पोषक तत्वों का अधिग्रहण और वितरण कीड़ों की खुराक और जीवन इतिहास के लक्षणों को एकीकृत करता है। जीवन के विभिन्न चरणों में विशिष्ट पोषक तत्वों की कमी की भरपाई के लिए, कीड़े इन पोषक तत्वों को पूरक आहार के माध्यम से प्राप्त कर सकते हैं, उदाहरण के लिए, पुडल नामक प्रक्रिया में कशेरुक स्राव पर भोजन करके। मच्छर एनोफिलिस अरेबियानी कुपोषित प्रतीत होता है और इसलिए, चयापचय और प्रजनन दोनों के लिए पोषक तत्वों की आवश्यकता होती है। इस अध्ययन का उद्देश्य यह आकलन करना था कि क्या एन.पोषक तत्वों की प्राप्ति के लिए गोमूत्र पर अरेबियन्सिस का मिश्रण जीवन इतिहास की विशेषताओं में सुधार लाता है।
सुनिश्चित करें कि यह सुरक्षित है। अरेबियन्सिस ताजा, 24 घंटे, 72 घंटे और 168 घंटे पुराने गोमूत्र की गंध से आकर्षित हुआ था, और मेजबान-चाहने वाली और रक्त-पोषित (रक्त भोजन के 48 घंटे बाद) मादाओं को वाई-ट्यूब ओल्फैक्टोमीटर में मापा गया था, और गर्भवती मादाओं को स्पॉनिंग परीक्षण के लिए मूल्यांकन किया गया था। फिर सभी चार आयु वर्गों में गोमूत्र में बायोएक्टिव यौगिकों की पहचान करने के लिए एक संयुक्त रासायनिक और इलेक्ट्रोफिजियोलॉजिकल विश्लेषण का उपयोग किया गया था। सिंथेटिक मिश्रण वाई-ट्यूब और फील्ड परीक्षणों में बायोएक्टिव यौगिकों का मूल्यांकन किया गया था। मलेरिया वैक्टर के लिए संभावित पूरक आहार के रूप में गोमूत्र और इसके मुख्य नाइट्रोजन युक्त यौगिक यूरिया की जांच करने के लिए, खिला मापदंडों और जीवन इतिहास विशेषताओं को मापा गया था। मादा मच्छरों के अनुपात और अवशोषित गोमूत्र और यूरिया की मात्रा का आकलन किया गया था। खिलाने के बाद, मादाओं को जीवित रहने, बंधी हुई उड़ान और प्रजनन के लिए मूल्यांकन किया गया था।
मेज़बान के रक्त और पोषण की तलाश करें। प्रयोगशाला और क्षेत्र अध्ययनों में, अरब ताजा और पुराने गोमूत्र की प्राकृतिक और सिंथेटिक गंध की ओर आकर्षित हुए। गर्भवती मादाएं प्रजनन स्थलों पर गोमूत्र प्रतिक्रियाओं के प्रति उदासीन थीं। मेज़बान की तलाश करने वाली और रक्त-चूसने वाली मादाएं सक्रिय रूप से गोमूत्र और यूरिया को अवशोषित करती हैं और उड़ान, अस्तित्व या प्रजनन के लिए शारीरिक स्थिति के एक कार्य के रूप में जीवन-इतिहास व्यापार-बंद के अनुसार इन संसाधनों को आवंटित करती हैं।
बेहतर जीवन इतिहास विशेषताओं के लिए गोमूत्र का अधिग्रहण और वितरण। गोमूत्र का पूरक आहार दैनिक अस्तित्व और वेक्टर घनत्व को बढ़ाकर और अप्रत्यक्ष रूप से उड़ान गतिविधि में परिवर्तन करके वेक्टर क्षमता को प्रभावित करता है और इसलिए भविष्य के मॉडल में इस पर विचार किया जाना चाहिए।
पोषक तत्वों का अधिग्रहण और वितरण कीड़ों की खोज और जीवन इतिहास विशेषताओं को एकीकृत करता है [1,2,3]। कीड़े भोजन का चयन और अधिग्रहण करने में सक्षम हैं और भोजन की उपलब्धता और पोषक तत्वों की आवश्यकताओं के आधार पर प्रतिपूरक भोजन करते हैं [1, 3]। पोषक तत्वों का वितरण जीवन-इतिहास प्रक्रिया पर निर्भर करता है और कीड़ों के विभिन्न जीवन चरणों में आहार की गुणवत्ता और मात्रा के लिए अलग-अलग आवश्यकताएं हो सकती हैं [1, 2]। विशिष्ट पोषक तत्वों में कमी की भरपाई के लिए, कीड़े इन पोषक तत्वों को पूरक भोजन के माध्यम से प्राप्त कर सकते हैं, जैसे कि मिट्टी, विभिन्न मल और स्राव पर। कशेरुक, और कैरीयन, एक प्रक्रिया जिसे पोखर के रूप में जाना जाता है [2]। हालांकि विभिन्न प्रकार की तितली और कीट प्रजातियों का मुख्य रूप से वर्णन किया गया है, पानी के छेद अन्य कीट समूहों में भी होते हैं, और इस प्रकार के संसाधनों के प्रति आकर्षण और भोजन करने से स्वास्थ्य और अन्य जीवन-इतिहास लक्षणों पर महत्वपूर्ण प्रभाव पड़ सकता है [2, 4, 5, 6], 7]। मलेरिया मच्छर एनोफिलिस गैम्बिया सेंसु लेटो (एसएल) एक 'कुपोषित' वयस्क के रूप में उभरता है [8], इसलिए पानी आईएनजी इसके जीवन इतिहास की विशेषताओं में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभा सकता है, लेकिन इस व्यवहार को अब तक उपेक्षित किया गया है। इस महत्वपूर्ण वाहन में पोषक तत्वों का सेवन बढ़ाने के साधन के रूप में आंदोलन का उपयोग ध्यान देने योग्य है क्योंकि इसके महत्वपूर्ण महामारी विज्ञान परिणाम हो सकते हैं।
वयस्क मादा एनोफिलीज मच्छरों में नाइट्रोजन का सेवन लार्वा चरण से कम कैलोरी भंडार और रक्त भोजन के अकुशल उपयोग के कारण सीमित है [9]। मादा एन.गांबिया एसएल आमतौर पर पूरक रक्त भोजन के साथ पूरक द्वारा इसकी भरपाई करती है [10, 11], जिससे अधिक लोगों को बीमारी होने का खतरा होता है और मच्छरों को शिकार के अधिक जोखिम में डाल दिया जाता है। वैकल्पिक रूप से, मच्छर नाइट्रोजन प्राप्त करने के लिए कशेरुकी मल के पूरक आहार का उपयोग कर सकते हैं। ous यौगिक जो अनुकूलन और उड़ान गतिशीलता को बढ़ाते हैं, जैसा कि अन्य कीड़ों द्वारा प्रदर्शित किया गया है [2]। इस संबंध में, एन के भीतर सहोदर प्रजातियों में से एक का मजबूत और विशिष्ट आकर्षण। गैम्बियन एसएल प्रजाति परिसर, एनोफिलिस अरेबिनिस, ताजा और पुराना गाय का मूत्र [12,13,14], दिलचस्प है। एनोफिलीज अरेबिनिस अपनी मेजबान प्राथमिकताओं में अवसरवादी है और मवेशियों के साथ जुड़ने और उन्हें खाने के लिए जाना जाता है। गोमूत्र यूरिया के साथ नाइट्रोजन यौगिकों से भरपूर एक संसाधन है ताजे मूत्र में कुल नाइट्रोजन का 50-95% होता है [15, 16]। जैसे-जैसे गोमूत्र की उम्र बढ़ती है, सूक्ष्मजीव इन संसाधनों का उपयोग 24 घंटों के भीतर नाइट्रोजन यौगिकों की जटिलता को कम करने के लिए करते हैं [15]। अमोनिया में तेजी से वृद्धि के साथ, कार्बनिक नाइट्रोजन में गिरावट के साथ, अल्कालोफिलिक सूक्ष्मजीव (जिनमें से कई मच्छरों के लिए विषाक्त यौगिकों का उत्पादन करते हैं) पनपते हैं [15], जो कि मादा एन.अरबीएंसिस अधिमानतः 24 घंटे या उससे कम उम्र के मूत्र की ओर आकर्षित होती है। [13,14]।
इस अध्ययन में, मेजबान और रक्त-पोषित Ans की तलाश की गई थी। अपने पहले गोनाडोट्रोपिन चक्र के दौरान, मूत्र मिश्रण द्वारा यूरिया सहित नाइट्रोजन यौगिकों के अधिग्रहण के लिए अरेबियन्सिस का मूल्यांकन किया गया था। इसके बाद, यह आकलन करने के लिए प्रयोगों की एक श्रृंखला आयोजित की गई थी कि मादा मच्छर बेहतर अस्तित्व, प्रजनन और आगे की चारागाह के लिए इस संभावित पोषक संसाधन को कैसे आवंटित करती हैं। अंत में, ताजा और वृद्ध गोमूत्र की गंध का मूल्यांकन यह निर्धारित करने के लिए किया गया था कि क्या ये मेजबान और रक्त-पोषित Ans के लिए विश्वसनीय सुराग प्रदान करते हैं। इस क्षमता की खोज में पोषण संसाधन, अरेबियन्सिस ने देखे गए अंतर आकर्षण के पीछे रासायनिक सहसंबंधों की खोज की। 24 घंटे पुराने मूत्र में पहचाने गए वाष्पशील कार्बनिक यौगिकों (वीओसी) के सिंथेटिक गंध मिश्रण का क्षेत्र की स्थितियों के तहत आगे मूल्यांकन किया गया, प्रयोगशाला स्थितियों के तहत प्राप्त परिणामों का विस्तार किया गया और विभिन्न शारीरिक स्थितियों पर गोजातीय मूत्र गंध के प्रभाव का प्रदर्शन किया गया।मच्छर का आकर्षण। प्राप्त परिणाम इस बात की पुष्टि करते हैं कि An.अरेबियन्सिस जीवन इतिहास की विशेषताओं को प्रभावित करने के लिए कशेरुकियों के मूत्र में पाए जाने वाले नाइट्रोजनयुक्त यौगिकों को प्राप्त और वितरित करता है। इन परिणामों पर संभावित महामारी विज्ञान परिणामों के संदर्भ में चर्चा की जाती है और उनका उपयोग वेक्टर निगरानी और नियंत्रण के लिए कैसे किया जा सकता है।
