Շնորհակալություն Nature.com այցելելու համար:Ձեր օգտագործած բրաուզերի տարբերակը ունի սահմանափակ CSS աջակցություն:Լավագույն փորձի համար խորհուրդ ենք տալիս օգտագործել թարմացված դիտարկիչ (կամ անջատել Համատեղելիության ռեժիմը Internet Explorer-ում):Միևնույն ժամանակ, շարունակական աջակցությունն ապահովելու համար մենք կայքը կներկայացնենք առանց ոճերի և JavaScript-ի:
Անվերահսկելի արյունահոսությունը մահվան հիմնական պատճառներից մեկն է:Արագ հեմոստազի հասնելը ապահովում է սուբյեկտի գոյատևումը որպես առաջին օգնություն մարտական ​​գործողությունների, ճանապարհատրանսպորտային պատահարների և մահացության նվազեցման գործողությունների ժամանակ:Նանոծակոտկեն մանրաթելով ամրացված կոմպոզիտային փայտամած (NFRCS) ստացված պարզ հեմոստատիկ թաղանթ ձևավորող կոմպոզիցիայից (HFFC), որպես շարունակական փուլ, կարող է հրահրել և ուժեղացնել հեմոստազը:NFRCS-ի մշակումը հիմնված է ճպուռի թևի նախագծման վրա։Ճպուռի թևի կառուցվածքը բաղկացած է լայնակի և երկայնական թեւերից, իսկ թևերի թաղանթները միացված են միմյանց՝ միկրոկառուցվածքի ամբողջականությունը պահպանելու համար։HFFC-ը միատեսակ ծածկում է մանրաթելի մակերեսը նանոմետր հաստությամբ թաղանթով և միացնում է պատահականորեն բաշխված բամբակի հաստությունը (Ct) (ցրված փուլ)՝ ձևավորելով նանոծակոտկեն կառուցվածք:Շարունակական և ցրված փուլերի համադրությունը տասը անգամ նվազեցնում է արտադրանքի արժեքը՝ համեմատած առևտրային հասանելի ապրանքների հետ:Փոփոխված NFRCS-ը (տամպոններ կամ ձեռքի ժապավեններ) կարող են օգտագործվել կենսաբժշկական տարբեր կիրառություններում:In vivo ուսումնասիրությունները եկել են այն եզրակացության, որ մշակված Cp NFRCS-ը խթանում և ուժեղացնում է կոագուլյացիայի գործընթացը կիրառման վայրում:NFRCS-ը կարող է մոդուլավորել միկրոմիջավայրը և գործել բջջային մակարդակում՝ շնորհիվ իր նանոծակոտկեն կառուցվածքի, ինչը հանգեցնում է վերքերի ավելի լավ բուժմանը հեռացման վերքի մոդելում:
Մարտական, ներվիրահատական ​​և արտակարգ իրավիճակների ժամանակ չվերահսկվող արյունահոսությունը կարող է լուրջ վտանգ ներկայացնել վիրավորների կյանքին1:Այս պայմանները հետագայում հանգեցնում են ծայրամասային անոթային դիմադրության ընդհանուր աճի, ինչը հանգեցնում է հեմոռագիկ շոկի:Վիրահատության ընթացքում և դրանից հետո արյունահոսությունը վերահսկելու համապատասխան միջոցները համարվում են պոտենցիալ կյանքին սպառնացող2,3:Խոշոր անոթների վնասումը հանգեցնում է զանգվածային արյան կորստի, որի արդյունքում մահացությունը կազմում է ≤ 50% մարտերում և 31% վիրահատության ժամանակ1:Արյան զանգվածային կորուստը հանգեցնում է մարմնի ծավալի նվազմանը, ինչը նվազեցնում է սրտի արտադրությունը:Ծայրամասային անոթային ընդհանուր դիմադրության աճը և միկրոշրջանառության աստիճանական խանգարումը հանգեցնում են կենսագործունեության օրգանների հիպոքսիայի:Հեմոռագիկ շոկ կարող է առաջանալ, եթե վիճակը շարունակվի առանց արդյունավետ միջամտության1,4,5:Այլ բարդությունները ներառում են հիպոթերմային և մետաբոլիկ acidosis-ի առաջընթացը, ինչպես նաև կոագուլյացիայի խանգարումը, որը խանգարում է մակարդման գործընթացին:Դաժան հեմոռագիկ շոկը կապված է մահվան ավելի բարձր ռիսկի հետ6,7,8:III աստիճանի (պրոգրեսիվ) շոկի դեպքում արյան փոխներարկումն էական նշանակություն ունի ներվիրահատական ​​և հետվիրահատական ​​հիվանդացության և մահացության ընթացքում հիվանդի գոյատևման համար:Կյանքին սպառնացող վերը նշված բոլոր իրավիճակները հաղթահարելու համար մենք մշակել ենք նանոծակոտկեն մանրաթելերով ամրացված կոմպոզիտային փայտամած (NFRCS), որն օգտագործում է պոլիմերների նվազագույն կոնցենտրացիան (0.5%)՝ օգտագործելով ջրում լուծվող հեմոստատիկ պոլիմերների համակցությունը:
Օպտիկամանրաթելային ամրացման միջոցով կարելի է մշակել ծախսարդյունավետ արտադրանք:Պատահականորեն դասավորված մանրաթելերը հիշեցնում են ճպուռի թևի կառուցվածքը, որը հավասարակշռված է թեւերի հորիզոնական և ուղղահայաց շերտերով:Թեւի լայնակի եւ երկայնական երակները շփվում են թեւի թաղանթի հետ (նկ. 1):NFRCS-ը բաղկացած է ուժեղացված Ct-ից՝ որպես ավելի լավ ֆիզիկական և մեխանիկական ուժ ունեցող փայտամած համակարգ (Նկար 1):Մատչելիության և վարպետության շնորհիվ վիրաբույժները վիրահատությունների և վիրակապման ժամանակ նախընտրում են օգտագործել բամբակյա թելաչափեր (Ct): Հետևաբար, հաշվի առնելով դրա բազմաթիվ առավելությունները, ներառյալ > 90% բյուրեղային ցելյուլոզը (նպաստում է հեմոստատիկ ակտիվության բարձրացմանը), Ct-ն օգտագործվել է որպես NFRCS9,10 կմախքային համակարգ: Հետևաբար, հաշվի առնելով դրա բազմաթիվ առավելությունները, ներառյալ > 90% բյուրեղային ցելյուլոզը (նպաստում է հեմոստատիկ ակտիվության բարձրացմանը), Ct-ն օգտագործվել է որպես NFRCS9,10 կմախքային համակարգ: Следовательно, учитывая его многочисленные преимущества, во том числе > 90% Հետևաբար, հաշվի առնելով դրա բազմաթիվ առավելությունները, ներառյալ >90% բյուրեղային ցելյուլոզը (ներառված է հեմոստատիկ ակտիվության բարձրացման մեջ), Ct-ն օգտագործվել է որպես NFRCS կմախքային համակարգ9,10:因此，考虑到它的多重益处，包括> 90% 的结晶纤维素（有助于增强止觼S的结晶纤维素（有助于增强止觼S 9,10 րոպե:因此，考虑到它的多重益处，包括> 90%Հետևաբար, հաշվի առնելով դրա բազմաթիվ առավելությունները, ներառյալ ավելի քան 90% բյուրեղային ցելյուլոզը (օգնում է ուժեղացնել հեմոստատիկ ակտիվությունը), Ct-ն օգտագործվել է որպես NFRCS9,10 փայտամած:Ct-ը մակերեսորեն պատված էր (նկատվել է նանո-հաստ թաղանթի ձևավորում) և փոխկապակցված հեմոստատիկ թաղանթ ձևավորող կոմպոզիցիայի հետ (HFFC):HFFC-ն գործում է մատրիգելի պես՝ պատահականորեն տեղադրված Ct-ը միասին պահելով:Մշակված դիզայնը փոխանցում է սթրեսը ցրված փուլում (ամրապնդող մանրաթելեր):Դժվար է ստանալ լավ մեխանիկական ուժով նանոծակոտկեն կառուցվածքներ՝ օգտագործելով նվազագույն պոլիմերային կոնցենտրացիաները:Բացի այդ, հեշտ չէ տարբեր կաղապարներ հարմարեցնել տարբեր կենսաբժշկական կիրառությունների համար:
Նկարը ցույց է տալիս NFRCS-ի նախագծման դիագրամը՝ հիմնված ճպուռի թևի կառուցվածքի վրա (A):Այս պատկերը ցույց է տալիս ճպուռի թևերի կառուցվածքի համեմատական ​​անալոգիան (թևի հատվող և երկայնական երակները փոխկապակցված են) և Cp NFRCS-ի խաչմերուկային լուսանկարը (B):NFRCS-ի սխեմատիկ ներկայացում:
NFRC-ները մշակվել են՝ օգտագործելով HFFC որպես շարունակական փուլ՝ վերը նշված սահմանափակումները լուծելու համար:HFFC-ն կազմված է տարբեր թաղանթ ձևավորող հեմոստատիկ պոլիմերներից, ներառյալ խիտոզանը (որպես հիմնական հեմոստատիկ պոլիմեր) մեթիլցելյուլոզայով (MC), հիդրօքսիպրոպիլ մեթիլցելյուլոզա (HPMC 50 cp) և պոլիվինիլ սպիրտ (PVA)) (125 կԴա)՝ որպես օժանդակ պոլիմեր, որը նպաստում է թրոմբի ձևավորմանը:կազմում.Պոլիվինիլպիրոլիդին K30 (PVP K30) ավելացումը բարելավեց NFRCS-ի խոնավության կլանման կարողությունը:Պոլիէթիլեն գլիկոլ 400 (PEG 400) ավելացվել է պոլիմերային խաչաձև կապը բարելավելու համար կապված պոլիմերային խառնուրդներում:Երեք տարբեր HFFC հեմոստատիկ կոմպոզիցիաներ (Cm HFFC, Ch HFFC և Cp HFFC), մասնավորապես խիտոզանը MC-ով (Cm), խիտոզանը HPMC-ով (Ch) և խիտոզանը PVA-ով (Cp) կիրառվել են Ct-ի վրա:Տարբեր in vitro և in vivo բնութագրման ուսումնասիրությունները հաստատել են NFRCS-ի հեմոստատիկ և վերքերի բուժման ակտիվությունը:NFRCS-ի կողմից առաջարկվող կոմպոզիտային նյութերը կարող են օգտագործվել փայտամածների տարբեր ձևեր հարմարեցնելու համար՝ հատուկ կարիքները բավարարելու համար:
Բացի այդ, NFRCS-ը կարող է փոփոխվել որպես վիրակապ կամ գլանափաթեթ՝ ծածկելու ստորին վերջույթների և մարմնի այլ մասերի վնասվածքի ամբողջ տարածքը:Հատկապես մարտական ​​վերջույթների վնասվածքների դեպքում, նախագծված NFRCS դիզայնը կարող է փոխվել կիսաթևի կամ ամբողջական ոտքի (Լրացուցիչ նկար S11):NFRCS-ը կարող է վերածվել ձեռնաշղթայի՝ հյուսվածքային սոսինձով, որը կարող է օգտագործվել՝ դադարեցնելու արյունահոսությունը ծանր ինքնասպանության հետևանքով դաստակի վնասվածքներից:Մեր հիմնական նպատակը հնարավորինս քիչ պոլիմերով NFRCS-ի մշակումն է, որը կարող է առաքվել մեծ բնակչության (աղքատության գծից ցածր) և որը կարող է տեղադրվել առաջին օգնության հավաքածուի մեջ:Պարզ, արդյունավետ և տնտեսական ձևավորման մեջ NFRCS-ն օգուտ է բերում տեղական համայնքներին և կարող է գլոբալ ազդեցություն ունենալ:
Chitosan (մոլեկուլային քաշը 80 kDa) և amaranth-ը ձեռք են բերվել Հնդկաստանի Merck-ից:Հիդրօքսիպրոպիլ մեթիլցելյուլոզա 50 Cp, պոլիէթիլեն գլիկոլ 400 և մեթիլցելյուլոզա գնվել են Loba Chemie Pvt-ից:ՍՊԸ, Մումբայ.Պոլիվինիլային սպիրտ (մոլեկուլային քաշը 125 կԴա) (87-90% հիդրոլիզացված) գնվել է National Chemicals-ից, Գուջարաթ:Պոլիվինիլպիրոլիդին K30-ը ձեռք է բերվել Մումբայ նահանգի Մոլիքեմից, ստերիլ շվաբրերը ձեռք են բերվել Ramaraju Surgery Cotton Mills Ltd.-ից, Թամիլ Նադու, որպես կրող Milli Q ջուր (Direct-Q3 ջրի մաքրման համակարգ, Merck, Հնդկաստան):
NFRCS-ը մշակվել է լիոֆիլացման մեթոդի կիրառմամբ11,12:Բոլոր HFFC կոմպոզիցիաները (Աղյուսակ 1) պատրաստվել են մեխանիկական հարիչի միջոցով:Պատրաստում են խիտոզանի 0,5% լուծույթ՝ օգտագործելով 1% քացախաթթու ջրի մեջ՝ մեխանիկական հարիչի վրա 800 պտտ/րոպե անընդհատ խառնելով:Աղյուսակ 1-ում նշված բեռնված պոլիմերի ճշգրիտ քաշը ավելացվել է խիտոզանի լուծույթին և խառնվել մինչև ստացվել է թափանցիկ պոլիմերային լուծույթ:PVP K30 և PEG 400 ստացված խառնուրդին ավելացվել են Աղյուսակ 1-ում նշված քանակներով, և խառնելը շարունակվել է մինչև ստացվի թափանցիկ մածուցիկ պոլիմերային լուծույթ:Պոլիմերային լուծույթի արդյունքում ստացված բաղնիքը 60 րոպե հնչեցվել է պոլիմերային խառնուրդից թակարդված օդային փուչիկները հեռացնելու համար:Ինչպես ցույց է տրված Լրացուցիչ Նկար S1(b)-ում, Ct-ը հավասարաչափ բաշխվել է 6 հորանի ափսեի (կաղապարի) յուրաքանչյուր հորում, որը լրացվել է 5 մլ HFFC-ով:
Վեց ջրհորի թիթեղը 60 րոպեի ընթացքում հնչյունավորվել է՝ հասնելու համար HFFC-ի միասնական թրջման և բաշխման Ct ցանցում:Այնուհետև վեց հորանի ափսեը սառեցրեք -20°C ջերմաստիճանում 8-12 ժամ:Սառեցման թիթեղները լիոֆիլացվել են 48 ժամով՝ NFRCS-ի տարբեր ձևակերպումներ ստանալու համար:Նույն պրոցեդուրան օգտագործվում է տարբեր ձևեր և կառուցվածքներ արտադրելու համար, ինչպիսիք են տամպոնները կամ գլանաձև թամպոնները կամ ցանկացած այլ ձև տարբեր կիրառությունների համար:
Ճշգրիտ կշռված խիտոզանը (80 կԴա) (3%) լուծվում է 1% քացախաթթվի մեջ՝ օգտագործելով մագնիսական խառնիչ:Ստացված խիտոզանի լուծույթին ավելացրել են 1% PEG 400 և խառնել 30 րոպե:Ստացված լուծույթը լցնել քառակուսի կամ ուղղանկյուն տարայի մեջ և սառեցնել -80°C ջերմաստիճանում 12 ժամ։Սառեցված նմուշները լիոֆիլացվել են 48 ժամով՝ ծակոտկեն Cs13 ստանալու համար:
Մշակված NFRCS-ը ենթարկվել է փորձերի՝ օգտագործելով Ֆուրիեի փոխակերպման ինֆրակարմիր սպեկտրոսկոպիան (FTIR) (Shimadzu 8400 s FTIR, Տոկիո, Ճապոնիա)՝ հաստատելու խիտոզանի քիմիական համատեղելիությունը այլ պոլիմերների հետ14,15:Բոլոր փորձարկված նմուշների FTIR սպեկտրները (սպեկտրային միջակայքի լայնությունը 400-ից 4000 սմ-1) ստացվել են 32 սկանավորման միջոցով:
Արյան կլանման արագությունը (BAR) բոլոր ձևակերպումների համար գնահատվել է Չեն և ուրիշների կողմից նկարագրված մեթոդով:16 չնչին փոփոխություններով։Բոլոր կոմպոզիցիաների մշակված NFRK-ները չորացել են վակուումային ջեռոցում 105°C ջերմաստիճանում մեկ գիշերվա ընթացքում՝ մնացորդային լուծիչը հեռացնելու համար:30 մգ NFRCS (նմուշի սկզբնական քաշը – W0) և 30 մգ Ct (դրական հսկողություն) տեղադրվել են առանձին ամանների մեջ, որոնք պարունակում են 3,8% նատրիումի ցիտրատ պրեմիքս:Նախապես որոշված ​​ժամանակային ընդմիջումներով, այսինքն՝ 5, 10, 20, 30, 40 և 60 վայրկյան, NFRCS-ները հեռացվեցին և դրանց մակերեսները մաքրվեցին չներծծված արյունից՝ նմուշները դնելով Ct-ի վրա 30 վայրկյան:NFRCS 16-ով կլանված արյան վերջնական կշիռը դիտարկվել է (W1) յուրաքանչյուր ժամանակային կետում:Հաշվեք BAR տոկոսը հետևյալ բանաձևով.
