Daalụ maka ileta Nature.com.Ụdị ihe nchọgharị ị na-eji nwere nkwado CSS nwere oke.Maka ahụmịhe kachasị mma, anyị na-akwado ka ị jiri ihe nchọgharị emelitere (ma ọ bụ gbanyụọ ọnọdụ ndakọrịta na Internet Explorer).Ka ọ dị ugbu a, iji hụ na nkwado na-aga n'ihu, anyị ga-enye saịtị ahụ na-enweghị ụdị na Javascript.
Angustifolius lupine (NLL, Lupinus angustifolius L.) bụ ahịhịa ahịhịa a na-eji maka mmepụta nri na nkwalite ala.Mgbasawanye NLL zuru ụwa ọnụ dị ka ihe ọkụkụ adọtala ọtụtụ fungi na-akpata ọrịa, gụnyere lupine anthracnose, nke na-ebute ọrịa anthracnose na-emebi emebi.A na-eji alleles abụọ, Lanr1 na AnMan, nke na-enye nkwụsi ike na-abawanye, na-amụba NLL, mana usoro mkpụrụ ndụ ihe ndị dị n'okpuru ka amabeghị.N'ime ọmụmụ ihe a, a na-eji akara Lanr1 na AnMan nyochaa ihe nlele European NLL.Nnwale ọgwụ mgbochi a na gburugburu ebe a na-achịkwa gosipụtara ịdị irè nke ndị inyeaka abụọ na-eguzogide ọgwụ.A na-eme profaịlụ mkpụrụ ndụ ihe nketa dị iche na ahịrị ndị nnọchi anya na-eguzogide ọgwụ.Ejikọtara nguzogide Anthracnose na oke okwu nke mkpụrụ ndụ ontology "GO: 0006952 Defence Response", "GO: 0055114 Redox Process", na "GO: 0015979 Photosynthesis".Na mgbakwunye, ahịrị Lanr1 (83A: 476) gosipụtara mmegharị transcriptome dị ịrịba ama ngwa ngwa mgbe etinyere ya, ebe ahịrị ndị ọzọ gosipụtara igbu oge na nzaghachi a n'ihe dị ka awa 42.A na-ejikọta nzaghachi nchebe na TIR-NBS, CC-NBS-LRR na NBS-LRR genes, protein 10 na-etinye aka na pathogenesis, protein na-ebufe lipid, endoglucan-1,3-β-glucosidase, protein protein cell glycine, na mkpụrụ ndụ ihe nketa sitere na ụzọ oxygen.Nzaghachi mbụ na 83A:476, gụnyere ịkpachapụ anya nke mkpụrụ ndụ ihe nketa metụtara photosynthesis, dabara na nchebe na-aga nke ọma n'oge usoro uto vegetative nke usoro ihe ọmụmụ fungal, na-atụ aro na onye na-eme ihe na-ebute ihe mgbochi.A na-ebelata mmeghachi omume Mandeloop, dịka ọ na-adọkpụ n'ogo kwụ ọtọ.
Lupine nwere warara (NLL, Lupinus angustifolius L.) bụ ọka protein dị elu sitere na mpaghara ọdịda anyanwụ Mediterranean1,2.A na-akụ ya ugbu a dị ka ihe ọkụkụ maka anụmanụ na ụmụ mmadụ.A na-elekwa ya anya ahịhịa ndụ ndụ n'ime usoro ntụgharị ihe ọkụkụ n'ihi nhazi nitrogen site na symbiotic nitrogen na-edozi nje bacteria na nkwalite nhazi nke ala.NLL emeela ngwa ngwa nke ụlọ na narị afọ gara aga ma ka nọ n'okpuru nrụgide dị elu 3,4,5,6,7,8,9,10,11,12.Site n'ịzụlite NLL zuru ebe niile, usoro nke fungi ndị na-akpata ọrịa mepụtara niche ọrụ ugbo ọhụrụ ma kpatara ọrịa ọhụrụ na-ebibi ihe ọkụkụ. Ihe kacha dị ịrịba ama maka ndị ọrụ ugbo lupine na ndị na-azụ anụ bụ ọdịdị anthracnose, nke ero nje na-akpata, Colletotrichum lupini (Bondar) Nirenberg, Feiler & Hagedorn13 kpatara. Ihe kacha dị ịrịba ama maka ndị ọrụ ugbo lupine na ndị na-azụ anụ bụ ọdịdị anthracnose, nke ero nje na-akpata, Colletotrichum lupini (Bondar) Nirenberg, Feiler & Hagedorn13 kpatara. Наиболее примечательным для фермеров и селекционеров люпина lupini (Bondar) Nirenberg, Feiler & Hagedorn13. Ihe kacha pụta ìhè nye ndị ọrụ ugbo lupine na ndị na-azụ anụ bụ mpụta anthracnose sitere na ero nje na-efe efe Colletotrichum lupini (Bondar) Nirenberg, Feiler & Hagedorn13.对于羽扇豆农民和饲养者来说，最引人注目的是炭疽病的出现，它是由病原真说：最引人注目的是炭疽病的出现，它是由病原真说： 3 ga-adị.对于羽扇豆农民和饲养者来说，最引人注目的是炭疽病的出现。 Наиболее поразительным для фермеров и селекционеров люпина. totrichum lupini (Bondar) Nirenberg, Feiler & Hagedorn13. Ihe kacha pụta ìhè nye ndị ọrụ ugbo lupine na ndị na-azụ anụ bụ mpụta anthracnose sitere na ero nje na-efe efe Colletotrichum lupini (Bondar) Nirenberg, Feiler & Hagedorn13.Akụkọ mbụ banyere ọrịa ahụ sitere na Brazil na United States, nke nwere ụdị mgbaàmà pụtara na 1912 na 1929 n'otu n'otu.Otú ọ dị, mgbe ihe dị ka afọ 30 gasịrị, a họpụtara nje ahụ dị ka Colletotrichum gloeosporioids (Penz.) Penz. & Sacc., teleomorph Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld. & Sacc., teleomorph Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld. & Sacc., телеоморф Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld. & Sacc., teleomorph nke Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld. & Sacc.，有目的形态的 Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld. & Sacc.，有目的形态的 Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld. & Sacc., Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld в Целенаправленной морфологии. & Sacc., Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld na ezubere iche maka ọdịdị ọdịdị. & H. Schrenk,. & H. Schrenk, .na H. Schrenk. & H.施伦克,. & H.施伦克,.na H. Schlenk,.Ọrịa phenotyping nke mbụ mere na etiti narị afọ nke 20 gosipụtara ụfọdụ nguzogide na NLL na lupine odo (L. luteus L.) accessions, ma ihe niile na-acha ọcha lupine (L. albus L.) accessions nwalere bụ nke ukwuu susceptible15,16.Nnyocha egosiwo na mmepe nke anthracnose jikọtara ya na oke mmiri ozuzo (ikuku ikuku) na okpomọkụ (na nso 12-28 ° C), na-eduga na mmebi nke iguzogide na okpomọkụ dị elu17, 18. N'ezie, oge a chọrọ maka conidia na-eto eto na ọrịa na-amalite , bụ ugboro anọ mkpumkpu na 24 ° C (4 awa) n'okpuru 1 ọnọdụ iru mmiri.Ya mere, okpomoku zuru ụwa ọnụ na-aga n'ihu emeela ka anthracnose gbasaa.Otú ọ dị, a hụrụ ọrịa ahụ na France (1982) na Ukraine (1983) dị ka ihe iyi egwu na-abịanụ, ma o doro anya na ụlọ ọrụ lupine leghaara ya anya n'oge 20,21.Afọ ole na ole ka e mesịrị, ọrịa a na-agbawa obi gbasara gburugburu ụwa ma metụtakwara obodo ndị bụ isi na-emepụta lupine dị ka Australia, Poland na Germany22,23,24.Na-esochi ntiwapụ nke anthracnose n'etiti 1990s, nyocha dị ukwuu mere ka a mata ọtụtụ ndị nyere onyinye na-eguzogide ọgwụ na NLL19.NLL na-eguzogide anthracnose na-achịkwa alleles abụọ dị iche iche a na-ahụ na germplasm dị iche iche: Lanr1 na cultivar Tanjil na Wonga na AnMan na cultivar.Mandalay 25, 26. Alleles ndị a na-emeju ihe nrịbama molekụla nke na-akwado nhọrọ nke germplasm na-eguzogide ọgwụ na mmemme ozuzu25,26,27,28,29,30.The eguzogide ozuzu 83A: 476 na-ebu Lanr1 allele gafere na susceptible ọhịa ahịrị P27255 iji nweta ọnụ ọgụgụ RIL segregating maka anthracnose eguzogide, nke mere ka o kwe omume ekenye Lanr1 locus ka chromosome NLL-1131, 32, 33. Alignment nke na-eguzogide site na njikọ nke na-eguzogide maapụ na-adabere na njikọ nke na-eguzogide ihe ọkụkụ. NLL kpughere ọnọdụ nke alleles atọ na otu chromosome (NLL-11), mana n'ọnọdụ dị iche iche29,34,35.Otú ọ dị, n'ihi ọnụ ọgụgụ dị nta nke RIL na nnukwu mkpụrụ ndụ ihe nketa dị n'etiti ihe nrịbama na alleles kwekọrọ, ọ dịghị nkwubi okwu a pụrụ ịdabere na ya nwere ike ịchọta banyere mkpụrụ ndụ ihe nketa ha.N'aka nke ọzọ, iji mkpụrụ ndụ ihe nketa reverse na lupins siri ike n'ihi ike nrụpụta ha dị ntakịrị, nke na-eme ka mkpụrụ ndụ ihe nketa na-akpa ike37.
Mmepe nke germplasm nke ụlọ na-ebu ihe a chọrọ na steeti homozygous, dị ka 83A: 476 (Lanr1) na Mandelup (AnMan), emeghewo ụzọ maka ịmụ ihe mgbochi anthracnose n'ihu ọnụnọ nke nchikota alleles na-emegide n'ime anụ ọhịa.Ohere nke usoro molekụla.Tulee nzaghachi nchebe nke ụdị genotypes akọwapụtara.Ọmụmụ ihe a tụlere nzaghachi mbụ transcriptome nke NLL na C. lupini ịgba ọgwụ mgbochi ọrịa.Nke mbụ, a na-enyocha panel germplasm European NLL nwere ahịrị 215 site na iji akara molekụla na-aka akara Lanr1 na AnMan alleles.Emeziri phenotyping anthracnose na ahịrị 50 NLL, nke ahọpụtara na mbụ maka akara mkpụrụ ndụ, n'okpuru ọnọdụ a na-achịkwa.Dabere na nnwale ndị a, ahịrị anọ dị iche na nguzogide anthracnose na Lanr1/AnMan allelic ka ahọpụtara maka ịkọwapụta mkpụrụ okwu nchekwa dị iche iche site na iji ụzọ abụọ jikọtara ọnụ: usoro RNA dị elu na ọnụọgụ PCR dị adị.
