ʻO kekahi mau kumuhana hoʻoponopono pilikia LC ʻaʻole loa i pau, no ka mea, aia nā pilikia ma ka hoʻomaʻamaʻa LC, ʻoiai ʻo ka hoʻomaikaʻi ʻana o ka ʻenehana mea kani i ka manawa.
Leʻaleʻa ke kākau ʻana i kēia kolamu "LC Troubleshooting" a noʻonoʻo i nā kumuhana i kēlā me kēia mahina, no ka mea, ʻaʻole e hele i waho o ke ʻano o kekahi mau kumuhana. ʻOiai ma ke kahua o ka noiʻi chromatography ua lilo kekahi mau kumuhana a i ʻole nā ​​manaʻo i ka wā kahiko no ka mea e pani ʻia ana e nā manaʻo hou a maikaʻi hoʻi, ma ke kahua hoʻoponopono pilikia, ʻoiai ua puka mai ka ʻatikala hoʻoponopono mua ma kēia puke pai (ʻoiai ua pili kekahi mau kumuhana LC i kēlā manawa). i nā makahiki i hala iho nei, ua kālele au i kekahi mau ʻāpana LC Troubleshooting i nā ʻano o kēia wā e pili ana i ka chromatography wai (LC) (no ka laʻana, ka hoʻohālikelike pili o ko mākou ʻike i ka hopena o ke kaomi ma ka hoʻopaʻa ʻana [2] New Advances) ʻO kā mākou wehewehe ʻana i nā hopena LC a pehea e hoʻoponopono ai me nā mea kani LC o kēia manawa. ʻO nā kumuhana "ola a me ka make" o ka hoʻoponopono pilikia LC - he mea nui nā mea nui no kēlā me kēia pilikia pilikia, ʻaʻole i ka makahiki o ka ʻōnaehana a mākou e hoʻohana nei. ʻO ke kumuhana kumu o kēia moʻo he mea pili loa i ka LCGC kaulana ʻo "LC Troubleshooting Guide" palapala pā (4) e kau ana ma nā hale hana he nui. ʻAʻole hiki iā mākou ke noʻonoʻo i kēia mau pilikia a pau i loko o ka ʻatikala hoʻokahi, no laila ma kēia māhele mua o ke kumuhana, e kālele au i kekahi o nā mea aʻu i ʻike pinepine ai.
ʻIke au i ka pane ʻana i nā nīnau hoʻoponopono me ka "hiki i kekahi mea." Me he mea maʻalahi paha kēia pane i ka wā e noʻonoʻo ai i nā ʻike paʻakikī e wehewehe, akā ʻike pinepine wau he kūpono.
ʻO kahi hana koʻikoʻi i nā hana hoʻoponopono pilikia - akā ʻo ka mea aʻu i manaʻo ai he mea hoʻohaʻahaʻa ʻia - ʻo ka ʻike ʻana aia kahi pilikia e pono e hoʻonā ʻia. ʻoluʻolu, fluffy, alakaʻi lihi, tailing, etc.), akā i ka laula. ʻO kā mākou mau manaʻolana no ke ʻano kiʻekiʻe maoli he maʻalahi. Kākoʻo maikaʻi ʻo Theory (6) i ka manaʻo o ka puke, i ka hapanui o nā hihia, e kūlike nā piko chromatographic a e kūlike i ke ʻano o kahi mahele Gaussian, e like me ka hōʻike ʻana ma ka Figure 1a. ʻatikala. ʻO nā kiʻi kiʻekiʻe ʻē aʻe ma ka Kiʻi 1 e hōʻike ana i kekahi o nā mea hiki ke ʻike ʻia - ma nā ʻōlelo ʻē aʻe, kekahi o nā ala e hewa ai nā mea.
I kekahi manawa, ʻaʻole ʻike ʻia nā piko i loko o ka chromatogram kahi i manaʻo ʻia e eluted. ʻO ka pakuhi o ka paia ma luna e hōʻike ana i ka loaʻa ʻole o kahi kiʻekiʻe (ke manaʻo ʻia ʻo ka hāpana i loaʻa i ka analyte target ma kahi ʻano e pono ai ka pane ʻana o ka mea ʻike e ʻike ma luna o ka walaʻau) pili maʻamau i kekahi pilikia mea kani a i ʻole nā ​​kūlana o ka pae kelepona hewa (inā ʻike ʻia. Hiki ke loaʻa ka papa inoa pōkole o nā pilikia a me nā hoʻonā i kēia māhele ma ka Papa I.
