Wasu batutuwa masu matsala na LC ba su daɗe ba, kamar yadda akwai batutuwa a cikin aikin LC, ko da yadda fasahar kayan aiki ta inganta a tsawon lokaci.Akwai hanyoyi da yawa da matsalolin da za su iya tashi a cikin tsarin LC kuma sun ƙare a cikin mafi girman siffar mara kyau.Lokacin da al'amurran da suka shafi siffar kololuwa suka taso, taƙaitaccen jerin abubuwan da za a iya haifar da waɗannan sakamakon yana taimakawa wajen sauƙaƙe ƙwarewar matsala na mu.
Yana jin daɗin rubuta wannan shafi na “LC Troubleshooting” da kuma yin tunani game da batutuwa kowane wata, domin wasu batutuwa ba su taɓa fita daga salon ba. Yayin da ake yin bincike kan chromatography wasu batutuwa ko ra'ayoyi sun zama mara amfani yayin da aka maye gurbinsu da sabbin kuma mafi kyawun ra'ayoyi, a fagen gyara matsala, tun lokacin da labarin farko na warware matsalar ya bayyana a cikin wannan mujallar (da LC Journal in the time) 8O bayan wasu shekaru 19 da suka gabata. sun mayar da hankali da yawa sassan warware matsalar LC akan abubuwan da suka shafi ruwa chromatography (LC) (alal misali, kwatanta dangi na fahimtarmu game da tasirin matsin lamba akan riƙewa [2] Sabon Ci gaban) Fassarar mu na sakamakon LC da yadda za a magance matsalar tare da kayan aikin LC na zamani. ting — abubuwan da ke da kyau ga kowane mai warware matsalar suna da mahimmanci, komai shekarun tsarin da muke amfani da su. Babban jigon wannan jerin yana da matuƙar dacewa ga shahararren bangon bangon LCGC na “Jagorar Gyara matsala na LC” (4) wanda ke rataye a cikin dakunan gwaje-gwaje da yawa. Domin kashi na uku na wannan jerin, na zaɓi in mai da hankali kan batutuwan da suka shafi ganiya siffar ko ganiya halaye. daki-daki a cikin labarin daya, don haka a cikin wannan kashi na farko a kan batun, zan mayar da hankali kan wasu daga cikin waɗanda nake gani sau da yawa. Ina fata matasa da tsofaffi masu amfani da LC za su sami wasu shawarwari da tunatarwa masu taimako a kan wannan muhimmin batu.
Na sami kaina ƙara amsa tambayoyin matsala tare da "komai yana yiwuwa" Wannan amsa na iya zama mai sauƙi lokacin yin la'akari da abubuwan da ke da wuyar fassarawa, amma na ga sau da yawa dacewa.
Mahimmin mataki a cikin kowane motsa jiki na matsala - amma wanda nake tsammanin ba shi da daraja - yana gane cewa akwai matsala da ake buƙatar warwarewa.Gane cewa akwai matsala sau da yawa yana nufin gane cewa abin da ya faru da kayan aiki ya bambanta da tsammaninmu, wanda aka tsara ta hanyar ka'idar, ilimin empirical, da kwarewa (5) .The "peak shape" da ake magana a kai a nan a zahiri ba wai kawai siffofi na musamman ba, kamar yadda aka kwatanta da nau'i-nau'i. gefen, wutsiya, da dai sauransu), amma kuma zuwa nisa. Abubuwan da muke tsammanin don ainihin siffar kololuwa suna da sauƙi.Ka'idar (6) tana goyan bayan tsammanin littafin rubutu cewa, a mafi yawan lokuta, ƙwararrun chromatographic ya kamata ya zama daidai kuma ya dace da siffar rarraba Gaussian, kamar yadda aka nuna a cikin Hoto 1a. Abin da muke tsammanin daga mafi girman girman girman shine wani abu mai mahimmanci game da wannan batu na gaba. biliyoyin da za a iya lura da su - a wasu kalmomi, wasu hanyoyin da abubuwa za su iya yin kuskure. A cikin ragowar wannan kashi, za mu yi amfani da lokaci don tattauna wasu takamaiman misalan yanayi waɗanda zasu iya haifar da waɗannan nau'o'in siffar.