Nleba anya nke otu NLL germplasm (N = 215) na nrịbama Lanr1 (Anseq3 na Anseq4) na AnMan (Anseq4) na AnMan (AnManM1) gosiri na naanị otu ahịrị (95726, nso Salamanca-b) amplifies "nguzogide" allele maka ihe niile nrịbama , mgbe "5 niile nwere ike ikweta ihe niile" (Presence 8). 73.5%) ahịrị.Ahịrị iri na atọ mepụtara alleles abụọ “na-eguzogide” nke akara Lanr1, na ahịrị 8 rụpụtara “na-eguzogide” alleles nke Lanr1.akara."Nguzogide" allele nke akara AnMan (Ntinye mgbakwunye S1).Ahịrị abụọ bụ heterozygous maka akara Anseq3 yana otu heterozygous maka akara AnManM1.Ahịrị 42 (19.5%) buru ụzọ dị iche iche nke Anseq3 na Anseq4 alleles, na-egosi nnukwu oge nchikota n'etiti loci abụọ a.Anthracnose phenotypes n'okpuru ọnọdụ a na-achịkwa (Mgbakwunye S2) gosipụtara mgbanwe dị na nguzogide nke genotypes a nwalere, bụ nke gosipụtara n'ịdị njọ nke anthracnose.Ọdịiche dị n'ọnụ ọgụgụ pụtara sitere na 1.8 (na-eguzogide obere ihe) ruo 6.9 (nwere ike ime) yana ọdịiche dị arọ nke osisi sitere na 0.62 (nwere ike ime) ruo 4.45 g (na-eguzogide). Enwere mmekọrịta dị ịrịba ama n'etiti ụkpụrụ ndị a hụrụ na nsụgharị abụọ nke nnwale ahụ (0.51 maka ọnụọgụ ọrịa, P = 0.00017 na 0.61 maka ibu osisi, P <0.0001) yana n'etiti etiti abụọ a (- 0.59 na - 0.77, P <0.0001). Enwere njikọ dị ịrịba ama n'etiti ụkpụrụ ndị a na-ahụ na nsụgharị abụọ nke nnwale ahụ (0.51 maka ọnụọgụ ọrịa, P = 0.00017 na 0.61 maka ibu osisi, P <0.0001) yana n'etiti etiti abụọ a (- 0.59 na - 0.77, P <0.0001). ВыявLENA DOSTVERNAIA NKE NDỊ NA-ECHICHE NDỊ MMADỤ NKE NDỊ NA-ECHICHE (0,51). 0,00017 na 0,61 dlya massы растения, P <0,0001), na ntakiri mezhdu эtymy дvyumya parametram (-0,59 и -0,77, 0,00) 10,00). Achọpụtara mmekọrịta dị ịrịba ama n'etiti ụkpụrụ ndị a na-ahụ na ugboro abụọ nke nnwale ahụ (0.51 maka ọnụọgụ ọrịa, P = 0.00017 na 0.61 maka ịdị arọ osisi, P <0.0001), yana n'etiti etiti abụọ a (- 0.59 na -0.77, P <0.00001) .. 0.61, P <0.0001）以及这两个参数之间（- 0.59 和- 0.77，P <0.0001).在 两 次 重复 实验 中 观察 的 值 之间 存在 相关性 （疾病 严重 程度 中 察0.00017和 - 0.77, P <0.0001). Наблюдалась значительная корреляция между значениями. 017 na mасса растения 0,61, P <0,0001), na межdu эtymy dvyumya parametram (-0,59 na -0,0001) 0,77, P <0,0001. Enwere mmekọrịta dị ịrịba ama n'etiti ụkpụrụ ndị a na-ahụ na oyiri (nrịba ọrịa 0.51, P = 0.00017 na ihe ọkụkụ 0.61, P <0.0001) na n'etiti paramita abụọ a (-0.59 na -0 .0001) 0.77, P <0.0001. ).Mgbaàmà ndị a na-ahụ anya na osisi ndị nwere ike ime ihe gụnyere ịgbagọ na ịgbagọ nke azuokokoosisi nke yiri usoro "ụta onye ọzụzụ atụrụ", na-esote ọnya oval nwere oroma/pink sporozoites (Mgbakwunye Fig. 1).Ngwa ndị Australia na-ebu Lanr1 (83A: 476 na Tanjil) na AnMan (Mandelup) mkpụrụ ndụ ihe nketa na-eguzogide nke ọma, 0.0331 na 0.0036).Ụfọdụ ahịrị ndị na-ebukwa Lanr1 na/ma ọ bụ AnMan alleles "na-eguzogide ọgwụ na-egosi mgbaàmà nke ọrịa ahụ.
N'ụzọ na-akpali mmasị, ole na ole NLL ahịrị na-enweghị ihe ọ bụla "na-eguzogide" akara allele kpughere ọkwa dị elu nke nguzogide anthracnose (tụnyere ma ọ bụ dị elu karịa maka Lanr1 ma ọ bụ AnMan genotypes), dị ka Boregine (P uru <0.0001 maka ma parameters), Bojar (P uru <0.0001 maka akara na 0.0001 Population maka osisi-5) na 0.001 maka osisi-5.4. na ndị na-adịghị mkpa maka ibu). N'ụzọ na-akpali mmasị, ole na ole NLL ahịrị na-enweghị ihe ọ bụla "na-eguzogide" akara allele kpughere ọkwa dị elu nke nguzogide anthracnose (tụnyere ma ọ bụ dị elu karịa maka Lanr1 ma ọ bụ AnMan genotypes), dị ka Boregine (P uru <0.0001 maka ma parameters), Bojar (P uru <0.0001 maka akara na 0.0001 Population maka osisi-5) na 0.001 maka osisi-5.4. na ndị na-adịghị mkpa maka ibu). Интересно, что несколько линий NLL, akwụkwọ ndụ akwụkwọ ndụ akwụkwọ ndụ ости антракнозу (сопоставимый или более высокий, чем для генотипов Lanr1 или AnMan), таких как как Boregine (знад,0поте 1) ), Bojar (значение P <0,0001 для оценки и 0,001 для массы растения) na популяции B-549/79b ). N'ụzọ na-akpali mmasị, ọtụtụ NLL ahịrị na-enweghị ihe ọ bụla 'na-eguzogide' marker allele gosiri ọkwa dị elu nke iguzogide anthracnose (tụnyere ma ọ bụ karịa maka Lanr1 ma ọ bụ AnMan genotypes), dị ka Boregine (P uru <0.0001 maka ma parameters), Bojar (P uru <0.0001 maka nyocha na 0.0001 osisi maka 0.5-001). 1 maka nyocha na ọ bụghị ihe dị mkpa maka ibu).有趣的是，一些缺乏任何“抗性”标记等位基因的NLL型相当或更高），例如Boregine（两个参数的P 值< 0.0001） B-549/79b（得分P 值< 0.0001，重量不显着）。 Ọ bụ ihe na-adọrọ mmasị na ụfọdụ usoro NLL nke na-enweghị akara "antigenic" ọ bụla na-egosi nguzogide dị elu (nke kwekọrọ na Lanr1 ma ọ bụ AnMan genes ma ọ bụ karịa), dị ka Boregine (ma parampat P <0.0001), Bojar (P uru <0.0001, osisi arọ 0.001) na nje B-549 / 000. Интересно, что некоторые линии NLL. к антракнозу (сравнимые или выше, чем у генотипов Lanr1 или AnMan), такие как Boregine (значение P для обоих повыш0,000), Boregine <1,000 1, масса растения 0,001) na популяция B-549/79b (оценка P-значение <0,0001, масса незначительна). N'ụzọ na-akpali mmasị, ụfọdụ ahịrị NLL na-enweghị ihe ọ bụla 'resistance' marker alleles gosipụtara ọkwa dị elu nke nguzogide anthracnose (tụnyere ma ọ bụ karịa Lanr1 ma ọ bụ AnMan genotypes), dị ka Boregine (P uru maka ma parameters <0.0001) , Bojar (P-uru <0.0001, 0.0001, osisi arọ 0.0-051) na 0.0005. arọ adịghị mkpa).Ihe omume a na-egosi na enwere ike nweta mkpụrụ ndụ ihe nketa ọhụụ nke nguzogide, na-akọwa enweghị njikọ dị n'etiti genotypes akara na ọrịa phenotypes (ụkpụrụ P sitere na ~ 0.42 ruo ~ 0.98).Ya mere, ule Kolmogorov-Smirnov gosiri na data na anthracnose na-eguzogide bụ ihe dị ka nkesa na-emekarị maka ọnụ ọgụgụ (P-values ​​0.25 na 0.11) na osisi uka (P-ụkpụrụ 0.47 na 0.55), na-atụ aro na m na-eche na ihe alleles karịa Lanr1 na AnMan na-etinye aka.
Dabere na nsonaazụ nyocha nke mgbochi anthracnose, ahọpụtara ahịrị 4 maka nyocha transcriptome: 83A: 476, Boregine, Mandelup, na Population 22660. A na-anwale ahịrị ndị a maka nguzogide anthrax na nnwale inoculation site na usoro RNA, ma ọ bụrụhaala na ha dị ka na ule gara aga.Ụkpụrụ akara bụ ndị a: Boregin (1.71 ± 1.39), 83A: 476 (2.09 ± 1.38), Mandelup (3.82 ± 1.42) na onu ogugu 22660 (6.11 ± 1.29).
Usoro Illumina NovaSeq 6000 nwetara nkezi nke ụzọ abụọ Mread 40.5 n'otu nlele (29.7 ruo 54.4 Mreads) (Table S3 na-agbakwunye).Ntụziaka n'usoro ntụaka sitere na 75.5% ruo 88.6%.Nkezi njikọ nke data ọgụgụ ọgụgụ dị n'etiti ụdị nnwale dị n'etiti ihe nṅomi nke ndu sitere na 0.812 ruo 0.997 (pụtara 0.959). N'ime mkpụrụ ndụ ihe nketa 35,170 nyochara, 2917 ekpugheghị okwu ọ bụla, na mkpụrụ ndụ 4785 ndị ​​ọzọ ka egosipụtara na ọkwa na-adịghị mma (isi pụtara <5). N'ime mkpụrụ ndụ ihe nketa 35,170 nyochara, 2917 ekpugheghị okwu ọ bụla, na mkpụrụ ndụ 4785 ndị ​​ọzọ ka egosipụtara na ọkwa na-adịghị mma (isi pụtara <5). Иz 35 170 proanalyzyrovannыh genov 2917 na ihe ngosi ihe ngosi, ostalnыe 4785 овне (базовое среднее <5). N'ime mkpụrụ ndụ 35,170 a nyochara, 2917 egosighị okwu ọ bụla, na mkpụrụ ndụ 4785 fọdụrụnụ ka egosipụtara na ọkwa na-adịghị mma (isi pụtara <5).在分析的35,170 个基因中，2917 个没有表达，其他478535,170 Иz 35 170 proanalyzyrovannыh genov 2917 na эkspressirovalis, a ostalnыe 4785 е среднее значение <5). N'ime mkpụrụ ndụ ihe nketa 35,170 nyochara, 2917 ekwuputaghị ya na mkpụrụ ndụ 4785 fọdụrụnụ nwere okwu na-enweghị atụ (isi pụtara <5).Ya mere, ọnụ ọgụgụ nke mkpụrụ ndụ ihe nketa a tụlere egosipụtara (ntọala pụtara ≥ 5) n'oge nnwale ahụ bụ 27,468 (78.1%) (Mgbakwunye S4).
