Javascript-ը ներկայումս անջատված է ձեր դիտարկիչում: Այս կայքի որոշ գործառույթներ չեն աշխատի, երբ javascript-ն անջատված է:
Գրանցվեք ձեր կոնկրետ մանրամասներով և հատուկ հետաքրքրություն ներկայացնող դեղամիջոցով, և մենք կհամապատասխանենք ձեր տրամադրած տեղեկատվությունը մեր լայնածավալ տվյալների բազայի հոդվածներին և անմիջապես ձեզ կուղարկենք PDF պատճենը:
作者 Stella S, Vitale SR, Martorana F, Massimino M, Pavone G, Lanzafame K, Bianca S, Barone C, Gorgone C, Fichera M, Manzella L
Ստեֆանիա Ստելլա, 1,2 Սիլվիա Ռիտա Վիտալե, 1,2 Ֆեդերիկա Մարտորանա, 1,2 Միքելե Մասիմինո, 1,2 Ջուլիանա Պավոնե, 3 Կատիա Լանզաֆամե, 3 Սեբաստիանո Բյանկա, 4 Կիարա Բարոնե, 5 Կրիստինա Գորգոնե, 6 Մարկո Ֆիչերա, 6, Էքսպերիմենտի Մարկո Ֆիչերա, 1,2 և Էքսպերի 6 Մարկո Ֆիչերա, ine, Կատանիայի համալսարան, Կատանիա, 95123, Իտալիա; 2 Փորձարարական ուռուցքաբանության և արյունաբանության կենտրոն, AOU Policlinico “G.Rodolico – San Marco”, Catania, 95123, Իտալիա;3 Բժշկական ուռուցքաբանություն, AOU Policlinico “G.Ռոդոլիկո – Սան Մարկո», Կատանիա, 95123, Իտալիա;4 Բժշկական գենետիկա, ARNAS Գարիբալդի, Կատանիա, 95123, Իտալիա;5 Medicine Genetics, ASP, Syracuse, 96100, Իտալիա;6 Կատանիայի համալսարանի կենսաբժշկական և կենսատեխնոլոգիայի գիտությունների բաժին, բժշկական գենետիկա, Կատանիա, Իտալիա, 95123;7Oasi Research Institute-IRCCS, Troina, 94018, Իտալիա Հաղորդակցություններ՝ Stefania Stella, հեռ +39 095 378 1946, էլ. փոստ [email protected];[email protected] Նպատակը. BRCA1-ի և BRCA2-ի բակտերիալ մուտացիաները և հաստատված կրծքագեղձի քաղցկեղը (BC), ձվարանների (OC) և այլ տեսակներ, որոնք կապված են ողջ կյանքի ընթացքում քաղցկեղի ռիսկի հետ: BRCA գենի թեստավորումը կարևոր է անհատական ​​ռիսկի գնահատման, ինչպես նաև առողջ կրողների մոտ կանխարգելման մեթոդների հայտնաբերման և BRCA-ի տարբեր շրջաններում, ինչպես նաև քաղցկեղով հիվանդների տարբեր շրջաններում: և չնայած առկա են տվյալներ սիցիլիական ընտանիքներում BRCA պաթոգեն տարբերակների մասին, արևելյան Սիցիլիայում հատուկ ուղղվածություն ունեցող պոպուլյացիաներին ուղղված հետազոտությունները բացակայում են: Մեր հետազոտության նպատակն էր ուսումնասիրել BRCA պաթոգեն բակտերիալ փոփոխությունների հաճախականությունը և բաշխումը արևելյան Սիցիլիայից BC հիվանդների մի խումբում և գնահատել դրանց կապը BC հատուկ հատկանիշների հետ՝ օգտագործելով հաջորդ սերնդի ուռուցքային ինդեքսավորման բնորոշ հատկանիշները: ULTS. Ընդհանուր առմամբ, 35 հիվանդ (9%) ունեցել է BRCA պաթոգեն տարբերակ, 17 (49%) BRCA1-ում և 18 (51%) BRCA2.BRCA1 փոփոխությունները տարածված են եռակի բացասական BC հիվանդների մոտ, մինչդեռ BRCA2 մուտացիաներն ավելի տարածված են լյումինալ BC-ով հիվանդների մոտ: Եզրակացություններ. Մեր գտածոները ներկայացնում են BRCA մուտացիոն կարգավիճակի ակնարկ Արևելյան Սիցիլիայից BC հիվանդների մոտ և հաստատում են NGS վերլուծության դերը ժառանգական BC-ով հիվանդների նույնականացման գործում: Ընդհանուր առմամբ, այս տվյալները համահունչ են նախկին ապացույցներին, որոնք աջակցում են BRCA սքրինինգին մուտացիա կրողների մոտ քաղցկեղի պատշաճ կանխարգելման և բուժման համար:
Կրծքագեղձի քաղցկեղը (BC) աշխարհում ամենատարածված չարորակ ուռուցքն է և կանանց մոտ ամենամահաբեր քաղցկեղը:1 Կենսաբանական առանձնահատկությունները, որոնք որոշում են BC-ի կանխատեսումը և կլինիկական վարքը, ժամանակի ընթացքում լայնորեն ուսումնասիրվել և մասամբ պարզաբանվել են: Փաստորեն, ներկայումս օգտագործվում են մի քանի փոխարինող մարկերներ BC-ն տարբեր մոլեկուլային ենթատիպերի դասակարգելու համար: Դրանք են՝ էստրոգեն (ER2) և recepteror recepteror աճի գործոնը (ER2) HER2) ուժեղացում, տարածման ինդեքս Ki-67 և ուռուցքի աստիճան (G): 2 Այս փոփոխականների համակցությունը բացահայտեց BC-ի հետևյալ կատեգորիաները. % և HER2 ուժեղացման առկայության դեպքում՝ անկախ տարածման ինդեքսից.2) HER2+ ուռուցքներ, որոնք ER և PgR բացասական են, բայց ցույց են տալիս HER2 ուժեղացում: Այս խմբին բաժին է ընկնում կրծքագեղձի բոլոր ուռուցքների 10%-ը.3) Կրծքագեղձի եռակի բացասական քաղցկեղը (TNBC), որը չի ցույց տալիս ER և PgR արտահայտություն և HER2 ուժեղացում, կազմում է կրծքագեղձի քաղցկեղի մոտ 15%-ը:2-4
