Mèsi paske ou te vizite Nature.com. Vèsyon navigatè w ap itilize a gen yon sipò CSS limite. Pou pi bon eksperyans lan, nou rekòmande pou w itilize yon navigatè ki ajou (oswa dezaktive Mòd Konpatibilite nan Internet Explorer). Antretan, pou asire sipò kontinyèl, nou pral rann sit la san estil ak JavaScript.
Senyen san kontwòl se youn nan prensipal kòz lanmò. Reyalize yon emostaz rapid asire siviv sijè a kòm yon premye swen pandan konba, aksidan trafik, ak operasyon rediksyon lanmò. Echafodaj konpoze ranfòse ak fib nanoporeu (NFRCS) sòti nan yon senp konpozisyon ki fòme fim emostatik (HFFC) kòm yon faz kontinyèl ka deklanche ak amelyore emostaz. Devlopman NFRCS la baze sou konsepsyon zèl libèl la. Estrikti zèl libèl la konsiste de zèl transvèsal ak longitudinal, epi manbràn zèl yo konekte youn ak lòt pou kenbe entegrite mikwoestrikti a. HFFC kouvri sifas fib la inifòmman ak yon fim ki gen yon epesè nanomèt epi konekte epesè koton (Ct) distribye owaza a (faz dispèse) pou fòme yon estrikti nanoporeu. Konbinezon faz kontinyèl ak dispèse diminye pri pwodwi a dis fwa plis konpare ak pwodwi ki disponib nan komès. NFRCS modifye (tanpon oswa braslè) ka itilize nan yon varyete aplikasyon byomedikal. Etid in vivo yo konkli ke Cp NFRCS ki devlope a deklanche epi amelyore pwosesis koagilasyon an nan sit aplikasyon an. NFRCS ka modifye mikwoanviwònman an epi aji nan nivo selilè a akòz estrikti nanoporè li a, sa ki lakòz yon pi bon gerizon nan modèl blesi eksizyon an.
Senyen san kontwòl pandan konba, sitiyasyon intraoperatif ak ijans ka poze yon menas grav pou lavi moun ki blese yo1. Kondisyon sa yo mennen plis nan yon ogmantasyon jeneral nan rezistans vaskilè periferik, sa ki lakòz chòk emorajik. Mezi apwopriye pou kontwole senyen pandan ak apre operasyon yo konsidere kòm potansyèlman menase lavi2,3. Domaj nan gwo veso yo mennen nan yon pèt san masiv, sa ki lakòz yon to mòtalite ≤ 50% nan konba ak 31% pandan operasyon1. Pèt san masiv mennen nan yon diminisyon nan volim kò a, sa ki diminye pwodiksyon kadyak la. Yon ogmantasyon nan rezistans vaskilè periferik total ak yon pwoblèm pwogresif nan mikwosikilasyon mennen nan ipoksi nan ògàn ki sipòte lavi yo. Chòk emorajik ka rive si kondisyon an kontinye san entèvansyon efikas1,4,5. Lòt konplikasyon yo enkli pwogresyon ipotermi ak asidoz metabolik, osi byen ke yon maladi koagilasyon ki anpeche pwosesis koagilasyon an. Chòk emorajik grav asosye avèk yon risk lanmò ki pi wo6,7,8. Nan chòk grad III (pwogresif), transfizyon san esansyèl pou siviv pasyan an pandan morbidite ak mòtalite intraoperatif ak postoperatif. Pou simonte tout sitiyasyon ki menase lavi nou mansyone pi wo yo, nou te devlope yon echafodaj konpoze ranfòse ak fib nanoporè (NFRCS) ki itilize yon konsantrasyon polimè minimòm (0.5%) lè l sèvi avèk yon konbinezon polimè emostatik idrosolubl.
Avèk itilizasyon ranfòsman fib, yo ka devlope pwodui ki pa koute chè. Fib yo, ki ranje o aza, sanble ak estrikti zèl yon demwazèl, balanse pa bann orizontal ak vètikal sou zèl yo. Venn transvèsal ak longitudinal zèl la kominike avèk manbràn zèl la (Fig. 1). NFRCS la konsiste de Ct ranfòse kòm yon sistèm echafodaj ki gen pi bon rezistans fizik ak mekanik (Figi 1). Akòz pri abòdab li ak atizanal li, chirijyen yo prefere itilize kalib fil koton (Ct) pandan operasyon ak pansman. Kidonk, lè nou konsidere plizyè benefis li yo, tankou > 90% seluloz cristalline (ki kontribye nan amelyorasyon aktivite emostatik), yo te itilize Ct kòm yon sistèm skelèt NFRCS9,10. Kidonk, lè nou konsidere plizyè benefis li yo, tankou > 90% seluloz cristalline (ki kontribye nan amelyorasyon aktivite emostatik), yo te itilize Ct kòm yon sistèm skelèt NFRCS9,10. Следовательно, учитывая его многочисленные преимущества, в том числе > 90% кристаличцесклолы (участвует в повышении гемостатической активности), Ct использовали в качестве скелетной скелетной скелетной сис9,10 N. Se poutèt sa, etandone anpil benefis li yo, tankou >90% seluloz cristalline (ki enplike nan ogmantasyon aktivite emostatik), yo te itilize Ct kòm sistèm skelèt NFRCS la9,10.因此，考虑到它的多重益处，包括> 90% 的结晶纤维素（有助于增强止血滉止血滴，被用作NFRCS9,10 的骨架系统。因此，考虑到它的多重益处，包括> 90%Se poutèt sa, etandone anpil benefis li yo, tankou plis pase 90% seluloz cristalline (ki ede amelyore aktivite emostatik), yo te itilize Ct kòm yon echafodaj pou NFRCS9,10.Yo te kouvri Ct an sifas (yo te obsève fòmasyon yon fim nano-epè) epi li te konekte ak yon konpozisyon emostatik ki fòme yon fim (HFFC). HFFC a aji tankou yon matrijèl, li kenbe Ct ki plase o aza ansanm. Konsepsyon yo devlope a transmèt estrès nan faz dispèse a (fib ranfòsman). Li difisil pou jwenn estrikti nanoporè ki gen bon rezistans mekanik lè w itilize konsantrasyon minim polimè. Anplis de sa, li pa fasil pou pèsonalize diferan mwazi pou diferan aplikasyon byomedikal.
