“कभी संदेह न करें कि विचारशील, समर्पित नागरिकों का एक छोटा समूह दुनिया को बदल सकता है।वास्तव में, यह वहां एकमात्र है।”
क्यूरियस का मिशन चिकित्सा प्रकाशन के लंबे समय से चले आ रहे मॉडल को बदलना है, जिसमें शोध प्रस्तुत करना महंगा, जटिल और समय लेने वाला हो सकता है।
प्लेटलेट-समृद्ध प्लाज्मा/पीआरपी, ऊतक पुनर्जनन, प्लेटलेट सक्रियण, ग्लूकोज प्रोलिफ़ेरेटिव थेरेपी, प्लेटलेट्स, प्रोलिफ़ेरेटिव थेरेपी
इस लेख को इस प्रकार उद्धृत करें: हैरिसन टीई, बॉलर जे, रीव्स के, एट अल।(17 मई, 2022) प्लेटलेट गिनती और मात्रा पर ग्लूकोज का प्रभाव: पुनर्योजी चिकित्सा के लिए निहितार्थ।इलाज 14(5): e25081.doi:10.7759/cureus.25081
प्लेटलेट-समृद्ध प्लाज्मा (पीआरपी) और हाइपरटोनिक ग्लूकोज समाधान आमतौर पर पुनर्योजी चिकित्सा में इंजेक्शन के लिए उपयोग किए जाते हैं, कभी-कभी एक साथ।प्लेटलेट लसीका और सक्रियण पर हाइपरटोनिक ग्लूकोज का प्रभाव पहले नहीं बताया गया है।हमने प्लेटलेट और एरिथ्रोसाइट गिनती के साथ-साथ पीआरपी और पूरे रक्त (डब्ल्यूबी) में सेल वॉल्यूम पर ऊंचे ग्लूकोज सांद्रता के प्रभाव का परीक्षण किया।पीआरपी या पूरे रक्त के साथ मिश्रित सभी ग्लूकोज मिश्रणों के साथ, आंशिक लसीका के अनुरूप, प्लेटलेट गिनती में तेजी से आंशिक कमी आई। पहले मिनट के बाद, प्लेटलेट काउंट स्थिर रहा, जिससे पता चलता है कि अवशिष्ट प्लेटलेट्स तेजी से चरम (>2000 mOsm) हाइपरटोनिटी में समायोजित हो रहे हैं। पहले मिनट के बाद, प्लेटलेट काउंट स्थिर रहा, जिससे पता चलता है कि अवशिष्ट प्लेटलेट्स तेजी से चरम (>2000 mOsm) हाइपरटोनिटी में समायोजित हो रहे हैं। После первой минуты количество тромбоцитов оставалось стабильным, что у казывает на быструю аккомодацию остаточных тромбоцитов до экстремального (>20 00 мОсм) гипертонуса. पहले मिनट के बाद, प्लेटलेट काउंट स्थिर रहा, जो अवशिष्ट प्लेटलेट्स के तेजी से चरम (>2000 mOsm) हाइपरटोनिटी में समायोजन का संकेत देता है।2000 mOsm क्षमता, 2000 mOsm।2000 mOsm) После первой минуты количество тромбоцитов оставалось стабильным, что у казывает на быструю адаптацию остаточных тромбоцитов к экстремальному (>2000) мОсм) гиперосмолярному состоянию. पहले मिनट के बाद, प्लेटलेट काउंट स्थिर रहा, जो कि अवशिष्ट प्लेटलेट्स के चरम (>2000 mOsm) हाइपरोस्मोलर अवस्था में तेजी से अनुकूलन का संकेत देता है।25% और उससे अधिक की ग्लूकोज सांद्रता के परिणामस्वरूप औसत प्लेटलेट मात्रा (एमपीवी) में उल्लेखनीय वृद्धि हुई, जो प्लेटलेट सक्रियण के प्रारंभिक चरण का संकेत देता है।यह निर्धारित करने के लिए आगे के अध्ययन की आवश्यकता है कि क्या प्लेटलेट लसीका या सक्रियण होता है और क्या हाइपरटोनिक ग्लूकोज इंजेक्शन अकेले या पीआरपी के साथ संयोजन में अतिरिक्त नैदानिक ​​​​लाभ प्रदान कर सकता है।
1950 के दशक में, अमेरिकी सर्जन जॉर्ज हैकेट ने पाया कि वह कण्डरा और स्नायुबंधन में एक प्रोलिफ़ेरेटिव समाधान इंजेक्ट करके कई रोगियों में जोड़ों और पीठ के दर्द से स्थायी रूप से राहत दिला सकते हैं।खरगोशों पर उनके प्रयोगों से पता चला कि उपचार, जिसे उन्होंने प्रोलिफ़ेरेटिव थेरेपी कहा, ने टेंडन को बड़ा और मजबूत किया।हिस्टोलॉजिकल अध्ययनों ने पुष्टि की है कि इस प्रक्रिया के दौरान नए कोलेजन का उत्पादन होता है [1]।
पहले कुछ दशकों के दौरान, कई अलग-अलग वितरण समाधान आज़माए गए।1990 के दशक तक, अधिकांश चिकित्सक ग्लूकोज की उच्च सांद्रता को सबसे सुरक्षित और सबसे प्रभावी तरीका मानते थे।हालाँकि, कार्रवाई का तंत्र अस्पष्ट बना हुआ है।
हैकेट के काम के बाद 20वीं सदी में कुछ नैदानिक ​​अध्ययन आयोजित किए गए।हालाँकि, 2000 के दशक में इसमें नए सिरे से दिलचस्पी बढ़ी और पीठ के निचले हिस्से में दर्द [2], घुटने के पुराने ऑस्टियोआर्थराइटिस [3] और लेटरल एपिकॉन्डिलाइटिस [4] के इलाज के लिए प्रोलिफ़ेरेटिव थेरेपी के कई सफल नैदानिक ​​​​परीक्षण पूरे किए गए।
