Javascript er óvirkt í vafranum þínum. Sumir eiginleikar þessarar vefsíðu virka ekki þegar JavaScript er óvirkt.
Skráðu þig með sérstökum upplýsingum þínum og tilteknu lyfi sem þú vekur áhuga á og við munum passa við upplýsingarnar sem þú gefur upp við greinar í umfangsmikla gagnagrunninum okkar og senda þér PDF afrit strax í tölvupósti.
作者 Stella S, Vitale SR, Martorana F, Massimino M, Pavone G, Lanzafame K, Bianca S, Barone C, Gorgone C, Fichera M, Manzella L
Stefania Stella, 1,2 Silvia Rita Vitale, 1,2 Federica Martorana, 1,2 Michele Massimino, 1,2 Giuliana Pavone, 3 Katia Lanzafame, 3 Sebastiano Bianca, 4 Chiara Barone, 5 Cristina Gorgone, 6 Marco Fichera, 6, 7. 95123, Ítalía;2 Center for Experimental Oncology and Hematology, AOU Policlinico “G.Rodolico – San Marco”, Catania , 95123, Ítalíu;3 Medical Oncology, AOU Policlinico “G.Rodolico – San Marco”, Catania, 95123, Ítalíu;4 Medical Genetics, ARNAS Garibaldi, Catania, 95123, Ítalíu;5 Medicine Genetics, ASP, Syracuse, 96100, Ítalía;6 Lífeinda- og líftæknivísindadeild, University of Catania, Medical Genetics, Catania, Ítalía, 95123;7Oasi Research Institute-IRCCS, Troina, 94018, Ítalíu Samskipti: Stefania Stella, sími +39 095 378 1946, tölvupóstur [varið með tölvupósti];[email protected] Tilgangur: Kímlínustökkbreytingar í BRCA1 og BRCA2 og staðfestu brjóstakrabbameini (BC), eggjastokkum (OC) og öðru sem tengist lífshættu á krabbameini. Próf á BRCA geninu er lykilatriði til að meta einstaklingsáhættu, sem og til að finna forvarnaraðferðir hjá heilbrigðum burðarberum og sérsníða meðferðir hjá krabbameinssjúklingum. afbrigði í sikileyskum fjölskyldum, rannsóknir sem beinast sérstaklega að þýðum á austurhluta Sikileyjar skortir. Markmið rannsóknarinnar okkar var að rannsaka tíðni og dreifingu BRCA sjúkdómsvaldandi kímlínubreytinga í hópi BC sjúklinga frá austurhluta Sikileyjar og að meta tengsl þeirra við sértæka BC eiginleika með því að nota næstu kynslóðar fylgni við æxlisröð og fylgni við æxlisröð,SULT. 35 sjúklingar (9%) voru með BRCA sjúkdómsvaldandi afbrigði, 17 (49%) í BRCA1 og 18 (51%) í BRCA2.BRCA1 breytingar eru algengar hjá þrefalt-neikvæðum BC sjúklingum, en BRCA2 stökkbreytingar eru algengari hjá luminal BC sjúklingum. Samanborið við ekki burðarbera, fengu einstaklingar með BRCA1 afbrigði með marktækri BRCA1 vísitölu afbrigðum ofar. stökkbreytingarstöðu í BC sjúklingum frá austurhluta Sikileyjar og staðfesta hlutverk NGS greiningar við að bera kennsl á sjúklinga með arfgengan BC. Á heildina litið eru þessi gögn í samræmi við fyrri vísbendingar sem styðja BRCA skimun fyrir rétta forvarnir og meðferð á krabbameini hjá stökkbreytingarberum.
