A Javascript jelenleg le van tiltva a böngészőjében.A webhely egyes funkciói nem működnek, ha a JavaScript le van tiltva.
Regisztráljon konkrét adataival és az érdeklődésre számot tartó gyógyszerrel, és az Ön által megadott információkat a kiterjedt adatbázisunkban található cikkekkel párosítjuk, és azonnal elküldjük Önnek egy PDF másolatot.
A klórhexidin-hidroklorid nanoemulzió, mint ígéretes antibakteriális gyökércsatorna-öblítő összetétele és jellemzése: in vitro és ex vivo vizsgálatok
Szereplők: Abdelmonem R., Younis MK, Hassan DH, El-Sayed Ahmed MAEG, Hassanien E., El-Batuti K., Elfaham A.
Rehab Abdelmonem, 1. Mona K. Younis, 1. Doaa H. Hassan, 1. Mohamed Abd El-Gawad El-Sayed Ahmed, 2. Ehab Hassanein, 3. Kariem El-Batuti, 3. Alaa Elfaham.2 Mikrobiológiai és Immunológiai Tanszék, Gyógyszerészeti Kar, Misr Tudományos és Technológiai Egyetem, október 6., Egyiptom;3 Endodontiai Tanszék, Ain Shams Egyetem, Kairó, Egyiptom Bevezetés és cél: A klór-hexidin-hidroklorid [Chx.HCl] széles spektrumú antibakteriális hatású, hosszan tartó hatású és alacsony toxicitású, ezért potenciális gyökércsatorna-öblítőként ajánlott.A tanulmány célja egy új összetételű Chx.HCl nanoemulzió volt a Chx.HCl behatoló erejének, tisztító- és antibakteriális hatásának növelése és gyökércsatorna-öblítőként történő alkalmazása.Módszerek: A Chx.HCl nanoemulziókat két különböző olaj felhasználásával állítottuk elő: olajsav és Labrafil M1944CS, két felületaktív anyag, a Tween 20 és Tween 80, valamint a társfelületaktív anyag, a propilénglikol.Ábrázoljon egy pszeudo-terner fázisdiagramot az optimális rendszer jelzésére.Az elkészített nanoemulziós készítményeket értékelték a gyógyszertartalom, az emulgeálási idő, a diszpergálhatóság, a cseppméret, az in vitro gyógyszerkibocsátás, a termodinamikai stabilitás, az in vitro antibakteriális aktivitás és a kiválasztott készítmények in vitro vizsgálata szempontjából.A Chx.HCl 0,75%-os és 1,6%-os nanoemulzió behatoló, tisztító és antibakteriális hatását a normál szemcsemérettel hasonlítottuk össze gyökércsatorna-öblítőként.Eredmények.A választott készítmény az F6 volt, amely 2% Labrafilt, 12% Tween 80-at és 6% propilénglikolt tartalmaz.Kis részecskeméret (12,18 nm), rövid emulgeálási idő (1,67 másodperc) és gyors oldódás 2 perc után.Azt találták, hogy ez egy termodinamikailag/fizikailag stabil rendszer.A hagyományos Chx.HCl szemcsemérethez képest a nagyobb koncentrációjú Chx.HCl 1,6%-os nanoemulzió jobb penetrációt mutatott a kisebb részecskeméret miatt.Egy normál részecskeméretű anyaghoz (2609,56 µm2) képest az 1,6%-os Chx.HCl nanoemulzió rendelkezik a legkisebb átlagos maradék törmelékfelülettel (2001,47 µm2).Következtetés: A Chx.HCl nanoemulziós összetétel jobb tisztítóképességgel és antibakteriális hatással rendelkezik.Rendkívül hatékony baktericid hatást fejt ki az Enterococcus faecalis ellen, és a baktériumsejtek összehúzódási aránya magas vagy teljesen elpusztul.Kulcsszavak: klórhexidin-hidroklorid, nanoemulzió, gyökérkezelés, penetráció, tisztító hatás, antibakteriális öblítő.
A nanoemulziók, az 50–500 nm közötti cseppméretű emulziók osztálya, egyedi tulajdonságaik miatt az elmúlt években nagy figyelmet kapott.Jó tisztító tulajdonságokkal rendelkezik, a víz keménysége nem befolyásolja őket, a legtöbb esetben alacsony toxicitásúak és nincs elektrosztatikus kölcsönhatás.2 A nanotechnológia a hasonló ömlesztett termékekhez képest rendkívül kis szemcsemérettel, nagy felület/tömeg aránnyal és egyedi fizikai és kémiai tulajdonságokkal rendelkezik, emellett új távlatokat nyit a fogászati ​​fertőzések kezelésében és megelőzésében.3 A klórhexidin-hidroklorid (Chx.HCl) vízben gyengén, alkoholban nagyon kevéssé oldódik, és fény hatására fokozatosan foltosodik.4,5 SH.A HCl széles spektrumú antibakteriális hatással, hosszan tartó hatású és alacsony toxicitású.Ezen tulajdonságai miatt potenciális gyökércsatorna-öblítőként is ajánlott.A Chx.HCl fő előnyei az alacsony citotoxicitás, a szag és a kellemetlen íz hiánya.6-9 A gyökércsatorna-fertőtlenítés javítására többféle lézert alkalmaztak.A lézerek baktericid hatása függ a hullámhossztól és az energiától, valamint a termikus expozíciótól, ami a baktérium sejtfalában változásokat okoz, ami az ozmotikus gradiens változásához vezet a sejthalálig.A lézerek és a gyökércsatorna-öblítők közötti kölcsönhatás új távlatokat nyit a pulpafertőtlenítésben.10 Az ultrahangos energia magas frekvenciákat, de alacsony amplitúdókat hoz létre. A fájlokat úgy tervezték, hogy 25–30 kHz-es ultrahangfrekvencián oszcilláljanak, ami meghaladja az emberi hallásérzékelés határát (>20 kHz). A fájlokat úgy tervezték, hogy 25–30 kHz-es ultrahangfrekvencián oszcilláljanak, ami meghaladja az emberi hallásérzékelés határát (>20 kHz). Файлы предназначены для колебаний на ультразвуковых частотах 25–30 кГц, которые находятся за пределугововочелаховочелам ловека (> 20 кГц). A fájlokat úgy tervezték, hogy 25-30 kHz-es ultrahang-frekvenciákon rezegjenek, ami meghaladja az emberi hallás tartományát (>20 kHz).这些文件被设计成在25–30 kHz 的超声波频率下振荡，这超出了人类听觉感矺类听觉感矺类听觉感矺类听觉感矺类听觉感这些文件被设计成在 25–30 kHz Файлы рассчитаны на колебания на ультразвуковых частотах 25-30 кГц, что выходит за пределы слуховя2 пределы слухо 0 кГц). A fájlokat 25-30 kHz-es ultrahang frekvenciájú rezgésekre tervezték, ami meghaladja az emberi hallás határait (>20 kHz).Keresztirányú oszcillációban működnek, beállítva a csomók és antinódusok jellemző módozatait hosszuk mentén.A „passzív ultrahangos irrigáció” (PUI) olyan öntözési protokoll, amelyben semmilyen műszer vagy fal nem érintkezik endodonciai fájlokkal vagy műszerekkel.A PUI során az ultrahang energia a vibrációs reszelőből a gyökércsatornában lévő öntözőoldatba kerül.Ez utóbbi hangáramlást és az öblítőszer kavitációját okozhatja.11 A fenti adatok alapján a Chx.HCl jobb behatoló és tisztító hatásának értékelésére nanotechnológia alkalmazása indokolt.
