Mèsi paske w vizite Nature.com.Vèsyon navigatè w ap itilize a gen sipò CSS limite.Pou pi bon eksperyans, nou rekòmande pou w sèvi ak yon navigatè ki ajou (oswa enfim mòd konpatibilite nan Internet Explorer).Antretan, pou asire sipò kontinye, nou pral rann sit la san estil ak JavaScript.
Senyen san kontwòl se youn nan kòz prensipal lanmò.Reyalize emostaz rapid asire siviv nan sijè a kòm yon premye swen pandan konba, aksidan trafik, ak operasyon rediksyon lanmò.Nanoporous fib-ranfòse echafodaj konpoze (NFRCS) sòti nan yon senp emostatik fim-fòme konpozisyon (HFFC) kòm yon faz kontinyèl ka deklanche ak amelyore emostaz.Devlopman NFRCS la baze sou konsepsyon zèl demwazèl la.Estrikti zèl demwazèl la konsiste de zèl transverse ak longitudinal, ak manbràn zèl yo konekte youn ak lòt pou kenbe entegrite mikrostruktur la.HFFC inifòm rad sifas fib la ak yon fim nan epesè nanomèt ak konekte epesè koton distribye owaza (Ct) (faz gaye) yo fòme yon estrikti nanoporous.Konbinezon an nan faz kontinyèl ak dispèse diminye pri a nan pwodwi a pa dis fwa konpare ak pwodwi komèsyal ki disponib.NFRCS modifye (tanpon oswa braslè) ka itilize nan yon varyete aplikasyon byomedikal.Etid in vivo yo te konkli ke devlope Cp NFRCS deklanche ak amelyore pwosesis coagulation nan sit aplikasyon an.NFRCS ka modile mikro-anviwònman an epi aji nan nivo selilè akòz estrikti nanoporè li yo ki lakòz pi bon gerizon blesi nan modèl blesi eksizyon an.
Senyen san kontwòl pandan konba, sitiyasyon entraoperasyon ak ijans ka reprezante yon menas grav pou lavi blese yo1.Kondisyon sa yo plis mennen nan yon ogmantasyon jeneral nan rezistans vaskilè periferik, ki mennen nan chòk emorajik.Yo konsidere mezi apwopriye pou kontwole senyen pandan ak apre operasyon an ki kapab menase lavi2,3.Domaj nan gwo veso yo mennen nan pèt san masiv, sa ki lakòz yon to mòtalite ≤ 50% nan konba ak 31% pandan operasyon1.Pèt san masiv mennen nan yon diminisyon nan volim kò a, ki diminye pwodiksyon kadyak.Yon ogmantasyon nan rezistans total vaskilè periferik ak yon andikap pwogresif nan mikrosirkulasyon mennen nan ipoksi nan ògàn ki bay sipò yo.Chòk emoraji ka rive si kondisyon an kontinye san entèvansyon efikas1,4,5.Lòt konplikasyon gen ladan pwogresyon nan ipotèmi ak asidoz metabolik, osi byen ke yon maladi coagulation ki anpeche pwosesis la coagulation.Se chòk emorajik grav ki asosye ak yon pi gwo risk pou lanmò6,7,8.Nan klas III (pwogresif) chòk, transfizyon san esansyèl pou siviv pasyan an pandan morbidite ak mòtalite intraoperasyon ak apre operasyon.Pou simonte tout sitiyasyon ki menase lavi ki anwo yo, nou devlope yon echafodaj konpoze nan fib ranfòse nanopore (NFRCS) ki itilize yon konsantrasyon polymère minim (0.5%) lè l sèvi avèk yon konbinezon de polymère emostatik idrosolubl.
Avèk itilize nan ranfòsman fib, pwodwi pri-efikas ka devlope.Fib yo ranje owaza sanble ak estrikti zèl yon demwazèl, balanse pa bann orizontal ak vètikal sou zèl yo.Venn transverse ak longitudinal nan zèl la kominike ak manbràn zèl la (figi 1).NFRCS konsiste de Ct ranfòse kòm yon sistèm echafodaj ak pi bon fòs fizik ak mekanik (Figi 1).Akòz abòdab ak atizana, chirijyen prefere sèvi ak mezi fil koton (Ct) pandan operasyon ak pansman. Pakonsekan, konsidere plizyè benefis li yo, ki gen ladan> 90% seluloz cristalline (ki bay nan amelyorasyon nan aktivite emostatik), Ct te itilize kòm yon sistèm skelèt nan NFRCS9,10. Pakonsekan, konsidere plizyè benefis li yo, ki gen ladan> 90% seluloz cristalline (ki bay nan amelyorasyon nan aktivite emostatik), Ct te itilize kòm yon sistèm skelèt nan NFRCS9,10. Следовательно, учитывая его многочисленные преимущества, в том числе > 90% кристалитчестель в повышении гемостатической активности), Ct использовали в качестве скелетной системы NFRCS9,10. Se poutèt sa, bay anpil benefis li yo, ki gen ladan> 90% seluloz cristalline (ki enplike nan ogmante aktivite emostatik), Ct te itilize kòm sistèm nan skelèt NFRCS9,10.因此，考虑到它的多重益处，包括> 90% 的结晶纤维素（有助于增强止血强止血滢止血滨） NF ，，，，，，） ,10 的骨架系统。因此，考虑到它的多重益处，包括> 90%Se poutèt sa, bay anpil benefis li yo, ki gen ladan plis pase 90% seluloz cristalline (ede amelyore aktivite emostatik), Ct te itilize kòm yon echafodaj pou NFRCS9,10.Ct te supèrfisyèl kouvwi (yo te obsève fòmasyon fim nano-epè) ak konekte ak yon konpozisyon emostatik fim-fòme (HFFC).HFFC aji tankou yon matrigel, kenbe Ct yo mete owaza ansanm.Konsepsyon devlope transmèt estrès nan faz dispèse (ranfòse fib).Li difisil pou jwenn estrikti nanopore ak bon fòs mekanik lè l sèvi avèk konsantrasyon polymère minimòm.Anplis de sa, li pa fasil yo Customize mwazi diferan pou diferan aplikasyon byomedikal.