Brjóstakrabbamein (BC) er algengasta illkynja sjúkdómurinn á heimsvísu og banvænasta krabbameinið hjá konum.1 Líffræðilegir eiginleikar sem ákvarða BC horfur og klíníska hegðun hafa verið mikið rannsökuð og að hluta til skýrð í gegnum tíðina. Reyndar eru nokkrir staðgöngumerki notaðir til að flokka BC í mismunandi sameindaundirgerðir. Þeir eru estrógen (R-viðtaka prógesterón (ER) og epider-viðtaka (R-viðtaka, prógesterón (ER)) og epiderm-viðtaka (R) 2) mögnun, útbreiðslustuðull Ki-67 og æxlisgráðu (G).2 Samsetning þessara breyta benti á eftirfarandi BC flokka: 1) Luminal æxli, sem sýndu ER og/eða PgR tjáningu, voru 75% af BCs. Þessum æxlum var frekar skipt í Luminal A, þegar Ki-67 var undir 20% og HER 20% og HER 20% og HER 2 neikvætt og HER 20% neikvæð. tilvist HER2 mögnunar, óháð útbreiðslustuðul;2) HER2+ æxli sem eru ER og PgR neikvæð en sýna HER2 mögnun. Þessi hópur stendur fyrir 10% allra brjóstaæxla;3) Þreffalt neikvætt brjóstakrabbamein (TNBC), sem sýnir ekki ER og PgR tjáningu og HER2 mögnun, er um það bil 15% brjóstakrabbameins.2-4
Meðal þessara BC undirtegunda tákna æxlisstig og útbreiðslustuðull þversniðs lífmerki sem tengjast beint og óháð æxlisárásargirni og horfum.5,6
Auk fyrrnefndra líffræðilegra eiginleika hefur hlutverk erfða erfðafræðilegra breytinga sem leiða til þróunar BC orðið sífellt mikilvægara á undanförnum árum.7 Um 1 af hverjum 10 brjóstaæxlum erfast vegna breytinga á kímlínum í sérstökum genum.8 Tvær stórar faraldsfræðilegar rannsóknir sem tóku til meira en 180.000 genahópa, BRCA, BRCA, hafa nýlega greint átta konur, BRCA, BRCA. 2, CHK2, PALB2, RAD51C og RAD51D) sem fyrst og fremst bera ábyrgð á arfgengum BC. Meðal þessara gena sýndu BRCA1 og BRCA2 (hér eftir nefnt BRCA1/2) sterkasta fylgni við þróun brjóstaæxla. , brisi, ristli og sortuæxli. Frá 13 til 80 ára er uppsöfnuð tíðni BC 72% hjá konum með BRCA1 sjúkdómsvaldandi afbrigði (PV) og 69% hjá konum með BRCA2 PV.14
Athyglisvert er að nýleg útgáfa bendir til þess að BC-áhætta sé háð tegund PV. Í raun, samanborið við sjúkdómsvaldandi styttingarafbrigði, eru áberandi missense-afbrigði, sérstaklega í BRCA1-geninu, tengd minni hættu á BC, sérstaklega hjá eldri konum.15
Tilvist BRCA1 eða BRCA2 PV tengdist mismunandi líffræðilegum og klínískum meinafræðilegum eiginleikum.16,17 BRCA1-tengd BCs hafa tilhneigingu til að vera klínískt árásargjarn, illa aðgreind og mjög fjölgandi. Þessi æxli eru venjulega þrefalt neikvæð og byrja snemma. s eru algengari í holrými B og koma venjulega fram hjá eldri fullorðnum.16-18 Athyglisvert er að stökkbreytingar í BRCA1 og BRCA2 auka næmi fyrir sértækum meðferðum, þar á meðal platínusöltum og marklyfjum eins og pólý(ADP-ríbósa) pólýmerasahemlum (PARPi).19,20
Undanfarin ár hefur innleiðing næstu kynslóðar raðgreiningar (NGS) í klínískri starfsemi gert auknum fjölda BC-sjúklinga kleift að gangast undir sameindapróf fyrir krabbameinsnæmisheilkenni, þar á meðal BRCA1/2.21 Samhliða því eru skilgreiningar byggðar á nákvæmum viðmiðum varðandi fjölskyldusögu, lýðfræðilegar og klínískir meinafræðilegir eiginleikar til að bera kennsl á einstaklingsbundin einkenni/2CA1,2 vísbendingar um það betur. að gera grein fyrir BRCA1/2 skimun í tilteknum þýðum, sem undirstrikar mun milli landfræðilegra svæða.24–27 Þó að til séu skýrslur um BC árganginn á vesturhluta Sikileyjar, eru færri upplýsingar tiltækar um BRCA1/2 skimun í austurhluta Sikileyjar íbúa.28,29
Við lýsum hér niðurstöðum kímlínu BRCA1/2 skimunar hjá BC sjúklingum frá austurhluta Sikileyjar, sem tengir tilvist BRCA1 eða BRCA2 stökkbreytinga frekar við helstu klínískt meinafræðilega eiginleika þessara æxla.
Afturskyggn rannsókn var gerð á „Center for Experimental Oncology and Hematology“ á Policlinico Hospital.Rodolico – San Marco í Catania. Frá janúar 2017 til mars 2021 var samtals 455 sjúklingum með brjósta- og eggjastokka-, sortuæxli, bris- eða blöðruhálskrabbamein vísað til krabbameins í brjósta- og eggjastokkum, í brisi eða blöðruhálskirtilskrabbameini í samræmi við declaring sameindagreiningu okkar. Helsinki og allir þátttakendur veittu skriflegt upplýst samþykki fyrir sameindagreiningu.
Vefjafræðilegir og líffræðilegir eiginleikar (ER, PgR, HER2 staða, Ki-67 og gráðu) BC voru metin á kjarna vefjasýni eða skurðsýni, þar sem aðeins var tekið tillit til árásargjarnra æxlisþátta. Byggt á þessum einkennum voru BCs flokkuð sem hér segir: luminal A (ER+ og/eða PgR+, HER2-, B0 Ki-6, HER2-, B0 Ki-6, + ER, 7, 20, 20, 20, 2000, 2007, 2007). -67≥20%), luminal B-HER2+ (ER og/eða PgR+, HER2+), HER2+ (ER og PgR-, HER2+) eða þrefalt neikvætt (ER og PgR-, HER2-).