A Chx.HCl klórhexidin-hidrokloridot az Arab Drug Company for Pharmaceuticals (Kairó, Egyiptom) biztosította.A Labrafil M 1944 CS-t (oleoil-polioxi-6-glicerid) a Gattefosse (Saint Priest, Franciaország) nagylelkűen biztosította.Tween 20 (polioxietilén (20) szorbitán-monolaurát), Tween 80 (polioxietilén (80) szorbitán-monooleát), olajsav, propilénglikol a Gomhorya Company-tól (Kairó, Egyiptom)).Nem szuvas egygyökerű fogak kinyerése parodontális vagy fogszabályozási kezeléshez, Maxillofacial Sciences, Fogorvosi Kar, Ain Shams Egyetem, Kairó, Egyiptom.Enterococcus faecalis (ATCC 29212 törzs) tiszta tenyészete agyszív kivonat (BHI) táplevesben (RC CLEANER, IIchung Dental Ltd., Szöul, Korea).
Vizsgálták a Chx.HCl oldhatóságát különböző közegekben (olajsav, Labrafil M 1944CS, Tween 20, Tween 80, propilénglikol és víz).Nagy feleslegben (50 mg) Chx.HCl-t helyezünk egy centrifugacsőbe, és hozzáadunk 5,0 g közepes fázist.Az elegyet vortex keverőben 15 percig rázattuk, majd szobahőmérsékleten tároltuk.24 óra elteltével a csőben lévő oldhatatlan gyógyszerpelletet 3000 fordulat/perc sebességgel centrifugáltuk 5 percig, hogy tiszta felülúszót kapjunk.Gyűjtsünk össze elegendő mintaoldatot, és hígítsuk fel n-butanollal.A hígított mintákat Whatman 102 szűrőpapíron átszűrtük, majd n-butanollal megfelelően hígítva meghatároztuk a telített oldat gyógyszerkoncentrációját.A mintákat UV spektrofotométerrel elemeztük 260 nm-en, kontrollként n-butanolt.12.13
Pszeudo-hármas fázisdiagramot építettünk fel, hogy meghatározzuk a készítményben szükséges egyes komponensek pontos arányát az ideális nanoemulzió optimális paramétereinek eléréséhez.14 A készítményt olajok (azaz olajsav és Labrafil M1944CS), felületaktív anyagok (pl. Tween 20 és Tween 80) és egy további felületaktív anyag, azaz propilénglikol felhasználásával állították össze.Először a felületaktív anyagokból (társfelületaktív anyagok nélkül) és az olajokból külön keverékeket állítottunk elő különböző térfogatarányban (1:9-től 9:1-ig).Amikor a keveréket vízzel titráljuk (víz cseppenkénti adagolásával), gondosan figyelje a keveréket a tisztatól a zavarosig, mint végpont.Ezeket a végpontokat ezután egy pszeudo-hármas fázisdiagramon jelöljük.A teljes eljárást megismételtük a 2:1 és 3:1 arányban elkészített felületaktív anyagok és másodlagos felületaktív anyagok (Smix) keverékeivel, amelyeket kiválasztott olajokkal kevertünk össze15,16 egy.
Chx.HCl-t tartalmazó nanoemulziós rendszereket állítottunk elő, olajos fázisként Labrafil M 1944 CS-t, további felületaktív anyagként Tween 80 vagy 20 felületaktív anyagot és propilénglikolt, végül vizet, 1. táblázat. A gyógyszert feloldottuk Labrafil M 1944 CS-ben, és a felületaktív anyag egyesített vizet adtuk hozzá lassú keverési sebességgel, majd a másodlagos felületaktív anyaggal.A hozzáadott felületaktív anyag és társfelületaktív anyag mennyiségét, valamint a hozzáadható olajfázis százalékos arányát pszeudo-terner fázisdiagram segítségével határozzuk meg.Ultrahangos generátort (Ultrasonic LC 60 H, Elma, Németország) használtunk a granulátumok kívánt mérettartományának eléréséhez.Akkor egyensúlyozd ki.17
A diszpergálhatósági vizsgálatot oldókészülékkel (Dr. Schleuniger Pharmaton, Model Diss 6000, Thun, Svájc) végeztük, amelyben mindegyik készítményből 1 ml-t adtunk 500 ml vízhez 37±0,5 °C-on.Az enyhe keverést szabványos, 50 fordulat/perc sebességgel forgó rozsdamentes acél oldólapátok biztosítják.A kapott emulziót vizuálisan határoztuk meg, és átlátszó, áttetsző, kékes árnyalatú, tejszerű vagy homályos kategóriába soroltuk.Válasszon egy világos formulát a további kutatáshoz.18.19
A Chx.HCl extrakciója optimalizált nanoemulziós kompozíciókból a pszeudo-hármas fázisdiagram alapján n-butanol előállításához vezet ultrahangos technológiával.Megfelelő hígítás után a kivonatokat spektrofotometriásan 260 nm hullámhosszon analizáltuk a Chx.HCl-tartalom meghatározására.húsz
Az önemulgeálási idő tesztelésére minden készítményből 1 ml-t adtunk egy 250 ml desztillált vízzel töltött főzőpohárba, és 37 ± 1 °C-on tartottuk állandó keverés közben 50 fordulat/perc sebességgel.Az önemulgeálási idő az az idő, amely alatt az előkoncentrátum hígítás után homogén keveréket képez.huszonegy
Cseppméret-elemzéshez hígítson fel 50 mg optimalizált készítményt 1000 ml-re vízzel egy lombikban, és óvatosan keverje össze kézzel.A cseppméret-eloszlást Malvern Zetasizer 2000 műszerrel (Malvern Instruments Ltd., Malvern, UK) határoztuk meg 173º-os visszaszórás-detektálási körülmények között, 25ºC-os hőmérsékleten és 1,330 törésmutatóval.húszonkettő
Az in vitro kioldódási vizsgálatokat USP Type II készülékkel (lapát) (Dr. Schleuniger Pharmaton, Diss Model 6000) 50 fordulat/perc mellett végeztük.Oldóközegként 500 ml 37±0,5 °C-on tartott desztillált vizet használtunk, és az elkészített készítményből 5 ml-t csepegtettünk az oldóközeghez.Ezután különböző időközönként 5 ml kioldóközeget vettünk, és a felszabaduló hatóanyag mennyiségét spektrofotometriásan meghatároztuk 254 nm-en.A kísérleteket három párhuzamosban végeztük.huszonhárom
Ezután megmértük a Chx.HCl in vitro kinetikai paramétereit az ennek alapján készített nanoemulziókból.Zéró, első és másodrendű kinetikát és Higuchi diffúziós modelleket teszteltünk annak érdekében, hogy kiválasszuk a Chx.HCl felszabadulásához legalkalmasabb kinetikai szekvenciát.
