Ụfọdụ isiokwu ndị na-eme nchọpụta nsogbu LC adịghị agwụ agwụ, ebe ọ bụ na e nwere okwu na omume LC, ọbụna dị ka nkà na ụzụ ngwá ọrụ na-eme ka oge na-aga. Enwere ọtụtụ ụzọ nke nsogbu nwere ike isi bilie na usoro LC ma kwụsị na ọdịdị elu dara ogbenye.Mgbe okwu metụtara ọdịdị elu na-ebili, ndepụta dị mkpirikpi nke ihe ndị nwere ike ime maka nsonaazụ ndị a na-enyere aka mee ka ahụmahụ anyị na-achọpụta nsogbu dị mfe.
Ọ na-atọ ụtọ na-ede nke a "LC Nchọpụta nsogbu" kọlụm na-eche echiche banyere isiokwu kwa ọnwa, n'ihi na ụfọdụ isiokwu adịghị aga nke style. Mgbe na ubi nke chromatography nnyocha ụfọdụ isiokwu ma ọ bụ echiche na-aghọ gharazie agwụ ka ha na-anọchi site ọhụrụ na mma echiche, na ubi nke nchọpụta nsogbu, ebe ọ bụ na mbụ nchọpụta nsogbu isiokwu pụtara na nke a journal (na LC ụfọdụ isiokwu na oge) 8O ka ọ dị mkpa. afọ ole na ole gara aga, M lekwasịrị anya ọtụtụ ngalaba Nchọpụta nsogbu LC na ọnọdụ dị ugbu a na-emetụta chromatography mmiri (LC) (dịka ọmụmaatụ, ntụnyere ikwu nke nghọta anyị banyere mmetụta nrụgide na njigide [2] Ọganihu Ọhụrụ) Nkọwa anyị nke nsonaazụ LC na otu esi edozi nsogbu na ngwa LC ọgbara ọhụrụ. N'ime nkeji nkeji nke ọnwa a, m na-aga n'ihu na usoro nke 1 nke ọnwa Disemba 2, nke na-aga n'ihu na usoro nke 1. na ọnwụ" isiokwu nke LC troubleshooting - ihe ndị dị ukwuu maka onye ọ bụla na-eme nchọpụta nsogbu dị mkpa, n'agbanyeghị afọ nke usoro anyị na-eji. Isi isiokwu nke usoro isiokwu a bụ nke ukwuu mkpa na LCGC's ma ama "LC Troubleshooting Guide" mgbidi chaatị (4) nghọta na ọtụtụ laboratories.N'ihi na akụkụ nke atọ nke usoro a, M họọrọ ilekwasị anya n'okwu metụtara ọnụ ọgụgụ kasị elu nke ọdịdị ma ọ bụ 4 dị iche iche na-akpata ọdịdị nke mgbidi. ogbenye ọnụ ọgụgụ kasị elu shape! Anyị enweghị ike ịtụle okwu ndị a niile n'ụzọ zuru ezu n'otu isiokwu, ya mere na nkeji mbụ a na isiokwu ahụ, m ga-elekwasị anya na ụfọdụ n'ime ndị m na-ahụ ọtụtụ ugboro. Enwere m olileanya na ndị ọrụ LC na-eto eto na ndị agadi ga-achọta ụfọdụ ndụmọdụ na-enye aka na ihe ncheta na isiokwu a dị mkpa.
Achọpụtara m onwe m na-azawanye ajụjụ nsogbu nsogbu na "ihe ọ bụla ga-ekwe omume" nzaghachi a nwere ike iyi ihe dị mfe mgbe ị na-atụle ihe ndị na-esiri ike ịkọwapụta, ma m na-achọpụta na ọ na-adịkarị mma. N'ọtụtụ ihe nwere ike ime ka ọdịdị elu dara ogbenye, ọ dị mkpa ka ị na-eche echiche nke ọma mgbe ị na-atụle ihe nsogbu ahụ nwere ike ịbụ, na iji nwee ike ibute ihe ndị nwere ike ime ka ịmalite mgbalị nchọpụta nsogbu anyị, na-elekwasị anya na ihe ndị a na-emekarị bụ ihe dị mkpa.