Áður en stöðu BRCA1 og BRCA2 stökkbreytinga var metin, gerði þverfaglegt teymi, þar á meðal krabbameinslæknir, erfðafræðingur og sálfræðingur, æxliserfðafræðiráðgjöf fyrir hvern sjúkling til að ákvarða tilvist BRCA1 og/eða BRCA1.eða einstaklingar með mikla hættu á PV í BRCA2 geninu. Sjúklingaval var framkvæmt samkvæmt leiðbeiningum ítalska félagsins um krabbameinslækningar (AIOM) og staðbundnum ráðleggingum frá Sikiley.30,31 Þessi viðmið eru meðal annars: (i) fjölskyldusaga um þekkt sjúkdómsvaldandi afbrigði í næmisgenum (td BRCA1, BRCA2, TP53, PTEN);(ii) karldýr með BC;(iii) þeir sem eru með BC og OC;(iv) konur með BC <36 ára, TNBC <60 ára, eða tvíhliða BC <50 ára;(v) persónuleg sjúkrasaga um BC <50 ár og að minnsta kosti einn fyrsta gráðu ættingja: (a) BC < 50 ár;(b) óslímandi og ekki landamæri OC á hvaða aldri sem er;(c) tvíhliða BC;(d) karlkyns BC;(e) krabbamein í brisi;(f) krabbamein í blöðruhálskirtli;(vi) tvær eða fleiri persónuleg saga um BC > 50 ár og fjölskyldusaga um BC, OC eða briskrabbamein fyrir ættingja sem eru fyrsta gráðu ættingjar hvors annars (þar á meðal ættingjar sem hún er fyrsta gráðu ættingjar með);(vii) Persónuleg saga um OC og að minnsta kosti einn fyrsta gráðu ættingja: (a) f.Kr. <50 ára;(b) NOC;(c) tvíhliða BC;(d) karlkyns BC;(vii) kvendýr með hágæða serous OC.
20 ml útæðablóðsýni var tekið úr hverjum sjúklingi og safnað í EDTA glös (BD Biosciences). Erfðafræðilegt DNA var einangrað úr 0,7 ml heilblóðssýnum með QIAsymphony DSP DNA Midi Kit Isolation Kit (QIAGEN, Hilden, Ítalíu) samkvæmt leiðbeiningum framleiðanda og fór í gegnum a Fishormometer, USA, Walham Performet, USA Qubitor® 3. magngreiningu.Markaauðgun og bókasafnsundirbúningur er framkvæmt af Oncomine™ BRCA Research Assay Chef, tilbúinn til að hlaða honum inn í Ion AmpliSeq™ Chef Reagents DL8 Kit fyrir sjálfvirkan bókasafnsundirbúning samkvæmt leiðbeiningum framleiðanda. Settið samanstendur af tveimur multiplex PCR primer laugum sem hægt er að nota til að rannsaka öll BRCA1 (NM_0002)_0073)_0073 gen (BRCA1 (NM_0002)_0002) (BRCA1002)_0073. í stuttu máli var 15 µL af hverju þynntu DNA-sýni (10 ng) bætt við strikamerktar plötur til að undirbúa safnið og öll hvarfefni og rekstrarvörur voru settar á Ion Chef™ tækið. Sjálfvirk bókasafnsundirbúningur og sameining sýnishorns með strikamerkjum voru síðan framkvæmd á Ion Chef™ tækinu. Fjöldi tilbúinna bókasöfnanna var metinn af Qubitor, 3, 3, 2000 söfnum. MA, USA) samkvæmt leiðbeiningum framleiðanda. Að lokum eru söfn sameinuð í jafnmólum hlutföllum í Ion Chef™ safnsýnisglas (strikamerkja) og hlaðið á Ion Chef™ tækið. Röðun var framkvæmd með Ion Torrent S5 (Thermo Fisher Scientific) tæki (Thermo Chip an Fisher Scientific) (Thermo Chip an Fisher Scientific) (Thermo Chip Fisher Scientific) (Thermo Chip Fisher Scientific 510). plicon Suite (SmartSeq srl) og Ion Reporter hugbúnaður.
