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Composizione e caratterizzazione della nanoemulsione clorexidina cloridrato come promettente irrigante canalare antibatterico: studi in vitro ed ex vivo
Da Abdelmonem R., Younis MK, Hassan DH, El-Sayed Ahmed MAEG, Hassanien E., El-Batuti K., Elfaham A.
Rehab Abdelmonem, 1 Mona K. Younis, 1 Doaa H. Hassan, 1 Mohamed Abd El-Gawad El-Sayed Ahmed, 2 Ehab Hassanein, 3 Kariem El-Batuti, 3 Alaa Elfaham 31 Scienze e Tecnologia, Facoltà di Farmacia e Farmacia Industriale, Misr University, 6 October City, Egitto;2 Dipartimento di Microbiologia e Immunologia, Facoltà di Farmacia, Misr University of Science and Technology, 6 ottobre, Egitto;3 Dipartimento di Endodonzia, Università Ain Shams, Il Cairo, Egitto Introduzione e Scopo: Cloro exidina cloridrato [Chx.HCl] ha un'attività antibatterica ad ampio spettro, azione prolungata e bassa tossicità, pertanto è consigliato come potenziale irrigante canalare.Lo scopo di questo studio era quello di utilizzare una nuova composizione Chx.HCl nanoemulsione per aumentare il potere penetrante, la pulizia e l'azione antibatterica di Chx.HCl e utilizzarla come irrigante canalare.Metodi: le nanoemulsioni Chx.HCl sono state preparate utilizzando due diversi oli: acido oleico e Labrafil M1944CS, due tensioattivi, Tween 20 e Tween 80, e co-tensioattivo, glicole propilenico.Tracciare un diagramma di fase pseudo-ternario per indicare il sistema ottimale.Le formulazioni di nanoemulsioni preparate sono state valutate per contenuto di farmaco, tempo di emulsionamento, disperdibilità, dimensione delle goccioline, rilascio di farmaci in vitro, stabilità termodinamica, attività antibatterica in vitro e studi in vitro di formulazioni selezionate.L'azione penetrante, detergente e antibatterica della nanoemulsione Chx.HCl 0,75% e 1,6% è stata confrontata con la normale dimensione delle particelle come irrigante canalare.Risultati.La formulazione scelta è stata F6 con il 2% di Labrafil, il 12% di Tween 80 e il 6% di glicole propilenico.Piccole dimensioni delle particelle (12,18 nm), breve tempo di emulsionamento (1,67 secondi) e rapida dissoluzione dopo 2 minuti.Si è scoperto che è un sistema termodinamicamente/fisicamente stabile.Rispetto alla dimensione delle particelle Chx.HCl convenzionale, la maggiore concentrazione di nanoemulsione Chx.HCl 1,6% ha mostrato una migliore penetrazione a causa della dimensione delle particelle più piccola.Rispetto a un normale materiale di dimensioni delle particelle (2609,56 µm2), la nanoemulsione Chx.HCl all'1,6% ha la superficie media più piccola di detriti residui (2001,47 µm2).Conclusione: la composizione della nanoemulsione Chx.HCl ha una migliore capacità di pulizia e azione antibatterica.Ha un'azione battericida altamente efficace contro Enterococcus faecalis e il tasso di contrazione delle cellule batteriche è elevato o completamente distrutto.Parole chiave: clorexidina cloridrato, nanoemulsione, irrigante canalare, penetrazione, effetto detergente, irrigante antibatterico.
Le nanoemulsioni, una classe di emulsioni con dimensioni delle goccioline comprese tra 50 e 500 nm, hanno ricevuto molta attenzione negli ultimi anni grazie alle loro proprietà uniche.Buone proprietà detergenti, non risentono della durezza dell'acqua, nella maggior parte dei casi hanno bassa tossicità e assenza di interazioni elettrostatiche.2 La nanotecnologia ha una dimensione delle particelle ultra-piccola, un ampio rapporto tra superficie e massa e proprietà fisiche e chimiche uniche rispetto a prodotti sfusi simili e apre anche nuove prospettive nel trattamento e nella prevenzione delle infezioni dentali.3 Clorexidina cloridrato (Chx.HCl) è leggermente solubile in acqua, leggermente solubile in alcool e si colora gradualmente alla luce.4,5 SH.L'HCl ha un'azione antibatterica ad ampio spettro, azione prolungata e bassa tossicità.A causa di queste proprietà, è consigliato anche come potenziale irrigante canalare.I principali vantaggi di Chx.HCl sono la bassa citotossicità, l'assenza di odore e di sapore sgradevole.6-9 Diversi tipi di laser sono stati utilizzati per migliorare la disinfezione del canale radicolare.L'effetto battericida dei laser dipende dalla lunghezza d'onda e dall'energia, nonché dall'esposizione termica, che provoca cambiamenti nella parete cellulare batterica, che porta a un cambiamento nel gradiente osmotico fino alla morte cellulare.L'interazione tra laser e irrigatori canalari apre nuovi orizzonti nella disinfezione pulpare.10 L'energia ultrasonica produce alte frequenze ma basse ampiezze. I file sono progettati per oscillare a frequenze ultrasoniche di 25–30 kHz, che sono oltre il limite della percezione uditiva umana (>20 kHz). I file sono progettati per oscillare a frequenze ultrasoniche di 25–30 kHz, che sono oltre il limite della percezione uditiva umana (>20 kHz). Fauci di vincita per il colombiano su ulьtraзвуковых частотах 25–30 кГц, которые находятся за пределами слухового восприятия человека (> 20 кГц). Le lime sono progettate per vibrare a frequenze ultrasoniche di 25-30 kHz, che vanno oltre la portata dell'udito umano (> 20 kHz).这些文件被设计成在25–30 kHz 的超声波频率下振荡，这超出了人类听觉感知的极限(>20 kHz)。这些文件被设计成在 25–30 kHz Файлы рассчитаны на колебания на ультразвуковых частотах 25–30 кГц, che выходит за пределы слухового восприятия человека (>20 кГц). I file sono progettati per vibrazioni a frequenze ultrasoniche di 25-30 kHz, che è oltre i limiti dell'udito umano (>20 kHz).Operano in oscillazione trasversale, impostando i modi caratteristici di nodi e antinodi lungo la loro lunghezza.Il termine "irrigazione ultrasonica passiva" (PUI) è un protocollo di irrigazione in cui nessuno strumento o parete entra in contatto con lime o strumenti endodontici.Durante la PUI, l'energia degli ultrasuoni viene trasferita dalla lima vibrante alla soluzione di irrigazione nel canale radicolare.Quest'ultimo può causare flusso sonico e cavitazione dell'agente di lavaggio.11 Sulla base dei dati di cui sopra, si ritiene opportuno utilizzare la nanotecnologia per valutare la migliore azione penetrante e pulente di Chx.HCl.