Site na oge mbụ, ahịrị NLL niile zara na inoculation nke C. lupini (strain Col-08) site na ịmegharị transcriptome (Table 1), Otú ọ dị, a hụrụ ọdịiche dị ukwuu n'etiti ahịrị.Ya mere, ahịrị na-eguzogide 83A: 476 (na-ebu Lanr1 gene) gosipụtara nsụgharị transcriptome dị ịrịba ama na oge mbụ (6 hpi) na mmụba 31-69 na ọnụ ọgụgụ nke dịpụrụ adịpụ elu- na ala-genes ma e jiri ya tụnyere oge ndị ọzọ n'oge a.Na mgbakwunye, ọnụ ọgụgụ kasị elu a dị mkpụmkpụ, n'ihi na okwu nke nanị mkpụrụ ndụ ihe nketa ole na ole nọgidere na-agbanwe nke ukwuu n'oge nke abụọ (12 hpi).N'ụzọ na-akpali mmasị, Boregine, nke gosikwara ọkwa dị elu nke nguzogide na ule graft, emeghị nnukwu nsụgharị nsụgharị n'oge nnwale ahụ.Otú ọ dị, ọnụ ọgụgụ nke mkpụrụ ndụ ihe nketa dị iche iche (DEG) bụ otu maka Boregine na 83A: 476 na 12 HPI.Ma Mandelup na ndị bi na 22660 gosipụtara DEG elu na njedebe ikpeazụ (48 l / s), na-egosi oge igbu oge na nzaghachi nchebe.
N'ihi na 83A: 476 nwere nnukwu transcriptome reprogramming nzaghachi na C. lupini na 6 HPI ma e jiri ya tụnyere ahịrị ndị ọzọ niile, ~ 91% nke DEGs hụrụ n'oge a bụ usoro ọmụmụ (Fig 1).Otú ọ dị, e nwere ụfọdụ ndakọrịta na nzaghachi mbụ n'etiti ahịrị ọmụmụ, dị ka 68.5%, 50.9%, na 52.6% DEG na Boregine, Mandelup, na ọnụ ọgụgụ 22660, n'otu n'otu, jikọtara ya na ndị ahụ dị na 83A: 476 na oge ụfọdụ.Otú ọ dị, ndị DEGs ndị a nwere naanị obere akụkụ (0.97-1.70%) nke DEGs niile a na-ahụ ugbu a site na iji 83A: 476.Tụkwasị na nke ahụ, 11 DEGs sitere na ahịrị niile na-ejikọta n'oge a (S4-S6 mgbakwunye), gụnyere ihe ndị na-emekarị nke nzaghachi nchebe nke osisi: protein nnyefe lipid (TanjilG_32225), endoglucan-1,3-β-glucoside enzyme (TanjilG_23384), protein abụọ na-akpata nchekasị dị ka SAM2G_5G_5 (TanjilG_5) protein tex (TanjilG_32352), na protein mgbidi sel abụọ nwere glycine bara ụba (TanjilG_19701 na TanjilG_19702).Enwekwara ngbanwe dị elu na nzaghachi transcriptome n'etiti 83A: 476 na Boregine na 24 HPI (ngụkọta 16-38% DEG) na n'etiti Mandelup na Population 22660 na 48 HPI (ngụkọta 14-20% DEG).
Ihe osise Venn na-egosi ọnụọgụ mkpụrụ ndụ ihe nketa dị iche iche (DEG) na ahịrị lupine dị warara (NLL) etinyere na Colletotrichum lupini (nsogbu Col-08 nwetara site na mpaghara lupine na Wierzhenice, Poland, 1999).Ahịrị NLL nyochara bụ: 83A: 476 (na-eguzogide ọgwụ, na-ebu Lanr1 allele), Boregine (na-eguzogide ọgwụ, mkpụrụ ndụ ihe nketa na-amaghị), Mandelup (na-eguzogide obere ihe, na-ebu AnMan allele) na ndị bi na 22660 (dị nnọọ mfe).Mbiri okwu hpi na-eguzo ọtụtụ awa mgbe ịgba ọgwụ mgbochi ọrịa gasịrị.Ewepụla ụkpụrụ efu iji mee ka eserese ahụ dị mfe.
A tụlere usoro mkpụrụ ndụ ihe nketa karịrị akarị na 6 hpi maka ọnụnọ nke ngalaba mkpụrụ ndụ ihe nketa R (Nkwupụta S7).Ọmụmụ ihe a kpughere transcriptome nke mkpụrụ ndụ ihe nketa na-eguzogide ọrịa nwere ngalaba NBS-LRR naanị na 83A: 476.Ntọala a nwere otu mkpụrụ ndụ TIR-NBS-LRR (tanjilg_05042), mkpụrụ ndụ ihe nketa CC-NBS-LRR ise (tanjilg_06165, tanjilg_06162, tanjilg_22773, tanjilg_22640, na tanjilg_1616-LR_4), na anọ N1 N1616LR (tanjilg_16162) yana anọ NBS-Lrr (tanjilg_16162) na anọ NBS-LRR (TANJILG_16162).Mkpụrụ ndụ ihe nketa ndị a niile nwere ngalaba canonical ahaziri n'usoro echekwara.Na mgbakwunye na mkpụrụ ndụ ngalaba NBS-LRR, ọtụtụ RLL kinases na-arụ ọrụ na 6 hpi, ya bụ otu na Boregine (TanjilG_19877), abụọ na Mandelup (TanjilG_07141 na TanjilG_19877) na ọnụ ọgụgụ mmadụ 22660 (TanjilG_0901G) na 6 na 22660 (TanjilG_0901G) .
A na-edobere mkpụrụ ndụ ihe nketa nwere okwu gbanwere nke ukwuu na nzaghachi maka inoculation na C. lupini (strain Col-08) na nyocha ịba ụba nke Gene Ontology (GO) (Ntinye mgbakwunye S8). Usoro usoro ihe omimi nke a na-egosipụtakarị bụ "GO: 0006952 nzaghachi nchebe" nke pụtara na 6 n'ime 16 (oge × ahịrị) nchikota nwere nnukwu uru (P value <0.001) (Fig 2). Usoro usoro ihe omimi nke a na-egosipụtakarị bụ "GO: 0006952 nzaghachi nchebe" nke pụtara na 6 n'ime 16 (oge × ahịrị) nchikota nwere nnukwu uru (P value <0.001) (Fig 2). Наиболее часто чрезмерно представленным термином биологического процессса был "GO: 0006952 защитой" я в 6 из 16 (время × линия) комбинаций с высокой значимостью (значение P <0,001) (рис. 2). Usoro usoro ndu nke a na-egosipụtakarị bụ 'GO: 0006952 nzaghachi agbachitere', nke pụtara na 6 nke 16 (oge × lineage) nchikota nwere nnukwu uru (P value <0.001) (Fig 2).最常被过度代表的生物过程术语是“GO:0006952具有高显着性（P 值< 0.001）（图2）。 Okwu usoro ihe omuma nke ihe omuma bu "GO: 0006952 nzaghachi agbachitere", nke na-egosi na 6 nke 16 (时间×线), nke nwere ihe di elu (P value <0.001) (图2) . Наиболее часто чрезмерно представленным термином биологического процесса был «GO: 0006952 Nzaghachi agbachitere», 1. комбинаций (время × линия) с высокой значимостью (значение P <0,001) (рис. 2). Usoro usoro ndu nke a na-egosipụtakarị bụ 'GO: 0006952 Defence Response', nke pụtara na 6 n'ime 16 nchikota (oge × ahịrị) nwere nnukwu uru (P uru <0.001) (Fig 2).Ekwupụtala okwu a na oge abụọ na 83A: 476 na Boregine (6 na 24 hpi) na n'otu oge na Mandelup na Population 22660 (12 na 6 hpi, n'otu n'otu).Nke a bụ ihe a na-atụ anya ya, na-egosipụta nzaghachi antifungal nke ahịrị ndị na-eguzogide ọgwụ.Tụkwasị na nke ahụ, 83A: 476 zara C. lupini site na ngwa ngwa na-ebute mkpụrụ ndụ ihe nketa metụtara oxidative burst na-anọchi anya okwu ahụ bụ "GO: 0055114 redox process", na-egosi nzaghachi nchebe kpọmkwem, ebe Boregine kpughere nzaghachi nchebe kpọmkwem, metụtara okwu 'GO'.: 0006950 Nzaghachi nrụgide.Ọnụ ọgụgụ mmadụ 22660 mere ka nzaghachi nkwụsị nke kwụ ọtọ gụnyere metabolites nke abụọ, na-egosipụta ọnụ ọgụgụ dị ukwuu nke okwu "GO: 0016104 Process of triterpene biosynthesis" na "GO: 0006722 Process of triterpene metabolism" (okwu abụọ ahụ bụ otu usoro nke mkpụrụ ndụ ihe nketa), na-eburu n'uche nsonaazụ nke nkwụsi ike, n'etiti mgbasa ozi mgbasa ozi 6. , mmeghachi omume mmalite 83A: 476 (6 hpi) na mmeghachi omume egbu oge Mandelup na Population 22660 gụnyere okwu GO: 0015979 'photosynthesis' na ndị ọzọ metụtara usoro ndu.
Usoro bioprocess gene ontology ahọpụtara na nkọwa nke mkpụrụ ndụ ihe nketa egosipụtara dị iche iche n'oge nzaghachi transcriptome nke lupine dị warara (NLL) ejiri lupine anthrax tinye (nsogbu Col-08 enwetara site na ubi lupine na Wierzhenice, Poland, na 1999) na-ekwubiga okwu ókè.Ahịrị NLL nyochara bụ: 83A: 476 (na-eguzogide ọgwụ, na-ebu homozygous Lanr1 allele), Boregine (na-eguzogide ọgwụ, mkpụrụ ndụ ihe nketa amabeghị), Mandelup (na-eguzogide obere ihe, na-ebu homozygous AnMan allele) na ọnụ ọgụgụ mmadụ 22660 (nwere ike ịdaba).