Այս BC ենթատեսակներից ուռուցքի աստիճանը և տարածման ինդեքսը ներկայացնում են խաչաձեւ հատվածային կենսամարկերներ, որոնք ուղղակիորեն և անկախորեն կապված են ուռուցքի ագրեսիվության և կանխատեսման հետ:5,6
Ի լրումն վերոհիշյալ կենսաբանական հատկանիշների, ժառանգական գենետիկական փոփոխությունների դերը, որը հանգեցնում է BC-ի զարգացմանը, վերջին մի քանի տարիների ընթացքում դարձել է ավելի կարևոր: BRCA2, CHK2, PALB2, RAD51C և RAD51D) հիմնականում պատասխանատու են ժառանգական BC-ի համար: Այս գեներից BRCA1-ը և BRCA2-ը (այսուհետ՝ BRCA1/2) ցույց են տվել ամենաուժեղ հարաբերակցությունը կրծքագեղձի ուռուցքների զարգացման հետ: ներառյալ ձվարանները, շագանակագեղձը, ենթաստամոքսային գեղձը, կոլոռեկտալը և մելանոման: 13-ից 80 տարեկանից BC-ի կուտակային հաճախականությունը կազմում է 72% BRCA1 պաթոգենիկ տարբերակով (PV) ունեցող կանանց մոտ և 69% BRCA2 PV ունեցող կանանց մոտ:14
Հատկանշական է, որ վերջին հրապարակումը ենթադրում է, որ BC ռիսկը կախված է PV-ի տեսակից: Իրականում, համեմատած պաթոգեն կտրող տարբերակների հետ, ակնհայտ սխալ տարբերակները, հատկապես BRCA1 գենում, կապված են BC-ի ռիսկի նվազեցման հետ, հատկապես տարեց կանանց մոտ:15
BRCA1 կամ BRCA2 PV-ի առկայությունը կապված է տարբեր կենսաբանական և կլինիկապաթոլոգիական առանձնահատկությունների հետ:16,17 BRCA1-ի հետ կապված BC-ները հակված են կլինիկորեն ագրեսիվ, վատ տարբերակված և բարձր բազմապատկվող: Այս ուռուցքները սովորաբար եռակի բացասական են և ունեն վաղ տարիքի սկիզբ: Այս ուռուցքները ավելի տարածված են լույս B-ում և սովորաբար հանդիպում են տարեց մարդկանց մոտ:16-18 Հատկանշական է, որ BRCA1-ի և BRCA2-ի մուտացիաները մեծացնում են զգայունությունը հատուկ բուժման, ներառյալ պլատինի աղերի և թիրախավորված դեղամիջոցների, ինչպիսիք են պոլի(ADP-ribose) պոլիմերազային ինհիբիտորները (PARPi):19,20:
Վերջին մի քանի տարիների ընթացքում հաջորդ սերնդի հաջորդականացման (NGS) ներդրումը կլինիկական պրակտիկայում հնարավորություն է տվել BC հիվանդների աճող թվին անցնել մոլեկուլային թեստավորում քաղցկեղի նկատմամբ զգայունության համախտանիշի համար, ներառյալ BRCA1/2.21. Միևնույն ժամանակ, ընտանեկան պատմության, ժողովրդագրական և կլինիկոպաթոլոգիական բնութագրերի2 համատեքստում ավելի լավ նույնականացնելու համար արժեւորվում են այս սահմանումները, որոնք հիմնված են ընտանեկան պատմության, ժողովրդագրական և կլինիկոպաթոլոգիական բնութագրերի2 ավելի լավ բացահայտման համար: մուլտացիա BRCA1/2 սքրինինգի վրա որոշակի պոպուլյացիաներում՝ ընդգծելով տարբերությունները աշխարհագրական տարածաշրջանների միջև:24–27 Թեև կան զեկույցներ արևմտյան Սիցիլիայում BC խմբի մասին, ավելի քիչ տվյալներ կան արևելյան Սիցիլիայի բնակչության BRCA1/2 սքրինինգի վերաբերյալ:28,29
Մենք այստեղ նկարագրում ենք Արևելյան Սիցիլիայից BC հիվանդների մոտ BRCA1/2 սքրինինգի արդյունքները՝ հետագայում փոխկապակցելով BRCA1 կամ BRCA2 մուտացիաների առկայությունը այս ուռուցքների հիմնական կլինիկոպաթոլոգիական առանձնահատկությունների հետ:
Այս հետահայաց հետազոտությունն իրականացվել է «Փորձարարական ուռուցքաբանության և արյունաբանության կենտրոնում»՝ Policlinico Hospital-ում: Rodolico – San Marco, Catania: 2017 թվականի հունվարից մինչև 2021 թվականի մարտը կրծքագեղձի և ձվարանների, մելանոմայի, ենթաստամոքսային գեղձի կամ շագանակագեղձի 2 լաբորատորիայի մեր լաբորատոր հետազոտությունը ուղղորդվել է BRCA2 գենետիկական քաղցկեղով: անցկացվել է Հելսինկյան հռչակագրի համաձայն, և բոլոր մասնակիցները տրամադրել են գրավոր տեղեկացված համաձայնություն մինչև մոլեկուլային վերլուծությունը:
BC-ի հյուսվածաբանական և կենսաբանական բնութագրերը (ER, PgR, HER2 կարգավիճակ, Ki-67 և աստիճան) գնահատվել են առանցքային բիոպսիայի կամ վիրաբուժական նմուշների վրա՝ հաշվի առնելով միայն ագրեսիվ ուռուցքային բաղադրիչները: Այս բնութագրերի հիման վրա BC-ները դասակարգվել են հետևյալ կերպ. Ki-67≥20%), լուսային B-HER2+ (ER և/կամ PgR+, HER2+), HER2+ (ER և PgR-, HER2+) կամ եռակի բացասական (ER և PgR-, HER2-):