Clorexidina cloridrato Chx.HCl è stato gentilmente fornito dalla Arab Drug Company for Pharmaceuticals (Il Cairo, Egitto).Labrafil M 1944 CS (oleoylpolyoxy-6-glyceride) è stato generosamente fornito da Gattefosse (Saint Priest, Francia).Tween 20 (poliossietilene (20) sorbitan monolaurato), Tween 80 (poliossietilene (80) sorbitan monooleato), acido oleico, glicole propilenico da Gomhorya Company (Cairo, Egitto)).Estrazione di denti a radice singola non cariati per trattamento parodontale o ortodontico, Dipartimento di Scienze Maxillofacciali, Facoltà di Odontoiatria, Università di Ain Shams, Il Cairo, Egitto.Coltura pura di Enterococcus faecalis (ceppo ATCC 29212) coltivata in brodo di estratto di cuore cerebrale (BHI) (RC CLEANER, IIchung Dental Ltd., Seoul, Corea).
È stata studiata la solubilità di Chx.HCl in vari mezzi (acido oleico, Labrafil M 1944CS, Tween 20, Tween 80, glicole propilenico e acqua).Un grande eccesso di Chx.HCl (50 mg) viene posto in una provetta da centrifuga e vengono aggiunti 5,0 g della fase media.La miscela è stata agitata in un agitatore a vortice per 15 minuti e quindi conservata a temperatura ambiente.Dopo 24 ore, il pellet di farmaco insolubile nella provetta è stato centrifugato a 3000 rpm per 5 minuti per ottenere un surnatante limpido.Raccogliere abbastanza soluzione campione e diluirla con n-butanolo.I campioni diluiti sono stati filtrati attraverso carta da filtro Whatman 102 e quindi diluiti in modo appropriato con n-butanolo per determinare la concentrazione del farmaco nella soluzione satura.I campioni sono stati analizzati con uno spettrofotometro UV a 260 nm con n-butanolo come controllo.12.13
È stato costruito un diagramma di fase pseudo-triplo per determinare il rapporto esatto di ciascun componente richiesto nella formulazione per ottenere i parametri ottimali di una nanoemulsione ideale.14 La formulazione è stata formulata utilizzando oli (ad es. acido oleico e Labrafil M1944CS), tensioattivi (ad es. Tween 20 e Tween 80) e un tensioattivo aggiuntivo, ovvero glicole propilenico.In primo luogo, sono state preparate miscele separate di tensioattivi (senza cotensioattivi) e oli in diversi rapporti di volume (da 1:9 a 9:1).Quando la miscela viene titolata con acqua (aggiungendo acqua goccia a goccia), monitorare attentamente la miscela da limpida a torbida come punto finale.Questi punti finali vengono quindi contrassegnati su un diagramma di fase pseudo-triplo.L'intero processo è stato ripetuto per miscele di tensioattivo e tensioattivo secondario (Smix) preparate in rapporti 2:1 e 3:1 e miscelate con oli selezionati15,16 one.
I sistemi di nanoemulsione contenenti Chx.HCl sono stati preparati utilizzando Labrafil M 1944 CS come fase oleosa e tensioattivo Tween 80 o 20 e glicole propilenico come tensioattivo aggiuntivo e infine acqua, Tabella 1. Il farmaco è stato sciolto in Labrafil M 1944 CS e l'acqua combinata di tensioattivo e tensioattivo secondario è stata aggiunta a bassa velocità con miscelazione graduale.La quantità di tensioattivo e co-tensioattivo aggiunto, nonché la percentuale di fase oleosa che può essere aggiunta, viene determinata utilizzando un diagramma di fase pseudo-ternario.Un generatore di ultrasuoni (Ultrasonic LC 60 H, Elma, Germania) è stato utilizzato per ottenere l'intervallo di dimensioni desiderato per la dispersione dei granuli.Quindi bilancialo.17
Il test di disperdibilità è stato effettuato utilizzando un apparecchio di dissoluzione (Dr. Schleuniger Pharmaton, Model Diss 6000, Thun, Switzerland) in cui 1 ml di ciascuna preparazione è stato aggiunto a 500 ml di acqua a 37±0,5°C.L'agitazione delicata è assicurata da pale di dissoluzione standard in acciaio inossidabile che ruotano a 50 giri/min.L'emulsione risultante è stata determinata visivamente e classificata come chiara, traslucida con una sfumatura bluastra, lattiginosa o torbida.Scegli una formula chiara per ulteriori ricerche.18.19
L'estrazione di Chx.HCl da composizioni di nanoemulsioni ottimizzate basate su un diagramma di fase pseudo-triplo porta alla produzione di n-butanolo utilizzando la tecnologia ad ultrasuoni.Dopo opportuna diluizione, gli estratti sono stati analizzati spettrofotometricamente alla lunghezza d'onda di 260 nm per il contenuto di Chx.HCl.venti
Per testare il tempo di autoemulsionamento, 1 ml di ciascuna composizione è stato aggiunto ad un becher riempito con 250 ml di acqua distillata e mantenuto a 37 ± 1°C con costante agitazione a 50 rpm.Il tempo di autoemulsione è considerato come il tempo durante il quale il preconcentrato forma una miscela omogenea dopo la diluizione.ventuno
Per l'analisi delle dimensioni delle gocce, diluire 50 mg della formulazione ottimizzata a 1000 ml con acqua in un pallone e miscelare delicatamente a mano.La distribuzione delle dimensioni delle goccioline è stata determinata utilizzando uno strumento Malvern Zetasizer 2000 (Malvern Instruments Ltd., Malvern, Regno Unito) in condizioni di rilevamento di retrodiffusione di 173º, temperatura di 25ºC e indice di rifrazione di 1,330.ventidue
Gli studi di dissoluzione in vitro sono stati eseguiti utilizzando un apparecchio USP di tipo II (paddle) (Dr. Schleuniger Pharmaton, Diss Model 6000) a 50 rpm.Come mezzo di dissoluzione è stata utilizzata acqua distillata (500 ml) mantenuta ad una temperatura di 37±0,5°C e al mezzo di dissoluzione sono stati aggiunti goccia a goccia 5 ml della composizione preparata.Quindi, a vari intervalli, sono stati prelevati 5 ml del mezzo di dissoluzione e la quantità di farmaco rilasciato è stata determinata spettrofotometricamente a 254 nm.Gli esperimenti sono stati condotti in triplice copia.ventitré
Quindi, sono stati misurati i parametri cinetici del rilascio di Chx.HCl in vitro da nanoemulsioni preparate sulla sua base.La cinetica di zero, primo e secondo ordine ei modelli di diffusione di Higuchi sono stati testati per selezionare la sequenza cinetica più adatta per il rilascio di Chx.HCl.