Öll afbrigðisnafnakerfi fylgdu núgildandi leiðbeiningum Human Genome Variation Consortium, sem er aðgengilegt á netinu (HGVS, http://www.hgvs.org/mutnomen). Klínískt mikilvægi BRCA1/2 afbrigða var skilgreint með því að nota flokkun International Consortium ENIGMA (Evidence-Based Network for Interpreting Germline Mutenigons gagnagrunni, https://s. UP, BRCAEXCHANGE , ClinVar, IARC_LOVD og UMD.Flokkunin felur í sér fimm aðskilda áhættuflokka: góðkynja (flokkur I), líklega góðkynja (flokkur II), afbrigði af óvissu um þýðingu (VUS, flokkur III), líklega sjúkdómsvaldandi (flokkur IV), og sjúkdómsvaldandi (flokkur V, stökkbreytt áhrif á gagnagrunnsvirkni og einnig greinandi verkfæri á gagnagrunni og aðgang að gagnagrunni virkni). 32
Til að úthluta mögulegri klínískri þýðingu fyrir hvert VUS, voru eftirfarandi reiknirit fyrir reiknirit fyrir spá um prótein notuð: MUTATION TASTER, 33 PROVEAN-SIFT (http://provean.jcvi.org/index.php), POLYPHEN-2 (http:// /genetics.bwh.harvard.edu/pph2//pph2/) og Align_aggvgvah.GD_aggvgVah. input.php).Afbrigði flokkuð sem flokkur 1 og 2 voru talin villigerð.
Sanger raðgreining staðfesti nærveru hvers sjúkdómsvaldandi afbrigðis. Í stuttu máli var par af sértækum frumurum hannað fyrir hvert greint afbrigði með því að nota BRCA1 og BRCA2 genaviðmiðunarröðina (NG_005905.2, NM_007294.3 og NG_012772.3, NM_000059, í sömu röð, var fylgt eftir af PC). cing.
Sjúklingar sem reyndust neikvæðir fyrir BRCA1/2 geninu voru prófaðir með multiplex ligation-dependent probe amplification (MLPA) í samræmi við leiðbeiningar framleiðanda til að meta tilvist stórra erfðafræðilegrar endurröðunar (LGR). Í stuttu máli eru DNA sýni eðlislögð og notuð eru allt að 60 BRCA1 og BRCA2 genasértækir rannsakar, sem hver um sig greinir í sérstakri nucleProot röð af um það bil 60 nucleProot afurðum. af PCR amplicons, voru síðan greind með háræðarafnámi og með Cofalyser.Net hugbúnaði í tengslum við viðeigandi lotu-sértækar Cofalyser töflur (www.mrcholland.com).
Valdar klínísk-meinafræðilegar breytur (vefjafræðileg einkunn og Ki-67% útbreiðslustuðull) tengdust nærveru BRCA1/2 PV, reiknuð með Prism hugbúnaðinum v. 8.4 með því að nota Fishers nákvæma próf þar sem gert var ráð fyrir að p-gildi <0,05 væri marktækt.
Á milli janúar 2017 og mars 2021 voru 455 sjúklingar skimaðir fyrir BRCA1/2 stökkbreytingum í kímlínu. Stökkbreytingarpróf voru framkvæmd á Policlinico Hospital's Center for Experimental Oncology and Hematology.Samkvæmt sikileysku leiðbeiningunum (http://www.gurs.regione.sicilia.it/Indic,N.2010, N.htm20. 020), Rodolico frá Catania – San Marco“ í heildina, 389 sjúklingar. Það voru brjóstakrabbamein, 37 krabbamein í eggjastokkum, 16 krabbamein í brisi, 8 krabbamein í blöðruhálskirtli og 5 sortuæxli.Dreifing sjúklinga eftir krabbameinstegundum og greiningarniðurstöðum er sýnd á mynd 1.
Mynd 1 sýnir flæðirit sem sýnir yfirlit yfir rannsóknina. Sjúklingar með brjósta-, sortuæxli, bris-, blöðruhálskirtils- eða eggjastokkaæxli voru prófuð með tilliti til stökkbreytinga í BRCA1 og BRCA2 genum.
Skammstafanir: PV, sjúkdómsvaldandi afbrigði;VUS, afbrigði af óvissri þýðingu;WT, villigerð BRCA1/2 röð.
Við beinum rannsóknum okkar sértækt að brjóstakrabbameinshópum. Sjúklingarnir voru með miðgildi aldurs 49 ára (á bilinu 23-89) og voru aðallega konur (n=376, eða 97%).
Af þessum einstaklingum voru 64 (17%) með BRCA1/2 stökkbreytingar og voru allar konur. Þrjátíu og fimm (9%) voru með PV og 29 (7,5%) með VUS. Sautján (48,6%) af 35 sjúkdómsvaldandi afbrigðum komu fram í BRCA1 og 18 (51,4%) í BRCA2, en í BRCA 2,21% (8%) (8%). (Mynd 1 og 2). LGR var ekki til staðar í MLPA greiningu.