Otu isi nzọụkwụ na ihe ọ bụla na-eme nchọpụta nsogbu - ma otu nke m na-eche na ọ bụ underrated - na-aghọta na e nwere nsogbu dị mkpa ka a dozie. Ịghọta na e nwere nsogbu na-apụtakarị ịghọta na ihe na-eme ngwá ọrụ dị iche na anyị na-atụ anya, nke a na-emepụta site tiori, empirical knowledge, and experience (5) .The "peak shape" zoro aka na ebe a n'ezie shapesymmetrical , dị ka smoothymmetrical (ọ bụghị nanị na-ezo aka n'ụdị peak, nke na-ezo aka n'ezie na ọ bụghị naanị na-arụ ọrụ na-eme ka ngwá ọrụ dị iche iche). fluffy, na-eduga ihu, ọdụ ọdụ, wdg), kamakwa na obosara.Anyị na-atụ anya n'ezie ọnụ ọgụgụ kasị elu dị mfe. Theory (6) na-akwado nke ọma akwụkwọ ọgụgụ na-atụ anya na, n'ọtụtụ ọnọdụ, chromatographic ọnụ ọnụ elu kwesịrị ịbụ symmetrical na kwekọọ na ọdịdị nke a Gaussian nkesa, dị ka e gosiri na Figure 1a. Ihe anyị na-atụ anya site na ọnụ ọgụgụ kasị elu n'ụdị na a ga-atụle n'ọdịnihu isiokwu na-adị mgbagwoju anya. Ihe osise 1 na-egosi ụfọdụ ohere ndị ọzọ enwere ike ịhụ-na okwu ndị ọzọ, ụfọdụ ụzọ ihe nwere ike isi na-ezighị ezi. N'ime nkeji ole na ole nke a, anyị ga-etinye oge na-ekwurịta ụfọdụ ihe atụ kpọmkwem nke ọnọdụ ndị nwere ike iduga ụdị ọdịdị a.
Mgbe ụfọdụ, ọnụ ọgụgụ kasị elu na-adịghị hụrụ ma ọlị na chromatogram ebe a na-atụ anya eluted. The n'elu mgbidi chaatị na-egosi na enweghị a ọnụ ọgụgụ kasị elu (na-eche na sample n'ezie nwere lekwasịrị analyte na a ịta nke kwesịrị ime ka onye nchọpụta nzaghachi zuru ezu ịhụ ya n'elu mkpọtụ) na-emekarị metụtara ụfọdụ ngwá ọrụ ma ọ bụ na-ezighị ezi mobile usoro ọnọdụ (ọ bụrụ na a na-ahụ na niile). ọnụ ọgụgụ kasị elu, na-abụkarị “adịghị ike”) .Enwere ike ịhụ ndepụta dị mkpirikpi nke nsogbu na ngwọta dị na ngalaba a na Tebụl I.
Dị ka e kwuru n'elu, ajụjụ nke ọnụ ọgụgụ kasị elu nke ịgbasawanye kwesịrị ekwesị tupu ị na-aṅa ntị na-agbalị imezi ya bụ isiokwu dị mgbagwoju anya nke m ga-atụle n'isiokwu ga-eme n'ọdịnihu. Ahụmahụ m bụ na mmụba dị ịrịba ama na-ejikọta ya na mgbanwe dị ịrịba ama na ọdịdị elu elu, na ọnụ ọgụgụ kasị elu na-emekarị karịa tupu elu ma ọ bụ nkewa. Otú ọ dị, ọnụ ọgụgụ ọnụ ọgụgụ nke ọnụ ọgụgụ dị iche iche na-eme ka ọnụ ọgụgụ dị iche iche nwee ike gbasaa site na ihe ole na ole dị iche iche.
A tụlere nke ọ bụla n'ime okwu ndị a n'ụzọ zuru ezu na mbipụta ndị gara aga nke Nchọpụta nsogbu LC, na ndị na-agụ akwụkwọ nwere mmasị na isiokwu ndị a nwere ike ịtu aka na isiokwu ndị a gara aga maka ozi gbasara ihe kpatara ya na ihe ngwọta nke nsogbu ndị a. Nkọwa ndị ọzọ.