Mindegyik készítményből 2 ml-t szobahőmérsékleten 48 órán át tároltunk, mielőtt a fázisszétválást megfigyeltük.Mindegyik Chx.HCl nanoemulziós készítményből 1 ml-es mintát 10 ml-re és 100 ml-re hígítottunk desztillált vízzel 25 °C-on, és 24 órán át tároltuk.Ezután fázisszétválást figyeltünk meg.huszonegy
Ezután mindegyik készítményből 2 ml-es mintákat külön-külön átlátszó, csavaros kupakkal ellátott palackokba töltöttünk, és hűtőszekrényben 2 °C-on 24 órán át tároltuk.Ezután eltávolítottuk, és 25 °C-on és 40 °C-on tároltuk.Egyetlen hűtési-olvasztási ciklust hajtottak végre.A mintákat ezután fázisszétválásra és gyógyszerkiválásra figyeltük meg.huszonegy
Mindegyik Chx.HCl nanoemulziós készítmény 5 ml-es mintáját üvegcsőbe helyeztük, és laboratóriumi centrifugába helyeztük (Shanghai Surgical Instrument Factory Microcentrifuge Model 800, Sanghaj, Kínai Népköztársaság), és 4000 fordulat/perc sebességgel centrifugáltuk 5 percig.A mintákat ezután fázisszétválásra és gyógyszerkiválásra figyeltük meg.huszonegy
Minden kísérletet jóváhagyott az egyiptomi Ain Shams Egyetem Intézményi Etikai Bizottsága.50 nem szuvas egygyökerű emberi fogat választottunk ki, amelyek csúcsa kialakult.A kihúzott fogakat a páciens írásos beleegyezése után használták fel.A fogak közé tartoznak a maxilláris és a mandibuláris metszőfogak, valamint a mandibularis előfogak.A gyökerek külső felületét kürettel kezeltük, és az összes fogat felületi sterilizálásnak vetettük alá 0,5%-os NaOCl-ban 24 órán keresztül, majd felhasználásig steril sóoldatban tároltuk.A koronát egy biztonságos oldali gyémánt koronggal távolítottuk el, és a fog hosszát 16 mm-re normalizáltuk a csúcstól a koronaszélig.24,25 Az öblítő oldat szerint a fogakat a következő csoportokba soroljuk:
(A) A csoport (n=24) mintáit Chx.HCl nanoemulzióval mostuk.Az (I) alcsoport (n = 12) a mintákat 5 ml Chx.HCl nanoemulzióval 0,75%-os koncentrációban öblítette le.A (II) alcsoport (n=12) 5 ml 1,6%-os Chx.HCl nanoemulzióval öblítette le a mintákat.(B) A minták egy csoportját (n=24) 5 ml 2%-os Chx.HCl normál szemcseméretű oldattal mossuk.Kontroll csoport: (n=2) 5 ml sóoldattal mossuk aktiválás nélkül.
Kiválasztottunk 44 nem szuvas egygyökerű emberi fogat, formált véggel.A fogak közé tartoznak a maxilláris és a mandibuláris metszőfogak, valamint a mandibularis előfogak.A gyökerek külső felületét kürettel kezeltük, és az összes fogat felületi sterilizálásnak vetettük alá 0,5%-os NaOCl-ban 24 órán keresztül, majd felhasználásig steril sóoldatban tároltuk.A koronákat biztonsági gyémánt koronggal távolítottuk el, és a fog hosszát 16 mm-re normalizáltuk a csúcstól a koronális szélig.24,25,29
Az 50-es főapikális reszelő mechanikai előkészítése szabványos módszerekkel.Használjon steril sóoldatot öntözőként a műtét során.Végül a gyökércsatornát 2 ml 17%-os EDTA-val öblítettük 1 percig, hogy eltávolítsuk a kenetréteget.A teljes gyökérfelületet, beleértve az egyes minták apikális nyílásait is, két réteg körömlakkal (cianoakrilát ragasztó) vontuk be, hogy megakadályozzuk a szivárgást.A fogakat ezután függőlegesen egy fogkőtömbbe helyezik a könnyebb kezelés és azonosítás érdekében.29-33 A mintákat ezután autoklávoztuk 121 °C-on és 15 psi nyomáson 20 percig.Sterilizálás után az összes mintát steril körülmények között, steril eszközökkel szállítottuk és feldolgoztuk.A gyökércsatornákat Enterococcus faecalis (ATCC 29212 törzs) tiszta tenyészetével szennyeztük, amelyet agyszív kivonat (BHI) táplevesben tenyésztettünk 24 órán át 37 °C-on.Steril mikropipetta segítségével fecskendezze be az E. faecalis inoculum tiszta szuszpenzióját az összes fog előkészített gyökércsatornájába.A blokkokat ezután steril főzőpoharakba helyeztük, és 37 °C-on 24 órán át inkubáltuk.31, 34, 35
(A) A csoport (n=24) mintáit Chx.HCl nanoemulzióval mostuk.Az (I) alcsoport (n=12) mintáit 5 ml 0,75%-os Chx.HCl nanoemulzióval öblítettük.A (II) alcsoport (n = 12) 5 ml 1,6%-os Chx.HCl nanoemulzióval öblítette le a mintákat.