Mynd 2. Greining á BRCA1 og BRCA2 stökkbreytingum í 389 brjóstakrabbameinssjúklingum.(A) Dreifing sjúkdómsvaldandi afbrigða (PV) (rauð), afbrigði af óvissu mikilvægi (VUS) (appelsínugult) og WT (blátt) í 389 brjóstakrabbameinssjúklingum;(B) 389 brjóstakrabbameinssjúklingar Þrjátíu og fimm (9%) voru með BRCA1/2 sjúkdómsvaldandi afbrigði (PVs). Þar á meðal voru 17 (48,6%) BRCA1 PV-berar (dökkrauður) og 18 (51,4%) BRCA2-berar (ljósrauður);(C) 29 (7,5%) af 389 einstaklingum báru VUS, 5 (17,2%) BRCA1 gen (dökkappelsínugult) og 24 (82,8%) BRCA2 gen (ljósappelsínugult).
Skammstafanir: PV, sjúkdómsvaldandi afbrigði;VUS, afbrigði af óvissri þýðingu;WT, villigerð BRCA1/2 röð.
Næst könnuðum við algengi BC sameindaundirtegunda hjá sjúklingum með BRCA1/2 PV. Dreifingin náði til 2 (5,7%) luminal A, 15 (42,9%) luminal B, 3 (8,6%) luminal B-HER2+, 2 (5,7%) HER2+ og 13 (37,1%) sjúklingar með TN4CA-positive. B BC, 2 (11,8%) voru með HER2+ sjúkdóm og 10 (58,8%) með TNBC. Æxli án BRCA1 stökkbreytinga voru annaðhvort luminal A eða luminal B-HER2+ (Mynd 3). Í BRCA2 jákvæða undirhópnum voru 10 (55,6%) æxli í luminal B, 3ER (55,6%) luminal B, 3ER (TN 6%). BC og 2 (11,1%) voru luminal A (Mynd 3). Engin HER2+ æxli voru til staðar í þessum hópi. Þannig eru BRCA1 stökkbreytingar algengar hjá TNBC sjúklingum, en BRCA2 breytingar eru ríkjandi í holrými B einstaklingum.
Mynd 3 Algengi undirtegunda brjóstakrabbameins hjá sjúklingum með sjúkdómsvaldandi afbrigði í BRCA1 og BRCA2. Vefrit sem sýna dreifingu BRCA1- (dökkrauðra) og BRCA2- (ljósrauðra) PVs meðal sameindaundirtegunda brjóstakrabbameinssjúklinga. Tölur sem greint er frá í hverjum reit tákna hlutfall sjúklinga með BRCA1 og BRCA2 undirgerð krabbameins PV fyrir hverja brjóstakrabbameins undirgerð.
Skammstafanir: PV, sjúkdómsvaldandi afbrigði;HER2+, húðþekjuvaxtarþáttur viðtaka 2 jákvæður;TNBC, þrefalt neikvætt brjóstakrabbamein.
Í kjölfarið metum við tegund og genastaðsetningu BRCA1 og BRCA2 PVs. Í BRCA1 PV sáum við 7 stakkirnisafbrigði (SNVs), 6 úrfellingar, 3 tvítekningar og 1 innsetningu. Aðeins ein stökkbreyting (c.5522delG) táknar nýja uppgötvun. Algengasta BRCA1 505Ta greindist í báðum einstaklingum. breyting felur í sér brottfellingu á fimm núkleótíðum (CTAAT) í BRCA1 exon 15, sem leiðir til þess að amínósýrunni leucine er skipt út fyrir týrósín við kódon 1679, og vegna þýðingarrammabreytingar með fyrirsjáanlegum stöðvunarkódoni leiða til ótímabærrar próteinstýfingar. Allar aðrar breytingar eru greindar á PV-svæðinu, var ekki greint í einni tilfelli á conplices-svæðinu. c.4357+1G>T) (tafla 1).
Varðandi BRCA2 PV, sáum við 6 úrfellingar, 6 SNVs og 2 tvítekningar. Engar breytinganna sem fundust eru nýjar. Þrjár stökkbreytingar komu fram aftur í þýði okkar, c.428dup og c.8487+1G>A sem kom fram hjá 3 einstaklingum, fylgt eftir með c.5851_5854 endurteknum C.5851_5854 endurteknum í 4 tilfellum. 5 af BRCA2, sem spáð er að kóði fyrir stytt, óvirkt prótein. Stökkbreytingin í c.8487+1G>A á sér stað á innra svæði BRCA2 intron 19 (± 1,2) og hefur áhrif á samsvörunarröðina fyrir splicing, sem leiðir til breyttrar splæsingar sem leiðir til óeðlilegrar eða fjarverandi 4AG-4-5AG-4 afbrigðis próteins. ótíðeyðing úr núkleótíðstöðum 5851 til 5854 í kóðun exon 10 af BRCA2 geninu og leiðir til þýðingarrammabreytingar með fyrirhuguðum öðrum stöðvunarkódoni (p.S1951WfsTer). Athyglisvert er, eins og áður hefur verið greint frá, að báðar breytingarnar c.631G>A og c.2.A greindust sömu stökkbreytingar og c.700. enósín (A) í BRCA2 exon 7 með gúaníni (G) sem inniheldur núkleótíð sem leiðir til breytinga á valíni í ísóleucín við kódon 211, ísóleucín Amínósýra er amínósýra með mjög svipaða eiginleika. Þessi breyting hefur áhrif á eðlilega mRNA splicing. Annað afbrigðið er staðsett á intronic svæði og hefur í för með sér tvöfalda A til 13 thymine gen BRCA á en thymine. 7008-2A>T breyting getur framkallað mörg afrit af mismunandi lengd. Ennfremur, í hópi BRCA2 PVs, voru 4 af 18 breytingum (22,2%) innfæddar.