2 ml di ciascuna formulazione sono stati conservati a temperatura ambiente per 48 ore prima che fosse osservata la separazione delle fasi.Campioni da 1 ml di ciascuna formulazione di nanoemulsione di Chx.HCl sono stati quindi diluiti a 10 ml e 100 ml con acqua distillata a 25°C e conservati per 24 ore.Quindi è stata osservata la separazione di fase.ventuno
Quindi campioni di 2 ml di ciascuna composizione sono stati trasferiti separatamente in flaconi trasparenti con tappo a vite e conservati in frigorifero a 2°C per 24 ore.Quindi sono stati rimossi e conservati a 25°C e 40°C.È stato effettuato un unico ciclo di raffreddamento-scongelamento.I campioni sono stati quindi osservati per la separazione di fase e la precipitazione del farmaco.ventuno
Un campione da 5 ml di ciascuna formulazione di nanoemulsione Chx.HCl è stato trasferito in un tubo di vetro e posto in una centrifuga da laboratorio (microcentrifuga di Shanghai Surgical Instrument Factory modello 800, Shanghai, Repubblica popolare cinese) e centrifugato a 4000 rpm per 5 minuti.I campioni sono stati quindi osservati per la separazione di fase e la precipitazione del farmaco.ventuno
Tutti gli esperimenti sono stati approvati dal Comitato Etico Istituzionale dell'Università di Ain Shams, in Egitto.Sono stati selezionati 50 denti umani a radice singola non cariati con apice formato.I denti estratti sono stati utilizzati dopo aver ottenuto il consenso informato scritto firmato dal paziente.I denti includono incisivi mascellari e mandibolari e premolari mandibolari.Le superfici esterne delle radici sono state trattate con una curette e tutti i denti sono stati sottoposti a sterilizzazione superficiale in NaOCl allo 0,5% per 24 ore e quindi conservati in soluzione fisiologica sterile fino all'uso.La corona è stata rimossa con un disco diamantato Safe Side e la lunghezza del dente è stata normalizzata a 16 mm dall'apice al margine coronale.24,25 Secondo la soluzione di risciacquo, i denti sono divisi nei seguenti gruppi:
(A) I campioni del gruppo (n = 24) sono stati lavati con nanoemulsione Chx.HCl.Sottogruppo (I) (n = 12) campioni risciacquati con 5 ml di nanoemulsione di Chx.HCl allo 0,75% di concentrazione.Il sottogruppo (II) (n=12) ha risciacquato i campioni con 5 ml di nanoemulsione Chx.HCl all'1,6%.(B) Un gruppo (n=24) di campioni sarà lavato con 5 ml di Chx.HCl al 2% di dimensioni normali.Gruppo di controllo: (n=2) lavato con 5 ml di soluzione fisiologica senza attivazione.
Sono stati selezionati 44 denti umani a radice singola non cariati con una punta formata.I denti includono incisivi mascellari e mandibolari e premolari mandibolari.Le superfici esterne delle radici sono state trattate con una curette e tutti i denti sono stati sottoposti a sterilizzazione superficiale in NaOCl allo 0,5% per 24 ore e quindi conservati in soluzione fisiologica sterile fino all'uso.Le corone sono state rimosse con un disco diamantato di sicurezza e la lunghezza del dente è stata normalizzata a 16 mm dall'apice al margine coronale.24,25,29
Preparazione meccanica della lima apicale principale misura 50 con metodi standard.Utilizzare soluzione salina sterile come irrigante durante l'intervento chirurgico.Infine, il canale radicolare è stato lavato con 2 ml di EDTA al 17% per 1 minuto per rimuovere lo smear layer.L'intera superficie della radice, compreso il forame apicale di ciascun esemplare, è stata ricoperta con due strati di smalto per unghie (colla cianoacrilica) per evitare perdite.I denti vengono quindi inseriti verticalmente in un blocco di tartaro per facilitarne la manipolazione e l'identificazione.29-33 I campioni sono stati quindi autoclavati a 121ºC e 15 psi per 20 minuti.Dopo la sterilizzazione, tutti i campioni sono stati trasportati e processati in condizioni sterili utilizzando strumenti sterili.I canali radicolari sono stati contaminati con una coltura pura di Enterococcus faecalis (ceppo ATCC 29212) cresciuto in brodo di estratto di cuore cerebrale (BHI) per 24 ore a 37°C.Utilizzando una micropipetta sterile, iniettare una sospensione limpida di E. faecalis inoculum nei canali radicolari preparati di tutti i denti.I blocchi sono stati quindi posti in becher sterili e incubati a 37°C per 24 ore.31, 34, 35
(A) I campioni del gruppo (n = 24) sono stati lavati con nanoemulsione Chx.HCl.I campioni del sottogruppo (I) (n=12) sono stati lavati con 5 ml di Chx.HCl nanoemulsion concentrazione 0,75%.Il sottogruppo (II) (n = 12) ha risciacquato i campioni con 5 ml di concentrazione di nanoemulsione Chx.HCl 1,6%.