E like me ka mea i ʻōlelo ʻia ma luna nei, ʻo ka nīnau e pili ana i ka nui o ka peak broadening e ʻae ʻia ma mua o ka nānā ʻana a me ka hoʻāʻo ʻana e hoʻoponopono he kumuhana paʻakikī aʻu e kūkākūkā ai ma kahi ʻatikala e hiki mai ana.
Ua kūkākūkā nui ʻia kēlā me kēia pilikia ma nā pukana mua o Troubleshooting LC, a hiki i ka poʻe heluhelu i makemake i kēia mau kumuhana ke nānā i kēia mau ʻatikala mua no ka ʻike e pili ana i ke kumu kumu a me nā hoʻonā kūpono i kēia mau pilikia. Nā kikoʻī hou aku.
Hiki ke kumu o ka huelo kiʻekiʻe, ka piko mua, a me ka ʻokiʻoki ʻana ma muli o ke kemika a i ʻole ke kino, a ʻokoʻa ka papa inoa o nā mea e hiki ai ke hoʻoponopono i kēia mau pilikia, ma muli o ke ʻano o ke kino a i ʻole ka pilikia kino. Hoʻopilikia ʻia kekahi mau piko, akā maikaʻi ke koena, ʻo ke kumu ke kumu.
ʻO nā kumu kemika o ka huelo kiʻekiʻe he paʻakikī ke kūkākūkā pōkole ma aneʻi. Ua kuhikuhi ʻia ka mea heluhelu hoihoi i ka pukana hou o "LC Troubleshooting" no kahi kūkākūkā hohonu loa (10). analyte masses, a i ʻole nā ​​kūlana chromatographic pono e hoʻololi ʻia i hiki ke loaʻa nā kiʻi kiʻekiʻe maikaʻi ʻoiai me ka nui o ka nui i hoʻokomo ʻia.
Nui nō hoʻi nā kumu kino no ka peak tailing. ʻO ka poʻe heluhelu makemake i kahi kūkākūkā kikoʻī o nā mea hiki ke kuhikuhi ʻia i kekahi pukana hou o "LC Troubleshooting" (11). ʻaʻole mākou i hoʻohana ma mua, a hoʻokomo i kahi puʻupuʻu liʻiliʻi liʻiliʻi me kahi ferrule i hoʻoheheʻe ʻia i ka capillary stainless steel. Ma hope o kekahi mau hoʻokolohua hoʻoponopono mua, ʻike mākou i ka hohonu o ka hohonu o ke awa i loko o ka stator valve injection ua ʻoi aku ka hohonu ma mua o ka mea i maʻa ai mākou, e hopena i ka nui make nui ma lalo o ke awa. leo make ma ka lalo o ke awa.
Hiki ke hoʻopili ʻia nā ʻaoʻao kiʻekiʻe e like me nā mea i hōʻike ʻia ma ka Figure 1e e nā pilikia kino a i ʻole nā ​​​​pilikia. ʻO nā kūlana paʻa ʻole "linear". Ma lalo o nā kūlana kūpono (linear), ʻo ka nui o ka analyte i mālama ʻia e ka pae paʻa (no laila, ʻo ka mea hoʻopaʻa ʻana) pili linearly i ka neʻe ʻana o ka analyte i loko o ke kolamu. Chromatographically, ʻo ia hoʻi i ka piʻi ʻana o ka analyte i hoʻokomo ʻia i loko o ke kolamu, piʻi ke kiʻekiʻe ke kiʻekiʻe ke kiʻekiʻe, akā ʻaʻole i haki ka pilina. ʻAʻole i ʻoi aku ka lōʻihi akā ʻoi aʻe hoʻi i ka nui o ka nuipaʻa i hoʻopaʻa ʻia. Eia kekahi, ʻo nā ʻano nonlinear e hoʻoholo i ke ʻano o nā piko chromatographic, e hopena i ke alakaʻi a i ʻole nā ​​kihi hope. lihi, a i ʻole e hoʻololi ʻia nā kūlana chromatographic e hōʻemi i kēia ʻano.