Արյան մակարդման ժամանակը (BCT) որոշվել է, ինչպես հաղորդում է Wang et al.17 .Ամբողջ արյան համար (առնետի արյունը նախապես խառնված 3,8% նատրիումի ցիտրատով) պահանջվող ժամանակը NFRCS-ի առկայության դեպքում հաշվարկվել է որպես փորձանմուշի BCT:Տարբեր NFRCS բաղադրիչները (30 մգ) տեղադրվեցին 10 մլ պտուտակային գլխարկով սրվակների մեջ և ինկուբացվեցին 37°C-ում:Արյուն (0,5 մլ) ավելացվել է սրվակի մեջ և ավելացվել է 0,3 մլ 0,2 M CaCl2՝ արյան կոագուլյացիայի ակտիվացման համար:Ի վերջո, շրջեք սրվակը յուրաքանչյուր 15 վայրկյանը մեկ (մինչև 180°), մինչև ամուր թրոմբ առաջանա:Նմուշի BCT-ը գնահատվում է պտտվող վարագույրների քանակով17,18:BCT-ի հիման վրա NFRCS Cm, Ch և Cp երկու օպտիմալ կոմպոզիցիաներ ընտրվել են հետագա բնութագրման ուսումնասիրությունների համար:
Ch NFRCS և Cp NFRCS կոմպոզիցիաների BCT-ը որոշվել է Li et al-ի կողմից նկարագրված մեթոդի կիրառմամբ:19 .Տեղադրեք 15 x 15 մմ2 Ch NFRCS, Cp NFRCS և Cs (դրական հսկողություն) առանձին Պետրի ամանների մեջ (37 °C):3,8% նատրիումի ցիտրատ պարունակող արյունը 10:1 ծավալային հարաբերակցությամբ խառնվել է 0,2 M CaCl2-ի հետ՝ սկսելու արյան մակարդման գործընթացը:20 մկլ 0,2 M CaCl2 առնետի արյան խառնուրդը կիրառվել է նմուշի մակերեսին և դրվել դատարկ Պետրի ամանի մեջ:Հսկիչը արյուն էր լցվել դատարկ Պետրի ափսեների մեջ՝ առանց Ct.0, 3 և 5 րոպե ֆիքսված ընդմիջումներով դադարեցրեք մակարդումը` ավելացնելով 10 մլ դեիոնացված (DI) ջուր ափսե պարունակող նմուշին` առանց թրոմբը խանգարելու:Չկոագուլյացված էրիթրոցիտները (էրիթրոցիտները) ենթարկվում են հեմոլիզի՝ դեիոնացված ջրի առկայության դեպքում և ազատում հեմոգլոբինը։Հեմոգլոբինը տարբեր ժամանակային կետերում (HA(t)) չափվել է 540 նմ (λmax հեմոգլոբին)՝ օգտագործելով UV-Vis սպեկտրոֆոտոմետր:Հեմոգլոբինի (AH(0)) բացարձակ կլանումը 0 րոպեում 20 մկլ արյան մեջ 10 մլ դեիոնացված ջրի մեջ ընդունվել է որպես հղման ստանդարտ:Կոագուլյացված արյան հարաբերական հեմոգլոբինի կլանումը (RHA) հաշվարկվել է HA(t)/HA(0) հարաբերակցությամբ՝ օգտագործելով արյան նույն խմբաքանակը:
Հյուսվածքային անալիզատորի միջոցով (Texture Pro CT V1.3 Build 15, Brookfield, USA) որոշվել են NFRK-ի կպչուն հատկությունները վնասված հյուսվածքին:Բաց հատակով գլանաձեւ աման սեղմեք խոզի մսի մաշկի ներսից (առանց ճարպի շերտի):Նմուշները (Ch NFRCS և Cp NFRCS) կիրառվել են կանուլայի միջոցով գլանաձև կաղապարների մեջ՝ խոզի մաշկին կպչունություն ստեղծելու համար:Սենյակային ջերմաստիճանում (RT) (25°C) 3 րոպե ինկուբացիայից հետո NFRCS սոսինձի ուժը գրանցվեց 0,5 մմ/վ հաստատուն արագությամբ:
Վիրաբուժական հերմետիկների հիմնական առանձնահատկությունն արյան մակարդման բարձրացումն է՝ միաժամանակ նվազեցնելով արյան կորուստը:Անկորուստ կոագուլյացիան NFRCS-ում գնահատվել է նախկինում հրապարակված մեթոդի կիրառմամբ՝ չնչին փոփոխություններով 19:Կատարեք միկրոցենտրիֆուգային խողովակ (2 մլ) (ներքին տրամագիծը 10 մմ) 8 × 5 մմ2 անցքով ցենտրիֆուգային խողովակի մի կողմում (բաց վերք է ներկայացնում):NFRCS-ն օգտագործվում է բացվածքը փակելու համար, իսկ ժապավենը՝ արտաքին եզրերը կնքելու համար:Ավելացրեք 20 µl 0,2 M CaCl2 միկրոցենտրիֆուգային խողովակին, որը պարունակում է 3,8% նատրիումի ցիտրատի պրեմիքս:10 րոպե անց միկրոցենտրիֆուգային խողովակները հանվել են սպասքից և որոշվել է ափսեների զանգվածի աճը NFRK-ից արյան արտահոսքի պատճառով (n=3):Արյան կորուստ Ch NFRCS-ը և Cp NFRCS-ը համեմատվել են C-ների հետ:
NFRCS-ի խոնավ ամբողջականությունը որոշվել է Mishra-ի և Chaudhary21-ի նկարագրած մեթոդի հիման վրա՝ չնչին փոփոխություններով:NFRCS-ը տեղադրեք 100 մլ Էրլենմայերի կոլբայի մեջ 50 մլ ջրով և պտտեք 60 վրկ՝ առանց վերևի ձևավորման:Նմուշների տեսողական ստուգում և առաջնահերթություն ֆիզիկական ամբողջականության համար՝ հիմնված հավաքման վրա:
HFFC-ի կապակցման ուժը Ct-ին ուսումնասիրվել է՝ օգտագործելով նախկինում հրապարակված մեթոդները՝ չնչին փոփոխություններով:Մակերեւույթի ծածկույթի ամբողջականությունը գնահատվել է NFRK-ի ակուստիկ ալիքների (արտաքին խթան) ազդեցության միջոցով milliQ ջրի (Ct) առկայության միջոցով:Մշակված NFRCS Ch NFRCS-ը և Cp NFRCS-ը տեղադրվել են ջրով լցված բաժակի մեջ և համապատասխանաբար 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 և 30 րոպե ձայնագրվել:Չորացնելուց հետո NFRCS-ի սկզբնական և վերջնական քաշի տոկոսային տարբերությունն օգտագործվել է նյութի տոկոսային կորուստը (HFFC) հաշվարկելու համար:In vitro BCT-ն հետագայում ապահովեց մակերևութային նյութերի կապակցման ուժը կամ կորուստը:HFFC-ի Ct-ին միանալու արդյունավետությունը ապահովում է արյան մակարդում և առաձգական ծածկույթ Ct22-ի մակերեսին:
Մշակված NFRCS-ի միատարրությունը որոշվել է NFRCS-ի պատահականորեն ընտրված ընդհանուր վայրերից վերցված նմուշների BCT-ով (30 մգ):Հետևեք նախկինում նշված BCT ընթացակարգին՝ NFRCS-ի համապատասխանությունը որոշելու համար:Բոլոր հինգ նմուշների միջև հարևանությունը ապահովում է մակերեսի միատեսակ ծածկույթ և HFFC նստվածք Ct ցանցում:
Անվանական արյան շփման տարածքը (NBCA) որոշվել է, ինչպես նախկինում հաղորդվել է որոշ փոփոխություններով:Արյունը կոագուլացրեք՝ սեղմելով 20 µl արյուն Ct, Ch NFRCS, Cp NFRCS և Cs երկու մակերեսների միջև:1 ժամ անց ստենտի երկու մասերն առանձնացրել են և ձեռքով չափել թրոմբի մակերեսը։Երեք կրկնությունների միջին արժեքը համարվում էր NBCA NFRCS19:
Դինամիկ գոլորշի կլանման (DVS) վերլուծությունը օգտագործվել է գնահատելու NFRCS-ի արդյունավետությունը արտաքին միջավայրից ջուրը կլանելու համար կամ վնասվածքի տեղամասից, որը պատասխանատու է կոագուլյացիայի մեկնարկի համար:DVS-ը գնահատում կամ գրանցում է գոլորշիների կլանումը և կորուստը նմուշի մեջ՝ օգտագործելով ±0,1 մկգ զանգվածային լուծաչափով ծայրահեղ զգայուն հավասարակշռություն:Մասնակի գոլորշիների ճնշում (հարաբերական խոնավություն) առաջանում է նմուշի շուրջ զանգվածի հոսքի էլեկտրոնային կարգավորիչի կողմից՝ հագեցած և չոր կրող գազերը խառնելով: Համաձայն Եվրոպական դեղագործական ուղեցույցների՝ հիմնվելով նմուշների կողմից խոնավության կլանման տոկոսի վրա, նմուշները դասակարգվել են 4 կատեգորիայի (0–0,012% w/w– ոչ հիգրոսկոպիկ, 0,2–2% w/w թեթևակի հիգրոսկոպիկ, 2–15% չափավոր հիգրոսկոպիկ)235% հիգրոսկոպիկ և >1։ Համաձայն Եվրոպական դեղագործական ուղեցույցների՝ հիմնվելով նմուշների կողմից խոնավության կլանման տոկոսի վրա, նմուշները դասակարգվել են 4 կատեգորիայի (0–0,012% w/w– ոչ հիգրոսկոպիկ, 0,2–2% w/w թեթևակի հիգրոսկոպիկ, 2–15% չափավոր հիգրոսկոպիկ)235% հիգրոսկոպիկ և >1։Եվրոպական դեղագրքի առաջարկությունների համաձայն, կախված նմուշների խոնավության կլանման տոկոսից, նմուշները բաժանվեցին 4 կատեգորիայի (0–0,012% w/w – ոչ հիգրոսկոպիկ, 0,2–2% w/w թեթևակի հիգրոսկոպիկ, 2–15%):% միջիննո գիգրոսկոպիական и > 15% очень гигроскопичен)23. % չափավոր հիգրոսկոպիկ և > 15% շատ հիգրոսկոպիկ)23.根据欧洲药典指南，根据样品吸收水分的百分比，样品分为4 类（0-2% w-0.012% w. /w 轻微吸湿性、2-15 % 适度吸湿，> 15% 非常吸湿）23։根据 欧洲 药典 指南 ， 根据 吸收 水分 的 百分比 样品 分为 分为 爆为 分为 爆为 分为 爆丼0%w.湿 性 、 、 、 、 0,2-2% W/W 轻微 、 2-15% 适度 吸湿 ，> 15% 非常吸湿）23。Եվրոպական դեղագրքի առաջարկություններին համապատասխան՝ նմուշները բաժանվում են 4 դասի՝ կախված նմուշի կողմից կլանված խոնավության տոկոսից (0-0,012% քաշային՝ ոչ հիգրոսկոպիկ, 0,2-2% քաշային՝ թեթևակի հիգրոսկոպիկ, 2-15% քաշային):% միջիննո գիգրոսկոպիական, > 15 % очень գիգրոսկոպիական) 23. % չափավոր հիգրոսկոպիկ, > 15% շատ հիգրոսկոպիկ) 23.NFCS X NFCS-ի և TsN NFCS-ի հիգրոսկոպիկ արդյունավետությունը որոշվել է DVS TA TGA Q5000 SA անալիզատորի վրա:Այս գործընթացի ընթացքում ստացվել են գործարկման ժամանակը, հարաբերական խոնավությունը (RH) և իրական ժամանակի նմուշի քաշը 25°C24-ում:Խոնավության պարունակությունը հաշվարկվում է ճշգրիտ NFRCS զանգվածի վերլուծությամբ՝ օգտագործելով հետևյալ հավասարումը.
MC-ն NFRCS խոնավություն է:m1 – NSAID-ների չոր քաշը:m2-ը իրական ժամանակի NFRCS զանգվածն է տվյալ RH-ում:
Ընդհանուր մակերեսը գնահատվել է հեղուկ ազոտով ազոտի կլանման փորձի միջոցով՝ նմուշները 25 °C ջերմաստիճանում 10 ժամ դատարկելուց հետո (<7 × 10–3 Torr): Ընդհանուր մակերեսը գնահատվել է հեղուկ ազոտով ազոտի կլանման փորձի միջոցով՝ նմուշները 25 °C ջերմաստիճանում 10 ժամ դատարկելուց հետո (<7 × 10–3 Torr): Общая площадь поверхности գնահատвалась с помощью эксперимента по адсорбции азота жидким азотом после опорожнения образцов при 25 °С течение 10 ч (< 7 × 10–3 Тор). Ընդհանուր մակերեսը գնահատվել է հեղուկ ազոտով ազոտի կլանման փորձի միջոցով այն բանից հետո, երբ նմուշները դատարկվել են 25°C ջերմաստիճանում 10 ժամ (<7 × 10–3 Torr):在25°C 清空样品10 小时（< 7 × 10-3 Torr）后，使用液氮的氮吸附实验估计总觡+25°C Համառոտ գնահատականները գնահատվում են ինչպես փորձարկումների արդյունքում: Ընդհանուր մակերեսը գնահատվել է հեղուկ ազոտով ազոտի կլանման փորձերի միջոցով, երբ նմուշները 10 ժամ դատարկվել են 25°C ջերմաստիճանում (< 7 x 10-3 torr):Ընդհանուր մակերեսը, ծակոտիների ծավալը և NFRCS ծակոտիների չափը որոշվել են Quantachrome-ով NOVA 1000e-ից, Ավստրիա՝ օգտագործելով RS 232 ծրագրակազմը:
Ամբողջ արյունից պատրաստել 5% կարմիր արյան բջիջներ (աղի լուծույթ որպես լուծիչ):Այնուհետև HFFC-ի մասնաբաժինը (0,25 մլ) տեղափոխեք 96 հորատանցք ունեցող ափսե և 5% RBC զանգված (0,1 մլ):Խառնուրդը 40 րոպե ինկուբացնում ենք 37°C ջերմաստիճանում։Արյան կարմիր բջիջների և շիճուկի խառնուրդը դիտարկվել է որպես դրական հսկողություն, իսկ աղի լուծույթի և կարմիր արյան բջիջների խառնուրդը որպես բացասական հսկողություն:Հեմագլյուտինացիան որոշվել է Ստաջիցկու սանդղակով:Առաջարկվող մասշտաբները հետևյալն են. + + + + խիտ հատիկավոր ագրեգատներ;+ + + հարթ ներքևի բարձիկներ կոր եզրերով;+ + հարթ ներքևի բարձիկներ պատռված եզրերով;+ նեղ կարմիր օղակներ հարթ բարձիկների եզրերի շուրջ;– (բացասական) դիսկրետ կարմիր կոճակ 12 ստորին հորանի կենտրոնում:
NFRCS-ի հեմոհամատեղելիությունը ուսումնասիրվել է Ստանդարտացման միջազգային կազմակերպության (ISO) մեթոդով (ISO10993-4, 1999)26,27:Սինգհի և այլոց կողմից նկարագրված ծանրաչափական մեթոդը:Փոքր փոփոխություններ են կատարվել՝ գնահատելու թրոմբի ձևավորումը NFRCS-ի առկայության կամ մակերեսի վրա:500 մգ Cs, Ch NFRCS և Cp NFRCS ինկուբացվել են ֆոսֆատով բուֆերացված ֆիզիոլոգիական լուծույթում (PBS) 24 ժամ 37°C ջերմաստիճանում:24 ժամ հետո PBS-ը հեռացվեց և NFRCS-ը մշակվեց 2 մլ արյունով, որը պարունակում էր 3,8% նատրիումի ցիտրատ:NFRCS-ի մակերեսին ինկուբացված նմուշներին ավելացրեք 0,04 մլ 0,1 M CaCl2:45 րոպե անց մակարդումը դադարեցնելու համար ավելացվել է 5 մլ թորած ջուր։NFRK-ի մակերեսին կոագուլյացված արյունը մշակվել է 36-38% ֆորմալդեհիդի լուծույթով:Ֆորմալդեհիդով ամրացված թրոմբները չորացրել և կշռել են։Թրոմբոցի տոկոսը գնահատվել է առանց արյան և նմուշառման ապակու և արյունով բաժակի (դրական հսկողություն) քաշի հաշվարկով:
Որպես նախնական հաստատում, նմուշները տեսանելի են եղել օպտիկական մանրադիտակի տակ՝ հասկանալու համար HFFC մակերեսային ծածկույթի, Ct փոխկապակցված և Ct ցանցի ծակոտիներ ձևավորելու ունակությունը:NFRCS-ից Ch-ի և Cp-ի բարակ հատվածները կտրվել են scalpel-ի սայրով:Ստացված հատվածը դրել են ապակե սլայդի վրա, ծածկել ծածկոցով, իսկ ծայրերը ամրացրել սոսինձով։Պատրաստված սլայդները դիտվել են օպտիկական մանրադիտակի տակ և լուսանկարվել տարբեր խոշորացումներով:
Պոլիմերային նստվածքը Ct ցանցերում տեսանելի է եղել ֆլուորեսցենտային մանրադիտակի միջոցով՝ Ռայսի և այլոց կողմից նկարագրված մեթոդի հիման վրա: Ձևակերպման համար օգտագործվող HFFC բաղադրությունը խառնվել է լյումինեսցենտ ներկով (ամարանթ), և NFRCS (Ch & Cp) պատրաստվել է նախկինում նշված մեթոդի համաձայն: Ձևակերպման համար օգտագործվող HFFC բաղադրությունը խառնվել է լյումինեսցենտ ներկով (ամարանթ), և NFRCS (Ch & Cp) պատրաստվել է նախկինում նշված մեթոդի համաձայն:Ձևակերպման համար օգտագործվող HFFC բաղադրությունը խառնվել է լյումինեսցենտ ներկով (ամարանթ) և ստացվել է NFRCS (Ch և Cp)՝ ըստ նախկինում նշված մեթոդի:将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的或光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的或将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的或光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的或Ձևակերպման մեջ օգտագործված HFFC բաղադրությունը խառնվել է լյումինեսցենտային ներկով (Amaranth) և ստացել NFRCS (Ch և Cp), ինչպես նշվեց ավելի վաղ:Ստացված նմուշներից կտրվել են NFRK-ի բարակ հատվածներ, տեղադրվել ապակե սլայդների վրա և ծածկվել ծածկոցներով։Դիտեք պատրաստված սլայդները լյումինեսցենտային մանրադիտակի տակ՝ օգտագործելով կանաչ ֆիլտր (310-380 նմ):Պատկերներն արվել են 4x խոշորացումով՝ հասկանալու համար Ct-ի հարաբերությունները և պոլիմերների ավելցուկ նստվածքը Ct ցանցում:
NFRCS Ch-ի և Cp-ի մակերևութային տեղագրությունը որոշվել է ատոմային ուժային մանրադիտակի (AFM) միջոցով՝ ծայրահեղ սուր TESP կոնտեյլերով՝ թակելու ռեժիմում՝ 42 Ն/մ, 320 կՀց, ROC 2-5 նմ, Բրուկեր, Թայվան:Մակերեւույթի կոշտությունը որոշվել է արմատային միջին քառակուսիով (RMS)՝ օգտագործելով ծրագրակազմ (Scanning Probe Image Processor):Տարբեր NFRCS տեղակայումներ ներկայացվել են 3D պատկերների վրա՝ մակերևույթի միատեսակությունը ստուգելու համար:Տվյալ տարածքի համար գնահատականի ստանդարտ շեղումը սահմանվում է որպես մակերեսի կոշտություն:RMS հավասարումն օգտագործվել է NFRCS31-ի մակերեսի կոշտությունը քանակականացնելու համար:
FESEM-ի վրա հիմնված ուսումնասիրություններ են իրականացվել՝ օգտագործելով FESEM, SU8000, HI-0876-0003, Hitachi, Tokyo՝ հասկանալու Ch NFRCS-ի և Cp NFRCS-ի մակերեսային մորֆոլոգիան, որոնք ավելի լավ BCT են ցույց տվել, քան Cm NFRCS-ը:FESEM-ի ուսումնասիրությունն իրականացվել է Ժաոյի և այլոց կողմից նկարագրված մեթոդի համաձայն:32 փոքր փոփոխություններով:NFRCS 20-ից 30 մգ Ch NFRCS-ը և Cp NFRCS-ը նախապես խառնվել են 20 մկլ 3,8% նատրիումի ցիտրատի հետ՝ նախապես խառնված առնետի արյան հետ:20 մկլ 0,2 M CaCl2 ավելացվել է արյունով մշակված նմուշներին՝ կոագուլյացիա սկսելու համար, և նմուշները ինկուբացվել են սենյակային ջերմաստիճանում 10 րոպե:Բացի այդ, ավելցուկային էրիթրոցիտները հեռացվել են NFRCS մակերեսից՝ ողողելով աղի լուծույթով:
Հետագա նմուշները մշակվել են 0,1% գլյուտարալդեհիդով, այնուհետև չորացրել են տաք օդով ջեռոցում 37°C ջերմաստիճանում՝ խոնավությունը հեռացնելու համար:Չորացրած նմուշները պատվեցին և վերլուծվեցին 32:Անալիզի ընթացքում ստացված այլ պատկերներ էին բամբակի առանձին մանրաթելերի մակերեսի վրա թրոմբի ձևավորումը, Ct-ի միջև պոլիմերային նստվածքը, էրիթրոցիտների ձևաբանությունը (ձևը), թրոմբի ամբողջականությունը և էրիթրոցիտների մորֆոլոգիան NFRCS-ի առկայության դեպքում:Չմշակված NFRCS տարածքները և Ch և Cp բուժված NFRCS տարածքները, որոնք ինկուբացված են արյունով, սկանավորվել են տարրական իոնների համար (նատրիում, կալիում, ազոտ, կալցիում, մագնեզիում, ցինկ, պղինձ և սելեն)33:Համեմատեք տարրական իոնների տոկոսները մշակված և չմշակված նմուշների միջև՝ հասկանալու համար թրոմբի ձևավորման ընթացքում տարրական իոնների կուտակումը և թրոմբների միատարրությունը:
Cp HFFC մակերեսային ծածկույթի հաստությունը Ct մակերեսի վրա որոշվել է FESEM-ի միջոցով:Cp NFRCS-ի խաչմերուկները կտրվել են շրջանակից և ցողվել:Ստացված ցողած ծածկույթի նմուշները դիտարկվել են FESEM-ի միջոցով և չափվել մակերեսի ծածկույթի հաստությունը 34, 35, 36:
Ռենտգեն միկրո-CT ապահովում է բարձր լուծաչափով 3D ոչ կործանարար պատկերներ և թույլ է տալիս ուսումնասիրել NFRK-ի ներքին կառուցվածքային դասավորությունը:Micro-CT-ն օգտագործում է նմուշի միջով անցնող ռենտգենյան ճառագայթը, որպեսզի գրանցի նմուշի ռենտգենյան ճառագայթների տեղական գծային թուլացման գործակիցը, որն օգնում է ստանալ մորֆոլոգիական տեղեկատվություն:Ct-ի ներքին տեղակայումը Cp NFRCS-ում և արյան միջոցով մշակված Cp NFRCS-ում հետազոտվել է միկրո-CT-ով՝ հասկանալու կլանման արդյունավետությունը և արյան մակարդումը NFRCS37,38,39-ի առկայության դեպքում:Արյունով մշակված և չմշակված Cp NFRCS նմուշների 3D կառուցվածքները վերակառուցվել են միկրո-CT-ի միջոցով (V|tome|x S240, Phoenix, Գերմանիա):VG STUDIO-MAX ծրագրաշարի 2.2 տարբերակի միջոցով մի քանի ռենտգեն պատկերներ են արվել տարբեր անկյուններից (իդեալական 360° ծածկույթ)՝ NFRCS-ի համար 3D պատկերներ մշակելու համար:Հավաքված պրոյեկցիոն տվյալները վերակառուցվել են 3D ծավալային պատկերների՝ օգտագործելով համապատասխան պարզ 3D ScanIP ակադեմիական ծրագրաշարը:
Բացի այդ, թրոմբի բաշխվածությունը հասկանալու համար 20 մկլ նախախառնված ցիտրատային արյուն և 20 մկլ 0,2 M CaCl2 ավելացվել են NFRCS-ին՝ արյան մակարդումը սկսելու համար:Պատրաստված նմուշները թողնում են պնդանալու։NFRK մակերեսը մշակվել է 0,5% գլյուտարալդեհիդով և չորացնել տաք օդով ջեռոցում 30–40°C ջերմաստիճանում 30 րոպե:NFRCS-ի վրա ձևավորված արյան թրոմբը սկանավորվել է, վերակառուցվել և տեսողականացվել է թրոմբի 3D պատկերը:
Հակաբակտերիալ անալիզներ են կատարվել Cp NFRCS-ի վրա (լավագույնը համեմատած Ch NFRCS-ի հետ)՝ օգտագործելով նախկինում նկարագրված մեթոդը՝ չնչին փոփոխություններով:Cp NFRCS-ի և Cp HFFC-ի հակաբակտերիալ ակտիվությունը որոշվել է՝ օգտագործելով երեք տարբեր փորձնական միկրոօրգանիզմներ [S.aureus (գրամ-դրական բակտերիաներ), E.coli (գրամ-բացասական բակտերիաներ) և սպիտակ Candida (C.albicans)], որոնք աճում են ագարի վրա Petri-ի ափսեներում ինկուբատորում:Միատեսակ պատվաստել 50 մլ նոսրացված բակտերիաների կուլտուրայի կախույթը 105-106 CFU մլ-1 կոնցենտրացիայով ագարի միջավայրի վրա:Միջինը լցնում ենք Պետրիի ամանի մեջ և թողնում ենք, որ պնդանա:Ագարի ափսեի մակերեսի վրա հորեր են արվել՝ HFFC-ով լցնելու համար (3 հորատանցք HFFC-ի համար և 1-ը՝ բացասական հսկողության համար):Ավելացրեք 200 μl HFFC 3 հորերին և 200 մկլ pH 7.4 PBS 4-րդ հորին:Պետրիի ափսեի մյուս կողմում 12 մմ Cp NFRCS սկավառակ դրեք պնդացած ագարի վրա և խոնավացրեք PBS-ով (pH 7.4):Ցիպրոֆլոքսասինը, ամպիցիլինի և ֆլուկոնազոլի հաբերը համարվում են ոսկեգույն ստաֆիլոկոկի, էշերիխիա կոլիի և Candida albicans-ի տեղեկատու ստանդարտներ:Ձեռքով չափեք արգելակման գոտին և վերցրեք արգելակման գոտու թվային պատկերը:
Ինստիտուցիոնալ էթիկական հաստատումից հետո ուսումնասիրությունն անցկացվել է Կաստուրբայի կրթության և հետազոտության բժշկական քոլեջում, Մանիպալում, Կարնատակա, հարավային Հնդկաստան:In vitro TEG փորձարարական արձանագրությունը վերանայվել և հաստատվել է Կաստուրբա բժշկական քոլեջի ինստիտուցիոնալ էթիկայի հանձնաժողովի կողմից, Մանիպալ, Կարնատակա (IEC: 674/2020):Առարկաները հավաքագրվել են կամավոր արյան դոնորներից (18-ից 55 տարեկան) հիվանդանոցի արյան բանկից:Բացի այդ, կամավորներից ստացվել է տեղեկացված համաձայնության ձև՝ արյան նմուշառման համար:Native TEG (N-TEG) ​​օգտագործվել է Cp HFFC ձևակերպման ազդեցությունը նատրիումի ցիտրատով նախապես խառնված ամբողջ արյան վրա ուսումնասիրելու համար:N-TEG-ը լայնորեն ճանաչված է խնամքի կետի վերակենդանացման գործում իր դերի համար, որը խնդիրներ է ստեղծում կլինիկական բժիշկների համար՝ արդյունքների կլինիկապես նշանակալի հետաձգման հնարավորության պատճառով (սովորական կոագուլյացիայի թեստեր):N-TEG վերլուծությունը կատարվել է ամբողջական արյան օգտագործմամբ:Բոլոր մասնակիցներից ստացվել է տեղեկացված համաձայնություն և մանրամասն բժշկական պատմություն:Հետազոտությունը չի ներառում հեմոստատիկ կամ թրոմբոցային բարդություններ ունեցող մասնակիցներ, ինչպիսիք են հղիությունը/հետծննդաբերությունը կամ լյարդի հիվանդությունը:Հետազոտությունից դուրս են մնացել նաև դեղամիջոցներ ընդունող անձինք, որոնք ազդում են կոագուլյացիայի կասկադի վրա:Հիմնական լաբորատոր հետազոտություններ (հեմոգլոբին, պրոտոմբինային ժամանակ, ակտիվացված թրոմբոպլաստին և թրոմբոցիտների քանակ) կատարվել են բոլոր մասնակիցների վրա՝ ստանդարտ ընթացակարգերի համաձայն:N-TEG-ը