Wasu batutuwa masu matsala na LC ba su daɗe ba, kamar yadda akwai batutuwa a cikin aikin LC, ko da yadda fasahar kayan aiki ta inganta a tsawon lokaci.Akwai hanyoyi da yawa da matsalolin da za su iya tashi a cikin tsarin LC kuma sun ƙare a cikin mafi girman siffar mara kyau.Lokacin da batutuwan da suka shafi siffar kololuwa suka taso, taƙaitaccen jerin abubuwan da za a iya haifar da waɗannan sakamakon yana taimakawa wajen sauƙaƙe ƙwarewar matsala.
Yana jin daɗin rubuta wannan shafi na “LC Troubleshooting” da kuma yin tunani game da batutuwa kowane wata, saboda wasu batutuwa ba su taɓa fita daga salon ba. Yayin da ake gudanar da bincike kan chromatography wasu batutuwa ko ra'ayoyi sun zama mara amfani yayin da aka maye gurbinsu da sabbin dabaru da mafi kyawun ra'ayoyi, a fagen warware matsalar, tun lokacin da labarin farko ya bayyana a cikin wannan jarida (da LC Journal a lokacin) 8O duk da haka. 'yan shekarun da suka gabata, na mayar da hankali kan sassan warware matsalar LC da yawa akan abubuwan da ke faruwa na zamani waɗanda ke shafar chromatography (LC) (alal misali, kwatanta dangi na fahimtarmu game da tasirin matsin lamba akan riƙewa [2] Sabon Ci gaban) Fassarar mu na sakamakon LC da yadda za a magance matsala tare da kayan aikin LC na zamani. A cikin sashe na wannan watan, Ina 30 na ci gaba a cikin jerin abubuwan da na fara a cikin 1 na Disamba, wanda na ci gaba da ci gaba a cikin 1. da kuma mutuwa" batutuwa na matsala na LC - abubuwan da ke da kyau ga kowane mai matsala suna da mahimmanci, ko da shekarun tsarin da muke amfani da su. Babban jigon wannan jerin yana da matukar dacewa ga LCGC's sanannen "Jagorar warware matsalar LC" bango ginshiƙi (4) rataye a da yawa dakunan gwaje-gwaje. Ga kashi na uku na wannan jerin, na zabi don mayar da hankali a kan al'amurran da suka shafi alaka ga kololuwa siffar ko peak 4 daban-daban halaye. matalauta kololuwar siffar! Ba za mu iya yin la'akari da dukan waɗannan batutuwa dalla-dalla a cikin labarin ɗaya ba, don haka a cikin wannan kashi na farko a kan batun, zan mayar da hankali ga wasu daga cikin waɗanda na gani sau da yawa. Ina fata matasa da tsofaffi masu amfani da LC za su sami wasu shawarwari masu taimako da tunatarwa game da wannan muhimmin batu.
Na sami kaina ƙara amsa tambayoyin matsala tare da "komai yana yiwuwa" Wannan amsa na iya zama mai sauƙi lokacin yin la'akari da abubuwan da ke da wuyar fassarawa, amma na ga sau da yawa dacewa.
Mahimmin mataki a cikin kowane motsa jiki na magance matsala - amma wanda nake tsammanin an ƙaddamar da shi - yana gane cewa akwai matsala da ake buƙatar warwarewa.Gane cewa akwai matsala sau da yawa yana nufin gane cewa abin da ya faru da kayan aiki ya bambanta da tsammaninmu, wanda aka tsara ta hanyar ka'idar, ilimin empirical, da kwarewa (5) .The "peak shape" da ake magana a kai a nan a zahiri ba wai kawai siffofi ba, kamar yadda aka kwatanta da santsi, ba kawai siffofi na musamman ba. Fluffy, jagorancin gefen, tai, da sauransu), har ma da abubuwan da aka nuna na Gaustraphic ya kamata su zama mafi sauƙin magana, kuma za mu tattauna wannan batun a talabijin na gaba. Sauran siffofin ganawa a ciki Hoto na 1 yana nuna wasu hanyoyin da za a iya lura da su - a wasu kalmomi, wasu hanyoyin da abubuwa za su iya yin kuskure. A cikin ragowar wannan kashi, za mu yi amfani da lokaci don tattauna wasu takamaiman misalan yanayi da zasu iya haifar da waɗannan nau'o'in siffar.
