"לעולם אל תטיל ספק בכך שקבוצה קטנה של אזרחים מתחשבים ומסורים יכולה לשנות את העולם.למעשה, זה היחיד שם."
המשימה של Cureus היא לשנות את המודל הוותיק של פרסום רפואי, שבו הגשת מחקר יכולה להיות יקרה, מורכבת וגוזלת זמן.
פלזמה/prp עשירה בטסיות, התחדשות רקמות, הפעלת טסיות דם, טיפול שגשוג גלוקוז, טסיות דם, טיפול שגשוג
ציין מאמר זה כ: Harrison TE, Bowler J, Reeves K, et al.(17 במאי 2022) השפעת הגלוקוז על ספירת טסיות ונפח: השלכות על רפואה רגנרטיבית.תרופה 14(5): e25081.doi:10.7759/cureus.25081
תמיסות פלזמה עשירה בטסיות דם (PRP) ותמיסות גלוקוז היפרטוניות משמשות בדרך כלל להזרקה ברפואה רגנרטיבית, לפעמים ביחד.ההשפעה של גלוקוז היפרטוני על תמוגה והפעלה של טסיות לא דווחה בעבר.בדקנו את ההשפעה של ריכוזי גלוקוז מוגברים על ספירת טסיות דם ואריתרוציטים, כמו גם נפחי תאים ב-PRP ובדם מלא (WB).הפחתה חלקית מהירה בספירת הטסיות התרחשה עם כל תערובות הגלוקוז מעורבבות עם PRP או דם מלא, בהתאם לתמוגה חלקית. לאחר הדקה הראשונה, ספירת הטסיות נותרה יציבה, דבר המצביע על התאמה מהירה של שיורי טסיות דם להיפרטוניות קיצונית (>2000 mOsm). לאחר הדקה הראשונה, ספירת הטסיות נותרה יציבה, דבר המצביע על התאמה מהירה של שיורי טסיות דם להיפרטוניות קיצונית (>2000 mOsm). После первой минуты количество тромбоцитов оставалось стабильным, что указывает на быструю аккомоцитов до экстремального (>2000 мОсм) гипертонуса. לאחר הדקה הראשונה, ספירת הטסיות נותרה יציבה, מה שמעיד על התאמה מהירה של שאריות הטסיות להיפרטוניות קיצונית (>2000 mOsm).第一分钟后，血小板计数保持稳定，表明残余血小板迅速适应极端（000m2000 mOsm）高渗状态. После первой минуты количество тромбоцитов оставалось стабильным, что указывает на быструю адаптацит экстремальному (>2000 мОсм) гиперосмолярному состоянию. לאחר הדקה הראשונה, ספירת הטסיות נותרה יציבה, מה שמעיד על הסתגלות מהירה של שאריות הטסיות למצב ההיפר-אוסמולרי הקיצוני (>2000 mOsm).ריכוזי גלוקוז של 25% ומעלה הביאו לעלייה משמעותית בנפח הטסיות הממוצע (MPV), המעיד על שלב מוקדם של הפעלת הטסיות.נדרשים מחקרים נוספים כדי לקבוע אם מתרחשת תמוגה או הפעלה של טסיות הדם והאם הזרקת גלוקוז היפרטונית לבדה או בשילוב עם PRP עשויה לספק תועלת קלינית נוספת.
בשנות ה-50 גילה המנתח האמריקאי ג'ורג' האקט שהוא יכול להקל לצמיתות על כאבי מפרקים וגב בחולים רבים על ידי הזרקת תמיסה מתרבה לגידים ולרצועות.הניסויים שלו בארנבות הראו שהטיפול, שאותו כינה טיפול שגשוג, גרם להגדלה והתחזקות של הגידים.מחקרים היסטולוגיים אישרו שקולגן חדש מיוצר במהלך תהליך זה [1].
במהלך העשורים הראשונים נוסו פתרונות הפצה רבים ושונים.בשנות ה-90, רוב המתרגלים ראו בריכוז גבוה של גלוקוז את השיטה הבטוחה והיעילה ביותר.עם זאת, מנגנון הפעולה עדיין לא ברור.