Figi a montre yon dyagram konsepsyon NFRCS ki baze sou estrikti zèl demwazèl la (A).Imaj sa a montre yon analoji konparatif nan estrikti zèl yon demwazèl (venn entèseksyon ak longitudinal nan zèl la konekte) ak yon fotomikrograf koup transvèsal Cp NFRCS (B).Reprezantasyon chema NFRCS.
NFRC yo te devlope lè l sèvi avèk HFFC kòm yon faz kontinyèl pou adrese limit ki anwo yo.HFFC konpoze de divès kalite polymère emostatik ki fòme fim ki gen ladan chitosan (tankou polymère emostatik prensipal la) ak methylcellulose (MC), hydroxypropyl methylcellulose (HPMC 50 cp) ak alkòl polyvinyl (PVA)) (125 kDa) kòm yon polymère sipò ki ankouraje fòmasyon tronbo.fòmasyon.Anplis de sa nan polyvinylpyrrolidine K30 (PVP K30) amelyore kapasite nan absòpsyon imidite nan NFRCS la.Polyethylene glycol 400 (PEG 400) te ajoute pou amelyore polymère crosslinking nan melanje polymère estokaj.Twa diferan konpozisyon emostatik HFFC (Cm HFFC, Ch HFFC ak Cp HFFC), sètadi chitosan ak MC (Cm), chitosan ak HPMC (Ch), ak chitosan ak PVA (Cp), yo te aplike nan Ct.Plizyè etid karakterizasyon in vitro ak in vivo te konfime aktivite emostatik ak geri blesi nan NFRCS.Materyèl konpoze NFRCS ofri yo ka itilize pou Customize divès fòm echafodaj pou satisfè bezwen espesifik.
Anplis de sa, NFRCS ka modifye kòm yon pansman oswa woulo liv pou kouvri tout zòn nan aksidan nan ekstremite ki pi ba yo ak lòt pati nan kò a.Espesyalman pou blesi manm konba, konsepsyon NFRCS ki fèt yo ka chanje nan yon mwatye bra oswa janm plen (Figi Siplemantè S11).NFRCS a ka fèt nan yon braslè ak lakòl tisi, ki ka itilize yo sispann senyen nan blesi grav ponyèt swisid.Objektif prensipal nou se devlope yon NFRCS ki gen mwens polymère ke posib ki ka delivre nan yon gwo popilasyon (anba liy povrete a) epi ki ka mete nan yon twous premye swen.Senp, efikas, ak ekonomik nan konsepsyon, NFRCS benefisye kominote lokal yo epi li ka gen yon enpak mondyal.
Chitosan (pwa molekilè 80 kDa) ak amaranth te achte nan men Merck, peyi Zend.Hydroxypropyl methylcellulose 50 Cp, polyethylene glycol 400 ak methylcellulose te achte nan men Loba Chemie Pvt.LLC, Mumbai.Alkòl polyvinyl (pwa molekilè 125 kDa) (87-90% idrolize) te achte nan men National Chemicals, Gujarat.Polyvinylpyrrolidine K30 te achte nan men Molychem, Mumbai, yo te achte écouvillons esteril nan Ramaraju Surgery Cotton Mills Ltd, Tamil Nadu, ak dlo Milli Q (sistèm pirifikasyon dlo Direct-Q3, Merck, peyi Zend) kòm konpayi asirans lan.
NFRCS te devlope lè l sèvi avèk yon metòd lyofilizasyon11,12.Tout konpozisyon HFFC (Tablo 1) yo te prepare lè l sèvi avèk yon brase mekanik.Prepare yon solisyon 0.5% nan chitosan lè l sèvi avèk 1% asid acetic nan dlo pa brase kontinyèl nan 800 rpm sou yon brase mekanik.Pwa egzak polymère chaje ki endike nan Tablo 1 te ajoute nan solisyon chitosan la epi brase jiskaske yo jwenn yon solisyon polymère klè.PVP K30 ak PEG 400 te ajoute nan melanj ki kapab lakòz nan kantite ki endike nan Tablo 1, epi yo te brase kontinye jiskaske yo jwenn yon solisyon klè polymère gluan.Te benyen an ki kapab lakòz nan solisyon polymère sonike pou 60 minit yo retire bul lè kwense nan melanj lan polymère.Jan yo montre nan Figi Siplemantè S1 (b), Ct te distribye respire nan chak pi nan yon plak 6-byen (mwazi) complétée ak 5 ml HFFC.
Plak sis-byen yo te sonike pou 60 min pou reyalize inifòm mouye ak distribisyon HFFC nan rezo Ct la.Lè sa a, friz plak la sis-pi nan -20 ° C pou 8-12 èdtan.Plak friz yo te lyofilize pou 48 èdtan pou jwenn divès fòmilasyon NFRCS.Se menm pwosedi a itilize pou pwodui diferan fòm ak estrikti, tankou tanpon oswa tanpon silendrik, oswa nenpòt lòt fòm pou aplikasyon diferan.
Kitosan byen peze (80 kDa) (3%) fonn nan 1% asid acetic lè l sèvi avèk yon brase mayetik.Nan solisyon an ki kapab lakòz nan chitosan te ajoute 1% PEG 400 ak brase pou 30 minit.Vide solisyon an ki kapab lakòz nan yon veso kare oswa rektangilè epi friz nan -80 ° C pou 12 èdtan.Yo te lyofilize echantiyon nan frizè pou 48 èdtan pou jwenn Cs13 pore.
NFRCS devlope a te sibi eksperyans lè l sèvi avèk Fourier transfòme espektroskopi enfrawouj (FTIR) (Shimadzu 8400 s FTIR, Tokyo, Japon) pou konfime konpatibilite chimik chitosan ak lòt polymers14,15.Yo te jwenn spectre FTIR (lajè ranje espektral la soti nan 400 a 4000 cm-1) nan tout echantiyon teste yo lè yo fè 32 eskanè.