Gruppo di controllo: controllo positivo, (n=4) il canale radicolare contaminato è stato lavato con 5 ml di soluzione fisiologica e conservato come controllo positivo.Controllo negativo: (n=4) I campioni non sono stati iniettati con sospensione, cioè il canale radicolare non è stato contaminato da E. faecalis ed è stato mantenuto sterile come controllo negativo per confermare la sterilizzazione e l'affidabilità della procedura.Utilizzare 5 ml di soluzione di lavaggio di prova in ciascun campione.Ciascun campione è stato quindi sottoposto ad un lavaggio finale con 1 ml di soluzione fisiologica sterile.
Una punta di carta sterile misura 35 viene utilizzata per raccogliere campioni dai canali radicolari.La punta di carta è stata inserita nel tubo fino alla lunghezza di lavoro, lasciata per 10 secondi e quindi trasferita su piastre di agar per determinare il numero di unità formanti colonia (CFU) per piastra.Le piastre sono state incubate a 37ºC per 24 ore e quindi valutate visivamente per la crescita batterica.La piastra trasparente mostra la completa sterilizzazione.Si ritiene che le lastre sfocate mostrino una crescita positiva.È stato determinato il numero medio di CFU nella zona di crescita batterica per piatto ed è stato calcolato il numero di CFU.I sopravvissuti vengono misurati principalmente con conte vitali su piastre di gocciolamento.Inoltre, è stata utilizzata una tazza per versare per contare i CFU bassi e una diluizione a 106 è stata utilizzata per contare i CFU alti.36.37
Preparare provette contenenti 15 ml di terreno agar scongelato pre-sterilizzato in autoclave lo stesso giorno dell'esperimento.L'Enterococcus faecalis è un cocco anaerobico Gram-positivo facoltativo che può sopravvivere a pH, acidità e temperature elevate molto elevati.39 Campioni batterici (Enterococcus faecalis ATCC 29212) sono stati preparati miscelando le cellule delle colonie con soluzione fisiologica sterile.I campioni batterici sono stati quindi diluiti con soluzione fisiologica per corrispondere a McFarland 0,5, equivalente a 108 CFU/mL.Il volume del campione aggiunto era di 10 µl.39 È stato preparato uno standard di torbidità (McFarland 0,5)40 versando 0,6 ml di soluzione di cloruro di bario all'1% (10 g/l) in un cilindro graduato da 100 ml e riempiendo fino a 100 ml con acido solforico all'1% (10 g/l).Gli standard di torbidità sono stati collocati nelle stesse provette dei campioni di brodo e conservati a temperatura ambiente per 6 mesi al buio e sigillati per evitare l'evaporazione.Aprire il coperchio della capsula di Petri vuota e versare il campione al centro della capsula.Se l'agar è completamente solidificato, capovolgere la piastra e incubare a 37°C per 24 ore.
Tutti i dati sono stati raccolti, tabulati e sottoposti ad analisi statistica.L'analisi statistica è stata eseguita utilizzando IBM® SPSS® Statistical versione 17 per Windows (SPSS Inc., IBM Corporation, Armonk, NY, USA).
È stata studiata la solubilità di Chx.HCl in varie fasi oleose, soluzioni di tensioattivo, soluzioni di co-tensioattivo e acqua.Chx.Hcl ha la più alta solubilità in Labrafil M e la più bassa solubilità in acido oleico.Una maggiore solubilità del farmaco nella fase oleosa è importante per le nanoemulsioni perché le nanoemulsioni sono in grado di mantenere il farmaco in forma disciolta, il che significa che una maggiore solubilità del farmaco nell'olio si traduce in meno olio nella formulazione e quindi meno farmaco.caricamento Per emulsionare le gocce d'olio è necessaria una certa quantità di tensioattivo e co-tensioattivo.
È stato costruito un diagramma di fase pseudo-triplo per definire le regioni di nanoemulsione e ottimizzare le concentrazioni di oli selezionati, tensioattivi e tensioattivi aggiuntivi (Labrafil M, Tween 80, Tween 20 e glicole propilenico, rispettivamente).Chx.Hcl mostra una solubilità molto bassa in acido oleico, con conseguente intorbidamento quando l'acido oleico viene titolato con la prima goccia d'acqua.Pertanto, il sistema dell'acido oleico è stato escluso da questo studio.Altre formulazioni sono state preparate utilizzando una miscela 1:9 di olio e tensioattivo.intervallo di pH e forza ionica, quindi sono stati scelti questi tensioattivi.
Tutte le formulazioni preparate erano limpide ad eccezione del Sistema F2, che appariva torbido ed è stato quindi escluso da ulteriori studi di valutazione.
La formulazione ideale di nanoemulsione dovrebbe essere in grado di disperdersi completamente e rapidamente se diluita con una leggera agitazione.Le formulazioni di nanoemulsione Chx.HCl hanno mostrato tempi di emulsione brevi, da 1,67 a 12,33 secondi.Tween 80 ha il tempo di emulsionamento più breve.Ciò può essere spiegato dalla maggiore capacità solubilizzante di Tween 80. Il tempo di autoemulsione aumenta con l'aumentare della concentrazione del tensioattivo, che può essere dovuto all'aumento della viscosità del sistema sotto l'azione del tensioattivo.