ऊतक पुनर्जनन के लिए स्टेम कोशिकाओं की भागीदारी की आवश्यकता होती है।इसलिए, ग्लूकोज की उच्च सांद्रता किसी तरह स्टेम कोशिकाओं के प्रवासन, प्रतिकृति और विभेदन को प्रेरित करती है।हम परिकल्पना करते हैं कि प्लेटलेट्स दूत के रूप में कार्य कर सकते हैं और उच्च ग्लूकोज सांद्रता प्लेटलेट्स को साइटोकिन्स और विकास कारकों को जारी करने का कारण बन सकती है, जिससे पुनर्योजी प्रक्रियाओं को बढ़ावा मिलता है, विशेष रूप से उच्च ग्लूकोज सांद्रता वाले क्षेत्रों में स्टेम सेल प्रवासन।
प्लेटलेट सक्रियण हमेशा इंट्रासेल्युलर कैल्शियम में वृद्धि से पहले होता है [5]।लियू एट अल.2008 में पता चला कि उच्च ग्लूकोज स्तर प्लाज्मा झिल्ली में क्षणिक रिसेप्टर संभावित कैनोनिकल प्रकार 6 (टीआरपीसी 6) चैनलों की गतिविधि को बढ़ाता है, जिससे प्लेटलेट्स में कैल्शियम आयनों का प्रवाह होता है [6]।एक अन्य अध्ययन से पता चला है कि कैल्शियम आयनों के संपर्क में आने से सूक्ष्मनलिकाएं सीमांत क्षेत्र में शिथिलता, विस्तार और विरूपण होता है, जिसके परिणामस्वरूप डिस्क से गोलाकार आकार में परिवर्तन होता है, जिसके परिणामस्वरूप औसत प्लेटलेट मात्रा (एमपीवी) होती है [7]।
इस अध्ययन में हमारी परिकल्पना यह है कि ग्लूकोज की उच्च सांद्रता में प्लेटलेट्स का संपर्क सूक्ष्मनलिका सीमांत क्षेत्र और इंट्रासेल्युलर वातावरण को प्रभावित करता है, जिससे एमपीवी में वृद्धि होती है।
अध्ययन का विवरण समझाने के बाद और नमूने प्राप्त करने से पहले सभी प्रतिभागियों ने एक सूचित सहमति प्रपत्र पर हस्ताक्षर किए।इस अध्ययन में, केवल 2% से अधिक हेमटोक्रिट वाले पीआरपी नमूनों का उपयोग किया गया था ताकि एरिथ्रोसाइट (एरिथ्रोसाइट) गिनती और लाल रक्त कोशिकाओं (एमसीवी) की औसत कणिका मात्रा को तुलना के लिए शामिल किया जा सके।
अध्ययन चार चरणों में आयोजित किया गया था, पहला चरण पीआरपी था और शेष चरण संपूर्ण रक्त (तालिका 1) थे।जैसा कि पहले बताया गया है [8], सभी सापेक्ष केन्द्रापसारक बलों (आरसीएफ, जी-बल) की गणना केन्द्रापसारक सिरिंज में रक्त स्तंभ के मध्य बिंदु (आरएमआईडी, सेमी में) से की गई थी।हमने एमपीवी को प्लेटलेट सेंसिटाइजेशन के मार्कर के रूप में और प्लेटलेट काउंट को संभावित प्लेटलेट लसीका के संकेतक के रूप में उपयोग करना चुना, दोनों को मानक हेमेटोलॉजी विश्लेषकों पर आसानी से मापा जा सकता है।
पहले चरण में, 47 स्वयंसेवकों ने रक्त के नमूने दान किए - एथिलीनडायमिनेटेट्राएसेटिक एसिड (ईडीटीए) की एक ट्यूब और एक पीआरपी संपूर्ण रक्त का नमूना (सोडियम साइट्रेट (NaCl, 3%) के साथ एंटीकोआग्युलेटेड) (तालिका 1)।रॉकर को तुरंत ट्यूब में रखें।संपूर्ण रक्त गणना (सीबीसी) ईडीटीए नमूनों पर तीन प्रतियों में की गई थी, और सीबीसी विश्लेषण के लिए NaCl नमूनों का तीन प्रतियों में विश्लेषण किया गया था, और फिर पीआरपी ऊपर वर्णित विभिन्न तरीकों से तैयार किया गया था [8]।सभी पीआरपी नमूने 900-1000 ग्राम पर सेंट्रीफ्यूजेशन द्वारा तैयार किए गए थे।प्रत्येक पीआरपी नमूने को भंवर मिक्सर पर 5-10 सेकंड के लिए मिलाएं, फिर पांच 0.5 मिलीलीटर एलिकोट्स को ट्यूबों में विभाजित करें।
बढ़ी हुई ग्लूकोज सांद्रता पर प्लेटलेट एक्सपोज़र के प्रभाव का मूल्यांकन करने के लिए, 0%, 5%, 12.5%, 25% और 50% ग्लूकोज की समान मात्रा (0.5 मिली) को पानी में प्लेटलेट नमूनों के साथ मिलाया गया ताकि 0%, 2.5% 6.25%, 12.5% ​​​​और 25% ग्लूकोज मिश्रण की सांद्रता प्राप्त की जा सके और 15 मिनट के लिए एक टेस्ट ट्यूब शेकर पर ट्यूबों को मिलाया जा सके।प्रत्येक मिश्रण के टीएसी का 15 मिनट के बाद तीन प्रतियों में विश्लेषण किया गया।प्रत्येक ट्यूब के लिए प्लेटलेट काउंट (पीएलटी), आरबीसी काउंट, एमसीवी और एमपीवी का औसत लिया गया और सभी पीआरपी नमूनों के लिए औसत प्लेटलेट काउंट, आरबीसी काउंट, एमसीवी और एमपीवी की गणना की गई।