Yo te evalye pousantaj absòpsyon san (BAR) pou tout fòmilasyon lè l sèvi avèk metòd ki dekri pa Chen et al.16 ak ti modifikasyon.NFRK yo devlope nan tout konpozisyon yo te cheche nan yon fou vakyòm nan 105 ° C lannwit lan pou retire sòlvan rezidyèl yo.30 mg NFRCS (inisyal pwa echantiyon - W0) ak 30 mg Ct (kontwòl pozitif) yo te mete nan asyèt separe ki gen yon premix nan 3.8% sitrat sodyòm.Nan entèval tan predetèmine, sa vle di 5, 10, 20, 30, 40 ak 60 segonn, yo te retire NFRCS yo epi netwaye sifas yo nan san ki pa absòbe lè yo mete echantiyon yo sou Ct pou 30 segonn.Pwa final la nan san absòbe pa NFRCS 16 te konsidere (W1) nan chak pwen tan.Kalkile pousantaj BAR la avèk fòmil sa a:
Tan san kayo (BCT) te detèmine jan Wang et al.17 .Tan ki nesesè pou san antye (san rat melanje ak 3.8% sitrat sodyòm) pou kaye nan prezans NFRCS yo te kalkile kòm BCT echantiyon tès la.Konpozan yo divès kalite NFRCS (30 mg) yo te mete nan 10 ml flakon bouchon vis ak enkubasyon nan 37 ° C.Yo te ajoute san (0.5 ml) nan flakon an epi yo te ajoute 0.3 ml 0.2 M CaCl2 pou aktive koagulasyon san.Finalman, ranvèse flakon an chak 15 segonn (jiska 180 °) jiskaske yon kayo fèm fòme.BCT echantiyon an estime pa kantite baskile vails17,18.Ki baze sou BCT, de konpozisyon pi bon nan NFRCS Cm, Ch ak Cp yo te chwazi pou plis etid karakterizasyon.
BCT nan konpozisyon Ch NFRCS ak Cp NFRCS te detèmine pa mete ann aplikasyon metòd ki dekri pa Li et al.19 .Mete 15 x 15 mm2 Ch NFRCS, Cp NFRCS, ak Cs (kontwòl pozitif) nan plat Petri separe (37 °C).San ki gen 3.8% sitrat sodyòm te melanje ak 0.2 M CaCl2 nan yon rapò volim 10:1 pou kòmanse pwosesis san kayo.Yo te aplike 20 µl melanj san rat 0.2 M CaCl2 sou sifas echantiyon an epi yo mete yo nan yon plat Petri vid.Kontwòl la te san vide nan plat Petri vid san Ct.Nan entèval fiks nan 0, 3, ak 5 minit, sispann kayo lè w ajoute 10 ml dlo deyonize (DI) nan echantiyon an ki gen plat la san yo pa deranje boul la.Eritrosit ki pa koagulasyon (eritrosit) sibi emoliz nan prezans dlo deyonize epi lage emoglobin.Emoglobin nan diferan pwen tan (HA(t)) te mezire nan 540 nm (λmax emoglobin) lè l sèvi avèk yon espektrofotomèt UV-Vis.Absòbsyon absoli emoglobin (AH(0)) nan 0 min nan 20 µl san nan 10 ml dlo deyonize te pran kòm yon estanda referans.Yo te kalkile absorption relatif emoglobin (RHA) san koagulasyon apati rapò HA(t)/HA(0) lè l sèvi avèk menm pakèt san an.
Sèvi ak yon analizeur teksti (Texture Pro CT V1.3 Build 15, Brookfield, USA), yo te detèmine pwopriyete adezif NFRK nan tisi ki domaje.Peze yon plat silendrik ki louvri sou anndan po vyann kochon an (san kouch grès la).Echantiyon (Ch NFRCS ak Cp NFRCS) yo te aplike atravè kanul nan mwazi silendrik yo kreye adezyon sou po a nan kochon an.Apre yon enkubasyon 3 minit nan tanperati chanm (RT) (25 ° C.), yo te anrejistre fòs adezif NFRCS nan yon pousantaj konstan de 0.5 mm / sec.
Karakteristik prensipal la nan sele chirijikal se ogmante kayo san pandan y ap diminye pèt san.Koagulasyon san pèt nan NFRCS te evalye lè l sèvi avèk yon metòd pibliye deja ak modifikasyon ti tay 19 .Fè yon tib mikrosantrifij (2 ml) (dyamèt enteryè 10 mm) ak yon twou 8 × 5 mm2 sou yon bò nan tib santrifij la (ki reprezante yon blesi louvri).NFRCS yo itilize pou fèmen ouvèti a epi yo itilize kasèt pou sele bor ekstèn yo.Ajoute 20 µl 0.2 M CaCl2 nan tib mikrosantrifij la ki gen 3.8% sodyòm sitrat premiz la.Apre 10 minit, tib mikrosantrifij yo te retire nan asyèt yo epi yo te detèmine ogmantasyon nan mas asyèt yo akòz koule san ki soti nan NFRK la (n = 3).Pèt san Ch NFRCS ak Cp NFRCS yo te konpare ak Cs.
Yo te detèmine entegrite mouye nan NFRCS baze sou metòd Mishra ak Chaudhary21 dekri ak modifikasyon minè.Mete NFRCS a nan yon flacon Erlenmeyer 100 ml ak 50 ml dlo epi toubiyon pou 60 s san yo pa fòme yon tèt.Enspeksyon vizyèl ak priyorite echantiyon pou entegrite fizik ki baze sou koleksyon.
Fòs obligatwa HFFC a Ct te etidye lè l sèvi avèk metòd pibliye deja ak modifikasyon minè.Entegrite kouch sifas yo te evalye pa ekspoze NFRK nan vag acoustic (estimilis ekstèn) nan prezans milliQ dlo (Ct).NFRCS Ch NFRCS devlope ak Cp NFRCS yo te mete nan yon beaker ki te ranpli avèk dlo ak sonike pou 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, ak 30 min, respektivman.Apre siye, yo te itilize diferans pousantaj ant pwa inisyal ak final la nan NFRCS la pou kalkile pousantaj pèt materyèl (HFFC).In vitro BCT plis sipòte fòs la obligatwa oswa pèt nan materyèl sifas yo.Efikasite nan HFFC obligatwa nan Ct bay koagulasyon san ak yon kouch elastik sou sifas la nan Ct22.