Kontroll csoport: pozitív kontroll, (n=4) a szennyezett gyökércsatornát 5 ml sóoldattal átöblítettük és pozitív kontrollként tartottuk.Negatív kontroll: (n=4) A mintákat nem fecskendeztük be szuszpenzióval, azaz a gyökércsatorna nem volt szennyezett E. faecalis-szal, és negatív kontrollként sterilen tartottuk a sterilizálás és az eljárás megbízhatóságának igazolására.Minden mintához használjon 5 ml tesztmosó oldatot.Ezután minden mintát 1 ml steril sóoldattal utolsó mosásnak vetünk alá.
A gyökércsatornákból származó minták gyűjtésére 35-ös méretű steril papírhegyet használnak.A papírhegyet munkahosszúságig behelyeztük a csőbe, 10 másodpercig hagytuk, majd agarlemezekre vittük, hogy meghatározzuk a lemezenkénti kolóniaképző egységek (CFU) számát.A lemezeket 37 °C-on 24 órán át inkubáltuk, majd vizuálisan megvizsgáltuk a baktériumok szaporodását.Az átlátszó lemez teljes sterilizálást mutat.Az elmosódott lemezek pozitív növekedést mutatnak.Meghatároztuk a CFU-k átlagos számát a baktériumnövekedési zónában edényenként, és kiszámítottuk a CFU-k számát.A túlélőket elsősorban a csepegtetőlemezeken lévő életképes számokkal mérik.Ezenkívül egy kiöntőpoharat használtunk az alacsony CFU-k számlálására, és egy 106-os hígítást használtunk a magas CFU-k számlálására.36.37
Készítsünk elő 15 ml felolvasztott agar táptalajt tartalmazó csöveket autoklávban elősterilizáltunk ugyanazon a napon, mint a kísérlethez.Az Enterococcus faecalis egy fakultatív Gram-pozitív anaerob coccus, amely nagyon magas pH-n, savasságon és magas hőmérsékleten képes túlélni.39 baktériummintát (Enterococcus faecalis ATCC 29212) állítottunk elő úgy, hogy a telepekből származó sejteket steril sóoldattal kevertük össze.A bakteriális mintákat ezután fiziológiás sóoldattal hígítottuk, hogy McFarland 0,5-re illeszkedjen, ami 108 CFU/ml-nek felel meg.A hozzáadott minta térfogata 10 µl volt.39 A zavarossági standardot (McFarland 0,5)40 úgy állítottuk elő, hogy 0,6 ml 1%-os (10 g/l) bárium-klorid-dihidrát oldatot öntöttünk egy 100 ml-es mérőhengerbe, és 100 ml-re megtöltöttük 1%-os (10 g/l) kénsawal.A zavarossági standardokat ugyanabba a csövekbe helyeztük, mint a húsleves mintákat, és szobahőmérsékleten 6 hónapig sötétben tároltuk, majd lezártuk, hogy megakadályozzuk a párolgást.Nyissa ki az üres Petri-csésze fedelét, és öntse a mintát a csésze közepére.Ha az agar teljesen megszilárdult, fordítsa meg a lemezt, és inkubálja 37 °C-on 24 órán át.
Minden adatot összegyűjtöttünk, táblázatba foglaltunk és statisztikai elemzésnek vetettük alá.A statisztikai elemzést IBM® SPSS® Statistical Version 17 for Windows (SPSS Inc., IBM Corporation, Armonk, NY, USA) segítségével végeztük.
Vizsgálták a Chx.HCl oldhatóságát különböző olajfázisokban, felületaktív anyagok oldataiban, társfelületaktív oldatokban és vízben.A Chx.Hcl oldékonysága a legjobb a Labrafil M-ben és a legalacsonyabb az olajsavban.A nagyobb gyógyszeroldhatóság az olajfázisban azért fontos a nanoemulziók esetében, mert a nanoemulziók képesek a gyógyszert oldott formában tartani, ami azt jelenti, hogy az olajban való nagyobb gyógyszeroldékonyság kevesebb olajat eredményez a készítményben, és így kevesebb gyógyszert is.terhelés Az olajcseppek emulgeálásához bizonyos mennyiségű felületaktív anyag és társfelületaktív anyag szükséges.
Egy pszeudo-hármas fázisdiagramot készítettek a nanoemulziós régiók meghatározására, valamint a kiválasztott olajok, felületaktív anyagok és további felületaktív anyagok (Labrafil M, Tween 80, Tween 20 és propilénglikol) koncentrációjának optimalizálására.A Chx.Hcl nagyon alacsony oldhatóságot mutat olajsavban, ami zavarosodást eredményez, amikor az olajsavat az első csepp vízzel titrálják.Ezért az olajsavrendszert kizártuk ebből a vizsgálatból.Más készítményeket is előállítottak olaj és felületaktív anyag 1:9 arányú keverékével.pH- és ionerősség-tartományban, ezért ezeket a felületaktív anyagokat választottuk.
Minden elkészített készítmény tiszta volt, kivéve a System F2-t, amely zavarosnak tűnt, és ezért kizárták a további értékelési vizsgálatokból.
Az ideális nanoemulziós készítménynek enyhe keveréssel hígítva teljesen és gyorsan szét kell tudnia oszlani.A Chx.HCl nanoemulziós készítmények rövid emulgeálási időt mutattak, 1,67-12,33 másodperc.A Tween 80 emulgeálási ideje a legrövidebb.Ez a Tween 80 nagyobb szolubilizáló képességével magyarázható. Az önemulgeálási idő a felületaktív anyag koncentrációjának növekedésével növekszik, ami a felületaktív anyag hatására a rendszer viszkozitásának növekedésével magyarázható.