N'ihi na ọmụmụ ihe a bụ iji chọpụta mkpụrụ ndụ ihe nketa ndị na-eme ka anthracnose na-eguzogide ọgwụ, mkpụrụ ndụ ihe nketa e kenyere okwu GO "GO: 0006952 Defensive responses" na "GO: 0055114 Redox processes" ka a na-enyocha ya na nkwụsị ebe ọ bụ na ntọala pụtara ≥ 30 na opekata mpe otu ahịrị.× na oge na-ejikọta ụkpụrụ ndekọ ọnụ ọgụgụ dị ịrịba ama nke log2 (mgbanwe okpukpu).Ọnụ ọgụgụ nke mkpụrụ ndụ ihe nketa na-ezute ụkpụrụ ndị a bụ 65 maka GO: 0006952 na 524 maka GO: 0055114.
83A: 476 kpughere ọnụ elu DEG abụọ akọwapụtara na okwu GO: 0006952, nke mbụ na mkpụrụ ndụ ihe nketa 6 kwa inch (usoro 64, elu na ala) na nke abụọ na mkpụrụ ndụ 24 kwa inch (genes 15, naanị iwu naanị).Boregine gosikwara na GO: 0006952 gbagoro n'otu oge ahụ, mana na obere DEG (11 na 8) na ntinye nhọrọ.Mandeloop gosipụtara ọnụ ọgụgụ abụọ nke GO: 0006952 na 12 na 48 HPI, ha abụọ na-ebu mkpụrụ ndụ ihe nketa iri na abụọ (nke mbụ nwere mkpụrụ ndụ ihe nketa na-arụ ọrụ, na nke abụọ nwere nanị mkpụrụ ndụ ihe na-egbochi), ebe ndị 22660 nọ na 6 HPI (13 genes) nwere nnukwu ọnụ ọgụgụ kasị elu.iwu.Ekwesiri iburu n'uche na 96.4% nke GO: 0006952 DEG na ọnụ ọgụgụ ndị a nwere otu ụdị nzaghachi (elu ma ọ bụ ala), na-egosi njedebe dị ịrịba ama na nzaghachi nchebe n'agbanyeghị ọdịiche dị na ọnụọgụ nke mkpụrụ ndụ ihe nketa.Otu kachasị n'usoro usoro metụtara okwu ahụ bụ GO: 0006952 na-edekọ ozi Protein Stress-Associated Message Protein 22 (SAM22), nke bụ protein protein 10 pathogenesis (PR-10) na isi protein latex.yiri (MLP-dị ka) protein) protein (Fig 3).Otu abụọ ahụ dị iche na ọdịdị nke okwu na ntụziaka nke nzaghachi.Mkpụrụ ndụ ihe nketa na-edobe protein dị ka SAM22 gosipụtara nnabata na-agbanwe agbanwe ma dị ịrịba ama na mmalite oge (6 ma ọ bụ 12 hpi) na anaghị anabata ya na njedebe nke nnwale ahụ (48 hpi), ebe protein ndị yiri MLP gosipụtara nhazi na 6 hpi.hpi.83A: 476 na Mandelup na 48 hp / in, ihe fọrọ nke nta ka ọ bụrụ ihe niile data ndị ọzọ anaghị anabata.Na mgbakwunye, ọdịiche dị na profaịlụ okwu nke mkpụrụ ndụ ihe nketa protein SAM22 sochiri mgbanwe dị na nguzogide anthracnose, ebe ahịrị ndị na-eguzogide ọgwụ nwere ọtụtụ oge na-ebute mkpụrụ ndụ ihe nketa ndị a karịa mkpụrụ ndụ ihe nketa nwere ike ime.Mkpụrụ ndụ LlR18A/B ọzọ dị ka PR-10 gosipụtara ụkpụrụ okwu yiri nke ahụ na mkpụrụ ndụ protein SAM22.
Achọpụtara ihe ndị bụ isi nke usoro usoro ndu "GO: 0006952 Azịza Nchekwa" yana usoro okwu nke mkpụrụ ndụ ihe nketa nke Lanr1 na AnMan alleles.Ọnụ ọgụgụ Log2 na-anọchi anya ụkpụrụ log2 (mgbanwe okpukpu) n'etiti inoculated (Colletotrichum lupini, strain Col-08, nke enwetara site na ubi lupine, Wizhenica, Poland, 1999) na njikwa (sham-inocated) osisi n'otu oge.A na-enyocha ahịrị lupine dị warara ndị a: 83A: 476 (na-eguzogide ọgwụ, na-ebu homozygous Lanr1 allele), Boregine (na-eguzogide ọgwụ, mkpụrụ ndụ ihe nketa na-amaghị), Mandelup (na-eguzogide obere ihe, na-ebu homozygous AnMan allele), na Population 22660 (nwere ike ime).
Na mgbakwunye, a na-enyocha profaịlụ okwu nke RNA-seq genes Canr1 (TanjilG_05042) na AnMan (TanjilG_12861) (Fig. 3).Gene TanjilG_05042 gosipụtara nzaghachi dị ịrịba ama (mmelite) na 83A: 476 naanị na oge mbụ (6 hpi), ebe TanjilG_12861 dị ịrịba ama na Mandeloop naanị na oge abụọ: 6 hpi (iwu ala) na 24 hpi (6 hpi).Ya na.).mgbanwe)).
Mkpụrụ ndụ ihe nketa kachasị emetụta na okwu GO: 0055114 "usoro redox" bụ mkpụrụ ndụ ihe nketa na-ekpuchi protein cytochrome P450 na peroxidase (Fig 4).Maka ihe atụ ndị dịpụrụ adịpụ na 83A: 476 na 6 HPI, a na-ahụkarị ụkpụrụ log2 ma ọ bụ kacha nta (maka 86.6% nke mkpụrụ ndụ ihe nketa) n'etiti osisi inoculated na njikwa, na-egosipụta nzaghachi dị elu nke genotype a na inoculating mmekọahụ.83A: 476 gosipụtara GO kachasị mkpa: 0055114 DEG na 6 hpi (503 genes), ebe ndị ọzọ nke ahịrị na 48 hpi (Boregine, 31 genes; Mandelup, 85 genes; na Population 22660, 78 genes)).N'ọtụtụ mkpụrụ ndụ ihe nketa nke ezinụlọ GO: 0055114, a hụrụ ụdị nzaghachi abụọ maka ịgba ọgwụ mgbochi ọrịa (mmelite na mgbochi).N'ụzọ na-akpali mmasị, ruo 97.6% nke DEGs chọpụtara maka okwu ahụ bụ GO: 0055114 na Mandelupe na 48 hp Ihe ndị a na-egosi na, n'agbanyeghị ọnụ ọgụgụ dị nta nke nta (ya bụ, ọnụ ọgụgụ nke mkpụrụ ndụ redox mutated, 85 versus 503), usoro nke nzaghachi transcriptome na-egbu oge nke manracnose 6 bụ ihe yiri nke 8.Na Boregine na onu ogugu 22660, nchikota a di ala na 51.6% na 75.6%, n'otu n'otu.
Ekpughere ụkpụrụ nke okwu nke isi ihe nke okwu nke usoro ndu "GO: 0055114 Redox process".Ọnụ ọgụgụ Log2 na-anọchi anya ụkpụrụ log2 (mgbanwe okpukpu) n'etiti inoculated (Colletotrichum lupini, strain Col-08, nke enwetara site na ubi lupine, Wizhenica, Poland, 1999) na njikwa (sham-inocated) osisi n'otu oge.A na-enyocha ahịrị lupine dị warara ndị a: 83A: 476 (na-eguzogide ọgwụ, na-ebu homozygous Lanr1 allele), Boregine (na-eguzogide ọgwụ, mkpụrụ ndụ ihe nketa na-amaghị), Mandelup (na-eguzogide obere ihe, na-ebu homozygous AnMan allele), na Population 22660 (nwere ike ime).
83A: 476 Nzaghachi transcriptomic maka inoculation na C. lupini (ndụ Col-08) gụnyekwara ịgbachi nkịtị nke mkpụrụ ndụ ihe nketa na-ekwu na okwu GO: 0015979 "photosynthesis" na usoro ndu ndị ọzọ metụtara ya (FIG. 5).Nke a GO: 0015979 DEG setịpụrụ nwere mkpụrụ ndụ ihe nketa 105 nke etinyere nke ukwuu na 6 hpi na 83A: 476.Na mpaghara nke a, 37 mkpụrụ ndụ ihe nketa na-agbadakwa na Mandelup na 48 HPI na 35 n'otu oge na ọnụ ọgụgụ 22660, gụnyere 19 DEGs na-ahụkarị na genotypes abụọ.Enweghị DEGs metụtara okwu GO: 0015979 na-arụ ọrụ nke ọma na nchikota ọ bụla (ahịrị x ​​oge).
Ekpughere ụkpụrụ nke ngosipụta nke isi akụkụ nke okwu nke usoro ndu "GO: 0015979 Photosynthesis".Ọnụ ọgụgụ Log2 na-anọchi anya ụkpụrụ log2 (mgbanwe okpukpu) n'etiti inoculated (Colletotrichum lupini, strain Col-08, nke enwetara site na ubi lupine, Wizhenica, Poland, 1999) na njikwa (sham-inocated) osisi n'otu oge.A na-enyocha ahịrị lupine dị warara ndị a: 83A: 476 (na-eguzogide ọgwụ, na-ebu homozygous Lanr1 allele), Boregine (na-eguzogide ọgwụ, mkpụrụ ndụ ihe nketa na-amaghị), Mandelup (na-eguzogide obere ihe, na-ebu homozygous AnMan allele), na Population 22660 (nwere ike ime).
Dabere na nsonaazụ nke nyocha okwu dị iche na nke a na-eche na ọ na-etinye aka na nzaghachi nchebe megide fungi pathogenic, a họọrọ usoro mkpụrụ ndụ ihe nketa asaa a maka ịkọwapụta profaịlụ okwu site na PCR ozugbo (Mgbakwunye Table S9).