Yo te detèmine omojèn NFRCS devlope pa BCT echantiyon (30 mg) yo te pran nan kote jeneral NFRCS yo chwazi owaza.Swiv pwosedi BCT mansyone deja pou detèmine konfòmite NFRCS.Pwoksimite ant tout senk echantiyon asire kouvèti sifas inifòm ak depozisyon HFFC nan may Ct la.
Yo te detèmine zòn kontak san nominal (NBCA) jan yo te rapòte anvan ak kèk modifikasyon.Koagule san an pa bloke 20 µl san ant de sifas Ct, Ch NFRCS, Cp NFRCS ak Cs.Apre 1 èdtan, de pati yo nan stent la te separe ak manyèlman mezire zòn nan nan kayo a.Valè mwayèn twa repetisyon yo te konsidere kòm NBCA NFRCS19.
Yo te itilize analiz Dynamic Vapor Sorption (DVS) pou evalye efikasite NFRCS pou absòbe dlo ki soti nan anviwònman ekstèn lan oswa nan sit aksidan an ki responsab pou kòmanse koagulasyon.DVS evalye oswa anrejistre absòpsyon ak pèt vapè nan yon echantiyon gravimetrikman lè l sèvi avèk yon balans ultra-sansib ak yon rezolisyon mas ±0.1 µg.Yon presyon vapè pasyèl (imidite relatif) pwodwi pa yon kontwolè elektwonik koule mas alantou echantiyon an pa melanje gaz satire ak sèk transpòtè. Dapre direktiv Farmakope Ewopeyen an, ki baze sou pousantaj absorption imidite pa echantiyon yo, echantiyon yo te klase nan 4 kategori (0-0.012% w / w - ki pa igroskopik, 0.2-2% w / w yon ti kras igroskopik, 2-15% modere igroskopik, ak > 155% trè igroskopik) Dapre direktiv Farmakope Ewopeyen an, ki baze sou pousantaj absorption imidite pa echantiyon yo, echantiyon yo te klase nan 4 kategori (0-0.012% w / w - ki pa igroskopik, 0.2-2% w / w yon ti kras igroskopik, 2-15% modere igroskopik, ak > 155% trè igroskopik, ak > 15.Dapre rekòmandasyon Farmakope Ewopeyen an, tou depann de pousantaj absòpsyon imidite pa echantiyon yo, echantiyon yo te divize an 4 kategori (0-0.012% w / w - ki pa igroskopik, 0.2-2% w / w yon ti kras igroskopik, 2- kenz%).% умеренно гигроскопичен и > 15% очень гигроскопичен)23. % modere igroskopik ak > 15% trè igroskopik)23.根据欧洲药典指南，根据样品吸收水分的百分比，样品分为4 类（0-0.012% w/0.012% w/0.012% w/0.012% w/0.012% w. /w 轻微吸湿性、2-15 % 适度吸湿，> 15% 非常吸湿）23。根据 欧洲 药典 指南 ， 根据 吸收 水分 的 百分比 样品 分为 分为 分为 分为 分为 分 分 0（ 0.0（ 0.湿 性 、 、 、 、 0.2-2% W/w 轻微 、 2-15% 适度 吸湿 ，> 15 %非常吸湿）23。Dapre rekòmandasyon Farmakope Ewopeyen an, echantiyon yo divize an 4 klas depann sou pousantaj imidite absòbe echantiyon an (0-0.012% nan pwa - ki pa igroskopik, 0.2-2% nan pwa yon ti kras igroskopik, 2-15% nan pwa).% умеренно гигроскопичен, > 15 % очень гигроскопичен) 23. % modere igroskopik, > 15% trè igroskopik) 23.Efikasite igroskopik NFCS X NFCS ak TsN NFCS te detèmine sou yon analizeur DVS TA TGA Q5000 SA.Pandan pwosesis sa a, yo te jwenn tan kouri, imidite relatif (RH), ak pwa echantiyon an tan reyèl nan 25 ° C24.Kontni imidite kalkile pa egzat analiz mas NFRCS lè l sèvi avèk ekwasyon sa a:
MC la vle di imidite NFRCS.m1 - pwa sèk nan NSAIDs.m2 se mas NFRCS an tan reyèl nan yon RH bay yo.
Sipèfisi total la te estime lè l sèvi avèk yon eksperyans adsorption nitwojèn ak nitwojèn likid apre yo fin vide echantiyon yo nan 25 °C pou 10 èdtan (< 7 × 10-3 Torr). Sipèfisi total la te estime lè l sèvi avèk yon eksperyans adsorption nitwojèn ak nitwojèn likid apre yo fin vide echantiyon yo nan 25 °C pou 10 èdtan (< 7 × 10-3 Torr). Общая площадь поверхности оценивалась с помощью эксперимента по адсорбции азоток по спощью ожнения образцов при 25 °С в течение 10 ч (< 7 × 10–3 Торр). Sipèfisi total la te estime lè l sèvi avèk yon eksperyans adsorption nitwojèn ak nitwojèn likid apre echantiyon yo te vide nan 25 ° C pou 10 èdtan (< 7 × 10-3 Torr).在25°C 清空样品10 小时（< 7 × 10-3 Torr）后，使用液氮的氮吸附实验估计总表靂总表靂在 25°C Общая площадь поверхности оценивалась с использованием экспериментов по адсорбцод сорбцик по сорбцик площадь оценивалась с использованием ле опорожнения образцов в течение 10 часов при 25°C (< 7 × 10-3 торр). Sipèfisi total la te estime lè l sèvi avèk eksperyans adsorption nitwojèn ak nitwojèn likid apre echantiyon yo te vide pou 10 èdtan nan 25 ° C (< 7 x 10-3 torr).Sipèfisi total, volim pò ak gwosè pò NFRCS yo te detèmine ak yon Quantachrome soti nan NOVA 1000e, Otrich lè l sèvi avèk lojisyèl RS 232.