Wasu lokuta ba a lura da kololuwa ko kaɗan a cikin chromatogram inda ake sa ran za a eluted.Taswirar bangon da ke sama yana nuna cewa rashi na kololuwa (zaton samfurin a zahiri yana ƙunshe da maƙasudin maƙasudi a cikin maida hankali wanda ya kamata ya sa mai gano amsa ya isa ya gan shi a sama da amo) yawanci yana da alaƙa da wasu batun kayan aiki ko yanayin yanayin motsi mara kyau (idan an lura da shi gaba ɗaya).kololuwa, yawanci ma “rauni”) .Takaitaccen jerin matsalolin matsalolin da mafita a cikin wannan rukunin ana iya samun su a cikin Tebura I.
Kamar yadda aka ambata a sama, tambaya game da yadda za a iya jurewa kololuwar faɗaɗawa kafin a mai da hankali da ƙoƙarin gyara shi batu ne mai rikitarwa wanda zan tattauna a cikin labarin na gaba. Kwarewar da nake da ita ita ce mafi girman girman girman girma yana sau da yawa tare da wani gagarumin canji a cikin siffar kololuwa, kuma wutsiya kololuwa ya fi kowa fiye da pre-peak ko splitting. Duk da haka, ƙananan ƙididdiga na ƙididdiga na iya haifar da wasu dalilai daban-daban, wanda zai iya haifar da wasu dalilai daban-daban.
An tattauna kowanne daga cikin waɗannan batutuwa dalla-dalla a cikin batutuwan da suka gabata na Matsalar LC, kuma masu karatu masu sha'awar waɗannan batutuwa za su iya komawa ga waɗannan kasidu da suka gabata don bayani kan tushen tushen da hanyoyin magance waɗannan batutuwa.Karin bayani.
Kololuwar wutsiya, kololuwar gaba, da tsagawa duk ana iya haifar da su ta hanyar sinadarai ko al'amuran zahiri, kuma jerin abubuwan da za a iya magance waɗannan matsalolin sun bambanta sosai, dangane da ko muna fama da matsalar sinadarai ko ta jiki. Sau da yawa, ta hanyar kwatanta kololuwa daban-daban a cikin chromatogram, zaku iya samun mahimman bayanai game da wanda shine mai laifi. Idan mafi yawan chromatogram ba zai iya haifar da irin wannan ba. Kololuwa suna shafar, amma sauran suna da kyau, dalilin shine mafi kusantar sinadarai.
Abubuwan da ke haifar da sinadarai na wutsiya kololuwa suna da rikitarwa don tattaunawa a taƙaice a nan. Mai karatu mai sha'awar yana magana ne game da batun kwanan nan na "Tsarin matsala na LC" don ƙarin tattaunawa mai zurfi (10) . Duk da haka, abu mai sauƙi don gwadawa shine rage yawan ƙwayar allurar da aka yi amfani da ita kuma duba idan siffar kololuwar ta inganta. Idan haka ne, to, wannan shine kyakkyawan ma'anar cewa matsalar tana da iyakacin iyaka. sses, ko kuma dole ne a canza yanayin chromatographic ta yadda za a iya samun kyawawan siffofi kololuwa ko da tare da manyan allurai.
Har ila yau, akwai wasu dalilai na jiki masu yawa na wutsiya kololuwa. Masu karatu masu sha'awar cikakken bayani game da yiwuwar ana magana da su zuwa wani batu na kwanan nan na "Tsarin matsala na LC" (11) .Daya daga cikin abubuwan da suka fi dacewa na jiki na kullun wutsiya shine haɗin da ba shi da kyau a wani batu tsakanin injector da mai ganowa (12) . An nuna misali mai mahimmanci a cikin Hoto 1d, wanda aka samu a cikin tsarin da aka gina tare da 'yan makonnin da suka wuce, ba mu yi amfani da shi ba a cikin tsarin da aka yi amfani da shi a cikin wani akwati tare da 'yan makonni da suka wuce. ƙaramin ƙarar allura madauki tare da ferrule wanda aka ƙera shi a kan capillary na bakin karfe.Bayan wasu gwaje-gwajen matsala na farko, mun gane cewa zurfin tashar tashar jiragen ruwa a cikin madaidaicin bawul ɗin allura ya fi zurfi fiye da yadda muke amfani da shi, wanda ya haifar da babban matattu girma a ƙasan tashar jiragen ruwa.Wannan matsalar tana da sauƙin warwarewa ta maye gurbin allurar madauki tare da wani bututu, za mu iya daidaita matattun madaidaicin madaidaicin zuwa tashar jiragen ruwa.
