„Soha ne kételkedj abban, hogy gondolkodó, elhivatott állampolgárok kis csoportja képes megváltoztatni a világot.Valójában ez az egyetlen ott.”
A Cureus küldetése az orvosi publikáció régóta fennálló modelljének megváltoztatása, amelyben a kutatások benyújtása költséges, összetett és időigényes lehet.
Vérlemezkében gazdag plazma/prp, szövetregeneráció, thrombocyta aktiváció, glükóz proliferatív terápia, vérlemezkék, proliferatív terápia
Idézd ezt a cikket: Harrison TE, Bowler J, Reeves K et al.(2022. május 17.) A glükóz hatása a thrombocytaszámra és -volumenre: következmények a regeneratív gyógyászatban.14. kúra (5): e25081.doi:10.7759/cureus.25081
A thrombocytában gazdag plazmát (PRP) és a hipertóniás glükózoldatot gyakran használják injekcióként a regeneratív gyógyászatban, néha együtt.A hipertóniás glükóznak a thrombocyta lízisre és aktivációra gyakorolt ​​hatásáról korábban nem számoltak be.Teszteltük a megemelkedett glükózkoncentráció hatását a vérlemezke- és eritrocitaszámra, valamint a sejttérfogatra PRP-ben és teljes vérben (WB).A vérlemezkeszám gyors részleges csökkenése következett be minden glükózkeverék PRP-vel vagy teljes vérrel keverésekor, ami összhangban van a részleges lízissel. Az első perc után a vérlemezkeszám stabil maradt, ami arra utal, hogy a maradék vérlemezkék gyorsan alkalmazkodnak az extrém (>2000 mOsm) hipertóniához. Az első perc után a vérlemezkeszám stabil maradt, ami arra utal, hogy a maradék vérlemezkék gyorsan alkalmazkodnak az extrém (>2000 mOsm) hipertóniához. После первой минуты количество тромбоцитов оставалось стабильным, что указывает на быструх аккомоданыцитою аккомоданыцитою стабильным экстремального (>2000 мОсм) гипертонуса. Az első perc után a thrombocytaszám stabil maradt, ami azt jelzi, hogy a maradék vérlemezkék gyorsan alkalmazkodtak az extrém (>2000 mOsm) hipertóniához.第一分钟后，血小板计数保持稳定，表明残余血小板迅速适应极端（> 2000 mOs2000 mOsm）高渗状态. После первой минуты количество тромбоцитов оставалось стабильным, что указывает на быструю адаптацитимокостоцитою стремальному (>2000 мОсм) гиперосмолярному состоянию. Az első perc után a vérlemezkeszám stabil maradt, ami azt jelzi, hogy a maradék vérlemezkék gyorsan alkalmazkodtak a szélsőséges (>2000 mOsm) hiperozmoláris állapothoz.A 25%-os és afeletti glükózkoncentráció az átlagos thrombocytatérfogat (MPV) szignifikáns növekedését eredményezte, ami a thrombocyta-aktiváció korai szakaszát jelzi.További vizsgálatokra van szükség annak meghatározására, hogy bekövetkezik-e a vérlemezke-lízis vagy -aktiváció, és hogy a hipertóniás glükóz injekció önmagában vagy PRP-vel kombinálva további klinikai előnyökkel járhat-e.
Az 1950-es években George Hackett amerikai sebész felfedezte, hogy sok betegnél tartósan enyhítheti az ízületi és hátfájást, ha proliferatív oldatot fecskendeznek inakba és szalagokba.Nyulakon végzett kísérletei kimutatták, hogy az általa proliferatív terápiának nevezett kezelés hatására az inak megnagyobbodtak és megerősödtek.Szövettani vizsgálatok megerősítették, hogy e folyamat során új kollagén termelődik [1].
Az első néhány évtizedben sokféle elosztási megoldást próbáltak ki.Az 1990-es évekre a legtöbb gyakorló a magas glükózkoncentrációt tartotta a legbiztonságosabb és leghatékonyabb módszernek.A hatásmechanizmus azonban továbbra is tisztázatlan.
Hackett munkája nyomán a 20. században kevés klinikai vizsgálatot végeztek.A 2000-es években azonban újra megnőtt az érdeklődés, és számos sikeres klinikai vizsgálatot végeztek a proliferatív terápiával kapcsolatban a derékfájás [2], a térdízületi gyulladás [3] és a laterális epicondylitis [4] kezelésére.