Prepare 5% RBC (saline kòm diluan) nan san antye.Lè sa a, transfere yon aliquot HFFC (0.25 ml) nan yon plak 96-pi ak 5% mas RBC (0.1 ml).Enkube melanj lan nan 37 ° C pou 40 minit.Yon melanj de globil wouj nan san ak serom te konsidere kòm yon kontwòl pozitif, ak yon melanj de saline ak globil wouj nan san kòm yon kontwòl negatif.Hemagglutination te detèmine selon echèl Stajitzky.Echèl yo pwopoze yo jan sa a: + + + + granules dans;+ + + kousinen anba lis ak kwen koube;+ + kousinen anba lis ak kwen chire;+ etwat bag wouj alantou bor yo nan kousinen yo lis;– (negatif) disrè bouton wouj 12 nan sant la nan pi ba a.
Emokonpatibilite NFRCS te etidye selon metòd Òganizasyon Entènasyonal pou Normalisation (ISO) (ISO10993-4, 1999)26,27.Metòd gravimetrik Singh et al dekri.Modifikasyon minè yo te fè pou evalye fòmasyon tronbo an prezans oswa sou sifas NFRCS.500 mg nan Cs, Ch NFRCS ak Cp NFRCS yo te enkube nan saline tampon fosfat (PBS) pou 24 èdtan nan 37 ° C.Apre 24 èdtan, PBS te retire epi NFRCS te trete ak 2 ml san ki gen 3.8% sitrat sodyòm.Sou sifas NFRCS a, ajoute 0.04 ml 0.1 M CaCl2 nan echantiyon enkubasyon yo.Apre 45 minit, yo te ajoute 5 ml dlo distile pou sispann coagulation.San koagulasyon sou sifas NFRK te trete ak 36-38% solisyon fòmaldeyid.Yo te cheche boul yo fiks ak fòmaldeyid epi yo te peze.Pousantaj tronboz la te estime lè w kalkile pwa glas la san san ak echantiyon (kontwòl negatif) ak vè ak san (kontwòl pozitif).
Kòm yon premye konfimasyon, echantiyon yo te vizyalize anba yon mikwoskòp optik yo konprann kapasite nan kouch sifas HFFC, Ct konekte, ak rezo Ct yo fòme porositë.Seksyon mens nan Ch ak Cp soti nan NFRCS yo te pran pare ak yon lam bistouri.Seksyon ki kapab lakòz yo te mete sou yon glise an vè, kouvri ak yon kouvèti, ak bor yo te fiks ak lakòl.Yo te gade glisad ki prepare yo anba yon mikwoskòp optik epi yo te pran foto nan diferan agrandisman.
Depozisyon polymère nan rezo Ct yo te vizyalize lè l sèvi avèk mikwoskopi fluoresans ki baze sou metòd ki dekri pa Rice et al.29. Konpozisyon HFFC yo itilize pou fòmilasyon an te melanje ak yon lank fliyoresan (amaranth), ak NFRCS (Ch & Cp) yo te prepare dapre metòd la mansyone deja. Konpozisyon HFFC yo itilize pou fòmilasyon an te melanje ak yon lank fliyoresan (amaranth), ak NFRCS (Ch & Cp) yo te prepare dapre metòd la mansyone deja.Konpozisyon HFFC yo itilize pou fòmilasyon an te melanje ak yon lank fliyoresan (amaranth) epi yo te jwenn NFRCS (Ch ak Cp) dapre metòd mansyone anvan an.将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的料光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的斶法到的斶Chp将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的料光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的斶法到的斶ChpKonpozisyon HFFC yo itilize nan fòmilasyon an te melanje ak yon lank fliyoresan (Amaranth) epi li te resevwa NFRCS (Ch ak Cp), jan mansyone pi bonè.Seksyon mens nan NFRK yo te koupe nan echantiyon yo jwenn yo, mete yo sou glisad an vè, epi yo kouvri ak kouvèti glise.Obsève glisad yo prepare anba yon mikwoskòp fliyoresan lè l sèvi avèk yon filtè vèt (310-380 nm).Imaj yo te pran nan agrandisman 4x pou konprann relasyon Ct ak depo polymère depase nan rezo Ct la.
Topografi sifas NFRCS Ch ak Cp te detèmine lè l sèvi avèk yon mikwoskòp fòs atomik (AFM) ak yon cantilever TESP ultra-byen file nan mòd tapping: 42 N/m, 320 kHz, ROC 2-5 nm, Bruker, Taiwan.Yo te detèmine brutality andigman pa kare mwayen rasin (RMS) lè l sèvi avèk lojisyèl (Scanning Probe Image Processor).Yo te rann plizyè kote NFRCS sou imaj 3D pou tcheke inifòmite sifas yo.Devyasyon estanda nan nòt la pou yon zòn yo defini kòm brutality sifas la.Yo te itilize ekwasyon RMS la pou quantifier brutality sifas NFRCS31.
Etid ki baze sou FESEM yo te fèt lè l sèvi avèk FESEM, SU8000, HI-0876-0003, Hitachi, Tokyo, pou konprann mòfoloji sifas Ch NFRCS ak Cp NFRCS, ki te montre pi bon BCT pase Cm NFRCS.Etid FESEM te fèt dapre metòd ki dekri pa Zhao et al.32 ak ti modifikasyon.NFRCS 20 a 30 mg Ch NFRCS ak Cp NFRCS yo te premellanje ak 20 µl nan 3.8% sitrat sodyòm premellanje ak san rat.Yo te ajoute 20 μl nan 0.2 M CaCl2 nan echantiyon yo trete san yo pou kòmanse coagulation ak echantiyon yo te enkube nan tanperati chanm pou 10 minit.Anplis de sa, eritrosit depase yo te retire nan sifas NFRCS la lè yo rense ak saline.
Echantiyon ki vin apre yo te trete ak 0.1% glutaraldehyde ak Lè sa a, seche nan yon fou lè cho nan 37 ° C pou retire imidite.Echantiyon yo sèk yo te kouvwi ak analize 32 .Lòt imaj yo te jwenn pandan analiz la se fòmasyon boul sou sifas fib koton endividyèl, depo polymère ant Ct, mòfoloji eritrosit (fòm), entegrite boul, ak mòfoloji eritrosit nan prezans NFRCS.Zòn NFRCS ki pa trete ak zòn NFRCS ki te trete Ch ak Cp enkubasyon ak san yo te tcheke pou iyon elemantè (sodyòm, potasyòm, nitwojèn, kalsyòm, mayezyòm, zenk, kwiv ak selenyòm)33.Konpare pousantaj iyon elemantè ant echantiyon trete ak echantiyon ki pa trete pou konprann akimilasyon ion elemantè pandan fòmasyon kayo ak omojèn kayo.