Peak fronts kamar waɗanda aka nuna a cikin Figure 1e kuma za a iya lalacewa ta hanyar jiki ko sunadarai matsaloli.A na kowa jiki dalilin da manyan baki shi ne cewa barbashi gado na ginshiƙi ba shi da kyau cushe, ko kuma cewa barbashi sun sake tsara a kan lokaci.As tare da ganiya tailing lalacewa ta hanyar wannan jiki sabon abu, mafi kyau hanyar gyara wannan shi ne maye gurbin shafi da kuma ci gaba da tafiya.Fundamentar kira ga kololuwa yanayi. A karkashin yanayin da ya dace (mikaice), yawan adadin analyte da ke riƙe da lokaci mai tsayi (saboda haka, abin da ake riƙewa) yana da alaƙa da haɗin kai da ƙaddamar da ƙididdiga a cikin ginshiƙi. Chromatographically, wannan yana nufin cewa yayin da yawan adadin analyte allura a cikin ginshiƙi yana ƙaruwa, girman ya zama tsayi, amma ba ya fi girma. ed.Bugu da ƙari, sifofin da ba na layi ba suna ƙayyade siffar kololuwar chromatographic, wanda ke haifar da jagora ko gefen gefuna.Kamar yadda tare da yawan nauyin nauyi wanda ke haifar da wutsiya kololuwa (10), ana iya gano kololuwar jagorancin da ke haifar da riƙewar da ba ta dace ba ta hanyar rage yawan allurar analyte. Idan kololuwar girma ta inganta, hanyar dole ne a canza yanayin da ba za a iya canza yanayin da zai haifar da yanayin chromat ba.
Wani lokaci muna lura da abin da ya zama kololuwar "raga" kamar yadda aka nuna a cikin Hoto na 1f. Mataki na farko na magance wannan matsala shine sanin ko siffar kololuwar ta kasance saboda haɗin haɗin kai (watau kasancewar nau'i biyu daban-daban amma masu kama da juna). ance ba shi da alaƙa da ginshiƙin kanta. Sau da yawa, mafi mahimmancin alamar wannan yanke shawara shine ko duk kololuwa a cikin chromatogram suna nuna sifofin tsaga, ko ɗaya ko biyu kawai. Idan ɗaya ko biyu ne kawai, yana iya yiwuwa batun haɗin gwiwa;idan duk kololuwa sun rabu, tabbas lamari ne na jiki, mai yuwuwa yana da alaƙa da rukunin kanta.
Rarraba kololuwar da ke da alaƙa da kaddarorin jiki na ginshiƙin kanta yawanci saboda wani ɓangaren katange mashigin ruwa ko fitarwa, ko sake tsara ɓangarorin a cikin ginshiƙi, ƙyale tsarin wayar hannu ya gudana da sauri fiye da lokacin wayar hannu a cikin wasu yankuna na samuwar tashar shafi .a cikin wasu yankuna (11) .A wasu yankuna (11) .Sai na ɗan toshe frit wani lokaci ana iya share shi ta hanyar jujjuya kwarara ta cikin shafi;duk da haka, a cikin kwarewata, wannan yawanci shine ɗan gajeren lokaci maimakon mafita na dogon lokaci. Wannan sau da yawa yana mutuwa tare da ginshiƙan zamani idan sassan sun sake haɗuwa a cikin ginshiƙi. A wannan lokaci, ya fi dacewa don maye gurbin shafi kuma ci gaba.
Kololuwa a cikin Hoto 1g, Har ila yau, daga wani misali na kwanan nan a cikin lab na kaina, yawanci yana nuna cewa siginar yana da girma har ya kai ga ƙarshen iyakar amsawa.Don masu gano abubuwan da ke ɗaukar hoto (UV-vis a cikin wannan yanayin), lokacin da ƙaddamarwar nazari yana da girma sosai, mai binciken yana ɗaukar mafi yawan hasken da ke wucewa ta cikin tantanin halitta mai gudana, yana barin haske kaɗan kaɗan don gano shi, ba tare da yin tasiri ga siginar yanayi daban-daban ba. irin su batattun haske da “babban halin yanzu”, suna sa siginar ta zama “mai ruɗi” a cikin bayyanar da zaman kanta ba tare da maida hankali ba.Lokacin da wannan ya faru, ana iya magance matsalar sau da yawa ta hanyar rage ƙarar allurar mai bincike-rage ƙarar allurar, diluting samfurin, ko duka biyun.