A szövetek regenerálódásához az őssejtek részvétele szükséges.Ezért a glükóz magas koncentrációinak valamilyen módon elő kell idézniük az őssejtek migrációját, replikációját és differenciálódását.Feltételezzük, hogy a vérlemezkék hírvivőként működhetnek, és a magas glükózkoncentráció hatására a vérlemezkék citokinek és növekedési faktorok szabadulhatnak fel, ezáltal elősegítve a regenerációs folyamatokat, különösen az őssejtek migrációját a magas glükózkoncentrációjú területekre.
A vérlemezkék aktivációja mindig megelőzi az intracelluláris kalcium növekedését [5].Liu et al.2008-ban kimutatták, hogy a magas glükózszint növeli a tranziens receptorpotenciálú kanonikus típusú 6 (TRPC6) csatornák aktivitását a plazmamembránban, ami kalciumionok beáramlásához vezet a vérlemezkékbe [6].Egy másik tanulmány kimutatta, hogy a mikrotubulusok marginális zónájának kalciumionoknak való kitettsége a marginális zóna relaxációját, tágulását és deformációját okozza, ami viszont korongból gömb alakúvá változtat, ami az átlagos vérlemezke térfogatot (MPV) eredményezi [7].
Hipotézisünk ebben a tanulmányban az, hogy a vérlemezkék magas koncentrációjú glükóznak való kitettsége hatással van a mikrotubulusok marginális zónájára és az intracelluláris környezetre, ami az MPV növekedéséhez vezet.
Minden résztvevő aláírt egy tájékozott beleegyező nyilatkozatot a vizsgálat részleteinek ismertetése után és a minták átvétele előtt.Ebben a vizsgálatban csak 2%-nál nagyobb hematokrit-értékkel rendelkező PRP-mintákat használtak, így az eritrociták (eritrociták) számát és a vörösvértestek átlagos térfogatát (MCV) be lehetett vonni összehasonlítás céljából.
A vizsgálat négy fázisban zajlott, az első fázis PRP volt, a többi fázis pedig teljes vér (1. táblázat).Amint azt korábban leírtuk [8], az összes relatív centrifugális erőt (RCF, g-force) a centrifugális fecskendőben lévő véroszlop középpontjából (Rmid, cm-ben) számítottuk.Úgy döntöttünk, hogy az MPV-t ​​használjuk a thrombocyta-szenzitizáció markereként és a vérlemezkeszámot a potenciális thrombocyta-lízis indikátoraként, mindkettő könnyen mérhető standard hematológiai analizátorokkal.
Az első fázisban 47 önkéntes vérmintát adott – egy tubus etilén-diamin-tetraecetsavat (EDTA) és egy PRP teljes vérmintát (nátrium-citráttal (NaCl, 3%) antikoagulált) (1. táblázat).Azonnal helyezze be a himbát a csőbe.A teljes vérképet (CBC) EDTA-mintákon három párhuzamosban, a NaCl-mintákat pedig három párhuzamosban elemeztük a CBC-analízishez, majd a PRP-t a fent leírt különféle módszerekkel állítottuk elő [8].Az összes PRP mintát 900-1000 g-vel végzett centrifugálással készítettük.Minden PRP-mintát vortex-keverőn 5-10 másodpercig keverjünk, majd öt 0,5 ml-es alikvot részt osztunk csövekbe.
A vérlemezkék expozíciójának a megemelkedett glükózkoncentrációra gyakorolt ​​hatásának értékelésére egyenlő mennyiségű (0,5 ml) 0%, 5%, 12,5%, 25% és 50% glükózt kevertünk össze a vérlemezke-mintákkal, így 0%, 2,5% 6,25%, 12,5% és 25% koncentrációjú kémcső és 1 perces kémcső keverékhez.Az egyes keverékek TAC-ját három párhuzamosban elemeztük 15 perc elteltével.A vérlemezkeszámot (PLT), a vörösvértestszámot, az MCV-t és az MPV-t ​​minden csőre átlagoltuk, és minden PRP-mintára kiszámítottuk az átlagos vérlemezkeszámot, vörösvértestszámot, MCV-t és MPV-t.
Az adatgyűjtés első fázisának befejezése után a D50W hozzáadása után a PRP vérlemezkék vérlemezke térfogatának jelentős növekedését észleltük.A PRP vérlemezkék nem feltétlenül képviselik a vérben lévő összes vérlemezkét, és a PRP táptalaj eltér a WB táptalajtól.Ezért úgy döntöttünk, hogy elvégzünk egy második fázisú vizsgálatot a D50W teljes vérhez való hozzáadásának hatásáról.