Epesè kouch sifas Cp HFFC sou sifas Ct te detèmine lè l sèvi avèk FESEM.Seksyon transvèsal Cp NFRCS yo te koupe nan fondasyon an ak kouvwi sputter.FESEM te obsève echantiyon kouch sputter ki kapab lakòz yo epi yo te mezire epesè kouch sifas la 34, 35, 36.
X-ray mikwo-CT bay D 'wo rezolisyon 3D ki pa destriktif epi li pèmèt ou etidye aranjman estriktirèl entèn NFRK.Mikwo-CT sèvi ak yon gwo bout bwa radyografi pase nan echantiyon an pou anrejistre koyefisyan lokal lineyè atenuasyon reyon X nan echantiyon an, ki ede jwenn enfòmasyon mòfolojik.Kote entèn Ct nan Cp NFRCS ak san trete Cp NFRCS te egzamine pa mikwo-CT pou konprann efikasite absòpsyon ak kayo san an prezans NFRCS37,38,39.Estrikti 3D echantiyon Cp NFRCS san trete ak san trete yo te rekonstwi lè l sèvi avèk mikwo-CT (V|tome|x S240, Phoenix, Almay).Sèvi ak vèsyon lojisyèl VG STUDIO-MAX 2.2, plizyè imaj radyografi yo te pran nan diferan ang (depreferans pwoteksyon 360 °) pou devlope imaj 3D pou NFRCS.Done pwojeksyon yo kolekte yo te rekonstwi nan imaj volumetrik 3D lè l sèvi avèk lojisyèl ki koresponn senp 3D ScanIP Academic.
Anplis de sa, pou w konprann distribisyon boul la, yo te ajoute 20 µl nan san sitrat premelanje ak 20 µl nan 0.2 M CaCl2 nan NFRCS la pou kòmanse kayo san.Echantiyon yo prepare yo kite vin di.Sifas NFRK la te trete ak 0.5% glutaraldehyde epi seche nan yon fou lè cho nan 30-40 ° C pou 30 min.Yo te analize boul san ki te fòme sou NFRCS la, rekonstwi, epi yo te vizyalize yon imaj 3D nan boul san an.
Yo te fè tès anti-bakteri sou Cp NFRCS (pi bon konpare ak Ch NFRCS) lè l sèvi avèk metòd ki dekri anvan an ak modifikasyon minè.Aktivite anti-bakteri Cp NFRCS ak Cp HFFC te detèmine lè l sèvi avèk twa mikwo-òganis tès diferan [S.aureus (bakteri gram-pozitif), E.coli (bakteri gram-negatif) ak Candida blan (C.albicans)] k ap grandi sou agar nan asyèt Petri nan yon enkibatè.Inifòm vaze 50 ml sispansyon kilti bakteri dilye nan yon konsantrasyon 105-106 CFU ml-1 sou mwayen agar la.Vide mwayen an nan yon plat Petri epi kite l solidifye.Pwi yo te fè sou sifas plak agar pou ranpli ak HFFC (3 pui pou HFFC ak 1 pou kontwòl negatif).Ajoute 200 µl HFFC nan 3 pwi ak 200 µl pH 7.4 PBS nan 4yèm pi a.Sou lòt bò a nan plat Petri a, mete yon disk 12 mm Cp NFRCS sou agar solidifye a epi mouye ak PBS (pH 7.4).Ciprofloxacin, ampicillin ak tablèt fluconazole yo konsidere kòm estanda referans pou Staphylococcus aureus, Escherichia coli ak Candida albicans.Mezire zòn nan anpèchman manyèlman epi pran yon imaj dijital nan zòn nan anpèchman.
Apre apwobasyon etik enstitisyonèl, etid la te fèt nan Kasturba Medical College of Education and Research nan Manipal, Karnataka, nan sid peyi Zend.Komite Etik Enstitisyonèl Kasturba Medical College, Manipal, Karnataka revize ak apwouve pwotokòl eksperimantal TEG in vitro a (IEC: 674/2020).Sijè yo te rekrite nan donatè san volontè (ki gen laj 18 a 55) nan bank san lopital la.Anplis de sa, yo te jwenn yon fòm konsantman enfòme nan men volontè yo pou ranmase echantiyon san yo.Teg natif natal (N-TEG) ​​te itilize pou etidye efè fòmilasyon Cp HFFC sou san antye melanje ak sitrat sodyòm.N-TEG se lajman rekonèt pou wòl li nan reanimasyon pwen-of-care, ki kreye pwoblèm pou klinisyen akòz potansyèl pou reta klinikman enpòtan nan rezilta (tès koagulasyon woutin).Analiz N-TEG te fèt lè l sèvi avèk san antye.Yo te jwenn konsantman enfòme ak istwa medikal detaye nan men tout patisipan yo.Etid la pa t enkli patisipan ki gen konplikasyon emostatik oswa tronbotik tankou gwosès / apre akouchman oswa maladi fwa.Sijè ki pran dwòg ki afekte kaskad koagulasyon an te eskli tou nan etid la.Tès laboratwa debaz yo (emoglobin, tan prothrombin, aktive tronboplastin ak konte plakèt) yo te fèt sou tout patisipan yo dapre pwosedi estanda yo.N-TEG detèmine viskoelastisite boul nan san, estrikti premye kayo, entèraksyon patikil, ranfòse boul, ak liz boul.Analiz N-TEG bay done grafik ak nimerik sou efè kolektif plizyè eleman selilè ak plasma.Analiz N-TEG te fèt sou de volim diferan Cp HFFC (10 µl ak 50 µl).Kòm yon rezilta, 1 ml san antye ak asid asid te ajoute nan 10 μl Cp HFFC.Ajoute 1 ml (Cp HFFC + san citrate), 340 µl san melanje nan 20 µl 0.2 M CaCl2 ki gen TEG plat.Apre sa, asyèt TEG yo te chaje nan TEG® 5000, US pou mezire R, K, ang alfa, MA, G, CI, TPI, EPL, LY 30% echantiyon san an prezans Cp HFFC41.