Az emulzió cseppmérete határozza meg a hatóanyag-felszabadulás sebességét és mértékét.A kisebb emulziócseppméret rövidebb emulgeálási időt és nagyobb gyógyszerfelszívódási felületet eredményez.A Chx.HCl nanoemulzió kiválasztott összetételeinek átlagos cseppmérete 711±0,44, 587±15,3, 10,97±0,11, 16,43±4,55 és 12,18±2,48, a PDI pedig 0,76,0,6 és 0,7 F,1,0,6 és 0,2 volt. ., F3 és 0,16 F4, F5 és F6.A Tween 80-at felületaktív anyagként tartalmazó készítmények kisebb szferulitokat mutattak.Ennek oka lehet a nagyobb emulgeálóképessége.Az alacsonyabb PDI érték szűkebb rendszerméret-eloszlást jelez.Ezeknek a készítményeknek tiszta megjelenésük van, mert cseppsugaruk kisebb, mint a látható fény optikai hullámhossza (390-750 nm), amelynél minimális fényszórás lép fel.41
ábrán.A 2. ábra a kiszerelt készítményből felszabaduló Chx.HCl százalékos arányát mutatja.A hatóanyag teljes felszabadulása a Chx.HCl nanoemulzió elkészített készítményeiből 2 és 7 perc között volt.Megfigyelték, hogy a legnagyobb hatóanyag-leadási sebességet a Chx.HCl F6 nanoemulziós készítmény esetében kaptuk (2 perc), ami a nagyobb fokú emulgeálást mutató Tween 80 jelenlétének és az így létrejövő nanoemulziónak köszönhető.nagy felületet biztosít a gyógyszerfelszabaduláshoz, ami lehetővé teszi a megnövekedett hatóanyag-leadási sebességet.Ugyanakkor a propilénglikol oldhatósági tulajdonságai lehetővé teszik nagy mennyiségű hidrofil felületaktív anyag feloldódását az olajban.40
Azt találták, hogy a Chx.HCl in vitro felszabadulása eltérő kinetikai sorrendet követ, és nincs egyértelmű kinetikai sorrend, amely tükrözi a különbözőképpen elkészített nanoemulziós készítményekből származó gyógyszerfelszabadulást.Az F4 gyógyszerek kinetikai felszabadulása elsőrendű kinetika, ami azt jelenti, hogy a bennük maradt gyógyszer mennyiségével arányosan szabadulnak fel.42 Más gyógyszerek kinetikai felszabadulása összhangban volt a Higuasha diffúziós modellel, amely azt jelezte, hogy a felszabaduló gyógyszer mennyisége arányos a teljes gyógyszer és a hatóanyag nanoemulzióban való oldhatóságának négyzetgyökével.42
A kiválasztott készítményeket változó termodinamikai stabilitásnak vetettük alá stressz-teszttel, hő-hűtés ciklusok, centrifugálás és fagyasztás-olvadás ciklusok alkalmazásával.Megfigyelték, hogy az F3 és F4 készítmények a gyógyszer kicsapódását mutatták kiolvasztási ciklusok után, míg az F1 besűrűsödést (gélesedést) mutatott.Az F5 és az F6 megfelelt a folyamatos centrifugálási cikluson, a fűtési-hűtési teszten és a fagyasztási-olvadási teszten.A nanoemulziók termodinamikailag stabil rendszerek, amelyek bizonyos koncentrációjú olaj, felületaktív anyag és víz mellett fázisszétválás, emulgeálás vagy repedés nélkül képződnek.A hőstabilitás különbözteti meg a nanoemulziókat az emulzióktól, amelyek kinetikailag stabilak és végül fázisokra válnak szét.19 Az F3 nagyobb részecskeméretet (587 nm) mutatott, mint más készítmények, ami megmagyarázhatja a fázisszétválást és a gyógyszer kicsapódását a termodinamikai stabilitási tesztekben.A Tween 80-at és társfelületaktív anyagot nem tartalmazó F4 gyógyszerkiválást mutatott, ami arra utalhat, hogy propilénglikolt és Tween 80-at kell használni a nanoemulziós készítmények stabilitásának javítása érdekében.A Tween 20-at további felületaktív anyag nélkül tartalmazó F1 sűrűsödést (gélesedést) mutatott, ami a gél viszkozitásának vagy szilárdságának növekedése a cseppek aggregációja miatt.
A stabilitási eredmények azt mutatják, hogy fontos egy további propilénglikol felületaktív anyag jelenléte a részecskék diszperziójának növelésében és a gyógyszer kicsapódásának megelőzésében.A 43 F6 volt a legjobb készítmény a kis részecskeméret (12,18 nm), a rövid emulgeálási idő (1,67 másodperc) és a gyors, 2 perc utáni oldódási sebesség miatt.Termodinamikailag/fizikailag stabil rendszernek találták, ezért választották ki további tanulmányozásra.
Egyre gyakoribbak a gyökérkezelés utáni kudarcok, ami azt jelenti, hogy a betegek fokozottan ki vannak téve az összetettebb fertőzések kialakulásának.44,45 A biofilmet el kell távolítani a gyökércsatornák fertőtlenítése és feltöltése során.46,47 A gyökércsatorna-rendszer összetettsége miatt nehézzé válik a bakteriális gyökércsatornák teljes eltávolítása csak műszerekkel és öntözéssel.48 A gyökércsatorna-öblítő oldatok hatékonysága az öntözőszer DT-be való behatolásától és a baktériumoknak való kitettség időtartamától függ.49 Ezért az alapos gyökérfertőtlenítés új módszereit kipróbálták és tesztelték.A hagyományos öblítések nem szüntetik meg teljesen az E. faecalis-t a DT kisebb behatolása miatt.50.
A nanoemulziós öblítő átlagos tisztítóereje 2001,47 µm2, az öblítőszer átlagos részecskemérete 2609,56 µm volt.Az átlagos különbség a nanoemulziós mosás és a normál szemcseméretű mosás között 608,09 µm2 volt. Statisztikailag igen szignifikáns (P<0,001) különbség volt a nanoemulziós öntözőszerek és a normál szemcseméretű irrigánsok között (P-érték 0,00052). Statisztikailag igen szignifikáns (P<0,001) különbség volt a nanoemulziós öntözőszerek és a normál szemcseméretű irrigánsok között (P-érték 0,00052). Между ирригационными растворами наноэмульсии и ирригационными растворами с нормальным размером частьдыми налблчесьдыц налблччастиюц козначимая (P<0,001) разница (значение P 0,00052). Statisztikailag igen szignifikáns (P<0,001) különbség volt (P-érték 0,00052) a nanoemulziós öntözőszerek és a normál szemcsés irrigánsok között.纳米乳液冲洗剂和正常粒径冲洗剂之间存在统计学上高度昼着的差异弼着的差异) 0.5（1（P0. .纳米乳液冲洗剂和正常粒径冲洗剂之间存在统计学上高度昼着的差异弼着的差异) 0.5（1（P0. . Между ополаскивателем с наноэмульсией и ополаскивателем с нормальным размером частиц была статистически <0,0001) (значение P 0,00052). Statisztikailag nagyon szignifikáns különbség (P<0,0001) volt a nanoemulziós öblítés és a normál szemcseméretű öblítés között (P-érték 0,00052).A nanoemulzió statisztikailag igen szignifikáns eltérést mutatott a normál szemcseméretű anyaghoz képest, kisebb átlagos maradék törmelékfelületet mutatva, azaz a nanoemulziós anyag volt a legjobb tisztítóképességgel, ahogy az a 3. ábrán is látható.
3. ábra Öblítőszerek tisztítási teljesítményének összehasonlítása: (A) aktivált Nano CHX lézerrel, (B) CHX lézer aktiválással, (C) PUI Nano CHX, (D) Nano CHX aktiválás nélkül, (E) CHX aktiválás nélkül és (F) ) CHX PUI aktiválással.
A fennmaradó Chx.HCl 1,6%-os fragmentumok átlagos felülete 2320,36 µm2, a Chx.HCl 2%-os átlagos felülete 2949,85 µm2 volt. Statisztikailag igen szignifikáns (P<0,001) különbség volt a nagyobb koncentrációjú nanoemulziós irrigánsok és a normál szemcseméretű irrigánsok között (P-érték 0,00000). Statisztikailag igen szignifikáns (P<0,001) különbség volt a nagyobb koncentrációjú nanoemulziós irrigánsok és a normál szemcseméretű irrigánsok között (P-érték 0,00000). Наблюдалась статистически высокозначимая (P<0,001) растворов и ирригационными растворами с нормальным размером частиц (значение P 0,00000). Statisztikailag igen szignifikáns (P<0,001) különbség volt a nagyobb koncentrációjú nanoemulziós irrigánsok és a normál szemcseméretű irrigánsok között (P-érték 0,00000).较高浓度的纳米乳液冲洗剂与正常粒径冲洗剂之间存在统计学上高度显 P 值0,00000).较高浓度的纳米乳液冲洗剂与正常粒径冲洗剂之间存在统计学扼着的差<P0.0.00 Наблюдалась статистически очень значимая разница (P<0,001) й и ополаскивателя с нормальным размером частиц (значение P 0,00000). Statisztikailag nagyon szignifikáns különbség volt (P<0,001) a magasabb koncentrációjú nanoemulziós öblítés és a normál szemcseméretű öblítés (P-érték 0,00000) között.Bár a nanoemulziós öntözőszer koncentrációja alacsonyabb volt, mint a normál szemcseméretű öntözőké, ez az alacsonyabb koncentráció lényegesen hatékonyabb volt a törmelék eltávolításában és hatékonyabb a gyökércsatornák tisztításában.
A PUI statisztikailag igen szignifikáns különbséget mutatott (p<0,001) a többi aktiválási módszerhez képest. A PUI statisztikailag igen szignifikáns különbséget mutatott (p<0,001) a többi aktiválási módszerhez képest. PUI имел статистически высокозначимую разницу (p<0,001) по сравнению с другими методами активации. A PUI statisztikailag igen szignifikáns különbséget mutatott (p<0,001) a többi aktiválási módszerhez képest.与其他激活方法相比，PUI 具有统计学上非常显着的差异(p<0,001).与其他激活方法相比，PUI 具有统计学上非常显着的差异(p<0,001). По сравнению с другими методами активации PUI имел статистически очень значимую разницу (p<0,001). Más aktiválási módszerekhez képest a PUI statisztikailag igen szignifikáns különbséget mutatott (p<0,001).Az ISP aktiválásával a törmelék maradék felületének átlagos területe 1695,31 µm2 volt. Az átlagos különbség a PUI és a lézer között 987,89929 volt, ami statisztikailag nagyon szignifikáns (P<0,001) különbséget mutat (p-érték 0,00000). Az átlagos különbség a PUI és a lézer között 987,89929 volt, ami statisztikailag nagyon szignifikáns (P<0,001) különbséget mutat (p-érték 0,00000). Средняя разница между PUI и Laser составила 987,89929, демонстрируя высокостатистически значимую (P<0,0001) 0,0,0, 0,001 ). Az átlagos különbség a PUI és a Laser között 987,89929 volt, ami statisztikailag erősen szignifikáns (P<0,001) különbséget mutat (p-érték 0,00000). PUI 和Laser 之间的平均差异为987.89929，显示出高度统计学显着性〧ののホテーーーーーージ 0,000 差异PUI és lézer Средняя разница между PUI и Laser составила 987,89929, что свидетельствует о высокой статистической (зназниченра,-0ческой) е 0,00000). A PUI és a Laser közötti átlagos különbség 987,89929 volt, ami magas statisztikai szignifikancia (P<0,001) különbséget jelez (p-érték 0,00000). Az átlagos különbség a PUI és az aktiválás hiánya között 712,40643 volt, ami statisztikailag erősen szignifikáns (P<0,001) különbséget mutat 0,00098 p-érték mellett. A lézeres aktiválás vagy az aktiválás hiánya statisztikailag nem különbözött szignifikánsan (P>0,05) 0,45112 P-érték mellett. Az átlagos különbség a PUI és az aktiválás hiánya között 712,40643 volt, ami statisztikailag erősen szignifikáns (P<0,001) különbséget mutat 0,00098 p-érték mellett.a P-érték 0,451211. Средняя разница между PUI и отсутствием активации составила 712,40643, демонстрируя высокострируя высокостатистически<0,0зуюч1. с p-значением 0,00098). Az átlagos különbség a PUI és az aktiválás hiánya között 712,40643 volt, ami statisztikailag erősen szignifikáns (P<0,001) különbséget mutat 0,00098 p-érték mellett.P-érték 0,451211. PUI 和未激活之间的平均差异为712.40643，显示高度统计学显着性差异(P<0.001)差异(P<0.001)差异PUI Средняя разница между PUI и инактивацией составила 712,40643, что свидетельствует о высокой статистической< , p-значение 0,00098). A PUI és az inaktiváció közötti átlagos különbség 712,40643 volt, ami a különbség magas statisztikai szignifikanciáját jelzi (P<0,001, p-érték 0,00098).使用激光激活或不激活在统计学上没有显着差异(P>0.05) P 值为0.451211.使用激光激活或不激活在统计学上没有显着差异(P>0.05) P 值为0.451211. Статистически значимой разницы (P>0,05) с лазерной активацией или без нее не было со значением P 0,4512111. Nem volt statisztikailag szignifikáns különbség (P>0,05) sem lézeres aktiválással, sem anélkül, 0,451211 P érték mellett.A fennmaradó fragmentumok átlagos felülete lézeres aktiváláskor 2683,21 µm2 volt.A fennmaradó, aktiválás nélküli fragmentumok átlagos felülete 2407,72 µm2 volt.Összehasonlítva a lézeres aktiválással vagy az aktiválás nélkül, a PUI statisztikailag kisebb átlagos forgácsfelülettel rendelkezett, azaz a legjobb tisztítóerővel rendelkezik.
A nanoemulziós öblítő átlagos tisztítóereje 2001,47 µm2, az öblítőszer átlagos részecskemérete 2609,56 µm volt.Az átlagos különbség a nanoemulziós mosás és a normál szemcseméretű mosás között 608,09 µm2 volt. Statisztikailag igen szignifikáns (P<0,001) különbség volt a nanoemulziós öntözőszerek és a normál szemcseméretű irrigánsok között (P-érték 0,00052). Statisztikailag igen szignifikáns (P<0,001) különbség volt a nanoemulziós öntözőszerek és a normál szemcseméretű irrigánsok között (P-érték 0,00052). Между ирригационными растворами наноэмульсии и ирригационными растворами с нормальным размером частицастиччистич былы ая (P<0,001) разница (значение P 0,00052). Statisztikailag igen szignifikáns (P<0,001) különbség volt (P-érték 0,00052) a nanoemulziós öntözőszerek és a normál szemcsés irrigánsok között.纳米乳液冲洗剂与正常粒径冲洗剂之间存在统计学上高度显着的差异显着的差异）弉2.0（01＀5.0（1＀P0. . P<0,001 (P值0,00052). Между ополаскивателем с наноэмульсией и ополаскивателем с нормальным размером частиц была статистически <0,0001) (значение P 0,00052). Statisztikailag nagyon szignifikáns különbség (P<0,0001) volt a nanoemulziós öblítés és a normál szemcseméretű öblítés között (P-érték 0,00052).A normál szemcseméretű anyaghoz képest a nanoemulzió statisztikailag igen szignifikáns eltérést mutat, kisebb átlagos maradék törmelékfelületet mutat, azaz a Nanoemulziós anyag jobb tisztítóképességgel rendelkezik, ahogy az a 3. ábrán látható.
A fennmaradó Chx.HCl 1,6%-os fragmentumok átlagos felülete 2320,36 µm2, a Chx.HCl 2%-os átlagos felülete 2949,85 µm2 volt. Statisztikailag igen szignifikáns (P<0,001) különbség volt a nagyobb koncentrációjú nanoemulziós irrigánsok és a normál szemcseméretű irrigánsok között (P-érték 0,00000). Statisztikailag igen szignifikáns (P<0,001) különbség volt a nagyobb koncentrációjú nanoemulziós irrigánsok és a normál szemcseméretű irrigánsok között (P-érték 0,00000). Имелась статистически высокодостоверная (P<0,001) в и ирригационными растворами с нормальным размером частиц (значение P 0,00000). Statisztikailag szignifikáns (P<0,001) különbség volt a nagyobb koncentrációjú nanoemulziós irrigánsok és a normál szemcseméretű irrigánsok között (P-érték 0,00000).较高浓度的纳米乳液冲洗剂与正常粒径冲洗剂之间存在统计学上高度显 P值0,00000).较高浓度的纳米乳液冲洗剂与正常粒径冲洗剂之间存在统计学上高度显 P000 Наблюдалась статистически высокозначимая разница (P <0,001) и ополаскивателем с нормальным размером частиц (значение P 0,00000). Statisztikailag igen szignifikáns különbség volt (P < 0,001) a magasabb koncentrációjú nanoemulziós öblítés és a normál szemcseméretű öblítés (P érték 0,00000) között.Bár a nanoemulziós öntözőszer koncentrációja alacsonyabb volt, mint a normál szemcseméretű öntözőké, ez az alacsonyabb koncentráció lényegesen hatékonyabb volt a törmelék eltávolításában és hatékonyabb a gyökércsatornák tisztításában.