एनोफ़ेलीज़ अरेबिकन्स (डोंगोला स्ट्रेन) को 25 ± 2 डिग्री सेल्सियस, 65 ± 5% आरएच और 12:12 घंटे प्रकाश: अंधेरे चक्र पर बनाए रखा गया था। लार्वा को आसुत जल से भरे प्लास्टिक ट्रे (20 सेमी × 18 सेमी × 7 सेमी) में पाला गया और टेट्रामिन® मछली का भोजन (टेट्रा वेर्के, मेले, डीई) खिलाया गया। प्यूपे को 30 मिलीलीटर कप (नोलाटो) में एकत्र किया गया था। हर्टिला, एस्टॉर्प, एसई) और फिर वयस्क उद्भव की अनुमति देने के लिए बगडोर्म पिंजरों (30 सेमी × 30 सेमी × 30 सेमी; मेगाव्यू साइंस, ताइचुंग, ताइवान) में स्थानांतरित कर दिया गया। वयस्कों को उभरने के 4 दिन बाद (डीपीई) तक 10% सुक्रोज समाधान एड लिबिटम प्रदान किया गया था, जिस बिंदु पर मेजबान की तलाश करने वाली महिलाओं को प्रयोग से तुरंत पहले आहार की पेशकश की गई थी, या प्रयोग से पहले आसुत जल के साथ रात भर भूखा रखा गया था, जैसा कि नीचे वर्णित है। फ्लाइट ट्यूब प्रयोगों के लिए उपयोग की जाने वाली मादाओं को केवल 4-6 घंटों के लिए पानी के एड लिबिटम के साथ भूखा रखा गया था। बाद के बायोएसेज़ के लिए रक्त-चूसने वाले मच्छरों को तैयार करने के लिए, 4 डीपीई मादाओं को मेम्ब्रेन फीडिंग सिस्टम (हेमोटेक डिस्कवरी वर्कशॉप, एक्रिंगटन, यूके) का उपयोग करके डिफाइब्रोटिक भेड़ का रक्त (हैटुनलैब, ब्रो, एसई) प्रदान किया गया था। पूरी तरह से भरी हुई मादाओं को फिर अलग-अलग पिंजरों में स्थानांतरित कर दिया गया और सीधे आहार प्रदान किया गया, जैसा कि नीचे वर्णित है, या 10% सुक्रोज विज्ञापन। नीचे वर्णित प्रयोगों से पहले 3 दिनों के लिए लिबिटम। बाद वाली महिलाओं को फ्लाइट ट्यूब बायोसेज़ के लिए इस्तेमाल किया गया और प्रयोगशाला में स्थानांतरित किया गया, और फिर प्रयोग से पहले 4-6 घंटे के लिए आसुत जल एड लिबिटम दिया गया।
वयस्क अरब महिला में मूत्र और यूरिया की खपत को मापने के लिए फीडिंग एसेज़ का उपयोग किया गया था। मेज़बान और रक्त-पोषित महिलाओं को 1% पतला ताजा और वृद्ध गोमूत्र, यूरिया की विभिन्न सांद्रता और 48 घंटे के लिए दो नियंत्रण (10% सुक्रोज और पानी) युक्त आहार प्रदान किया गया था। इसके अलावा, खाद्य रंग (1 मिलीग्राम एमएल -1 ज़ाइलीन साइनाइड एफएफ; सीएएस 2650-17-1; सिग्मा-एल्ड्रिच, स्टॉकहोम, एसई) को आहार में जोड़ा गया था और 250 μl माइक्रोसेंट्रीफ्यूज ट्यूबों में 4 × 4 मैट्रिक्स में आपूर्ति की गई थी (एक्सीजन साइंटिफिक, यूनियन सिटी, सीए, यूएस; चित्र 1ए) किनारे तक भरें (~300 μl)। मच्छरों के बीच प्रतिस्पर्धा और डाई रंग के संभावित प्रभावों से बचने के लिए, 10 मच्छरों को एक बड़े पेट्री डिश (12 सेमी व्यास और 6 सेमी ऊंचाई; सेमाडेनी, ओस्टरमुंडीजेन, सीएच; चित्र 1ए) में 25 पर पूर्ण अंधेरे में रखें। ± 2 सेमी डिग्री सेल्सियस और 65 ± 5% सापेक्ष आर्द्रता। इन प्रयोगों को 5 से 10 बार दोहराया गया। आहार के संपर्क में आने के बाद, मच्छरों को अगले विश्लेषण तक -20 डिग्री सेल्सियस पर रखा गया।
मेज़बान और रक्त-चूसने वाली मादा एनोफ़ेलीज़ अरेबियनस द्वारा अवशोषित गोजातीय मूत्र और यूरिया की तलाश करें। भोजन परीक्षण (ए) में, मादा मच्छरों को ताजा और पुराने गोमूत्र, यूरिया की विभिन्न सांद्रता, सुक्रोज (10%), और आसुत जल (एच 2 ओ) से युक्त आहार प्रदान किया गया था। मेज़बान (बी) और रक्त-पोषित (सी) मादाओं ने परीक्षण किए गए किसी भी अन्य आहार की तुलना में अधिक सुक्रोज को अवशोषित किया। ध्यान दें कि मेज़बान की तलाश करने वाली मादाएं 72 घंटे से भी कम समय में गोमूत्र को अवशोषित करती हैं। 168 घंटे का गोमूत्र (बी)। मूत्र की औसत कुल नाइट्रोजन सामग्री (± मानक विचलन) को इनसेट में दर्शाया गया है। मेज़बान-चाहने वाली (डी, एफ) और रक्त-चूसने वाली (ई, जी) महिलाएं खुराक-निर्भर तरीके से यूरिया लेती हैं। अलग-अलग अक्षरों के नामों के साथ सांस की मात्रा (डी, ई) एक-दूसरे से काफी अलग थीं (ट्यूकी के पोस्ट हॉक विश्लेषण का उपयोग करके एक तरफा एनोवा; पी <0.05)। त्रुटि पट्टियाँ माध्य (बीई) की मानक त्रुटि का प्रतिनिधित्व करती हैं। सीधी धराशायी रेखा लॉग-रैखिक प्रतिगमन रेखा (एफ, जी) का प्रतिनिधित्व करती है
अवशोषित भोजन को छोड़ने के लिए, मच्छरों को व्यक्तिगत रूप से 230 μl आसुत जल वाले 1.5 मिलीलीटर माइक्रोसेंट्रीफ्यूज ट्यूबों में रखा गया था और ऊतक को एक डिस्पोजेबल मूसल और ताररहित मोटर (वीडब्ल्यूआर इंटरनेशनल, लुंड, एसई) का उपयोग करके बाधित किया गया था, इसके बाद 10 मिनट के लिए 10 krpm पर सेंट्रीफ्यूजेशन किया गया था। सतह पर तैरनेवाला (200 μl) को 96-वेल माइक्रोप्लेट (सिग्मा-एल्ड्रिच) और अवशोषण (λ) में स्थानांतरित किया गया था। 620) एक स्पेक्ट्रोफोटोमीटर-आधारित माइक्रोप्लेट रीडर (स्पेक्ट्रोस्टार® नैनो, बीएमजी लैबटेक, ऑर्टनबर्ग, डीई) एनएम) का उपयोग करके निर्धारित किया गया था। वैकल्पिक रूप से, मच्छरों को 1 मिलीलीटर आसुत जल में डाला गया था, जिसमें से 900 μl को स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिक विश्लेषण (λ 620 एनएम; यूवी 1800, शिमदज़ु, किस्टा, एसई) के लिए एक क्यूवेट में स्थानांतरित किया गया था। आहार सेवन की मात्रा निर्धारित करने के लिए, एक मानक वक्र तैयार किया गया था 1 मिलीग्राम एमएल-1 ज़ाइलीन साइनाइड के 0.2 μl से 2.4 μl प्राप्त करने के लिए क्रमिक कमजोर पड़ने से। फिर, ज्ञात डाई सांद्रता के ऑप्टिकल घनत्व का उपयोग प्रत्येक मच्छर द्वारा खाए गए भोजन की मात्रा निर्धारित करने के लिए किया गया था।
वॉल्यूम डेटा का विश्लेषण विचरण (एनोवा) के एक-तरफ़ा विश्लेषण का उपयोग करके किया गया, जिसके बाद तुकी की पोस्ट हॉक जोड़ीदार तुलना (जेएमपी प्रो, वी14.0.0, एसएएस इंस्टीट्यूट इंक, कैरी, एनसी, यूएस, 1989-2007) का उपयोग किया गया। , सैन डिएगो, सीए, यूएस)।