La dimensione delle goccioline dell'emulsione determina la velocità e l'entità del rilascio del farmaco.Le dimensioni delle goccioline di emulsione più piccole si traducono in un tempo di emulsionamento più breve e in una maggiore superficie per l'assorbimento del farmaco.Le dimensioni medie delle goccioline delle composizioni selezionate della nanoemulsione Chx.HCl erano 711±0,44, 587±15,3, 10,97±0,11, 16,43±4,55 e 12,18±2,48 e il PDI era 0,76, 0,19, 0,61, 0,47 e 0,76 per F1, F2., F3 e 0,16 rispettivamente F4, F5 e F6.Le formulazioni contenenti Tween 80 come tensioattivo hanno mostrato sferuliti più piccole.Ciò può essere dovuto al suo maggiore potere emulsionante.Un valore PDI inferiore indica una distribuzione delle dimensioni del sistema più ristretta.Queste formulazioni hanno un aspetto pulito perché i loro raggi delle goccioline sono più piccoli della lunghezza d'onda ottica della luce visibile (390-750 nm) alla quale si verifica una dispersione minima della luce.41
Sulla fig.2 mostra la percentuale di Chx.HCl rilasciata dalla formulazione formulata.Il rilascio completo del farmaco dalle formulazioni preparate della nanoemulsione Chx.HCl variava da 2 a 7 minuti.È stato osservato che il più alto tasso di rilascio del farmaco è stato ottenuto nel caso della formulazione di nanoemulsione Chx.HCl F6 (2 min), che potrebbe essere dovuto alla presenza di Tween 80, che ha mostrato un grado più elevato di emulsione, e alla conseguente nanoemulsione.fornisce un'ampia superficie per il rilascio del farmaco, consentendo un aumento dei tassi di rilascio del farmaco.Allo stesso tempo, le proprietà di solubilità del glicole propilenico consentono di sciogliere nell'olio una grande quantità di tensioattivi idrofili.40
È stato riscontrato che il rilascio di Chx.HCl in vitro segue un ordine cinetico diverso e nessun chiaro ordine cinetico può riflettere il rilascio di farmaci da formulazioni di nanoemulsioni preparate in modo diverso.Il rilascio cinetico dei farmaci F4 è una cinetica di primo ordine, il che significa che vengono rilasciati in proporzione alla quantità di farmaco che rimane al loro interno.42 Il rilascio cinetico di altri farmaci era coerente con il modello di diffusione di Higuasha, che indicava che la quantità di farmaco rilasciato era proporzionale alla radice quadrata del farmaco totale e alla solubilità del farmaco nella nanoemulsione.42
Le formulazioni selezionate sono state sottoposte a stabilità termodinamica variabile mediante stress test utilizzando cicli caldo-freddo, centrifugazione e cicli di congelamento-scongelamento.È stato osservato che le formulazioni F3 e F4 hanno mostrato precipitazione del farmaco dopo i cicli di scongelamento, mentre F1 ha mostrato ispessimento (gelificazione).F5 e F6 hanno superato il ciclo di centrifugazione continua, il test di riscaldamento-raffreddamento e il test di congelamento-scongelamento.Le nanoemulsioni sono sistemi termodinamicamente stabili formati a determinate concentrazioni di olio, tensioattivo e acqua senza separazione di fase, emulsionamento o cracking.È la stabilità termica che distingue le nanoemulsioni dalle emulsioni, che sono cineticamente stabili e alla fine si separeranno in fasi.19 F3 ha mostrato una dimensione delle particelle maggiore (587 nm) rispetto ad altre formulazioni, il che può spiegare la separazione di fase e la precipitazione del farmaco nei test di stabilità termodinamica.F4 contenente Tween 80 e nessun co-tensioattivo ha mostrato la precipitazione del farmaco, questo potrebbe indicare la necessità di utilizzare glicole propilenico e Tween 80 per migliorare la stabilità delle formulazioni di nanoemulsione.F1 contenente Tween 20 senza tensioattivo aggiuntivo ha mostrato ispessimento (gelificazione), che è un aumento della viscosità o forza del gel dovuto all'aggregazione delle goccioline.
I risultati di stabilità dimostrano l'importanza della presenza di un ulteriore tensioattivo di glicole propilenico per aumentare la dispersione delle particelle e prevenire la precipitazione del farmaco.43 F6 è stata la migliore formulazione grazie alla piccola dimensione delle particelle (12,18 nm), al breve tempo di emulsionamento (1,67 secondi) e alla rapida velocità di dissoluzione dopo 2 minuti.Si è scoperto che era un sistema termodinamicamente/fisicamente stabile ed è stato quindi selezionato per ulteriori studi.
I fallimenti dopo il trattamento del canale radicolare stanno diventando più frequenti, il che significa che i pazienti corrono un rischio maggiore di sviluppare infezioni più complesse.44,45 Il biofilm deve essere rimosso durante la disinfezione e il riempimento dei canali radicolari.46,47 A causa della complessità del sistema dei canali radicolari, diventa difficile rimuovere completamente i canali radicolari batterici utilizzando solo strumenti e irrigazione.48 L'efficacia delle soluzioni di risciacquo canalare dipende dalla penetrazione dell'irrigante nel DT e dalla durata dell'esposizione ai batteri.49 Pertanto, sono stati provati e testati nuovi metodi di sterilizzazione completa del canale radicolare.I risciacqui convenzionali non eliminano completamente E. faecalis a causa della minore penetrazione di DT.50.