डेटा संग्रह का पहला चरण पूरा होने के बाद, हमने D50W को शामिल करने के बाद पीआरपी प्लेटलेट्स में प्लेटलेट मात्रा में उल्लेखनीय वृद्धि देखी।पीआरपी प्लेटलेट्स आवश्यक रूप से रक्त में सभी प्लेटलेट्स का प्रतिनिधित्व नहीं करते हैं, और पीआरपी माध्यम डब्ल्यूबी माध्यम से भिन्न होता है।इसलिए, हमने पूरे रक्त में D50W जोड़ने के प्रभाव का दूसरे चरण का परीक्षण करने का निर्णय लिया।
दूसरे दौर के लिए, हमने पहली श्रृंखला के परिणामों के आधार पर 30 का नमूना आकार चुना, जैसा कि विश्लेषण अनुभाग में वर्णित है।इस श्रृंखला में, 20 स्वयंसेवकों ने रक्त के नमूने दान किए (तालिका 1)।संपूर्ण रक्त (1.8 मिली) को 3 मिली सिरिंज में खींचा गया और 0.2 मिली 40% NaCl के साथ थक्कारोधी किया गया।पूरे रक्त सिरिंज को एक भंवर मिक्सर के साथ पांच सेकंड के लिए मिलाया गया था और सीबीसी का तीन प्रतियों में विश्लेषण किया गया था।विश्लेषण के बाद, 5 मिलीलीटर सिरिंज में 50% ग्लूकोज के 2 मिलीलीटर में एंटीकोआग्युलेटेड रक्त जोड़ा गया था (अंतिम ग्लूकोज एकाग्रता लगभग 25% (डी 25) थी और 30 मिनट के लिए शेक ट्यूब में रखा गया था। 30 मिनट के बाद, डब्ल्यूबी सिरिंज में डी 25 / सीबीसी का तीन प्रतियों में विश्लेषण किया गया था। प्लेटलेट गिनती, आरबीसी गिनती, एमसीवी और एमपीवी प्रति सिरिंज औसत थे, और पीएलटी, आरबीसी गिनती, एमसीवी और एमपीवी का मतलब था ग्लूकोज जोड़ने से पहले और बाद में प्रत्येक नमूने के लिए गणना की गई।
क्योंकि न्यूनतम इनवेसिव इंजेक्शन के कारण प्रोलिफेरेटिव ग्लूकोज थेरेपी के दौरान पूरे रक्त में प्लेटलेट्स आमतौर पर हाइपरटोनिक ग्लूकोज के संपर्क में आते हैं, और इंजेक्शन से ठीक पहले पीआरपी को हाइपरटोनिक ग्लूकोज के साथ जोड़ना आम बात नहीं है, हमने धारा 1 में डब्ल्यूबी के साथ संयोजन में हाइपरटोनिक ग्लूकोज का अध्ययन करने का निर्णय लिया। चरण तीन और चार।प्रत्येक चरण में, 20 स्वयंसेवकों ने रक्त एंटीकोआगुलंट्स (तालिका 1) के लिए 7-8 मिलीलीटर एसीडी-ए (ट्राइसोडियम साइट्रेट (22.0 ग्राम/लीटर), साइट्रिक एसिड (8.0 ग्राम/लीटर) और ग्लूकोज (24.5 ग्राम/लीटर), समाधान डेक्सट्रोज साइट्रेट युक्त एसिड) दान किया।एमपीवी में वृद्धि से जुड़े थ्रेशोल्ड प्रतिशत को निर्धारित करने के लिए केवल 12.5% ​​​​से अधिक ग्लूकोज के मिश्रण का उपयोग किया गया था।तीसरे चरण में, 1 मिलीलीटर रक्त को एक परखनली में रखा जाता है।फिर क्रमशः 15%, 20% और 25% की अंतिम ग्लूकोज सांद्रता प्राप्त करने के लिए ट्यूब में 1 मिलीलीटर 30% ग्लूकोज, 40% ग्लूकोज, या 50% ग्लूकोज मिलाकर एक भंवर मिक्सर पर 10 सेकंड के लिए रक्त मिलाएं।मिश्रण के तुरंत बाद सीबीसी के लिए ग्लूकोज रक्त के नमूनों का विश्लेषण किया गया और 30 मिनट तक हर दो मिनट में दोहराया गया।
प्रारंभिक मिश्रण के दौरान, 1:1 हाइपरटोनिक ग्लूकोज और डब्ल्यूबी या पीआरपी को जोड़ने से प्लेटलेट्स कई सेकंड के लिए 25% से ऊपर की सांद्रता में आ जाते हैं।चौथे चरण में, न्यूनतम प्रारंभिक शिखर सांद्रता के साथ हाइपरटोनिक ग्लूकोज के प्रभाव का मूल्यांकन करने और ग्लूकोज के प्रभाव की ऊपरी सीमा का परीक्षण करने के लिए, हमने D25W या D50W में केवल थोड़ी मात्रा में रक्त जोड़ा।एक ट्यूब में 1 मिलीलीटर D25W या D50W रखें और नमूने को 10 सेकंड के लिए घुमाते हुए 0.2 मिलीलीटर WB डालें।इन मामलों में, रक्त ग्लूकोज के संपर्क में अंतिम सांद्रता से लगभग 20% ऊपर था, न कि चरण 3 में अंतिम सांद्रता से 50% अधिक, जिसके परिणामस्वरूप अंतिम ग्लूकोज सांद्रता 20.8% और 41.6% थी।मिश्रित नमूनों का चरण 3 के समान समय अंतराल पर विश्लेषण किया गया।