प्रत्येक आयु वर्ग से लगभग 20 μl मूत्र के नमूने क्रोमोसॉर्ब® W/AW (10 mg 80/100 मेश, सिग्मा एल्ड्रिच) पर बंधे थे और टिन कैप्सूल (8 मिमी × 5 मिमी) में बंद थे। ताजा और पुराने मूत्र में नाइट्रोजन सामग्री निर्धारित करने के लिए कैप्सूल को CHNS/O विश्लेषक (फ्लैश 2000, थर्मो फिशर साइंटिफिक, वाल्थम, एमए, यूएस) के दहन कक्ष में डाला गया था। निर्माता का प्रोटोकॉल। कुल नाइट्रोजन (जी एन एल-1) को एक मानक के रूप में उपयोग की जाने वाली ज्ञात यूरिया सांद्रता के आधार पर निर्धारित किया गया था।
मेज़बान की तलाश करने वाली और रक्त-चूसने वाली मादा जीवित रहने पर आहार के प्रभाव का आकलन करने के लिए, मच्छरों को व्यक्तिगत रूप से बड़े पेट्री डिश (व्यास में 12 सेमी और ऊंचाई में 6 सेमी; सेमाडेनी) में रखा गया था, जिसमें वेंटिलेशन और भोजन की आपूर्ति के लिए ढक्कन (व्यास में 3 सेमी) में एक जाल से ढका हुआ छेद था। आहार 4 डीपीई के बाद सीधे प्रदान किया गया था और इसमें 1% पतला ताजा और पुराना गोमूत्र, यूरिया की चार सांद्रता, और दो नियंत्रण, 10% सुक्रोज और पानी शामिल था। प्रत्येक आहार को एक पाइप में डाला गया था। डेंटल टैम्पोन (डीएबी डेंटल एबी, अप्प्लैंड्स वास्बी, एसई) को 5 मिलीलीटर सिरिंज (थर्मो फिशर साइंटिफिक, गोथेनबर्ग, एसई) में डाला जाता है, प्लंजर को हटा दिया जाता है, और पेट्री डिश के ऊपर रख दिया जाता है (चित्र 1).1ए)। आहारों के बीच उत्तरजीविता वितरण तुलनाओं की तुलना करने के लिए कपलान-मेयर उत्तरजीविता वक्र और लॉग-रैंक परीक्षणों का उपयोग करके विभिन्न आहारों का सांख्यिकीय विश्लेषण किया गया (आईबीएम एसपीएसएस सांख्यिकी 24.0.0.0)।
एटिसानो एट अल पर आधारित एक कस्टम मच्छर उड़ान मिल। [17], जो सामने और पीछे के पैनल के बिना 5 मिमी मोटे स्पष्ट ऐक्रेलिक पैनल (10 सेमी चौड़ा x 10 सेमी लंबा x 10 सेमी ऊंचा) से बना है (चित्र 3: शीर्ष)। उसी सामग्री (6.5 सेमी एल) ने ऊर्ध्वाधर ट्यूब को एक बंधी हुई भुजा बनाने के लिए विभाजित किया और एक भुजा जो प्रकाश-बाधित संकेत के रूप में एल्यूमीनियम पन्नी के एक छोटे टुकड़े को ले गई।
24 घंटे भूखी रहने वाली मादाओं को संयम से पहले 30 मिनट के लिए उपरोक्त आहार दिया गया था। पूरी तरह से खिलाई गई मादा मच्छरों को 2-3 मिनट के लिए बर्फ पर व्यक्तिगत रूप से संवेदनाहारी किया गया था और मधुमक्खियों के मोम के साथ कीड़ों के पिन से जोड़ा गया था (जोएल स्वेन्सन्स वैक्सफैब्रिक एबी, मुनका लजुंगबी, एसई) और फिर क्षैतिज ट्यूबों की भुजाओं से बांध दिया गया था। फ्लाइंग मिल। प्रति उड़ान क्रांतियों को एक कस्टम-निर्मित डेटा लॉगर द्वारा रिकॉर्ड किया गया था, फिर पीसी का उपयोग करके संग्रहीत और प्रदर्शित किया गया था -लैब 2000™ सॉफ्टवेयर (v4.01; वेलेमैन, गेवरे, बीई)। फ्लाइट मिल को जलवायु-विनियमित कमरे (12 घंटे: 12 घंटे, प्रकाश: अंधेरा, 25 ± 2 डिग्री सेल्सियस, 65 ± 5% आरएच) में रखा गया था।
उड़ान गतिविधि के पैटर्न की कल्पना करने के लिए, 24 घंटे की अवधि में प्रति घंटे उड़ाई गई कुल दूरी (एम) और लगातार उड़ान गतिविधियों की कुल संख्या की गणना की गई। इसके अलावा, उपचार के दौरान अलग-अलग महिलाओं द्वारा उड़ाई गई औसत दूरी की तुलना की गई और एक-तरफ़ा एनोवा और तुकी के पोस्ट हॉक विश्लेषण (जेएमपी प्रो, वी14.0.0, एसएएस इंस्टीट्यूट इंक) का उपयोग करके विश्लेषण किया गया, जहां औसत दूरी को एक आश्रित चर माना जाता था, जबकि उपचार एक स्वतंत्र कारक है। इसके अतिरिक्त, राउंड की औसत संख्या की गणना की जाती है 10 मिनट की वृद्धि में.
An.arabiensis के प्रजनन प्रदर्शन पर आहार के प्रभाव का आकलन करने के लिए, छह मादाओं (4 डीपीई) को रक्त संग्रह के बाद सीधे बगडोर्म पिंजरों (30 सेमी × 30 सेमी × 30 सेमी) में स्थानांतरित किया गया और फिर ऊपर बताए अनुसार 48 घंटे के लिए प्रायोगिक आहार प्रदान किया गया। फिर आहार हटा दिया गया और 20 मिलीलीटर आसुत जल से भरा स्पॉनिंग कप (30 मिलीलीटर; नोलाटो हर्टिला) तीसरे दिन 48 घंटों के लिए प्रदान किया गया, हर 24 घंटे में बदलते हुए। प्रत्येक आहार आहार को 20-50 बार पीटें। प्रत्येक प्रायोगिक पिंजरे के लिए अंडों की गिनती की गई और उन्हें रिकॉर्ड किया गया। लीका कैमरा (डीएफसी) 320 आर 2 से सुसज्जित डायलक्स -20 माइक्रोस्कोप (डीएम 1000; अर्न्स्ट लीट्ज़ वेट्ज़लर, वेट्ज़लर, डीई) का उपयोग करके अलग-अलग अंडों के औसत आकार और लंबाई भिन्नता (एन ≥ 200 प्रति आहार) का आकलन करने के लिए अंडों के उप-नमूनों का उपयोग किया गया;लीका माइक्रोसिस्टम्स लिमिटेड, डीई)। शेष अंडों को 24 घंटे के लिए मानक पालन स्थितियों के तहत एक जलवायु-नियंत्रित कमरे में रखा गया था, और जैसा कि ऊपर वर्णित है, हाल ही में उभरे प्रथम इंस्टार लार्वा (एन ≥ 200 प्रति आहार) का एक उप-नमूना मापा गया था। उपचार और एक-तरफ़ा एनोवा और तुकी के पोस्ट हॉक विश्लेषण (जेएमपी प्रो, वी 14.0.0, एसएएस इंस्टीट्यूट इंक) का उपयोग करके अंडों की संख्या और अंडों और लार्वा के आकार की तुलना की गई थी।
ताजा (सैंपलिंग के बाद 1 घंटे), 24 घंटे, 72 घंटे और 168 घंटे पुराने मूत्र से हेडस्पेस वाष्पशील पदार्थ ज़ेबू मवेशियों, अर्सी नस्लों से एकत्र किए गए नमूनों से एकत्र किए गए थे। सुविधा के लिए, मूत्र के नमूने सुबह जल्दी एकत्र किए गए थे, जबकि गायें अभी भी खलिहान में थीं। मूत्र के नमूने 10 व्यक्तियों से एकत्र किए गए थे और प्रत्येक नमूने के 100-200 मिलीलीटर को व्यक्तिगत पॉलियामाइड बेकिंग बैग (टॉपपिट्स कोफ्रेस्को, फ्रिस्कहल्टेप्रोडक्टे) में स्थानांतरित किया गया था। जीएमबीएच एंड कंपनी, मिंडेन, डीई) विनाइल क्लोराइड प्लास्टिक ड्रम में ढक्कन के साथ 3 एल पॉलियामाइड में। प्रत्येक गोजातीय मूत्र नमूने से हेडस्पेस वाष्पशील पदार्थ या तो सीधे (ताजा) या 24 घंटे, 72 घंटे और 168 घंटे के लिए कमरे के तापमान पर परिपक्वता के बाद एकत्र किए गए थे, यानी प्रत्येक मूत्र नमूना प्रत्येक आयु वर्ग का प्रतिनिधि था।
हेडस्पेस वाष्पशील संग्रह के लिए, एक डायाफ्राम वैक्यूम पंप (केएनएफ न्यूबर्गर, फ्रीबर्ग, डीई) का उपयोग करके 2.5 घंटे के लिए पॉलियामाइड बैग के माध्यम से सक्रिय कार्बन-फ़िल्टर्ड गैस धारा (100 मिलीलीटर मिनट -1) को सोखने वाले कॉलम में प्रसारित करने के लिए एक बंद-लूप प्रणाली का उपयोग किया गया था। नियंत्रण के रूप में, हेडस्पेस संग्रह एक खाली पॉलियामाइड बैग से किया गया था। सोखना कॉलम टेफ्लॉन टयूबिंग (5.5 सेमी x 3 मिमी आईडी) से बना था ) ग्लास वूल प्लग के बीच 35 मिलीग्राम पोरापाक क्यू (50/80 जाल; वाटर्स एसोसिएट्स, मिलफोर्ड, एमए, यूएस) युक्त। उपयोग से पहले, कॉलम को 1 मिलीलीटर रेडिस्टिल्ड एन-हेक्सेन (मर्क, डार्मस्टाड, डीई) और 1 मिलीलीटर पेंटेन (99.0% शुद्ध विलायक जीसी ग्रेड, सिग्मा एल्ड्रिच) के साथ फ्लश किया गया था। अधिशोषित वाष्पशील को 400 μl के साथ निस्तारित किया गया था। पेंटेन.हेडस्पेस संग्रहों को एकत्रित किया गया और फिर आगे के विश्लेषण के लिए उपयोग किए जाने तक -20 डिग्री सेल्सियस पर संग्रहीत किया गया।