I kekahi manawa, nānā mākou i ka mea i ʻike ʻia he piko "māhele", e like me ka mea i hōʻike ʻia ma ka Figure 1f. ʻO ka hana mua i ka hoʻonā ʻana i kēia pilikia ʻo ia ka hoʻoholo ʻana inā ʻo ke ʻano o ke kiʻekiʻe ma muli o ka hui ʻana ʻāpana (ʻo ia hoʻi, ka loaʻa ʻana o ʻelua mau pūhui ʻokoʻa akā eluting kokoke ana). ʻO nā piko "mākaʻikaʻi" pili i ke kino ʻAʻohe pili o ka hana me ke kolamu ponoʻī. inā māhele ʻia nā piko a pau, he pilikia kino paha ia, pili paha i ke kolamu ponoʻī.
ʻO nā puʻu mahele e pili ana i nā waiwai kino o ke kolamu ponoʻī ma muli o nā ʻāpana i hoʻopaʻa ʻia i loko a i waho frits, a i ʻole ka hoʻonohonoho hou ʻana o nā ʻāpana i loko o ke kolamu, e ʻae ana i ka pae kelepona e kahe wikiwiki aʻe ma mua o ka pae kelepona i kekahi mau wahi o ka hoʻokumu ʻana i ke kahawai kolamu. ma nā wahi ʻē aʻe (11). akā naʻe, i koʻu ʻike, he manawa pōkole kēia ma mua o ka hopena lōʻihi.
ʻO ke kiʻekiʻe o ke kiʻi 1g, mai kahi manawa hou i loko o kaʻu lab ponoʻī, hōʻike maʻamau i ke kiʻekiʻe o ka hōʻailona a hiki i ka hopena kiʻekiʻe o ka pae pane. e nā kumu like ʻole o ka walaʻau, e like me ke kukui hele a me ka "pōʻeleʻele", e hoʻolilo i ka hōʻailona "fuzzy" i ka nānā ʻana a kūʻokoʻa i ka ʻike analyte. Ke hiki mai kēia, hiki ke maʻalahi ka hoʻoponopono ʻana i ka pilikia ma ka hoʻemi ʻana i ka nui o ka injection o ka analyte—e hoʻemi i ka nui o ka injection, diluting i ka hāpana, a i ʻole nā ​​mea ʻelua.
Ma ke kula chromatography, hoʻohana mākou i ka hōʻailona detector (ʻo ia hoʻi, ka axis y i loko o ka chromatogram) ma ke ʻano he hōʻailona o ka ʻike analyte i ka hāpana.
I kēia hihia, ʻo ka peak maikaʻi ʻole, ʻo ia ka mea e hoʻomoʻi ʻia nā molekala eluting mai ke kolamu i ka liʻiliʻi o ka mālamalama ma mua o ka pae paʻa ponoʻī ma mua a ma hope o ka piko. peaks e hoʻomākaukau i ka calibration curve a loaʻa i ka ʻike quantitative pololei, no laila ʻaʻohe kumu kumu e pale aku iā lākou no kēlā me kēia (keia ʻano i kapa ʻia i kekahi manawa ʻo "indirect UV detection") (13). māmā ma mua o nā analytes.
Hiki ke ʻike ʻia nā piko maikaʻi ʻole i ka wā e hoʻohana ai i ka ʻike refractive index (RI) inā ʻokoʻa ka helu refractive o nā ʻāpana ʻē aʻe i ka analyte i loko o ka hāpana, e like me ka solvent matrix, i ʻokoʻa me ka refractive index o ka mobile phase. ka pae kelepona.
Ma ka ʻāpana ʻekolu ma ke kumuhana kumu o ka hoʻoponopono pilikia LC, ua kūkākūkā au i nā kūlana i ʻokoʻa ai ke ʻano kiʻekiʻe i ʻike ʻia mai ka mea i manaʻo ʻia a i ʻole ka peak shape maʻamau. ʻO nā kumu aʻu i ʻike pinepine ai. ʻO ka ʻike ʻana i kēia mau kikoʻī he wahi maikaʻi ia e hoʻomaka ai i ka hoʻoponopono pilikia, akā ʻaʻole ia e hopu i nā mea āpau.
(4) LCGC “LC Troubleshooting Guide”.https://www.chromatographyonline.com/view/troubleshooting-wallchart (2021).
(6) A. Felinger, Ka Ikepili Ikepili a me ka Hana Hoailona ma Chromatography (Elsevier, New York, NY, 1998), pp. 43-96.
(8) Wahab MF, Dasgupta PK, Kadjo AF a me Armstrong DW, Anal.Chim.Journal.Rev. 907, 31–44 (2016).https://doi.org/10.1016/j.aca.2015.11.043.