מחקרים קליניים מעטים נערכו במאה ה-20 בעקבות עבודתו של האקט.עם זאת, בשנות ה-2000 הייתה התעניינות מחודשת והושלמו מספר ניסויים קליניים מוצלחים של טיפול פרוליפרטיבי לטיפול בכאבי גב תחתון [2], דלקת מפרקים ניוונית של הברך [3] ואפיקונדיליטיס לרוחב [4].
התחדשות הרקמות דורשת השתתפות של תאי גזע.לכן, ריכוז גבוה של גלוקוז חייב איכשהו לגרום להגירה, שכפול והתמיינות של תאי גזע.אנו משערים כי טסיות הדם עשויות לפעול כשליחים וכי ריכוזי גלוקוז גבוהים עלולים לגרום לטסיות לשחרר ציטוקינים וגורמי גדילה, ובכך לקדם תהליכי התחדשות, במיוחד נדידת תאי גזע לאזורים בעלי ריכוזי גלוקוז גבוהים.
הפעלת טסיות דם תמיד קודמת לעלייה בסידן התוך תאי [5].Liu et al.בשנת 2008 הראו כי רמות גלוקוז גבוהות מגבירות את הפעילות של תעלות קנוניות מסוג 6 (TRPC6) חולפות בקולטנים פוטנציאליים בממברנת הפלזמה, מה שמוביל לזרימה של יוני סידן לטסיות [6].מחקר אחר הראה שחשיפה של אזור השוליים של המיקרוטובוליות ליוני סידן גורמת להרפיה, התרחבות ועיוות של אזור השוליים, אשר בתורו גורם לשינוי צורה מדיסק לכדורי, וכתוצאה מכך לנפח טסיות ממוצע (MPV) [7].
ההשערה שלנו במחקר זה היא שחשיפה של טסיות דם לריכוזים גבוהים של גלוקוז משפיעה על האזור השולי של המיקרוטובולי ועל הסביבה התוך-תאית, מה שמוביל לעלייה ב-MPV.
כל המשתתפים חתמו על טופס הסכמה מדעת לאחר שהוסברו פרטי המחקר ולפני קבלת הדגימות.במחקר זה, נעשה שימוש רק בדגימות PRP עם המטוקריט גבוה מ-2%, כך שניתן היה לכלול ספירת אריתרוציטים (אריתרוציטים) ונפח גופי גוף ממוצע של תאי דם אדומים (MCV) לצורך השוואה.
המחקר נערך בארבעה שלבים, השלב הראשון היה PRP והשלבים הנותרים היו דם מלא (טבלה 1).כפי שתואר קודם [8], כל הכוחות הצנטריפוגליים היחסיים (RCF, g-force) חושבו מנקודת האמצע (Rmid, בס"מ) של עמודת הדם במזרק הצנטריפוגלי.בחרנו להשתמש ב-MPV כסמן של רגישות לטסיות וספירת טסיות כאינדיקטור לתמוגגת טסיות פוטנציאלית, את שניהם ניתנים למדידה בקלות במנתחי המטולוגיה סטנדרטיים.
בשלב הראשון, 47 מתנדבים תרמו דגימות דם - שפופרת אחת של חומצה אתילן-דיאמין-טטרה-אצטית (EDTA) ודגימת דם מלא PRP אחת (מנוגד קרישה עם נתרן ציטראט (NaCl, 3%)) (טבלה 1).הנח את הנדנדה בצינור מיד.ספירת דם מלאה (CBC) בוצעה על דגימות EDTA בשלושה עותקים, ודגימות NaCl נותחו בשלושה עותקים לצורך ניתוח CBC, ולאחר מכן הוכן PRP בשיטות שונות שתוארו לעיל [8].כל דגימות ה-PRP הוכנו על ידי צנטריפוגה ב-900-1000 גרם.מערבבים כל דגימת PRP במערבל מערבולת למשך 5-10 שניות, ואז מחלקים חמישה מנות של 0.5 מ"ל לצינורות.
כדי להעריך את ההשפעה של חשיפה לטסיות דם על ריכוזי גלוקוז מוגברים, כמויות שוות (0.5 מ"ל) של 0%, 5%, 12.5%, 25% ו-50% גלוקוז במים עורבבו עם דגימות טסיות כדי לקבל 0%, 2.5% 6.25%, 12.5% ​​תערובת גלוקוזה על תערובת של 5% תערובת של גלוקוזה ו-5% תערובת של גלוקוזה על תערובת. דקות.ה-TAC של כל תערובת נותח בשלושה עותקים לאחר 15 דקות.ספירת טסיות דם (PLT), ספירת RBC, MCV ו-MPV נמדדה עבור כל צינור, וממוצע ספירת הטסיות, ספירת RBC, MCV ו-MPV חושבה עבור כל דגימות ה-PRP.