Wasu lokuta ba a lura da kololuwa ko kaɗan a cikin chromatogram inda ake sa ran za a eluted.Taswirar bangon da ke sama yana nuna cewa rashi na kololuwa (zaton samfurin a zahiri yana ƙunshe da maƙasudin maƙasudi a cikin maida hankali wanda ya kamata ya sa mai gano amsa ya isa ya gan shi a sama da amo) yawanci yana da alaƙa da wasu batun kayan aiki ko yanayin yanayin motsi mara kyau (idan an lura da shi gaba ɗaya). kololuwa, yawanci ma “rauni”) .Takaitaccen jerin matsalolin matsalolin da mafita a cikin wannan rukunin ana iya samun su a cikin Tebura I.
Kamar yadda aka ambata a sama, tambaya game da yadda za a iya jurewa kololuwar faɗaɗawa kafin a mai da hankali da ƙoƙarin gyara shi batu ne mai rikitarwa wanda zan tattauna a cikin labarin na gaba. Kwarewar da nake da ita ita ce mafi girman girman girman girma yana sau da yawa tare da wani gagarumin canji a cikin siffar kololuwa, kuma wutsiya kololuwa ya fi kowa fiye da pre-peak ko splitting. Duk da haka, ƙananan ƙididdiga na ƙididdiga na iya haifar da wasu dalilai daban-daban, wanda zai iya haifar da wasu dalilai daban-daban.
Kowane ɗayan waɗannan batutuwa an tattauna su dalla-dalla a cikin batutuwan da suka gabata na Gyara matsala LC, kuma masu karatu masu sha'awar waɗannan batutuwa za su iya komawa ga waɗannan kasidu na baya don bayani kan tushen tushen da hanyoyin magance waɗannan batutuwa. Karin bayani.
Kololuwar wutsiya, kololuwar gaba, da tsaga duk ana iya haifar da su ta hanyar sinadarai ko al'amuran zahiri, kuma jerin abubuwan da za a iya magance waɗannan matsalolin sun bambanta sosai, dangane da ko muna fama da matsalar sinadarai ko ta jiki. Sau da yawa, ta hanyar kwatanta kololuwa daban-daban a cikin chromatogram, zaku iya samun mahimman bayanai game da wanda shine mai laifi.Idan mafi yawan chromatogram ba zai iya haifar da kamanni na zahiri ba. Kololuwa ɗaya ko kaɗan ne abin ya shafa, amma sauran suna da kyau, dalilin shine mafi kusantar sinadarai.
Abubuwan da ke haifar da sinadarai na wutsiya kololuwa suna da rikitarwa don tattaunawa a taƙaice a nan. Mai karatu mai sha'awar yana magana ne game da batun kwanan nan na "Tsarin matsala na LC" don tattaunawa mai zurfi (10) .Duk da haka, abu mai sauƙi don gwadawa shine rage yawan ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar ƙwayar kuma za a iya ganin idan haka ne, to, wannan alama ce mai kyau don magance matsalar, dole ne a yi la'akari da matsalar "matsala a cikin matsala". ƙananan talakawa masu nazari, ko yanayin chromatographic dole ne a canza su domin a iya samun kyawawan siffofi kololuwa ko da tare da manyan allurai.
Har ila yau, akwai wasu dalilai na jiki masu yawa don hawan wutsiya. Masu karatu masu sha'awar cikakken bayani game da yiwuwar ana magana da su zuwa wani batu na baya-bayan nan na "Tsarin matsala na LC" (11) .Daya daga cikin abubuwan da suka fi dacewa na jiki na kullun wutsiya shine rashin haɗin gwiwa a wani matsayi tsakanin injector da mai ganowa (12) . An nuna wani misali mai mahimmanci a cikin Hoto 1d, wanda aka samo a cikin tsarin nawa tare da 'yan makonni da suka wuce. kafin, da kuma shigar da ƙaramin madauki na allurar ƙararrawa tare da ferrule wanda aka ƙera a kan capillary na bakin karfe.Bayan wasu gwaje-gwajen matsala na farko, mun gane cewa zurfin tashar tashar jiragen ruwa a cikin ma'aunin bawul ɗin allura ya kasance mai zurfi fiye da yadda muka yi amfani da mu, wanda ya haifar da babban mataccen girma a kasan tashar jiragen ruwa. Wannan matsala yana da sauƙin warwarewa ta hanyar maye gurbin allurar daidaitawa a daidaitaccen madaidaicin madaidaicin zuwa wani mataccen bututu don mu iya kawar da madaidaicin madaidaicin ga mataccen bututu. tashar jiragen ruwa.