Figi a montre yon dyagram konsepsyon NFRCS la ki baze sou estrikti zèl libèl la (A). Imaj sa a montre yon analoji konparatif estrikti zèl yon libèl (venn ki kwaze ak longitudinal zèl la konekte youn ak lòt) ak yon mikrofotografi kwa-seksyonèl Cp NFRCS (B). Reprezantasyon eskematik NFRCS la.
Yo te devlope NFRC yo lè l sèvi avèk HFFC kòm yon faz kontinyèl pou adrese limitasyon ki anwo yo. HFFC konpoze de plizyè polimè emostatik ki fòme fim, tankou kitosan (kòm prensipal polimè emostatik la) avèk metilseluloz (MC), idroksipropil metilseluloz (HPMC 50 cp) ak polivinil alkòl (PVA) (125 kDa) kòm yon polimè sipò ki ankouraje fòmasyon tronbus. Ajoute polivinilpirolidin K30 (PVP K30) te amelyore kapasite absòpsyon imidite NFRCS yo. Yo te ajoute polietilèn glikòl 400 (PEG 400) pou amelyore retikulasyon polimè nan melanj polimè lye. Yo te aplike twa diferan konpozisyon emostatik HFFC (Cm HFFC, Ch HFFC ak Cp HFFC), sètadi kitosan avèk MC (Cm), kitosan avèk HPMC (Ch), ak kitosan avèk PVA (Cp), sou Ct. Divès etid karakterizasyon in vitro ak in vivo te konfime aktivite emostatik ak gerizon blesi NFRCS yo. Materyèl konpoze NFRCS yo ofri yo ka itilize pou pèsonalize divès fòm echafodaj pou satisfè bezwen espesifik.
Anplis de sa, yo ka modifye NFRCS yo kòm yon bandaj oswa yon woulo pou kouvri tout zòn blesi nan ekstremite enferyè yo ak lòt pati nan kò a. Espesyalman pou blesi manm konba, yo ka chanje konsepsyon NFRCS ki fèt la pou l vin yon demi bra oswa yon janm konplè (Figi Siplemantè S11). Yo ka fè NFRCS la tounen yon braslè ak lakòl tisi, ki ka itilize pou sispann senyen nan men moun ki blese grav nan ponyèt ak swisid. Objektif prensipal nou se devlope yon NFRCS ki gen mwens polymère posib ki ka delivre bay yon gwo popilasyon (anba liy povrete a) epi ki ka mete nan yon twous premye swen. Senp, efikas, epi ekonomik nan konsepsyon, NFRCS benefisye kominote lokal yo epi li ka gen yon enpak mondyal.
Yo te achte kitosan (pwa molekilè 80 kDa) ak amarant nan men Merck, peyi Zend. Yo te achte idroksipropil metilseluloz 50 Cp, polietilèn glikòl 400 ak metilseluloz nan men Loba Chemie Pvt. LLC, Mumbai. Yo te achte alkòl polivinil (pwa molekilè 125 kDa) (87-90% idrolize) nan men National Chemicals, Gujarat. Yo te achte polivinilpirolidin K30 nan men Molychem, Mumbai, epi yo te achte ti sèvyèt esteril nan men Ramaraju Surgery Cotton Mills Ltd., Tamil Nadu, avèk dlo Milli Q (sistèm pirifikasyon dlo Direct-Q3, Merck, peyi Zend) kòm materyèl transpòtè.
Yo te devlope NFRCS la lè l sèvi avèk yon metòd liofilizasyon11,12. Yo te prepare tout konpozisyon HFFC yo (Tablo 1) lè l sèvi avèk yon ajitatè mekanik. Prepare yon solisyon 0.5% kitosan lè l sèvi avèk 1% asid asetik nan dlo pa brase kontinyèlman a 800 rpm sou yon ajitatè mekanik. Yo te ajoute pwa egzak polimè chaje a ki endike nan Tablo 1 nan solisyon kitosan an epi yo te brase l jiskaske yo te jwenn yon solisyon polimè klè. Yo te ajoute PVP K30 ak PEG 400 nan melanj ki te sòti a nan kantite yo endike nan Tablo 1, epi yo te kontinye brase l jiskaske yo te jwenn yon solisyon polimè viskoz klè. Yo te sonike beny solisyon polimè ki te sòti a pandan 60 minit pou retire bul lè ki te bloke nan melanj polimè a. Jan yo montre nan Figi Siplemantè S1(b), Ct te distribye respire nan chak pi nan yon plak 6 pi (mwazi) complété ak 5 ml HFFC.
Yo te sonike plak sis pi a pandan 60 minit pou reyalize yon mouyaj ak yon distribisyon inifòm HFFC nan rezo Ct a. Apre sa, yo te konjele plak sis pi a a -20°C pandan 8-12 èdtan. Yo te liofilize plak konjelasyon yo pandan 48 èdtan pou jwenn divès fòmilasyon NFRCS. Yo itilize menm pwosedi a pou pwodui diferan fòm ak estrikti, tankou tanpon oswa tanpon silendrik, oswa nenpòt lòt fòm pou diferan aplikasyon.
Yo peze kitosan (80 kDa) (3%) avèk presizyon epi yo fonn li nan 1% asid asetik avèk yon ajitatè mayetik. Nan solisyon kitosan ki te sòti a, yo te ajoute 1% PEG 400 epi yo te brase l pandan 30 minit. Vide solisyon ki te sòti a nan yon veso kare oswa rektangilè epi konjele l a -80°C pandan 12 èdtan. Yo te liofilize echantiyon ki te konjele yo pandan 48 èdtan pou jwenn Cs13 pore.
NFRCS ki te devlope a te sibi eksperyans lè l sèvi avèk spektroskopi enfrawouj transfòme Fourier (FTIR) (Shimadzu 8400 s FTIR, Tokyo, Japon) pou konfime konpatibilite chimik kitosan ak lòt polymè14,15. Espèk FTIR yo (lajè seri espektral la soti nan 400 a 4000 cm-1) nan tout echantiyon teste yo te jwenn lè yo te fè 32 eskanè.