Ọnụ ọgụgụ kasị elu n'ihu ọdụ, ọnụ ọgụgụ kasị elu, na nkewa nwere ike ịbụ ihe niile sitere na kemịkalụ ma ọ bụ ọdịdị anụ ahụ, na ndepụta nke ngwọta nwere ike ime maka nsogbu ndị a dịgasị iche iche, dabere na ma anyị na-enwe nsogbu nke kemịkal ma ọ bụ nke anụ ahụ. Ọtụtụ mgbe, site n'iji atụnyere ọnụ ọgụgụ dị iche iche dị na chromatogram, ị nwere ike ịchọta ihe ngosi dị mkpa banyere nke bụ ihe kpatara ya. naanị otu ma ọ bụ ọnụ ọgụgụ ole na ole na-emetụta, ma ndị ọzọ na-ele anya nke ọma, ihe kpatara ya bụ kemịkalụ.
Ihe na-akpata kemịkalụ nke ọdụdụ elu dị oke mgbagwoju anya iji kwurịta nkenke ebe a. A na-ezo aka na onye na-agụ akwụkwọ nwere mmasị na mbipụta na-adịbeghị anya nke "Nchọpụta nsogbu LC" maka mkparịta ụka miri emi karị (10) . Otú ọ dị, ihe dị mfe ịnwale bụ iji belata ọnụ ọgụgụ nke nyocha nke injected ma hụ ma ọ bụrụ na ọnụ ọgụgụ kasị elu na-eme ka ọ dịkwuo mma. obere ihe nyocha, ma ọ bụ ọnọdụ chromatographic ga-agbanwerịrị ka enwere ike nweta ụdị ọnụ ọgụgụ dị mma ọbụlagodi na agbanyere nnukwu mmadụ.
E nwekwara ọtụtụ ihe ndị nwere ike ime ihe anụ ahụ maka ọnụ ọgụgụ kasị elu. Ndị na-agụ akwụkwọ nwere mmasị na mkparịta ụka zuru ezu banyere ohere ndị a na-ezo aka na mbipụta ọzọ na-adịbeghị anya nke "LC Troubleshooting" (11) .Otu n'ime ihe ndị na-emekarị anụ ahụ nke ọdụdụ elu bụ njikọ na-adịghị mma n'ebe dị n'etiti injector na onye nchọpụta (12) .A na-egosi ihe atụ dị oke egwu na Figure 1d, nwetara n'ime usoro nyocha nke a na-eji izu ole na ole gara aga. tupu , ma wụnye obere olu injection loop na ferrule nke a na-akpụzi na capillary igwe anaghị agba nchara. Mgbe ụfọdụ nyocha nchọpụta nsogbu mbụ, anyị ghọtara na omimi nke ọdụ ụgbọ mmiri dị na stator valve injection dị nnọọ omimi karịa ka anyị na-eji, na-akpata nnukwu olu nwụrụ anwụ na ala nke ọdụ ụgbọ mmiri. A na-edozi nsogbu a n'ụzọ dị mfe site n'iji dochie anya ntanye na-edozi n'ime ala ahụ nke ọma na tuberu ọzọ, anyị ga-edozi nsogbu ahụ n'ụzọ kwesịrị ekwesị. ọdụ ụgbọ mmiri ahụ.
Ọnụ ọgụgụ kasị elu n'ihu dị ka ndị e gosiri na Figure 1e nwekwara ike mere site anụ ahụ ma ọ bụ chemical nsogbu. A nkịtị nkịtị na-akpata nke na-eduga n'ọnụ bụ na urughuru bed nke kọlụm na-adịghị mma juru n'ọnụ, ma ọ bụ na ahụ nwere reorganized karịrị oge. Dị ka ọnụ ọgụgụ kasị elu tailing kpatara nke a anụ ahụ onu, ụzọ kasị mma idozi nke a bụ iji dochie kọlụm na-aga n'ihu na-aga n'ihu na-eduga ná mmalite nke chemical, na-eduga n'ọnụ na-aga n'ihu na-aga n'ihu. Ọnọdụ njide "na-abụghị nke linear". N'okpuru ọnọdụ dị mma (linear), ọnụ ọgụgụ nke nyocha na-ejigide site na nkeji oge (n'ihi ya, ihe na-ejide ya) na-ejikọta ya na ntinye nke nyocha na kọlụm. Chromatographically, nke a pụtara na dị ka ọnụ ọgụgụ nke nyocha nke a na-agbanye n'ime kọlụm na-abawanye, ọnụ ọgụgụ kasị elu na-adị ogologo, ma ọ bụghị nke a na-eme ka ọ bụrụ nke na-eme ka ọ ghara ịdị ogologo, ma ọ bụghị nke a na-eme ka ọ bụrụ ihe na-adịghị mma. naanị na-adị ogologo ma na-agbasawanye ka a na-agbanyekwu uka. Tụkwasị na nke ahụ, ọdịdị ndị na-abụghị nke na-achọpụta ọdịdị nke ọnụ ọgụgụ chromatographic, nke na-ebute ụzọ ma ọ bụ n'azụ azụ. Dị ka oke ibu nke na-akpata ọdụdụ elu (10), ọnụ ọgụgụ kasị elu nke na-eduga site na njide na-enweghị ihe ọ bụla nwekwara ike ịchọpụta site n'ịbelata ihe nyocha nke a na-agbanye n'ọkụ ga-emeziwanye àgwà nke na-eduga n'ịgba ọgwụ ahụ ga-eme ka ọ dịkwuo mma. ihu, ma ọ bụ ọnọdụ chromatographic ga-agbanwerịrị iji belata omume a.