որոշում է արյան մակարդուկի մածուցիկությունը, թրոմբի սկզբնական կառուցվածքը, մասնիկների փոխազդեցությունը, թրոմբի ամրապնդումը և թրոմբի լիզը:N-TEG վերլուծությունը տրամադրում է գրաֆիկական և թվային տվյալներ մի քանի բջջային տարրերի և պլազմայի կոլեկտիվ ազդեցության վերաբերյալ:N-TEG վերլուծությունը կատարվել է Cp HFFC-ի երկու տարբեր ծավալների վրա (10 մկլ և 50 մկլ):Արդյունքում 1 մլ Cp HFFC-ին ավելացվել է 1 մլ ամբողջական արյուն՝ կիտրոնաթթուով:Ավելացրեք 1 մլ (Cp HFFC + ցիտրատված արյուն), 340 մկլ խառը արյուն 20 մկլ 0,2 M CaCl2 պարունակող TEG կերակրատեսակին:Այնուհետև, TEG ափսեները բեռնվել են TEG® 5000, ԱՄՆ՝ R, K, ալֆա անկյունը, MA, G, CI, TPI, EPL, LY արյան նմուշների 30%-ը Cp HFFC41-ի առկայության դեպքում:
In vivo ուսումնասիրության արձանագրությունը վերանայվել և հաստատվել է Կենդանիների էթիկայի ինստիտուցիոնալ կոմիտեի (IAEC), Kasturba բժշկության դպրոցի, Manipal բարձրագույն կրթության ինստիտուտի, Manipal (IAEC/KMC/69/2020) կողմից:Կենդանիների հետ կապված բոլոր փորձերը կատարվել են Կենդանիների վրա փորձերի վերահսկման և վերահսկողության կոմիտեի (CPCSEA) առաջարկություններին համապատասխան:Բոլոր in vivo NFRCS-ի ուսումնասիրությունները (2 × 2 սմ2) իրականացվել են Wistar առնետների (200-ից 250 գ կշռող) էգ առնետների վրա:Բոլոր կենդանիները ընտելացվել են 24-26°C ջերմաստիճանում, կենդանիներին ազատ մուտք է եղել ստանդարտ սնունդ և ջուր ad libitum:Բոլոր կենդանիները պատահականորեն բաժանվեցին տարբեր խմբերի, յուրաքանչյուր խումբ բաղկացած էր երեք կենդանիներից:Բոլոր ուսումնասիրությունները կատարվել են Animal Studies. Report of In Vivo Experiments 43-ի համաձայն:Նախքան ուսումնասիրությունը կենդանիներին անզգայացրել են 20-50 մգ կետամինի (մարմնի քաշի 1 կգ-ի դիմաց) և 2-10 մգ քսիլազինի (1 կգ քաշի դիմաց) խառնուրդի ներպերիտոնեային (IP) կիրառմամբ:Ուսումնասիրությունից հետո արյունահոսության ծավալը հաշվարկվել է՝ գնահատելով նմուշների նախնական և վերջնական քաշի տարբերությունը, երեք թեստերից ստացված միջին արժեքը վերցվել է որպես նմուշի արյունահոսության ծավալ:
Առնետի պոչի ամպուտացիայի մոդելն իրականացվել է հասկանալու համար NFRCS-ի ներուժը մոդուլավորելու արյունահոսությունը տրավմայի, մարտական ​​գործողությունների կամ ճանապարհատրանսպորտային պատահարների ժամանակ (վնասվածքի մոդել):Կտրեք պոչի 50%-ը սկալպելի սայրով և դրեք օդում 15 վրկ՝ նորմալ արյունահոսություն ապահովելու համար:Բացի այդ, փորձանմուշները դրվել են առնետի պոչի վրա՝ ճնշում գործադրելով (Ct, Cs, Ch NFRCS և Cp NFRCS):Արյունահոսություն և PCT արձանագրվել են փորձանմուշների համար (n = 3) 17,45:
NFRCS ճնշման վերահսկման արդյունավետությունը մարտում հետազոտվել է մակերեսային ազդրային զարկերակի մոդելի վրա:Ֆեմուրալ զարկերակը մերկացվում է, ծակվում է 24G տրոկարով և արյունահոսում 15 վայրկյանի ընթացքում:Անվերահսկելի արյունահոսություն նկատվելուց հետո փորձանմուշը տեղադրվում է պունկցիայի վայրում՝ կիրառվող ճնշումով:Փորձանմուշը կիրառելուց անմիջապես հետո արձանագրվել է մակարդման ժամանակը և հաջորդ 5 րոպեի ընթացքում դիտվել է հեմոստատիկ արդյունավետություն:Նույն ընթացակարգը կրկնվել է Cs-ի և Ct46-ի հետ:
Dowling et al.47-ն առաջարկել է լյարդի վնասվածքի մոդել՝ գնահատելու հեմոստատիկ նյութերի հեմոստատիկ ներուժը ներվիրահատական ​​արյունահոսության համատեքստում:BCT-ն արձանագրվել է Ct նմուշների (բացասական վերահսկողություն), Cs շրջանակի (դրական հսկողության), Ch NFRCS նմուշների և Cp NFRCS նմուշների համար:Առնետի վերլյարդային խոռոչի երակը մերկացվել է՝ կատարելով միջին լապարոտոմիա:Դրանից հետո մկրատով կտրել են ձախ բլթի հեռավոր հատվածը։Սկալպելի շեղբով կտրվածք արեք լյարդում և թողեք, որ մի քանի վայրկյան արյունահոսի։Ճշգրիտ կշռված Ch NFRCS և Cp NFRCS փորձանմուշները տեղադրվել են վնասված մակերեսի վրա առանց որևէ դրական ճնշման և գրանցվել է BCT:Վերահսկիչ խումբը (Ct) այնուհետև ճնշում գործադրեց, որին հաջորդեց Cs 30 s47 առանց վնասվածքը կոտրելու:
In vivo վերքերի ապաքինման անալիզները կատարվել են՝ օգտագործելով կտրող վերքի մոդել՝ մշակված պոլիմերների վրա հիմնված NFRCS-ների վերքերի բուժման հատկությունները գնահատելու համար:Կտրող վերքերի մոդելները ընտրվել և կատարվել են նախկինում հրապարակված մեթոդների համաձայն՝ չնչին փոփոխություններով19,32,48:Բոլոր կենդանիները անզգայացվել են, ինչպես նախկինում նկարագրված է:Օգտագործեք բիոպսիայի դակիչ (12 մմ) մեջքի մաշկի վրա շրջանաձև խորը կտրվածք անելու համար:Պատրաստված վերքերի տեղամասերը հագցվել են Cs-ով (դրական հսկողություն), Ct-ով (հասկանալով, որ բամբակյա բարձիկները խանգարում են բուժմանը), Ch NFRCS և Cp NFRCS (փորձարարական խումբ) և բացասական հսկողություն՝ առանց որևէ բուժման:Հետազոտության յուրաքանչյուր օր բոլոր առնետների մոտ չափվել է վերքի մակերեսը:Օգտագործեք թվային տեսախցիկ՝ վերքի հատվածը նկարելու և նոր վիրակապ դնելու համար։Վերքի փակման տոկոսը չափվել է հետևյալ բանաձևով.