ताजा, 24 घंटे, 72 घंटे और 168 घंटे की उम्र वाले मूत्र से एकत्र किए गए मेज़बान और रक्त खाने वाले एन.हेडस्पेस वाष्पशील अर्क की व्यवहारिक प्रतिक्रियाओं का विश्लेषण सीधे ग्लास ट्यूब ओल्फैक्टोमीटर [18] का उपयोग करके अरेबिडोप्सिस मच्छरों से वाष्पशील अर्क के लिए किया गया था। प्रयोग जेडटी 13-15 के दौरान आयोजित किए गए थे, जो एन की घर की तलाश गतिविधि की चरम अवधि थी। अरब [19]। एक ग्लास ट्यूब घ्राण मीटर (80 सेमी × 9.5 सेमी आईडी) को ऊपर से 3 ± 1 एलएक्स लाल रोशनी से रोशन किया गया था। चारकोल फ़िल्टर और आर्द्र वायु प्रवाह (25 ± 2 डिग्री सेल्सियस, 65 ± 2% सापेक्ष आर्द्रता) 30 सेमी एस-1 पर बायोएसेय से गुजरा। हवा को स्टेनलेस स्टील जाल स्क्रीन की एक श्रृंखला के माध्यम से पारित किया जाता है, जिससे एक लामिना का प्रवाह और एक समान प्लम संरचना बनती है। डेंटल टैम्पोन डिस्पेंसर (4 सेमी × 2% सापेक्ष आर्द्रता) 1 सेमी; एल:डी; डीएबी डेंटल एबी), ओल्फेक्टोमीटर के घुमावदार छोर पर 5 सेमी कुंडल से निलंबित, हर 5 मिनट में उत्तेजक परिवर्तन के साथ। विश्लेषण के लिए, प्रत्येक हेडस्पेस अर्क के 10 μl, पतला 1:10, एक उत्तेजना के रूप में इस्तेमाल किया गया था। पेंटेन की एक समान मात्रा को नियंत्रण के रूप में इस्तेमाल किया गया था। व्यक्तिगत मेजबान-चाहने वाले या रक्त-चूसने वाले मच्छरों को प्रयोग शुरू होने से 2-3 घंटे पहले व्यक्तिगत रिलीज पिंजरों में रखा गया था। .रिलीज़ पिंजरे को घ्राणमापी के नीचे की ओर रखा गया था, और मच्छरों को 1 मिनट के लिए अनुकूल होने दिया गया था, और फिर पिंजरे के तितली वाल्व को छोड़ने के लिए खोला गया था। उपचार या नियंत्रण के लिए आकर्षण का विश्लेषण उन मच्छरों के अनुपात के रूप में किया गया था जो रिहाई के 5 मिनट के भीतर स्रोत के संपर्क में आए थे। प्रत्येक हेडस्पेस वाष्पशील अर्क और नियंत्रण को कम से कम 30 बार दोहराया गया था, और किसी भी एक दिन के प्रभाव से बचने के लिए, प्रत्येक प्रयोगात्मक दिन पर समान संख्या में उपचार और नियंत्रण का परीक्षण किया गया था। मेजबान और रक्त-पोषित उत्तर-अरबी बनाम हेडस्पेस सेट की प्रतिक्रियाओं का विश्लेषण नाममात्र लॉजिस्टिक रिग्रेशन का उपयोग करके किया गया, जिसके बाद विषम अनुपात (जेएमपी प्रो, वी14.0.0, एसएएस इंस्टीट्यूट इंक) के लिए जोड़ीवार तुलना की गई।
एन की स्पॉनिंग प्रतिक्रिया। ताजा और वृद्ध गोमूत्र से हेडस्पेस अर्क का बगडोर्म पिंजरों (30 सेमी × 30 सेमी × 30 सेमी; मेगाव्यू साइंस) में विश्लेषण किया गया। 20 एमएल आसुत जल से भरे प्लास्टिक के कप (30 एमएल; नोलाटो हर्टिला) ने स्पॉनिंग सब्सट्रेट प्रदान किया और पिंजरे के विपरीत कोनों में 24 सेमी की दूरी पर रखा गया। उपचार कप को प्रत्येक हेडस्पेस अर्क के 10 μl के साथ समायोजित किया गया था। 1:10 तनुकरण। नियंत्रण कप को समायोजित करने के लिए समान मात्रा में पेंटेन का उपयोग किया गया था। स्थिति प्रभावों को नियंत्रित करने के लिए प्रत्येक प्रयोग के बीच उपचार और नियंत्रण कप का आदान-प्रदान किया गया था। दस रक्त-पोषित मादाओं को ZT 9-11 पर प्रायोगिक पिंजरों में छोड़ा गया था और कप में अंडे 24 घंटे बाद गिने गए थे। स्पॉनिंग इंडेक्स की गणना करने का सूत्र है: (उपचार कप में रखे गए अंडों की संख्या - नियंत्रण कप में रखे गए अंडों की संख्या) / (अंडे की कुल संख्या)। प्रत्येक उपचार 8 बार दोहराया गया.
मादा An.arabiensis का गैस क्रोमैटोग्राफिक और इलेक्ट्रॉन एंटीना पैटर्न डिटेक्शन (जीसी-ईएडी) विश्लेषण पहले वर्णित के रूप में किया गया था [20]। संक्षेप में, एचपी -5 कॉलम (30 मीटर × 0.25 मिमी आईडी, 0.25 माइक्रोन फिल्म मोटाई, एगिलेंट टेक्नोलॉजीज) से सुसज्जित एगिलेंट टेक्नोलॉजीज 6890 जीसी (सांता क्लारा, सीए, यूएस) का उपयोग करके ताजा हेडस्पेस वाष्पशील अर्क को अलग किया गया था।और उम्र बढ़ने वाला मूत्र। हाइड्रोजन का उपयोग 45 सेमी एस-1 की औसत रैखिक प्रवाह दर के साथ मोबाइल चरण के रूप में किया गया था। प्रत्येक नमूना (2 μl) को 225 डिग्री सेल्सियस के इनलेट तापमान के साथ स्प्लिटलेस मोड में 30 सेकंड के लिए इंजेक्ट किया गया था। जीसी ओवन तापमान को 10 डिग्री सेल्सियस मिनट-1 पर 35 डिग्री सेल्सियस (3 मिनट होल्ड) से 300 डिग्री सेल्सियस (10 मिनट होल्ड) तक प्रोग्राम किया गया था। जीसी एफ्लुएंट स्प्लिटर में, 4 पीएसआई नाइट्रोजन को जोड़ा गया और फ्लेम आयनीकरण डिटेक्टर और ईएडी के बीच गेरस्टेल 3डी/2 लो डेड वॉल्यूम क्रॉस (गेरस्टेल, मुल्हेम, डीई) में 1:1 में विभाजित किया गया। ईएडी के लिए जीसी प्रवाह केशिका को गेरस्टेल ओडीपी-2 ट्रांसफर लाइन के माध्यम से पारित किया गया था, जो जीसी ओवन तापमान प्लस 5 डिग्री सेल्सियस को एक ग्लास ट्यूब (10 सेमी × 8 मिमी) में ट्रैक करता है, जहां इसे कार्बन-फ़िल्टर्ड, आर्द्र हवा (1.5 एल मिनट) के साथ मिलाया गया था। −1).एंटीना को ट्यूब के आउटलेट से 0.5 सेमी की दूरी पर रखा गया था। प्रत्येक व्यक्तिगत मच्छर में एक प्रतिकृति होती थी, और मेजबान की तलाश करने वाले मच्छरों के लिए, प्रत्येक उम्र के मूत्र के नमूनों पर कम से कम तीन प्रतिकृति बनाई गई थीं।
जीसी-ईएडी विश्लेषण में एंटेना प्रतिक्रिया प्राप्त करने के लिए एक संयुक्त जीसी और मास स्पेक्ट्रोमीटर (जीसी-एमएस; 6890 जीसी और 5975 एमएस; एगिलेंट टेक्नोलॉजीज) का उपयोग करके ताजा और वृद्ध गोजातीय मूत्र के हेडस्पेस संग्रह में बायोएक्टिव यौगिकों की पहचान, 70 ईवी पर इलेक्ट्रॉन प्रभाव आयनीकरण मोड में काम कर रही है। जीसी एक एचपी -5 एमएस यूआई-लेपित फ्यूज्ड सिलिका केशिका कॉलम (60 मीटर × 0.25) से सुसज्जित था। मिमी आंतरिक व्यास, 0.25 μm फिल्म मोटाई) 35 सेमी s-1 की औसत रैखिक प्रवाह दर के साथ मोबाइल चरण के रूप में हीलियम का उपयोग करते हुए 2 μl नमूना जीसी-ईएडी विश्लेषण के लिए समान इंजेक्टर सेटिंग्स और ओवन तापमान का उपयोग करके इंजेक्ट किया गया था। यौगिकों की पहचान कस्टम लाइब्रेरी और एनआईएसटी14 लाइब्रेरी (एगिलेंट) की तुलना में उनके अवधारण समय (कोवेट इंडेक्स) और द्रव्यमान स्पेक्ट्रा के आधार पर की गई थी। पहचाने गए यौगिकों की पुष्टि प्रामाणिक मानकों को इंजेक्ट करके की गई थी। (अतिरिक्त फ़ाइल 1: तालिका एस2)। परिमाणीकरण के लिए, हेप्टाइल एसीटेट (10 एनजी, 99.8% रासायनिक शुद्धता, एल्ड्रिच) को बाहरी मानक के रूप में इंजेक्ट किया गया था।