Mgbe ụfọdụ, anyị na-ahụ ihe na-egosi na ọ bụ ọnụ ọgụgụ kasị elu nke "gbawara ekewa", dị ka e gosiri na Figure 1f. Nzọụkwụ mbụ na-edozi nsogbu a bụ iji chọpụta ma ọnụ ọgụgụ kasị elu bụ n'ihi na ọnụ ọgụgụ nke akụkụ (ya bụ, ọnụnọ nke abụọ dị iche iche ma dị nnọọ eluting ogige). metụtara arụ ọrụ anụ ahụ enweghị ihe jikọrọ ya na kọlụm n'onwe ya. Ọtụtụ mgbe, ihe kacha mkpa na-egosi na mkpebi a bụ ma ọnụ ọgụgụ niile dị na chromatogram na-egosipụta ụdị nkewa, ma ọ bụ naanị otu ma ọ bụ abụọ. Ọ bụrụ na ọ bụ naanị otu ma ọ bụ abụọ, ọ ga-abụ na ọ bụ okwu ọnụ; ọ bụrụ na agbawara ọnụ ọnụ niile, ọ nwere ike bụrụ ihe gbasara anụ ahụ, o yikarịrị ka ọ metụtara kọlụm n'onwe ya.
Kewaa ọnụ ọgụgụ kasị elu metụtara anụ ahụ Njirimara nke kọlụm n'onwe ya na-abụkarị n'ihi akụkụ ụfọdụ egbochiri inlet ma ọ bụ outlet frits, ma ọ bụ reorganization nke ahụ na kọlụm, ikwe ka mobile frasi na-asọ ọsọ ọsọ karịa mobile na-adọ na ụfọdụ ebe nke kọlụm ọwa e guzobere .na ndị ọzọ na mpaghara (11) .Partially clogged frit nwere ike mgbe ụfọdụ kpochapụ site reversing eruba site na kọlụm; Otú ọ dị, na ahụmahụ m, nke a na-abụkarị obere oge kama ngwọta dị ogologo oge. Nke a na-egbukarị egbu egbu na ogidi nke oge a ma ọ bụrụ na ihe ndị ahụ na-ejikọta n'ime kọlụm. N'oge a, ọ kacha mma iji dochie kọlụm ma gaa n'ihu.
Ọnụ ọgụgụ kasị elu na Figure 1g, nakwa site n'oge na-adịbeghị anya na ụlọ nyocha nke m, na-emekarị na-egosi na mgbaàmà ahụ dị elu nke na ọ ruru na njedebe dị elu nke nzaghachi nzaghachi. Maka ndị na-achọpụta ihe nyocha anya (UV-vis na nke a), mgbe nchịkọta nyocha dị elu nke ukwuu, onye nyocha ahụ na-etinye ọtụtụ n'ime ọkụ na-agafe site na cell detector eruba cell, na-ahapụ nnọọ obere ìhè na-achọpụta site na ọnọdụ dị iche iche nke eletrọnịkị ihe ndị a na-eme ka ọ pụta ìhè site na ọnọdụ eletrik. isi iyi nke mkpọtụ, dị ka ìhè kpafuo na “ụjọ gbara ọchịchịrị”, na-eme ka mgbama ahụ bụrụ “ihe na-enweghị isi” n'ọdịdị ya na-adabereghị na itinye uche nyocha. Mgbe nke a mere, a na-edozi nsogbu ahụ n'ụzọ dị mfe site n'ibelata ụda ntụtụ nke onye nyocha - ibelata olu ntụtụ, ịgbanye ihe atụ, ma ọ bụ abụọ.