Ելնելով հետազոտության 12-րդ օրը վերքի փակման տոկոսից, լավագույն խմբի առնետի մաշկը կտրվել է ((Cp NFRCS) և վերահսկիչ խումբը) և ուսումնասիրվել է H&E ներկման և Masson-ի տրիքրոմի ներկման միջոցով: Ելնելով հետազոտության 12-րդ օրը վերքի փակման տոկոսից, լավագույն խմբի առնետի մաշկը կտրվել է ((Cp NFRCS) և վերահսկիչ խումբը) և ուսումնասիրվել է H&E ներկման և Masson-ի տրիքրոմի ներկման միջոցով:Ելնելով հետազոտության 12-րդ օրը վերքի փակման տոկոսից, լավագույն խմբի առնետների մաշկը ((Cp NFRCS) և վերահսկիչ խումբ) հեռացվել և հետազոտվել է՝ ներկելով հեմատոքսիլին-էոզինով և Մասսոնի տրիքրոմով:根据研究第12天的伤口闭合百分比，切除最佳组((Cp NFRCS)和对照组)的大迌褌分比迧褼猼sson三色染色研究.根据研究第12天的伤口闭合百分比，切除最佳组((Cp NFRCS)和对照组)的大迌褌猄大迌褼分比，切除最佳组眳组)Լավագույն խմբի ((Cp NFRCS) և վերահսկիչ խմբերի առնետները հեռացվել են հեմատոքսիլին-էոզին ներկելու և Մասսոնի տրիկրոմի ներկման համար՝ հիմնվելով հետազոտության 12-րդ օրը վերքի փակման տոկոսի վրա:Իրականացված ներկման պրոցեդուրան իրականացվել է նախկինում նկարագրված մեթոդներով49,50:Համառոտ, 10% ֆորմալինի մեջ ֆիքսվելուց հետո նմուշները ջրազրկվել են՝ օգտագործելով մի շարք աստիճանավորված սպիրտներ:Օգտագործեք միկրոտոմա՝ կտրված հյուսվածքի բարակ հատվածներ (5 մկմ հաստությամբ) ստանալու համար:Ստուգումների և Cp NFRCS-ի բարակ սերիական հատվածները մշակվել են հեմատոքսիլինով և էոզինով` ուսումնասիրելու հիստոպաթոլոգիական փոփոխությունները:Մասսոնի տրիկրոմի բիծն օգտագործվել է կոլագենի մանրաթելերի առաջացումը հայտնաբերելու համար։Ստացված արդյունքները կուրորեն ուսումնասիրվել են ախտաբանների կողմից։
Cp NFRCS նմուշների կայունությունն ուսումնասիրվել է սենյակային ջերմաստիճանում (25°C ± 2°C/60% RH ± 5%) 12 ամսվա ընթացքում51:Cp NFRCS (մակերեսի գունաթափում և մանրէների աճ) տեսողական ստուգվել և փորձարկվել է ծալովի մաշվածության դիմադրության և BCT-ի համար՝ համաձայն Նյութեր և մեթոդներ բաժնում նկարագրված վերը նշված մեթոդների:
Cp NFRCS-ի մասշտաբայնությունն ու վերարտադրելիությունը հետազոտվել է՝ պատրաստելով Cp NFRCS 15×15 սմ2 չափսով:Բացի այդ, 30 մգ նմուշները (n = 5) հեռացվել են Cp NFRCS-ի տարբեր ֆրակցիաներից և ուսումնասիրված նմուշների BCT-ն գնահատվել է, ինչպես նկարագրված է ավելի վաղ «Մեթոդներ» բաժնում:
Մենք փորձել ենք մշակել տարբեր ձևեր և կառուցվածքներ՝ օգտագործելով Cp NFRCS կոմպոզիցիաները կենսաբժշկական տարբեր կիրառությունների համար:Նման ձևերը կամ կոնֆիգուրացիաները ներառում են կոնաձև շվաբրեր քթից արյունահոսության, ատամնաբուժական պրոցեդուրաների և գլանաձև շվաբրեր հեշտոցային արյունահոսության համար:
Բոլոր տվյալների հավաքածուներն արտահայտված են որպես միջին ± ստանդարտ շեղում և վերլուծվել են ANOVA-ով` օգտագործելով Prism 5.03 (GraphPad, Սան Դիեգո, Կալիֆորնիա, ԱՄՆ), որին հաջորդում է Բոնֆերոնիի բազմակի համեմատությունների թեստը (*p<0.05):
Մարդկային ուսումնասիրություններում իրականացված բոլոր ընթացակարգերը համապատասխանում էին Ինստիտուտի և Ազգային Հետազոտական ​​խորհրդի չափանիշներին, ինչպես նաև Հելսինկիի 1964 թվականի հռչակագրին և դրա հետագա փոփոխություններին կամ նմանատիպ էթիկական չափանիշներին:Բոլոր մասնակիցները տեղեկացվեցին հետազոտության առանձնահատկությունների և դրա կամավոր բնույթի մասին:Մասնակիցների տվյալները հավաքագրվելուց հետո մնում են գաղտնի:In vitro TEG փորձարարական արձանագրությունը վերանայվել և հաստատվել է Կաստուրբա բժշկական քոլեջի ինստիտուցիոնալ էթիկայի հանձնաժողովի կողմից, Մանիպալ, Կարնատակա (IEC: 674/2020):Կամավորները ստորագրել են արյան նմուշներ հավաքելու տեղեկացված համաձայնություն:
Կենդանիների ուսումնասիրություններում կատարված բոլոր ընթացակարգերն իրականացվել են Կաստուբայի բժշկության ֆակուլտետի, Մանիպալ բարձրագույն կրթության ինստիտուտի Մանիպալի (IAEC/KMC/69/2020) համաձայն:Կենդանիների վրա նախագծված բոլոր փորձերն իրականացվել են Կենդանիների վրա փորձերի վերահսկման և վերահսկողության կոմիտեի (CPCSEA) ուղեցույցներին համապատասխան:Բոլոր հեղինակները հետևում են ARRIVE ուղեցույցներին:
Բոլոր NFRCS-ների FTIR սպեկտրները վերլուծվել և համեմատվել են Նկար 2Ա-ում ներկայացված խիտոզանի սպեկտրի հետ:Խիտոզանի բնորոշ սպեկտրային գագաթները (գրանցվել են) 3437 սմ-1 (OH և NH ձգում, համընկնումը), 2945 և 2897 սմ-1 (CH ձգում), 1660 սմ-1 (NH2 լարվածություն), 1589 սմ-1 (N–H թեքում), 115 սմ-1 (ձգվածություն N–H), 115 սմ–1 սմ (O-H ճկում), 115 սմ–1 (O-H ճկում), 115 սմ–1 (0-1 սմ) երկրորդային հիդրոքսիլ), 993 սմ-1 (ձգվող CO, Bo-OH) 52.53.54.Լրացուցիչ աղյուսակ S1 ցույց է տալիս FTIR NFRCS կլանման սպեկտրի արժեքները chitosan-ի (թղթակից), մաքուր խիտոզանի, Cm-ի, Ch-ի և Cp-ի համար:Բոլոր NFRCS-ների FTIR սպեկտրները (Cm, Ch և Cp) ցույց տվեցին նույն բնորոշ կլանման շերտերը, ինչ մաքուր խիտոզանը, առանց որևէ էական փոփոխության (նկ. 2Ա):FTIR-ի արդյունքները հաստատեցին քիմիական կամ ֆիզիկական փոխազդեցությունների բացակայությունը պոլիմերների միջև, որոնք օգտագործվում էին NFRCS-ի մշակման համար՝ ցույց տալով, որ օգտագործված պոլիմերներն իներտ են:
Cm NFRCS-ի, Ch NFRCS-ի, Cp NFRCS-ի և Cs-ի in vitro բնութագրումը:(A) ներկայացնում է խիտոզանի և Cm NFRCS-ի, Ch NFRCS-ի և Cp NFRCS-ի կոմպոզիցիաների համակցված FTIR սպեկտրները սեղմման տակ:(B) ա) NFRCS Cm, Ch, Cp և Cg ամբողջ արյան կլանման արագությունը (n = 3);Ct նմուշները ցույց են տվել ավելի բարձր BAR, քանի որ բամբակյա շվաբրն ունի ավելի բարձր կլանման արդյունավետություն;բ) Արյունը արյան կլանումից հետո Կլանված նմուշի նկարազարդում:C փորձանմուշի BCT-ի գրաֆիկական ներկայացումը (Cp NFRCS-ն ուներ լավագույն BCT (15 վ, n = 3)): C, D, E և G-ի տվյալները ցուցադրվել են որպես միջին ± SD, իսկ սխալի գծերը ներկայացնում են SD, ***p <0.0001: C, D, E և G-ի տվյալները ցուցադրվել են որպես միջին ± SD, իսկ սխալի գծերը ներկայացնում են SD, ***p <0.0001: Данные в C, D, E и G представлены как среднее ± стандартное отклонение, а планки погрешноей представляют стандартное отклонение, ***p <0,0001. C, D, E և G-ի տվյալները ներկայացված են որպես միջին ± ստանդարտ շեղում, իսկ սխալի տողերը ներկայացնում են ստանդարտ շեղում, ***p<0.0001: C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD，误差线代表SD，***p <0,0001。 C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD，误差线代表SD，***p <0,0001。 Данные в C, D, E и G показаны как среднее значение ± стандартное отклонение, планки погрешноей представляют стандартное отклонение, ***p <0,0001. C, D, E և G-ի տվյալները ցուցադրվում են որպես միջին ± ստանդարտ շեղում, սխալի տողերը ներկայացնում են ստանդարտ շեղում, ***p<0.0001: