LC Troubleshooting Essentials, Part III: The Peaks Don't Look Right

ʻO kekahi mau kumuhana hoʻoponopono pilikia LC ʻaʻole loa i pau, no ka mea, aia nā pilikia ma ka hoʻomaʻamaʻa LC, ʻoiai ʻo ka hoʻomaikaʻi ʻana o ka ʻenehana mea kani i ka manawa.
He leʻaleʻa ke kākau ʻana i kēia kolamu "LC Troubleshooting" a me ka noʻonoʻo ʻana i nā kumuhana i kēlā me kēia mahina, no ka mea, ʻaʻole e pau ke ʻano o kekahi mau kumuhana. ʻOiai ma ke kahua o ka noiʻi chromatography e lilo ana kekahi mau kumuhana a i ʻole nā ​​manaʻo e lilo i mea kahiko no ka mea e pani ʻia ana e nā manaʻo hou a maikaʻi hoʻi, ma ke kahua hoʻoponopono pilikia, ʻoiai ua puka ka ʻatikala hoʻoponopono mua ma kēia puke pai (ʻoiai he kakaikahi nā kumuhana LC i kēlā manawa). Ua kālele au i kekahi mau ʻāpana LC Troubleshooting i nā ʻano o kēia wā e pili ana i ka chromatography wai (LC) (no ka laʻana, ka hoʻohālikelike pili o ko mākou ʻike i ka hopena o ke kaomi i ka paʻa ʻana [2] New Advances) ʻO kā mākou wehewehe ʻana i nā hopena LC a pehea e hoʻoponopono ai me nā mea kani LC hou. hoʻoponopono pilikia — pono nā mea nui no nā mea hoʻoponopono pilikia, ʻaʻole i ka makahiki o ka ʻōnaehana a mākou e hoʻohana nei. ʻO ke kumuhana kumu o kēia moʻo he mea pili loa ia i ka LCGC kaulana kaulana "LC Troubleshooting Guide" palapala paia (4) e kau ana i loko o nā laboratories he nui. o keia mau pilikia ma ka kiko'ī i loko o ka 'atikala hoʻokahi, no laila, ma keia mahele mua ma ke kumuhana, au e kālele ana ma luna o kekahi o na mea aʻu i ike pinepine.
ʻIke au i ka pane ʻana i nā nīnau hoʻoponopono me ka "hiki i kekahi mea." Me he mea maʻalahi paha kēia pane i ka wā e noʻonoʻo ai i nā ʻike paʻakikī e wehewehe, akā ʻike pinepine wau he kūpono.
ʻO kahi hana koʻikoʻi i kekahi hana hoʻoponopono pilikia - akā ʻo ka mea aʻu i manaʻo ai he mea hoʻohaʻahaʻa ʻia - ʻo ka ʻike ʻana aia kahi pilikia e pono e hoʻonā ʻia. , alakai lihi, huelo, a pela aku), aka, i ka laula no hoi. He ma'alahi ko makou manao no ke ano peak maoli. Ua kāko'o maika'i 'o Theory (6) i ka mana'o o ka puke, ma ka hapanui o na hihia, pono e like na piko chromatographic a kulike me ke ano o ka mahele Gaussian, e like me ka hoike ana ma ka Figure 1a. e 1 hōʻike i kekahi o nā mea ʻē aʻe i hiki ke ʻike ʻia—ma nā ʻōlelo ʻē aʻe, kekahi o nā ala e hewa ai nā mea.
I kekahi manawa, ʻaʻole ʻike ʻia nā piko i loko o ka chromatogram kahi i manaʻo ʻia e eluted. ʻO ka pakuhi o ka paia ma luna e hōʻike ana i ka loaʻa ʻole o kahi kiʻekiʻe (ke manaʻo ʻia ʻo ka hāpana i loaʻa i ka analyte target ma kahi ʻano e pono ai ka pane ʻana o ka mea ʻike e ʻike ma luna o ka walaʻau) pili maʻamau i kekahi pilikia mea kani a i ʻole nā ​​kūlana o ka pae kelepona hewa (inā ʻike ʻia.Hiki ke loaʻa ka papa inoa pōkole o nā pilikia a me nā hoʻonā i kēia māhele ma ka Papa I.