לאחר השלמת השלב הראשון של איסוף הנתונים, הבחנו בעלייה משמעותית בנפח הטסיות בטסיות PRP לאחר הוספת D50W.טסיות PRP אינן מייצגות בהכרח את כל הטסיות בדם, ואמצעי PRP שונה ממדיום WB.לכן, החלטנו לערוך ניסוי שלב שני של השפעת הוספת D50W לדם מלא.
לסיבוב השני, בחרנו גודל מדגם של 30 על סמך התוצאות מהסדרה הראשונה, כמתואר בסעיף ניתוח.בסדרה זו תרמו 20 מתנדבים דגימות דם (טבלה 1).דם מלא (1.8 מ"ל) נשאב לתוך מזרק של 3 מ"ל ונוגד קרישה ב-0.2 מ"ל 40% NaCl.מזרק הדם המלא היה מעורב במשך חמש שניות עם מערבל מערבולת וה-CBC נותח בשלושה עותקים.לאחר הניתוח, דם נוגד קרישה הוסף ל-2 מ"ל של 50% גלוקוז במזרק של 5 מ"ל (ריכוז הגלוקוז הסופי היה כ-25% (D25) והונח בצינור ניעור למשך 30 דקות. לאחר 30 דקות, D25/CBC במזרקי WB נותחו בשלושה עותקים. ספירת טסיות דם, ספירת RBC, ו-PLT ממוצעת, ספירת RBC, ו-PLT. , MCV ו-MPV חושבו עבור כל דגימה לפני ואחרי הוספת גלוקוז.
מכיוון שטסיות דם בדם מלא נחשפות לרוב לגלוקוז היפרטוני במהלך טיפול פרוליפרטיבי בגלוקוז עקב הזרקה זעיר פולשנית, ולא מקובל לשלב PRP עם גלוקוז היפרטוני ממש לפני ההזרקה, החלטנו ללמוד גלוקוז היפרטוני בשילוב עם WB בסעיף 1. שלב שלישי ורביעי.בכל שלב, 20 מתנדבים תרמו 7-8 מ"ל של ACD-A (חומצה המכילה טריסודיום ציטראט (22.0 גרם/ליטר), חומצת לימון (8.0 גרם/ליטר) וגלוקוז (24.5 גרם/ליטר), תמיסה דקסטרוז ציטראט) עבור נוגדי קרישה בדם (טבלה 1).רק תערובות של גלוקוז גבוהות מ-12.5% ​​שימשו לקביעת אחוז הסף הקשור לעלייה ב-MPV.בשלב השלישי שמים 1 מ"ל דם במבחנה.לאחר מכן ערבבו את הדם במערבל מערבולת למשך 10 שניות על ידי הוספת 1 מ"ל של 30% גלוקוז, 40% גלוקוז או 50% גלוקוז לצינור כדי לקבל ריכוז גלוקוז סופי של 15%, 20% ו-25%, בהתאמה.דגימות דם של גלוקוז נותחו עבור CBC מיד לאחר הערבוב וחזרו על עצמם כל שתי דקות במשך 30 דקות.
במהלך הערבוב הראשוני, תוספת של גלוקוז היפרטוני 1:1 ו-WB או PRP חושפת את הטסיות לריכוזים מעל 25% למשך מספר שניות.בשלב הרביעי, כדי להעריך את ההשפעה של גלוקוז היפרטוני עם ריכוזי שיא ראשוניים מינימליים ולבדוק את הגבול העליון של השפעת הגלוקוז, הוספנו רק כמות קטנה של דם ל-D25W או D50W.הנח 1 מ"ל של D25W או D50W בצינור והוסף 0.2 מ"ל של WB תוך מערבולת הדגימה למשך 10 שניות.במקרים אלו, הדם נחשף לגלוקוז בריכוז של כ-20% מעל הריכוז הסופי, ולא 50% מעל הריכוז הסופי כמו בשלב 3, וכתוצאה מכך ריכוזי גלוקוז סופיים של 20.8% ו-41.6%.דגימות מעורבות נותחו באותו מרווח זמן כמו בשלב 3.
בשלב הראשון של כל סדרת דילול גלוקוז, נלקחו 30 דגימות שכן זה היה גודל המדגם המתאים למחקר הפיילוט [9].בסוף כל שלב (כולל השלב הראשון), הערך את נאותות גודל המדגם באמצעות הנוסחה המשמשת לקביעת גודל המדגם הדרוש להערכת הממוצע של משתנה התוצאה המתמשכת באוכלוסייה אחת.נוסחה n = Z2 x SD2 /E2.במשוואה זו, Z הוא ציון Z, SD הוא סטיית התקן, ו-E הוא השגיאה הרצויה [10].האלפא שלנו הוא 0.05, המתאים לערך Z של 1.96, ואנו מצפים לשגיאה של 5 (באחוזים).לפיכך אנו פותרים עבור n = (1.962 x SD2)/52.התוצאות הראו שגודל המדגם הנדרש לכל שלב היה קטן מהמספר שנאסף בפועל.
במהלך תקופות 1, 3 ו-4 תוך שימוש ביותר מריכוז גלוקוז אחד, נותחה ההשפעה של ריכוזי גלוקוז שונים על ידי השוואת השינוי החלקי בין זמן 0 לכל זמן עוקב (שלב 1 ב-15 דקות, תקופה 3 ב-15 דקות).וארבעה ב-15 שניות, ולאחר מכן כל שתי דקות.) שיעורי השינוי עבור כל פרק זמן הושוו באמצעות מבחן Mann-Whitney U מכיוון שהנתונים לא עקבו אחר התפלגות נורמלית כפי שנקבעה על ידי מבחן הנורמליות של Shapiro-Wilk.מכיוון שבוצע ניתוח 1 ל-1 של מספר קבוצות (חמש) בשלב הראשון, השלישי והרביעי (חמישה בסך הכל), בוצע תיקון Bonferroni כדי להתאים את ערך האלפא הרצוי ל- ≤0.01 אך לא ≤0.05.
הפחתה של ספירת הטסיות עם כל הריכוזים של דקסטרוז היפרטוני ועלייה ב-MPV בטסיות PRP בריכוז של יותר מ-12.5% ​​דקסטרוז: ספירת טסיות ה-PRP עלתה מריכוז של פי 1 עד חמישה בהשוואה לדם מלא בסיס, משתנה לפי השיטה (לא מתואר). הפחתת ספירת הטסיות עם כל הריכוזים של דקסטרוז היפרטוני ועלייה ב-MPV בטסיות PRP בריכוז של מעל 12.5% ​​דקסטרוז: ספירת טסיות ה-PRP עלתה מריכוז של פי 1 עד חמישה בהשוואה לדם מלא בבסיס קו הבסיס, משתנה לפי השיטה (לא מתואר). Уменьшение количества тромбоцитов при всех концентрациях гипертонической декстрозы и увеличение MPV вцентрациях рации декстрозы > 12.5%: количество тромбоцитов PRP увеличилось в 1-5 раз по сравнению с исходной сисходной цельной етода (не показано). ירידה בספירת הטסיות בכל ריכוזי הדקסטרוז ההיפרטוניים ועלייה ב-MPV בטסיות PRP בריכוז של מעל 12.5% ​​דקסטרוז: ספירת טסיות ה-PRP עלתה פי 1-5 בהשוואה לדם מלא בקו הבסיס, תלוי בשיטה (לא מוצג). ).在> 12.5% ​​的葡萄糖浓度下，所有浓度的高渗葡萄糖降低血小板计数，Prp线全血相比，PRP 血小板计数从浓度的1 倍上升到5 倍，因方法而异（未／艋 בריכוז גלוקוז של מעל 12.5%, הריכוז הגבוה של הגלוקוז מפחית את ספירת הדם, ה-MPV בדם PRP עולה: בהשוואה ל-与基线全血, ספירת הדם של ה-PRP עולה מפי 1 ל-5 מהריכוז (לא תואר). שיעורי רווחים > 12.5% ​​מכלל הכספים הארגוניים, טרומבוצית PRP: количество тромбоцитов PRP увеличивалось от 1- עד 5-кратных концентраций по сравниц и цельной крови, в зависимости от метода (не описано ). בריכוזי גלוקוז מעל 12.5%, כל ריכוזי הגלוקוז עם יתר לחץ דם הפחיתו את ספירת הטסיות והעלו את ה-MPV בטסיות PRP: ספירת טסיות ה-PRP עלתה פי 1 עד פי 5 בהשוואה לריכוזי הדם המלא הבסיסיים, בהתאם לשיטה (כמתואר).איור 1 מראה שמספר הטסיות ירד בכמעט 75% לאחר דילול במים וב-20-30% לאחר 15 דקות של דילול עם ריכוזים שונים של גלוקוז בהשוואה ל-PRP הבסיס ודילול 1:1 מותאם לנפח (1- k1 עם תיקון נפח).k -1 רבייה).1 רבייה).