Yo te evalye to absòpsyon san an (BAR) pou tout fòmilasyon yo lè l sèvi avèk metòd Chen et al. 16 dekri a avèk ti modifikasyon. Yo te seche NFRK yo ki te devlope nan tout konpozisyon yo nan yon fou vakyòm a 105°C pandan tout lannwit lan pou retire solvan ki rete a. Yo te mete 30 mg NFRCS (pwa echantiyon inisyal la – W0) ak 30 mg Ct (kontwòl pozitif) nan asyèt separe ki gen yon premix 3.8% sitrat sodyòm. Nan entèval tan predetèmine, sa vle di 5, 10, 20, 30, 40 ak 60 segonn, yo te retire NFRCS yo epi yo te netwaye sifas yo pou san ki pa absòbe a lè yo te mete echantiyon yo sou Ct pandan 30 segonn. Yo te konsidere pwa final san NFRCS 16 la absòbe a (W1) nan chak pwen tan. Kalkile pousantaj BAR la lè l sèvi avèk fòmil sa a:
Yo te detèmine tan kayo san an (BCT) jan Wang et al. 17 te rapòte l. Yo te kalkile tan ki nesesè pou san konplè (san rat premelanje ak 3.8% sitrat sodyòm) kayo an prezans NFRCS kòm BCT echantiyon tès la. Yo te mete divès konpozan NFRCS yo (30 mg) nan ti boutèy ak bouchon vis 10 ml epi yo te enkube yo a 37°C. Yo te ajoute san (0.5 ml) nan ti boutèy la epi yo te ajoute 0.3 ml CaCl2 0.2 M pou aktive koagilasyon san an. Finalman, envèse ti boutèy la chak 15 segonn (jiska 180°) jiskaske yon kayo fèm fòme. Yo estime BCT echantiyon an pa kantite ti boutèy yo te ranvèse17,18. Baze sou BCT, yo te chwazi de konpozisyon optimal nan NFRCS Cm, Ch ak Cp pou plis etid karakterizasyon.
Yo te detèmine BCT konpozisyon Ch NFRCS ak Cp NFRCS yo lè yo te aplike metòd Li et al. dekri a 19. Mete 15 x 15 mm2 Ch NFRCS, Cp NFRCS, ak Cs (kontwòl pozitif) nan bwat Petri separe (37 °C). Yo te melanje san ki gen 3.8% sitrat sodyòm ak 0.2 M CaCl2 nan yon rapò volim 10:1 pou kòmanse pwosesis kayo san an. Yo te aplike 20 µl melanj san rat 0.2 M CaCl2 sou sifas echantiyon an epi yo te mete l nan yon bwat Petri vid. Kontwòl la se te san yo te vide nan bwat Petri vid san Ct. Nan entèval fiks 0, 3, ak 5 minit, sispann kayo a lè w ajoute 10 ml dlo deyonize (DI) nan echantiyon an ki gen bwat la san w pa deranje kayo a. Eritrosit ki pa koagile yo sibi emoliz an prezans dlo deyonize epi yo libere emoglobin. Yo te mezire emoglobin nan diferan moman (HA(t)) nan 540 nm (λmax emoglobin) lè l sèvi avèk yon espektrofotomèt UV-Vis. Yo te pran absòpsyon absoli emoglobin (AH(0)) nan 0 min nan 20 µl san nan 10 ml dlo deyonize kòm yon estanda referans. Yo te kalkile absòpsyon relatif emoglobin (RHA) nan san kaye a apati rapò HA(t)/HA(0) lè l sèvi avèk menm pakèt san an.
Lè yo te itilize yon analizè teksti (Texture Pro CT V1.3 Build 15, Brookfield, USA), yo te detèmine pwopriyete adezif NFRK sou tisi domaje a. Yo te peze yon plat silendrik ki gen fon ouvè kont anndan po kochon an (san kouch grès la). Yo te aplike echantiyon yo (Ch NFRCS ak Cp NFRCS) atravè kanil nan mwazi silendrik pou kreye adezyon sou po kochon an. Apre yon enkubasyon 3 minit nan tanperati chanm (RT) (25° C.), yo te anrejistre fòs adezif NFRCS la nan yon vitès konstan 0.5 mm/seg.
Prensipal karakteristik selan chirijikal yo se ogmante kayo san an pandan y ap diminye pèt san. Koagilasyon san pèt nan NFRCS yo te evalye lè l sèvi avèk yon metòd ki te pibliye deja avèk ti modifikasyon 19. Fè yon tib mikwosantrifij (2 ml) (dyamèt enteryè 10 mm) ak yon twou 8 × 5 mm2 sou yon bò tib santrifij la (ki reprezante yon blesi ouvè). NFRCS itilize pou fèmen ouvèti a epi tep itilize pou sele bor ekstèn yo. Ajoute 20 µl 0.2 M CaCl2 nan tib mikwosantrifij ki gen premix sitrat sodyòm 3.8% la. Apre 10 minit, tib mikwosantrifij yo te retire nan asyèt yo epi ogmantasyon nan mas asyèt yo te detèmine akòz koule san ki soti nan NFRK la (n = 3). Pèt san Ch NFRCS ak Cp NFRCS yo te konpare ak Cs.
Yo te detèmine entegrite mouye NFRCS yo dapre metòd Mishra ak Chaudhary21 dekri a avèk kèk ti modifikasyon. Mete NFRCS yo nan yon flakon Erlenmeyer 100 ml avèk 50 ml dlo epi brase pandan 60 segonn san fòme yon kouvèti. Enspeksyon vizyèl ak priyorizasyon echantiyon yo pou entegrite fizik dapre koleksyon an.
Yo te etidye fòs lyezon HFFC ak Ct lè l sèvi avèk metòd ki te pibliye deja avèk modifikasyon minè. Yo te evalye entegrite kouch sifas la lè yo te ekspoze NFRK a ond akoustik (estimilis ekstèn) an prezans dlo milliQ (Ct). Yo te mete NFRCS Ch NFRCS ak Cp NFRCS ki te devlope yo nan yon bechè ki te ranpli ak dlo epi yo te sonike pandan 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, ak 30 minit, respektivman. Apre siye a, yo te itilize diferans pousantaj ant pwa inisyal ak final NFRCS la pou kalkile pousantaj pèt materyèl (HFFC). BCT in vitro te plis sipòte fòs lyezon oswa pèt materyèl sifas yo. Efikasite lyezon HFFC ak Ct bay koagilasyon san ak yon kouch elastik sou sifas Ct22.