मेज़बान-चाहने वाले और रक्त-चूसने वाले Ans.arabiensis को आकर्षित करने के लिए ताजा और पुराने मूत्र में पहचाने गए बायोएक्टिव यौगिकों से युक्त एक सिंथेटिक गंध मिश्रण की प्रभावकारिता का मूल्यांकन करना, ऊपर दिए गए समान घ्राणमापी और प्रोटोकॉल का उपयोग करना। सिंथेटिक मिश्रण ने ताजा, 24-घंटे, 48-घंटे, 72-घंटे और 168-घंटे पुराने मूत्र के मिश्रित हेडस्पेस अस्थिर अर्क में यौगिकों की संरचना और अनुपात की नकल की (चित्र 5D-G) ; अतिरिक्त फ़ाइल 1: तालिका एस2)।विश्लेषण के लिए, मेजबान और रक्त-चूसने वाले मच्छरों के आकर्षण का आकलन करने के लिए, लगभग 140-2400 एनजी एच-1 से लेकर समग्र रिलीज दर के साथ, पूरी तरह से सिंथेटिक मिश्रण के 1:100 तनुकरण के 10 μl का उपयोग करें। इसके बाद, परीक्षण पूर्ण मिश्रण पर किया जाता है, जिसमें पूरे मिश्रण के एकल यौगिकों के घटिया मिश्रण को हटा दिया जाता है। मेजबान और रक्त-पोषित उत्तर अरब बनाम से प्रतिक्रिया लें। नाममात्र लॉजिस्टिक रिग्रेशन का उपयोग करके सिंथेटिक और घटिया मिश्रण का विश्लेषण किया गया, जिसके बाद विषम अनुपात (जेएमपी प्रो, वी14.0.0, एसएएस इंस्टीट्यूट इंक) के लिए जोड़ीवार तुलना की गई।
यह आकलन करने के लिए कि क्या गोमूत्र मलेरिया के मच्छरों के लिए मेजबान आवास संकेत के रूप में काम कर सकता है, ताजा और वृद्ध गोमूत्र, जैसा कि ऊपर वर्णित है, एकत्र किया गया और पानी को जालीदार 3 लीटर बाल्टी (100 मिलीलीटर) में रखा गया और मेजबान चारा जाल में रखा गया।(बीजी-एचडीटी संस्करण; बायोजेंट्स, रेगेन्सबर्ग, डीई)। चरागाह में 50 मीटर की दूरी पर दस जाल लगाए गए, ग्रामीण समुदाय से 400 मीटर (सिले, इथियोपिया, 5°53´24´´उत्तर, 37°29´24´´पूर्व) और कोई मवेशी नहीं, स्थायी प्रजनन स्थलों और गांवों में। एक मेज़बान की उपस्थिति का अनुकरण करने के लिए पांच जालों को गर्म किया गया, जबकि पांच जालों को बिना गर्म किए छोड़ दिया गया। प्रत्येक उपचार स्थान को रात में घुमाया जाता है कुल पांच रातों के लिए। अलग-अलग उम्र के मूत्र के साथ जाल में पकड़े गए मच्छरों की संख्या की तुलना बीटा द्विपद वितरण (जेएमपी प्रो, v14.0.0, एसएएस इंस्टीट्यूट इंक) के साथ लॉजिस्टिक रिग्रेशन का उपयोग करके की गई थी।
इथियोपिया के ओरोमिया क्षेत्र के माकी शहर के पास एक मलेरिया-स्थानिक गांव में (8° 11′ 08″ उत्तर, 38° 81′ 70″ पूर्व; चित्र 6ए)। यह अध्ययन लंबी बारिश के मौसम के साथ-साथ वार्षिक इनडोर अवशिष्ट छिड़काव से पहले मध्य अगस्त और मध्य सितंबर के बीच आयोजित किया गया था। गांव के बाहरी इलाके में स्थित पांच जोड़े घरों (20-50 मीटर की दूरी पर) को अध्ययन के लिए चुना गया था (चित्र)। 6ए)। घरों का चयन करने के लिए उपयोग किए जाने वाले मानदंड थे: घर में किसी भी जानवर को अनुमति नहीं थी, घर के अंदर खाना पकाने (जलाऊ लकड़ी या लकड़ी का कोयला बनाने) की अनुमति नहीं थी (कम से कम परीक्षण अवधि के दौरान), और अधिकतम दो निवासियों वाले घर, कीटनाशकों में सो रहे थे।उपचारित मच्छरदानी के तहत। वर्ल्ड मेडिकल एसोसिएशन हेलसिंकी की घोषणा द्वारा स्थापित दिशानिर्देशों के अनुसार, अदीस अबाबा विश्वविद्यालय के प्राकृतिक विज्ञान संकाय (सीएनएस-आईआरबी) के संस्थागत अनुसंधान नैतिकता समीक्षा बोर्ड (आईआरबी/022/2016) द्वारा नैतिक अनुमोदन प्रदान किया गया है। स्वास्थ्य विस्तार कर्मचारियों की सहायता से घर के प्रत्येक मुखिया से सहमति प्राप्त की गई थी। पूरी प्रक्रिया को जिला और वार्ड ('केबेले') स्तर पर स्थानीय प्रशासन द्वारा समर्थन दिया गया है। प्रयोगात्मक डिजाइन का पालन किया गया एक 2 × 2 लैटिन वर्ग डिजाइन, जिसमें सिंथेटिक मिश्रण और नियंत्रण को पहली रात में जोड़े गए घरों को सौंपा गया था और अगली प्रायोगिक रात में घरों के बीच अदला-बदली की गई थी। इस प्रक्रिया को दस बार दोहराया गया था। इसके अलावा, चयनित घरों में मच्छरों की गतिविधि का अनुमान लगाने के लिए, सीडीसी जाल को दिन के एक ही समय में क्षेत्र परीक्षण की शुरुआत, मध्य और अंत में लगातार पांच रातों तक चलाने के लिए निर्धारित किया गया था।
छह बायोएक्टिव यौगिकों वाले एक सिंथेटिक मिश्रण को हेप्टेन (97.0% विलायक जीसी ग्रेड, सिग्मा एल्ड्रिच) में घोल दिया गया और एक कॉटन विक डिस्पेंसर [20] का उपयोग करके 140 एनजी एच-1 पर छोड़ा गया। बाती डिस्पेंसर ने 12 घंटे के प्रयोग के दौरान सभी यौगिकों को स्थिर अनुपात में जारी करने की अनुमति दी। हेप्टेन को एक नियंत्रण के रूप में इस्तेमाल किया गया था। शीशी को रोग नियंत्रण और रोकथाम केंद्र (सीडीसी) प्रकाश जाल (जॉन डब्ल्यू) के प्रवेश बिंदु के बगल में निलंबित कर दिया गया था। . हॉक कंपनी, गेन्सविले, एफएल, यूएस; चित्र 6ए)। जालों को जमीन से 0.8 - 1 मीटर ऊपर, बिस्तर के पैर के पास लटकाया गया था, और एक स्वयंसेवक एक अनुपचारित मच्छरदानी के नीचे सोया और 18:00 और 06:30 के बीच ऑपरेशन किया। लिंग और शारीरिक स्थिति (बिना भोजन किए, खिलाए गए, अर्ध-गर्भवती और गर्भवती [21]) द्वारा पकड़े गए मच्छरों को बाद में प्रजातियों के रूपात्मक पहचान के लिए पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन (पीसीआर) विश्लेषण का उपयोग करके जांच की गई। इसकी पहचान ए. गैंबिया एसएल के रूप में की गई। परिसर के सदस्य [23]। क्षेत्र अध्ययन में, युग्मित घरों के जाल फंसाने का विश्लेषण एक नाममात्र लॉजिस्टिक फिट मॉडल का उपयोग करके किया गया था, जहां आकर्षण निर्भर चर था और उपचार (सिंथेटिक मिश्रण बनाम नियंत्रण) निश्चित प्रभाव था (जेएमपी® 14.0)।0. एसएएस इंस्टीट्यूट इंक.)।यहां, हम संभावना अनुपात परीक्षण से χ2 और पी-मानों की रिपोर्ट करते हैं।
मूल्यांकन करें कि क्या यह सुरक्षित है। अरबिएन्सिस मेजबान-चाहने वाली और रक्त-पोषित महिला खिला परीक्षणों (छवि 1 ए) के बाद 4 दिनों के लिए प्रशासन के 48 घंटों के भीतर, प्रत्यक्ष भोजन द्वारा मूत्र, इसका मुख्य नाइट्रोजन स्रोत, यूरिया प्राप्त करने में सक्षम था। मेजबान-चाहने वाली और रक्त-चूसने वाली दोनों महिलाओं ने किसी भी अन्य आहार या पानी (एफ (5,426) = 20.15, पी <0.0001 और एफ (5,) की तुलना में काफी अधिक सुक्रोज अवशोषित किया। 299) = 56.00, पी <0.0001, क्रमशः; चित्र 1 बी, सी)। इसके अलावा, मेजबान की तलाश करने वाली महिलाओं ने 168 घंटे के मूत्र की तुलना में 72 घंटों में कम मूत्र खाया (चित्र 1 बी)। जब यूरिया युक्त आहार की पेशकश की गई, तो मेजबान की तलाश करने वाली महिलाओं ने अन्य सभी सांद्रता और पानी की तुलना में 2.69 मिमी पर काफी अधिक मात्रा में यूरिया को अवशोषित किया, जबकि 10% सुक्रोज (एफ) से अप्रभेद्य था। (10,813) = 15.72, पी <0.0001; चित्र 1डी)। फ़्लेबोटोमाइज़्ड मादाओं ने सबसे कम सांद्रता में मेजबान-चाहने वाली मादाओं की तुलना में अधिक यूरिया को अवशोषित किया, और इन महिलाओं ने उच्च सांद्रता (एफ (1,953) = 78.82, पी <0.0001) पर समान मात्रा में यूरिया को अवशोषित किया;चित्र 1एफ, जी)। जबकि यूरिया युक्त आहार के सेवन में इष्टतम मूल्य (चित्र 1डी,ई) दिखाई देते हैं, दोनों शारीरिक अवस्थाओं में महिलाएं लॉग-लीनियर फैशन में यूरिया सांद्रता की पूरी श्रृंखला में अवशोषित यूरिया की मात्रा को नियंत्रित करने में सक्षम थीं (चित्र 1एफ,जी)।).इसी तरह, मच्छर अवशोषित मूत्र की मात्रा को नियंत्रित करके अपने नाइट्रोजन ग्रहण को नियंत्रित करते हैं, क्योंकि मूत्र में नाइट्रोजन की मात्रा अवशोषित मात्रा में परिलक्षित होती है (चित्रा 1 बी, सी और बी इनसेट)।