E like me ka mea i ʻōlelo ʻia ma luna nei, ʻo ka nīnau e pili ana i ka nui o ka peak broadening e ʻae ʻia ma mua o ka nānā ʻana a me ka hoʻāʻo ʻana e hoʻoponopono he kumuhana paʻakikī aʻu e kūkākūkā ai ma kahi ʻatikala e hiki mai ana.
Ua kūkākūkā nui ʻia kēlā me kēia pilikia ma nā pukana mua o Troubleshooting LC, a hiki i ka poʻe heluhelu i makemake i kēia mau kumuhana ke nānā i kēia mau ʻatikala mua no ka ʻike e pili ana i ke kumu kumu a me nā hoʻonā kūpono i kēia mau pilikia.Nā kikoʻī hou aku.
Hiki ke kumu o ka peak tailing, peak front, a me ka wehe 'ana i nā mea kemika a i 'ole ke kino, a 'o ka papa inoa o nā mea e hiki ai ke ho'oponopono i kēia mau pilikia he 'oko'a like 'ole, ma muli o ka pilikia kemika a kino paha. pili, akā maikaʻi ke koena, ʻo ke kumu ke kumu.
ʻO nā kumu kemika o ka huelo kiʻekiʻe he paʻakikī ke kūkākūkā pōkole ma aneʻi. Ua kuhikuhi ʻia ka mea heluhelu hoihoi i ka pukana hou o "LC Troubleshooting" no kahi kūkākūkā hohonu loa (10). a i ʻole e hoʻololi ʻia nā kūlana chromatographic i hiki ke loaʻa nā kiʻi kiʻekiʻe maikaʻi me ka nui o ka nui o ka hoʻokomo ʻia.
Nui nō hoʻi nā kumu kino no ka huelo kiʻekiʻe. ʻO ka poʻe heluhelu makemake i kahi kūkākūkā kikoʻī o nā mea hiki ke kuhikuhi ʻia i kekahi pukana hou o "LC Troubleshooting" (11). ma mua, a hoʻokomo i kahi loop injection volume liʻiliʻi me kahi ferrule i hoʻoheheʻe ʻia i ka capillary stainless steel. Ma hope o kekahi mau hoʻokolohua hoʻoponopono pilikia mua, ʻike mākou i ka hohonu o ka hohonu o ke awa ma ka stator valve injection ua ʻoi aku ka hohonu ma mua o mākou i maʻa ai, ka hopena i kahi leo make nui ma lalo o ke awa.
ʻO nā fonuk e like me nā mea i hōʻikeʻia ma ke kiʻi he mea hiki ke kiʻiʻia e keʻano o ke kolamu. ʻO ka hoʻonohonohoʻana i keʻano o nā kūlana kūpono akā,ʻoi aku ka nui o ka nui o ka nui o ka hanaʻana, e hiki ke hoʻololiʻia i keʻano o ka mea i hoʻopaʻaʻia e ka lehulehu. Pono e hoʻololiʻia nā kūlana Romatographic e hōʻemi i kēiaʻano.
I kekahi manawa, nānā mākou i ka mea i ʻike ʻia he piko "māhele", e like me ka mea i hōʻike ʻia ma ka Figure 1f. ʻO ka hana mua i ka hoʻoponopono ʻana i kēia pilikia ʻo ka hoʻoholo ʻana inā ʻo ke ʻano o ke kiʻekiʻe ma muli o ka hui pū ʻana (ʻo ia hoʻi, ka loaʻa ʻana o ʻelua mau pūhui ʻokoʻa akā eluting kokoke ana). ks pili i ke kino ʻAʻohe pili o ka hana me ke kolamu.inā māhele ʻia nā piko a pau, he pilikia kino paha ia, pili paha i ke kolamu ponoʻī.