N'ụlọ akwụkwọ chromatography, anyị na-eji akara ngosi (ie, y-axis na chromatogram) dị ka ihe na-egosi ntinye uche nke nyocha na sample. Ya mere, ọ dị ka ihe na-adịghị mma ịhụ chromatogram na akara n'okpuru efu, dị ka nkọwa dị mfe bụ na nke a na-egosi mkpokọta nyocha na-adịghị mma - nke n'ezie ọ gaghị ekwe omume n'anụ ahụ. Na ahụmahụ m, a na-ahụkarị ọnụ ọgụgụ na-adịghị mma mgbe ị na-eji nhọrọ U).
Na nke a, a na-adịghị mma elu nanị pụtara na ụmụ irighiri eluting si kọlụm banye obere ìhè karịa mobile frasi onwe ya ozugbo tupu na mgbe peak.This nwere ike ime, n'ihi na ihe atụ, mgbe na-eji dịtụ ala nchọpụta wavelengths (<230 nm) na mobile frasi mgbakwunye na-amịkọrọ ọtụtụ n'ime ìhè na ndị a wavelengths.Such mgbakwunye nwere ike ịbụ mobile frasi formate ma ọ bụ ihe mgbakwunye nwere ike ịbụ mobile frasi usoro ihe mgbaze dị otú ahụ. nwere ike iji ọnụ ọgụgụ na-adịghị mma na-eme ka ihe dị mma ma nweta ihe ndị na-adịghị mma iji zere ịcheta ihe dị iche iche na -echeta ihe mejupụtara nke na mobile na-adọ nke mere na ha na-amịkọrọ obere ìhè karịa analytes.
Na-adịghị mma ọnụ ọnụ elu nwekwara ike ịpụta mgbe iji refractive index (RI) nchọpụta mgbe refractive index nke components ndị ọzọ karịa nyocha na sample, dị ka ihe mgbaze matrix, dị iche na refractive index nke mobile phase.This na-eme na UV-vis nchọpụta, ma nke a mmetụta na-emekarị na-attenuated ikwu na RI nchọpụta.N'okwu abụọ ahụ nwere ike ịbụ sample na-adịghị mma pempek nke nso mejupụtara nke na-eme ihe n'ọnọdụ abụọ ahụ. ruo nke usoro mkpanaka.
Na akụkụ nke atọ na isi isiokwu nke LC nchọpụta nsogbu, M atụle ọnọdụ nke hụrụ elu udi dị iche iche na-atụ anya ma ọ bụ nkịtị elu shape.Irè Nchọpụta nsogbu nke nsogbu ndị dị otú ahụ na-amalite na ihe ọmụma nke na-atụ anya elu shapes (dabere na tiori ma ọ bụ tupu ahụmahụ na ẹdude ụzọ), otú deviations si ndị a na-atụ anya bụ doro anya.Peak ụdị nsogbu nwere ọtụtụ dị iche iche nwere ike na-akpata (oke obosara, tailing, m na-atụle nke a n'ụzọ zuru ezu, wdg). Ọtụtụ mgbe. Ịmara nkọwa ndị a na-enye ebe dị mma ịmalite nchọpụta nsogbu, ma ọ dịghị ejide ohere niile. Ndị na-agụ akwụkwọ nwere mmasị na ndepụta miri emi nke ihe na-akpata na ngwọta nwere ike na-ezo aka na LCGC "Nduzi Nchọpụta Nchọpụta nsogbu LC".
(4) chaatị mgbidi LCGC "Nduzi Nchọpụta nsogbu LC".https://www.chromatographyonline.com/view/troubleshooting-wallchart (2021).
(6) A. Felinger, Nyocha data na nhazi akara ngosi na Chromatography (Elsevier, New York, NY, 1998), p. 43-96.
(8) Wahab MF, Dasgupta PK, Kadjo AF na Armstrong DW, Anal.Chim.Journal.Rev. 907, 31–44 (2016).https://doi.org/10.1016/j.aca.2015.11.043.