Նախքան BRCA1 և BRCA2 մուտացիայի կարգավիճակը գնահատելը, բազմամասնագիտական ​​թիմը, ներառյալ ուռուցքաբան, գենետոլոգ և հոգեբան, յուրաքանչյուր հիվանդի համար անցկացրեց ուռուցքի գենետիկական խորհրդատվություն՝ BRCA1 և/կամ BRCA1-ի առկայությունը որոշելու համար:կամ BRCA2 գենում PV-ի բարձր ռիսկ ունեցող անհատներ: Հիվանդների ընտրությունը կատարվել է ըստ Իտալական Բժշկական Ուռուցքաբանության Միության (AIOM) ուղեցույցների և տեղական սիցիլիական առաջարկությունների:30,31 Այս չափանիշները ներառում են.(ii) տղամարդիկ մ.թ.ա.(iii) նրանք, ովքեր ունեն BC և OC;(iv) BC <36 տարեկան, TNBC <60 տարեկան կամ երկկողմանի BC <50 տարեկան կանայք;(v) Անձնական բժշկական պատմություն BC <50 տարի և առնվազն մեկ առաջին կարգի ազգական. (ա) BC < 50 տարի;բ) ցանկացած տարիքի ոչ լորձաթաղանթային և ոչ սահմանային ՕԿ.գ) երկկողմանի մ.թ.ա.դ) արական սեռի մ.թ.ա.ե) ենթաստամոքսային գեղձի քաղցկեղ;զ) շագանակագեղձի քաղցկեղ;(vi) երկու կամ ավելի Անձնական պատմություն BC > 50 տարի և ընտանեկան պատմություն BC, OC կամ ենթաստամոքսային գեղձի քաղցկեղի հարազատների համար, ովքեր միմյանց առաջին կարգի ազգականներ են (ներառյալ այն հարազատները, որոնց հետ նա առաջին կարգի ազգական է).(vii) OC-ի և առնվազն մեկ առաջին կարգի ազգականի անձնական պատմություն. ա) մ.թ.ա. <50 տարի.(բ) ՀԱՕԿ;գ) երկկողմանի մ.թ.ա.դ) արական սեռի մ.թ.ա.(vii) իգական սեռի բարձր աստիճանի շիճուկ OC-ով:
Յուրաքանչյուր հիվանդից ստացվել է 20 մլ ծայրամասային արյան նմուշ և հավաքվել EDTA խողովակներում (BD Biosciences): Գենոմիկ ԴՆԹ-ն մեկուսացվել է 0,7 մլ ամբողջական արյան նմուշներից՝ օգտագործելով QIAsymphony DSP DNA Midi մեկուսացման հավաքածուն (QIAGEN, Hilden, Italy)՝ ըստ արտադրողի հրահանգների: , MA, ԱՄՆ) Կատարել քանակականացում:Թիրախի հարստացումը և գրադարանի պատրաստումն իրականացվում է Oncomine™ BRCA Research Assay Chef-ի կողմից, որը պատրաստ է ներբեռնվել Ion AmpliSeq™ Chef Reagents DL8 հավաքածուի մեջ՝ գրադարանի ավտոմատ պատրաստման համար՝ համաձայն արտադրողի ցուցումների: Հավաքածուն բաղկացած է երկու մուլտիպլեքսային PCR այբբենարանից, որոնք կարող են օգտագործվել բոլորը ուսումնասիրելու համար (NM_200001): 059.3) գեներ: Համառոտ, 15 մկլ յուրաքանչյուր նոսրացված նմուշի ԴՆԹ-ից (10 նգ) ավելացվել է շտրիխ կոդավորված թիթեղներին գրադարանի պատրաստման համար, և բոլոր ռեակտիվներն ու սպառվող նյութերը բեռնվել են Ion Chef™ գործիքի վրա: Գրադարանի ավտոմատ պատրաստում և շտրիխ կոդավորված գրադարանի միավորումը, այնուհետև կատարվել է Quobit-ի 3-ի չափիչ սարքի վրա: (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, ԱՄՆ) արտադրողի ցուցումների համաձայն: Ի վերջո, գրադարանները համադրվում են հավասարամոլյար հարաբերակցությամբ Ion Chef™ գրադարանի նմուշի խողովակներում (շտրիխ կոդավորված խողովակներ) և բեռնվում Ion Chef™ գործիքի վրա: Հերթականությունը կատարվել է Ion Torrent S5-ի միջոցով ScientificrP (ThermoFir0) (ThermoFir0) mo Fisher Scientific): Տվյալների վերլուծությունն իրականացվել է Amplicon Suite (SmartSeq srl) և Ion Reporter Software-ի կողմից:
Բոլոր տարբերակների անվանացանկը հետևել է Մարդու գենոմի փոփոխական կոնսորցիումի ընթացիկ ուղեցույցներին, որոնք հասանելի են առցանց (HGVS, http://www.hgvs.org/mutnomen): BRCA1/2 տարբերակների կլինիկական նշանակությունը որոշվել է միջազգային կոնսորցիումի ENIGMA (Evidence-Based Network for Interpreting Allembers.org, Muntes.org/Münsterig) տարբեր տվյալների բազայի դասակարգման միջոցով: ինչպիսիք են ARUP-ը, BRCAEXCHANGE-ը, ClinVar-ը, IARC_LOVD-ը և UMD-ը: Դասակարգումը ներառում է հինգ տարբեր ռիսկային կատեգորիաներ՝ բարենպաստ (կատեգորիա I), հավանական բարենպաստ (կատեգորիա II), անորոշ նշանակության տարբերակ (VUS, կատեգորիա III), հավանական պաթոգենիկ (IV կատեգորիա), և ախտածին (վերլուծված է ինֆորմացիոն ինֆորմացիոն կառուցվածքը V կատեգորիայի գործիքի վրա): մուտք դեպի 30 տվյալների բազա.32
Յուրաքանչյուր VUS-ին պոտենցիալ կլինիկական նշանակություն վերագրելու համար օգտագործվել են սպիտակուցի կանխատեսման հետևյալ հաշվողական ալգորիթմները՝ MUTATION TASTER, 33 PROVEAN-SIFT (http://provean.jcvi.org/index.php), POLYPHEN-2 (http:// /genetics.bwh.harvard.edu/pph-G2.VhvG) և Algord. gd_input.php): 1 և 2 դասակարգված տարբերակները համարվում էին վայրի տիպ:
Sanger-ի հաջորդականությունը հաստատեց յուրաքանչյուր պաթոգեն տարբերակի առկայությունը: Համառոտ, յուրաքանչյուր հայտնաբերված տարբերակի համար նախագծվել է մի զույգ հատուկ պրայմերներ՝ օգտագործելով BRCA1 և BRCA2 գեների հղման հաջորդականությունները (NG_005905.2, NM_007294.3 և NG_012772.3, համապատասխանաբար, համապատասխանաբար՝ PREF, NM5CR): Սանգերի հաջորդականությունը.
