Mèsi paske w te vizite Nature.com.Vèsyon navigatè w ap itilize a gen yon sipò limite pou CSS.Pou pi bon eksperyans, nou rekòmande pou w itilize yon navigatè ki ajou (oswa fèmen mòd konpatibilite nan Internet Explorer). Antretan, pou asire sipò kontinye, nou pral montre sit la san estil ak JavaScript.
Patikil silica pore yo te prepare pa yon metòd sol-jèl ak kèk modifikasyon yo jwenn patikil macroporous.Sa yo patikil yo te derivatized pa revèsib adisyon fragmentation chèn transfè (RAFT) polymérisation ak N-phenylmaleimide-methylvinylisocyanate (PMI) ak styrene yo prepare N-phenylmaleimide entèrkalasyon nan polystyrène (180Narrow 180Narrow) èstasyone kolòn polystyrene. mm id) yo te chaje pa sispansyon packing.Evaluated PMP kolòn separasyon nan yon melanj peptide ki gen ladan senk peptides (Gly-Tyr, Gly-Leu-Tyr, Gly-Gly-Tyr-Arg, Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg, leucine enkephalin) chromatografik kondisyon yo nan dijesyon HA chromatografik optimal, ak dijesyon HA chromatografik pèfòmans nan HA). konte plak oretical nan melanj peptide a se kòm yon wo 280,000 plak / m². Konpare pèfòmans nan separasyon nan kolòn nan devlope ak komèsyal Ascentis Express RP-Amide kolòn nan, li te obsève ke pèfòmans nan separasyon nan kolòn nan PMP te siperyè kolòn nan komèsyal an tèm de efikasite separasyon ak rezolisyon.
Nan dènye ane yo, endistri biopharmaceutique la te vin tounen yon mache mondyal elaji ak yon ogmantasyon sibstansyèl nan pati nan mache.Avèk kwasans eksplozif nan endistri biopharmaceutique 1,2,3, analiz la nan peptides ak pwoteyin yo trè vle.Anplis de peptide a sib, plizyè enpurte yo pwodwi pandan sentèz peptide, kidonk mande pou pirifye kwomatografik la nan pirifikasyon nan peptides nan kò likid ak pirifikasyon likid peptides yo vle nan analiz selil likid ak peptides yo vle. se yon travay trè difisil akòz gwo kantite espès ki kapab detekte nan yon sèl echantiyon. Malgre ke espektrometri mas se yon zouti efikas pou sekans peptide ak pwoteyin, si echantiyon sa yo yo enjekte nan espektromèt mas la nan yon sèl pas, separasyon an pa pral ideyal. 5,6.Anplis de sa, pandan separasyon faz likid, analit yo ka konsantre nan rejyon etwat, kidonk konsantre analit sa yo ak amelyore MS deteksyon sansiblite.Kwomatografi likid (LC) te avanse siyifikativman sou deseni ki sot pase a e li te vin tounen yon teknik popilè nan analiz pwoteomik 7,8,9,10.
Ranvèse-faz chromatografi likid (RP-LC) se lajman ki itilize pou pirifye a ak separasyon nan melanj peptide lè l sèvi avèk octadecyl-modifye silica (ODS) kòm faz nan estasyonè 11,12, 13.Sepandan, faz estasyonè RP pa bay satisfezan separasyon peptides ak pwoteyin akòz estrikti konplèks yo ak faz peptide amphiphilic yo analize espesyal 14,14, peptide peptide obligatwa pou analize espesyal. es ak pwoteyin ki gen pati polè ak ki pa polè pou kominike ak ak kenbe analit sa yo. 21.Mixed-mòd estasyonè faz (WAX / RPLC, HILIC / RPLC, polè entèrkalasyon / RPLC) yo apwopriye pou separasyon peptide ak pwoteyin akòz prezans nan tou de polè ak gwoup ki pa polè 22,23,24,25,26,27,28 .Menm jan an tou, polè entèrkalasyon polar ak gwoup polar ki pa seleksyone ak polar ki pa seleksyone faz ak polar ki pa seleksyone. r analit, kòm separasyon depann sou entèraksyon ki genyen ant analit ak faz estasyonè.Multimodal entèraksyon 29, 30, 31, 32.Dènyèman, Zhang et al.30 te prepare yon faz estasyonè poliamin ki te fini ak dodecyl ak siksè separe idrokarbur, depresè, flavonoid, nukleozid, estwojèn, ak plizyè lòt analit. 8 kolòn) yo disponib nan komès sou non komès Ascentis Express RP-Amide kolòn, men kolòn sa yo yo itilize pou analiz amine 33 sèlman.