A második körhöz 30-as mintanagyságot választottunk az első sorozat eredményei alapján, az Elemzés részben leírtak szerint.Ebben a sorozatban 20 önkéntes adott vérmintát (1. táblázat).Teljes vért (1,8 ml) vettünk egy 3 ml-es fecskendőbe, és 0,2 ml 40%-os NaCl-dal antikoaguláltuk.A teljes vérű fecskendőt öt másodpercig kevertük vortex keverővel, és a CBC-t három párhuzamosban elemeztük.Az analízis után véralvadásgátló vért adtunk 2 ml 50%-os glükózhoz egy 5 ml-es fecskendőben (a végső glükózkoncentráció körülbelül 25% volt (D25), és rázócsőbe helyeztük 30 percre. 30 perc elteltével a WB fecskendőkben lévő D25/CBC-t három párhuzamosban elemeztük. , a vörösvértestek számát, az MCV-t és az MPV-t ​​minden mintára kiszámítottuk a glükóz hozzáadása előtt és után.
Mivel a teljes vérben lévő vérlemezkék gyakran vannak kitéve hipertóniás glükóz hatásának a proliferatív glükózterápia során a minimálisan invazív injekció miatt, és nem gyakori, hogy a PRP-t hipertóniás glükózzal kombinálják közvetlenül az injekció beadása előtt, úgy döntöttünk, hogy megvizsgáljuk a hipertóniás glükózt WB-vel kombinálva az 1. részben. Harmadik és negyedik lépés.Minden szakaszban 20 önkéntes adományozott 7-8 ml ACD-A-t (savtartalmú trinátrium-citrátot (22,0 g/l), citromsavat (8,0 g/l) és glükózt (24,5 g/l), dextróz-citrát oldatot) véralvadásgátlók céljára (1. táblázat).Csak 12,5%-nál nagyobb glükóz keverékeket használtak az MPV növekedéséhez kapcsolódó százalékos küszöbérték meghatározásához.A harmadik szakaszban 1 ml vért helyezünk egy kémcsőbe.Ezután keverje össze a vért vortex keverőn 10 másodpercig úgy, hogy 1 ml 30% glükózt, 40% glükózt vagy 50% glükózt ad a csőbe, hogy 15%, 20% és 25% végső glükózkoncentrációt kapjon.A glükóz vérmintákat a keverés után azonnal CBC-re elemeztük, és kétpercenként megismételtük 30 percig.
A kezdeti keverés során 1:1 arányú hipertóniás glükóz és WB vagy PRP hozzáadása a vérlemezkéket 25% feletti koncentrációnak teszi ki néhány másodpercig.A negyedik lépésben a hipertóniás glükóz hatásának minimális kezdeti csúcskoncentrációval történő értékeléséhez és a glükóz hatásának felső határának teszteléséhez csak kis mennyiségű vért adtunk a D25W-hez vagy a D50W-hez.Helyezzen 1 ml D25W-t vagy D50W-t egy csőbe, és adjon hozzá 0,2 ml WB-t, miközben a mintát 10 másodpercig vortexelje.Ezekben az esetekben a vért a végső koncentrációnál körülbelül 20%-kal magasabb koncentrációjú glükóznak tették ki, nem pedig 50%-kal a végső koncentráció felett, mint a 3. fázisban, ami 20,8%-os és 41,6%-os végső glükózkoncentrációt eredményezett.A vegyes mintákat a 3. lépésben leírtakkal azonos időintervallumban elemeztük.
Az egyes glükózhígítási sorozatok első lépésében 30 mintát vettek, mivel ez volt a megfelelő mintaméret a kísérleti vizsgálathoz [9].Minden fázis végén (beleértve az első fázist is) értékelje a minta méretének megfelelőségét a mintanagyság meghatározásához használt képlet segítségével, amely egy populációban a folytonos kimeneti változó átlagának becsléséhez szükséges.n képlet = Z2 x SD2 /E2.Ebben az egyenletben Z a Z-pontszám, SD a szórás, E pedig a kívánt hiba [10].Alfánk 0,05, ami 1,96-os Z ​​értéknek felel meg, és 5-ös hibára számítunk (százalékban).Ezért n = (1,962 x SD2)/52-t oldunk meg.Az eredmények azt mutatták, hogy az egyes szakaszokhoz szükséges mintanagyság kisebb volt, mint a ténylegesen összegyűjtött szám.