मेजबान की तलाश करने वाले और रक्त-चूसने वाले मच्छरों के जीवित रहने पर मूत्र और यूरिया के प्रभाव का आकलन करने के लिए, महिलाओं को सभी चार उम्र (ताजा, 24 घंटे, 72 घंटे, और जमाव के बाद 168 घंटे) का मूत्र और यूरिया सांद्रता की एक सीमा, साथ ही आसुत जल और 10% सुक्रोज नियंत्रण के रूप में दिया गया (चित्रा 2 ए)। इस उत्तरजीविता विश्लेषण से पता चला कि आहार का मेजबान की तलाश करने वाली महिलाओं में समग्र अस्तित्व पर महत्वपूर्ण प्रभाव पड़ा (मूत्र: χ2 = 1) 08.5, डीएफ = 5, पी < 0.0001; यूरिया: χ2 = 122.8, डीएफ = 5, पी < 0.0001; चित्र 2बी, सी) और रक्त-पोषित महिलाएं (मूत्र: χ2 = 93.0, डीएफ = 5, पी < 0.0001; यूरिया: χ2 = 137.9, डीएफ = 5, पी <0। 0001; चित्र 2डी,ई)। यूरिया जल नियंत्रण से अधिक समय तक जीवित रहता है (पी <0.04) (चित्र)।2सी)।पानी की तुलना में, ताजा मूत्र और 24 घंटे का मूत्र पीने वाली महिलाएं अधिक समय तक जीवित रहीं (क्रमशः पी = 0.001 और पी = 0.012; चित्र 2डी), जबकि 72 घंटे के मूत्र का सेवन करने वाली महिलाएं कम ताजा मूत्र और 24 घंटे के पुराने मूत्र का सेवन करने वाली महिलाओं की तुलना में अधिक समय तक जीवित रहीं (क्रमशः पी <0.0001 और पी = 0.013; चित्र 2डी)।जब 135 एमएम यूरिया खिलाया गया, तो रक्त-पोषित महिलाएं अधिक समय तक जीवित रहीं। यूरिया और पानी की अन्य सभी सांद्रता की तुलना में (पी <0.013; चित्र 2ई)।
गोमूत्र और यूरिया पर भोजन करने वाली मेजबान और रक्त-चूसने वाली मादा एनोफिलिस अरेबिनिस का अस्तित्व। बायोसे (ए) में, मादा मच्छरों को ताजा और वृद्ध गोमूत्र, यूरिया, सुक्रोज (10%) और आसुत जल (एच 2 ओ) की विभिन्न सांद्रता वाला आहार प्रदान किया गया था। मेजबान-चाहने वाले (बी, सी) और रक्त-चूसने (डी, ई) मच्छरों का अस्तित्व हर 12 घंटे में दर्ज किया गया था जब तक कि सभी मादाएं मूत्र (बी, डी) और यूरिया (सी, ई) नहीं खाती थीं। ), और नियंत्रण, सुक्रोज और पानी, मर चुके हैं
24 घंटे की अवधि में उड़ान मिल परीक्षण में निर्धारित कुल दूरी और राउंड की संख्या मेजबान की तलाश करने वाले और रक्त-चूसने वाले मच्छरों के बीच भिन्न थी, जिसने कुल मिलाकर कम उड़ान गतिविधि दिखाई (छवि 3)। मेजबान की तलाश करने वाले मच्छर जो ताजा और पुराना मूत्र या सुक्रोज और पानी प्रदान करते थे, उन्होंने अलग-अलग उड़ान पैटर्न दिखाए (चित्र 3), ताजा मूत्र खाने वाली मादाएं सुबह के समय अधिक सक्रिय थीं, जबकि 24- और 168 घंटे की आयु वाले मच्छर जो मूत्र पर भोजन करते थे, उन्होंने अलग-अलग उड़ान पैटर्न प्रदर्शित किए और मुख्य रूप से अलग थे। सुक्रोज या 72 घंटे का मूत्र प्रदान करने वाली मादा मच्छरों ने पूरे 24 घंटे की अवधि में गतिविधि दिखाई, जबकि पानी प्रदान करने वाली मादा मच्छर मध्य अवधि के दौरान अधिक सक्रिय थीं। सुक्रोज खाने वाले मच्छरों ने देर रात और सुबह जल्दी गतिविधि के उच्चतम स्तर का प्रदर्शन किया, जबकि 72 घंटे पुराने मूत्र का सेवन करने वाली मच्छरों की गतिविधि में 24 घंटों में लगातार गिरावट देखी गई (चित्रा 3)।
गोमूत्र और यूरिया खाने वाली शिकारी रक्त-चूसने वाली मादा एनोफिलिस अरेबिनिस का उड़ान प्रदर्शन। उड़ान मिल परीक्षण में, ताजा और पुराने गोमूत्र, यूरिया, सुक्रोज (10%) और आसुत जल (H2O) की विभिन्न सांद्रता पर भोजन करने वाली मादा मच्छरों को क्षैतिज, स्वतंत्र रूप से घूमने वाली भुजाओं (ऊपर) से बांधा गया था। मेजबान-चाहने वाली (बाएं) और रक्त-चूसने वाली (दाएं) मादाओं के लिए, 2 से अधिक आहार के लिए प्रति घंटे की कुल दूरी और उड़ानों की संख्या 4-घंटे की अवधि दर्ज की गई (गहरा: ग्रे; हल्का: सफेद)। औसत दूरी और मुकाबलों की औसत संख्या सर्कैडियन गतिविधि ग्राफ के दाईं ओर दिखाई गई है। त्रुटि पट्टियाँ माध्य की मानक त्रुटि का प्रतिनिधित्व करती हैं। सांख्यिकीय विश्लेषण पाठ देखें
सामान्य तौर पर, मेज़बान की तलाश करने वाली महिलाओं की समग्र उड़ान गतिविधि 24 घंटे की अवधि में उड़ान दूरी के समान पैटर्न का पालन करती है। औसत उड़ान दूरी निगले गए आहार (एफ (5, 138) = 28.27, पी <0.0001) से काफी प्रभावित होती है, और मेज़बान की तलाश करने वाली मादाएं 72 घंटे का मूत्र पीकर अन्य सभी आहारों (पी <0.0001) की तुलना में काफी लंबी दूरी तय करती हैं, और सुक्रोज-पोषित मच्छर ताजा (पी <0.0001) की तुलना में काफी लंबी दूरी तक उड़ते हैं। पी = 0.022) और 24-घंटे की आयु वाले मूत्र (पी = 0.022)-पोषित मच्छर। मूत्र आहार द्वारा वर्णित उड़ान गतिविधि पैटर्न के विपरीत, यूरिया-पोषित मेजबान-चाहने वाली महिलाओं ने 24-घंटे की अवधि में लगातार उड़ान गतिविधि का प्रदर्शन किया, जो अंधेरे चरण की दूसरी छमाही के दौरान चरम पर थी (छवि 3)। हालांकि गतिविधि पैटर्न समान थे, यूरिया-पोषित मेजबान-चाहने वाली महिलाओं ने अवशोषित एकाग्रता (एफ (5, 138) =) के आधार पर औसत उड़ान दूरी में काफी वृद्धि की। 1310.91, पी <0.0001)। मेज़बान की तलाश करने वाली महिलाओं को यूरिया की कोई भी सांद्रता पानी या सुक्रोज खिलाने वाली महिलाओं की तुलना में अधिक समय तक उड़ती है (पी <0.03)।
रक्त-चूसने वाले मच्छरों की समग्र उड़ान गतिविधि स्थिर थी और सभी आहारों में 24 घंटों तक बनी रही, पानी पीने वाली महिलाओं के साथ-साथ ताजा और 24 घंटे पुरानी महिलाओं में अंधेरे अवधि के दूसरे छमाही के दौरान मूत्र गतिविधि में वृद्धि हुई (छवि 3)। जबकि मूत्र आहार ने रक्त-पोषित महिलाओं में औसत उड़ान दूरी को महत्वपूर्ण रूप से प्रभावित किया (एफ (5, 138) = 4.83, पी = 0.0004), यूरिया आहार में नहीं (एफ (5, 138) = 1) .36, पी = 0.24) .अन्य मूत्र और नियंत्रण आहार के साथ (ताजा, पी = 0.0091; 72 घंटे, पी = 0.0022; 168 घंटे, पी = 0.001; सुक्रोज, पी = 0.0017; डीएच2ओ, पी = 0.036)।