Yo te detèmine omojènite NFRCS ki te devlope a pa BCT echantiyon yo (30 mg) ki te pran nan kote jeneral NFRCS yo te chwazi o aza. Swiv pwosedi BCT ki te mansyone deja a pou detèmine konfòmite NFRCS la. Pwòksimite ant tout senk echantiyon yo asire yon kouvèti sifas inifòm ak yon depo HFFC nan may Ct a.
Yo te detèmine sifas kontak nominal san an (NBCA) jan yo te rapòte deja avèk kèk modifikasyon. Koagile san an lè w mete 20 µl san ant de sifas Ct, Ch NFRCS, Cp NFRCS ak Cs yo. Apre 1 èdtan, yo te separe de pati stent la epi yo te mezire sifas kayo a manyèlman. Yo te konsidere valè mwayèn twa repetisyon yo kòm NBCA NFRCS19.
Yo te itilize analiz Absòpsyon Vapè Dinamik (DVS) pou evalye efikasite NFRCS pou absòbe dlo nan anviwònman ekstèn lan oswa nan sit blesi a ki responsab pou inisye koagilasyon an. DVS la evalye oswa anrejistre absòpsyon ak pèt vapè nan yon echantiyon gravimetrikman lè l sèvi avèk yon balans ultra-sansib ak yon rezolisyon mas ±0.1 µg. Yon presyon vapè pasyèl (imidite relatif) jenere pa yon kontwolè koule mas elektwonik alantou echantiyon an lè yo melanje gaz transpòtè satire ak sèk. Selon direktiv Farmakope Ewopeyen an, dapre pousantaj absòpsyon imidite pa echantiyon yo, echantiyon yo te klase an 4 kategori (0–0.012% p/p− non-igroskopik, 0.2–2% p/p yon ti jan igroskopik, 2–15% modera igroskopik, ak > 15% trè igroskopik)23. Selon direktiv Farmakope Ewopeyen an, dapre pousantaj absòpsyon imidite pa echantiyon yo, echantiyon yo te klase an 4 kategori (0–0.012% p/p− non-igroskopik, 0.2–2% p/p yon ti jan igroskopik, 2–15% modera igroskopik, ak > 15% trè igroskopik)23.An akò avèk rekòmandasyon Farmakope Ewopeyen an, selon pousantaj absòpsyon imidite echantiyon yo te fè, yo te divize echantiyon yo an 4 kategori (0–0.012% p/p – non-igroskopik, 0.2–2% p/p lejèman igroskopik, 2–15%).% умеренно гигроскопичен и > 15% очень гигроскопичен)23. % modera igroskopik ak > 15% trè igroskopik)23.根据欧洲药典指南，根据样品吸收水分的百分比，样品分为4 类（0-0.012% w/w-w非吸湿性、0.2-2% w/w 轻微吸湿性、2-15% 适度吸湿，> 15% 非常吸湿）23。根据 欧洲 药典 指南 ， 根据 吸收 水分 的 百分比 样品 分为 分为 分为 分为 （01（0（0. W/w- 吸湿 性 、 、 、 、 0.2-2% W/w 轻微 、 2-15% 适度 吸湿 ，> 15 %非常吸湿）23〿）An akò avèk rekòmandasyon Farmakope Ewopeyen an, echantiyon yo divize an 4 klas selon pousantaj imidite echantiyon an absòbe (0-0.012% pa pwa – non-igroskopik, 0.2-2% pa pwa lejèman igroskopik, 2-15% pa pwa).% умеренно гигроскопичен, > 15 % очень гигроскопичен) 23. % modera igroskopik, > 15% trè igroskopik) 23.Yo te detèmine efikasite igroskopik NFCS X NFCS ak TsN NFCS sou yon analizè DVS TA TGA Q5000 SA. Pandan pwosesis sa a, yo te jwenn tan analiz la, imidite relatif la (RH), ak pwa echantiyon an tan reyèl a 25°C24. Yo kalkile kontni imidite a pa yon analiz mas NFRCS egzat lè l sèvi avèk ekwasyon sa a:
MC se imidite NFRCS. m1 – pwa sèk NSAID yo. m2 se mas NFRCS an tan reyèl nan yon RH bay.
Yo te estime sifas total la lè l sèvi avèk yon eksperyans adsorpsyon azòt ak azòt likid apre yo te fin vide echantiyon yo a 25 °C pandan 10 èdtan (< 7 × 10–3 Torr). Yo te estime sifas total la lè l sèvi avèk yon eksperyans adsorpsyon azòt ak azòt likid apre yo te fin vide echantiyon yo a 25 °C pandan 10 èdtan (< 7 × 10–3 Torr). Общая площадь поверхности оценивалась с помощью эксперимента по адсорбции азотка сомощью опорожнения образцов при 25 °С в течение 10 ч (< 7 × 10–3 Торр). Yo te estime sifas total la lè l sèvi avèk yon eksperyans adsorpsyon azòt ak azòt likid apre yo te fin vide echantiyon yo a 25°C pandan 10 èdtan (< 7 × 10–3 Torr).在25°C 清空样品10 小时（< 7 × 10-3 Torr）后，使用液氮的氮吸附实验估计总表靂总表靂在 25°C Общая площадь поверхности оценивалась с использованием экспериментов по адсорбцик и бцик использованием азотом после опорожнения образцов в течение 10 часов при 25°C (< 7 × 10-3 торр). Yo te estime sifas total la lè yo te itilize eksperyans adsorpsyon azòt ak azòt likid apre yo te fin vide echantiyon yo pandan 10 èdtan a 25°C (< 7 x 10-3 torr).Yo te detèmine sifas total la, volim pò a ak gwosè pò NFRCS la avèk yon Quantachrome ki soti nan NOVA 1000e, Otrich, lè l sèvi avèk lojisyèl RS 232.
Prepare 5% globil wouj (saline kòm diluan) nan san konplè. Apre sa, transfere yon alikòt HFFC (0.25 ml) nan yon plak 96-pi ak 5% mas globil wouj (0.1 ml). Enkube melanj lan a 37°C pandan 40 minit. Yo te konsidere yon melanj globil wouj ak serom kòm yon kontwòl pozitif, epi yon melanj saline ak globil wouj kòm yon kontwòl negatif. Yo te detèmine emaglitinasyon an dapre echèl Stajitzky a. Echèl yo pwopoze yo se jan sa a: + + + + agregasyon granulaire dans; + + + kousinen anba lis ak bor koube; + + kousinen anba lis ak bor chire; + bag wouj etwat toutotou bor kousinen lis yo; – (negatif) bouton wouj disrè 12 nan sant pi ki pi ba a.