A PUI statisztikailag magas szignifikáns különbséget mutatott (p<0,001) a többi aktiválási módszerhez képest. A PUI statisztikailag magas szignifikáns különbséget mutatott (p<0,001) a többi aktiválási módszerhez képest. PUI имел статистически высокую значимую разницу (p<0,001) по сравнению с другими методами активации. A PUI statisztikailag szignifikáns különbséget mutatott (p<0,001) a többi aktiválási módszerhez képest.与其他激活方法相比，PUI 具有统计学上的显着差异(p<0,001). Más aktiválási módszerekkel összehasonlítva a PUI statisztikailag szignifikáns különbséget mutat (p<0,001). PUI статистически значимо отличался (p<0,001) по сравнению с другими методами активации. A PUI statisztikailag szignifikánsan különbözött (p<0,001) a többi aktiválási módszerhez képest.A PUI aktiválása során a maradék felszíni törmelék átlagos területe 1695,31 μm2 volt. Az átlagos különbség a PUI és a lézer között 987,89929 volt, ami statisztikailag igen szignifikáns (P<0,001) különbséget mutatott (p-érték 0,00000). A PUI és az aktiválás hiánya közötti átlagos különbség 712,40643 volt, ami statisztikailag szignifikáns (P<0,001) különbséget mutat a (p-00090) értékkel. statisztikai (P>0,05) különbözik (P-érték 0,451211). Az átlagos különbség a PUI és a lézer között 987,89929 volt, ami statisztikailag nagyon szignifikáns (P<0,001) különbséget mutat (p-érték 0,00000).Az átlagos különbség a PUI és az aktiválás hiánya között 712,40643 volt, ami statisztikailag erősen szignifikáns (P<0,001) különbséget mutat (p-érték 0,00098).A lézeres aktiválás vagy az aktiválás nélküli alkalmazása statisztikailag (P>0,05) nem különbözött szignifikánsan (P-érték 0,451211). Средняя разница между PUI и лазером составила 987,89929, демонстрируя высокостатистически значимучниезна, (P<0,-0p0чние) 00000). Az átlagos különbség a PUI és a lézer között 987,89929 volt, ami statisztikailag erősen szignifikáns (P<0,001) különbséget mutat (p-érték 0,00000). - значение 0,00098).Использование лазерной активации или отсутствие активации не имело (статистически) (статистически) значение 0,451211). - érték 0,00098).A lézeres aktiválás alkalmazása vagy az aktiválás hiánya statisztikailag szignifikáns különbséget mutatott (P>0,05) és (P-érték 0,451211). PUI 和激光之间的平均差异为987.89929，与(p 值0.00000) 差异具有高度统计学(1<P)0.0.0. A PUI és a lézer közötti átlagos különbség 987,89929, és a különbség (p 值0,00000) magas statisztikai szignifikancia (P<0,001). Средняя разница между PUI и лазером составила 987,89929, что было высоко статистически значимым (P<0,001че (P<0,001чена0,001)). Az átlagos különbség a PUI és a lézer között 987,89929 volt, ami statisztikailag erősen szignifikáns (P<0,001) (p érték 0,00000). PUI 与未激活之间的平均差异为712.40643，与(p) 差异具有高度统计学意义(P<090801)0.090. Az átlagos különbség a PUI és az inaktív között 712,40643, és a különbség (p) magas statisztikai szignifikancia (P<0,001) – értéke 0,00098. Средняя разница между PUI и инактивацией составила 712,40643, что было высоко статистически значимым сP0 –<значимым сP0, ние 0,00098). A PUI és az inaktiváció közötti átlagos különbség 712,40643 volt, ami statisztikailag erősen szignifikáns (p) különbséggel (P<0,001 – 0,00098 érték).使用激光激活或不激活没有显着统计学差异(P>0.05) 与(P 值0.451211). Nem volt szignifikáns statisztikai különbség a lézeres aktiválás és a nem aktiválás (P>0,05) és (P 值0,451211) között. Не было статистически значимой разницы (P>0,05) по сравнению с (значение P 0,451211) с лазерной активацерной активац Nem volt statisztikailag szignifikáns különbség (P>0,05) a (P-érték 0,451211) lézeraktiválással vagy anélkül.A fennmaradó fragmentumok átlagos felülete a lézeres aktiválás során 2683,21 μm2 volt.A fennmaradó fragmentumok átlagos felülete aktiválás nélkül 2407,72 μm2 volt.Összehasonlítva a lézeres aktiválással vagy az aktiválás nélkül, a PUI-nak statisztikailag kisebb a chip átlagos felülete, azaz jobb a tisztítási képessége.
A nanoemulziós öblítés átlagos hatása a törmelék eltávolítására statisztikailag szignifikánsan magasabb volt, mint a normál szemcseméretű öblítésé.Chx.HCl 1,6%, PUI 1938,77 µm2, 2510,96 µm2 lézerrel.Aktiválás nélkül az átlagos érték 2511,34 µm2.Amikor 2%-os Chx.HCl-t használtunk, és lézerrel aktiváltuk, az eredmények a legrosszabbak voltak, és a törmelék mennyisége maximális volt.Ugyanezeket az eredményeket kaptuk, amikor a 0,75% Chx.HCl nem volt aktiválva.Nyilvánvaló, hogy a legjobb eredményeket a nanoemulzióban lévő öblítőszer magasabb koncentrációival érték el.A PUI volt a leghatékonyabb az öntözőszer aktiválásában és a törmelék öblítésében, amint az a 3A-F) ábrán látható).
A 2. táblázatból látható, hogy a Chx.HCl nanoemulzió az életképes mikroorganizmusok számát tekintve jobban teljesített, mint a normál méretű részecskék, és jó korrelációt mutatott a készítmény behatolásával és tisztító hatásával a következő paraméterek szerint: méret, öblítőszer koncentráció és aktiválási módszer.
Nagyobb koncentrációjú öblítőszer használatával a baktériumok teljesen elpusztíthatók.Még PUI aktiválással is a 0,75%-os Chx.HCl volt a legrosszabb antibakteriális hatása.A lézeres aktiválás negatív hatással van a nano-emulziós öblítésekre.Mint minden korábbi eredményből kiderül, a lézer alkalmazása csökkenti a Chx.HCl 0,75% nanoemulzió hatékonyságát, ahol a nanoChx.HCl 0,75% CFU értéke 195, ami nagyon magas érték, ami azt jelzi, hogy a reagensek ilyen koncentrációban a lézeres aktiváláshoz hasonlíthatók.A dióda lézerek fototermikusak, így akár fény, akár hő hatására a nanoemulzió elveszti antibakteriális hatását.A magas koncentráció eredménye a baktériumok teljes elpusztulása.A Nano Chx.HCl 1,6% negatív baktériumszaporodást mutatott lézeraktiválás jelenlétében, ami azt jelenti, hogy a lézer nem befolyásolta a nano Chx.HCl 1,6% antibakteriális képességét.Megállapítható, hogy a nagyobb koncentrációjú nanoemulziós anyag jobb antibakteriális hatással rendelkezik.
Ebben a munkában Chx.HCl nanoemulziókat állítottunk elő két különböző olaj, két felületaktív anyag és egy társfelületaktív anyag felhasználásával, az optimális készítményt (F6) választottuk kis részecskemérettel, rövid emulgeációs idővel és nagy oldódási sebességgel.Ezenkívül az (F6) termodinamikai/fizikai stabilitását is teszteltük.A Chx.HCl nanoemulzióban 1,6%-os koncentrációban a Chx.HCl nanoemulzió mutatta a legjobb permeabilitást a dentintubulusokban a hagyományos Chx.HCl mint öblítőfolyadékhoz képest, a PUI mint aktivációs módszer pedig tisztító képességgel bírt.Ezenkívül a Chx.HCl nanoemulzió antibakteriális vizsgálatai a baktériumok teljes eliminációját mutatták.Az eredmények ezt megerősítették.A Chx.HCl nanoemulzió ígéretes mosófolyadéknak tekinthető.
Nagyon hálásak vagyunk a Misr Tudományos és Műszaki Egyetem kutatólaboratóriumának dolgozóinak a rengeteg támogatásért.