प्रत्येक ग्लूकोज कमजोर पड़ने की श्रृंखला के पहले चरण में, 30 नमूने लिए गए क्योंकि यह पायलट अध्ययन के लिए उपयुक्त नमूना आकार था [9]।प्रत्येक चरण के अंत में (पहले चरण सहित), एक जनसंख्या में निरंतर परिणाम चर के माध्य का अनुमान लगाने के लिए आवश्यक नमूना आकार निर्धारित करने के लिए उपयोग किए जाने वाले सूत्र का उपयोग करके नमूना आकार की पर्याप्तता का मूल्यांकन करें।सूत्र n = Z2 x SD2 /E2.इस समीकरण में, Z, Z-स्कोर है, SD मानक विचलन है, और E वांछित त्रुटि है [10]।हमारा अल्फा 0.05 है, जो 1.96 के Z मान से मेल खाता है, और हम 5 (प्रतिशत में) की त्रुटि की उम्मीद करते हैं।इसलिए हम n = (1.962 x SD2)/52 के लिए हल करते हैं।परिणामों से पता चला कि प्रत्येक चरण के लिए आवश्यक नमूना आकार एकत्र की गई वास्तविक संख्या से छोटा था।
अवधि 1, 3 और 4 के दौरान एक से अधिक ग्लूकोज सांद्रता का उपयोग करते हुए, समय 0 और प्रत्येक बाद के समय (चरण 1 15 मिनट पर, अवधि 3 15 मिनट पर) के बीच आंशिक परिवर्तन की तुलना करके विभिन्न ग्लूकोज सांद्रता के प्रभाव का विश्लेषण किया गया था।और 15 सेकंड पर चार, फिर हर दो मिनट में।) प्रत्येक समय अवधि के लिए परिवर्तन दरों की तुलना मैन-व्हिटनी यू-टेस्ट का उपयोग करके की गई क्योंकि डेटा शापिरो-विल्क सामान्यता परीक्षण द्वारा निर्धारित सामान्य वितरण का पालन नहीं करता था।चूंकि पहले, तीसरे और चौथे चरण (कुल पांच) में कई समूहों (पांच) का 1-से-1 विश्लेषण किया गया था, वांछित अल्फा मान को ≤0.01 पर समायोजित करने के लिए एक बोनफेरोनी सुधार किया गया था, लेकिन ≤0.05 को नहीं।
हाइपरटोनिक डेक्सट्रोज़ की सभी सांद्रता के साथ प्लेटलेट काउंट में कमी और पीआरपी प्लेटलेट्स में एमपीवी में 12.5% ​​डेक्सट्रोज़ सांद्रता में वृद्धि: बेसलाइन संपूर्ण रक्त की तुलना में पीआरपी प्लेटलेट काउंट एक से पांच गुना तक बढ़ गया, विधि के अनुसार अलग-अलग (चित्रित नहीं)। हाइपरटोनिक डेक्सट्रोज़ की सभी सांद्रता के साथ प्लेटलेट गिनती में कमी और पीआरपी प्लेटलेट्स में एमपीवी में 12.5% ​​​​डेक्सट्रोज़ एकाग्रता में वृद्धि: पीआरपी प्लेटलेट गिनती बेसलाइन पूरे रक्त की तुलना में एक से पांच गुना एकाग्रता तक बढ़ गई, विधि के अनुसार भिन्न (चित्रित नहीं)। Уеньшение количества тромбоцитов при всех концентрациях гипертонич еской декстрозы и увеличение MPV в тромбоцитах PRP при концентрации декстроз ы > 12,5%: количество тромбоцитов PRP увеличилось в 1-5 раз по сравнению с исходн ой цельной кровью, в зависимости от метода (не показано)। सभी हाइपरटोनिक डेक्सट्रोज़ सांद्रता पर प्लेटलेट गिनती में कमी और >12.5% ​​​​डेक्सट्रोज़ सांद्रता पर पीआरपी प्लेटलेट्स में एमपीवी में वृद्धि: विधि के आधार पर बेसलाइन पूरे रक्त की तुलना में पीआरपी प्लेटलेट गिनती 1-5 गुना बढ़ गई (दिखाया नहीं गया)। ).> 12.5% ​​अतिरिक्त शुल्क, अतिरिक्त शुल्क, अतिरिक्त शुल्क, पीआरपी शुल्क एमपीवी स्रोत: 与अधिक पढ़ें >12.5% ​​ग्लूकोज सांद्रता पर, ग्लूकोज की उच्च सांद्रता रक्त गणना को कम कर देती है, पीआरपी रक्त एमपीवी बढ़ जाती है: 与基线全血 की तुलना में, पीआरपी रक्त गणना एकाग्रता की 1 से 5 गुना तक बढ़ जाती है (वर्णित नहीं)। При концентрациях глюкозы >12,5% все концентрации гипертонической глюко зы снижали количество тромбоцитов, а MPV повышали в тромбоцитах PRP: количество тромбоцитов PRP увеличивалось от 1- 5-कोर концентраций по сравнению с и сходными концентрациями цельной крови, в зависимости от метода (не описано ). ग्लूकोज सांद्रता>12.5% ​​पर, सभी उच्च रक्तचाप से ग्रस्त ग्लूकोज सांद्रता में प्लेटलेट गिनती कम हो गई और पीआरपी प्लेटलेट्स में एमपीवी में वृद्धि हुई: पीआरपी प्लेटलेट गिनती बेसलाइन संपूर्ण रक्त सांद्रता की तुलना में 1 से 5 गुना बढ़ गई, विधि पर निर्भर करती है (जैसा कि वर्णित है)।चित्र 1 से पता चलता है कि पानी में पतला करने के बाद प्लेटलेट्स की संख्या लगभग 75% कम हो गई और बेसलाइन पीआरपी की तुलना में ग्लूकोज की विभिन्न सांद्रता के साथ 15 मिनट के कमजोर पड़ने के बाद 20-30% कम हो गई और मात्रा के लिए समायोजित 1: 1 कमजोर पड़ने (वॉल्यूम सुधार के साथ 1- के 1)।k -1 प्रजनन).1 प्रजनन).