Yo te etidye emokonpatibilite NFRCS yo dapre metòd Òganizasyon Entènasyonal pou Normalizasyon (ISO) (ISO10993-4, 1999)26,27. Metòd gravimetrik Singh et al. te dekri a te fè ti modifikasyon pou evalye fòmasyon tronbis an prezans oswa sou sifas NFRCS yo. Yo te enkube 500 mg Cs, Ch NFRCS ak Cp NFRCS nan saline tampon fosfat (PBS) pandan 24 èdtan a 37°C. Apre 24 èdtan, yo te retire PBS la epi yo te trete NFRCS la ak 2 ml san ki gen 3.8% sitrat sodyòm. Sou sifas NFRCS la, ajoute 0.04 ml 0.1 M CaCl2 nan echantiyon yo te enkube yo. Apre 45 minit, yo te ajoute 5 ml dlo distile pou sispann koagilasyon an. Yo te trete san ki te koagile sou sifas NFRK la ak yon solisyon fòmaldeyid 36-38%. Yo te seche epi peze kaye yo ki te fikse ak fòmaldeyid. Yo te estime pousantaj tronboz la lè yo te kalkile pwa vè a san san ak echantiyon an (kontwòl negatif) ak vè a ki te gen san an (kontwòl pozitif).
Kòm yon premye konfimasyon, echantiyon yo te vizyalize anba yon mikwoskòp optik pou konprann kapasite kouch sifas HFFC a, Ct ki konekte ansanm, ak rezo Ct a pou fòme porositë. Seksyon mens Ch ak Cp ki soti nan NFRCS yo te koupe ak yon lam bistouri. Seksyon ki te sòti a te mete sou yon lam vè, kouvri ak yon kouvèlamèl, epi yo te fikse bor yo ak lakòl. Lam ki te prepare yo te gade anba yon mikwoskòp optik epi yo te pran foto nan diferan agrandisman.
Yo te vizyalize depo polimè nan rezo Ct yo lè l sèvi avèk mikwoskopi fliyoresans ki baze sou metòd Rice et al.29 dekri a. Konpozisyon HFFC ki te itilize pou fòmilasyon an te melanje avèk yon koloran fliyoresan (amaranth), epi yo te prepare NFRCS (Ch & Cp) dapre metòd ki te mansyone anvan an. Konpozisyon HFFC ki te itilize pou fòmilasyon an te melanje avèk yon koloran fliyoresan (amaranth), epi yo te prepare NFRCS (Ch & Cp) dapre metòd ki te mansyone anvan an.Konpozisyon HFFC ki te itilize pou fòmilasyon an te melanje avèk yon koloran fliyoresan (amaranth) epi yo te jwenn NFRCS (Ch ak Cp) dapre metòd ki te mansyone anvan an.将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的斶光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的斶法到的方法CNFh Cp）.将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的斶光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的斶法到的方法CNFh Cp）.Konpozisyon HFFC ki te itilize nan fòmilasyon an te melanje avèk yon lank fliyoresan (Amaranth) epi li te resevwa NFRCS (Ch ak Cp), jan nou te mansyone pi bonè.Yo te koupe seksyon mens NFRK nan echantiyon yo te jwenn yo, yo te mete yo sou lam an vè, epi yo te kouvri yo ak lamèl. Yo te obsève lam yo te prepare yo anba yon mikwoskòp fliyoresan lè l sèvi avèk yon filtè vèt (310-380 nm). Yo te pran imaj yo ak yon agrandisman 4x pou konprann relasyon Ct yo ak depo polimè an plis nan rezo Ct a.
Yo te detèmine topografi sifas NFRCS Ch ak Cp a lè l sèvi avèk yon mikwoskòp fòs atomik (AFM) avèk yon cantilever TESP ultra-file nan mòd tapo: 42 N/m, 320 kHz, ROC 2-5 nm, Bruker, Taiwan. Yo te detèmine aspè sifas la pa rasin kare mwayèn (RMS) lè l sèvi avèk lojisyèl (Scanning Probe Image Processor). Yo te rann plizyè kote NFRCS sou imaj 3D pou tcheke inifòmite sifas la. Devyasyon estanda nòt la pou yon zòn bay defini kòm aspè sifas la. Yo te itilize ekwasyon RMS la pou quantifye aspè sifas NFRCS31 la.
Yo te fè etid ki baze sou FESEM avèk FESEM, SU8000, HI-0876-0003, Hitachi, Tokyo, pou konprann mòfoloji sifas Ch NFRCS ak Cp NFRCS, ki te montre pi bon BCT pase Cm NFRCS. Yo te fè etid FESEM lan dapre metòd Zhao et al. 32 dekri a avèk ti modifikasyon. Yo te premelanje 20 a 30 mg Ch NFRCS ak Cp NFRCS ak 20 µl sitrat sodyòm 3.8% premelanje ak san rat. Yo te ajoute 20 μl CaCl2 0.2 M nan echantiyon trete ak san yo pou kòmanse koagilasyon epi yo te enkube echantiyon yo nan tanperati chanm pandan 10 minit. Anplis de sa, yo te retire eritrosit anplis yo sou sifas NFRCS la lè yo rense yo avèk solisyon saline.
Echantiyon ki te vin apre yo te trete ak 0.1% glutaraldeyid epi answit yo te seche yo nan yon fou lè cho a 37°C pou retire imidite. Echantiyon seche yo te kouvri epi analize 32. Lòt imaj yo te jwenn pandan analiz la se te fòmasyon kaye sou sifas fib koton endividyèl yo, depo polimè ant Ct, mòfoloji eritrosit (fòm), entegrite kaye a, ak mòfoloji eritrosit an prezans NFRCS. Yo te eskane zòn NFRCS ki pa trete yo ak zòn NFRCS trete ak Ch ak Cp ki te enkube ak san pou iyon elemantè (sodyòm, potasyòm, azòt, kalsyòm, mayezyòm, zenk, kwiv ak selenyòm) 33. Konpare pousantaj iyon elemantè ant echantiyon trete ak sa ki pa trete yo pou konprann akimilasyon iyon elemantè pandan fòmasyon kaye a ak omojènite kaye a.