מספר התאים בכל דילול מבוטא כשבריר מהמספר המקורי לפני הדילול.
MPV ירד באופן מינימלי במהלך ייצור PRP, ללא שינוי נוסף בריכוזי הדילול ל-12.5% ​​במים או בגלוקוז (כולל 25% תערובות גלוקוז PRP) ועלה ביותר מ-20% לאחר דילול בתמיסת גלוקוז של 50% (איור .2).).לעומת זאת, אריתרוציטים לא הראו שינוי משמעותי בנפח בכל דילול מלבד H2O.
נפח התאים הממוצע בכל דילול מבוטא כאחוז מהנפח המקורי לפני הדילול.
ירידה דומה אך פחות בולטת בספירת הטסיות ועלייה ב-CVR נצפתה ב-BC שנחשף ל-50% גלוקוז (כדי להכיל 25% גלוקוז).טבלה 2 משווה מספרי תאים ונפחי תאים בדם מלא מדולל ב-50% דקסטרוז עם נתוני PRP שלב 1 מדולל ב-50% דקסטרוז.שינויים בספירת RBC ו-RBC MCV לא היו ברורים ולא היו מוקד תשומת הלב שלנו.
SD = סטיית תקן, MD = הבדל ממוצע בין קבוצות, SE = סטיית תקן של ההבדל הממוצע, RBC = אריתרוציטים, PLT = טסיות דם, PRP = פלזמה עשירה בטסיות, WB = דם מלא
לאחר הוספת D50W ל-WB, אחוז איבוד הטסיות המותאם לדילול היה 7.7% (310±73 לעומת 286±96) בהשוואה ל-17.8% עבור דילול PRP ב-D50W (664±348 לעומת 544±277).MPV WB עלה ב-16.8% (מ-10.1 ± 0.5 ל-11.8 ± 0.6), בעוד MPV PRP עלה ב-26% (9.2 ± 0.8 לעומת 11.6 ± 0.7). למרות שההבדלים הממוצעים הן בהפחתת ספירת הטסיות והן בעלייה ב-MPV היו גבוהים יותר באופן מובהק עם PRP, השינויים בהפחתת ספירת הטסיות בתוך WB היו כמעט מובהקים (310 ± 73 עד 286 ± 96 (-7.7%); p = .06) והעלייה ב-MPV הייתה מובהקת (10.1 ± 0.5 עד 11.0 ± 11.0 p). למרות שההבדלים הממוצעים הן בהפחתת ספירת הטסיות והן בעלייה ב-MPV היו גבוהים יותר באופן מובהק עם PRP, השינויים בהפחתת ספירת הטסיות בתוך WB היו כמעט מובהקים (310 ± 73 עד 286 ± 96 (-7.7%); p = .06) והעלייה ב-MPV הייתה מובהקת (10.1 ± 0.5 עד 11.0 ± 11.0 p).למרות שההבדלים הממוצעים הן בהפחתת ספירת הטסיות והן בעליית ה-CVR היו גדולים יותר באופן משמעותי עם PRP, השינויים בירידה בספירת הטסיות בתוך ה-WB היו כמעט מובהקים (310 ± 73 עד 286 ± 96 (-7.7%); p = 0.06).увеличение MPV было значительным (от 10,1 ± 0,5 עד 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001). העלייה ב-MPV הייתה מובהקת (מ-10.1 ± 0.5 ל-11.8 ± 0.6 (+16.8) p < 0.001).尽管PRP 在血小板计数减少和MPV 增加方面的平均差异显着更大，但WB 内衰臰几乎是显着的（310 ± 73 至286 ± 96 (-7.7%)；p = .06）和MPV 的增加是显着的凳001）.尽管 PRP 在 血小板 计数 和 和 增加 方面 的 平均 差异 显着 大 ， 但 使 内的 几乎 是 显着 的 （（（（310 ± 73 至 286 ± 96 (-7.7%) ； p = .06）和MPV 的增加睈睯昚1.（1.5±1. ± 0.6 (+16.8) p < .001）.השינוי בהפחתת ספירת הטסיות בתוך ה-WB היה כמעט משמעותי (מ-310 ± 73 ל-286 ± 96 (-7.7%); p=0.06), אם כי ל-PRP היו הבדלים ממוצעים גדולים יותר משמעותית בירידה בספירת הטסיות ובעלייה ב-MPV.והעלייה ב-MPV הייתה משמעותית.(от 10,1 ± 0,5 עד 11,8 ± 0,6 (+16,8) р < 0,001). (מ-10.1 ± 0.5 ל-11.8 ± 0.6 (+16.8) p < 0.001).