Komite Enstitisyonèl Etik Animal (IAEC), Kasturba School of Medicine, Manipal Institute of Higher Education, Manipal (IAEC/KMC/69/2020), revize ak apwouve pwotokòl etid la nan vivo.Tout eksperyans bèt yo te fèt an akò ak rekòmandasyon Komite pou Kontwòl ak Sipèvizyon Eksperyans Animal (CPCSEA).Tout etid NFRCS nan vivo (2 × 2 cm2) yo te fèt sou rat Wistar fi (ki peze 200 a 250 g).Tout bèt yo te aklimate nan yon tanperati ki nan 24-26 ° C, bèt yo te gen aksè gratis nan manje estanda ak dlo ad libitum.Tout bèt yo te owaza divize an diferan gwoup, chak gwoup te konpoze de twa bèt.Tout etid yo te fèt an akò ak Animal Studies: Report of In Vivo Experiments 43 .Anvan etid la, bèt yo te anestezi pa administrasyon intraperitoneal (ip) nan yon melanj de 20-50 mg nan ketamin (pou chak 1 kg nan pwa kò) ak 2-10 mg nan xylazine (pou chak 1 kg nan pwa kò).Apre etid la, yo te kalkile volim senyen an nan evalye diferans ki genyen ant pwa inisyal ak final echantiyon yo, yo te pran valè mwayèn yo jwenn nan twa tès yo kòm volim senyen echantiyon an.
Yo te aplike modèl anpitasyon ke rat la pou konprann potansyèl NFRCS pou modile senyen nan chòk, konba, oswa aksidan trafik (modèl aksidan).Koupe 50% ke a ak yon lam bistouri epi mete yo nan lè a pou 15 s pou asire nòmal senyen.Anplis de sa, echantiyon tès yo te mete sou ke yon rat pa aplike presyon (Ct, Cs, Ch NFRCS ak Cp NFRCS).Yo te rapòte senyen ak PCT pou echantiyon tès (n ​​= 3) 17,45.
Efikasite kontwòl presyon NFRCS nan konba te envestige sou yon modèl atè femoral supèrfisyèl la.Atè femoral la ekspoze, twou ak yon trokar 24G, epi senyen nan 15 segonn.Apre yo fin obsève senyen san kontwòl, yo mete echantiyon tès la nan sit la twou ak presyon aplike.Touswit apre aplikasyon echantiyon tès la, yo te anrejistre tan an kayo epi yo te obsève efikasite emostatik pou pwochen 5 minit yo.Menm pwosedi a te repete ak Cs ak Ct46.
Dowling et al.47 pwopoze yon modèl blesi fwa pou evalye potansyèl emostatik materyèl emostatik nan yon kontèks senyen entraoperasyon.BCT te anrejistre pou echantiyon Ct (kontwòl negatif), Cs kad (kontwòl pozitif), echantiyon Ch NFRCS, ak echantiyon Cp NFRCS.Vena cava suprahepatic nan rat la te ekspoze pa fè yon laparotomi medyàn.Apre sa, pati distal lòb gòch la te koupe ak sizo.Fè yon ensizyon nan fwa a ak yon lam bistouri epi kite l senyen pou kèk segonn.Egzakteman peze Ch NFRCS ak Cp NFRCS echantiyon tès yo te mete sou sifas ki domaje san okenn presyon pozitif epi yo te anrejistre BCT.Gwoup kontwòl la (Ct) Lè sa a, te aplike presyon ki te swiv pa Cs 30 s47 san yo pa kraze aksidan an.
Yo te fè tès gerizon blesi an vivo lè l sèvi avèk yon modèl blesi eksizyon pou evalye pwopriyete geri blesi NFRCS ki baze sou polymère devlope yo.Modèl blesi eksizyon yo te chwazi ak fèt dapre metòd pibliye deja ak modifikasyon minè19,32,48.Tout bèt yo te anestezi jan yo dekri deja.Sèvi ak yon kout pyen byopsi (12 mm) pou fè yon ensizyon sikilè gwo twou san fon nan po a nan do a.Sit blesi prepare yo te abiye ak Cs (kontwòl pozitif), Ct (rekonèt ke kousinen koton entèfere ak gerizon), Ch NFRCS ak Cp NFRCS (gwoup eksperimantal) ak yon kontwòl negatif san okenn tretman.Nan chak jou etid la, yo te mezire zòn blesi a nan tout rat.Sèvi ak yon kamera dijital pou pran yon foto nan zòn blese a epi mete yon nouvo pansman.Pousantaj fèmen blesi a te mezire pa fòmil sa a:
Ki baze sou pousantaj fèmen blesi nan 12yèm jou etid la, yo te retire po rat nan pi bon gwoup la ((Cp NFRCS) ak gwoup kontwòl la) epi etidye pa H & E tach ak tach trikrom Masson la. Ki baze sou pousantaj fèmen blesi nan 12yèm jou etid la, yo te retire po rat nan pi bon gwoup la ((Cp NFRCS) ak gwoup kontwòl la) epi etidye pa H & E tach ak tach trikrom Masson la.Dapre pousantaj fèmen blesi a nan 12yèm jou etid la, po rat yo nan pi bon gwoup la ((Cp NFRCS) ak gwoup kontwòl la) yo te retire ak egzamine pa tach ak ematoksilin-eozin ak trikrom Masson la.根据研究第12天的伤口闭合百分比，切除最佳组((Cp NFRCS)和对照组)的大鼠百分比切除最佳组((Cp NFRCS)和对照组)的大鼠百分比切除最佳组三色染色研究。根据研究第12天的伤口闭合百分比，切除最佳组((Cp NFRCS)和对照组)的大鼠百分比，切除最佳组((Cp NFRCS)和对照组)的大鼠百分比大鼠皌按进鼠皌H&E眳组）Rat nan pi bon gwoup la ((Cp NFRCS) ak gwoup kontwòl) yo te retire pou tach ematoksilin-eozin ak tach trikrom Masson ki baze sou fèmen blesi pousan nan jou 12 nan etid la.Pwosedi tach aplike a te fèt dapre metòd ki dekri deja49,50.Yon ti tan, apre yo fin fikse nan fòmalin 10%, echantiyon yo te dezidrate lè l sèvi avèk yon seri alkòl gradye.Sèvi ak yon mikrotom pou jwenn seksyon mens (5 µm epesè) nan tisi ki retire a.Seksyon seri mens nan kontwòl ak Cp NFRCS yo te trete ak ematoksilin ak eosin pou etidye chanjman istopatolojik yo.Yo te itilize tach trikrom Masson pou detekte fòmasyon fibril kolagen an.Rezilta yo jwenn yo te avèg etidye pa patolojis.
