C ± 2°C/60% RH ± 5%) કરવામાં આવ્યો હતો. Cp NFRCS (સપાટીના વિકૃતિકરણ અને માઇક્રોબાયલ વૃદ્ધિ) નું દૃષ્ટિની નિરીક્ષણ કરવામાં આવ્યું હતું અને સામગ્રી અને પદ્ધતિઓ વિભાગમાં દર્શાવેલ ઉપરોક્ત પદ્ધતિઓ અનુસાર ફોલ્ડ વસ્ત્રો પ્રતિકાર અને BCT માટે પરીક્ષણ કરવામાં આવ્યું હતું.
15×15 cm2 ના કદ સાથે Cp NFRCS તૈયાર કરીને Cp NFRCS ની માપનીયતા અને પ્રજનનક્ષમતા તપાસવામાં આવી હતી. વધુમાં, વિવિધ Cp NFRCS અપૂર્ણાંકોમાંથી 30 મિલિગ્રામ નમૂનાઓ (n = 5) કાઢવામાં આવ્યા હતા અને પદ્ધતિઓ વિભાગમાં અગાઉ વર્ણવ્યા મુજબ અભ્યાસ કરાયેલા નમૂનાઓના BCTનું મૂલ્યાંકન કરવામાં આવ્યું હતું.
અમે વિવિધ બાયોમેડિકલ એપ્લિકેશનો માટે Cp NFRCS રચનાઓનો ઉપયોગ કરીને વિવિધ આકારો અને રચનાઓ વિકસાવવાનો પ્રયાસ કર્યો છે. આવા આકારો અથવા રૂપરેખાંકનોમાં નાકમાંથી રક્તસ્ત્રાવ માટે શંકુ આકારના સ્વેબ, દાંતની પ્રક્રિયાઓ અને યોનિમાર્ગ રક્તસ્ત્રાવ માટે નળાકાર સ્વેબનો સમાવેશ થાય છે.
બધા ડેટા સેટ સરેરાશ ± માનક વિચલન તરીકે દર્શાવવામાં આવ્યા છે અને ANOVA દ્વારા પ્રિઝમ 5.03 (ગ્રાફપેડ, સાન ડિએગો, CA, USA) નો ઉપયોગ કરીને વિશ્લેષણ કરવામાં આવ્યું હતું, ત્યારબાદ બોનફેરોનીના બહુવિધ તુલના પરીક્ષણ (*p<0.05) દ્વારા અનુસરવામાં આવ્યું હતું.
માનવ અભ્યાસમાં કરવામાં આવતી બધી પ્રક્રિયાઓ સંસ્થા અને રાષ્ટ્રીય સંશોધન પરિષદના ધોરણો, તેમજ હેલસિંકીની ઘોષણા 1964 અને તેના પછીના સુધારાઓ, અથવા સમાન નૈતિક ધોરણો અનુસાર હતી. બધા સહભાગીઓને અભ્યાસની વિશેષતાઓ અને તેના સ્વૈચ્છિક સ્વભાવ વિશે માહિતી આપવામાં આવી હતી. સહભાગીઓનો ડેટા એકત્રિત કર્યા પછી ગુપ્ત રહે છે. ઇન વિટ્રો TEG પ્રાયોગિક પ્રોટોકોલની સમીક્ષા કરવામાં આવી છે અને કર્ણાટકના મણિપાલ સ્થિત કસ્તુરબા મેડિકલ કોલેજની સંસ્થાકીય નીતિશાસ્ત્ર સમિતિ દ્વારા મંજૂરી આપવામાં આવી છે (IEC: 674/2020). સ્વયંસેવકોએ રક્ત નમૂનાઓ એકત્રિત કરવા માટે જાણકાર સંમતિ પર હસ્તાક્ષર કર્યા.
પ્રાણી અભ્યાસમાં કરવામાં આવતી બધી પ્રક્રિયાઓ કસ્તુબા ફેકલ્ટી ઓફ મેડિસિન, મણિપાલ ઇન્સ્ટિટ્યૂટ ઓફ હાયર એજ્યુકેશન, મણિપાલ (IAEC/KMC/69/2020) અનુસાર હાથ ધરવામાં આવી હતી. ડિઝાઇન કરાયેલા બધા પ્રાણી પ્રયોગો પ્રાણી પ્રયોગ નિયંત્રણ અને દેખરેખ સમિતિ (CPCSEA) ની માર્ગદર્શિકા અનુસાર હાથ ધરવામાં આવ્યા હતા. બધા લેખકો ARRIVE માર્ગદર્શિકાનું પાલન કરે છે.