Kololuwa gaba kamar waɗanda aka nuna a cikin Figure 1e kuma za a iya lalacewa ta hanyar jiki ko sunadarai matsaloli.A na kowa jiki dalilin da manyan baki shi ne cewa barbashi gado na ginshiƙi ba shi da kyau cushe, ko kuma cewa barbashi sun sake tsara kan lokaci.As tare da kololuwar wutsiya lalacewa ta hanyar wannan jiki sabon abu, mafi kyau hanyar gyara wannan shi ne maye gurbin shafi da kuma ci gaba da tafiya.Fundamente kira ga kololuwa daga abin da ake kira gefu da asali siffar. Yanayin riƙewa na "marasa linzamin kwamfuta". A ƙarƙashin yanayi mai kyau (mikalika), yawan adadin analyte da aka riƙe ta hanyar tsayayyen lokaci (saboda haka, abin da ke riƙewa) yana da alaƙa da haɗin kai a cikin ginshiƙi. kawai ya zama tsayi amma kuma ya fi girma yayin da ake yin allura da yawa. Bugu da ƙari, siffofi marasa layi suna ƙayyade siffar kololuwar chromatographic, wanda ke haifar da jagora ko gefuna. Kamar yadda yawan nauyin nauyi wanda ke haifar da wutsiya kololuwa (10), jagorancin mafi girma wanda ya haifar da riƙon da ba a kan layi ba kuma za'a iya gano shi ta hanyar rage yawan allurar da aka yi wa allurar da aka yi amfani da ita ta hanyar rage yawan allurar da aka yi amfani da ita don inganta ingancin allura. gefen, ko kuma dole ne a canza yanayin chromatographic don rage wannan hali.
Wani lokaci muna lura da abin da ya zama kololuwar "raga", kamar yadda aka nuna a cikin Hoto na 1f. Mataki na farko na magance wannan matsala shine sanin ko siffar kololuwar ta kasance saboda haɗin haɗin kai (watau kasancewar mahaɗan guda biyu daban-daban amma masu kama da juna). dangane da Ayyukan jiki ba shi da alaƙa da ginshiƙin kanta. Sau da yawa, mafi mahimmancin alamar wannan yanke shawara shine ko duk kololuwa a cikin chromatogram suna nuna sifofin tsaga, ko kuma ɗaya ko biyu kawai. idan duk kololuwa sun rabu, tabbas lamari ne na jiki, mai yuwuwa yana da alaƙa da rukunin kanta.
Rarraba kololuwa da ke da alaƙa da kaddarorin jiki na ginshiƙin kanta yawanci saboda wani yanki da aka katange mashigin ko fitarwa, ko sake tsara barbashi a cikin ginshiƙi, ƙyale tsarin wayar hannu ya gudana da sauri fiye da lokacin wayar hannu a wasu yankuna na samuwar tashar shafi .a cikin wasu yankuna (11) .A wasu yankuna (11) .. Wani lokaci ana iya share frit a wani lokaci ta hanyar jujjuya kwarara ta cikin shafi; duk da haka, a cikin kwarewata, wannan yawanci shine ɗan gajeren lokaci maimakon mafita na dogon lokaci. Wannan sau da yawa yana mutuwa tare da ginshiƙan zamani idan sassan sun sake haɗuwa a cikin ginshiƙi. A wannan lokaci, ya fi dacewa don maye gurbin shafi kuma ci gaba.
Kololuwar a cikin Hoto 1g, kuma daga wani misali na baya-bayan nan a cikin lab na kaina, yawanci yana nuna cewa siginar yana da tsayi sosai har ya kai ƙarshen iyakar amsawa.Don masu gano abubuwan ɗaukar hoto na gani (UV-vis a cikin wannan yanayin), lokacin da maida hankali na nazari yana da girma sosai, analyte yana ɗaukar mafi yawan hasken da ke wucewa ta cikin tantanin halitta ya kwarara, yana barin ƙaramin haske kaɗan don gano shi ta hanyar lantarki ta hanyar yanayi daban-daban. tushen surutu, kamar hasken da ba daidai ba da “babban halin yanzu”, suna sa siginar ta zama “mai ruɗi” a cikin bayyanar da zaman kanta ba tare da natsuwa ba. Lokacin da wannan ya faru, ana iya magance matsalar sau da yawa ta hanyar rage ƙarar allurar mai bincike-rage ƙarar allurar, diluting samfurin, ko duka biyun.