ʻO nā puʻu mahele e pili ana i nā waiwai kino o ke kolamu ponoʻī ma muli o nā ʻāpana i hoʻopaʻa ʻia i loko a i waho frits, a i ʻole ka hoʻonohonoho hou ʻana o nā ʻāpana i loko o ke kolamu, e ʻae ana i ka pae kelepona e kahe wikiwiki aʻe ma mua o ka pae kelepona i kekahi mau wahi o ka hoʻokumu ʻana i ke kahawai kolamu. ma nā wahi ʻē aʻe (11).akā naʻe, i koʻu ʻike, he manawa pōkole kēia ma mua o ka hopena lōʻihi.
ʻO ke kiʻekiʻe o ka Figure 1g, mai kahi manawa hou i loko o kaʻu lab ponoʻī, hōʻike maʻamau i ke kiʻekiʻe o ka hōʻailona a hiki i ka hopena kiʻekiʻe o ka pae pane. ise, e like me ke kukui hele hewa a me ka "pouli o ka manawa", e hana ana i ka hōʻailona "fuzzy" ma ke ʻano a kūʻokoʻa i ka manaʻo analyte.Ke hiki mai kēia, hiki ke maʻalahi ka hoʻoponopono ʻana i ka pilikia ma ka hoʻemi ʻana i ka nui o ka injection o ka analyte—e hoʻemi i ka nui o ka injection, diluting i ka hāpana, a i ʻole nā ​​mea ʻelua.
Ma ke kula chromatography, hoʻohana mākou i ka hōʻailona detector (ʻo ia hoʻi, ka axis y i loko o ka chromatogram) ma ke ʻano he hōʻailona o ka analyte concentration ma ka sample.
I kēia hihia, ʻo ka peak maikaʻi ʻole, ʻo ia ka mea e hoʻomoʻi nā molekala eluting mai ke kolamu i ka liʻiliʻi o ka mālamalama ma mua o ka pae paʻa ponoʻī ma mua koke a ma hope o ka piko. libration curve a loaʻa ka ʻike kikoʻī kūpono, no laila ʻaʻohe kumu kumu e pale aku ai iā lākou no kēlā me kēia (ua kapa ʻia kēia ʻano he "ʻike UV indirect") (13).
Hiki ke ʻike ʻia nā piko maikaʻi ʻole i ka wā e hoʻohana ai i ka ʻike kuhikuhi refractive (RI) i ka wā e ʻokoʻa ai ka index refractive o nā ʻāpana ʻē aʻe i ka analyte i loko o ka hāpana, e like me ka solvent matrix, i ʻokoʻa me ka index refractive o ka pae paʻa.
Ma ka ʻāpana ʻekolu ma ke kumuhana kumu o ka hoʻoponopono pilikia LC, ua kūkākūkā au i nā kūlana i ʻokoʻa ai ke ʻano o ka piko i ʻike ʻia mai ka mea i manaʻo ʻia a i ʻole ke ʻano maʻamau. ʻO ka ʻike pinepine ʻana i kēia mau kikoʻī he wahi maikaʻi e hoʻomaka ai i ka hoʻoponopono pilikia, akā ʻaʻole e hopu i nā mea hiki.
(4) LCGC “LC Troubleshooting Guide”.https://www.chromatographyonline.com/view/troubleshooting-wallchart (2021).
(6) A. Felinger, Ka Ikepili Ikepili a me ka Hana Hoailona ma Chromatography (Elsevier, New York, NY, 1998), pp. 43-96.
(8) Wahab MF, Dasgupta PK, Kadjo AF a me Armstrong DW, Anal.Chim.Journal.Rev.907, 31–44 (2016).https://doi.org/10.1016/j.aca.2015.11.043.


Ka manawa hoʻouna: Jul-04-2022