प्रजनन मापदंडों पर मूत्र और यूरिया खिलाने के प्रभावों का मूल्यांकन अंडे देने वाली बायोएसेज़ (चित्रा 4 ए) में किया गया था और प्रत्येक मादा द्वारा दिए गए अंडों की संख्या, अंडे के आकार और नव रचित पहले इंस्टार लार्वा के अनुसार जांच की गई थी। अन्य मूत्र आहार खाने वाली महिलाओं की तुलना में और सुक्रोज खाने वाली महिलाओं के समान थे (चित्र 4 बी)। इसी तरह, मूत्र-आहार वाली महिलाओं द्वारा दिए गए अंडों का आकार आहार के अनुसार भिन्न होता है (एफ (5, 209) = 12.85, पी <0.0001), 24 घंटे मूत्र और सुक्रोज-पोषित महिलाएं पानी-आहार वाली महिलाओं की तुलना में काफी बड़े अंडे देती हैं, जबकि 168 घंटे मूत्र प्राप्त करने वाली महिलाओं के अंडे काफी छोटे होते हैं (चित्र 4)। सी)। इसके अलावा, मूत्र आहार ने लार्वा आकार (एफ (5, 187) = 7.86, पी <0.0001) को काफी प्रभावित किया, जिसमें अंडे के लार्वा से दिए गए अंडों की तुलना में 24 और 72 घंटे पुरानी मूत्र-पोषित मादाओं द्वारा दिए गए अंडों से काफी बड़े लार्वा निकलते हैं। पानी-पोषित और 168-घंटे मूत्र-पोषित मादाएं (चित्र 4डी)।
गोमूत्र और यूरिया खाने वाली मादा एनोफिलीज अरेबिनिस का प्रजनन प्रदर्शन। रक्त से पोषित मादा मच्छरों को बायोएसेज़ में रखने और अंडे देने वाले सब्सट्रेट प्राप्त करने से पहले 48 घंटे के लिए ताजा और पुराने गोमूत्र, यूरिया, सुक्रोज (10%) और आसुत जल (एच 2 ओ) से युक्त आहार खिलाया गया था। 48 घंटे (ए)। अंडे की संख्या (बी, ई), अंडे का आकार (सी, एफ) और लार्वा का आकार (डी, जी) प्रदान किए गए आहार से काफी प्रभावित थे। (गोमूत्र: बीडी; यूरिया: ईजी)। अलग-अलग अक्षर नामों का उपयोग करके मापा गया प्रत्येक पैरामीटर के साधन एक-दूसरे से काफी भिन्न थे (ट्यूकी के पोस्ट हॉक विश्लेषण का उपयोग करके एक-तरफ़ा एनोवा; पी <0.05)। त्रुटि पट्टियाँ माध्य की मानक त्रुटि का प्रतिनिधित्व करती हैं
मूत्र के प्रमुख नाइट्रोजन घटक के रूप में, यूरिया, जब रक्त-पोषित महिलाओं को आहार के रूप में प्रदान किया जाता है, तो सभी अध्ययनों में प्रजनन मापदंडों पर महत्वपूर्ण प्रभाव पड़ता है। रक्त-भोजन के बाद यूरिया खिलाने वाली महिलाओं द्वारा दिए गए अंडों की संख्या, यूरिया एकाग्रता (एफ (11, 360) = 4.69; पी <0.0001) पर निर्भर करती है, महिलाओं को 134 µM और 1.34 मिमी के बीच यूरिया सांद्रता खिलाया जाता है, वे अधिक अंडे देती हैं (चित्रा 4ई)। 134 µM या उससे अधिक पानी पीने वाली मादाओं की तुलना में बड़े अंडे देती है (F(10, 4245) = 36.7; p <0.0001; चित्र 4F), और लार्वा का आकार, हालांकि माताओं में यूरिया की समान सांद्रता से प्रभावित होता है (F(10, 3305) = 37.9; p <0.0001) अधिक परिवर्तनशील था (चित्र 4जी)।
मेज़बान-चाहने वाले गोजातीय मूत्र हेडस्पेस वाष्पशील अर्क के प्रति समग्र आकर्षण। ग्लास ट्यूब ओल्फैक्टोमीटर (छवि 5 ए) में मूल्यांकन किया गया अरेबियन्सिस मूत्र की उम्र (χ2 = 15.9, डीएफ = 4, पी = 0.0032; चित्र 5 बी) से काफी प्रभावित था। पोस्ट हॉक विश्लेषण से पता चला कि 24 घंटों में बासी मूत्र की गंध ने अन्य सभी उपचारों की तुलना में आकर्षण के काफी उच्च स्तर का कारण बना (72 घंटे: पी = 0) .0060, 168 घंटे: पी = 0.012, पेंटेन: पी = 0.00070), ताजे मूत्र की गंध को छोड़कर (पी = 0.13; चित्र 5बी)। हालांकि मूत्र की गंध के प्रति खून चूसने वाले मच्छरों का समग्र आकर्षण बहुत अलग नहीं था (χ2 = 8.78, डीएफ = 4, पी = 0.067; चित्र 5सी), इन मादाओं को हेडस्पेस के लिए काफी अधिक आकर्षक पाया गया। नियंत्रण की तुलना में 72-घंटे पुराने मूत्र की तुलना में अस्थिर अर्क (पी = 0.0066; चित्र 5सी)।
मेज़बान और रक्त-पोषित एनोफ़ेलीज़ अरेबियनस की खोज में प्राकृतिक और सिंथेटिक गोमूत्र की गंध के प्रति व्यवहारिक प्रतिक्रियाएँ। ग्लास ट्यूब ओल्फेक्टोमीटर (ए) का योजनाबद्ध। ताज़ा और वृद्ध गोमूत्र से मेज़बान (बी) और रक्त-चूसने वाले (सी) मच्छरों के लिए हेडस्पेस वाष्पशील अर्क का आकर्षण। लॉर्ड एन की स्पर्शक प्रतिक्रिया का पता लगाएं। ताज़ा (डी), 24-घंटे (ई), 72-घंटे (एफ), और से अलग किए गए हेडस्पेस अर्क। 168-घंटे (जी) पुराना गोमूत्र दिखाया गया है। इलेक्ट्रॉन एंटीना डिटेक्शन (ईएडी) निशान गैस क्रोमैटोग्राफ से निकलने वाले हेडस्पेस में बायोएक्टिव यौगिकों के जवाब में वोल्टेज परिवर्तन दिखाते हैं और लौ आयनीकरण डिटेक्टर (एफआईडी) द्वारा पता लगाया जाता है। स्केल बार प्रतिक्रिया आयाम (एमवी) बनाम अवधारण समय का प्रतिनिधित्व करता है। जैविक रूप से सक्रिय यौगिकों के गुण और रिलीज दर (µg h-1) दिखाए जाते हैं। एक एकल तारांकन (*) लगातार कम-आयाम प्रतिक्रिया को इंगित करता है। दोहरे तारांकन (**) अप्राप्य प्रतिक्रियाओं को इंगित करते हैं। मेजबान (एच) और रक्त-चूसने वाले (आई) को ढूंढें। एन.अरेबियन्सिस में ताजा और पुराने गोमूत्र गंध के सिंथेटिक मिश्रण के लिए अलग-अलग अपील होती है। विभिन्न अक्षरों के नामों से आकर्षित मच्छरों का औसत अनुपात एक-दूसरे से काफी अलग था (ट्यूकी के पोस्ट हॉक विश्लेषण का उपयोग करके एक तरफा एनोवा);पी <0.05).त्रुटि पट्टियाँ पैमाने की मानक त्रुटि का प्रतिनिधित्व करती हैं
मादा ऐन.अरबीएंसिस, रक्त भोजन के 72 घंटे और 120 घंटे बाद, स्पॉनिंग के दौरान, पेंटेन नियंत्रण (χ2 = 3.07, पी > 0.05; अतिरिक्त फ़ाइल 1: चित्र एस1) की तुलना में ताजा और पुराने गोमूत्र से हेडस्पेस वाष्पशील अर्क के लिए कोई प्राथमिकता नहीं दिखाई गई।
मादा ऐन.अरबीएन्सिस के लिए, जीसी-ईएडी और जीसी-एमएस विश्लेषणों ने आठ, छह, तीन और तीन बायोएक्टिव यौगिकों (चित्र 5डी-जी) की पहचान की। हालांकि इलेक्ट्रोफिजियोलॉजिकल प्रतिक्रियाएं प्राप्त करने वाले यौगिकों की संख्या में अंतर देखा गया था, इनमें से अधिकतर यौगिक ताजा और पुराने मूत्र से एकत्र किए गए प्रत्येक हेडस्पेस वाष्पशील अर्क में मौजूद थे। इसलिए, प्रत्येक अर्क के लिए, केवल ऐसे यौगिक जो थ्रेशोल्ड के ऊपर महिला एंटीना से शारीरिक प्रतिक्रिया उत्पन्न करते थे, उन्हें आगे के विश्लेषण में शामिल किया गया था।
हेडस्पेस संग्रह में बायोएक्टिव यौगिकों की कुल अस्थिर रिलीज दर ताजा मूत्र में 29 μg h-1 से बढ़कर 168 घंटे पुराने मूत्र में 242 μg h-1 हो गई है, मुख्य रूप से पी-क्रेसोल और एम-फॉर्मेल्डिहाइड फिनोल के साथ-साथ फिनोल में वृद्धि के कारण। इसके विपरीत, अन्य यौगिकों, जैसे 2-साइक्लोहेक्सेन-1-वन और डिकैनल की रिलीज दर, मूत्र की बढ़ती उम्र के साथ कम हो गई, जो कि देखी गई के साथ संबंधित है। क्रोमैटोग्राम में सिग्नल की तीव्रता (बहुतायत) में कमी (चित्र 5डी)-जी बायां पैनल) और इन यौगिकों के लिए शारीरिक प्रतिक्रियाएं (चित्र 5डी-जी दायां पैनल)।
कुल मिलाकर, सिंथेटिक मिश्रण में ताजा और पुराने मूत्र हेडस्पेस (छवि 5 डी-जी) के अस्थिर अर्क में पहचाने जाने वाले बायोएक्टिव यौगिकों का एक समान प्राकृतिक अनुपात था और एक मेजबान (χ2 = 8.15, डीएफ = 4, पी = 0.083; चित्र 5 एच) या रक्त-चूसने वाले मच्छरों (χ2 = 4.91, डीएफ = 4, पी = 0.30) की खोज में महत्वपूर्ण अपील नहीं दिखाई दी; चित्र 5आई)।हालांकि, उपचारों के बीच पोस्ट हॉक जोड़ीवार तुलना से पता चला कि मेजबान की तलाश करने वाले मच्छर पेंटेन नियंत्रण (पी = 0.0086; चित्र 5 एच) की तुलना में 24 घंटे पुराने मूत्र के सिंथेटिक मिश्रण के लिए काफी आकर्षक थे।