Yo te detèmine epesè kouch sifas Cp HFFC sou sifas Ct a lè l sèvi avèk FESEM. Yo te koupe seksyon kwa Cp NFRCS yo nan estrikti a epi yo te aplike kouch sa a pa pulverizasyon katodik. Yo te obsève echantiyon kouch pulverizasyon ki te soti yo avèk FESEM epi yo te mezire epesè kouch sifas la 34, 35, 36.
Mikwo-tomografi radyografi bay imaj 3D ki pa destriktif ak gwo rezolisyon epi li pèmèt ou etidye aranjman estriktirèl entèn NFRK la. Mikwo-tomografi a itilize yon reyon radyografi ki pase nan echantiyon an pou anrejistre koyefisyan atenyasyon lineyè lokal reyon X yo nan echantiyon an, sa ki ede jwenn enfòmasyon mòfolojik. Yo te egzamine kote entèn Ct nan Cp NFRCS ak Cp NFRCS trete ak san pa mikwo-tomografi pou konprann efikasite absòpsyon ak kayo san an prezans NFRCS37,38,39. Yo te rekonstwi estrikti 3D echantiyon Cp NFRCS trete ak san ak sa ki pa trete yo lè l sèvi avèk mikwo-tomografi (V|tome|x S240, Phoenix, Almay). Lè l sèvi avèk lojisyèl VG STUDIO-MAX vèsyon 2.2, yo te pran plizyè imaj radyografi nan diferan ang (idealman pwoteksyon 360°) pou devlope imaj 3D pou NFRCS. Yo te rekonstwi done pwojeksyon yo te kolekte yo an imaj volumetrik 3D lè l sèvi avèk lojisyèl senp 3D ScanIP Academic ki koresponn lan.
Anplis de sa, pou konprann distribisyon kayo a, yo te ajoute 20 µl san sitre premelanje ak 20 µl CaCl2 0.2 M nan NFRCS la pou kòmanse kayo san an. Yo kite echantiyon yo prepare yo vin di. Yo te trete sifas NFRC la ak 0.5% glutaraldeyid epi yo te seche l nan yon fou lè cho a 30-40°C pandan 30 minit. Yo te eskane kayo san ki te fòme sou NFRCS la, yo te rekonstwi l, epi yo te vizyalize yon imaj 3D nan kayo san an.
Yo te fè tès antibakteri sou Cp NFRCS (pi bon konparezon ak Ch NFRCS) lè l sèvi avèk metòd ki te dekri deja a avèk ti modifikasyon. Yo te detèmine aktivite antibakteri Cp NFRCS ak Cp HFFC lè l sèvi avèk twa mikwo-òganis tès diferan [S.aureus (bakteri gram-pozitif), E.coli (bakteri gram-negatif) ak Candida blan (C.albicans)] k ap grandi sou agar nan bwat Petri nan yon enkibatè. Inokile inifòmman 50 ml sispansyon kilti bakteri dilye a nan yon konsantrasyon 105-106 CFU ml-1 sou medyòm agar la. Vide medyòm nan nan yon bwat Petri epi kite l solidifye. Yo te fè pi sou sifas plak agar la pou ranpli ak HFFC (3 pi pou HFFC ak 1 pou kontwòl negatif). Ajoute 200 µl HFFC nan 3 pi ak 200 µl pH 7.4 PBS nan 4yèm pi a. Sou lòt bò bwat Petri a, mete yon disk Cp NFRCS 12 mm sou agar solidifye a epi mouye l ak PBS (pH 7.4). Tablèt siprofloksasin, anpisilin ak flukonazol yo konsidere kòm estanda referans pou Staphylococcus aureus, Escherichia coli ak Candida albicans. Mezire zòn inibisyon an manyèlman epi pran yon imaj dijital zòn inibisyon an.
Apre apwobasyon etik enstitisyonèl la, etid la te fèt nan Kasturba Medical College of Education and Research nan Manipal, Karnataka, nan sid peyi Zend. Komite Etik Enstitisyonèl Kasturba Medical College, Manipal, Karnataka (IEC: 674/2020) te revize epi apwouve pwotokòl eksperimantal TEG in vitro a. Yo te rekrite sijè yo pami donatè san volontè (ki gen laj 18 a 55 an) ki soti nan bank san lopital la. Anplis de sa, yo te jwenn yon fòm konsantman enfòme nan men volontè yo pou koleksyon echantiyon san yo. Yo te itilize TEG natif natal (N-TEG) ​​pou etidye efè fòmilasyon Cp HFFC a sou san konplè premelanje ak sitrat sodyòm. N-TEG lajman rekonèt pou wòl li nan reanimasyon pwen swen, ki kreye pwoblèm pou klinisyen yo akòz potansyèl pou reta klinikman siyifikatif nan rezilta yo (tès koagilasyon woutin). Yo te fè analiz N-TEG lè l sèvi avèk san konplè. Yo te jwenn konsantman enfòme ak istwa medikal detaye nan men tout patisipan yo. Etid la pa t enkli patisipan ki te gen konplikasyon emostatik oswa tronbotik tankou gwosès/apre akouchman oswa maladi fwa. Moun ki t ap pran medikaman ki afekte kaskad koagilasyon an te eskli nan etid la tou. Tès laboratwa debaz (emoglobin, tan protrombin, tronboplastin aktive ak konte plakèt) yo te fèt sou tout patisipan yo dapre pwosedi estanda yo. N-TEG detèmine viskoelastisite kayo san an, estrikti inisyal kayo a, entèraksyon patikil, ranfòsman kayo a, ak liziz kayo a. Analiz N-TEG la bay done grafik ak nimerik sou efè kolektif plizyè eleman selilè ak plasma. Analiz N-TEG la te fèt sou de volim diferan Cp HFFC (10 µl ak 50 µl). Kòm rezilta, yo te ajoute 1 ml san konplè ak asid asid nan 10 μl Cp HFFC. Ajoute 1 ml (Cp HFFC + san sitre), 340 µl san melanje nan 20 µl 0.2 M CaCl2 ki gen asyèt TEG. Apre sa, yo te chaje asyèt TEG yo nan TEG® 5000, US pou mezire R, K, ang alfa, MA, G, CI, TPI, EPL, LY 30% echantiyon san yo an prezans Cp HFFC41.