BRCA1/2 գենի համար բացասական թեստ ստացած հիվանդները թեստավորվել են մուլտիպլեքսային կապակցված զոնդերի ուժեղացման միջոցով (MLPA)՝ համաձայն արտադրողի ցուցումների՝ գնահատելու մեծ գենոմային վերադասավորումների (LGR) առկայությունը: ուժեղացման արտադրանքները, որոնք բաղկացած են PCR ամպլիկոնների եզակի հավաքածուից, այնուհետև վերլուծվել են մազանոթային էլեկտրոֆորեզի և Cofalyser.Net ծրագրաշարի միջոցով՝ համապատասխան խմբաքանակին հատուկ Cofalyser աղյուսակների հետ համատեղ (www.mrcholland.com):
Ընտրված կլինիկոպաթոլոգիական փոփոխականները (հյուսվածքաբանական աստիճանը և Ki-67% տարածման ինդեքսը) կապված են եղել BRCA1/2 PV-ի առկայության հետ, որը հաշվարկվել է Prism ծրագրաշարի միջոցով v. 8.4՝ օգտագործելով Fisher-ի ճշգրիտ թեստը՝ ենթադրելով, որ p-արժեքը <0.05 էական է:
2017 թվականի հունվարից մինչև 2021 թվականի մարտն ընկած ժամանակահատվածում 455 հիվանդ հետազոտվել է BRCA1/2 բակտերիալ մուտացիաների համար: Մուտացիաների թեստավորումն իրականացվել է Policlinico հիվանդանոցի փորձարարական ուռուցքաբանության և արյունաբանության կենտրոնում: Ըստ սիցիլիական ուղեցույցի (http://www.gurs.regione.Inditice.1 0 Gennaio 2020), Rodolico of Catania – San Marco», ընդհանուր առմամբ, 389 հիվանդ Կար կրծքագեղձի քաղցկեղ, 37 ձվարանների քաղցկեղ, 16 ենթաստամոքսային գեղձի քաղցկեղ, 8 շագանակագեղձի քաղցկեղ և 5 մելանոմա:Հիվանդների բաշխումն ըստ քաղցկեղի տեսակի և վերլուծության արդյունքների ներկայացված է Նկար 1-ում:
Նկար 1-ը ցույց է տալիս հոսքի աղյուսակը, որը ցույց է տալիս ուսումնասիրության ակնարկը: Կրծքագեղձի, մելանոմայի, ենթաստամոքսային գեղձի, շագանակագեղձի կամ ձվարանների ուռուցքներով հիվանդները փորձարկվել են BRCA1 և BRCA2 գեների մուտացիաների համար:
Հապավումներ՝ PVs, pathogenic variant;VUS, անորոշ նշանակության տարբերակ;WT, վայրի տիպի BRCA1/2 հաջորդականություն։
Մենք ընտրողաբար կենտրոնացրել ենք մեր ուսումնասիրությունները կրծքագեղձի քաղցկեղի խմբերի վրա: Հիվանդների միջին տարիքը 49 տարեկան էր (23-89 միջակայքը) և հիմնականում կանայք էին (n=376 կամ 97%):
Այս առարկաներից 64-ը (17%) ուներ BRCA1/2 մուտացիաներ և բոլորը իգական սեռի ներկայացուցիչներ էին: Երեսունհինգը (9%) ուներ PV, իսկ 29-ը (7.5%)՝ VUS: 35 պաթոգեն տարբերակներից տասնյոթը (48.6%) տեղի են ունեցել BRCA1-ում և 18-ը (51.4%) (51.4%) (51.4%) (51.4%) BRCA22-ում և 5.8%-ը (51.4%) BRCAUS1-ում և 5.8%-ը (51.4%): %) BRCA2-ում (Նկար 1 և 2): LGR-ը բացակայում էր MLPA վերլուծության մեջ:
Նկար 2. BRCA1 և BRCA2 մուտացիաների վերլուծություն կրծքագեղձի քաղցկեղով 389 հիվանդների մոտ: (A) Պաթոգեն տարբերակների (PV) (կարմիր), անորոշ նշանակության տարբերակների (VUS) (նարնջագույն) և WT (կապույտ) բաշխումը կրծքագեղձի քաղցկեղով 389 հիվանդների մոտ;(B) Կրծքագեղձի քաղցկեղով 389 հիվանդ Երեսունհինգ (9%) ունեցել են BRCA1/2 պաթոգեն տարբերակներ (PV): Նրանցից 17-ը (48.6%) եղել են BRCA1 PV կրիչներ (մուգ կարմիր), իսկ 18-ը (51.4%)՝ BRCA2 (բաց կարմիր);(C) 389 առարկաներից 29-ը (7,5%) կրում էին VUS, 5 (17,2%) BRCA1 գեներ (մուգ նարնջագույն) և 24 (82,8%) BRCA2 գեներ (բաց նարնջագույն):
Հապավումներ՝ PVs, pathogenic variant;VUS, անորոշ նշանակության տարբերակ;WT, վայրի տիպի BRCA1/2 հաջորդականություն։
Մենք հաջորդիվ ուսումնասիրեցինք BC մոլեկուլային ենթատիպերի տարածվածությունը BRCA1/2 PV-ով հիվանդների մոտ: Բաշխումը ներառում էր 2 (5.7%) լյումինալ A, 15 (42.9%) լյումինալ B, 3 (8.6%) լյումինալ B-HER2+, 2 (5.7%) HER2+, 13 (NBC2.9.5%) դրական հիվանդներ (37.1%): ուներ լյումինալ B BC, 2-ը (11.8%) ուներ HER2+ հիվանդություն, և 10 (58.8%) ուներ TNBC: Ուռուցքներն առանց BRCA1 մուտացիաների եղել են կամ լյումինալ A կամ լյումինալ B-HER2+ (Նկար 3): BRCA2-դրական ենթախմբում 10 (55.6%) լյումինալ (55.6%) (55.6%) (55.6%) լյումինալ B-HER2,3-H% ուռուցքներ էին 3: 16.7%) TNBC և 2 (11.1%) լյումինալ A (Նկար 3): Այս խմբում HER2+ ուռուցքներ չեն եղել: Այսպիսով, BRCA1 մուտացիաները տարածված են TNBC հիվանդների մոտ, մինչդեռ BRCA2 փոփոխությունները գերակշռում են լույսի B անհատների մոտ:
Նկար 3 Կրծքագեղձի քաղցկեղի ենթատեսակների տարածվածությունը BRCA1-ում և BRCA2-ում պաթոգեն տարբերակներով հիվանդների մոտ: Հիստոգրամաները, որոնք ցույց են տալիս BRCA1- (մուգ կարմիր) և BRCA2- (բաց կարմիր) PV-ների բաշխվածությունը կրծքագեղձի քաղցկեղով հիվանդների մոլեկուլային ենթատիպերի միջև: Յուրաքանչյուր տուփում ներկայացված թվերը ներկայացնում են BRCAV քաղցկեղով հիվանդների տոկոսը և յուրաքանչյուր BRCAV ենթատիպով հիվանդների տոկոսը:
Հապավումներ՝ PVs, pathogenic variant;HER2+, մարդու էպիդերմիսի աճի գործոնի ընկալիչ 2 դրական;TNBC, եռակի բացասական կրծքագեղձի քաղցկեղ։
Այնուհետև մենք գնահատեցինք BRCA1 և BRCA2 PV-ների տեսակը և գեների տեղայնացումը: BRCA1 PV-ում մենք նկատեցինք 7 մեկ նուկլեոտիդային տարբերակ (SNVs), 6 ջնջում, 3 կրկնօրինակում և 1 տեղադրում: Միայն մեկ մուտացիա (c.5522delG) ներկայացնում է ամենահաճախ հանդիպող հայտնաբերված PV5 սուբյեկտը: 039delCTAAT: Այս փոփոխությունը ներառում է հինգ նուկլեոտիդների (CTAAT) ջնջում BRCA1 էկզոն 15-ում, ինչը հանգեցրել է ամինաթթվի լեյցինի փոխարինմանը թիրոզինով 1679 կոդոնում, և կանխատեսված այլընտրանքային կանգառ կոդոնով թարգմանության շրջանակի փոփոխության պատճառով չի հաղորդվել, որ միայն մեկ այլ դեպք չի հայտնաբերվել սպիտակուցի վաղաժամ կրճատման մեջ: splice site consensus region (c.4357+1G>T) (Աղյուսակ 1):
Ինչ վերաբերում է BRCA2 PV-ին, մենք նկատեցինք 6 ջնջում, 6 SNV և 2 կրկնօրինակում: Հայտնաբերված փոփոխություններից և ոչ մեկը նոր չէ: Մեր պոպուլյացիայի մեջ կրկնվել են երեք մուտացիաներ, c.428dup և c.8487+1G>A դիտվել են 3 սուբյեկտների մոտ, որին հաջորդել են c.5851_22 կրկնվող դեպքերը: C-ը BRCA2-ի 5-ում էկզոնում, որը կանխատեսվում է, որ կոդավորում է կտրված, ոչ ֆունկցիոնալ սպիտակուցը: c.8487+1G>A մուտացիան տեղի է ունենում BRCA2 ինտրոն 19-ի ինտրոնիկ շրջանում (± 1,2) և ազդում է միացման կոնսենսուսի հաջորդականության վրա, որի արդյունքում փոխվում է c. TT-ի պաթոգեն տարբերակը պայմանավորված է BRCA2 գենի կոդավորող էկզոն 10-ում 5851-ից 5854 նուկլեոտիդային դիրքերից 4-նուկլեոտիդային ջնջմամբ և հանգեցնում է կանխատեսված այլընտրանքային կանգառի կոդոնով թարգմանական շրջանակի փոփոխության (p.S1951WfsTer): նույն հիվանդի մոտ:34 Առաջին մուտացիան ներառում է ադենոզինի (A) փոխարինումը BRCA2 էկզոն 7-ում գուանին (G) պարունակող նուկլեոտիդով, ինչը հանգեցնում է վալինի փոփոխության իզոլեյցինի կոդոն 211-ում, isoleucine Ամինաթթուն ամինաթթու է խիստ նման հատկություններով: BRCA2 կոդավորող գենի էկզոն 13-ից առաջ փոխարինումը: c.7008-2A>T փոփոխությունը կարող է առաջացնել տարբեր երկարության բազմաթիվ տառադարձումներ: Ավելին, BRCA2 PV-ների խմբում 18 փոփոխություններից 4-ը (22,2%) եղել են ինտրոնիկ:
Այնուհետև մենք քարտեզագրեցինք BRCA1/2 վնասակար մուտացիաները ֆունկցիոնալ տիրույթներում և սպիտակուցին կապող շրջաններում (նկ. 4): BRCA1 գենում PV-ների 50%-ը գտնվում էր կրծքագեղձի քաղցկեղի կլաստերային շրջանում (BCCR), մինչդեռ մուտացիաների 22%-ը գտնվում էր ձվարանների քաղցկեղի կլաստերային շրջանում (OCCR), BRCA1% : BCCR շրջանը և մուտացիաների 42,8%-ը գտնվում էին OCCR-ում (նկ. 4B): Այնուհետև մենք գնահատեցինք PV-ի գտնվելու վայրը BRCA1 և BRCA2 սպիտակուցային տիրույթներում: BRCA1 սպիտակուցի համար մենք գտանք երեք PV՝ օղակաձև և ոլորված կծիկի տիրույթներում, և երկու մուտացիաներ՝ BRCA4 տիրույթում, իսկ BRCA2 տիրույթում կրկնում ենք երկու մուտացիա, իսկ BRCA2 տիրույթում կրկնում ենք PV տիրույթում (նկ. 3 ինտրոնիկ և 3 էկզոնիկ փոփոխություններ են հայտնաբերվել օլիգո/օլիգոսաքարիդ կապող (OB) և աշտարակի (T) տիրույթներում (Նկար 4B):