Il potere pulente medio del risciacquo in nanoemulsione era di 2001,47 µm2 e la dimensione media delle particelle del brillantante era di 2609,56 µm.La differenza media tra il lavaggio in nanoemulsione e il lavaggio di dimensioni normali delle particelle era di 608,09 µm2. C'era una differenza statisticamente molto significativa ( P <0, 001) tra irriganti nanoemulsione e irriganti di dimensioni normali delle particelle con (valore P 0, 00052). C'era una differenza statisticamente molto significativa ( P <0, 001) tra irriganti nanoemulsione e irriganti di dimensioni normali delle particelle con (valore P 0, 00052). Mezzi di frequenza di rotazione e di frequenza di rotazione con il normale formato di registrazione тистически высокозначимая (P<0,001) разница (значение P 0,00052). C'era una differenza statisticamente molto significativa ( P <0, 001) (valore P 0, 00052) tra gli irriganti a nanoemulsione e gli irriganti a particelle normali.纳米乳液冲洗剂和正常粒径冲洗剂之间存在统计学上高度显着的差异（P<0.001）（P 值0.00052） 。纳米乳液冲洗剂和正常粒径冲洗剂之间存在统计学上高度显着的差异（P<0.001）（P 值0.00052） 。 Il metodo di acquisizione con il numero minimo e l'acquisizione con il normale formato di registrazione delle statistiche чимая разница (P<0,0001) (значение P 0,00052). C'era una differenza statisticamente molto significativa (P <0,0001) tra il risciacquo della nanoemulsione e il normale risciacquo delle dimensioni delle particelle (valore P 0,00052).La nanoemulsione ha mostrato una differenza statisticamente molto significativa rispetto al normale materiale di dimensioni delle particelle, mostrando una superficie di detriti residui media inferiore, ovvero il materiale della nanoemulsione aveva la migliore capacità di pulizia, come mostrato nella figura 3.
Figura 3. Confronto delle prestazioni di pulizia dei brillantanti: (A) con laser Nano CHX attivato, (B) con laser CHX attivato, (C) con PUI Nano CHX, (D) senza attivazione Nano CHX, (E) senza attivazione CHX e (F)) attivazione CHX PUI.
L'area superficiale media dei restanti frammenti Chx.HCl 1,6% era 2320,36 µm2 e l'area superficiale media di Chx.HCl 2% era 2949,85 µm2. C'era una differenza statisticamente molto significativa (P <0,001) tra la maggiore concentrazione di irriganti in nanoemulsione e gli irriganti di dimensioni normali delle particelle (valore P 0,00000). C'era una differenza statisticamente molto significativa (P <0,001) tra la maggiore concentrazione di irriganti in nanoemulsione e gli irriganti di dimensioni normali delle particelle (valore P 0,00000). Statistiche di base disponibili (P<0,001) per misurare il livello di controllo del flusso di lavoro ригационных растворов и ирригационными растворами с размером частиц (значение P 0,00000). C'era una differenza statisticamente molto significativa ( P <0, 001) tra la maggiore concentrazione di irriganti in nanoemulsione e irriganti di dimensioni normali delle particelle (valore P 0, 00000).P<0.001）（ P 值0.00000）。P<0.001）（P 0 0.0 I valori statistici più bassi dell'intervallo di valori (P<0,001) consentono di ottenere un numero elevato di valori di controllo dell'opzione наноэмульсией и ополаскивателя с нормальным размером частиц (значение P 0,00000). C'era una differenza statisticamente molto significativa ( P <0, 001) tra concentrazioni più elevate di risciacquo in nanoemulsione e risciacquo di dimensioni normali delle particelle (valore P 0, 00000).Sebbene la concentrazione dell'irrigante in nanoemulsione fosse inferiore a quella dell'irrigante di dimensioni normali delle particelle, questa concentrazione inferiore era significativamente più efficace nella rimozione dei detriti e più efficace nella pulizia dei canali radicolari.
Il PUI presentava una differenza statisticamente molto significativa (p<0,001) rispetto ad altri metodi di attivazione. Il PUI presentava una differenza statisticamente molto significativa (p<0,001) rispetto ad altri metodi di attivazione. PUI è un valore statistico del valore del punteggio (p<0,001) relativo alle altre modalità di attivazione. Il PUI presentava una differenza statisticamente molto significativa (p<0,001) rispetto ad altri metodi di attivazione.与其他激活方法相比，PUI 具有统计学上非常显着的差异(p<0.001)。与其他激活方法相比，PUI 具有统计学上非常显着的差异(p<0.001)。 A causa di altri metodi di attivazione della PUI, le statistiche mostrano una percentuale di valori (p<0,001). Rispetto ad altri metodi di attivazione, il PUI presentava una differenza statisticamente molto significativa (p<0,001).Con l'attivazione dell'ISP, l'area media della superficie residua dei detriti era di 1695,31 µm2. La differenza media tra PUI e Laser era 987,89929 mostrando una differenza altamente statisticamente significativa (P<0,001) con (p-value 0,00000). La differenza media tra PUI e Laser era 987,89929 mostrando una differenza altamente statisticamente significativa (P<0,001) con (p-value 0,00000). Numero di punti PUI e Laser composto da 987,89929, valore di valutazione del valore (P<0,001) con (p-valore) cioè 0,00000). La differenza media tra PUI e Laser era 987,89929, mostrando una differenza altamente statisticamente significativa (P<0,001) rispetto a (p-value 0,00000). PUI 和Laser 之间的平均差异为987.89929，显示出高度统计学显着性(P<0.001) 差异(p 值0.00000)。PUI 和Laser Il punteggio medio di PUI e laser è pari a 987,89929, che mostra i valori statistici più alti (P<0,001) цы (p-значение 0,00000). La differenza media tra PUI e Laser era 987,89929, indicando un'elevata differenza di significatività statistica (P<0,001) (valore p 0,00000). La differenza media tra PUI e nessuna attivazione era 712,40643, mostrando una differenza altamente statisticamente significativa (P<0,001) con un valore p di 0,00098). La differenza media tra PUI e nessuna attivazione era 712,40643, mostrando una differenza altamente statisticamente significativa (P<0,001) con un valore p di 0,00098).un valore P di 0,451211. Il tasso medio di PUI e l'attivazione delle attività sono pari a 712,40643, tasso di crescita demografico (P<0,001) разницу с p-значением 0,00098). La differenza media tra PUI e nessuna attivazione era 712,40643, mostrando una differenza altamente statisticamente significativa (P<0,001) con un valore p di 0,00098).Valore P 0,451211. PUI 和未激活之间的平均差异为712.40643，显示高度统计学显着性差异(P<0.001)，p 值为0.00098)。PUI Il punteggio medio PUI e il valore inattivo 712,40643, che mostra la tua statistica in base al numero ницы (P<0,001, p-значение 0,00098). La differenza media tra PUI e inattivazione era 712,40643, indicando un'elevata significatività statistica della differenza (P<0,001, p-value 0,00098).使用激光激活或不激活在统计学上没有显着差异(P>0.05) P 值为0.451211。使用激光激活或不激活在统计学上没有显着差异(P>0.05) P 值为0.451211。 Статистически значимой разницы (P>0,05) con лазерной активацией или без нее не было со значением P 0,451211. Non c'era alcuna differenza statisticamente significativa (P>0,05) con o senza attivazione laser con un valore P di 0,451211.La superficie media dei frammenti rimanenti all'attivazione del laser era di 2683,21 µm2.La superficie media dei restanti frammenti senza attivazione era di 2407,72 µm2.Rispetto all'attivazione o alla mancata attivazione del laser, PUI presentava una superficie media del chip statisticamente inferiore, ovvero il miglior potere pulente.