A cikin makarantar chromatography, muna amfani da siginar ganowa (watau y-axis a cikin chromatogram) a matsayin mai nuna alamar ƙaddamarwa a cikin samfurin.Saboda haka yana da ban mamaki don ganin chromatogram tare da siginar da ke ƙasa da sifili, kamar yadda fassarar sauƙi shine cewa wannan yana nuna ƙaddamar da ƙaddamarwa mara kyau - wanda ba shakka ba zai yiwu ba.
A wannan yanayin, wani korau ganiya kawai yana nufin cewa kwayoyin eluting daga ginshiƙi sha kasa da haske fiye da mobile lokaci kanta nan da nan kafin da kuma bayan ganiya.Wannan na iya faruwa, alal misali, a lokacin da yin amfani da in mun gwada da low gano wavelengths (<230 nm) da mobile lokaci Additives cewa sha mafi yawan haske a wadannan wavelengths. Irin wannan Additives na iya zama mobile lokaci formate irin wannan abu kamar yadda acceffer aka gyara kamar yadda aka gyara a lokacin da kaushi. aks don shirya tsarin daidaitawa da samun cikakkun bayanai masu ƙididdigewa, don haka babu wani dalili mai mahimmanci don guje wa kowane ɗayansu (wannan hanyar ana kiranta wani lokaci a matsayin "ganewar UV kai tsaye") (13) .Duk da haka, idan da gaske muna so mu guje wa kololuwar kololuwa gaba ɗaya, a cikin yanayin gano abin sha, mafi kyawun bayani shine amfani da wani nau'in ganowa daban-daban na gano tsawon lokaci, ko kuma canza yanayin lokacin da wayar hannu ta mamaye lokaci fiye da yadda yanayin ke ɗaukar lokaci fiye da lokacin da wayar hannu take sha. manazarta.
Korau kololuwa kuma iya bayyana a lokacin da yin amfani da refractive index (RI) ganewa a lokacin da refractive index na aka gyara wanin da Analyte a cikin samfurin, kamar sauran ƙarfi matrix, shi ne daban-daban daga refractive index na mobile lokaci.This kuma ya faru da UV-vis ganewa, amma wannan sakamako o ƙarin tabbatar da za a attenuated dangi zuwa RI ganowa. lokaci.
A kashi na uku a kan ainihin batu na LC gyara matsala, Na tattauna yanayi a cikin abin da lura kololuwa siffar bambanta daga da ake tsammani ko na al'ada siffar.Ingantacciyar matsala na irin waɗannan matsalolin ya fara da ilimin da ake sa ran ganiya siffofi (dangane da ka'idar ko kafin kwarewa tare da data kasance hanyoyin), don haka sabawa daga wadannan tsammanin su ne bayyananne.Matsalolin siffar kololuwa suna da yawa daban-daban m haddasawa (ma fadi, tailing, da manyan abubuwan da suka faru a cikin wannan). cikakkun bayanai suna ba da wuri mai kyau don fara magance matsala, amma ba ya kama duk yiwuwar. Masu karatu masu sha'awar ƙarin zurfin jerin abubuwan da ke haifar da mafita na iya komawa ga taswirar bangon bangon LCGC “LC Proubleshooting Guide”.
(4) Taswirar bangon bangon LCGC “Jagorar Gyara matsala ta LC.https://www.chromatographyonline.com/view/troubleshooting-wallchart (2021).
(6) A. Felinger, Binciken Bayanai da Gudanar da Sigina a cikin Chromatography (Elsevier, New York, NY, 1998), shafi na 43-96.
(8) Wahab MF, Dasgupta PK, Kadjo AF da Armstrong DW, Anal.Chim.Journal.Rev.907, 31–44 (2016).https://doi.org/10.1016/j.aca.2015.11.043.