Az 1., 3. és 4. periódusban, egynél több glükózkoncentrációt használva, a különböző glükózkoncentrációk hatását a 0. időpont és az azt követő időszakok töredékes változásának összehasonlításával elemeztük (1. fázis 15 percnél, 3. periódus 15 percnél).és négyet 15 másodpercenként, majd kétpercenként.) Az egyes időszakok változási sebességét Mann-Whitney U-teszttel hasonlítottuk össze, mivel az adatok nem követték a Shapiro-Wilk normalitásteszt által meghatározott normál eloszlást.Mivel az első, harmadik és negyedik lépésben (összesen öt) több csoport (öt) 1-1 analízisét végezték el, Bonferroni-korrekciót végeztünk, hogy a kívánt alfa-értéket ≤0,01-re állítsuk be, de nem ≤0,05-re.
A vérlemezkeszám csökkenése a hipertóniás dextróz összes koncentrációjával és az MPV növekedése a PRP vérlemezkékben >12,5%-os dextrózkoncentrációnál: A PRP thrombocytaszám egy-ötszörösére nőtt a kiindulási teljes vérhez képest, a módszertől függően (nincs ábrázolva). A vérlemezkeszám csökkenése a hipertóniás dextróz minden koncentrációjával és az MPV növekedése a PRP vérlemezkékben >12,5%-os dextrózkoncentrációnál: A PRP vérlemezkeszáma a kiindulási teljes vérhez képest egy-ötszörösére emelkedett, módszertől függően (nincs ábrázolva). Уменьшение количества тромбоцитов при всех концентрациях гипертонической декстрозы и увеличение MPVчества вхпцитов вхпцитов ции декстрозы > 12,5%: количество тромбоцитов PRP увеличилось в 1-5 раз по сравнению с имза исходной цельной да (не показано). Csökkent thrombocytaszám minden hipertóniás dextróz koncentrációnál és megnövekedett MPV PRP vérlemezkékben >12,5% dextróz koncentrációnál: A PRP thrombocytaszám 1-5-szörösére nőtt a kiindulási teljes vérhez képest, módszertől függően (nincs ábrázolva). ).在> 12,5% 的葡萄糖浓度下，所有浓度的高渗葡萄糖降低血小板计数，PRP MP 血基线全血相比，PRP 血小板计数从浓度的1 倍上升到5 倍，因方法而异／谰＂ >12,5%-os glükózkoncentrációnál a magas glükózkoncentráció csökkenti a vérképet, a PRP vér MPV nő: a 与基线全血-hoz képest a PRP vérképe a koncentráció 1-5-szörösére növekszik (nincs leírás). При концентрациях глюкозы >12,5% все концентрации гипертонической глюкозы снижали количество MPV количество тромбо боцитах PRP: количество тромбоцитов PRP увеличивалось от 1- до 5-кратных концентраций по сравнентраций по сравненыситов цельной крови, в зависимости от метода (не описано ). 12,5% feletti glükózkoncentrációnál minden hipertóniás glükózkoncentráció csökkentette a vérlemezkeszámot és megnövelte az MPV-t ​​a PRP thrombocytákban: A PRP thrombocytaszám 1-5-szörösére nőtt a kiindulási teljes vérkoncentrációhoz képest, a módszertől függően (a leírtak szerint).Az 1. ábra azt mutatja, hogy a vérlemezkék száma csaknem 75%-kal csökkent vizes hígítás után, és 20-30%-kal 15 perces hígítás után különböző glükózkoncentrációk mellett, összehasonlítva a kiindulási PRP-vel és a térfogathoz igazított 1:1 hígítással (1-k1 térfogatkorrekcióval).k -1 tenyésztés).1 tenyésztés).
Az egyes hígításokban lévő sejtek számát a hígítás előtti eredeti szám törtrészeként fejezzük ki.
Az MPV minimálisan csökkent a PRP előállítása során, anélkül, hogy a hígítási koncentráció további változása 12,5%-ra változott volna vízben vagy glükózban (beleértve a 25%-os PRP glükóz keverékeket is), és több mint 20%-kal nőtt 50%-os glükózoldattal történő hígítás után (.2. ábra).).Ezzel szemben az eritrociták nem mutattak szignifikáns térfogatváltozást a H2O-n kívüli hígításoknál.
Az egyes hígításokban lévő sejtek átlagos térfogatát a hígítás előtti eredeti térfogat százalékában fejezzük ki.
Hasonló, de kevésbé kifejezett thrombocytaszám-csökkenést és a CVR növekedését figyelték meg 50%-os glükóznak kitett BC-ben (25%-os glükózzal történő formulázáshoz).A 2. táblázat összehasonlítja a sejtszámot és a sejttérfogatot 50%-os dextrózzal hígított teljes vérben az 50%-os dextrózzal hígított 1. fázisú PRP adatokkal.A vörösvértestek számában és az MCV-ben bekövetkezett változások nem voltak nyilvánvalóak, és nem is kerültek figyelmünk középpontjába.