Nan etid aktyèl la, yo te prepare yon faz estasyonè polè-embedded (N-phenylmaleimide-embedded polystyrène) ak evalye pou separasyon peptides ak dijere tripsin nan HSA. Faz estasyonè a te prepare lè l sèvi avèk estrateji sa a. Patikil silica pore yo te prepare dapre pwosedi ki te bay nan piblikasyon anvan nou an ak kèk modifikasyon nan pwotokòl preparasyon asid TMOSG, polietil, asid dlo, TMOSG. te ajiste pou prepare patikil silica ak gwosè pò gwo. Dezyèmman, yon nouvo ligand, phenylmaleimide-methyl vinyl isocyanate, te sentèz ak itilize yo derivatize patikil silica yo prepare yon faz estasyonè polè entegre. Faz la ki kapab lakòz estasyonè te chaje nan yon kolòn asye pur (100 × 1.8 mm mm) lè l sèvi avèk fòm nan optimize kolòn ak anbalaj mechanical se konplo a se optimize. d nan kolòn nan.Evalye separasyon kolòn chaje nan melanj peptides ki gen senk peptides;(Gly-Tyr, Gly-Leu-Tyr, Gly-Gly-Tyr-Arg, Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg, Leucine Enkephalin) ak Trypsin dijere nan albumin serom imen (HAS). Melanj peptide ak tripsin dijere HSA yo te obsève pou separe ak bon pèfòmans kolòn separasyon an konparezon ak efikasite nan PMP la te konpare ak bon rezilta nan konparezon. -Amide kolòn.Tou de peptides ak pwoteyin yo te obsève yo dwe byen rezoud ak efikas sou kolòn nan PMP, ki te pi efikas pase kolòn Ascentis Express RP-Amide la.
PEG (Polyethylene Glycol), Ure, Asid Acetic, Trimethoxy Orthosilicate (TMOS), Trimethyl Chlorosilane (TMCS), Trypsin, Albumin Serom Imèn (HSA), Klori Amonyòm, Ure, Hexane Methyldisilazane (HMDS), Methacryloyl Chloride (MC4), Styreny,HP,HP,HP,HP Klas Acetonitrile (ACN), Methanol, 2-Propanol, ak Acetone Achte nan Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA).
Yon melanj de ure (8 g), polyethylene glycol (8 g), ak 8 mL nan 0.01 N asid acetic te brase pou 10 minit, ak Lè sa a, 24 mL nan TMOS yo te ajoute ladan l 'nan kondisyon glas-frèt. Melanj reyaksyon an te chofe nan 40 ° C pou 6 èdtan ak Lè sa a, nan 120 ° C nan dlo a te vide materyèl rezidyèl nan otoklav la ak dlo a te vide dlo. ed nan 70 ° C pou 12 èdtan. Mas la mou sèk te lis nan yon fou ak kalsine nan 550 ° C pou 12 èdtan. Twa lo yo te prepare ak karakterize egzaminen repwodiksyon nan gwosè patikil, gwosè pò ak sifas sifas yo.
Pa modifikasyon sifas nan patikil silica ak pre-sentèz ligand phenylmaleimide-methylvinylisocyanate (PCMP) ki te swiv pa polymérisation radial ak styrène, yo te prepare yon konpoze polè ki gen gwoup.Faz estasyonè pou granula ak chenn polystyrène. Pwosesis preparasyon an dekri anba a.
N-phenylmaleimide (200 mg) ak methyl vinyl isocyanate (100 mg) yo te fonn nan toluèn sèk, ak 0.1 mL nan 2,2′-azoisobutyronitrile (AIBN) te ajoute nan flakon reyaksyon an prepare phenylmaleimide-methyl vinyl isocyanate nan copolymer. mete nan yon fou a 40 ° C pou 3 èdtan.