A kpalitere mkpụrụ ndụ protein putative TanjilG_10657 n'ime ahịrị ọmụmụ niile na akara oge ma e jiri ya tụnyere osisi njikwa (mimic) (Mgbakwunye Tebụlụ S10, S11).Na mgbakwunye, profaịlụ okwu nke TanjilG_10657 gosipụtara usoro na-abawanye ụba n'oge nnwale ahụ maka ahịrị niile.Ndị mmadụ 22660 gosipụtara mmetụta kachasị elu nke TanjilG_10657 na inoculation na ntinye 114-fold na ọkwa nkwupụta okwu kachasị elu (4.4 ± 0.4) na 24 HPI (Fig. 6a).The PR10 LlR18A protein gene TanjilG_27015 gosikwara ịgbalite n'ofe niile ahịrị na oge oge, na ọnụ ọgụgụ pụtara na ọtụtụ data (Fig. 6b).Yiri TanjilG_10657, a hụrụ ọkwa ikwu okwu kachasị elu nke TanjilG_27015 n'ime mmadụ 22660 etinyere na 24 HPI (19.5 ± 2.4).Acid endochitinase gene TanjilG_04706 ka emelitere nke ukwuu n'ahịrị niile na oge niile ma ewezuga Boregine 6 hpi (Fig 6c).A kpaliri ya nke ukwuu na oge mbụ (6 HPI) na 83A: 476 (site na 10.5 ugboro) ma na-abawanye na ahịrị ndị ọzọ (site na 6.6-7.5 ugboro).N'oge nnwale, okwu nke TanjilG_04706 nọgidere na-na-etoju na 83A: 476 na Boregine, mgbe na Mandelup na Population 22660 ọ budata ụba, na-eru dịtụ elu ụkpụrụ (5.9 ± 1.5 na 6.2 ± 1.5, karị).endoglucan-1,3-β-glucosidase-dị ka gene TanjilG_23384 gosipụtara ọrụ dị elu na oge abụọ mbụ (6 na 12 hpi) n'ahịrị niile ma e wezụga ọnụ ọgụgụ 22660 (Fig 6d).A na-ahụ ọkwa nkwupụta ikwu kachasị elu nke TanjilG_23384 n'oge nke abụọ (12 hpi) na Mandelup (2.7 ± 0.3) na 83A: 476 (1.5 ± 0.1).Na 24 HPI, okwu TanjilG_23384 dị ntakịrị na ahịrị ọmụmụ niile (site na 0.04 ± 0.009 ruo 0.44 ± 0.12).
Profaịlụ nkọwapụta nke mkpụrụ ndụ ihe nketa ahọpụtara (ag) nke PCR ọnụọgụ ekpughere.Nọmba 6, 12 na 24 na-anọchi anya awa mgbe ịgba ọgwụ mgbochi ọrịa gasịrị.A na-eji mkpụrụ ndụ ihe nketa LanDExH7 na LanTUB6 mee ka ọ dị mma ma jiri LanTUB6 mee ihe maka nhazi usoro n'etiti.Ogwe mperi na-anọchite anya ndahie ọkọlọtọ dabere na ụdị mkpụrụ ndụ atọ, nke ọ bụla n'ime ha bụ nkezi nke nrụgharị teknụzụ atọ. Ihe ndekọ ọnụ ọgụgụ dị iche iche dị na ọkwa okwu dị n'etiti inoculated (Colletotrichum lupini, strain Col-08, nwetara na 1999 site na mpaghara lupine na Wierzenica, Poland) na njikwa (ịkwa emo) osisi na-akara n'elu data data (* P value <0.05, ** P value ≤ 0.01 , *** P value ≤ 0.01 , 1). Ihe ndekọ ọnụ ọgụgụ dị iche iche dị na ọkwa okwu dị n'etiti inoculated (Colletotrichum lupini, strain Col-08, nwetara na 1999 site na mpaghara lupine na Wierzenica, Poland) na njikwa (ịkwa emo) osisi na-akara n'elu data data (* P value <0.05, ** P value ≤ 0.01 , *** P value ≤ 0.01 , 1). Ndị ọkà mmụta sayensị na ndị ọkà mmụta sayensị na-ahụ maka ọrịa shuga na-eme ka ahụ dịkwuo mma (Colletotrichum lupini, Col. люпина в Верженице, Польша) na контрольными P ≤ 0,01, *** значение P ≤ 0,001). Ọnụ ọgụgụ dị ịrịba ama dị iche iche na ọkwa nkwupụta dị n'etiti inoculated (Colletotrichum lupini, strain Col-08, nwetara na 1999 site na ubi lupine na Wierzhenice, Poland) na njikwa (sham-inocated) osisi na-ahụ n'elu data data (* P uru <0.05, ** P-uru ≤ 0.01, *** P-value ≤ 0.01, ≤-1).接种（Colletotrichum lupini，Col-08株，1999年从波兰Wierzenica的羽扇豆田获得）和对照（模拟接科又模拟接科剤來模拟接种剤來來）差异的统计学显着性标记在数据点上方（*P值< 0.05, **P 值≤ 0.01, ***P 值≤ 0.001).接种 （colletotrichum lupini ， color-08 株 ， 1999 年 波兰 波兰 wierzenica 的 羽扇 获得） 和 对照差异 的 统计学 显着性 标记 数据点 上方*p 值 <0.05, **P ≤ 0.01, ***P ≤ 0.001). Ndị ọkà mmụta sayensị na ndị ọkà mmụta sayensị na-ahụ maka ọgwụgwọ anụ ahụ na-eme ka ahụ dịkwuo mma. Верженице, Польша, в 1999 г.) na контрольными -значение ≤ 0,01, *** P-значение ≤ 0,001). Ọnụ ọgụgụ dị ịrịba ama dị iche iche na ọkwa nkwupụta n'etiti inoculated (Colletotrichum lupini, strain Col-08, nwetara site na lupine ubi na Verzhenice, Poland, na 1999) na njikwa (sham-inoculated) osisi na-dere n'elu data data (* P uru <0.05, ** P-uru ≤ 0.01, *** P-value ≤ 0.01, *** P) .Ahịrị NLL nyochara bụ: 83A: 476 (na-eguzogide ọgwụ, na-ebu homozygous Lanr1 allele), Mandelup (na-eguzogide n'ụzọ kwesịrị ekwesị, na-ebu homozygous AnMan allele), Boregine (na-eguzogide ọgwụ, mkpụrụ ndụ ihe na-amaghị ama) na ọnụ ọgụgụ mmadụ 22660 (nwere ike ịdaba).
Onye ndoro-ndoro ochichi TanjilG_05042 na mpaghara Lanr1 gosipụtara ụkpụrụ ngosipụta pụtara ìhè dị iche site na profaịlụ enwetara na ọmụmụ RNA-seq (Fig. 6e).Achọpụtara mmụba dị ịrịba ama nke mkpụrụ ndụ ihe nketa a na Mandelup na ọnụ ọgụgụ 22660 (ruo oge 39.7 na 11.7, n'otu n'otu), na-ebute ọkwa nkwupụta dị elu (ruo 1.4 ± 0.14 na 7.2 ± 1.3, n'otu n'otu).83A: 476 kpughekwara ụfọdụ ngbanwe nke TanjilG_05042 gene (ruo 3.8-fold), Otú ọ dị, ọkwa nkwupụta okwu e nwetara (0.044 ± 0.002) karịrị okpukpu 30 karịa nke a hụrụ na Mandelup na ndị 22660.nke qPCR nyochara gosipụtara ọdịiche dị ịrịba ama na ọkwa nkwupụta n'etiti genotypes na ụdị mock-vaccinated (njikwa) dị iche iche, na-erute ọdịiche dị okpukpu 58 n'etiti ndị mmadụ 22660 na 83A: 476, yana n'etiti ọnụ ọgụgụ 22660 na 22660. E nwetara ọdịiche okpukpu abụọ n'etiti Boregine na Mandalup.
Onye ndoro-ndoro ochichi na mpaghara AnMan, TanjilG_12861, na-arụ ọrụ na nzaghachi maka ịgba ọgwụ mgbochi na 83A: 476 na Mandelup, na-anọpụ iche na ndị 22660, ma na-agbadata na Boregine (Fig 6f).Okwu ikwu nke mkpụrụ ndụ TanjilG_12861 bụ nke kachasị elu na 83A etinyere: 476 (0.14± 0.01).Nke 17.4 kDa klas m okpomọkụ ujo protein gene TanjilG_05080 HSP17.4 gosiri ala ikwu okwu etoju na niile ọmụmụ strains na oge ihe (Fig. 6g).Ahụrụ uru kachasị elu na 24 HPI na ọnụ ọgụgụ 22660 (0.14 ± 0.02, mmụba okpukpu asatọ na nzaghachi ịgba ọgwụ mgbochi).
Ntụle nke profaịlụ mkpụrụ ndụ ihe nketa (Fig 7) kpughere njikọ dị elu n'etiti TanjilG_10657 na mkpụrụ ndụ ihe anọ ọzọ: TanjilG_27015 (r = 0.89), TanjilG_05080 (r = 0.85), TanjilG_05042 (r = 0.80) (r = 0.80) na Tanjil.Nsonaazụ dị otú ahụ nwere ike igosi nhazi nhazi nke mkpụrụ ndụ ihe nketa ndị a n'oge nzaghachi nchebe.Mkpụrụ ndụ ihe nketa TanjilG_12861 na TanjilG_23384 gosipụtara profaịlụ okwu dị iche iche nwere ụkpụrụ ọnụọgụ njikọ Pearson dị ala (site na 0.08 ruo 0.43 na -0.19 ruo 0.28, n'otu n'otu) ma e jiri ya tụnyere mkpụrụ ndụ ihe nketa ndị ọzọ.
Achọpụtara njikọ dị n'etiti profaịlụ okwu mkpụrụ ndụ ihe nketa site na iji PCR ọnụọgụ.A na-enyocha ahịrị lupine dị warara ndị a: 83A: 476 (na-eguzogide ọgwụ, na-ebu homozygous Lanr1 allele), Mandelup (na-eguzogide obere ihe, na-ebu homozygous AnMan allele), Boregine (na-eguzogide ọgwụ, mkpụrụ ndụ ihe nketa na-amaghị), na Population 22660 (nwere ike ịdaba).A gbakọrọ oge atọ (6, 12 na 24 awa mgbe inoculation), gụnyere inoculated (Colletotrichum lupini, strain Col-08, nwetara site na lupine ubi na Wierzhenice, Poland, na 1999) na njikwa (sham-inocated) osisi.Ọ̀tụ̀tụ̀ ahụ na-egosi uru nke ọnụọgụ mmekọrịta nke Pearson.