प्रत्येक तनुकरण में कोशिकाओं की संख्या तनुकरण से पहले मूल संख्या के एक अंश के रूप में व्यक्त की जाती है।
पीआरपी उत्पादन के दौरान एमपीवी न्यूनतम रूप से कम हो गया, पानी या ग्लूकोज (25% पीआरपी ग्लूकोज मिश्रण सहित) में 12.5% ​​तक कमजोर पड़ने की सांद्रता में कोई बदलाव नहीं हुआ और 50% ग्लूकोज समाधान (छवि 2) में कमजोर पड़ने के बाद 20% से अधिक की वृद्धि हुई।).इसके विपरीत, एरिथ्रोसाइट्स ने H2O के अलावा किसी भी तनुकरण पर मात्रा में कोई महत्वपूर्ण परिवर्तन नहीं दिखाया।
प्रत्येक तनुकरण में कोशिकाओं की औसत मात्रा तनुकरण से पहले मूल मात्रा के प्रतिशत के रूप में व्यक्त की जाती है।
50% ग्लूकोज (25% ग्लूकोज के साथ तैयार करने के लिए) के संपर्क में आने वाले बीसी में प्लेटलेट काउंट में समान लेकिन कम स्पष्ट कमी और सीवीआर में वृद्धि देखी गई।तालिका 2 50% डेक्सट्रोज़ में पतला पूरे रक्त में सेल संख्या और सेल वॉल्यूम की तुलना 50% डेक्सट्रोज़ में पतला चरण 1 पीआरपी डेटा के साथ करती है।आरबीसी गणना और आरबीसी एमसीवी में परिवर्तन स्पष्ट नहीं थे और हमारे ध्यान का केंद्र नहीं थे।
एसडी = मानक विचलन, एमडी = समूहों के बीच औसत अंतर, एसई = औसत अंतर का मानक विचलन, आरबीसी = एरिथ्रोसाइट्स, पीएलटी = प्लेटलेट्स, पीआरपी = प्लेटलेट समृद्ध प्लाज्मा, डब्ल्यूबी = संपूर्ण रक्त
WB में D50W जोड़ने के बाद, D50W (664±348 बनाम 544±277) में PRP कमजोर पड़ने पर 17.8% की तुलना में प्रतिशत कमजोर पड़ने-समायोजित प्लेटलेट हानि 7.7% (310±73 बनाम 286±96) थी।एमपीवी डब्ल्यूबी में 16.8% (10.1 ± 0.5 से 11.8 ± 0.6) की वृद्धि हुई, जबकि एमपीवी पीआरपी में 26% (9.2 ± 0.8 बनाम 11.6 ± 0. 7) की वृद्धि हुई। यद्यपि पीआरपी के साथ प्लेटलेट गिनती में कमी और एमपीवी वृद्धि दोनों में औसत अंतर काफी अधिक था, डब्ल्यूबी के भीतर प्लेटलेट गिनती में कमी में परिवर्तन लगभग महत्वपूर्ण थे (310 ± 73 से 286 ± 96 (-7.7%); पी = .06) और एमपीवी में वृद्धि महत्वपूर्ण थी (10.1 ± 0.5 से 11.8 ± 0.6 (+16.8) पी <.001)। यद्यपि पीआरपी के साथ प्लेटलेट गिनती में कमी और एमपीवी वृद्धि दोनों में औसत अंतर काफी अधिक था, डब्ल्यूबी के भीतर प्लेटलेट गिनती में कमी में परिवर्तन लगभग महत्वपूर्ण थे (310 ± 73 से 286 ± 96 (-7.7%); पी = .06) और एमपीवी में वृद्धि महत्वपूर्ण थी (10.1 ± 0.5 से 11.8 ± 0.6 (+16.8) पी <.001)।यद्यपि पीआरपी के साथ प्लेटलेट गिनती में कमी और सीवीआर वृद्धि दोनों में औसत अंतर काफी अधिक था, डब्ल्यूबी के भीतर प्लेटलेट गिनती में गिरावट में परिवर्तन लगभग महत्वपूर्ण थे (310 ± 73 से 286 ± 96 (-7.7%); पी = 0.06)।увеличение MPV было значительным (от 10,1 ± 0,5 до 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001). एमपीवी में वृद्धि महत्वपूर्ण थी (10.1 ± 0.5 से 11.8 ± 0.6 (+16.8) पी <0.001)।尽管PRP 在血小板计数减少和MPV 增加方面的平均差异显着更大,但WB 内血小板计数减少的变化अधिकतम मूल्य (310 ± 73 प्रति 286 ± 96 (-7.7%)；पी = .06） और एमपीवी मूल्य निर्धारण (10.1 ± 0.5 और 11.8 ± 0.6 (+16.8) पी < .001）。पीआरपी के बारे में अधिक जानें （（（310 ± 73 ± 286 ± 96 (-7.7%) ； p = .06） और MPV （10.1 ± 0.5 到11 .8 ± 0.6 (+16.8) पी < .001）。डब्ल्यूबी के भीतर प्लेटलेट गिनती में कमी में परिवर्तन लगभग महत्वपूर्ण था (310 ± 73 से 286 ± 96 (-7.7%); पी = 0.06), हालांकि पीआरपी में प्लेटलेट गिनती में गिरावट और एमपीवी वृद्धि में काफी बड़ा औसत अंतर था।और एमपीवी में वृद्धि महत्वपूर्ण थी।(10,1 ± 0,5 से लेकर 11,8 ± 0,6 (+16,8) р < 0,001). (10.1 ± 0.5 से 11.8 ± 0.6 (+16.8) पी < 0.001 तक)।
एमपीवी में महत्वपूर्ण परिवर्तन देखने के लिए 20% ग्लूकोज की अंतिम सांद्रता की आवश्यकता थी, लेकिन 25% की अंतिम सांद्रता पर एमपीवी में परिवर्तन अधिक स्पष्ट था।प्रारंभिक गिरावट के बाद प्लेटलेट हानि स्थिर हो गई।हमने सीवीआर में प्रारंभिक तेज कमी देखी, हालांकि, सीवीआर को 25% अंतिम ग्लूकोज एकाग्रता पर तेजी से बहाल किया गया था, जो कि 20% और 15% (चित्र 3 और तालिका 3 के बाईं ओर; छायांकित बक्से) की अंतिम ग्लूकोज सांद्रता पर देखे गए सीवीआर स्तरों से काफी अधिक था।0.01 के बोनफेरोनी सुधार के साथ पी-मान ≤ अल्फा इंगित करें)।पीएलटी की संख्या में भी शुरुआती तेज गिरावट देखी गई, जो 0-15 सेकेंड के शुरुआती चरण में देखी गई, और फिर स्थिर रही (15 सेकेंड से 30 मिनट तक; तालिका 4 के बाईं ओर)।