SD = standard deviation, MD = átlagos különbség a csoportok között, SE = az átlagos különbség szórása, RBC = eritrociták, PLT = vérlemezkék, PRP = vérlemezkében gazdag plazma, WB = teljes vér
A D50W WB-hez való hozzáadása után a százalékos hígítással korrigált vérlemezkeveszteség 7,7% volt (310±73 vs. 286±96), szemben a D50W-ban mért PRP-hígítás 17,8%-ával (664±348 vs. 544±277).Az MPV WB 16,8%-kal nőtt (10,1 ± 0,5-ről 11,8 ± 0,6-ra), míg az MPV PRP 26%-kal (9,2 ± 0,8 vs. 11,6 ± 0,7). Bár az átlagos különbségek mind a thrombocytaszám-csökkenésben, mind az MPV-növekedésben szignifikánsan nagyobbak voltak PRP-vel, a vérlemezkeszám-csökkenés változásai a WB-n belül csaknem szignifikánsak voltak (310 ± 73-286 ± 96 (-7,7%); p = 0,06), az MPV-növekedés pedig szignifikáns (10,1 ± 0,5-11,8 p) (+1,0,8 p) (+1,0,8). Bár az átlagos különbségek mind a thrombocytaszám-csökkenésben, mind az MPV-növekedésben szignifikánsan nagyobbak voltak PRP-vel, a vérlemezkeszám-csökkenés változásai a WB-n belül csaknem szignifikánsak voltak (310 ± 73-286 ± 96 (-7,7%); p = 0,06), az MPV-növekedés pedig szignifikáns (10,1 ± 0,5-11,8 p) (+1,0,8 p) (+1,0,8).Bár az átlagos különbségek mind a thrombocytaszám-csökkenésben, mind a CVR-növekedésben szignifikánsan nagyobbak voltak PRP esetén, a vérlemezkeszám-csökkenésben bekövetkezett változások a WB-n belül csaknem szignifikánsak voltak (310 ± 73-286 ± 96 (-7,7%); p = 0,06).увеличение MPV было значительным (от 10,1 ± 0,5 до 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001). az MPV növekedése szignifikáns volt (10,1 ± 0,5-ről 11,8 ± 0,6-ra (+16,8) p < 0,001).尽管PRP 在血小板计数减少和MPV 增加方面的平均差异显着更大，但WB 尚村血小村血小(几乎是显着的（310 ± 73 至 286 ± 96 (-7,7%)；p = 0,06）和MPV 的增加是显着的（（（Ｐ ±1,5 .8 p ±1,5 001).尽管 PRP 在 血小板 计数 和 和 增加 方面 的 平均 差异的 几乎 是 显着 的 （（（310 ± 73 至 286 ± 96 (-7,7%) ； p = 0,06）和MPV 的增加昀 的增加是暄 ± 1 1 0.1 ± 1. ± 0,6 (+16,8) p < 0,001).A vérlemezkeszám-csökkenés változása a WB-n belül csaknem szignifikáns volt (310 ± 73-ról 286 ± 96-ra (-7,7%); p = 0,06), bár a PRP szignifikánsan nagyobb átlagos különbséget mutatott a vérlemezkeszám csökkenésében és az MPV növekedésében.és az MPV növekedése jelentős volt.(от 10,1 ± 0,5 до 11,8 ± 0,6 (+16,8) р < 0,001). (10,1 ± 0,5-ről 11,8 ± 0,6-ra (+16,8) p < 0,001).
Az MPV szignifikáns változásához 20%-os végső glükózkoncentrációra volt szükség, de az MPV változása kifejezettebb volt 25%-os végső koncentrációnál.A vérlemezke-vesztés a kezdeti csökkenés után stabilizálódott.Megfigyeltük a CVR kezdeti éles csökkenését, azonban a CVR gyorsan helyreállt a 25%-os végső glükózkoncentrációnál, ami szignifikánsan magasabb volt, mint a 20%-os és 15%-os végső glükózkoncentrációnál megfigyelt CVR-szint (3. ábra és a 3. táblázat bal oldalán; árnyékolt négyzetek).a p-értékeket ≤ alfa 0,01-es Bonferroni-korrekcióval jelezze.A PLT számában is kezdetben éles csökkenés volt megfigyelhető, a kezdeti szakaszban 0-15 másodpercig, majd stabil maradt (15 másodpercről 30 percre; a 4. táblázat bal oldalán).