Komite Etik Animal Enstitisyonèl (IAEC), Lekòl Medsin Kasturba, Enstiti Edikasyon Siperyè Manipal, Manipal (IAEC/KMC/69/2020) te revize epi apwouve pwotokòl etid in vivo a. Tout eksperyans sou bèt yo te fèt an akò avèk rekòmandasyon Komite pou Kontwòl ak Sipèvizyon Eksperimantasyon Animal (CPCSEA). Tout etid NFRCS in vivo (2 × 2 cm2) yo te fèt sou rat Wistar fi (ki peze 200 a 250 g). Tout bèt yo te aklimate nan yon tanperati 24-26°C, bèt yo te gen aksè lib a manje ak dlo estanda ad libitum. Tout bèt yo te divize owaza an diferan gwoup, chak gwoup te gen twa bèt. Tout etid yo te fèt an akò avèk Etid sou Animal: Rapò Eksperyans In Vivo 43. Anvan etid la, yo te anestezi bèt yo atravè administrasyon intraperitoneyal (ip) yon melanj 20-50 mg ketamin (pou chak 1 kg pwa kò) ak 2-10 mg ksilazin (pou chak 1 kg pwa kò). Apre etid la, yo te kalkile volim senyen an lè yo te evalye diferans ki genyen ant pwa inisyal ak pwa final echantiyon yo, epi yo te pran valè mwayèn yo te jwenn nan twa tès yo kòm volim senyen echantiyon an.
Yo te aplike modèl anpitasyon ke rat la pou konprann potansyèl NFRCS yo pou modifye senyen nan twomatis, konba, oswa aksidan trafik (modèl blesi). Koupe 50% ke a ak yon lam bistouri epi mete l nan lè a pandan 15 segonn pou asire senyen nòmal. Anplis de sa, yo te mete echantiyon tès yo sou ke yon rat lè yo te aplike presyon (Ct, Cs, Ch NFRCS ak Cp NFRCS). Yo te rapòte senyen ak PCT pou echantiyon tès yo (n = 3)17,45.
Yo te envestige efikasite kontwòl presyon NFRCS nan konba sou yon modèl atè femoral sifasyal la. Yo ekspoze atè femoral la, yo pèse l ak yon troka 24G, epi yo senyen l nan 15 segonn. Apre yo fin obsève yon senyen san kontwòl, yo mete echantiyon tès la nan sit pèse a epi aplike presyon. Touswit apre aplikasyon echantiyon tès la, yo te anrejistre tan kayo a epi yo te obsève efikasite emostatik la pandan 5 minit apre yo. Yo te repete menm pwosedi a ak Cs ak Ct46.
Dowling et al. 47 te pwopoze yon modèl blesi nan fwa pou evalye potansyèl emostatik materyèl emostatik yo nan kontèks senyen intraoperatwa. Yo te anrejistre BCT pou echantiyon Ct (kontwòl negatif), kad Cs (kontwòl pozitif), echantiyon Ch NFRCS, ak echantiyon Cp NFRCS. Yo te ekspoze venn kav supraepatik rat la lè yo te fè yon laparotomi medyàn. Apre sa, yo te koupe pati distal lòb gòch la ak sizo. Fè yon ensizyon nan fwa a ak yon lam bistouri epi kite l senyen pandan kèk segonn. Yo te mete echantiyon tès Ch NFRCS ak Cp NFRCS ki te peze avèk presizyon sou sifas ki domaje a san okenn presyon pozitif epi yo te anrejistre BCT. Gwoup kontwòl la (Ct) te aplike presyon epi apre sa Cs 30 s47 san kraze blesi a.
Yo te fè tès gerizon blesi in vivo lè l sèvi avèk yon modèl blesi eksizisyonèl pou evalye pwopriyete gerizon blesi NFRCS ki baze sou polymère yo. Yo te chwazi epi yo te fè modèl blesi eksizisyonèl yo dapre metòd ki te pibliye deja avèk ti modifikasyon19,32,48. Yo te anestezye tout bèt yo jan yo te dekri deja. Sèvi ak yon pwenson byopsi (12 mm) pou fè yon ensizyon sikilè pwofon nan po do a. Yo te abiye sit blesi ki te prepare yo ak Cs (kontwòl pozitif), Ct (lè yo rekonèt ke kousinen koton entèfere ak gerizon), Ch NFRCS ak Cp NFRCS (gwoup eksperimantal) ak yon kontwòl negatif san okenn tretman. Chak jou nan etid la, yo te mezire zòn blesi a nan tout rat yo. Sèvi ak yon kamera dijital pou pran yon foto zòn blesi a epi mete yon nouvo pansman. Yo te mezire pousantaj fèmti blesi a avèk fòmil sa a:
Baze sou pousantaj fèmen blesi a nan 12yèm jou etid la, yo te retire po rat ki nan pi bon gwoup la ((Cp NFRCS) ak gwoup kontwòl la) epi yo te etidye li avèk koloran H&E ak koloran trichrome Masson. Baze sou pousantaj fèmen blesi a nan 12yèm jou etid la, yo te retire po rat ki nan pi bon gwoup la ((Cp NFRCS) ak gwoup kontwòl la) epi yo te etidye li avèk koloran H&E ak koloran trichrome Masson.Baze sou pousantaj fèmen blesi a nan 12yèm jou etid la, yo te retire po rat ki nan pi bon gwoup la ((Cp NFRCS) ak gwoup kontwòl la) epi yo te egzamine li avèk koloran ematoksilin-eozin ak trikwòm Masson.根据研究第12天的伤口闭合百分比，切除最佳组((Cp NFRCS)和对照组)的大鼠皮肤，进行H&E染色和Masson三色染色研究。根据研究第12天的伤口闭合百分比，切除最佳组((Cp NFRCS)和对照组)的大鼠皮肤，进行H&E染色和眳组）Yo te retire rat ki te nan pi bon gwoup la ((Cp NFRCS) ak gwoup kontwòl yo) pou yo te ka fè yo kolorye ak ematoksilin-eozin epi kolorye ak trichwòm Masson, dapre pousantaj fèmti blesi a nan 12yèm jou etid la.Pwosedi koloryasyon an te fèt dapre metòd ki te dekri deja49,50. An brèf, apre fiksasyon nan 10% formalin, echantiyon yo te dezidrate lè l sèvi avèk yon seri alkòl gradye. Sèvi ak yon mikwotòm pou jwenn seksyon mens (5 µm epesè) nan tisi ki te koupe a. Seksyon seri mens nan kontwòl ak Cp NFRCS yo te trete ak ematoksilin ak eozin pou etidye chanjman istopatolojik yo. Koloran trichrome Masson an te itilize pou detekte fòmasyon fibril kolagen an. Patolojis yo te etidye rezilta yo te jwenn yo avèg.