Patikil silica sèk (2 g) yo te gaye nan toluèn sèk (100 mL), brase ak sonike nan yon flacon anba wonn 500 mL pou 10 minit. PMCP (10 mg) te fonn nan toluèn epi ajoute gout nan flakon reyaksyon an atravè yon antonwa jete. 0 ° C pou 3 èdtan. Lè sa a, PMCP-bonded silica patikil (100 g) yo te fonn nan toluène (200 ml) ak 4-hydroxy-TEMPO (2 mL) te ajoute nan prezans 100 µL nan dibutiltin dilaurate kòm yon katalis. Melanj la te brase nan 50 ° C, 5 0 ° C ak filtre pou èdtan 8 ° C.
Styrene (1 mL), benzoyl oksijene BPO (0.5 mL), ak TEMPO-PMCP-tache patikil silica (1.5 g) yo te dispèse nan toluèn ak purge ak nitwojèn.Te polymérisation nan styrene te pote soti nan 100 ° C pou 12 èdtan.
Echantiyon yo te degaze nan 393 K pou 1 èdtan pou jwenn yon presyon rezidyèl ki mwens pase 10-3 Torr. Yo te itilize kantite N2 adsorbed nan yon presyon relatif nan P/P0 = 0.99 pou detèmine volim pò total. Mòfoloji nan patikil silica vid ak ligand-bonded yo te egzamine ak eskanè mikwoskopsyon elèktron (H, Japon, Japon). patikil silica lye) yo te mete sou yon kolòn aliminyòm lè l sèvi avèk kasèt kabòn adezif.Gold te plake sou echantiyon yo lè l sèvi avèk yon coater sputter Q150T, epi yo te yon kouch 5 nm Au depoze sou echantiyon yo. n (Worcestershire, UK) yo te itilize analizeur gwosè patikil Mastersizer 2000 pou jwenn distribisyon gwosè patikil la. Patikil silica toutouni ak patikil silica ligand-bonded (5 mg chak) yo te gaye nan 5 mL izopropanol, sonike pou 10 min, vortexed pou 5 min, epi mete yo sou yon analiz optik pou chak minit. ranje tanperati 30 a 800 °C.
Glass-aliyen asye pur etwat-for kolòn nan dimansyon (100 × 1.8 mm id) yo te chaje lè l sèvi avèk metòd la anbalaj sispansyon, aplike menm pwosedi a yo itilize nan Ref.31.Yon kolòn asye pur (vè-aliyen, 100 × 1.8 mm id) ak yon fitting priz ki gen yon frit 1 µm te konekte ak yon anbalaj sispansyon (Alltech Deerfield, IL, USA). Prepare yon sispansyon faz estasyonè pa sispann 150 mg nan faz estasyonè nan 1.2 mL nan 1.2 mL nan depo a kòm sòlvan yo te itilize kòm byen ke kolòn yo te itilize. Solvants la propulsion.Ranpli kolòn nan sekans pa aplike presyon nan 100 MP pou 10 minit, 80 MP pou 15 minit, ak 60 MP pou 30 minit. Pandan procesna, yo te aplike vibrasyon mekanik ak de GC kolòn shakers (Alltech, Deerfield, IL, USA) asire inifòm anbalaj kolòn nan. soti nan inite anbalaj sispansyon an epi konekte yon lòt Fitting nan inlet la ak nan sistèm nan LC yo tcheke pèfòmans li yo.
Yon ponp LC (10AD Shimadzu, Japon), piki (Valco (USA) C14 W.05) ak bouk piki 50nL, degazeur manbràn (Shimadzu DGU-14A), UV-VIS fenèt kapilè te konstwi Espesyal µLC aparèy detektè (UV-2075) ak vè-aliyen mikrokolòn yo. anbalaj, kapilè (50 μm id 365 ak diminye kapilè sendika (50 μm) yo te enstale nan priz la 1/16″ nan sendika a diminye. Koleksyon done ak pwosesis kwomatografik yo te fè lè l sèvi avèk lojisyèl Multichro 2000. Siveyans nan 254 nm Analytes yo te teste pou absòbe UV, MA Origine analize.
Albumin ki soti nan serom imen, poud lyofilize, ≥ 96% (elektwoforèz jèl agaroz) 3 mg melanje ak tripsin (1.5 mg), 4.0 M ure (1 mL), ak 0.2 M bikabonat amonyòm (1 mL). Solisyon an te brase pou 10 minit epi kenbe nan yon 3 èdtan 7 ° C nan dlo 1. % TFA.Filtre solisyon an epi estoke anba a 4 °C.
Separasyon melanj peptides ak HSA dijere tripsin yo te evalye separeman sou kolòn PMP.Tcheke separasyon melanj peptide ak dijere tripsin nan HSA pa kolòn PMP a epi konpare rezilta yo ak kolòn Ascentis Express RP-Amide la. Nimewo plak teyorik la kalkile jan sa a:
Imaj SEM nan patikil silica fè ak patikil silica ligand-bonded yo montre nan FIG.2 .SEM imaj nan patikil silica fè (A, B) montre ke, nan Kontrèman ak etid anvan nou an, patikil sa yo se esferik nan ki patikil yo long oswa gen simetri iregilye. Sifas la nan patikil yo silica ligand-bonded (C, D) se douser pase sa yo ki nan patikil yo silica fè, ki ka akòz kouch nan chain yo nan sifas patikil yo.
Scanning imaj mikwoskòp elèktron nan patikil silica fè (A, B) ak patikil silica ligand-bonded (C, D).
Distribisyon gwosè patikil yo nan patikil silica fè ak ligand-kole patikil silica yo montre nan Figi 3 (A). Koub distribisyon gwosè patikil ki baze sou volim yo te montre ke gwosè patikil yo silica ogmante apre modifikasyon chimik (Fig. 3A). , konpare ak etid anvan nou an ak valè ad(0.5) nan 3.05 μm (patikil silica polystyrène-bound) 34.Pakèt sa a te gen yon distribisyon gwosè patikil pi etwat konpare ak etid anvan nou an akòz rapò yo varye PEG, ure, TMOS, ak asid acetic nan melanj reyaksyon an. te etidye deja.Sa vle di ke fonksyonalizasyon sifas nan patikil silica ak styrène sèlman depoze yon kouch polystyrène (0.97 µm) sou sifas la silica, tandiske nan faz nan PMP epesè kouch la te 1.38 µm.
Distribisyon gwosè patikil (A) ak distribisyon gwosè pò (B) nan patikil silica fè ak patikil silica ligand-bound.
Gwosè pò a, volim pò ak sifas patikil silica etid aktyèl la yo bay nan Tablo 1 (B). Des PSD nan patikil silica fè ak patikil silica ligand-lye yo montre nan Figi 3 (B). jan yo montre nan tablo 1 (B), ak chanjman nan koub la montre nan Fig. 3 (B). Menm jan an tou, volim pò nan patikil yo silica diminye soti nan 0.67 a 0.58 cm3 / g apre modifikasyon chimik. /g) nan patikil yo silica tou diminye soti nan 116 m2 / g a 105 m2 / g apre modifikasyon chimik.
Rezilta analiz elemantè nan faz la estasyonè yo montre nan tablo 2.Chajman kabòn nan faz estasyonè aktyèl la se 6.35%, ki se pi ba pase chaj kabòn nan etid anvan nou an (patikil silica lye polystyrène, 7.93% 35 ak 10.21%, respektivman) 42. Chajman kabòn nan aktyèl la estasyonè faz nan preparasyon an nan polar ki ba kounye a, se preparasyon ki ba. nds tankou phenylmaleimide-methylvinylisocyanate (PCMP) ak 4-hydroxy-TEMPO te itilize.Pwa azòt pousan nan faz aktyèl la estasyonè se 2.21%, konpare ak 0.1735 ak 0.85% pa pwa nan nitwojèn nan etid anvan yo, respektivman. 4) ak (5) yo te 2.7% ak 2.9%, respektivman, pandan y ap chaj kabòn nan pwodwi final la (6) te 6.35%, jan yo montre nan tablo 2.Pèdi pwa a te tcheke ak faz PMP estasyonè, ak koub TGA yo montre nan Figi 4.Kob TGA a montre yon pèt pwa nan 8.6%, men li se pa sèlman chaj nan kabòn nan 8.6%. , O, ak H.
Ligan an phenylmaleimide-methylvinylisocyanate te chwazi pou modifikasyon sifas nan patikil silica paske li gen gwoup phenylmaleimide polè ak gwoup vinylisocyanate vinyl. imid moety pa gen okenn chaj vityèl nan pH nòmal. Polarite faz estasyonè a ka kontwole pa pi bon kantite styrène ak tan reyaksyon polymerization radikal gratis. Dènye etap reyaksyon an (polimerizasyon radikal gratis) se kritik epi li ka chanje polarite faz estasyonè. Yo te fè analiz elemantè pou tcheke chaj kabòn sa yo ki ogmante kantite chaj kabòn estasyonè. ing nan faz estasyonè a ak vis vèrsa.SPs prepare ak diferan konsantrasyon nan styrène gen diferan chaj kabòn.Ankò, chaje faz estasyonè sa yo nan kolòn asye pur epi tcheke pèfòmans chromatografik yo (selektif, rezolisyon, valè N, elatriye). Baze sou eksperyans sa yo, yo te chwazi yon fòmilasyon optimize pou prepare faz estasyonè PMP la pou asire bon retansyon polè a nan kontwole.
Senk melanj peptide (Gly-Tyr, Gly-Leu-Tyr, Gly-Gly-Tyr-Arg, Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg, leucine enkephalin) yo te evalye tou lè l sèvi avèk yon kolòn PMP lè l sèvi avèk yon faz mobil;60/40 (v/v) acetonitrile/dlo (0.1% TFA) nan yon vitès koule 80 μL/min.Anba kondisyon elisyon optimal, nimewo plak teyorik (N) pou chak kolòn (100 × 1.8 mm id) se 20,000 ± 100 (200,000 000 (200,000 μL/m²) plak yo bay twa kolòn N chromato/m² pou twa chromatos yo. gram yo montre nan Figi 5A.Fast analiz sou yon kolòn PMP nan gwo vitès koule (700 μL / min), senk peptides yo te eliye nan yon minit, valè N yo te trè bon, 13,500 ± 330 pou chak kolòn (100 × 1.8 mm id), Koresponn ak 135,000 plak 135,000 (figi 0000000000000001) .8 mm id) yo te chaje ak twa diferan pakèt faz PMP estasyonè pou tcheke repwodiksyon. Yo te anrejistre konsantrasyon analit pou chak kolòn lè l sèvi avèk kondisyon optimal elisyon yo ak kantite plak teyorik N ak tan retansyon pou separe menm melanj tès la sou chak kolòn.
Separasyon melanj peptide sou kolòn PMP (B) ak kolòn Ascentis Express RP-Amide (A);faz mobil 60/40 ACN/H2O (TFA 0.1%), dimansyon kolòn PMP (100 × 1.8 mm id);analyse Lòd elisyon konpoze yo: 1 (Gly-Tyr), 2 (Gly-Leu-Tyr), 3 (Gly-Gly-Tyr-Arg), 4 (Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg) ak 5 (Leucine) enkephalin asid)).
Yon kolòn PMP (100 × 1.8 mm id) te evalye pou separasyon dijere triptik nan albumin serom imen nan chromatography likid segondè pèfòmans. Kwomatogram nan Figi 6 montre ke echantiyon an byen separe ak rezolisyon an trè bon. chromatogram (Figi 6), dijesyon HSA te divize an 17 pik ki koresponn ak 17 peptides. Efikasite separasyon chak pik nan dijere HSA yo te kalkile ak valè yo bay nan Tablo 5.
Yon dijere triptik nan HSA (100 × 1.8 mm id) te separe sou yon kolòn PMP;to koule (100 µL/min), faz mobil 60/40 acetonitrile/dlo ak 0.1% TFA.
kote L se longè kolòn, η se viskozite faz mobil la, ΔP se presyon an tounen kolòn, ak u se vitès lineyè faz mobil lan. Pèmeyabilite kolòn PMP la te 2.5 × 10-14 m2, to koule a te 25 μL/min, ak 60/40 v/v ACN/dlo te itilize nan kolòn PMP a 0 × 1 nan menm jan an. etid anvan nou an Ref.34.Pèmeyabilite kolòn nan chaje ak patikil supèrfisyèl ki mouye se: 1.7 × 10-15 pou patikil 1.3 μm, 3.1 × 10-15 pou patikil 1.7 μm, 5.2 × 10-15 ak 2.5 × 10-14 μm 2.5 pou patikil μm2. pèmeyabilite faz PMP a sanble ak patikil nwayo-koki 5 μm.
kote Wx se pwa kolòn ki chaje ak klowofòm, Wy se pwa kolòn ki chaje ak metanol, ak ρ se dansite sòlvan an.Dansite metanol (ρ = 0.7866) ak klowofòm (ρ = 1.484).Porosite total patikil SILIKA-C18 kolòn 3-C18 mm-18 kolòn. 31 ke nou te deja etidye yo te 0.63 ak 0.55, respektivman.Sa vle di ke prezans nan ligand ure diminye pèmeyabilite nan faz nan estasyonè.Nan lòt men an, porosite total la nan kolòn nan PMP (100 × 1.8 mm id) se 0.60.The pèmeyabilite nan PMP kolòn-bonded èstasyone C1-type pi ba pase sa ki nan kolòn PMP-bonded C1 patikil-type silica. faz ligand C18 yo tache ak patikil silica yo kòm chèn lineyè, pandan y ap nan faz estasyonè ki kalite polystyrène, yon kouch polymère relativman epè fòme alantou li.Nan yon eksperyans tipik, porosite kolòn nan kalkile kòm:
Figi 7A, B montre kolòn PMP (100 × 1.8 mm id) ak kolòn Ascentis Express RP-Amide (100 × 1.8 mm id) lè l sèvi avèk menm kondisyon elisyon yo (sa vle di, 60/40 ACN/H2O ak 0.1% TFA).) nan konplo van Deemter la.Te chwazi melanj peptides (Gly-Tyr, Gly-Leu-Tyr, Gly-Gly-Tyr-Arg, Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg, Leucine Enkephalin) yo te prepare nan 20 µL/ Pousantaj minimòm koule pou tou de kolòn yo se 800 µL/min. Kolòn Express RP-Amide yo te 2.6 µm ak 3.9 µm, respektivman. Valè HETP yo endike ke efikasite separasyon kolòn PMP a (100 × 1.8 mm id) pi bon pase kolòn Ascentis Express RP-Amide ki disponib nan komès (100 × 1.8 mm id). etid.Pi wo efikasite separasyon kolòn PMP (100 × 1.8 mm id) konpare ak kolòn Ascentis Express RP-Amide la baze sou amelyorasyon nan fòm patikil, gwosè, ak pwosedi anbalaj kolòn konplèks yo itilize nan travay aktyèl la34.
(A) trase van Deemter (HETP kont vitès lineyè faz mobil) yo te jwenn lè l sèvi avèk yon kolòn PMP (100 × 1.8 mm id) nan 60/40 ACN/H2O ak 0.1% TFA.(B) trase van Deemter (HETP kont faz mobil vitès lineyè) yo te jwenn lè l sèvi avèk yon kolòn Ascentis Express RP-Amide/Amide 40/40/400/40/40/40/40/40/40/40/40/40/40/40/40/40 ak 0.1% TFA.
Yo te prepare yon faz estasyonè polistirèn polè entegre ak evalye pou separasyon melanj peptide sentetik ak dijere tripsin nan albumin serom imen (HAS) nan chromatography likid segondè. Pèfòmans kwomatografik kolòn PMP pou melanj peptides ekselan nan efikasite separasyon ak rezolisyon. , sentèz kontwole nan faz estasyonè a, ak kolòn anbalaj konplèks.Anplis de efikasite separasyon segondè, presyon ki ba kolòn tounen nan to koule segondè se yon lòt avantaj nan faz sa a estasyonè.PMP kolòn montre bon repwodiksyon epi yo ka itilize pou analiz la nan melanj peptide ak dijesyon tripsin nan divès pwoteyin. yo pral evalye tou pou separasyon an nan pwoteyin ak antikò monoklonal.