Különböző koncentrációjú glükóz hozzáadása a teljes vérhez az MPV kezdeti gyors csökkenését eredményezte, amelyet több mint 20%-os koncentrációfüggő gyógyulás követett.A jelmagyarázat a glükóz koncentrációját mutatja hígítás után.D15, D20 és D25 1:1 hígításban végeztük.D21 és D41 1:5 hígítással végeztük.
A 4. táblázat a vérlemezkeszám változását mutatja hipertóniás glükózzal hígítva.Dózisfüggő összefüggést figyeltünk meg a PLT-számok azonnali csökkenése között 1:1 és 1:5 hígítás esetén.Az 1:1-es hígításokat egyetlen csoportban összehasonlítva az 1:5-ös hígításokkal, az 1:1-es csoportban a vérlemezkeszám azonnali csökkenése kisebb volt, mint az 1:5-ös csoportban 66±48 000 (23%), szemben a 99±69 000-rel (37%)., p = 0,014) az 1:5 arányú csoportban.Az első mérési pont kezdeti csökkenése után a vérlemezkeszám a glükóz százalékában stabilizálódott (4. ábra).
Ha teljes vért adunk a glükózhoz 1:1 arányban, a vérlemezkeszám körülbelül 25%-kal csökken.Ha azonban teljes vért adtunk hozzá 1:5 arányban, a csökkenés sokkal nagyobb volt – körülbelül 50%.
A glükóz 41%-a gyorsabban és drámaiabban növelte az MPV-t, mint 25%-kal vagy 21%-kal.Az MPV-eredményeket a 3. ábra mutatja. Az összes többi hígításnál nem figyeltek meg azonnali kezdeti MPV-csökkenést 50%-os glükóz hozzáadása után.25%-os glükóz használatakor (a végső hígításban 20,8%-os glükózkoncentráció) az MPV változása hasonló volt a 20%-os glükóz változásához 1:1 hígításnál (3. ábra).Bár az MPV változásai kezdetben nagyobbak voltak a 41%-os vegyes koncentrációnál, mint 25%-nál, az MPV 41% és 25% közötti különbsége 16 perc után már nem volt szignifikáns (3. táblázat, jobbra).Az is érdekes, hogy 25%-os glükóz hatékonyabban növelte az MPV-t, mint 20,8%.
Ez az in vitro vizsgálat részben megerősítette hipotézisünket. Lehetséges részleges vérlemezke-lízist mutatott ki dextróz keverékkel, a vérlemezkék gyors alkalmazkodását az extrém hipertóniához, és az MPV jelentős növekedését a hipertóniás dextróz > 25%-os koncentrációjára adott válaszként. Lehetséges részleges vérlemezke-lízist mutatott ki dextróz keverékkel, a vérlemezkék gyors alkalmazkodását az extrém hipertóniához, és az MPV jelentős növekedését a hipertóniás dextróz > 25%-os koncentrációjára adott válaszként. Он показал потенциальный частичный лизис тромбоцитов примесью декстрозы, быструю аккомодациальный аккомодациальный частичный лизис тромбоцитов примесью декстрозы, быструю аккомодациальный аккомодациальный частичный лизис тромбоцитов примесью декстрозы ртонуса и значительное повышение MPV в ответ на гипертоническую концентрацию декстрозы > 25%. Lehetséges részleges thrombocyta-lízist mutatott dextrózzal, gyors thrombocyta-akkomodációt az extrém hipertóniás hatásig, és az MPV szignifikáns növekedését a hipertóniás dextrózszintekre >25%.它显示出通过葡萄糖混合物潜在的部分血小板溶解，血小板快，血小板快速适应枘糖速适应枘竓% 浓度的高渗葡萄糖时MPV 显着上升.它 显示 出 通过 葡萄糖 潜在 的 部分 血小板 溶解 血小板 忼 速 适庯 极 速 适庯 极应> 25% 浓度 高渗 葡萄糖 时 时 mpv 显着。。。。. Он показывает потенциальный частичный лизис тромбоцитов смесями с глюкозой, бымиструю адаптациц адаптацию адаптацию пертонусу и значительное увеличение MPV в ответ на концентрацию гипертонической глюкозы > 25%. A glükózkeverékek potenciális részleges thrombocyta-lízisét, a thrombocyták gyors alkalmazkodását az extrém hipertóniához, valamint az MPV szignifikáns növekedését mutatja hipertóniás glükóz > 25% hatására.A kezdeti növekedés 41,6%-os glükózexpozíciónál volt a maximális, de az MPV növekedése megközelítette a 25%-os glükózexpozíciót körülbelül 20 perccel az expozíció után.
