Ịnweta nri na nkesa na-edozi ahụ na-ejikọta nri ụmụ ahụhụ na àgwà akụkọ ndụ ndụ. Iji kwụọ ụgwọ maka adịghị ike na nri ụfọdụ dị iche iche na usoro ndụ dị iche iche, ụmụ ahụhụ nwere ike nweta nri ndị a site na nri mgbakwunye, dịka ọmụmaatụ, site n'inye ihe nzuzo vertebrate n'ime usoro a maara dị ka puddles. Anwụnta Anopheles arabiani na-egosi na ọ bụ erighị nri na-edozi ahụ, ya mere, ọ na-achọ ka ihe oriri na-edozi ahụ ma na-edozi ahụ. iji nyochaa ma An. mkpasu iwe arabiensis na mmamịrị ehi maka inweta nri na-eme ka njirimara akụkọ ndụ dị mma.
Jide n'aka na ọ dị mma.arabiensis dọtara isi ísì ọhụrụ, awa 24, awa 72, na mmamịrị ehi ochie 168, na ndị ọbịa na-eri nri (48-hour post-blood food) a tụrụ ụmụ nwanyị na Y-tube olfactometer, na ụmụ nwanyị dị ime na-anwale nyocha nke biochemical. Ngwakọta na mmamịrị ehi na mmamịrị ehi na klas anọ niile. A na-enyocha ngwakọta nke ngwakọta bioactive na Y-tube na nnwale ubi.To nyochaa mmamịrị ehi na isi nitrogen nwere urea dị ka ihe oriri nwere ike ime maka ọrịa ịba, a tụrụ nri nri na njirimara akụkọ ndụ ndụ. enyochara maka nlanarị, ụgbọ elu ejikọtara ọnụ, na mmeputakwa.
Chọọ maka ọbara na nri onye ọbịa.In laabu na ubi ọmụmụ, Arab na-adọta na eke na sịntetik senti nke ọhụrụ na agadi ehi mmamịrị.Pregnant inyom bụ indifferent ka cow mmamịrị azịza na spawning sites.Ọbịa-achọ na ọbara-aṅụ nwanyị ifịk ifịk na-amịkọrọ ehi mmamịrị na urea dị ka ndụ ọrụ dị ka ndụ physiological ego dị ka ndụ ọrụ dị ka ndụ-ọrụ nke steeti. maka ụgbọ elu, nlanarị, ma ọ bụ mmeputakwa.
Anopheles arabinis nnweta na nkesa nke ehi mmamịrị maka mma ndụ akụkọ ihe mere eme character.Supplemental nri nke ehi mmamịrị na-emetụta vector ikike kpọmkwem site na-amụba ndụ kwa ụbọchị na vector njupụta, na udiozi site na-agbanwe ụgbọ elu ọrụ na ya mere a ga-atụle n'ọdịnihu ụdị.
Ịnweta ihe oriri na nkesa na-ejikọta nri ụmụ ahụhụ na njirimara akụkọ ihe mere eme nke ndụ [1,2,3] . Ụmụ ahụhụ na-enwe ike ịhọrọ ma nweta nri ma na-enye nri na-akwụ ụgwọ na-adabere na nri nri na ihe ndị na-edozi ahụ [1, 3] . Nkesa nke ihe oriri na-adabere na usoro akụkọ ihe mere eme nke ndụ na nwere ike iduga dị iche iche chọrọ maka nri nri na ọnụ ọgụgụ dị iche iche na ndụ dị iche iche, iji kwụọ ụgwọ maka nkeji iri na ise. ụmụ ahụhụ nwere ike nweta nri ndị a site na nri mgbakwunye, dị ka na apịtị, dị iche iche excrement na secretions nke vertebrates, na carrion, usoro a maara dị ka puddles [2] . Ọ bụ ezie na a na-akọwapụta ụdị nru ububa na nla dị iche iche, oghere mmiri na-emekwa na iwu ụmụ ahụhụ ndị ọzọ, na mmasị na ịzụ nri na ụdị ihe onwunwe ndị a nwere ike inwe mmetụta dị ukwuu na ndụ-2his na ahụike ndị ọzọ, 6. ,7].Anwụnta ịba Anopheles gambiae sensu lato (sl) na-apụta dị ka onye toro eto 'na-adịghị eri nri' [8], ya mere ịgbara mmiri nwere ike ịrụ ọrụ dị mkpa na njirimara akụkọ ihe mere eme nke ndụ ya, ma a na-eleghara omume a anya ruo ugbu a.
Nri nitrogen n'ime ụmụ nwanyị toro eto Anopheles anwụnta na-ejedebe n'ihi obere caloric dị na-ebu site na ụgbụgbọ na iji nri ọbara na-adịghị arụ ọrụ [9]. anwụnta nwere ike iji nri mgbakwunye nke vertebrate excreta iji nweta ogige nitrogenous nke na-eme ka mgbanwe na mgbanwe ụgbọ elu, dị ka ụmụ ahụhụ ndị ọzọ na-egosi [2].N'akụkụ a, ihe siri ike na nke dị iche iche nke otu n'ime ụdị nwanne n'ime An.The Gambian sl ụdị mgbagwoju, Anopheles arabinis, ọhụrụ na agadi mmamịrị ehi, Abin, 3 bụ ihe na-akpali mmasị. opportunistic na mmasị ndị ọbịa ya ma mara na ọ na-akpakọrịta ma na-eri nri na anụ ụlọ. Urine ehi bụ ihe onwunwe bara ụba na ogige nitrogenous, na urea na-aza 50-95% nke mkpokọta nitrogen na mmamịrị ọhụrụ [15, 16] . Dị ka mmamịrị ehi na-eto eto, microorganisms na-eji ihe ndị a eme ihe iji belata mgbagwoju anya n'ime awa 5 nke nitrogen.24. jikọtara ya na mbelata nke organic nitrogen, alkalophilic microorganisms (ọtụtụ n'ime ha na-emepụta ogige ndị na-egbu egbu na anwụnta) na-eme nke ọma [15], nke nwere ike ịbụ nwanyị Ann.arabiensis na-adọrọ mmasị na mmamịrị dị afọ 24 awa ma ọ bụ obere [13, 14].
N'ime ọmụmụ ihe a, a na-ele anya maka ndị ọbịa na ndị na-eri nri na ọbara. N'oge usoro gonadotropin mbụ ya, a na-enyocha arabiensis maka ịnweta ogige nitrogenous, gụnyere urea, site na ngwakọta mmamịrị. Ọzọ, a na-eduzi usoro nyocha iji chọpụta otú anwụnta nwanyị na-ekenye ihe oriri a nwere ike ime ka ọ dịkwuo mma maka ndụ, mmepụta na mmepụta nke ọhụrụ. A na-enyocha mmamịrị iji chọpụta ma ndị a na-enye ihe ngosi ndị a pụrụ ịdabere na ya maka ndị ọbịa na ndị na-enye ọbara nri An. N'ịchọ nke a nwere ike inye ihe oriri na-edozi ahụ, arabiensis chọpụtara njikọ nke kemịkalụ n'azụ ihe dị iche iche a na-ahụ anya.Synthetic odor mixs of volatile organic compounds (VOCs) chọpụtara na 24-hour agadi mmamịrị na-nyochaa nyochaa n'okpuru ubi ọnọdụ, ịgbatị na nsonaazụ nke enwetara n'okpuru ọnọdụ ubi, na-agbatị mmetụta nke borine dị iche iche. physiological steeti. Mmanya anwụnta. Nsonaazụ enwetara na-akwado na An. arabiensis na-enweta ma na-ekesa ogige nitrogenous dị na mmamịrị vertebrate iji metụta àgwà akụkọ ihe mere eme nke ndụ. A na-atụle nsonaazụ ndị a n'ihe gbasara ọrịa na-akpata ọrịa na otú e nwere ike isi jiri ha mee ihe maka nlekota vector na njikwa.
A na-edobe arabicans Anopheles (ndụ Dongola) na 25 ± 2 ° C, 65 ± 5% RH na 12: 12 h ìhè: okirikiri gbara ọchịchịrị. A na-azụta larvae na trays plastik (20 cm × 18 cm × 7 cm) jupụtara na mmiri mmiri na-ekpo ọkụ ma na-anakọta Tetramin® nri azụ, TetraeP. 30 ml iko (Nolato Hertila, Åstorp, SE) wee bufee ya na oghere Bugdorm (30 cm × 30 cm × 30 cm; MegaView Science, Taichung, Taiwan) iji kwe ka ndị okenye pụta. na distilled mmiri tupu nnwale, dị ka akọwara n'okpuru ebe a. Ụmụ nwanyị na-eji maka ụgbọ elu tube nnwale na-agụụ maka nanị 4-6 awa na mmiri ad libitum. Iji kwadebe ọbara-aṅụ anwụnta maka ụdi bioassays, 4 dpe inyom e nyere defibrotic atụrụ ọbara (Håtunalab, Bro, SE) iji a membrane feeding system (Helprington Workshomotes UK). A na-ebufe ụmụ nwanyị na oghere ndị mmadụ n'otu n'otu ma nye nri ozugbo, dị ka akọwara n'okpuru ebe a, ma ọ bụ 10% sucrose ad libitum maka ụbọchị 3 tupu nyocha ndị a kọwara n'okpuru ebe a. A na-eji ụmụ nwanyị ndị ikpeazụ mee ihe maka ụgbọ elu tube bioassays ma nyefee ya na ụlọ nyocha, wee nwee mmiri ad libitum distilled maka awa 4-6 tupu nnwale ahụ.
A na-eji nyocha nri iji chọpụta mmamịrị na oriri urea na ndị okenye An.Arab nwanyi.A na-enye ndị na-achọ onye ọbịa na ụmụ nwanyị na-enye ọbara nri nke nwere 1% diluted mmamịrị ehi ọhụrụ na agadi, ihe dị iche iche nke urea, na njikwa abụọ (10% sucrose na mmiri) maka 48 h. Tụkwasị na nke ahụ, agba agba nri (1 mg xy 1 mg cyanide). 2650-17-1; Sigma-Aldrich, Stockholm, SE) na-agbakwunyere na nri ma nye ya na 4 × 4 matrix na 250 µl microcentrifuge tubes (Axygen Scientific, Union City, CA, US; Figure 1A) Jupụta n'akụkụ ọnụ (~ 300 µl mmetụta nke nwere ike ime n'etiti 1 moquito). anwụnta na nnukwu efere Petri (12 cm na dayameta na 6 cm n'ịdị elu; Semadeni, Ostermundigen, CH; Figure 1A) n'ọchịchịrị zuru oke na 25 ± 2 cm Celsius C na 65 ± 5% iru mmiri iru mmiri. A na-emeghachi nyocha ndị a ugboro 5 ruo 10. Mgbe ekpughere nri, anwụnta 20 na-etinye ya na - nyocha ọzọ.
Chọọ maka mmamịrị anụ na urea nke onye ọbịa na-amịkọrọ ọbara na nwanyị na-aṅụ ọbara Anopheles arabianus.N'nnwale nri (A), a na-enye ụmụ nwanyị anwụnta nri nke gụnyere mmamịrị ehi ọhụrụ na agadi, urea dị iche iche, sucrose (10%), na mmiri distilled (H2O) .Ọ dịghị onye na-achọ (B) na-eri nri karịa nwanyị. na host-achọ nwanyị etinye obi gị dum 72-hour cow mmamịrị erughị 168-hour ehi mmamịrị (B) .The mean total nitrogen content (± standard deviation) nke mmamịrị na-anọchi anya na inset.Ọbịa-achọ (D, F) na ọbara-aṅụ (E, G) nwanyị na-elu urea na dose-dependent manner.Mean inhaled leta (D) dị iche iche na nke ọ bụla ọzọ aha (D) dị iche iche aha (D). ANOVA na-eji Tukey's post hoc analysis;p <0.05) .Ogwe mperi na-anọchite anya njehie ọkọlọtọ nke pụtara (BE) .Akara akara kwụ ọtọ na-anọchi anya ahịrị nlọghachi nke log-linear (F, G)
Iji hapụ nri na-etinye uche n'ihe, a na-etinye anwụnta n'otu n'otu n'ime 1.5 ml microcentrifuge tubes nwere 230 µl nke mmiri distilled na anụ ahụ mebiri site na iji pestle na cordless moto (VWR International, Lund, SE), na-esote centrifugation na 10 krpm maka 10 min . Achọpụtara microplate (Sigma-Aldrich) na absorbance (λ620) site na iji spectrophotometer dabeere na microplate reader (SPECTROStar® Nano, BMG Labtech, Ortenberg, DE) nm).N'aka nke ọzọ, a na-akụ anwụnta n'ime 1 ml nke mmiri distilled, 900 »te maka nyocha nke cucumbers. 620 nm; UV 1800, Shimadzu, Kista, SE) .Iji chọpụta ihe oriri na-eri nri, a na-akwadebe usoro nhazi site na dilution iji nweta 0.2 µl na 2.4 µl nke 1 mg ml-1 xylene cyanide. Mgbe ahụ, a na-eji njupụta anya nke ihe eji esiji mee ihe na nri ọ bụla.
A na-enyocha data olu site na iji nyocha otu ụzọ nke ọdịiche (ANOVA) sochiri Tukey's post hoc pairwise ntụnyere (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc., Cary, NC, US, 1989-2007) .Linear regression analysiss kọwara nlebara anya na-adabere na urea oriri na atụnyere nzaghachi n'etiti ndị ọbịa-na-ahụ n'anya onye ọbịa. v8.0.0 maka Mac, GraphPad Software, San Diego, CA, US).
Ihe dị ka 20 µl nke ihe nlele mmamịrị sitere na afọ ọ bụla na-ejikọta na Chromosorb® W/AW (10 mg 80/100 mesh, Sigma Aldrich) na mkpuchi na capsules tin (8 mm × 5 mm). A na-etinye capsules n'ime ụlọ combustion nke CHNSFlash/O analyzer Waltham, MA, US) iji chọpụta ọdịnaya nitrogen dị n'ime mmamịrị ọhụrụ na nke merela agadi dịka ụkpụrụ ndị nrụpụta si dị. Ngụkọta nitrogen (g N l-1) ka agbadoro dabere na mkpokọta urea amaara ejiri dị ka ọkọlọtọ.
Iji chọpụta mmetụta nke nri na-achọ ndị ọbịa na ndụ ụmụ nwanyị na-aṅụ ọbara, a na-etinye anwụnta n'otu n'otu na nnukwu efere Petri (12 cm na dayameta na 6 cm n'ịdị elu; Semadeni) nke nwere oghere na-ekpuchi ntupu na mkpuchi (3 cm na dayameta) na Maka ventilashion na nri nri. A na-enye nri ozugbo mgbe 4 dpe gachara ma tinye 1% diluw nke ọhụrụ na uzuzu uzuzu na anọ. njikwa, 10% sucrose na mmiri. Onye ọ bụla nri e pipetted na a eze tampon (DAB Dental AB, Upplands Väsby, SE) ịtinye n'ime a 5 ml sirinji (Thermo Fisher Scientific, Gothenburg, SE), plunger wepụrụ, na-etinye n'elu a petri efere (kọwara 1). A na-agụ anwụnta ugboro abụọ n'ụbọchị, ebe anwụnta nwụrụ anwụ na-atụfu ruo mgbe anwụnta ikpeazụ nwụrụ (n = 40 kwa ọgwụgwọ). A na-enyocha ndụ anwụnta na-eri nri dị iche iche site na iji Kaplan-Meyer survival curves na log-rank tests iji tụnyere nkesa nkesa ndụ n'etiti diets (IBM SP.SS0) .
A omenala anwụnta na-efe efe igwe igwe dabeere na Attisano et al.[17], mere nke 5 mm oké doro anya acrylic panels (10 cm obosara x 10 cm ogologo x 10 cm elu) na-enweghị n'ihu na azụ ogwe (Fig. 3: top) .A pivot mgbakọ na a vetikal tube mere nke gas chromatography kọlụm (0.25 mmle mkpagide na njedebe L;) Otu ụzọ magnetik neodymium dị 9 cm n'ebe dịpụrụ adịpụ. Otu tube dị n'ahịrị nke otu ihe ahụ (6.5 cm L) na-eme ka tube kwụ ọtọ na-emepụta ogwe aka na-ejikọta ya na ogwe aka nke na-ebu obere mpempe akwụkwọ aluminom dị ka ihe mgbaàmà na-egbochi ọkụ.
A na-enye ụmụ nwanyị 24-hour agụụ na-eri nri dị n'elu maka nkeji 30 tupu ha ejide onwe ha. A na-egbutu anwụnta ụmụ nwanyị na-eri nri zuru oke na ice maka 2-3 min ma tinye ya na ntụtụ ahụhụ na beeswax (Joel Svenssons Vaxfabrik AB, Munka Ljungby, SE) wee kechie ya na tubes nke ụgbọ elu. omenala-wuru data logger, wee chekwaa ma gosipụta site na iji PC-Lab 2000 ™ software (v4.01; Velleman, Gavere, BE) .A na-etinye igwe igwe ụgbọ elu n'ime ụlọ na-achịkwa ihu igwe (12 h: 12 h, ìhè: ọchịchịrị, 25 ± 2 ° C, 65 ± 5% RH).
Iji jiri anya nke uche hụ usoro nke ọrụ ụgbọ elu, a na-agbakọ ogologo oge (m) na ọnụ ọgụgụ nke ọrụ ụgbọ elu na-aga n'ihu kwa elekere n'ime oge awa 24. Tụkwasị na nke ahụ, a na-atụle nkezi anya nke ụmụ nwanyị n'otu n'otu na-agafe na ọgwụgwọ ma nyochaa site na iji otu ụzọ ANOVA na Tukey's post hoc analysis (JMP Pro, v14.0.0), bụ nke a na-ewere na SAS na-agbanwe anya dị anya, ebe a na-atụle nkezi ọgwụgwọ dị anya Inc. ihe kpatara ya. Ọzọkwa, a na-agbakọ ọnụ ọgụgụ nke agba agba na nkeji iri 10.
Iji chọpụta mmetụta nke nri na arụmọrụ ịmụ nwa nke An.arabiensis, a na-ebufe ụmụ nwanyị isii (4 dpe) ozugbo na oghere Bugdorm (30 cm × 30 cm × 30 cm) mgbe nchịkọta ọbara gasịrị wee nye nri nnwale maka 48 h dị ka akọwara n'elu. E wepụrụ nri nri na iko spawning (30 ml; Nolato Hertila) jupụtara na mmiri 8 nke atọ n'ụbọchị nke atọ. awa, na-agbanwe kwa awa 24. Tinyegharịa usoro nri ọ bụla ugboro 20-50. A na-agụta akwa ma dekọọ maka ụlọ nyocha ọ bụla. A na-eji ihe atụ nke àkwá mee ihe iji chọpụta nha nha na ogologo mgbanwe dị iche iche nke àkwá ọ bụla (n ≥ 200 kwa nri) na-eji Dialux-20 microscope (DM1000; Ernst, Leratz Weitz Weitz) (DFC) 320 R2; Leica Microsystems Ltd., DE) The fọdụrụ nsen nọ na-na a ihu igwe na-achịkwa ụlọ n'okpuru ọkọlọtọ ịzụ ọnọdụ maka 24 h, na a subsample nke na-adịbeghị anya pụta 1st instar larvae (n ≥ 200 kwa nri) e tụrụ, dị ka akọwara n'elu.The ọnụ ọgụgụ nke àkwá na size nke àkwá na larvae e tụnyere n'etiti ọgwụgwọ na iji otu-nyocha ProJ. v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Headspace volatiles si ọhụrụ (1 hr post-sampling), 24 hr, 72 hr na 168 hr agadi mmamịrị na-anakọtara site sample anakọtara site Zebu ehi, Arsi agbụrụ. Maka mma, mmamịrị samples na-anakọtara n'isi ụtụtụ mgbe ehi ka nọ n'ụlọ. polyamide baking bags (Toppits Cofresco, Frischhalteprodukte GmbH na Co., Minden, DE) na 3 l polyamide na mkpuchi Na vinyl chloride plastic drums.Headspace volatiles si nke ọ bụla bovine urine sample e anakọtara ma ozugbo (ọhụrụ) ma ọ bụ mgbe maturation na ụlọ okpomọkụ maka 24 h, 68 afọ urine otu onye nnọchiteanya nke ọ bụla h.
Maka mkpokọta volatiles headspace, a na-eji usoro mechiri emechi mee ihe iji gbasaa ikuku carbon carbon-filtered na-arụ ọrụ (100 ml min-1) site na akpa polyamide na kọlụm adsorption maka 2.5 h site na iji mgbapụta mgbapụta diaphragm (KNF Neuberger, Freiburg, DE) .N'ihi njikwa, a na-eme mkpokọta isi ihe na-enweghị isi. tubing (5.5 cm x 3 mm id) nwere 35 mg nke Porapak Q (50/80 mesh; Waters Associates, Milford, MA, US) n'etiti iko ajị anụ. Aldrich) .A na-eji 400 μl nke pentane mee ka ihe ndị na-eme ka ọ bụrụ ihe na-adịghị mma.
Azịza omume omume nke ịchọ ndị ọbịa na iri ọbara An.Headspace volatile extracts anakọtara site na ọhụrụ, 24-h, 72-h, na 168-h-aged mmamịrị maka ihe ndị na-agbanwe agbanwe sitere na anwụnta Arabidopsis site na iji tube olfactometer kwụ ọtọ [18] .Nnwale ndị a na-eduzi n'ụlọ 13- n'oge oge nke ZT5. Arụ ọrụ.Arab [19] . A na-eji olfactometer iko tube olfactometer (80 cm × 9.5 cm id) mee ka ìhè na 3 ± 1 lx nke ọkụ na-acha uhie uhie si n'elu. A na-enyocha unyi na ikuku ikuku (25 ± 2 ° C, 65 ± 2% iru mmiri) gafere bioassay na 30 cm s-enweghị ihe na-eme ka ọ bụrụ ihe na-eme ka ígwè na-emepụta ihe na-emepụta ihe na-emepụta ihe na-emepụta ihe na-ekpuchi ígwè lash. a edo plume Ọdịdị.Dental tampon dispenser (4 cm × 1 cm; L: D; DAB Dental AB), kwụsịtụrụ si a 5 cm eriri igwe na windward ọgwụgwụ nke olfactometer, na stimulator mgbanwe ọ bụla 5 nkeji. Maka nyocha, 10 μl nke ọ bụla headspace wepụ, diluted 1:10, e ji mee ihe dị ka a hà ego nke stimuling. A na-etinye anwụnta na-achọ onye ọbịa ma ọ bụ na-aṅụ ọbara n'ime ụlọ ntọhapụ nke onye ọ bụla 2-3 awa tupu mmalite nke nnwale ahụ. A na-etinye oghere ntọhapụ n'akụkụ ihu ala nke olfactometer, na anwụnta na-ekwe ka acclimate maka 1 min, mgbe ahụ, valvụ nru ububa nke ọnụ ụlọ ahụ meghere ka ọ hapụ ya. Ihe na-adọrọ mmasị n'ime ebe a na-ahụ maka ọgwụgwọ ma ọ bụ njikwa ahụ bịara n'ime ebe a na-ahụ maka ọgwụgwọ na proquito. 5 nkeji mwepụta. Onye ọ bụla headspace volatile extract and control were replicated at least 30 times, and tozere the effects of any one day, the same number of therapy and controls were tested on each experimental day.Chọọ nzaghachi site ọbịa na ọbara nri Ans.Arabic versus headspace sets were nyochara iji nominal logistic regression sochirinụ site pairwise, ntụnyere . Inc.).
A na-enyocha ihe ndị na-esi na mmamịrị ehi ọhụrụ na nke merela agadi n'ime oghere Bugdorm (30 cm × 30 cm × 30 cm; MegaView Science). Iko plastik (30 ml; Nolato Hertila) jupụtara na 20 mL nke mmiri na-ekpo ọkụ na-enye mkpụrụ osisi na-agbapụta ma tinye ya na akụkụ dị iche iche nke iko. 10 μl nke ọ bụla headspace wepụ na a 1:10 dilution.An hà ego nke pentane e ji dozie akara cup.Treatment na akara iko e gbanwere n'etiti onye ọ bụla nnwale na-achịkwa maka ọnọdụ mmetụta.Ten ọbara nri ụmụ nwanyị e wepụtara n'ime nnwale cages na ZT 9-11 na àkwá na iko e gua 24 awa mgbe e mesịrị. iko - ọnụ ọgụgụ nke àkwá ndị a na-etinye na iko nchịkwa) / (ọnụọgụ ọnụ ọgụgụ nke nsen). A na-emeghachi ọgwụgwọ ọ bụla ugboro 8.
Gas chromatographic na electron antenna pattern detection (GC-EAD) nyocha nke nwanyị An.arabiensis ka a rụrụ dị ka akọwara mbụ [20] .Na nkenke, ọhụrụ headspace volatile extracts e kewara site na iji Agilent Teknụzụ 6890 GC (Santa Clara, CA, US) onwem na HP-5 (30 m × 0.0.25 mm kọlụm, Id Teknụzụ). na mmamịrị ịka nká. A na-eji hydrogen dị ka usoro mkpanaka na nkezi linear eruba ọnụego nke 45 cm s-1. Onye ọ bụla sample (2 μl) e injected maka 30 sekọnd na splitless mode na ihe ntinye okpomọkụ nke 225 Celsius C. The GC oven okpomọkụ e mere site 35 °C (3 nkeji njide) ka 300 °C na nkeji 10C (10.0C). Effluent splitter, 4 psi nke nitrogen na-agbakwunyere na kewaa 1: 1 na Gerstel 3D / 2 dị ala nwụrụ anwụ cross cross (Gerstel, Mülheim, DE) n'etiti ọkụ ionization detector na EAD. The GC effluent capillary maka EAD gafere site Gerstel ODP-2 nyefe akara, nke tracks na 5 × 8 ° C oven, gbakwunyere okpomọkụ nke 5 × 1 mm. a na-ejikọta ya na carbon-filtered, humidified air (1.5 l min-1) . A na-etinye antenna ahụ 0.5 cm site na ntinye nke tube ahụ. Anwụnta ọ bụla na-agụta otu oyiri, na maka anwụnta na-achọ ndị ọbịa, ọ dịkarịa ala ugboro atọ ka a na-eme na urine sample nke afọ ọ bụla.
Nchọpụta nke ogige bioactive na nchịkọta isi nke mmamịrị bovine ọhụrụ na agadi site na iji GC jikọtara ọnụ na spectrometer (GC-MS; 6890 GC na 5975 MS; Agilent Teknụzụ) iji nweta nzaghachi antennal na nyocha GC-EAD, na-arụ ọrụ na ọnọdụ ionization electron na 70 eV-GC nwere ikike siri ike nke HP-5. kọlụm (60 m × 0.25 mm n'ime dayameta, 0,25 μm film ọkpụrụkpụ) iji helium dị ka mobile na-adọ na nkezi linear eruba ọnụego nke 35 cm s-1.A 2 μl sample e injected iji otu injector ntọala na oven okpomọkụ dị ka GC-EAD analysis.Compounds e chọpụtara dabeere na ha na-ejigide oge n'ọbá akwụkwọ (Ková). Ọbá akwụkwọ NIST14 (Agilent) .Achọpụtara ogige ndị a na-achọpụta site n'ịgbanye ụkpụrụ ziri ezi (Nkọwa mgbakwunye 1: Tebụl S2) .N'ihi na ọnụọgụ, heptyl acetate (10 ng, 99.8% chemical purity, Aldrich) na-agbanye dị ka ọkọlọtọ mpụga.
Ịtụle irè nke a sịntetik isi ngwakọta mejupụtara bioactive ogige mara na ọhụrụ na agadi mmamịrị na-adọta ndị ọbịa-achọ na ọbara-aṅụ Ans.arabiensis, na-eji otu olfactometer na protocol dị ka above.Synthetic ngwakọta mimicked na mejupụtara na nha nke ogige na ngwakọta headspace agbanwe agbanwe2-hour,4-hour,4-hour,8-hour. 72-hour, na 168-hour mmamịrị (Nyocha 5D-G; Mgbakwunye File 1: Table S2) .N'ihi na nyocha, jiri 10 μl nke a 1: 100 dilution nke n'ụzọ zuru ezu sịntetik ngwakọta, na mkpokọta ntọhapụ ọnụego sitere na mkpokọta 140-2400 ng h-1, n'ihi na-enyocha ọbara-na-mma na-na-na-na-na-na-na-na-na-na-na-na-na-na-na-na-na-na-na-na-na-na-nlekọta ọbara. Ngwakọta zuru oke, nke a na-ewepụ ihe ngwakọta subtractive nke otu ogige nke ngwakọta zuru oke.Chọọ nzaghachi sitere na ndị ọbịa na nri Ans.Arab vs synthetic na subtractive ngwakọta e nyochara site na iji nominal logistic regression sochiri pairwise ntụnyere maka odd ratios (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Iji chọpụta ma mmamịrị ehi nwere ike bụrụ ebe obibi maka anwụnta ịba, mmamịrị ehi ọhụrụ na nke merela agadi, nke anakọtara dịka akọwara n'elu, ma tinye mmiri n'ime bọket 3 l (100 ml) ma tinye n'ọnyà ndị ọbịa. (BG-HDT version; BioGents, Regensburg, DE) .Iri ọnyà enịm 50 m iche na ịta nri, 400 m si obodo obodo (Silay, Ethiopia, 5°53′24′N, 37°29′24′′E) na ọ dịghị anụ ụlọ, na-adịgide adịgide ozuzu mgbakwasị na obodo. A na-atụgharị ebe ọgwụgwọ n'abalị kwa abalị maka ngụkọta nke abalị ise. A na-eji ọnụọgụ anwụnta ejidere na ọnyà nke mmamịrị afọ dị iche iche na-eji ntụgharị logistic na nkesa beta binomial (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
N'ime obodo ịba-ndemic nke dị nso na obodo Maki, mpaghara Oromia, Etiopia (8 ° 11' 08 ″ N, 38° 81′ 70″ E; Figure 6A) . A na-eduzi ọmụmụ ihe n'etiti etiti August na etiti Septemba tupu ịgbanye ụlọ ime ụlọ kwa afọ, yana ogologo oge mmiri ozuzo. Akụkụ ise-5 nke dị na mpụga obodo a họọrọ. ọmụmụ (Fig 6A) .Njikere eji ahọrọ ụlọ ndị ahụ bụ: ọ dịghị anụmanụ a na-anabata n'ime ụlọ, a naghị anabata nri ime ụlọ (isere nkụ ma ọ bụ unyi) (ma ọ dịkarịa ala n'oge oge ikpe), na ụlọ ndị nwere ihe karịrị mmadụ abụọ bi, na-ehi ụra n'enweghị ihe mgbochi. n'okpuru a na-emeso anwụnta net.Ethical nkwenye e nyere site Institutional Research Ethics Review Board (IRB/022/2016) nke Faculty of Natural Sciences (CNS-IRB), Addis Ababa University, dị ka ụkpụrụ nduzi guzosie ike site World Medical Association Nkwupụta nke Helsinki.Consent si onye ọ bụla isi nke ezinụlọ e nwetara site n'enyemaka nke ndị ọrụ nlekọta ahụike mpaghara. ('kebele') larịị. Nnwale nnwale ahụ gbasoro nhazi square Latin 2 × 2, bụ nke a na-ekenye ngwakọta synthetic na njikwa maka ụlọ ndị jikọtara ọnụ n'abalị mbụ wee gbanwee n'etiti ụlọ na abalị nnwale ọzọ. A na-emegharị usoro a ugboro iri. Ọzọkwa, iji chọpụta ọrụ anwụnta n'ụlọ ndị ahọpụtara, a na-edozi ọnyà CDC ka ọ na-agba ọsọ ise n'otu oge, n'etiti abalị na etiti abalị n'otu oge ahụ.
Ngwakọta sịntetik nke nwere ogige bioactive isii ka agbazere na heptane (97.0% mgbaze GC grade, Sigma Aldrich) wee wepụta ya na 140 ng h-1 site na iji owu wick dispenser [20]. Nchịkwa na Mgbochi Ọrịa (CDC) ọkụ ọkụ (John W. Hock Company, Gainesville, FL, US; Figure 6A) . A na-atụkwasị ọnyà ndị ahụ 0.8 - 1 m n'elu ala, n'akụkụ ụkwụ nke ihe ndina ahụ, na onye ọrụ afọ ofufo na-ehi ụra n'okpuru anwụnta na-adịghị edozi ma na-arụ ọrụ n'etiti 18: 00 na 06: 30, na-enwe mmekọahụ site na mmekọahụ. ọkara ime, na ime [21] e mechara enyocha ya site na iji polymerase chain reaction (PCR) analysis iji mata ụdị morphologically amata dị ka A. gambiae sl. Ndị otu mgbagwoju [23]. 0. SAS Institute Inc.) N'ebe a, anyị na-akọ χ2 na p-values ​​site na ule nke nwere ike.
Nyochaa ma ọ bụ nchekwa.arabiensis nwere ike nweta mmamịrị, isi iyi nitrogen ya, urea, site na nri nri kpọmkwem, n'ime 48 h nke nchịkwa maka 4 ụbọchị post (dpe) na-achọ ndị ọbịa na ọbara na-eri nri ụmụ nwanyị na-eri nri (Fig 1A) .Ma ndị ọbịa na-achọ na ụmụ nwanyị na-aṅụ ọbara na-etinye uche dị ukwuu = sucrose karịa ihe ọ bụla ọzọ 5 ma ọ bụ mmiri (F52). 0.0001 na F (5,299) = 56.00, p <0.0001, otu; mM ma e jiri ya tụnyere ihe ndị ọzọ niile na mmiri, ebe a na-apụghị ịmata ọdịiche dị na 10% sucrose (F (10,813) = 15.72, p <0.0001; Figure 1D). 78.35, p <0.0001; Figure 1.1E) .Ọzọkwa, mgbe atụnyere n'etiti abụọ physiological steeti, phlebotomized inyom na-etinye uche na urea karịa ndị ọbịa na-achọ ndị inyom na ndị kasị ala, na ndị inyom na-etinye uche dị otú ahụ nke urea na elu mkpokọta (F (1,950.0), p = 0. 1F, G) .Ọ bụ ezie na oriri sitere na nri nwere urea pụtara na ha nwere ụkpụrụ kachasị mma (Fig 1D, E), ụmụ nwanyị na steeti physiological abụọ nwere ike ịmegharị ọnụọgụ nke urea na-etinye n'ime oke urea niile na log-linear fashion (Fig 1F, G). .N'otu aka ahụ, anwụnta na-egosi na ọ na-achịkwa ntinye nitrogen ha site n'ịchịkwa ọnụ ọgụgụ nke mmamịrị na-etinye n'ime ya, dịka ọnụọgụ nitrogen dị na mmamịrị na-egosipụta na ọnụọgụ nke etinyere (Figure 1B, C na B insets).
Iji chọpụta mmetụta nke mmamịrị na urea na-achọ ndị ọbịa na anwụnta na-aṅụ ọbara, a na-enye ụmụ nwanyị nri mmamịrị nke afọ anọ niile (ọhụrụ, 24 h, 72 h, na 168 h post-deposition) na ọnụọgụ urea dị iche iche, yana mmiri mmiri na-ekpo ọkụ na 10 % sucroseure jere ozi dị ka nchịkọta dị ịrịba ama na nchịkwa 2 nke a na-eri nri. nlanarị n'ime ụmụ nwanyị na-achọ nnabata (mmamịrị: χ2 = 108.5, df = 5, p <0.0001; urea: χ2 = 122.8, df = 5, p <0.0001; Fig. 2B, C) na ụmụ nwanyị na-eri ọbara (p = 9 χ0, p = 9 χ0). 0.0001; urea: χ2 = 137.9, df = 5, p <0.0001; Figure 2D,E) .N'ime nyocha niile, ụmụ nwanyị na-eri nri nke mmamịrị, urea, na mmiri nwere obere ndụ ndụ ma e jiri ya tụnyere ụmụ nwanyị na-eri nri na-edozi ahụ dị iche iche. ọnụego, na ndị na-eri nri 72-h stale mmamịrị (p = 0.016) na-enwe ndị kasị ala ndụ puru omume (Fig. 2B) . Ọzọkwa, ndị ọbịa na-achọ ndị inyom na-eri nri 135 mM urea na-adị ndụ ogologo oge karịa njikwa mmiri (p <0.04) (Fig. 2C = ndụ dị ogologo ndụ na mmiri, ụmụ nwanyị na urine 2). 0.001 na p = 0.012, n'otu n'otu; Figure 2D), ebe ndị inyom na-eri nri na 72-hour mmamịrị na-adị ndụ ogologo oge karịa ndị na-eri nri ụmụ nwanyị obere mmamịrị ọhụrụ na 24-hour mmamịrị (p <0.0001 na p = 0.013, n'otu n'otu; Figure 2D, 5-mfure) niile ọzọ karịa ụmụ nwanyị. ntinye nke urea na mmiri (p <0.013; Figure 2E).
Ịlanahụ nke onye ọbịa na nwanyị na-aṅụ ọbara Anopheles arabinis na-eri nri na mmamịrị ehi na urea.Na bioassay (A), a na-enye anwụnta nwanyị nri nke gụnyere mmamịrị ehi ọhụrụ na agadi, ọkwa dị iche iche nke urea, sucrose (10%) na mmiri distilled (H2O) .The survival of host-achọ, ọbara (B) ọ bụla (B) moquis. 12 awa ruo mgbe ụmụ nwanyị niile na-eri nri na mmamịrị (B, D) na urea (C, E), na njikwa, Sucrose na mmiri, anwụọla.
Ngụkọta anya na ọnụ ọgụgụ nke agba agba kpebisiri ike na ule igwe igwe ụgbọ elu n'elu oge elekere 24 dị iche n'etiti ndị na-achọ ndị ọbịa na anwụnta na-aṅụ ọbara, nke gosipụtara obere ọrụ ụgbọ elu n'ozuzu (Fig 3) .Ọnwụ anwụnta na-achọ ndị ọbịa nke na-enye mmamịrị ọhụrụ na agadi mmamịrị ma ọ bụ sucrose na mmiri gosipụtara ụdị ụgbọ elu dị iche iche (Fig 3), na ụmụ nwanyị na-eri nri mgbe ha na-eri nri na-arụ ọrụ n'ụbọchị ọhụrụ 4. 168-hour agadi anwụnta nke na-eri nri na mmamịrị na-egosipụta ụdị ụgbọ elu dị iche iche ma bụrụ ndị bụ isi kwa ụbọchị. Nwanyị nwanyị nke na-enye sucrose ma ọ bụ mmamịrị awa 72 gosipụtara ọrụ n'ime oge 24-hour, ebe ụmụ nwanyị ndị na-enye mmiri na-arụsi ọrụ ike n'oge etiti oge. anwụnta na-eri nri n'ụtụtụ na n'isi ụtụtụ nke na-eme ka a na-arụ ọrụ n'isi ụtụtụ na nke na-eme ka a na-arụ ọrụ n'isi ụtụtụ na nke na-eme ka a na-arụ ọrụ n'isi ụtụtụ. mmamịrị gbara awa iri asaa na abụọ nwetara mbelata n'ọrụ n'ime awa 24 (Foto 3).
Flight arụmọrụ nke dinta na-achọ ọbara na-aṅụ nwanyị Anopheles arabinis na-eri nri na mmamịrị ehi na urea.N'ime ule igwe igwe ụgbọ elu, anwụnta nwanyị na-eri nri na mmamịrị ehi ọhụrụ na agadi, ọkwa dị iche iche nke urea, sucrose (10%), na mmiri distilled (H2O) na-ejikọta ya na kwụ ọtọ, na-agbagharị agbagharị (hụta ọbara). (n'aka nri) ụmụ nwanyị, ngụkọta anya na ọnụ ọgụgụ nke ụgbọ elu kwa elekere maka nri ọ bụla n'ime oge awa 24 ka edere (ọchịchịrị: isi awọ; ìhè: ọcha) .A na-egosi nkezi anya na nkezi ọnụ ọgụgụ nke bouts n'aka nri nke graph ọrụ circadian. Ogwe njehie na-anọchite anya njehie ọkọlọtọ nke ihe ọ pụtara. Nyocha nchịkọta akụkọ lee ederede.
N'ozuzu, ọrụ ụgbọ elu nke ụmụ nwanyị na-achọ ndị ọbịa na-agbaso ụkpụrụ yiri nke njem ụgbọ elu n'ime oge awa 24. Ogologo ụgbọ elu na-emetụta nke ọma site na nri nri (F(5, 138) = 28.27, p <0.0001), na ụmụ nwanyị na-achọ ndị ọbịa na-eri nri 72 awa mmamịrị na-efe efe ogologo oge niile (p) ma e jiri ya tụnyere nri ndị ọzọ dị ogologo (p00). anwụnta na-eri nri sucrose na-efe efe ogologo oge karịa ọhụrụ (p = 0.022) na 24-h-aged (p = 0.022) anwụnta na-eri nri. N'adịghị ka usoro ọrụ ụgbọ elu kọwara site na nri mmamịrị, ụmụ nwanyị na-achọ ndị ọbịa na-eri urea gosipụtara ọrụ ụgbọ elu na-adịgide adịgide n'ime oge 24-h nke ọchịchịrị. usoro ihe omume yiri nke ahụ, ụmụ nwanyị na-achọ urea na-eri nri urea budata mụbara ọdụ ụgbọ elu dabere na itinye uche na-etinye uche (F(5, 138) = 1310.91, p <0.0001) .
N'ozuzu ọrụ ụgbọ elu nke anwụnta na-aṅụ ọbara na-eguzosi ike ma na-adịgide adịgide n'elu 24 awa gafee nri niile, na-amụba ọrụ mmamịrị n'oge ọkara nke abụọ nke oge ọchịchịrị maka ụmụ nwanyị na-eri nri na mmiri yana ụmụ nwanyị na-eri nri ọhụrụ na 24 awa (oyiyi 3). nri urea emeghị (F (5, 138) = 1.36, p = 0.24) . na mmamịrị ndị ọzọ na nri nchịkwa (ọhụrụ, p = 0.0091; 72 awa, p = 0.0022; 168 awa, p = 0.001; sucrose, p = 0.020.3).
A na-enyocha mmetụta nke mmamịrị na urea na-eri nri na usoro ọmụmụ na bioassays na-edozi akwa (Njirimara 4A) wee nyochaa ya dị ka ọnụ ọgụgụ nke àkwá nke nwanyị ọ bụla tọrọ, nha akwa, na nwa ọhụrụ a kpọpụtara ọhụrụ larvae. Ọnụ ọgụgụ nke àkwá tọrọ. Ụmụ nwanyị Arab na-eri nri mmamịrị dịgasị iche iche = F(5,4.03). 4B) .Ụmụ nwanyị na-enye mmamịrị awa 24, nri ọbara tọgbọrọ nsen karịa ka ụmụ nwanyị na-eri nri mmamịrị ndị ọzọ ma dị ka ndị a na-eri nri sucrose (Fig 4B) .N'otu aka ahụ, nha akwa nke ụmụ nwanyị na-eri mmamịrị dịgasị iche iche site na nri (F(5, 209) = 12.85,0-4 p. ụmụ nwanyị sucrose na-etinye akwa nsen buru ibu karịa ụmụ nwanyị na-eri nri, ebe akwa nke ụmụ nwanyị na-eri nri na 168 h nke mmamịrị dị ntakịrị (Fig 4C) . Tụkwasị na nke ahụ, nri mmamịrị na-emetụta oke nha (F (5, 187) = 7.86, p <0.0001), na-eji nnukwu larvaeid 2 site na eggur-2-7. Ụmụ nwanyị na-eri mmamịrị karịa site na akwa nke a na-etinye na akwa larvae. Mmiri na-eri nri na 168-h mmamịrị nwanyị na-eri nri (Figure 4D).
Nrụpụta arụmọrụ nke nwanyị Anopheles arabinis na-eri nri na mmamịrị ehi na urea. Anwụnta ndị na-eri ọbara na-eri nri ndị mejupụtara mmamịrị ehi ọhụrụ na agadi, ọkwa dị iche iche nke urea, sucrose (10%), na mmiri distilled (H2O) maka awa 48 tupu etinye ya na bioassays na-enweta awa 4 (Egg) . E), akwa akwa (C, F) na larvae size (D, G) na-emetụta nke ukwuu site na nri nyere (mkpụrụ ehi: BD; urea: EG) .Means maka paramita ọ bụla tụrụ site na iji aha mkpụrụedemede dị iche iche dị iche iche (otu ụzọ ANOVA site na iji Tukey's post hoc analysis; p <0.05) .Error bars na-anọchi anya ọkọlọtọ njehie nke pụtara.
Dị ka isi nitrogenous akụrụngwa nke mmamịrị, urea, mgbe enyere dị ka nri na-eri ọbara na ụmụ nwanyị na-eri ọbara, budata metụtara ọmụmụ parameters na niile ọmụmụ.The ọnụ ọgụgụ nke àkwá tọgbọrọ ụmụ nwanyị nri urea, mgbe nri ọbara, dabere na urea ịta ahụhụ (F(11, 360) = 4.69; p <0.0001), nwanyị 4 na-eri nri n'etiti 3µM. mM tinyekwuo nsen (Ọnọdụ 4E) .Ụmụ nwanyị na-eri nri na urea mkpokọta 134 µM ma ọ bụ n'elu dina nnukwu nsen karịa ndị inyom na-eri nri na mmiri (F (10, 4245) = 36.7; p <0.0001; Figure 4F), na larval size, ọ bụ ezie na ọ na-emetụta ihe ndị yiri ya nke urea (3010 nne urea); 3019 p. <0.0001) na-agbanwe karịa (Fig 4G).
N'ozuzu mmasị ka host-achọ bovine mmamịrị headspace volatile extracts.The arabiensis enyocha na iko tube olfactometer (Fig. 5A) na-emetụta nke ukwuu site na mmamịrị afọ (χ2 = 15.9, df = 4, p = 0.0032; Fig. 5B) .Post hoc analysis mere ka ọ bụrụ nke ukwuu elu ọkwa nke mmamịrị 4 awa mmamịrị 4 ndị ọzọ. (72 awa: p = 0.0060, 168 awa: p = 0.012, pentane: p = 0.00070), Ma e wezụga isi nke mmamịrị ọhụrụ (p = 0.13; Figure 5B) .Ọ bụ ezie na mkpokọta mmasi nke anwụnta na-aṅụ ọbara na = d = p urine, adịghị dị iche (8χ4). 0.067; Fig. 5C), achọpụtara na ụmụ nwanyị ndị a na-adọrọ adọrọ mmasị na isi ihe na-agbanwe agbanwe ma e jiri ya tụnyere mmamịrị 72-hour ma e jiri ya tụnyere njikwa (p = 0.0066; Figure 5C).
Azịza omume maka mmamịrị mmamịrị anụ ahụ na sịntetik na-achọ mmamịrị na-eri nri Anopheles arabianus.Schematic of the glass tube olfactometer (A) .mmanụ headspace volatile extracts from fresh and aged cow urine to host (B) na ọbara-aṅụ (C) anwụnta. Chọta nke Onyenwe anyị tentacle (A). 24-hour (E), 72-hour (F), na 168-hour (G) agadi mmamịrị ehi na-egosi.Electron antenna nchọpụta (EAD) traces na-egosi voltaji mgbanwe nzaghachi bioactive ogige na headspace eluted si chromatograph gas na chọpụtara site ire ọkụ ionization detector (FID) .The scales barde ntọhapụ Properties (V) . A na-egosi ọnụego (µg h-1) nke ogige ndị na-arụ ọrụ ndụ. A otu akara mmuke (*) na-egosi nzaghachi dị ala na-agbanwe agbanwe. Asterisks abụọ (**) na-egosi nzaghachi ndị na-adịghị emepụtaghachi. Chọta onye ọbịa (H) na ọbara-aṅụ (I) An.arabiensis nwere dị iche iche na-adọrọ adọrọ ka synthetic mixs nke ọhụrụ na ihe na-esi ísì ụtọ. mmasị dị iche iche leta aha ndị dị nnọọ iche na ibe ha (otu ụzọ ANOVA iji Tukey's post hoc analysis; p <0.05) .Error Ogwe na-anọchi anya ọkọlọtọ njehie nke ọnụ ọgụgụ.
Nwanyị Ann.arabiensis, 72 h na 120 h mgbe nri ọbara gasịrị, n'oge spawning, ọ dịghị mmasị e gosiri maka headspace mgbanwe extracts si ọhụrụ na agadi ehi mmamịrị ma e jiri ya tụnyere pentane njikwa (χ2 = 3.07, p> 0.05; Mgbakwunye faịlụ 1: Fig. S1).
N'ihi na nwanyi Ann.arabiensis, GC-EAD na GC-MS nyochaa chọpụtara asatọ, isii, atọ na atọ bioactive ogige (Figure 5D-G) .Ọ bụ ezie na ọdịiche dị na ọnụ ọgụgụ nke ogige ndị na-eme ka electrophysiological zaa hụrụ, ọtụtụ n'ime ndị a ogige nọ na onye ọ bụla headspace volatile wepụ anakọtara site ọhụrụ na agadi mmamịrị. Ya mere, nanị physiological nke nwanyị na-emepụta n'ihi na onye ọ bụla na-emepụta ihe na-emepụta site na anụ ahụ nke anụ ahụ na-emepụta site na mmamịrị ọhụrụ na agadi. etinyere ọnụ ụzọ na nyocha ndị ọzọ.
Mkpokọta ntọhapụ na-agbanwe agbanwe nke ogige bioactive na mkpokọta isi na-abawanye site na 29 µg h-1 na mmamịrị ọhụrụ ruo 242 µg h-1 na mmamịrị 168-hour, tumadi n'ihi p-cresol na m-formaldehyde Phenol na-abawanye yana phenol. decanal, na-ebelata site na ịba ụba mmamịrị afọ, nke jikọtara ya na nhụta mbelata nke mgbaàmà siri ike (ụba) na chromatogram (Fig. 5D) -G aka ekpe na nzaghachi physiological na ogige ndị a (Fig 5D-G nri panel).
N'ozuzu, ngwakọta sịntetik nwere ihe yiri nke ahụ nke ogige bioactive nke a chọpụtara na mpụta na-agbanwe agbanwe nke oghere isi mmamịrị ọhụrụ na nke ochie (Fig 5D-G) na ọ pụtaghị na ọ na-adọrọ mmasị na-achọ onye ọbịa (χ2 = 8.15, df = 4, p = 0.083; quito 5H) ma ọ bụ ọbara-sucking 1. = 4, p = 0.30; Fig. 5I) Otú ọ dị, post hoc pairwise ntụnyere n'etiti ọgwụgwọ gosiri na ndị ọbịa na-achọ anwụnta na-adọrọ mmasị nke ukwuu na ngwakọta sịntetik nke 24-h mmamịrị afọ ma e jiri ya tụnyere njikwa pentane (p = 0.0086; Figure 5H).
Iji nyochaa ọrụ nke ihe ndị dị n'otu n'otu na ngwakọta sịntetik nke mmamịrị 24-h-afọ, a na-enyocha ngwakọta isii na-emepụta ihe megide ngwakọta zuru ezu na nyocha Y-tube, bụ nke e wepụrụ ogige nke onye ọ bụla. Maka anwụnta na-achọ ndị ọbịa, ịwepụ ogige ndị mmadụ na ngwakọta zuru ezu nwere mmetụta dị ukwuu na nzaghachi omume (χ2 = 19.60, p. 1: Figure S2A), ihe ngwakọta niile na-emepụta ihe na-adọrọ mmasị karịa Obere karịa n'ụzọ zuru ezu. N'ụzọ dị iche, mwepụ nke onye ọ bụla n'otu n'otu site na ngwakọta nke synthetic zuru ezu emetụtaghị nzaghachi omume nke anwụnta na-aṅụ ọbara (χ2 = 11.38, df = 6, p = 0.077), ma e wezụga decanal, nke mere ka ọ bụrụ ọkwa 2 dị ala. 1: Foto S2B).
N'ime obodo ịba-ndemic nke dị na Etiopia, a na-enyocha arụmọrụ nke ngwakọta sịntetik nke mmamịrị ehi nke awa 24 na-adọta anwụnta n'okpuru ọnọdụ ubi maka abalị iri (Fig 6A) .E jidere 4,861 anwụnta ma chọpụta, nke 45.7% bụ Anthropus.gambiaen phenolosis na 9% 35.4% bụ Culex spp. (Mgbakwunye faịlụ 1: Isiokwu S1) .Anopheles arabinis bụ nanị onye òtù An.Gambian ụdị mgbagwoju anya nke PCR analysis mara. N'ihe dị ka nkezi, 320 anwụnta e jidere kwa abalị, n'oge a ọnyà na sịntetik ngwakọta baits jidere ọzọ anwụnta karịa jikọtara ọnyà na-enweghị ngwakọta (χ12) = 12 (6), p0. 0.0001) .A na-etinye ọnyà ndị na-adịghị mma na nke ọ bụla n'ime abalị nchịkwa ise na mmalite, n'etiti, na njedebe nke ikpe ahụ. A na-ejide ọnụ ọgụgụ ndị dị otú ahụ nke anwụnta na ọnyà ọ bụla nke ọnyà, na-egosi enweghị mmasị n'etiti ụlọ (χ2 (0, 1665) = 9 × 10-13, p> na ọnụ ọgụgụ ndị na-achịkwa oge n'oge ọnụ ọgụgụ 0.05). nke anwụnta ejidere na ọnyà nwere ngwakọta sịntetik abawanyela nke ukwuu: ịchọ onye ọbịa (χ2 (0, 2107) = 138.7, p <0.0001), nri ọbara n'oge na-adịbeghị anya (χ2 (0, 650) = 32.2, p <0.0001 = 32.2, p <0.0001 = 6) na ime ime (χ2 (0, 2107) = 138.7, p <0.0001. 0.0123; Mgbakwunye faịlụ 1: Tebụl S1) .Nke a na-egosipụtakwa na ọnụọgụ anwụnta ejidere: onye ọbịa na-achọ> ịṅụ ọbara> ime> ọkara ime> nwoke.
Ntụle ubi nke ịdị irè nke ngwakọta mmamịrị ehi na-esi ísì ụtọ nke awa 24. A na-eduzi ule ubi na South-central Ethiopia (map), nke dị nso na obodo Maki (tinye), na-eji Ụlọ Ọrụ Maka Nchịkwa Ọrịa (CDC) ọkụ ọkụ (n'aka nri) n'ime ụlọ ndị jikọtara ọnụ, na-eji ihe ngosi Latin square (ihe oyiyi ikuku) (Adortrapsthetic CDC) . arabesques (B), ma ọ bụghị Anopheles farroes (C), na a dị iche iche n'ụzọ, a physiological ala-adabere mmetụta. Tụkwasị na nke a, ndị a ọnyà weghaara budata ụba ọnụ ọgụgụ nke usu Culex anwụnta. na-anọchi anya nkezi nhọrọ index na ụzọ abụọ nke ọnyà njikwa (emeghe; N = 5). .Asterisks na-egosi ọkwa ngụkọ ọnụ ọgụgụ (*p = 0.01 na ***p <0.0001)
E jidere ụdị atọ ahụ dị iche iche na ọnyà nwere ngwakọta sịntetik. Na-achọ onye ọbịa (χ2 (1, 1345) = 71.7, p <0.0001), nri ọbara (χ2 (1, 517) = 16.7, p <0.0001) = afọ ime (χ2 (1), 6, 1.001. a .arabiensis tọrọ n'ime ọnyà na-ahapụ ngwakọta sịntetik (Fig 6B), ebe ọnụ ọgụgụ nke An adịghị iche. A chọtara Pharoensis na steeti physiological dị iche iche (Fig 6C) . Maka Culex, ọ bụ naanị mmụba dị ịrịba ama na ọnụ ọgụgụ nke anwụnta na-achọ ndị ọbịa ka a chọtara na ọnyà = bated na synthetic mix (13.6). 0.0004; Fig. 6D), ma e jiri ya tụnyere ọnyà nchịkwa.
A na-eji ọnyà ọnyà ndị ọbịa dị n'èzí nke ndị ọbịa nwere ike n'etiti ebe a na-azụ anụ na obodo ime obodo dị na Etiopia iji chọpụta ma anwụnta ịba na-eji ísì mmamịrị ehi dị ka ebe obibi ndị ọbịa. N'ịbụ ndị na-enweghị ihe ngosi nke onye ọbịa, okpomọkụ, na na ma ọ bụ na-enweghị ọnụnọ nke mmamịrị ehi, ọ dịghị anwụnta e jidere (Mgbakwunye faịlụ 1: Figure S3 ọnụnọ nke elu okpomọkụ, opekata mpe nwanyị). a dọtara ma jide anwụnta, ọ bụ ezie na ọnụ ọgụgụ dị nta, na-adabere na afọ mmamịrị (χ2 (5, 25) = 2.29, p = 0.13; Mgbakwunye faịlụ 1: Figure S3) .N'ụzọ dị iche, njikwa mmiri ejideghị anwụnta ịba na okpomọkụ dị elu (Ngbakwunye 1: Foto S3).
Anwụnta ịba na-enweta ma na-ekesa ogige ndị nwere nitrogen site na inye nri na-akwụ ụgwọ na mmamịrị ehi (ya bụ, puddles) iji kwalite àgwà akụkọ ndụ, dị ka ụmụ ahụhụ ndị ọzọ. Ebe anwụnta ndị nwanyị na-achọta ebe a site n'isi wee nwee ike ịhazi nnabata nke ogige nitrogen dị na mmamịrị, gụnyere urea, ihe bụ isi nitrogen na mmamịrị [15, 16].Dabere na ọnọdụ anụ ahụ nke nwanyị anwụnta, a na-ekenye nri na mmamịrị ka ọ na-eme ka ndị ọbịa na-ahụ maka ụgbọ elu na ịdị ndụ nke ọma. Njirimara ọmụmụ nke ndị na-eri nri n'ọbara n'oge usoro gonadotropic nke mbụ. N'ihi ya, ngwakọta mmamịrị na-arụ ọrụ dị mkpa na-edozi ahụ maka ndị na-ahụ maka ọrịa ịba nke na-emechi dị ka ndị okenye na-eri nri na-edozi ahụ [8], ebe ọ na-enye ụmụ nwanyị anwụnta ikike iji nweta ogige nitrogen dị mkpa site n'itinye nri dị ala-ihe ize ndụ. Nchọpụta a nwere mmetụta dị ịrịba ama na mmepụta nke ụmụ nwanyị na-amụba, dị ka ihe na-eme ka ụmụ nwanyị na-emepụta ihe na-emetụta ndụ ha, dị ka ihe na-eme ka ụmụ nwanyị na-emepụta ihe na-emetụta ndụ ha. ikike vector. Ọzọkwa, omume a nwere ike ịbụ ebumnuche nke mmemme njikwa vector n'ọdịnihu.