पूरे रक्त में ग्लूकोज की विभिन्न सांद्रता को जोड़ने से एमपीवी में प्रारंभिक तेजी से कमी आई, जिसके बाद 20% से अधिक की एकाग्रता-निर्भर वसूली हुई।किंवदंती तनुकरण के बाद ग्लूकोज की सांद्रता को दर्शाती है।D15, D20 और D25 को 1:1 तनुकरण में किया गया।D21 और D41 को 1:5 तनुकरण पर किया गया।
तालिका 4 हाइपरटोनिक ग्लूकोज में पतला होने पर प्लेटलेट गिनती में परिवर्तन दिखाती है।हमने 1:1 तनुकरण और 1:5 तनुकरण पर पीएलटी संख्या में तत्काल गिरावट के बीच खुराक पर निर्भर संबंध देखा।एकल समूह के रूप में 1:5 तनुकरणों के साथ 1:1 तनुकरणों की तुलना करने पर, 1:1 समूह में प्लेटलेट गिनती में तत्काल कमी 1:5 समूह 66±48,000 (23%) बनाम 99±69,000 (37%) से कम हो गई।, पी = 0.014) 1:5 समूह में।पहले माप बिंदु पर प्रारंभिक गिरावट के बाद, ग्लूकोज के प्रतिशत के रूप में प्लेटलेट गिनती स्थिर हो गई (चित्र 4)।
जब संपूर्ण रक्त को 1:1 के अनुपात में ग्लूकोज में मिलाया जाता है, तो प्लेटलेट गिनती लगभग 25% कम हो जाती है।हालाँकि, जब संपूर्ण रक्त को 1:5 के अनुपात में जोड़ा गया, तो कमी बहुत अधिक थी - लगभग 50%।
41% ग्लूकोज ने एमपीवी को 25% या 21% की तुलना में तेजी से और अधिक नाटकीय रूप से बढ़ाया।एमपीवी परिणाम चित्र 3 में दिखाए गए हैं। अन्य सभी तनुकरणों पर, 50% ग्लूकोज जोड़ने के बाद एमपीवी में कोई तत्काल प्रारंभिक कमी नहीं देखी गई।25% ग्लूकोज (अंतिम कमजोर पड़ने पर ग्लूकोज एकाग्रता 20.8%) का उपयोग करते समय, एमपीवी में परिवर्तन 1:1 कमजोर पड़ने पर 20% ग्लूकोज में परिवर्तन के बराबर था (चित्र 3)।हालाँकि एमपीवी में बदलाव शुरू में 25% की तुलना में 41% मिश्रित सांद्रता पर अधिक थे, 16 मिनट के बाद 41% और 25% के बीच एमपीवी में अंतर अब महत्वपूर्ण नहीं था (तालिका 3, दाएं)।यह भी दिलचस्प है कि 25% ग्लूकोज ने एमपीवी को 20.8% से अधिक प्रभावी ढंग से बढ़ाया।
इस इन विट्रो अध्ययन ने आंशिक रूप से हमारी परिकल्पना की पुष्टि की। इसमें डेक्सट्रोज मिश्रण द्वारा संभावित आंशिक प्लेटलेट लसीका, अत्यधिक हाइपरटोनिटी के लिए प्लेटलेट्स का तेजी से समायोजन, और हाइपरटोनिक डेक्सट्रोज की 25% से अधिक सांद्रता के जवाब में एमपीवी में उल्लेखनीय वृद्धि देखी गई। इसमें डेक्सट्रोज मिश्रण द्वारा संभावित आंशिक प्लेटलेट लसीका, अत्यधिक हाइपरटोनिटी के लिए प्लेटलेट्स का तेजी से समायोजन, और हाइपरटोनिक डेक्सट्रोज की 25% से अधिक सांद्रता के जवाब में एमपीवी में उल्लेखनीय वृद्धि देखी गई। एक और पोस्ट देखें ठीक है, एक मोबाइल फोन के लिए एक मोबाइल फोन खरीदें ऑपरेटिंग सिस्टम पर एमपीवी को डाउनलोड करें > 25%. इसमें डेक्सट्रोज के साथ संभावित आंशिक प्लेटलेट लसीका, अत्यधिक हाइपरटोनिटी के लिए तेजी से प्लेटलेट समायोजन और हाइपरटोनिक डेक्सट्रोज स्तर> 25% की प्रतिक्रिया में एमपीवी में उल्लेखनीय वृद्धि देखी गई।它显示出通过葡萄糖混合物潜在的部分血小板溶解,血小板快速适应极端高渗，以及响应> 25 % 浓度的高渗葡萄糖时MPV 显着上升.它显示 出 通过 葡萄糖 潜在 的 部分 血小板 溶解 血小板 快速 适应 极端 高渗 ， 以及 响> 25% अतिरिक्त शुल्क एमपीवी शुल्क से कम है। एक और पोस्ट देखें козой, быструю адаптацию тромбоцитов к экстремальному гипертонусу и знач ительное увеличение MPV в ответ на концентрацию гипертонической глюкозю > 25%. यह ग्लूकोज मिश्रण द्वारा संभावित आंशिक प्लेटलेट लसीका, अत्यधिक हाइपरटोनिटी के लिए तेजी से प्लेटलेट अनुकूलन और हाइपरटोनिक ग्लूकोज के जवाब में एमपीवी में 25% से अधिक की उल्लेखनीय वृद्धि दर्शाता है।प्रारंभिक वृद्धि 41.6% ग्लूकोज एक्सपोज़र पर अधिकतम थी, लेकिन एमपीवी में वृद्धि एक्सपोज़र के लगभग 20 मिनट बाद 25% ग्लूकोज एक्सपोज़र तक पहुंच गई।
प्लेटलेट्स की सांद्रता ग्लूकोज से प्रभावित होती है।हमने देखा कि ग्लूकोज के सभी तनुकरणों पर पीएलटी की मात्रा कम हो गई।पीआरपी श्रृंखला के H2O (0%) तनुकरण में प्लेटलेट्स की संख्या में तेज गिरावट ऑस्मोटिक लसीका से जुड़ी हो सकती है।वैकल्पिक रूप से, यह प्लेटलेट क्लंपिंग के कारण होने वाली एक विकृति हो सकती है, लेकिन यह इस कमजोर पड़ने पर एमपीवी परिवर्तन की कमी के विपरीत है।इस खोज का मतलब है कि कुछ प्लेटलेट्स हाइपोऑस्मोलैरिटी के प्रति बहुत संवेदनशील हैं।
ग्लूकोज के सभी 1:1 तनुकरण में, पीएलटी की मात्रा 20-30% कम हो गई, यहां तक ​​कि डी5डब्ल्यू (252 एमओएसएम पर हाइपोटोनिक) तक, जो ग्लूकोज के एक विशिष्ट गैर-ऑस्मोटिक प्रभाव का संकेत दे सकता है, क्योंकि पीएलटी और एमपीवी दोनों एकाग्रता में तीन गुना वृद्धि पर अपरिवर्तित रहे।ग्लूकोज.D5W से D25W तक.वास्तव में, ऑस्मोलैरिटी बढ़ने के साथ पीएलटी सांद्रता में थोड़ी वृद्धि हुई।
1:1 और 1:5 तनुकरण के बीच पीएलटी में कमी का मतलब है कि विघटन प्रभाव प्रारंभिक और अंतिम ग्लूकोज एकाग्रता पर निर्भर करता है।यदि यह केवल प्रारंभिक सांद्रता पर निर्भर करता है, तो कोई 1:1 सांद्रता के बीच पीएलटी में कमी में अंतर देखने की उम्मीद करेगा।लेकिन हम ऐसा नहीं करते.यदि लाइसिस प्रभाव केवल अंतिम ग्लूकोज एकाग्रता पर निर्भर करता है, तो हम 20% 1:1 तनुकरण और 20.8% 1:5 तनुकरण के बीच अधिक अंतर की उम्मीद नहीं करते हैं।और फिर भी हमने यह किया.
यदि प्लेटलेट लिसिस के कारण प्लेटलेट हानि होती है, तो आंशिक लाइसेट बनता है, जिसके बाद साइटोकिन्स और विकास कारक बाह्य कोशिकीय वातावरण में जारी किए जाते हैं।कई अध्ययनों से पता चला है कि प्रसार समाधान के रूप में प्लेटलेट लाइसेट लगभग पीआरपी जितना ही प्रभावी है [11]।पीआरपी को प्रसार के उपचार के लिए एक प्रभावी समाधान के रूप में दिखाया गया है [12-14]।
निष्क्रिय प्लेटलेट्स कई आंतरिक संरचनाओं के साथ प्रबलित डिस्क के रूप में प्रसारित होते हैं।सक्रियण के दौरान, वे अधिक गोलाकार या अमीबा आकार ले लेते हैं, जिसके परिणामस्वरूप मात्रा में वृद्धि होती है।आयतन में वृद्धि के लिए सतह क्षेत्र में वृद्धि की आवश्यकता होती है, जो खुली नलिका प्रणाली (ओसीएस) के बाहर निकलने और झिल्ली में एक्सोसाइटिक कणिकाओं के जुड़ने का परिणाम है।यह निर्धारित किया जाना बाकी है कि क्या हाइपरटोनिक ग्लूकोज से प्रेरित एमपीवी में वृद्धि में इनमें से एक या दोनों तंत्र शामिल हैं, लेकिन यदि उत्तरार्द्ध, तो एमपीवी में वृद्धि गिरावट का संकेत देगी।
इस अध्ययन से पता चला है कि पीआरपी या संपूर्ण रक्त प्लेटलेट्स पर ग्लूकोज की उच्च सांद्रता के संपर्क में आने से 15 मिनट के भीतर एमपीवी में वृद्धि हुई, जिसमें ग्लूकोज एकाग्रता क्रमशः 25% और 41.6% थी।
प्लेटलेट एमपीवी में वृद्धि कैल्शियम प्रवाह की प्रतिक्रिया में आसपास के सूक्ष्मनलिकाएं के फैलाव के कारण हो सकती है।लियू एट अल.ग्लूकोज को प्लेटलेट टीआरपीसी6 चैनल [6] के माध्यम से कैल्शियम के प्रवाह में मध्यस्थता करते हुए दिखाया गया है।हमारी परिकल्पना यह है कि ग्लूकोज सूक्ष्मनलिकाएं उलझनों में छूट उत्पन्न करता है, जिससे एमपीवी और प्लेटलेट संवेदीकरण और/या सक्रियण में वृद्धि होती है।हालाँकि, हमारे परिणामों को देखते हुए, यह कहानी का केवल एक हिस्सा है।हमारे परीक्षणों में, D25W से नीचे कोई सांद्रता नहीं होने के कारण MPV में वृद्धि हुई।यह देखते हुए कि हमने 12.5% ​​और 25% के बीच ग्लूकोज सांद्रता के संपर्क का परीक्षण नहीं किया है, हमारे चरण 1 के परिणाम बताते हैं कि ग्लूकोज सांद्रता की इस सीमा में एक सीमा हो सकती है जिससे एमपीवी में वृद्धि हो सकती है।चरण 3 और 4 में आगे के परीक्षण से पता चला कि 20-25% ग्लूकोज इसके लिए सीमा प्रतीत होता है, लेकिन यह स्पष्ट नहीं है कि क्यों।
हमने सेंट्रीफ्यूजेशन के बाद एमपीवी में ~9% की कमी भी देखी।यह स्पष्ट नहीं है कि एमपीवी में यह कमी सेंट्रीफ्यूज की आरबीसी परत में फंसे बड़े और सघन प्लेटलेट्स के कारण है या नहीं।यह अवलोकन चिकित्सकों के लिए महत्वपूर्ण हो सकता है क्योंकि इसका मतलब यह हो सकता है कि पीआरपी प्लेटलेट्स डब्ल्यूबी प्लेटलेट्स का एक छोटा और कम घना उपसमूह है।