Il potere pulente medio del risciacquo in nanoemulsione era di 2001,47 µm2 e la dimensione media delle particelle del brillantante era di 2609,56 µm.La differenza media tra il lavaggio in nanoemulsione e il lavaggio di dimensioni normali delle particelle era di 608,09 µm2. C'era una differenza statisticamente molto significativa ( P <0, 001) tra irriganti nanoemulsione e irriganti di dimensioni normali delle particelle con (valore P 0, 00052). C'era una differenza statisticamente molto significativa ( P <0, 001) tra irriganti nanoemulsione e irriganti di dimensioni normali delle particelle con (valore P 0, 00052). Mezzi di emissione di emissione di elettricità e di emissione di emissione con dimensioni standard del formato delle statistiche ки высокозначимая (P<0,001) разница (значение P 0,00052). C'era una differenza statisticamente molto significativa ( P <0, 001) (valore P 0, 00052) tra gli irriganti a nanoemulsione e gli irriganti a particelle normali.纳米乳液 冲 洗剂 与 正常 粒径 冲洗剂 之间 存在 统计 学 上 高度 显着 的 差异 （P <0,001） （P 值 0,00052）。 P<0.001）（P值0.00052）。 Il metodo di acquisizione con il numero minimo e l'acquisizione con il normale formato di registrazione delle statistiche чимая разница (P<0,0001) (значение P 0,00052). C'era una differenza statisticamente molto significativa (P <0,0001) tra il risciacquo della nanoemulsione e il normale risciacquo delle dimensioni delle particelle (valore P 0,00052).Rispetto a un normale materiale di dimensioni delle particelle, la nanoemulsione presenta una differenza statisticamente molto significativa, mostrando una superficie media residua inferiore dei detriti, ovvero il materiale della nanoemulsione ha una migliore capacità di pulizia, come mostrato nella Figura 3.
L'area superficiale media dei restanti frammenti Chx.HCl 1,6% era 2320,36 µm2 e l'area superficiale media di Chx.HCl 2% era 2949,85 µm2. C'era una differenza statisticamente molto significativa ( P <0, 001) tra la maggiore concentrazione di irriganti in nanoemulsione e gli irriganti di dimensioni normali delle particelle (valore P 0, 00000). C'era una differenza statisticamente molto significativa (P <0,001) tra la maggiore concentrazione di irriganti in nanoemulsione e gli irriganti di dimensioni normali delle particelle (valore P 0,00000). Valorizzazione delle statistiche del valore (P<0,001) del valore medio del valore di controllo dell'irrigazione ционных средств и ирригационными растворами с нормальным размером частиц (значение P 0,00000). C'era una differenza statisticamente significativa (P <0,001) tra la maggiore concentrazione di irriganti in nanoemulsione e gli irriganti di dimensioni normali delle particelle (valore P 0,00000).P<0.001）（ P值0.00000）。P<0.001）（ P000 I valori statistici disponibili per la valutazione (P <0,001) possono essere modificati in base al numero di opzioni disponibili оэмульсией и ополаскивателем с нормальным размером частиц (значение P 0,00000). C'era una differenza statisticamente molto significativa (P <0,001) tra concentrazioni più elevate di risciacquo in nanoemulsione e risciacquo di dimensioni normali delle particelle (valore P 0,00000).Sebbene la concentrazione dell'irrigante in nanoemulsione fosse inferiore a quella dell'irrigante di dimensioni normali delle particelle, questa concentrazione inferiore era significativamente più efficace nella rimozione dei detriti e più efficace nella pulizia dei canali radicolari.