A vérlemezkék koncentrációját a glükóz befolyásolja.Észrevettük, hogy a PLT mennyisége a glükóz minden hígításánál csökkent.A vérlemezkék számának éles csökkenése a PRP sorozat H2O (0%-os) hígításaiban ozmotikus lízissel hozható összefüggésbe.Alternatív megoldásként ez lehet a vérlemezkék csomósodása által okozott műtermék, de ez ellentétben áll azzal, hogy az MPV nem változik ennél a hígításnál.Ez a megállapítás azt jelenti, hogy egyes vérlemezkék nagyon érzékenyek a hipoozmolaritásra.
Minden 1:1 arányú glükóz hígításban a PLT mennyisége 20-30%-kal csökkent, még D5W-re is (hipotonikus 252 mOsm-on), ami a glükóz specifikus nem ozmotikus hatására utalhat, mivel a PLT és az MPV is változatlan maradt háromszoros koncentrációnövekedés mellett.szőlőcukor.D5W-től D25W-ig.Valójában a PLT-koncentrációk enyhén növekedtek az ozmolaritás növekedésével.
A PLT 1:1 és 1:5 hígítások közötti csökkenése azt jelenti, hogy az oldódási hatás a kezdeti és végső glükózkoncentrációtól függ.Ha csak a kezdeti koncentrációtól függne, akkor az 1:1 koncentrációk közötti PLT-csökkenésben várható különbség.De mi nem.Ha a lízis hatás csak a végső glükózkoncentrációtól függ, akkor a 20%-os 1:1 hígítás és a 20,8%-os 1:5 hígítás között nem számítunk nagy különbségre.És mégis megcsináltuk.
Ha a vérlemezke-lízis miatt vérlemezke-vesztés következik be, akkor részleges lizátum képződik, amely után citokinek és növekedési faktorok szabadulnak fel az extracelluláris környezetbe.Számos tanulmány kimutatta, hogy a thrombocyta-lizátum proliferációs oldatként majdnem olyan hatékony, mint a PRP [11].Maga a PRP hatékony megoldásnak bizonyult a proliferáció kezelésére [12-14].
Az inaktív vérlemezkék több belső szerkezettel megerősített korong formájában keringenek.Az aktiválás során gömbölyűbb vagy amőba alakot vesznek fel, ami térfogatnövekedést eredményez.A térfogat növekedéséhez a felület növelése szükséges, ami a nyitott tubulusrendszer (OCS) extrudálásának és a membránhoz exocita szemcsék hozzáadásának az eredménye.Azt még meg kell határozni, hogy a hipertóniás glükóz által kiváltott MPV-növekedés magában foglalja-e az egyik vagy mindkét mechanizmust, de ha ez utóbbi, akkor az MPV növekedése degranulációt jelez.
Ez a tanulmány kimutatta, hogy a PRP-n vagy a teljes vérlemezkéken lévő magas glükózkoncentrációnak való kitettség az MPV 15 percen belüli növekedését eredményezte 25%-os, illetve 41,6%-os glükózkoncentráció mellett.
A thrombocyta MPV növekedésének oka lehet a környező mikrotubulusok tágulása a kalcium beáramlás hatására.Liu et al.Kimutatták, hogy a glükóz közvetíti a kalcium beáramlását a vérlemezke TRPC6 csatornáján keresztül [6].Hipotézisünk az, hogy a glükóz a mikrotubulus-gubancok ellazulását idézi elő, ami az MPV és a thrombocyta szenzitizáció és/vagy aktiváció növekedéséhez vezet.Eredményeinkből ítélve azonban ez csak egy része a történetnek.Teszteinkben a D25W alatti koncentráció nem eredményezett MPV növekedést.Tekintettel arra, hogy nem teszteltük a 12,5% és 25% közötti glükózkoncentrációnak való kitettséget, az 1. fázis eredményeink arra utalnak, hogy a glükózkoncentrációnak ebben a tartományában lehet egy küszöb, amely az MPV növekedéséhez vezet.A 3. és 4. szakaszban végzett további vizsgálatok azt mutatták, hogy ennek küszöbe 20-25% glükóz, de továbbra sem világos, hogy miért.
Centrifugálás után az MPV ~9%-os csökkenését is megfigyeltük.Nem világos, hogy az MPV csökkenése a centrifuga vörösvértest-rétegében megrekedt nagyobb és sűrűbb vérlemezkéknek köszönhető-e.Ez a megfigyelés fontos lehet a klinikusok számára, mivel azt sugallhatja, hogy a PRP vérlemezkék a WB vérlemezkék egy kisebb és kevésbé sűrű alcsoportját alkotják.