נדרש ריכוז סופי של 20% גלוקוז כדי לראות שינוי משמעותי ב-MPV, אך השינוי ב-MPV היה בולט יותר בריכוז הסופי של 25%.איבוד הטסיות התייצב לאחר הירידה הראשונית.ציינו ירידה חדה ראשונית ב-CVR, עם זאת, ה-CVR שוחזר במהירות בריכוז הגלוקוז הסופי של 25%, שהיה גבוה משמעותית מרמות ה-CVR שנצפו בריכוזי הגלוקוז הסופיים של 20% ו-15% (איור 3 ומשמאל לטבלה 3; תיבות מוצללות).ציין ערכי p ≤ אלפא עם תיקון Bonferroni של 0.01).הייתה גם ירידה חדה ראשונית במספר ה-PLT, שנצפתה בשלב הראשוני של 0-15 שניות, ולאחר מכן נשארה יציבה (מ-15 שניות ל-30 דקות; משמאל לטבלה 4).
הוספה של ריכוזים שונים של גלוקוז לדם מלא הביאה לירידה מהירה ראשונית ב-MPV ולאחריה התאוששות תלוית ריכוז של יותר מ-20%.האגדה מראה את ריכוז הגלוקוז לאחר דילול.D15, D20 ו-D25 בוצעו בדילול 1:1.D21 ו-D41 בוצעו בדילול 1:5.
טבלה 4 מציגה את השינוי בספירת הטסיות בדילול בגלוקוז היפרטוני.ראינו קשר תלוי מינון בין הירידה המיידית במספרי ה-PLT בדילול 1:1 ובדילול 1:5.בהשוואה בין הדילולים של 1:1 כקבוצה בודדת לדילול של 1:5, לקבוצה של 1:1 הייתה ירידה מיידית בספירת הטסיות פחות מקבוצת ה-1:5 66±48,000 (23%) לעומת 99±69,000 (37%)., p = 0.014) בקבוצת 1:5.לאחר ירידה ראשונית בנקודת המדידה הראשונה, ספירת הטסיות כאחוז הגלוקוז התייצב (איור 4).
כאשר מוסיפים דם מלא לגלוקוז ביחס של 1:1, ספירת הטסיות מופחתת בכ-25%.עם זאת, כאשר הוסף דם מלא ביחס של 1:5, ההפחתה הייתה גדולה בהרבה - כ-50%.
41% הגלוקוז העלה את MPV מהר יותר ובאופן דרמטי יותר מ-25% או 21%.תוצאות MPV מוצגות באיור 3. בכל שאר הדילולים, לא נצפתה ירידה ראשונית מיידית ב-MPV לאחר הוספת 50% גלוקוז.בעת שימוש ב-25% גלוקוז (ריכוז גלוקוז 20.8% בדילול הסופי), השינוי ב-MPV היה דומה לשינוי ב-20% גלוקוז בדילול 1:1 (איור 3).למרות שהשינויים ב-MPV היו גדולים בהתחלה בריכוז המעורב של 41% מאשר ב-25%, ההבדל ב-MPV בין 41% ל-25% לאחר 16 דקות כבר לא היה משמעותי (טבלה 3, מימין).מעניין גם ש-25% גלוקוז העלה את ה-MPV ביעילות רבה יותר מ-20.8%.