Dabere na data enwetara na 6 horsepower kwa inch, WGCNA rụrụ na 9981 DEG chọpụtara site na-atụnyere inoculated na njikwa osisi na-elekwasị anya n'oge agbachitere nzaghachi (Mgbakwunye Table S12).Achọtara mkpụrụ ndụ mkpụrụ ndụ iri abụọ na abụọ (ụyọkọ) nwere profaịlụ okwu jikọrọ (nke dị mma ma ọ bụ nke na-adịghị mma) n'etiti genotypes na ụdị nnwale. Ná nkezi, usoro okwu mkpụrụ ndụ ihe nketa na-agbadata n'usoro 83A: 476> Mandelup> Boregine> Ọnụ ọgụgụ mmadụ 22660 (na ụdị abụọ ahụ, Otú ọ dị, omume a siri ike na osisi nchịkwa). Ná nkezi, usoro okwu mkpụrụ ndụ ihe nketa na-agbadata n'usoro 83A: 476> Mandelup> Boregine> Ọnụ ọgụgụ mmadụ 22660 (na ụdị abụọ ahụ, Otú ọ dị, omume a siri ike na osisi nchịkwa). 83A:476 > Mandelup > Boregine > Ọnụ Ọgụgụ 22660 ильнее у контрольных растений). Ná nkezi, usoro okwu mkpụrụ ndụ ihe nketa na-ebelata n'usoro 83A: 476> Mandelup> Boregine> Ọnụ ọgụgụ mmadụ 22660 (na ụdị abụọ ahụ, Otú ọ dị, usoro a siri ike na osisi nchịkwa).平均而言，基因表达水平按83A:476 > Mandelup > Boregine > Population 22660物中更强）.平均 而 ， 基因 水平 按 按 83a: 476> mandelup> boregine> onu ogugu mmadu 22660 .更！！！！！ 83A: 476 > Mandelup > Boregine > Ọnụ Ọgụgụ 22660 е у контрольных растений). Na nkezi, usoro okwu mkpụrụ ndụ ihe nketa belatara na usoro 83A: 476> Mandelup> Boregine> Ọnụ ọgụgụ mmadụ 22660 (agbanyeghị, na ụdị abụọ a, omume a siri ike na osisi njikwa).Ịgba ọgwụ mgbochi ọrịa butere mbelata nke okwu mkpụrụ ndụ ihe nketa, ọkachasị na modul 18, 19, 14, 6 na 1 (n'usoro nke na-agbadata), ụkpụrụ na-adịghị mma (dịka modul 9 na 20) ma ọ bụ nwere mmetụta na-anọpụ iche (dịka modul 11, 22, 8 na 13).GO okwu enrichment analysis (Mgbakwunye Tebụl S13) kpughere "GO: 0006952 Nzaghachi Nchedo" maka modul inoculated (18) nwere oke ịgbalite, gụnyere mkpụrụ ndụ ihe nketa nke qPCR (TanjilG_04706, TanjilG_23384, TanjilG_10657) na-enyocha ya dị ka TanjilG_10657 na TanjilG. modul (9).Module 18 concentrator (Fig. 8) ka amapụtara dị ka mkpụrụ ndụ TanjilG_26536 na-edobe protein PR-10 dị ka LlR18B, na modul 9 concentrator ka amapụtara dị ka mkpụrụ ndụ TanjilG_28955 nke na-edobe fotosystem II PsbQ protein.Achọtara nwa akwukwo anthracnose resistance gene Lanr1, TanjilG_05042, na modul 22 (Fig 9) ma jikọta ya na okwu "GO: 0044260 Cellular macromolecular metabolic processes" na "GO: 0006355 Transcriptional regulation, DNA templating" na-ebu TanjilG_0121.mkpụrụ ndụ ihe nketa ahụ na-etinye ihe ngbanwe nrụgide okpomọkụ A-4a (HSFA4a).
Nyocha netwọkụ dị arọ nke nkwupụta mkpụrụ ndụ ihe nketa nke modul nwere usoro usoro ndu nke egosipụtara nke ọma "GO: 0006952 nzaghachi nchekwa".E mere ka ligation dị mfe iji pụta ìhè mkpụrụ ndụ ihe nketa anọ nke qPCR nyochara (TanjilG_04706, TanjilG_23384, TanjilG_10657 na TanjilG_27015).
Ntụle netwọkụ dị arọ nke nkwupụta mkpụrụ ndụ ihe nketa nke modul nwere usoro usoro ndu nke egosipụtara nke ọma "GO: 0006355: ụkpụrụ ederede, DNA templating" na iburu onye ndoro-ndoro ochichi anthracnose gene Lanr1 TanjilG_05042.E mere ka ligation dị mfe iji kewapụ mkpụrụ ndụ TanjilG_05042 na etiti TanjilG_01212.
Nnyocha nguzogide Anthracnose anakọtara n'Australia gosiri na ihe ka ọtụtụ n'ime mkpụrụ osisi a tọhapụrụ n'oge na-adị mfe;A kọwawo Kalya, Coromop na Mandelup dị ka ndị na-eguzogide agafeghị oke, ebe Wonga, Tanjil na 83A: 476 ka akọwara dị ka ihe na-eguzogide nke ukwuu26,27,31.nwere otu ihe mgbochi ahụ, akpọrọ Lanr1, na Coromup na Mandelup nwere ihe dị iche iche, akpọrọ AnMan10, 26, 39, ebe Kalya gafere n'ụzọ dị iche., Lanr2.Nleba anya maka nguzogide anthracnose na Germany rụpụtara na njirimara Bo7212 ahịrị na-eguzogide ya na onye na-achọ allele ọzọ karịa Lanr1, nke akpọrọ LanrBo36.
Ọmụmụ ihe anyị kpughere obere oge (ihe dịka 6%) nke Lanr1 allele na germplasm nwalere.Nleba anya a kwekọrọ na nsonaazụ nyocha nke East European germplasm site na iji akara Anseq3 na Anseq4, nke gosipụtara na Lanr1 allele dị na ahịrị abụọ Belarusian.Nke a na-egosi na mmemme ịmụ nwa mpaghara ejibeghị nke Lanr1 allele, n'adịghị ka ọ dị n'Australia, ebe ọ bụ otu n'ime isi ihe dị mkpa maka ịmụ nwa na-enyere aka.Nke a nwere ike ịbụ n'ihi nguzogide dị ala nke Lanr1 allele na-enye na ọnọdụ ubi Europe ma e jiri ya tụnyere akụkọ Australia.Tụkwasị na nke ahụ, ọmụmụ banyere anthracnose na mpaghara mmiri ozuzo dị elu na Australia egosiwo na nzaghachi nkwụsị nke Lanr1 allele na-emekọrịta ihe nwere ike ọ gaghị adị irè na ọnọdụ ihu igwe na-akwado ọganihu na mmepe ngwa ngwa nke pathogen19,42.N'ezie, na ọmụmụ ihe ugbu a, a na-ahụkwa ụfọdụ ihe mgbaàmà nke anthracnose na genotypes na-ebu Lanr1 allele, na-atụ aro na nguzogide nwere ike ịla n'iyi n'okpuru ọnọdụ kachasị mma maka mmepe nke C. lupini.Tụkwasị na nke ahụ, nkọwa ụgha dị mma nke ọnụnọ Anseq3 na akara Anseq4, bụ ihe dịka 1 cm site na mpaghara Lanr1, ga-ekwe omume 28,30,43.
Ọmụmụ ihe anyị gosiri na 83A: 476, na-ebu Lanr1 allele, zaghachi na C. lupini inoculation na nnukwu transcriptome reprogramming na oge mbụ nyochachara (6 hpi), mgbe Mandelup, na-ebu AnMan allele, a na-ahụ nzaghachi transcriptomic ọtụtụ mgbe.(site na 24 ruo 48 hp).Ọdịiche ndị a na-adịru nwa oge na nzaghachi agbachitere jikọtara ya na ọdịiche dị na mgbaàmà ọrịa, na-egosipụta mkpa ọ dị n'oge mmalite nke nje pathogen maka nzaghachi na-aga nke ọma na nguzogide.Iji bute anụ ahụ ihe ọkụkụ, spores anthrax ga-agaferịrị ọtụtụ usoro ntolite n'elu ụlọ, gụnyere germination, nkewa sel, na nguzobe nke appressorium.Ihe mgbakwunye bụ usoro na-adịghị emerụ ahụ nke na-ejikọta ya na elu nke onye ọbịa ma na-eme ka ịbanye n'ime anụ ahụ ndị ọbịa.Ya mere, spores nke C. gloeosporioides na pea wepụ gosipụtara nkewa mbụ nke oghere mgbe 75-90 nkeji nke incubation, nhazi nke tube germ mgbe 90-120 nkeji gasịrị, na nkwụsị mgbe 4 awa 45 gasịrị.Mango C. gloeosporioides gosiri ihe karịrị 40% conidial germination mgbe awa 3 nke incubation na banyere 20% e guzobere appressors mgbe 4 awa.Mkpụrụ ndụ CAP20 na-emetụta virulence nke C. gloeosporioides gosipụtara ọrụ transcriptional na epiphyte-forming conidia mgbe 3.5 h incubation na ube oyibo elu wax na nnukwu mkpokọta nke CAP20 protein mgbe 4 h 46 min.N'otu aka ahụ, ọrụ nke mkpụrụ ndụ ihe nketa melanin biosynthesis na C. trifolii ka a kpalitere n'oge ntinye awa 2 wee guzobe appressorium mgbe elekere 1 gachara.Nnyocha nke anụ ahụ akwụkwọ egosiwo na strawberries ndị e tinyere na C. acutatum nwere nkwụsị nke mbụ na 8 hpi, ebe tomato ndị e tinyere na C. coccodes nwere nkwụsị mbụ na 4 hpi48,49.n'ụzọ dị ukwuu kwekọrọ n'ogo oge nke Colletotrichum spp.usoro na-efe efe.Nzaghachi agbachitere ngwa ngwa na 83A: 476 na-atụ aro itinye aka na nguzogide osisi na mkpụrụ ndụ ihe nketa na-akpata ọrịa (ETI) n'ahịrị a, ebe nzaghachi egbu oge nke Mandelup na-akwado ihe mgbochi molecular na-emetụta micro-triggered immunity (MTI) hypothesis 50. Nzaghachi mbụ na 83A: 476 na Mandelup.Ntugharị akụkụ dị n'etiti mkpụrụ ndụ ihe nketa elu-ma ọ bụ ala na-achịkwa na nzaghachi na-egbu oge na-akwadokwa echiche a, ebe a na-ewerekarị ETI dị ka nzaghachi MTI na-emewanyewanye ma kwalite nke na-ejedebe na ọnwụ cell a na-eme na saịtị nke ọrịa, nke a maara dị ka ihe egwu anaphylactic 51,52.