Il PUI presentava una differenza significativa statisticamente elevata (p<0,001) rispetto ad altri metodi di attivazione. Il PUI presentava una differenza significativa statisticamente elevata (p<0,001) rispetto ad altri metodi di attivazione. PUI è un parametro statistico del valore di valutazione (p<0,001) per l'interazione con altri metodi di azione. Il PUI presentava una differenza statisticamente significativa (p<0,001) rispetto ad altri metodi di attivazione.与其他激活方法相比，PUI 具有统计学上的显着差异(p<0.001)。 Rispetto ad altri metodi di attivazione, PUI presenta una differenza statisticamente significativa (p<0,001). PUI statistически значимо отличался (p<0,001) a causa di altri metodi di azione. La PUI era statisticamente significativamente diversa (p<0,001) rispetto ad altri metodi di attivazione.Durante l'attivazione della PUI, l'area media dei detriti superficiali residui era di 1695,31 μm2. La differenza media tra PUI e laser era 987,89929 mostrando una differenza altamente statisticamente significativa (P<0,001) con (valore p 0,00000). Valore P 0,451211). La differenza media tra PUI e Laser era 987,89929 mostrando una differenza altamente statisticamente significativa (P<0,001) con (p-value 0,00000).La differenza media tra PUI e nessuna attivazione era 712,40643 mostrando una differenza altamente statisticamente significativa (P<0,001) con (p-value 0,00098).L'uso dell'attivazione laser o di nessuna attivazione non era significativamente statisticamente diverso (P>0,05) con (valore P 0,451211). Средняя разница между PUI и лазером составила 987,89929, демонстрируя высокостатистически значимую (P<0,001) разницу с (p -значение 0,00000). La differenza media tra PUI e laser era 987,89929, dimostrando una differenza altamente statisticamente significativa (P<0,001) con (p-value 0,00000). - значение 0,00098). ы (P>0,05) с (P-значение 0,451211). - valore 0,00098).L'uso dell'attivazione laser o nessuna attivazione ha avuto una differenza statisticamente significativa (P>0,05) con (P-value 0,451211). PUI 和激光之间的平均差异为987.89929，与(p 值0.00000) 差异具有高度统计学意义(P<0.001)。 La differenza media tra PUI e laser è 987,89929 e la differenza (p 值0,00000) ha un'elevata significatività statistica (P<0,001). Il valore medio di PUI e il laser sono pari a 987,89929, quindi le statistiche più basse sono pari a (P<0,001) rispetto a (p<0,001) 0,00000). La differenza media tra PUI e laser era 987,89929, che era altamente statisticamente significativa (P<0,001) con (p value 0,00000). PUI 与未激活之间的平均差异为712.40643，与(p) 差异具有高度统计学意义(P<0.001) -值0.00098)。 La differenza media tra PUI e inattivo è 712,40643 e la differenza (p) ha un'elevata significatività statistica (P<0,001) – valore 0,00098. Il punteggio medio di PUI e il valore inattivo di 712,40643, che è un totale di statistiche relative alla percentuale (p) (P<0 ,001 — значение 0,00098). La differenza media tra PUI e inattivazione era 712,40643, che era altamente statisticamente significativa con differenza (p) (P<0,001 – valore 0,00098).使用激光激活或不激活没有显着统计学差异(P>0.05) 与(P 值0.451211)。 Non c'era alcuna differenza statistica significativa tra l'attivazione e la non attivazione del laser (P>0,05) e (P 值0,451211). Nessun valore statistico minimo (P>0,05) rispetto a (P 0,451211) rispetto all'attività operativa o al di sotto di esso ee. Non c'era alcuna differenza statisticamente significativa (P > 0,05) rispetto a (valore P 0,451211) con o senza attivazione laser.La superficie media dei frammenti rimanenti durante l'attivazione del laser era di 2683,21 μm2.La superficie media dei frammenti rimanenti senza attivazione era di 2407,72 μm2.Rispetto all'attivazione o alla mancata attivazione del laser, PUI ha una superficie media del chip statisticamente inferiore, ovvero una migliore capacità di pulizia.
L'effetto medio del risciacquo della nanoemulsione sulla rimozione dei detriti era statisticamente significativamente superiore a quello del normale risciacquo delle dimensioni delle particelle.Chx.HCl 1,6%, PUI 1938,77 µm2, 2510,96 µm2 con laser.Senza attivazione, il valore medio è 2511,34 µm2.Quando è stato utilizzato Chx.HCl al 2% e attivato con un laser, i risultati sono stati i peggiori e la quantità di detriti era massima.Gli stessi risultati sono stati ottenuti quando Chx.HCl 0,75% non è stato attivato.Ovviamente, i migliori risultati sono stati ottenuti utilizzando concentrazioni più elevate di brillantante nella nanoemulsione.PUI era più efficace nell'attivazione dell'irrigante e nel lavaggio dei detriti, come mostrato nella Figura 3A-F)).
Come mostrato nella Tabella 2, la nanoemulsione Chx.HCl ha funzionato meglio delle particelle di dimensioni normali in termini di conta di microrganismi vitali e ha avuto una buona correlazione con la penetrazione della formulazione e l'effetto detergente secondo i seguenti parametri: dimensione, concentrazione dell'agente di lavaggio e metodo di attivazione.
I batteri possono essere completamente distrutti utilizzando una maggiore concentrazione di brillantante.Anche con l'attivazione della PUI, lo 0,75% di Chx.HCl ha avuto il peggior effetto antibatterico.L'attivazione laser ha un effetto negativo sui risciacqui con nanoemulsione.Come si può vedere da tutti i risultati precedenti, l'uso di un laser riduce l'efficienza della nanoemulsione Chx.HCl 0,75%, dove il CFU di nanoChx.HCl 0,75% è 195, che è un valore molto alto, indicando che i reagenti a questa concentrazione sono paragonabili all'attivazione laser.I laser a diodi sono fototermici, quindi sia la luce che il calore possono far perdere alla nanoemulsione il suo effetto antibatterico.Il risultato di alte concentrazioni è la completa distruzione dei batteri.Nano Chx.HCl 1,6% ha mostrato una crescita batterica negativa in presenza di attivazione laser, il che significa che il laser non ha influenzato la capacità antibatterica di nano Chx.HCl 1,6%.Si può concludere che il materiale in nanoemulsione con una concentrazione più elevata ha un migliore effetto antibatterico.
In questo lavoro, le nanoemulsioni Chx.HCl sono state preparate utilizzando due diversi oli, due tensioattivi e un co-tensioattivo, è stata scelta la formulazione ottimale (F6) con particelle di piccole dimensioni, tempo di emulsionamento breve e velocità di dissoluzione elevata).Inoltre, (F6) è stato testato per la stabilità termodinamica/fisica.Nella nanoemulsione Chx.HCl a una concentrazione dell'1,6%, la nanoemulsione Chx.HCl ha mostrato la migliore permeabilità nei tubuli dentinali rispetto al tradizionale Chx.HCl come fluido di risciacquo e PUI come metodo di attivazione aveva una capacità di pulizia.Inoltre, gli studi antibatterici della nanoemulsione Chx.HCl hanno mostrato la completa eliminazione dei batteri.I risultati lo hanno confermato.La nanoemulsione Chx.HCl può essere considerata un promettente liquido di lavaggio.
Siamo molto grati allo staff del laboratorio di ricerca della Misr University of Science and Technology per il loro grande supporto.