Նկար 4 BRCA1 և BRCA2 սպիտակուցների սխեմատիկ ներկայացում և պաթոգեն տարբերակների տեղայնացում: Այս նկարը ցույց է տալիս BRCA1 (A) և BRCA2 (B) պաթոգեն տարբերակների բաշխվածությունը կրծքագեղձի քաղցկեղով հիվանդների մոտ: Էկզոնիկ մուտացիաները ցուցադրված են կապույտով, մինչդեռ ինտրոնիկ տարբերակները ցուցադրված են նարնջագույնով: Գծի բարձրությունը ներկայացնում է նրանց BRCA տիրույթների և BRCA տիրույթների թիվը: BRCA1 սպիտակուցը պարունակում է օղակաձև տիրույթ (RING) և միջուկային տեղայնացման հաջորդականություն (NLS), կծիկով տիրույթ, SQ/TQ կլաստերային տիրույթ (SCD) և BRCA1 C-տերմինալ տիրույթ (BRCT)։ աշտարակի տիրույթը (T) և NLS-ը C կողմում: Ներքևում ցուցադրված են կրծքագեղձի քաղցկեղի կլաստերային շրջան (BCCR) և ձվարանների քաղցկեղի կլաստերային շրջան (OCCR):*Ներկայացնում է մուտացիաները, որոնք որոշում են կանգառի կոդոնները:
Այնուհետև մենք ուսումնասիրեցինք BC կլինիկոպաթոլոգիական առանձնահատկությունները, որոնք կարող էին փոխկապակցված լինել BRCA1/2 PV-ի առկայության հետ: Ամբողջ կլինիկական գրառումները հասանելի էին 181 BRCA1/2-բացասական հիվանդների (չկրողներ) և բոլոր կրողների համար (n = 35): Կար հարաբերակցություն ուռուցքի տարածման արագության և աստիճանի միջև:
Մենք հաշվարկել ենք Ki-67-ի բաշխվածությունը՝ հիմնվելով մեր խմբի մեդիանայի վրա (25%, միջակայք <10-90%): Ki-67 < 25% ունեցող առարկաները սահմանվել են որպես «ցածր Ki-67», մինչդեռ ≥ 25% արժեք ունեցող անհատները համարվում են «բարձր Ki-67″: Նշանակալից են Ki-67-ի և 1 ավտոմեքենաների միջև հայտնաբերված զգալի տարբերություններ (p<V0.CA-ի միջև): riers (նկ. 5A):
Նկար 5 Ki-67-ի հարաբերակցությունը աստիճանի բաշխման հետ կրծքագեղձի քաղցկեղով կանանց մոտ և առանց BRCA1 և BRCA2 PV-ների: (A) Boxplot-ը ցույց է տալիս միջին Ki-67 արժեքները 181 ոչ կրող BC հիվանդների մոտ BRCA1 (18) կամ BRCA2 (17) PV հիվանդների նկատմամբ: BC քաղցկեղով հիվանդները բաժանվում են հյուսվածքաբանական աստիճանի խմբերի (G2 և G3)՝ ըստ BRCA1 և BRCA2 մուտացիոն կարգավիճակի (WT առարկաներ, BRCA1 և BRCA2 PVs կրիչներ):
Նմանապես, մենք ուսումնասիրեցինք, թե արդյոք ուռուցքի աստիճանը փոխկապակցված է BRCA1/2 PV-ի առկայության հետ: Քանի որ G1 BC-ն բացակայում էր մեր պոպուլյացիայի մեջ, մենք հիվանդներին բաժանեցինք երկու խմբի (G2 կամ G3): Համապատասխան Ki-67 արդյունքների, վերլուծությունը ցույց տվեց վիճակագրորեն նշանակալի հարաբերակցություն ուռուցքի աստիճանի և BRCA1 մուտացիայի միջև, համեմատած BRCA1-ի ոչ ավելի բարձր համամասնությամբ, BRCA-carri մուտացիաների հետ՝ համեմատած 30 carri ավելի բարձր համամասնությամբ: 005) (Նկար 5B):
ԴՆԹ-ի հաջորդականության տեխնոլոգիայի առաջընթացը թույլ է տվել աննախադեպ առաջընթաց BRCA1/2 գենետիկական թեստում, ինչը կարևոր հետևանքներ ունի քաղցկեղի ընտանեկան պատմություն ունեցող հիվանդների համար: Մինչ օրս մոտ 20,000 BRCA1/2 տարբերակներ են հայտնաբերվել և դասակարգվել՝ համաձայն բժշկական գենետիկայի ամերիկյան ընկերության: ռոմը լայնորեն տարբերվում է աշխարհագրական տարածաշրջաններում:37 Իտալիայում BRCA1/2 PV-ների մակարդակը տատանվել է 8%-ից մինչև 37%, ինչը ցույց է տալիս երկրի ներսում լայն փոփոխականություն: կղզու արևային մասը։
Մեր ուսումնասիրությունը արևելյան Սիցիլիայում BC հիվանդների մոտ BRCA1/2 PV-ի հաճախականության մասին առաջին զեկույցներից մեկն է:28 Մենք կենտրոնացրել ենք մեր վերլուծությունը մ.թ.ա.