Estabilite echantiyon Cp NFRCS yo te etidye nan tanperati chanm (25°C ± 2°C/60% RH ± 5%) pou 12 mwa51.Cp NFRCS (dekolorasyon sifas ak kwasans mikwòb) te vizyèlman enspekte ak teste pou rezistans mete pliye ak BCT dapre metòd ki anwo yo dekri nan seksyon Materyèl ak Metòd.
Yo te egzamine évolutivité ak repwodiksyon Cp NFRCS lè w prepare Cp NFRCS ak yon gwosè 15 × 15 cm2.Anplis de sa, yo te retire 30 mg echantiyon (n = 5) nan divès fraksyon Cp NFRCS epi yo te evalye BCT echantiyon etidye yo jan sa dekri pi bonè nan seksyon Metòd yo.
Nou te eseye devlope divès fòm ak estrikti lè l sèvi avèk konpozisyon Cp NFRCS pou divès aplikasyon byomedikal.Fòm oswa konfigirasyon sa yo gen ladan prelèvman konik pou senyen nan nen, pwosedi dantè, ak prelèvman silendrik pou senyen nan vajen.
Tout seri done yo eksprime kòm mwayen ± devyasyon estanda epi yo te analize pa ANOVA lè l sèvi avèk Prism 5.03 (GraphPad, San Diego, CA, USA) ki te swiv pa tès konparezon miltip Bonferroni a (* p<0.05).
Tout pwosedi ki fèt nan etid imen yo te an akò ak estanda Enstiti a ak Konsèy Nasyonal Rechèch la, osi byen ke Deklarasyon èlenki 1964 ak amannman ki vin apre li yo, oswa menm estanda etik.Tout patisipan yo te enfòme sou karakteristik etid la ak nati volontè li yo.Done patisipan yo rete konfidansyèl yon fwa yo kolekte.Komite Etik Enstitisyonèl Kasturba Medical College, Manipal, Karnataka revize ak apwouve pwotokòl eksperimantal TEG in vitro a (IEC: 674/2020).Volontè yo te siyen konsantman enfòme pou kolekte echantiyon san.
Tout pwosedi ki fèt nan etid sou bèt yo te fèt an akò ak Fakilte Medsin Kastuba, Enstiti Edikasyon siperyè Manipal, Manipal (IAEC/KMC/69/2020).Tout eksperyans bèt ki fèt yo te fèt an akò ak direktiv Komite pou Kontwòl ak Sipèvizyon Eksperyans Animal (CPCSEA).Tout otè yo swiv direktiv ARRIVE yo.
Yo te analize spectre FTIR tout NFRCS yo epi yo te konpare ak spectre chitosan yo montre nan Figi 2A.Karakteristik pik espektral chitosan (anrejistre) nan 3437 cm-1 (OH ak NH etann, sipèpoze), 2945 ak 2897 cm-1 (CH etann), 1660 cm-1 (tansyon NH2), 1589 cm-1 (N-H koube), 1157 cm-, 1157 cm-, (segondè detire C--10) yl), 993 cm-1 (detire CO, Bo-OH) 52,53,54.Tablo siplemantè S1 montre valè spectre absòpsyon FTIR NFRCS pou chitosan (repòtè), chitosan pi, Cm, Ch, ak Cp.Spectres FTIR yo nan tout NFRCS (Cm, Ch ak Cp) te montre menm gwoup absòpsyon karakteristik kòm chitosan pi san okenn chanjman enpòtan (Fig. 2A).Rezilta FTIR yo konfime absans entèraksyon chimik oswa fizik ant polymères yo itilize pou devlope NFRCS yo, ki endike ke polymères yo itilize yo inaktif.
In vitro karakterizasyon nan Cm NFRCS, Ch NFRCS, Cp NFRCS ak Cs.(A) reprezante espèk FTIR konbine nan konpozisyon chitosan ak Cm NFRCS, Ch NFRCS ak Cp NFRCS anba konpresyon.(B) a) To absorption san antye nan NFRCS Cm, Ch, Cp, ak Cg (n = 3);Echantiyon Ct yo te montre yon BAR ki pi wo paske prelèvman koton an gen yon efikasite absòpsyon ki pi wo;b) San apre absòpsyon san Ilistrasyon echantiyon absòbe a.Reprezantasyon grafik BCT echantiyon tès C a (Cp NFRCS te gen pi bon BCT (15 s, n = 3)). Done nan C, D, E, ak G yo te montre kòm mwayen ± SD, ak ba erè yo reprezante SD, ***p <0.0001. Done nan C, D, E, ak G yo te montre kòm mwayen ± SD, ak ba erè yo reprezante SD, ***p <0.0001. Данные в C, D, E и G представлены как среднее ± стандартное отклонение, а планки погрешностей прешностей прешностей прешностей прешноставлены онение, ***p <0,0001. Done nan C, D, E, ak G yo prezante kòm mwayen ± devyasyon estanda, ak ba erè reprezante devyasyon estanda, ***p<0.0001. C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD，误差线代表SD，***p < 0.0001。 C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD，误差线代表SD，***p < 0.0001。 Данные в C, D, E и G показаны как среднее значение ± стандартное отклонение, планки погрештносде погрештносде погрештносто е отклонение, ***p <0,0001. Done nan C, D, E, ak G yo montre kòm mwayen ± devyasyon estanda, ba erè reprezante devyasyon estanda, ***p<0.0001.