બધા NFRCS ના FTIR સ્પેક્ટ્રાનું વિશ્લેષણ કરવામાં આવ્યું હતું અને આકૃતિ 2A માં બતાવેલ ચાઇટોસન સ્પેક્ટ્રમ સાથે સરખામણી કરવામાં આવી હતી. ચાઇટોસન (રેકોર્ડ કરેલ) ના લાક્ષણિક સ્પેક્ટ્રલ શિખરો 3437 cm-1 (OH અને NH સ્ટ્રેચિંગ, ઓવરલેપ), 2945 અને 2897 cm-1 (CH સ્ટ્રેચિંગ), 1660 cm-1 (NH2 સ્ટ્રેન), 1589 cm-1 (N–H બેન્ડિંગ), 1157 cm-1 (બ્રિજ સ્ટ્રેચ O-), 1067 cm-1 (સ્ટ્રેચ C–O, સેકન્ડરી હાઇડ્રોક્સિલ), 993 cm-1 (સ્ટ્રેચ CO, Bo-OH) 52.53.54. પૂરક કોષ્ટક S1 ચાઇટોસન (રિપોર્ટર), શુદ્ધ ચાઇટોસન, Cm, Ch, અને Cp માટે FTIR NFRCS શોષણ સ્પેક્ટ્રમ મૂલ્યો દર્શાવે છે. બધા NFRCS (Cm, Ch અને Cp) ના FTIR સ્પેક્ટ્રામાં કોઈ નોંધપાત્ર ફેરફારો વિના શુદ્ધ ચાઇટોસન જેવા જ લાક્ષણિક શોષણ બેન્ડ દર્શાવવામાં આવ્યા હતા (આકૃતિ 2A). FTIR પરિણામોએ NFRCS વિકસાવવા માટે ઉપયોગમાં લેવાતા પોલિમર વચ્ચે રાસાયણિક અથવા ભૌતિક ક્રિયાપ્રતિક્રિયાઓની ગેરહાજરીની પુષ્ટિ કરી, જે દર્શાવે છે કે ઉપયોગમાં લેવાતા પોલિમર નિષ્ક્રિય છે.
Cm NFRCS, Ch NFRCS, Cp NFRCS અને Cs નું ઇન વિટ્રો લાક્ષણિકતા. (A) કમ્પ્રેશન હેઠળ ચાઇટોસન અને Cm NFRCS, Ch NFRCS અને Cp NFRCS ની રચનાઓના સંયુક્ત FTIR સ્પેક્ટ્રાનું પ્રતિનિધિત્વ કરે છે. (B) a) NFRCS Cm, Ch, Cp, અને Cg (n = 3) નો સંપૂર્ણ રક્ત શોષણ દર; Ct નમૂનાઓએ ઉચ્ચ BAR દર્શાવ્યો કારણ કે કપાસના સ્વેબમાં વધુ શોષણ કાર્યક્ષમતા હોય છે; b) લોહી પછી શોષણ શોષિત નમૂનાનું ચિત્ર. પરીક્ષણ નમૂના C ના BCT નું ગ્રાફિકલ પ્રતિનિધિત્વ (Cp NFRCS માં શ્રેષ્ઠ BCT (15 s, n = 3) હતું). C, D, E, અને G માં ડેટા સરેરાશ ± SD તરીકે દર્શાવવામાં આવ્યો હતો, અને ભૂલ બાર SD, ***p < 0.0001 દર્શાવે છે. C, D, E, અને G માં ડેટા સરેરાશ ± SD તરીકે દર્શાવવામાં આવ્યો હતો, અને ભૂલ બાર SD, ***p < 0.0001 દર્શાવે છે. Данные в C, D, E и G представлены как среднее ± стандартное отклонение, а планки погрешностей представляют представляют стандартное, *** <0,0001. C, D, E, અને G માં ડેટા સરેરાશ ± માનક વિચલન તરીકે રજૂ કરવામાં આવે છે, અને ભૂલ પટ્ટીઓ માનક વિચલન, ***p<0.0001 દર્શાવે છે. C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD,误差线代表SD,***p <0.0001. C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD,误差线代表SD,***p <0.0001. Данные в C, D, E и G показаны как среднее значение ± стандартное отклонение, планки погрешностей представляют стандоляют стандартное <0,0001. C, D, E, અને G માં ડેટા સરેરાશ ± માનક વિચલન તરીકે દર્શાવવામાં આવ્યો છે, ભૂલ પટ્ટીઓ માનક વિચલન દર્શાવે છે, ***p<0.0001.