24-एच-आयु वाले मूत्र के सिंथेटिक मिश्रण में व्यक्तिगत घटकों की भूमिका का आकलन करने के लिए, वाई-ट्यूब परख में पूर्ण मिश्रण के खिलाफ छह घटाव मिश्रण का मूल्यांकन किया गया था, जिसमें व्यक्तिगत यौगिकों को हटा दिया गया था। मेजबान की तलाश करने वाले मच्छरों के लिए, पूर्ण मिश्रण से व्यक्तिगत यौगिकों को घटाने से व्यवहारिक प्रतिक्रियाओं पर महत्वपूर्ण प्रभाव पड़ा (χ2 = 19.63, डीएफ = 6, पी = 0.0032; अतिरिक्त फ़ाइल 1: चित्रा एस 2 ए), सभी घटिया मिश्रण थे पूरी तरह से मिश्रित की तुलना में छोटे से अधिक आकर्षक। इसके विपरीत, पूरी तरह से सिंथेटिक मिश्रण से अलग-अलग यौगिकों को हटाने से रक्त-चूसने वाले मच्छरों (χ2 = 11.38, डीएफ = 6, पी = 0.077) की व्यवहारिक प्रतिक्रियाओं पर कोई असर नहीं पड़ा, डिकैनल के अपवाद के साथ, जिसके परिणामस्वरूप पूर्ण मिश्रण की तुलना में कम स्तर आकर्षण (पी = 0.022; अतिरिक्त फ़ाइल 1: चित्रा एस 2 बी)।
इथियोपिया के एक मलेरिया-स्थानिक गांव में, मैदानी परिस्थितियों में मच्छरों को आकर्षित करने में 24 घंटे के गोमूत्र के सिंथेटिक मिश्रण की प्रभावकारिता का मूल्यांकन दस रातों के लिए किया गया था (चित्र 6ए)। कुल 4,861 मच्छरों को पकड़ा गया और उनकी पहचान की गई, जिनमें से 45.7% एंथ्रोपस.गैंबिया एसएल, 18.9% एनोफिलिस फैरोनेसिस और 35.4% क्यूलेक्स एसपीपी थे। (अतिरिक्त फ़ाइल 1: तालिका) एस1).एनोफिलिस अरेबिनिस पीसीआर विश्लेषण द्वारा पहचाने गए एन.गैम्बियन प्रजाति परिसर का एकमात्र सदस्य है। औसतन, प्रति रात 320 मच्छरों को पकड़ा गया, इस दौरान सिंथेटिक मिश्रण चारा वाले जाल ने मिश्रण के बिना जोड़े वाले जाल की तुलना में अधिक मच्छरों को पकड़ा (χ2(0, 3196) = 170.0, पी <0.0001)। .प्रत्येक जोड़ी जाल में समान संख्या में मच्छरों को पकड़ा गया, जो दर्शाता है कि घरों के बीच कोई पूर्वाग्रह नहीं है (χ2(0, 1665) = 9 × 10-13, पी > 0.05) और अध्ययन अवधि के दौरान जनसंख्या में कोई गिरावट नहीं हुई। नियंत्रण जाल की तुलना में, सिंथेटिक मिश्रण वाले जाल में पकड़े गए मच्छरों की संख्या में काफी वृद्धि हुई थी: मेजबान की तलाश (χ2(0, 2107) = 138.7, पी <0.0001), हाल ही में रक्त पिलाना (χ2(0, 650) = 32.2, पी <0.0001) और गर्भावस्था (χ2(0, 228) = 6.27, पी = 0.0123;अतिरिक्त फ़ाइल 1: तालिका एस1)। यह पकड़े गए मच्छरों की कुल संख्या में भी परिलक्षित होता है: मेजबान की तलाश > खून चूसने वाला > गर्भवती > अर्ध-गर्भवती > नर।
24 घंटे के सिंथेटिक गोमूत्र गंध मिश्रण की प्रभावकारिता का क्षेत्र मूल्यांकन। दक्षिण-मध्य इथियोपिया (मानचित्र) में, माकी शहर के पास, रोग नियंत्रण केंद्र (सीडीसी) प्रकाश जाल (दाएं) का उपयोग करके लैटिन वर्गाकार डिजाइन (हवाई छवि) (ए) के साथ जोड़े गए घरों में फील्ड परीक्षण किए गए। एक अलग तरीके से, एक शारीरिक स्थिति पर निर्भर प्रभाव। इसके अलावा, इन जालों ने मेजबान क्यूलेक्स मच्छरों की काफी बढ़ी हुई संख्या को पकड़ लिया। (डी) नियंत्रण की तुलना में। बाईं ओर की पट्टियाँ गंधयुक्त चारा (हरा) और नियंत्रण (खुले) जाल (एन = 10) के जोड़े में पकड़े गए मच्छरों के औसत चयन सूचकांक का प्रतिनिधित्व करती हैं, जबकि दाईं ओर की पट्टियाँ नियंत्रण जाल (खुले; एन = 5) के जोड़े में औसत चयन सूचकांक का प्रतिनिधित्व करती हैं।.तारांकन सांख्यिकीय महत्व स्तर दर्शाते हैं (*p = 0.01 और ***p < 0.0001)
तीन प्रजातियों को सिंथेटिक मिश्रण वाले जाल में अलग-अलग तरीके से पकड़ा गया था। मेजबान (χ2(1, 1345) = 71.7, पी <0.0001), रक्त पोषण (χ2(1, 517) = 16.7, पी <0.0001) और गर्भावस्था (χ2(1, 180) = 6.11, पी = 0.0134) की तलाश में एक .अरबीएंसिस फंस गया था। जाल से सिंथेटिक मिश्रण छोड़ा गया (चित्र 6बी), जबकि एन की मात्रा भिन्न नहीं थी। विभिन्न शारीरिक अवस्थाओं में फैरोनेसिस पाए गए (चित्र 6सी)। क्यूलेक्स के लिए, नियंत्रण जाल की तुलना में सिंथेटिक मिश्रण (χ2(1,1319) = 12.6, पी = 0.0004; चित्र 6डी) से बने जाल में मेजबान की तलाश करने वाले मच्छरों की संख्या में केवल उल्लेखनीय वृद्धि पाई गई।
इथियोपिया में प्रजनन स्थलों और ग्रामीण समुदायों के बीच संभावित मेजबानों के बाहर स्थित मेजबान चारा जाल का उपयोग यह आकलन करने के लिए किया गया था कि क्या मलेरिया के मच्छर मेजबान आवास संकेत के रूप में गोमूत्र गंध का उपयोग करते हैं। मेजबान संकेतों, गर्मी के अभाव में, और गोमूत्र गंध की उपस्थिति के साथ या उसके बिना, कोई भी मच्छर नहीं पकड़ा गया (अतिरिक्त फ़ाइल 1: चित्र S3)। हालांकि, उच्च तापमान और गोमूत्र गंध की उपस्थिति में, मादा मलेरिया मच्छरों को आकर्षित किया गया और पकड़ लिया गया, हालांकि छोटी संख्या में, मूत्र की उम्र से स्वतंत्र (χ2(5, 25) = 2) .29, पी = 0.13; अतिरिक्त फ़ाइल 1: चित्र एस3)। इसके विपरीत, जल नियंत्रण ने उच्च तापमान पर मलेरिया के मच्छरों को नहीं पकड़ा (अतिरिक्त फ़ाइल 1: चित्र एस3)।
मलेरिया के मच्छर अन्य कीड़ों के समान जीवन-इतिहास गुणों को बढ़ाने के लिए गोमूत्र (यानी, पोखर) पर प्रतिपूरक भोजन के माध्यम से नाइट्रोजन युक्त यौगिकों को प्राप्त करते हैं और वितरित करते हैं [2, 4, 24, 25, 26]। गोमूत्र एक आसानी से उपलब्ध नवीकरणीय संसाधन है जो मलेरिया वैक्टरों के लिए आराम करने वाले स्थानों से निकटता से जुड़ा हुआ है, जैसे गौशाला और ग्रामीण घरों और प्रजनन स्थलों के करीब लंबी वनस्पतियाँ। मादा मच्छर गंध से इस संसाधन का पता लगाती हैं और नाइट्रोजन यौगिक के अवशोषण को नियंत्रित करने में सक्षम हैं। मूत्र में यूरिया सहित, मूत्र में प्रमुख नाइट्रोजन घटक [15, 16]। मादा मच्छर की शारीरिक स्थिति के आधार पर, मूत्र में पोषक तत्वों को मेजबान की तलाश करने वाली मादा मच्छरों की उड़ान गतिविधि और अस्तित्व को बढ़ाने के लिए आवंटित किया जाता है, साथ ही पहले गोनाडोट्रोपिक चक्र के दौरान रक्त-पोषित व्यक्तियों के अस्तित्व और प्रजनन विशेषताओं को भी। इसलिए, मूत्र मिश्रण मलेरिया वैक्टर के लिए एक महत्वपूर्ण पोषण भूमिका निभाता है जो कुपोषित वयस्कों की तरह बंद होते हैं [8], क्योंकि यह मादा मच्छरों को महत्वपूर्ण नाइट्रोजन यौगिक प्राप्त करने की क्षमता प्रदान करता है। कम जोखिम वाले आहार में संलग्न होकर। इस खोज के महत्वपूर्ण महामारी विज्ञान परिणाम हैं, क्योंकि महिलाएं अपनी जीवन प्रत्याशा, गतिविधि और प्रजनन उत्पादन में वृद्धि करती हैं, जो सभी वेक्टर क्षमता को प्रभावित करते हैं। इसके अलावा, यह व्यवहार भविष्य के वेक्टर प्रबंधन कार्यक्रमों का लक्ष्य हो सकता है।