Ọtụtụ n'ime mkpụrụ ndụ ihe nketa na-ekwu na okwu a na-egosipụtakarị Gene Ontology GO: 0006952 "Nzaghachi Nchekwa" bụ 11 homologues nke ozi ibu ọnụ na-akpata nchekasị 22 protein (dị ka SAM22) na isi asaa protein protein-amasị (MLPs).-dị ka protein 31, 34, 43 na 423 gosipụtara myirịta usoro.Mkpụrụ ndụ ihe nketa nke SAM22 gosipụtara ọrụ dị ịrịba ama nke na-adịte aka, na-egosi mmụba nke nguzogide anthracnose (83A: 476 na Boregine).Agbanyeghị, a na-ahazi mkpụrụ ndụ ihe nketa MLP naanị n'ahịrị na-ebu onye na-emegide onye mmeri (83A:476/Lanr1 na 6 hpi na Mandelup/AnMan na 24 hpi).Ekwesiri iburu n'uche na ihe niile achọpụtara SAM22 yiri homologues sitere na ụyọkọ mkpụrụ ndụ ihe dị ka 105 kb, ebe mkpụrụ ndụ ihe nketa MLP sitere na mpaghara dị iche iche nke genome.Achọkwara ịgbalite ụdị mkpụrụ ndụ ihe nketa SAM22 dị otú ahụ na nyocha anyị gara aga nke NLL na-eguzogide ọgwụ mgbochi Diaporthetoxica, na-atụ aro na ha na-etinye aka na akụkụ kwụ ọtọ nke nzaghachi agbachitere.A na-akwado nkwubi okwu a site na akụkọ banyere nzaghachi dị mma nke SAM22-dị ka mkpụrụ ndụ ihe nketa na mmerụ ahụ ma ọ bụ ọgwụgwọ na salicylic acid, fungal inducers, ma ọ bụ hydrogen peroxide.
E gosiputara mkpụrụ ndụ ihe nketa MLP ka ọ zaghachi na nrụgide abiotic na biotic dị iche iche, gụnyere nje nje, nje na nje fungal na-efe efe n'ọtụtụ ụdị osisi55.Ntuziaka nzaghachi nke ụfọdụ mmekọrịta dị n'etiti osisi na pathogens sitere na mmụba siri ike (ya bụ, n'oge a na-etinye owu na Verticillium dahliae) na-ebelata nke ukwuu (ya bụ, mgbe ọrịa apụl na Alternaria spp.) 56,57.Achọpụtala mbelata nke ukwuu nke mkpụrụ ndụ MLP dị ka 423 n'oge nchebe ube oyibo na ọrịa F. niger na n'oge ọrịa nke osisi apụl Botryosphaeria berengeriana f.cn.piricola na Alternaria alternata bụ apple pathotypes58,59.Na mgbakwunye, apple calli overexpressing MLP-dị ka 423 gene nwere ngosipụta dị ala nke mkpụrụ ndụ ihe nketa na-emegide ma bụrụkwa ndị nwere ike ibute ọrịa fungal59.Na-eso Fusarium oxysporum f, a na-egbochikwa mkpụrụ ndụ MLP dị ka 423 na germplasm agwa agwa na-eguzogide ọgwụ.cn.Ọrịa bean 60.
Ndị ọzọ nọ n'ezinụlọ PR-10 nke a chọpụtara na ọmụmụ RNA-seq anyị bụ mkpụrụ ndụ LlR18A na LlR18B na nzaghachi maka mmụba, yana usoro (1 gene) ma ọ bụ 3 mkpụrụ ndụ ihe nketa) maka protein na-ebufe lipid DIR1..Na mgbakwunye, WGCNA na-akọwapụta mkpụrụ ndụ LlR18B dị ka oghere na modul a, nke nwere ike ịgba ọgwụ mgbochi ọrịa ma na-ebu ọtụtụ mkpụrụ ndụ ihe nchebe.A na-ebute mkpụrụ ndụ LlR18A na LlR18B na akwụkwọ lupine na-acha odo odo na nzaghachi nke nje bacteria na-akpata, yana na NLL stems mgbe D. toxica inoculation, ebe osikapa homologue nke mkpụrụ ndụ ihe nketa ndị a, RSOsPR10, na-ebute ngwa ngwa site na ọrịa fungal na-eche na ọ na-etinye aka na jasmonic acid signaling pathway, D. . s nke achọrọ maka mmalite nke nguzogide sistemu enwetara (SAR).Site na mmepe nke mmeghachi omume nchebe, a na-ebufe protein DIR1 site na nlebara anya nke ọrịa site na phloem iji kpalite SAR n'ime akụkụ ahụ dị anya.N'ụzọ na-akpali mmasị, a kpalitere mkpụrụ ndụ TanjilG_02313 DIR1 nke ọma n'oge mbụ n'ahịrị 84A: 476 na Population 22660, mana nguzogide anthracnose mepụtara nke ọma naanị na ahịrị 84A: 476.Nke a nwere ike igosi ụfọdụ subfunctionalization nke DIR1 gene na NLL, ebe ọ bụ na homologues atọ fọdụrụ zara inoculation naanị na 83A: 476 ahịrị na 6 hpi, na nzaghachi a na-eduga ala.
N'ime ọmụmụ ihe anyị, ihe ndị a na-ahụkarị nke kwekọrọ na usoro ndu nke a na-akpọ "GO: 0055114 Redox Protein" bụ protein cytochrome P450, peroxidase, linoleic acid 9S-/13S-lipoxygenase, na 1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid oxidase.Na mgbakwunye, WGCNA anyị na-akọwapụta homologue HSFA4a dị ka oghere na-ebu modul dị ka onye na-akwado mkpụrụ ndụ ihe mgbochi Lanr1 TanjilG_05042.HSFA4a bụ akụkụ nke redox na-adabere na redox nke ndebanye aha nuklia na osisi.
Ndị na-edozi Cytochrome P450 bụ oxidoreductases nke na-eme ka NADPH na / ma ọ bụ O2-adabere hydroxylation mmeghachi omume na mbụ na nke abụọ metabolism, gụnyere metabolism nke xenobiotics, nakwa dị ka hormones, ọdụdụ asịd, sterols, cell mgbidi components, biopolymers, na biosynthesis nke nchebe ogige 69, na anyị ọrụ chrome 0.0. 6 log2 (mgbanwe mkpụkọ) gaa na 5.7 n'ihi ọnụ ọgụgụ buru ibu nke mgbanwe homologues (37) na ọdịiche dị na usoro nzaghachi n'etiti mkpụrụ ndụ ihe nketa akọwapụtara, na-egosipụta ntughari elu..Iji naanị data RNA-seq kọwapụta ọrụ ndụ ndụ nke mkpụrụ ndụ ihe nketa NLL n'ime nnukwu ezinụlọ protein dị otú ahụ ga-abụ nke ukwuu.Otú ọ dị, ọ dị mma ịmara na ụfọdụ mkpụrụ ndụ ihe nketa cytochrome P450 na-ejikọta na ụbara iguzogide fungi pathogenic ma ọ bụ nje bacteria, gụnyere ntinye aka na mmeghachi ahụ nfụkasị ahụ69,70,71.
Class III peroxidases bụ multifunctional osisi enzymes na-etinye aka na usoro metabolic dị iche iche n'oge uto na mmepe osisi, yana nzaghachi na nrụgide gburugburu ebe obibi dị ka salinity, ụkọ mmiri ozuzo, ọkụ ọkụ dị elu, na ọgụ pathogen72.Peroxidases na-etinye aka na mmekọrịta nke ọtụtụ ụdị osisi na Anthracis, gụnyere Stylosanthes humilis na C. gloeosporioides, Lens culinaris na C. truncatum, Phaseolus vulgaris na C. lindemuthianum, Cucumis sativus na C. lagenarium73,764.75.Azịza ya dị ngwa ngwa, mgbe ụfọdụ ọbụna na 4 HPI, tupu ero ahụ abanye n'ime osisi anụ ahụ73.Mkpụrụ ndụ peroxidase zaghachikwara na inoculation D. toxica NLL.Na mgbakwunye na ọrụ ha na-ahụkarị iji mezie mgbawa oxidative ma ọ bụ wepụ nrụgide oxidative, peroxidases nwere ike igbochi uto pathogen site na ịmepụta ihe mgbochi anụ ahụ dabere na nkwado mgbidi cell n'oge lignification, subunit ma ọ bụ njikọ njikọ nke ogige ndị akọwapụtara.Enwere ike ịdepụta ọrụ a na silico na TanjilG_03329 gene encoding a putative lignin-forming anion peroxidase bụ nke emelitere nke ukwuu na ọmụmụ anyị na 83A: 476 ahịrị na-eguzogide na 6 HPI, ma ọ bụghị na nsogbu ndị ọzọ na oge oge na-azaghị.
9S-/13S-lipoxygenase nke linoleic acid bụ nzọụkwụ mbụ na ụzọ oxidative nke lipid biosynthesis78.Ngwaahịa nke ụzọ a nwere ọtụtụ ọrụ na nchekwa ihe ọkụkụ, gụnyere mgbidi cell na-ewusi ike site na nguzobe nke callose na pectin, na nhazi nke nrụgide oxidative site na mmepụta ụdị oxygen na-emeghachi omume79,80,81,82,83.N'ime ọmụmụ ihe ugbu a, okwu nke linoleic acid 9S- / 13S-lipoxygenase gbanwere na ụdị ọ bụla, ma na ndị nwere ike ịdaba 22660, ngbanwe na-emeri n'oge dị iche iche, ebe ọ bụ na nsogbu na-ebu Lanr1 na-eguzogide ọgwụ na AnMan allele, ọ na-emesi ike dị iche iche nke oyi akwa oxylipin dị n'etiti ihe nchebe gerex.
1-aminocyclopropane-1-carboxylate oxidase (ACO) homologue gbadara nke ukwuu (genes 9) ma ọ bụ gbadaa (genes 2) mgbe ejiri lupine tinye ya.Ewezuga ihe abụọ, azịza ndị a niile mere na 6 hp.na 83A:476.Mmeghachi omume enzymatic nke ndị na-edozi ACO na-agbazitere bụ nzọụkwụ na-ebelata ọnụego na mmepụta ethylene ma bụrụ nke a na-achịkwa nke ukwuu84.Ethylene bụ hormone osisi nke na-arụ ọrụ dịgasị iche iche n'ịhazi mmepe osisi na nzaghachi nye ọnọdụ nrụgide abiotic na biotic.Ntinye nke ntụgharị ACO na ịgbalite ụzọ akara ethylene na-etinye aka n'ịbawanye nguzogide osikapa na ero hemibiotrophic oryzae oryzae site na ịhazi mmepụta nke ụdị oxygen na-emeghachi omume na phytoalexins.A yiri nnọọ akwụkwọ ọrịa usoro achọtara n'etiti M. oryzae na C. lupini88,89, megide backdrop nke a ịrịba upregulation nke ACO homologues na 83A: 476 akara a kọrọ na ọmụmụ a, na-agbanwe ohere nke inyefe iguzogide NLL anthracnose Ethylene a mgbaàmà Central nzọụkwụ na molekụla ụzọ.