पिछले अध्ययन में, हमने दिखाया था कि मैन्युअल तरीकों से पीआरपी तैयार करना सस्ता है [8]।यदि ग्लूकोज ऊतक प्लेटलेट्स या पीआरपी को संवेदनशील बनाता है, जिससे वे सक्रियण के प्रति अधिक संवेदनशील हो जाते हैं, या यदि पीआरपी आंशिक लाइसेट गुणों के साथ उत्पन्न होता है, तो यह पुनर्जनन को बढ़ा सकता है और चिकित्सा की आवश्यकता को कम कर सकता है।इसलिए, पीआरपी और अत्यधिक संकेंद्रित ग्लूकोज का संयोजन अकेले पीआरपी या ग्लूकोज की तुलना में अधिक लागत प्रभावी हो सकता है।
हमारे अध्ययन में कई कमियाँ हैं।सबसे पहले, हम कई अलग-अलग तरीकों से प्राप्त पीआरपी का उपयोग करते हैं।इससे परस्पर विरोधी परिणाम हो सकते हैं.दूसरा, प्लेटलेट सक्रियण हुआ था या नहीं, यह अधिक सटीक रूप से निर्धारित करने के लिए हम अपने किसी भी नमूने का जैव रासायनिक विश्लेषण करने में असमर्थ थे।हम अल्फा ग्रेन्युल गिरावट की डिग्री या उपस्थिति को बेहतर ढंग से समझने के लिए पी-सेलेक्टिन, प्लेटलेट फैक्टर 4, मोनोसाइटिक प्लेटलेट समुच्चय, या प्लेटलेट सक्रियण के अन्य मार्करों को मापना चाहेंगे, लेकिन यह इस अध्ययन के दायरे से परे है।तीसरा, हम इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी या अन्य तरीकों से यह पुष्टि करने में असमर्थ थे कि ग्लूकोज-उजागर प्लेटलेट्स में एमपीवी में वृद्धि सूक्ष्मनलिकाएं उलझनों पर प्रभाव के कारण थी।
25% ग्लूकोज के साथ डब्ल्यूबी या पीआरपी के मिश्रण ने एमपीवी को बढ़ा दिया, जो प्लेटलेट सक्रियण की शुरुआत का संकेत देता है, हालांकि इस अध्ययन ने एकत्रीकरण या गिरावट की प्रगति को प्रदर्शित नहीं किया।हाइपरटोनिक ग्लूकोज मिश्रण के परिणामस्वरूप प्लेटलेट हानि हुई, जो संभवतः लिटिक प्रभाव का प्रतिनिधित्व करता है।प्लेटलेट्स का आंशिक सक्रियण या लसीका प्लेटलेट इंजेक्शन के बाद ऊतक पुनर्जनन का कारण बन सकता है।यह स्पष्ट नहीं है कि इन परिवर्तनों के क्या नैदानिक ​​परिणाम हो सकते हैं।आगे के अध्ययनों ने सक्रियण या लसीका के अधिक सटीक माप का प्रदर्शन किया है और डब्ल्यूबी या पीआरपी के साथ हाइपरटोनिक ग्लूकोज मिश्रण के विभिन्न नैदानिक ​​​​प्रभावों का मूल्यांकन किया है।
ग्लूकोज प्रोलिफ़ेरेटिव थेरेपी एक सरल और सस्ती पुनर्योजी थेरेपी है जो तेजी से विस्तार कर रही है और नैदानिक ​​​​अनुसंधान का समर्थन कर रही है।यह अध्ययन एक शारीरिक तंत्र का सुझाव देता है, जिसकी पुष्टि होने पर, हमें प्रोलिफ़ेरेटिव थेरेपी के पुनर्योजी तंत्र के हिस्से को समझने में मदद मिल सकती है।
मिसौरी विश्वविद्यालय, कैनसस सिटी स्कूल ऑफ मेडिसिन, कैनसस सिटी, यूएसए में बायोमेडिकल और स्वास्थ्य सूचना विज्ञान
मानव विषय: इस अध्ययन में सभी प्रतिभागियों ने सहमति दी या नहीं दी।इंटरनेशनल सोसाइटी फॉर सेल्युलर मेडिसिन ने ICMS-2017-003 अनुमोदन जारी किया है।निम्नलिखित प्रोटोकॉल को इंटरनेशनल सोसाइटी फॉर सेल्युलर मेडिसिन के संस्थागत समीक्षा बोर्ड द्वारा आगे उपयोग के लिए अनुमोदित किया गया है: शीर्षक: बेसलाइन सीबीसी प्लेटलेट गिनती के आधार पर प्लेटलेट-समृद्ध प्लाज्मा दवा उपज की गणना।पशु विषय: सभी लेखकों ने पुष्टि की कि इस अध्ययन में कोई भी जानवर या ऊतक शामिल नहीं थे।हितों का टकराव: आईसीएमजेई यूनिफॉर्म डिस्क्लोजर फॉर्म के अनुसार, सभी लेखक निम्नलिखित घोषणा करते हैं: भुगतान/सेवा जानकारी: सभी लेखक घोषणा करते हैं कि प्रस्तुत कार्य के लिए उन्हें किसी भी संगठन से वित्तीय सहायता नहीं मिली।वित्तीय संबंध: सभी लेखक घोषित करते हैं कि उनका वर्तमान में या पिछले तीन वर्षों के भीतर किसी भी ऐसे संगठन के साथ वित्तीय संबंध नहीं है जो प्रस्तुत कार्य में रुचि रखता हो।अन्य रिश्ते: सभी लेखक घोषित करते हैं कि ऐसे कोई अन्य रिश्ते या गतिविधियाँ नहीं हैं जो प्रस्तुत कार्य को प्रभावित कर सकते हैं।
हैरिसन टीई, बॉलर जे, रीव्स के एट अल।(17 मई, 2022) प्लेटलेट गिनती और मात्रा पर ग्लूकोज का प्रभाव: पुनर्योजी चिकित्सा के लिए निहितार्थ।इलाज 14(5): e25081.doi:10.7759/cureus.25081
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