Մ.թ.ա. 389 հիվանդների թեստավորման ժամանակ 9%-ը կրում էր BRCA1/2 PV-ներ՝ հավասարաչափ բաշխված BRCA1-ի և BRCA2-ի միջև: Այս արդյունքները համընկնում են Իտալիայի բնակչության նախկինում հաղորդվածների հետ:28 Հետաքրքիր է, որ մեր խմբի 3%-ը (13/389) արական սեռի էր: Մուտացիայի վտանգ: Այնուամենայնիվ, այս տղամարդկանցից և ոչ մեկը չի զարգացրել BRCA1/2 PV, ուստի նրանք թեկնածուներ էին հետագա մոլեկուլային վերլուծության համար՝ բացառելու ավելի քիչ տարածված մուտացիաների առկայությունը, ինչպիսիք են PALB2, RAD51C և D, ի թիվս այլոց: Անորոշ նշանակության տարբերակները վերցվել են հետազոտվողների 7%-ի մոտ, որոնցում BRCA2 VUS-ը համապատասխանում է 4 արդյունքին:
Երբ մենք վերլուծեցինք BC մոլեկուլային ենթատիպերի բաշխվածությունը BRCA1/2 մուտանտ կանանց մոտ, մենք հաստատեցինք TNBC-ի և BRCA1 PV-ի (58.8%) և լյումինալ B BC-ի և BRCA2 PV-ի (55.6%) միջև հայտնի կապերը:
Այնուհետև մենք կենտրոնանում ենք BRCA1/2 PV-ի տեսակի և տեղակայման վրա: Մեր խմբի մեջ ամենատարածված BRCA1 PV-ն c.5035_5039delCTAAT էր: Չնայած Incorvaia et al.չեն նկարագրել այս տարբերակն իրենց սիցիլիական կոհորտում, այլ հեղինակներ այն հայտնել են որպես BRCA1 PV բողբոջային գիծ:34 Մեր կոհորտում հայտնաբերվել են մի քանի BRCA1 PV-ներ, օրինակ՝ c.181T>G, c.514del, c.3253dupA և c.5266dupC. G և c.5266dupC) սովորաբար հանդիպում են Արևելյան և Կենտրոնական Եվրոպայի (Լեհաստան, Չեխիա), հյուսիսային, ավստրիացի, հունգարացի, բելառուսական և գերմանական աշքենազ հրեաների մոտ, 44,45 և Միացյալ Նահանգներում և Արգենտինայում վերջերս սահմանվել է որպես «կրկնվող բակտերիալ տարբերակ» իտալացի հիվանդների մոտ՝ BC և OC: Պալերմոյում և Մեսինայում: Հետաքրքիր է, որ նույնիսկ Incorvaia et al.գտել է c.3253dupA տարբերակը Կատանիայի որոշ ընտանիքներում:28 Ամենաներկայացուցիչ BRCA2 PV-ներն են՝ c.428dup, c.5851_5854delAGTT և ինտրոնիկ տարբերակը c.8487+1G>A, որոնք ավելի մանրամասն 28 դիտարկվել են Պալերմոյում հիվանդի մոտ c.TTV58up c. տնային տնտեսություններ հյուսիս-արևմտյան Սիցիլիայում, հիմնականում Տրապանիի և Պալերմոյի շրջաններում, մինչդեռ c.5851_5854delAGTT PV-ն դիտվել է հյուսիս-արևմտյան Սիցիլիայի տնային տնտեսություններում: 8487+1G>A տարբերակն ավելի տարածված էր Մեսինայից, Պալերմոյից և Կալտանիսետից ժամանած մարդկանց մոտ:28 Rebbe.նախկինում նկարագրված է c.5851_5854delAGTT փոփոխությունը Կոլումբիայում:37 Մեկ այլ BRCA2 PV՝ c.631+1G>A, հայտնաբերվել է BC և OC հիվանդների մոտ Սիցիլիայից (Agrigento, Siracusa և Ragusa):28 Հատկանշական է, որ մենք դիտարկել ենք երկու BRCA2. ) միևնույն հիվանդի մոտ, որը մենք ենթադրում էինք, որ տարանջատված է cis ռեժիմով, ինչպես նախկինում հաղորդվել էր, որ այդպես էր:34,46 Այս BRCA2 uble մուտացիաները իսկապես հաճախ են նկատվում Իտալիայի տարածաշրջանում և պարզվել է, որ ներմուծում են վաղաժամ կանգառ կոդոններ, որոնք ազդում են հաղորդիչ ՌՆԹ-ի միացման վրա և առաջացնելով BRCA2 սպիտակուցի 48 ձախողում:
Մենք նաև քարտեզագրեցինք BRCA1 և BRCA2 PV-ները սպիտակուցային տիրույթների և գեների ենթադրյալ OCCR և BCCR շրջաններում: Այս շրջանները նկարագրվել են Rebbeck et al-ի կողմից:որպես համապատասխանաբար ձվարանների և կրծքագեղձի քաղցկեղի զարգացման ռիսկային տարածքներ:49 Այնուամենայնիվ, վիճահարույց են մնում բողբոջային տարբերակների տեղակայման և կրծքագեղձի կամ ձվարանների քաղցկեղի ռիսկի միջև կապի վերաբերյալ ապացույցները: OCCR և BCCR շրջանները և BC առանձնահատկությունները: Դա կարող է պայմանավորված լինել BRCA1/2 մուտացիաներով հիվանդների սահմանափակ թվով: Սպիտակուցի տիրույթի տեսանկյունից BRCA1 PV-ները բաշխված են ամբողջ սպիտակուցի երկայնքով, իսկ BRCA2 փոփոխությունները նախընտրելիորեն հայտնաբերվում են BRC կրկնվող տիրույթում:
Վերջապես, մենք փոխկապակցեցինք BC կլինիկոպաթոլոգիական առանձնահատկությունները BRCA1/2 PV-ի հետ: Ներառված հիվանդների սահմանափակ քանակի պատճառով մենք միայն զգալի հարաբերակցություն գտանք Ki-67-ի և ուռուցքի աստիճանի միջև: Թեև Ki-67-ի գնահատումն ու մեկնաբանությունը մնում է որոշակի հակասական, վստահ է, որ տարածման բարձր տեմպերը կապված են «հիվանդության կրկնվող ամսաթվի նվազման ռիսկի հետ»: Ki-67-ը 20% է։ Այնուամենայնիվ, այս շեմը չի տարածվում մեր BRCA1/2 մուտացիայով հիվանդների պոպուլյացիայի վրա, որն ունի Ki-67 միջին արժեքը՝ 25%։ Այս միտումը բարձր Ki-67 մակարդակներում կարելի է բացատրել մեր լյումինալ B և TNBC խմբերում տարածվածությամբ, որոնցից մի քանի լյումինալ A ուռուցքներ կարող են ենթադրել, որ ավելի լավ է եղել 23-6%։ շերտավորել հիվանդներին՝ ըստ նրանց կանխատեսման:53,54 Մեր վերլուծության արդյունքներից զգալի հարաբերակցությունը զարմանալի չէ: Տեղի է ունենում բարձր Ki-67-ի և աստիճանների և BRCA1 PV-ի առկայության միջև: Փաստորեն, BRCA1-ի հետ կապված ուռուցքները բնորոշ են TNBC-ին և ավելի ագրեսիվ հատկանիշներ են դրսևորում:16,17
Եզրափակելով՝ այս հետազոտությունը ներկայացնում է BRCA1/2-ի մուտացիոն կարգավիճակի մասին զեկույց արևելյան Սիցիլիայից BC կոհորտում: Ընդհանուր առմամբ, մեր բացահայտումները համահունչ են նախկինում առկա ապացույցներին, ինչպես մուտացիայի տարածվածության, այնպես էլ կլինիկոպաթոլոգիական առանձնահատկությունների առումով BC-ում: BRCA1/2-մուտանտների ավելի մեծ պոպուլյացիաներում ավելի շատ հետազոտություններ ընդլայնվում են, քանի որ BCV-ի բազմաբնույթ մուտանտի վերլուծությունը գնահատվում է մինչև BCV հիվանդների, որոնք տարբեր են և ավելի քիչ հաճախակի, քան BRCA1/2-ը: Սա թույլ կտա նույնականացնել և ճիշտ կառավարել գենետիկ մուտացիաների պատճառով քաղցկեղով հիվանդանալու ռիսկի աճող թվով առարկաների:
Մենք հաստատեցինք, որ հիվանդները ստորագրել են իրենց ուռուցքային նմուշները անանուն թողարկելու տեղեկացված համաձայնությունը հետազոտական ​​նպատակներով: Բոլոր հիվանդները ստորագրել են գրավոր տեղեկացված համաձայնություն՝ համաձայն Հելսինկիի հռչակագրի: AOU Policlinico «G.Rodolico – S.Marco»-ի քաղաքականության համաձայն՝ այս հետազոտությունը ազատվել է էթիկական վերանայումից, քանի որ BRCA1/2-ի բոլոր կլինիկական վերլուծությունները կատարվել են նաև գրավոր համաձայնությամբ: իրենց տվյալները հետազոտական ​​նպատակներով:
Մենք շնորհակալություն ենք հայտնում պրոֆեսոր Պաոլո Վիգներիին կրծքագեղձի քաղցկեղով հիվանդների խնամքի հարցում նրա աջակցության համար, ինչպես պահանջել է Էթիկայի հանձնաժողովը:
Ֆեդերիկա Մարտորանան հայտնում է Istituto Gentili-ի, Eli Lilly-ի, Novartis-ի, Pfizer-ի հոնորարները: Մյուս հեղինակները չեն հայտարարում այս աշխատության մեջ շահերի բախման մասին:
1. Sung H, Ferlay J, Siegel RL, et al.Global Cancer Statistics 2020. GLOBOCAN-ը գնահատում է 36 քաղցկեղի դեպքերը և մահացությունը աշխարհի 185 երկրներում:CA Cancer J Clin.2021;71(3):209-249.doi:209-249.332210