N'ime ọmụmụ ihe dị ugbu a, a na-ahụ nnukwu nkwụsị nke ọtụtụ mkpụrụ ndụ ihe nketa metụtara photosynthesis na 6 hpi na 83A: 476 na na 48 hpi na Mandeloop na ndị 22660.Ogologo na ọganihu nke mgbanwe ndị a dabara na ọkwa.A hụrụ nguzogide anthracnose na nnwale a.N'oge na-adịbeghị anya, a kọwawo mmegide siri ike na mmalite nke akwụkwọ ndekọ fotosynthesis n'ọtụtụ ụdị nke mmekọrịta nke osisi-pathogen, gụnyere nje bacteria na fungi.Ngwa ngwa (site na 2 HPI na ụfọdụ mmekọrịta) na mkpochapụ zuru ụwa ọnụ nke mkpụrụ ndụ ihe nketa metụtara photosynthesis na nzaghachi nke ọrịa nwere ike ịkpalite mgbochi osisi dabere na ntinye nke ụdị oxygen na-emeghachi omume na mmekọrịta ha na ụzọ salicylic acid iji dozie mmeghachi ahụ nfụkasị 90,94.
Na mmechi, usoro nzaghachi agbachitere atụpụtara maka usoro ahịrị kacha eguzogide ọgwụ (83A: 476) gụnyere nnabata ngwa ngwa pathogen site na R gene (nke a na-eche na TIR-NBS-LRR TanjilG_05042) na nrịanrịa nke salicylic acid na nrịbama ethylene, sochiri guzobe SAR dị ogologo.A na-akwado ọrụ site na protein DIR-1.Ekwesiri ighota na oge biotrophic maka oria C. lupini dị mkpụmkpụ (ihe dị ka ụbọchị 2), na-esote necrotic growth95.Mgbanwe n'etiti ọkwa ndị a nwere ike jikọta ya na necrosis na nkwupụta nke protein ethylene-inducible nke na-eme ka ihe na-akpata mmeghachi omume hypersensitivity na osisi ndị ọbịa.Ya mere, windo oge maka ijide C. lupini nke ọma na ọkwa biotrophic dị warara.Nhazigharị nke mkpụrụ ndụ ihe nketa jikọtara ya na redox na photosynthesis hụrụ na 83A: 476 na 6 hpi kwekọrọ na ọganihu nke hyphae fungal ma na-akpọsa mmepe nke nzaghachi nchebe na-aga nke ọma na ọkwa biotrophic.Nzaghachi transcriptomic nke Mandelup na ọnụ ọgụgụ 22660 nwere ike ị na-egbu oge iji jide ero ahụ tupu ọ gbanwee na uto necrotic, Otú ọ dị, Mandelup nwere ike ịdị irè karịa ọnụ ọgụgụ 22660 n'ihi na nhazi ngwa ngwa nke protein PR-10 na-akwalite nkwụsị nke kwụ ọtọ.
ETI, nke mkpụrụ ndụ ihe nketa R nke canonical na-achị, yiri ka ọ bụ usoro a na-ahụkarị maka mgbochi agwa na anthracnose.Ya mere, na ụdị legume Medicago truncatula, a na-enye iguzogide anthracnose site na RCT1 gene, onye so na TIR-NBS-LRR97 osisi R gene class.Mkpụrụ ndụ ihe nketa a na-enyekwa nguzogide anthracnose sara mbara na alfalfa mgbe a na-ebufe ya na osisi ndị nwere ike ịdaba.Na agwa nkịtị (P. vulgaris), a chọpụtala ihe karịrị mkpụrụ ndụ ihe nketa anthracnose iri na abụọ ruo taa.A na-ahụ ụfọdụ mkpụrụ ndụ ihe nketa ndị a na mpaghara enweghị mkpụrụ ndụ ihe nketa R ọ bụla, mana ọtụtụ ndị ọzọ dị na nsọtụ chromosomes na-ebu ụyọkọ mkpụrụ ndụ NBS-LRR, gụnyere TIR-NBS-LRRs99.Ọmụmụ SSR nke genome-wide gosikwara njikọ nke mkpụrụ ndụ NBS-LRR na nguzogide anthracnose na agwa nkịtị.Achọkwara mkpụrụ ndụ ihe nketa R na mpaghara genomic na-ebu nnukwu ebe mgbochi anthracnose na lupine ọcha 101.
Ọrụ anyị na-egosi na mmeghachi omume nguzogide ozugbo, na-arụ ọrụ n'oge mmalite nke ọrịa osisi (ọkacha mma karịa 12 hpi), na-echebe lupine dị warara nke ọma site na anthracnose nke fungus pathogenic Collelotrichum lupini kpatara.N'iji usoro mmepụta dị elu, anyị gosipụtara profaịlụ okwu dị iche iche nke mkpụrụ ndụ ihe nketa anthracnose na osisi NLL nke Lanr1 na AnMan na-eguzogide.Nchekwa na-aga nke ọma gụnyere iji nlezianya chepụta mkpụrụ ndụ ihe nketa maka protein ndị na-etinye aka na redox, photosynthesis, na pathogenesis n'ime awa nke mbụ ihe ọkụkụ ahụ nwere na nje nje.Mmeghachi omume nchebe yiri nke ahụ, mana egbu oge n'oge, adịghị arụ ọrụ nke ukwuu n'ichebe osisi site na ọrịa.Mgbochi Anthrax nke usoro Lanr1 na-agbaziri dị ka nzaghachi ngwa ngwa nke R gene (nsogbu na-akpata ihe na-akpata), ebe mkpụrụ ndụ AnMan nwere ike inye nzaghachi kwụ ọtọ (ọgwụgwọ nke usoro ihe omimi nke microbe na-ejikọta), na-enye ọkwa dị elu nke nkwado.
Ahịrị 215 NLL a na-enyocha maka akara anthracnose nwere cultivar 74, ahịrị 60 enwetara site na ịgafe ma ọ bụ ịmụba, mutant 5, na 76 anụ ọhịa ma ọ bụ mbụ germplasms.Ahịrị ahụ sitere na mba 17, ọkachasị site na Poland (58), Spain (47), Germany (27), Australia (26), Russia (19), Belarus (7), Italy (5) na ahịrị ndị ọzọ.sitere na mba iri.Ntọala ahụ gụnyekwara ahịrị na-eguzogide ntụaka: 83A: 476, Tanjil, Wonga na-ebu Lanr1 allele, na Mandelup na-ebu AnMan allele.E nwetara ahịrị ndị ahụ site na nchekwa data Lupine Genetic Resource nke Europe nke Poznań Plant Breeding Ltd., Wiatrowo, Poland (Ntinye mgbakwunye S1) debere.
A na-akụ osisi n'okpuru ọnọdụ a na-achịkwa (photoperiod 16 awa, okpomọkụ 25 Celsius C n'ehihie na 18 Celsius C n'abalị).A tụlere ụdị mkpụrụ ndụ ihe nketa abụọ.E kewapụrụ DNA site na akwụkwọ ndị dị izu atọ site na iji DNeasy Plant Mini Kit (Qiagen, Hilden, Germany) dịka ụkpụrụ ahụ siri dị.A na-enyocha ogo na ntinye nke DNA dịpụrụ adịpụ site na ụzọ spectrophotometric (NanoDrop 2000; Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA).A na-enyocha akara AnManM1 nke na-aka akara anthracnose resistance gene AnMan (nke sitere na cv. Mandelup) na akara Anseq3 na Anseq4 flanking gene Lanr1 (nke sitere na cv. Tanjil) nyochara 11,26,28.Akara homozygotes maka allele na-eguzogide ọgwụ dị ka "1", nwere ike ime - dịka "0" na heterozygotes - dịka 0.5.
Dabere na nsonaazụ nyocha maka akara AnManM1, AnSeq3 na AnSeq4 na nnweta mkpụrụ maka nnwale nleba anya ikpeazụ, ahịrị 50 NLL ka ahọpụtara maka phenotyping nguzogide anthracnose.Emere nyocha ahụ n'ụdị oyiri na kọmpụta na-achịkwa griin ha na oge foto nke awa 14 nwere oke okpomọkụ nke 22 Celsius C n'ehihie yana 19 Celsius C n'abalị.A na-akpụcha mkpụrụ (iji agụba dị nkọ na-ebipụ uwe mkpụrụ dị n'akụkụ nke ọzọ nke ẹmbrayo) tupu ịgha mkpụrụ ka ọ ghara ịmị mkpụrụ n'ihi na uwe mkpụrụ ahụ siri ike na iji hụ na ọ ga-etolite.A na-akụ osisi na ite (11 × 11 × 21 cm) na ala na-adịghị mma (TS-1 REC 085 Medium Basic, Klasmann-Deilmann Polska, Warsaw, Poland).Ejiri ụdị Colletotrichum lupini Col-08, nke toro na 1999 site na ị ga-esi na osisi lupine dị warara na-eto n'ọhịa dị na Verzhenitsa, Greater Poland (52° 27′ 42″ N 17° 04′ 05″ E).Nweta mpaghara.Azụlitere ndị dịpụrụ adịpụ na etiti SNA na 20 Celsius C. n'okpuru ìhè ojii maka ụbọchị 21 iji kpalite sporulation.Izu anọ ka aghachara, mgbe osisi ahụ ruru ogo akwukwo 4-6, a na-eme ọgwụ mgbochi site na ịgbanye nkwusioru nke conidia na mkpokọta 0,5 x 106 conidia kwa ml.Mgbe etinyere ya, a na-edobe osisi ndị ahụ n'ọchịchịrị maka awa 24 na iru mmiri dị ihe dịka 98% yana okpomọkụ nke 25 Celsius C iji mee ka mkpụrụ nke condia na usoro ọrịa ahụ dịkwuo mfe.A na-akụ osisi ndị ahụ n'okpuru oge foto nke awa 14 na 22 Celsius C ụbọchị / 19 Celsius C n'abalị na iru mmiri 70%.Emere akara ọrịa ahụ ụbọchị 22 mgbe a gwọchara ya wee malite site na 0 (immune) ruo 9 (dị nnọọ mfe) dabere na ọnụnọ ma ọ bụ enweghị ọnya necrotic na ị ga na akwụkwọ.Na mgbakwunye, mgbe ọ gbasịrị akara, a tụrụ ibu nke osisi.A na-agbakọ mmekọrịta dị n'etiti genotypes nrịbama na ọrịa phenotypes dị ka isi ihe jikọrọ ya na usoro abụọ (enweghị ihe nrịbama heterozygous na nhazi nke ahịrị maka nyocha nke anthracnose resistance phenotype).