Field, JK, Euerby, MR, Lau, J., Thøgersen, H. & Petersson, P. Rechèch sou sistèm separasyon peptides pa chromatografi faz ranvèse Pati I: Devlopman yon pwotokòl karakterizasyon kolòn.J.Chromatography.1603, 113–129.https://doi.org/10.1016/j.chroma.2019.05.038 (2019).
Gomez, B. et al.Amelyore peptides aktif ki fèt pou tretman maladi enfeksyon.Biotechnology.Advanced.36(2), 415-429.https://doi.org/10.1016/j.biotechadv.2018.01.004 (2018).
Vlieghe, P., Lisowski, V., Martinez, J. & Khrestchatisky, M. Peptides terapetik sentetik: syans ak mache a.drug discovery.15 (1-2) jodi a, 40-56.https://doi.org/10.1016/j.drudis.2009.10.009 (2009.10.009).
Xie, F., Smith, RD & Shen, Y. Advanced Proteomic Liquid Chromatography.J.Chromatography.A 1261, 78–90 (2012).
Liu, W. et al.Advanced likid chromatography-mass spèktrometri pèmèt enkòporasyon nan metabolomics lajman vize ak proteomics.anus.Chim.Acta 1069, 89-97 (2019).
Chesnut, SM & Salisbury, JJ Wòl UHPLC nan devlopman dwòg.J.Septanm Sci.30 (8), 1183-1190 (2007).
Wu, N. & Clausen, AM Aspè fondamantal ak pratik nan ultrahigh presyon likid chromatografi pou separasyon rapid.J.Septanm Sci.30 (8), 1167-1182.https://doi.org/10.1002/jssc.200700026 (2007).
Wren, SA & Tchelitcheff, P. Aplikasyon nan ultra-wo pèfòmans likid chromatography nan devlopman dwòg.J.Chromatography.1119(1-2), 140-146.https://doi.org/10.1016/j.chroma.2006.02.052 (2006).
Gu, H. et al.Monolithic macroporous hydrogels prepare nan lwil oliv-nan-dlo segondè emulsion faz entèn pou pirifye efikas nan enterovirus.Chemical.Britain.J.401, 126051 (2020).
Shi, Y., Xiang, R., Horváth, C. & Wilkins, JA Wòl kwomatografi likid nan proteomik.J.Chromatography.A 1053(1-2), 27-36 (2004).
Fekete, S., Veuthey, J.-L. & Guillarme, D. Émergentes tandans nan ranvèse-faz likid kwomatografi separasyon nan peptides terapetik ak pwoteyin: teyori ak aplikasyon.J.Pharmacy.Biomedical Science.anus.69, 9-27 (2012).
Gilar, M., Olivova, P., Daly, AE & Gebler, JC Separasyon ki genyen de dimansyon nan peptides lè l sèvi avèk yon sistèm RP-RP-HPLC lè l sèvi avèk diferan valè pH nan premye ak dezyèm dimansyon separasyon yo.J.Septanm Sci.28 (14), 1694-1703 (2005).
Feletti, S. et al.Karakteristik transfè mas ak pèfòmans sinetik wo-efikasite kolòn chromatografik chaje ak C18 sub-2 μm patikil totalman ak supèrfisyèl ki pore yo te envestige.J.Septanm Sci.43 (9-10), 1737-1745 (2020).
Piovesana, S. et al.Dènye tandans ak defi analyse nan izolasyon, idantifikasyon ak validation nan plant byoaktif peptides.anus.biological anus.Chemical.410 (15), 3425-3444.https://doi.org/10.1007/s00216-018-x (02018-x).
Mueller, JB et al.The proteomic landscape of the way of life.Nature 582(7813), 592-596.https://doi.org/10.1038/s41586-020-2402-x (2020).
DeLuca, C. et al.Downstream pwosesis nan peptides ki ka geri ou pa preparasyon likid chromatography.Molecule (Basel, Swis) 26 (15), 4688 (2021).
Yang, Y. & Geng, X. Kwomatografi melanje-mòd ak aplikasyon li nan biopolymers.J.Kwomatografi.A 1218 (49), 8813–8825 (2011).
Zhao, G., Dong, X.-Y.& Solèy, Y. Ligands pou kwomatografi pwoteyin melanje-mòd: prensip, karakterizasyon, ak konsepsyon.J.Biotechnology.144(1), 3-11 (2009).