Við kortlögðum síðan BRCA1/2 skaðlegar stökkbreytingar í starfrænum sviðum og próteinbindandi svæðum (Mynd 4). Í BRCA1 geninu voru 50% PVs staðsett í brjóstakrabbameinsþyrpingasvæðinu (BCCR), en 22% stökkbreytinganna voru staðsett í eggjastokkakrabbameinsþyrpingunni (OCCR) (Mynd 4A var staðsett í BRCA2% 7 og afbrigðum 3% PV). 42,8% stökkbreytinganna voru staðsett í OCCR (Mynd 4B). Næst, við metum staðsetningu PV innan BRCA1 og BRCA2 prótein lénsins. Fyrir BRCA1 próteinið fundum við þrjú PVs í lykkju og spólu léninu, og tvær stökkbreytingar í BRCT léninu (Mynd 4A próteinið, í BRC próteininu, í BRC próteininu, í BRC próteininu, í BRC léninu). tronic og 3 exonic breytingar greindust í oligo/oligosaccharide-binding (OB) og turn (T) lénum (Mynd 4B).
Mynd 4 Skýringarmynd af BRCA1 og BRCA2 próteinum og staðsetning sjúkdómsvaldandi afbrigða. Þessi mynd sýnir dreifingu BRCA1 (A) og BRCA2 (B) sjúkdómsvaldandi afbrigða hjá brjóstakrabbameinssjúklingum. Exonic stökkbreytingar eru sýndar í bláu en innra afbrigði eru sýndar í appelsínugult. Hæð súlu táknar fjölda tilfella. BRCA1 og BRCA2 prótein hómin sem greint er frá eru virkni prótein(A) lykkjan þeirra. í (RING) og kjarnastaðsetningarröð (NLS), spólu léni, SQ/TQ klasa léni (SCD) og BRCA1 C-enda léni (BRCT).(B) BRCA2 próteinið inniheldur átta BRC endurtekningar, DNA bindandi lén með helical domain (Helikical domain (Helikical) lén (Helical), þríföld oligona lén (Helical oligouwer) binding (Helical) (T), og An NLS á C hlið. Svæði sem kallast Breast Cancer Cluster Region (BCCR) og Ovarian Cancer Cluster Region (OCCR) eru sýnd neðst.*Táknar stökkbreytingar sem ákvarða stöðvunarkódon.
Við rannsökuðum síðan BC klínískt meinafræðileg einkenni sem gætu tengst nærveru BRCA1/2 PV. Fullkomnar klínískar skrár voru tiltækar fyrir 181 BRCA1/2 neikvæða sjúklinga (ekki burðarbera) og alla arfbera (n = 35). Fylgni var á milli tíðni æxlisfjölgunar og gráðu.
Við reiknuðum dreifingu Ki-67 út frá miðgildi hóps okkar (25%, bil <10-90%). Einstaklingar með Ki-67 < 25% voru skilgreindir sem „lágt Ki-67″, en einstaklingar með gildi ≥ 25% voru taldir „hár Ki-67“. burðarefni (mynd 5A).
Mynd 5 Fylgni Ki-67 við stigsdreifingu hjá brjóstakrabbameinskonum með og án BRCA1 og BRCA2 PVs.(A) Boxplot sem sýnir miðgildi Ki-67 hjá 181 BC sjúklingum sem ekki eru burðarberar á móti BRCA1 (18) eða BRCA2 (17) PV sjúklingum. P gildi undir 0,5 grömm töldu marktækt hans krabbameinssjúklinga. bekk (G2 og G3) í samræmi við BRCA1 og BRCA2 stökkbreytingarstöðu (WT einstaklingar, BRCA1 og BRCA2 PVs burðarberar).
Sömuleiðis skoðuðum við hvort æxlisstig tengdist nærveru BRCA1/2 PV. Þar sem G1 BC var fjarverandi í þýði okkar skiptum við sjúklingum í tvo hópa (G2 eða G3). Í samræmi við Ki-67 niðurstöður leiddi greiningin í ljós tölfræðilega marktæka fylgni á milli æxlisstigs og BRCA1 stökkbreytinga, með hærra hlutfalli af G3 burðarberum (5<Fi0p) burðarbera (0p) en G3 burðarbera. e 5B).