Yo te etidye estabilite echantiyon Cp NFRCS yo nan tanperati chanm (25°C ± 2°C/60% RH ± 5%) pandan 12 mwa51. Yo te enspekte Cp NFRCS (dekolorasyon sifas ak kwasans mikwòb) vizyèlman epi yo te teste li pou rezistans kont pli ak BCT dapre metòd ki dekri pi wo yo nan seksyon Materyèl ak Metòd la.
Yo te egzamine évolutivité ak reproduktibilite Cp NFRCS yo lè yo te prepare Cp NFRCS ak yon gwosè 15 × 15 cm2. Anplis de sa, yo te retire echantiyon 30 mg (n = 5) nan divès fraksyon Cp NFRCS epi yo te evalye BCT echantiyon yo te etidye yo jan sa dekri pi bonè nan seksyon Metòd la.
Nou te eseye devlope plizyè fòm ak estrikti lè l sèvi avèk konpozisyon Cp NFRCS pou plizyè aplikasyon byomedikal. Fòm oswa konfigirasyon sa yo enkli ti koton konik pou senyen nan nen, pwosedi dantè, ak ti koton silendrik pou senyen nan vajen.
Tout ansanm done yo eksprime kòm mwayèn ± devyasyon estanda epi yo te analize pa ANOVA lè l sèvi avèk Prism 5.03 (GraphPad, San Diego, CA, USA) ki te swiv pa tès konparezon miltip Bonferroni a (*p <0.05).
Tout pwosedi ki te fèt nan etid sou moun yo te an akò avèk estanda Enstiti a ak Konsèy Rechèch Nasyonal la, ansanm ak Deklarasyon Helsinki 1964 la ak amannman ki vin apre yo, oswa estanda etik menm jan an. Tout patisipan yo te enfòme sou karakteristik etid la ak nati volontè li. Done patisipan yo rete konfidansyèl yon fwa yo kolekte yo. Pwotokòl eksperimantal TEG in vitro a te revize epi apwouve pa Komite Etik Enstitisyonèl Kasturba Medical College, Manipal, Karnataka (IEC: 674/2020). Volontè yo te siyen konsantman enfòme pou kolekte echantiyon san.
Tout pwosedi ki te fèt nan etid sou bèt yo te fèt an akò avèk Fakilte Medsin Kastuba, Enstiti Edikasyon Siperyè Manipal, Manipal (IAEC/KMC/69/2020). Tout eksperyans sou bèt yo te fèt an akò avèk direktiv Komite pou Kontwòl ak Sipèvizyon Eksperimantasyon Animal (CPCSEA). Tout otè yo swiv direktiv ARRIVE yo.
Yo te analize spèktr FTIR tout NFRCS yo epi yo te konpare yo ak spèktr kitosan an ki montre nan Figi 2A. Pik spèktr karakteristik kitosan an (anrejistre) nan 3437 cm-1 (etannman OH ak NH, sipèpoze), 2945 ak 2897 cm-1 (etannman CH), 1660 cm-1 (souch NH2), 1589 cm-1 (koube N–H), 1157 cm-1 (etannman pon O-), 1067 cm-1 (etannman C–O, idroksil segondè), 993 cm-1 (etannman CO, Bo-OH) 52.53.54. Tablo Siplemantè S1 montre valè spèktr absòpsyon FTIR NFRCS yo pou kitosan (rapòtè), kitosan pi, Cm, Ch, ak Cp. Spèktr FTIR tout NFRCS yo (Cm, Ch ak Cp) te montre menm bann absòpsyon karakteristik yo ak kitosan pi san okenn chanjman enpòtan (Fig. 2A). Rezilta FTIR yo konfime absans entèraksyon chimik oswa fizik ant polimè yo itilize pou devlope NFRCS yo, sa ki endike ke polimè yo itilize yo inaktif.
Karakterizasyon in vitro Cm NFRCS, Ch NFRCS, Cp NFRCS ak Cs. (A) reprezante spèk FTIR konbine konpozisyon kitosan ak Cm NFRCS, Ch NFRCS ak Cp NFRCS anba konpresyon. (B) a) To absòpsyon san konplè NFRCS Cm, Ch, Cp, ak Cg (n = 3); Echantiyon Ct yo te montre yon BAR ki pi wo paske koton an gen yon efikasite absòpsyon ki pi wo; b) San apre absòpsyon san. Ilistrasyon echantiyon ki te absòbe a. Reprezantasyon grafik BCT echantiyon tès C a (Cp NFRCS te gen pi bon BCT a (15 s, n = 3)). Done nan C, D, E, ak G yo te montre kòm mwayèn ± SD, epi ba erè yo reprezante SD, ***p < 0.0001. Done nan C, D, E, ak G yo te montre kòm mwayèn ± SD, epi ba erè yo reprezante SD, ***p < 0.0001. Данные в C, D, E и G представлены как среднее ± стандартное отклонение, а планки погрешноставлены как среднее ± стандартное отклонение, а планки погрешностей прешностей прешностей прешноста отклонение, ***p <0,0001. Done nan C, D, E, ak G yo prezante kòm mwayèn ± devyasyon estanda, epi ba erè yo reprezante devyasyon estanda, ***p<0.0001. C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD，误差线代表SD，***p < 0.0001。 C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD，误差线代表SD，***p < 0.0001。 Данные в C, D, E и G показаны как среднее значение ± стандартное отклонение, планки погрештностестей стандартное отклонение, ***p <0,0001. Done nan C, D, E, ak G yo montre kòm mwayèn ± devyasyon estanda, ba erè yo reprezante devyasyon estanda, ***p<0.0001.