A cikin makarantar chromatography, muna amfani da siginar ganowa (watau y-axis a cikin chromatogram) a matsayin mai nuna alamar ƙaddamarwa a cikin samfurin.Saboda haka yana da ban mamaki don ganin chromatogram tare da siginar da ke ƙasa da sifili, kamar yadda fassarar sauƙi ita ce wannan yana nuna ƙaddamar da ƙaddamarwa mara kyau - wanda ba shakka ba zai yiwu ba.
A wannan yanayin, wani korau ganiya kawai yana nufin cewa kwayoyin eluting daga ginshiƙi sha kasa haske fiye da mobile lokaci kanta nan da nan kafin da kuma bayan ganiya.Wannan na iya faruwa, alal misali, a lokacin da yin amfani da in mun gwada da low gano wavelengths (<230 nm) da kuma mobile lokaci Additives cewa sha mafi yawan haske a wadannan wavelengths. Irin wannan Additives na iya zama mobile lokaci formate bugu kamar yadda aceffer aka gyara kamar yadda Ace Aceffer aka gyara. iya zahiri amfani da korau kololuwa shirya wani calibration kwana da samun daidai gwargwado bayanai, don haka babu wani muhimmin dalili don kauce wa su da se (wannan hanya wani lokacin ake magana a kai a matsayin "kai kaikaice UV ganewa") (13) .Duk da haka, idan da gaske muna so mu guje wa korau kololuwa gaba daya, a cikin hali na absorbance ganowa, mafi kyaun bayani shi ne don amfani da wani daban-daban ganewa lokaci, ko ana canja wurin abun da ke ciki na hannu fiye da yadda ake iya canza yanayin yanayin. tsarin wayar hannu domin su sha ƙarancin haske fiye da masu nazari.
Korau kololuwa kuma iya bayyana a lokacin da yin amfani da refractive index (RI) ganewa a lokacin da refractive index na aka gyara wanin da Analyte a cikin samfurin, kamar sauran ƙarfi matrix, shi ne daban-daban daga refractive index na mobile lokaci.Wannan kuma ya faru da UV-vis ganewa, amma wannan sakamako o ƙarin tabbatar da za a attenuated dangi da RI ganowa. zuwa na tsarin wayar hannu.
A cikin kashi na uku a kan ainihin batu na matsala na LC, na tattauna yanayin da yanayin da aka lura ya bambanta da yanayin da ake tsammani ko na al'ada. Gyaran matsala mai tasiri na irin waɗannan matsalolin yana farawa da sanin abubuwan da ake tsammani (bisa ka'idar ko ƙwarewar da ta gabata tare da hanyoyin da ake da su), don haka karkacewa daga waɗannan tsammanin suna bayyane. Matsalolin siffar kololuwa suna da yawa daban-daban m haddasawa (ma fadi, wutsiya, da dai sauransu) na tattauna daki-daki. Sau da yawa. Sanin waɗannan cikakkun bayanai yana ba da wuri mai kyau don fara matsala, amma ba ya kama duk yiwuwar. Masu karatu masu sha'awar ƙarin zurfin jerin abubuwan da ke haifar da mafita zasu iya komawa ga ginshiƙi na bangon LCGC "LC Troubleshooting Guide".
(4) Taswirar bangon bangon LCGC “Jagorar Gyara matsala ta LC.https://www.chromatographyonline.com/view/troubleshooting-wallchart (2021).
(6) A. Felinger, Binciken Bayanai da Gudanar da Sigina a cikin Chromatography (Elsevier, New York, NY, 1998), shafi na 43-96.
(8) Wahab MF, Dasgupta PK, Kadjo AF da Armstrong DW, Anal.Chim.Journal.Rev. 907, 31–44 (2016).https://doi.org/10.1016/j.aca.2015.11.043.