Framfarir í DNA raðgreiningartækni hafa gert áður óþekktar framfarir í BRCA1/2 erfðarannsóknum kleift, með afgerandi þýðingu fyrir sjúklinga með fjölskyldusögu um krabbamein. Hingað til hafa um það bil 20.000 BRCA1/2 afbrigði verið auðkennd og flokkuð samkvæmt American Society of Medical Genetics 35 og ENIGMA 6 BRCA kerfinu. s.37 Innan Ítalíu var hlutfall BRCA1/2 PVs á bilinu 8% til 37%, sem sýnir mikinn breytileika innan lands.38,39 Með tæplega 5 milljónir íbúa er Sikiley fimmta stærsta svæðið á Ítalíu hvað varðar fjölda íbúa. Þó að gögn séu til um dreifingu BRCA1/2 í vesturhluta landsins, eru engar vísbendingar um útbreiðslu BRCA1/2 í vesturhlutanum.
Rannsóknin okkar er ein af fyrstu skýrslum um tíðni BRCA1/2 PV í BC sjúklingum á austurhluta Sikileyjar.28 Við beinum greiningum okkar að BC, þar sem þetta er langalgengasti sjúkdómurinn í hópi okkar.
Þegar 389 BC sjúklingar voru prófaðir, báru 9% BRCA1/2 PVs, jafnt dreift á milli BRCA1 og BRCA2. Þessar niðurstöður eru í samræmi við þær niðurstöður sem áður var greint frá í ítölsku þýðinu.28 Athyglisvert er að 3% (13/389) af árgangi okkar voru karlkyns. Þetta hlutfall er hærra en búist var við fyrir karlkyns brjóstakrabbameini (1% af öllum brjóstakrabbameini sem byggist á BRCA/0 BC1), 4% af öllum BC1 hópum sem eru stökkbreytt. , enginn þessara manna þróaði BRCA1/2 PV, svo þeir voru umsækjendur í frekari sameindagreiningu til að útiloka tilvist sjaldgæfara stökkbreytinga eins og PALB2, RAD51C og D, meðal annarra. Afbrigði af óvissu um þýðingu voru sótt í 7% einstaklinga þar sem BRCA2 VUS var augljóst.
Þegar við greindum dreifingu BC sameindaundirgerða í BRCA1/2 stökkbreyttum konum, staðfestum við þekkt tengsl milli TNBC og BRCA1 PV (58,8%) og milli luminal B BC og BRCA2 PV (55,6%).
Við einbeitum okkur síðan að gerð og staðsetningu BRCA1/2 PV. Í okkar árgangi var algengasta BRCA1 PV c.5035_5039delCTAAT. Þó Incorvaia o.fl.lýsti ekki þessu afbrigði í sínum sikileyska árgangi, aðrir höfundar hafa greint frá því sem kímlínu BRCA1 PV.34 Nokkrir BRCA1 PVs fundust í hópnum okkar – td c.181T>G, c.514del, c.3253dupA og c.5266dupC – sem hafa sést í þessum tveimur og c.1G stökkbreytingum á Sicily >1 BRc28>1 af c.18. .5266dupC) finnast almennt í Ashkenazi gyðingum í Austur- og Mið-Evrópu (Póllandi, Tékklandi), slóvenskum, austurrískum, ungverskum, hvítrússneskum og þýskum ), 44,45 og, í Bandaríkjunum og Argentínu, var nýlega skilgreint sem „endurtekið sýklaafbrigði“ hjá ítölskum sjúklingum með BC og OC afbrigði af krabbameini í BC5434c sem áður hafði verið greint með BC5434c. í Palermo og Messina. Athyglisvert er að jafnvel Incorvaia o.fl.fann c.3253dupA afbrigðið í sumum fjölskyldum í Catania.28 Helstu BRCA2 PVs eru c.428dup, c.5851_5854delAGTT og intronic afbrigðið c.8487+1G>A, sem hefur verið greint nánar frá 28 hjá sjúklingi í Palermo með c.588dupdel, c.58dupdel, c. norðvestur Sikileyjar, aðallega á Trapani og Palermo svæðum, en c.5851_5854delAGTT PV sást á heimilum á norðvestur Sikiley. 8487+1G>A afbrigðið var algengara hjá einstaklingum frá Messina, Palermo og Caltanissetta.28 Rebbeck o.fl.áður lýst c.5851_5854delAGTT breytingunni í Kólumbíu.37 Annar BRCA2 PV, c.631+1G>A, hefur fundist hjá BC og OC sjúklingum frá Sikiley (Agrigento, Siracusa og Ragusa).28 Athyglisvert var að við sáum sambúð tveggja BRCA2 afbrigða í sama sjúklingi (BRCA.7G>08) og sama sjúklingi (BRCA.7G>A, C31G>08). sem við gerðum ráð fyrir að væri aðskilin í cis-ham, eins og áður hefur verið greint frá þannig.34,46 Þessar BRCA2 uble stökkbreytingar sjást örugglega oft á ítalska svæðinu og hafa reynst koma fram ótímabæra stöðvunarkódon, sem hafa áhrif á boðbera RNA skeytinguna og valda því að BRCA2 próteinið mistakast.47,48
Við kortlögðum einnig BRCA1 og BRCA2 PVs á hugsanlegum OCCR og BCCR svæðum prótein léna og gena. Þessum svæðum var lýst af Rebbeck o.fl.sem áhættusvæði fyrir þróun eggjastokka- og brjóstakrabbameins, í sömu röð.49 Hins vegar eru vísbendingar um tengsl milli staðsetningar kímlínuafbrigða og hættu á brjósta- eða eggjastokkakrabbameini enn umdeild.28,50-52 Hjá okkar þýði voru BRCA1 PVs aðallega staðsett á BCCR svæðinu, en BRCA2 PV tengsl voru aðallega staðsett á milli OCCR-svæða sem við fundum á milli. OCCR og BCCR svæði og BC eiginleika. Þetta getur stafað af takmörkuðum fjölda sjúklinga með BRCA1/2 stökkbreytingar. Frá sjónarhóli prótein léns dreifast BRCA1 PVs um allt próteinið og BRCA2 breytingar finnast helst í BRC endurteknum léninu.