Egy korábbi tanulmányunkban kimutattuk, hogy a PRP manuális módszerekkel történő előállítása olcsó [8].Ha a glükóz érzékenyíti a szöveti vérlemezkéket vagy a PRP-t, ezáltal fogékonyabbá teszi őket az aktiválódásra, vagy ha a PRP részleges lizátum tulajdonságokkal termelődik, ez fokozhatja a regenerációt és csökkentheti a terápia szükségességét.Ezért a PRP és az erősen koncentrált glükóz kombinációja költséghatékonyabb lehet, mint a PRP vagy a glükóz önmagában.
Tanulmányunknak több hiányossága is van.Először is több különböző módszerrel nyert PRP-t használunk.Ez ellentmondásos eredményekhez vezethet.Másodszor, egyik mintánkon sem tudtunk biokémiai elemzést végezni, hogy pontosabban meghatározhassuk, megtörtént-e a vérlemezke aktiváció.Szeretnénk megmérni a P-szelektint, a 4-es thrombocyta faktort, a monocitikus thrombocyta aggregátumokat vagy a thrombocyta aktiváció egyéb markereit, hogy jobban megértsük az alfa granulátum degranuláció mértékét vagy jelenlétét, de ez túlmutat jelen tanulmány keretein.Harmadszor, nem tudtuk elektronmikroszkóppal vagy más módszerekkel megerősíteni, hogy a glükóznak kitett vérlemezkék MPV-növekedése a mikrotubulusok gubancolódására gyakorolt ​​hatás következménye volt.
A WB vagy PRP és 25% glükóz keverékei növelték az MPV-t, jelezve a vérlemezke-aktiváció kezdetét, bár ez a vizsgálat nem mutatta ki az aggregáció vagy a degranuláció előrehaladását.A hipertóniás glükózkeverék vérlemezke-vesztést eredményezett, ami valószínűleg lítikus hatást jelent.A vérlemezkék részleges aktiválása vagy lízise szövetregenerációt okozhat a vérlemezke injekció beadása után.Nem világos, hogy ezek a változások milyen klinikai következményekkel járhatnak.További vizsgálatok az aktiváció vagy lízis pontosabb mérését mutatták be, és értékelték a WB-vel vagy PRP-vel végzett hipertóniás glükózkeverékek különböző klinikai hatásait.
A glükóz proliferatív terápia egy egyszerű és olcsó regeneratív terápia, amely gyorsan bővül, és támogatja a klinikai kutatásokat.Ez a tanulmány egy olyan fiziológiai mechanizmust sugall, amely megerősítése esetén segíthet megérteni a proliferatív terápia regeneratív mechanizmusának egy részét.
Orvosbiológiai és egészségügyi informatika a Missouri Egyetemen, Kansas City School of Medicine, Kansas City, USA
Humán alanyok: Ebben a vizsgálatban minden résztvevő beleegyezett vagy nem.Az International Society for Cellular Medicine kiadta az ICMS-2017-003 jóváhagyást.A következő protokollt az International Society for Cellular Medicine Institutional Review Board jóváhagyta további használatra: Cím: A vérlemezkében gazdag plazma gyógyszerhozamának kiszámítása a kiindulási CBC vérlemezkeszám alapján.Állati alanyok: Minden szerző megerősítette, hogy ebben a vizsgálatban nem vettek részt állatok vagy szövetek.Összeférhetetlenség: Az ICMJE Egységes Közzétételi Nyomtatványának megfelelően minden szerző nyilatkozik a következőkről: Fizetési/szolgáltatási információk: Valamennyi szerző kijelenti, hogy a benyújtott munkához semmilyen szervezettől nem kapott anyagi támogatást.Pénzügyi kapcsolatok: Valamennyi szerző kijelenti, hogy sem jelenleg, sem az elmúlt három évben nem áll pénzügyi kapcsolatban egyetlen olyan szervezettel sem, amely érdeklődhet a benyújtott munka iránt.Egyéb kapcsolatok: Minden szerző kijelenti, hogy nincs más kapcsolat vagy tevékenység, amely hatással lehet a beküldött munkára.
Harrison TE, Bowler J, Reeves K et al.(2022. május 17.) A glükóz hatása a thrombocytaszámra és -volumenre: következmények a regeneratív gyógyászatban.14. kúra (5): e25081.doi:10.7759/cureus.25081
© Copyright 2022 Harrison et al.Ez egy nyílt hozzáférésű cikk a Creative Commons Attribution License CC-BY 4.0 feltételei szerint.Bármilyen adathordozón korlátlan felhasználás, terjesztés és sokszorosítás megengedett, feltéve, hogy az eredeti szerzőt és a forrást feltüntetik.