Að lokum tengdum við BC klínískt meinafræðileg einkenni við BRCA1/2 PV. Vegna takmarkaðs fjölda sjúklinga sem teknir voru með fundum við aðeins marktæka fylgni á milli Ki-67 og æxlisstigs. Þó að mat og túlkun á Ki-67 sé enn nokkuð umdeilt, er víst að há fjölgunartíðni tengist aukinni hættu á að sjúkdómurinn endurtaki sig og „minnkun“ á því að sjúkdómurinn taki sig upp og „minnkun“. lágt“ Ki-67 er 20%. Þessi þröskuldur á hins vegar ekki við um BRCA1/2 stökkbreytinga sjúklingahópinn okkar, sem hefur miðgildi Ki-67 upp á 25%. Þessa þróun í háum Ki-67 tíðni má útskýra með algengi í luminal B og TNBC hópum okkar, þar af fátt luminal Aver æxli sem benda til þess að Ki260 vísbendingar hafi verið til staðar, sum vísbendingar um að Ki260 hafi verið til staðar. lagskiptu sjúklinga í samræmi við horfur þeirra.53,54 Út frá niðurstöðum greiningar okkar kemur marktæk fylgni ekki á óvart. Kemur fram á milli hás Ki-67 og einkunna og tilvistar BRCA1 PV.Reyndar eru BRCA1-tengd æxli dæmigerð fyrir TNBC og sýna árásargjarnari eiginleika.16,17
Að lokum gefur þessi rannsókn skýrslu um stökkbreytingastöðu BRCA1/2 í BC árgangi frá austurhluta Sikileyjar. Á heildina litið eru niðurstöður okkar í samræmi við fyrirliggjandi vísbendingar, bæði hvað varðar algengi stökkbreytinga og klínískt meinafræðilegt einkenni í BC. Fleiri rannsóknir á stærri hópum BRCA1/2 stökkbreyttra BC sjúklinga, svo sem að nota fjölgena stökkbreytta greiningu, er tilefni til að meta stökkbreytta PV, til að meta færri stökkbreytingar. tíðari en BRCA1/2. Þetta mun gera kleift að bera kennsl á og rétta stjórn á auknum fjölda einstaklinga sem eru í aukinni hættu á krabbameini vegna erfðabreytinga.
Við staðfestum að sjúklingar skrifuðu undir upplýst samþykki til að gefa út æxlissýni sín nafnlaust í rannsóknarskyni. Allir sjúklingar skrifuðu undir skriflegt upplýst samþykki í samræmi við Helsinki-yfirlýsinguna. Samkvæmt stefnu AOU Policlinico „G.Rodolico – S.Marco“ var þessi rannsókn undanþegin siðferðilegri endurskoðun vegna þess að BRCA1/2 greiningin var gerð í samræmi við skrifleg upplýst samþykki sjúklinga þeirra fyrir skriflegt samþykki sjúklinga til að nota í skriflegu samþykki sjúklinga fyrir upplýst samþykki. .
Við þökkum prófessor Paolo Vigneri fyrir aðstoð hans við umönnun brjóstakrabbameinssjúklinga eins og siðanefndin hefur óskað eftir.
Federica Martorana greinir frá heiðursverðlaunum frá Istituto Gentili, Eli Lilly, Novartis, Pfizer. Aðrir höfundar lýsa því yfir að engin hagsmunaárekstrar séu í þessu verki.
1. Sung H, Ferlay J, Siegel RL, o.fl.Global Cancer Statistics 2020: GLOBOCAN áætlar tíðni og dánartíðni 36 krabbameina í 185 löndum um allan heim.CA Cancer J Clin.2021;71(3):209-249.doi: 1603.22/caac.32: 1603.32.