מחקר זה במבחנה אישר חלקית את ההשערה שלנו. הוא הראה תמוגה חלקית של טסיות דם על ידי תערובת דקסטרוז, התאמות מהירה של טסיות דם ליפרטוניות קיצונית, ועלייה משמעותית ב-MPV בתגובה לריכוזים של מעל 25% של דקסטרוז היפרטוני. הוא הראה תמוגה חלקית של טסיות דם על ידי תערובת דקסטרוז, התאמות מהירה של טסיות דם ליפרטוניות קיצונית, ועלייה משמעותית ב-MPV בתגובה לריכוזים של מעל 25% של דקסטרוז היפרטוני. Он показал потенциальный частичный лизис тромбоцитов примесью декстрозы, быструю аккомгодациц тромбоцитов пертонуса и значительное повышение MPV в ответ на гипертоническую концентрацию декстрозы > 25%. הוא הראה תמוגה חלקית פוטנציאלית של טסיות דם עם דקסטרוז, התאמה מהירה של טסיות דם ליפרטוניות קיצונית, ועלייה משמעותית ב-MPV בתגובה לרמות דקסטרוז היפרטוניות של מעל 25%.它显示出通过葡萄糖混合物潜在的部分血小板溶解，血小板快速适亗且应櫁竌2> % 浓度的高渗葡萄糖时MPV 显着上升。它 显示 出 通过 葡萄糖 潜在 的 部分 血小板 血小板 溶解 血小板 快速 适庯 极瞌应> 25% 浓度 高渗 葡萄糖 时 时 mpv 显着。。。。。 Он показывает потенциальный частичный лизис тромбоцитов смесями с глюкозой, быструю адаптацицом тромбоцитов гипертонусу и значительное увеличение MPV в ответ на концентрацию гипертонической глюкозы > 25%. זה מראה תמוגה חלקית של טסיות דם על ידי תערובות גלוקוז, הסתגלות מהירה של טסיות דם להיפרטוניות קיצונית, ועלייה משמעותית ב-MPV בתגובה לגלוקוז היפרטוני מעל 25%.העלייה הראשונית הייתה מקסימלית בחשיפה של 41.6% לגלוקוז, אך העלייה ב-MPV התקרבה ל-25% חשיפה לגלוקוז כ-20 דקות לאחר החשיפה.
ריכוז הטסיות מושפע מגלוקוז.שמנו לב שכמות ה-PLT ירדה בכל דילול הגלוקוז.ירידה חדה במספר הטסיות בדילול H2O (0%) מסדרת PRP עשויה להיות קשורה לתמוגה אוסמטית.לחלופין, זה יכול להיות חפץ שנגרם על ידי התגבשות טסיות דם, אבל זה בניגוד להיעדר שינוי MPV בדילול זה.ממצא זה אומר שחלק מהטסיות רגישות מאוד להיפואוסמולריות.
בכל הדילול 1:1 של גלוקוז, כמות ה-PLT ירדה ב-20-30%, אפילו ב-D5W (היפוטוני ב-252 mOsm), מה שעשוי להעיד על השפעה לא אוסמוטי ספציפית של גלוקוז, שכן גם PLT וגם MPV נותרו ללא שינוי בעלייה של פי שלושה בריכוז.גלוקוז.מ-D5W ל-D25W.למעשה, ריכוזי PLT נטו לעלות מעט עם הגברת האוסמולריות.
הירידה ב-PLT בין דילולים של 1:1 ל-1:5 פירושה שהשפעת ההמסה תלויה בריכוז הגלוקוז הראשוני והסופי.אם זה היה תלוי רק בריכוז הראשוני, אז אפשר היה לצפות לראות הבדל בהפחתת PLT בין ריכוזים של 1:1.אבל אנחנו לא.אם השפעת התמוגה תלויה רק ​​בריכוז הגלוקוז הסופי, אז אנחנו לא מצפים להרבה הבדל בין דילול של 20% 1:1 לדילול של 20.8% 1:5.ובכל זאת עשינו את זה.
אם מתרחש אובדן טסיות עקב תמוגה של טסיות דם, נוצר ליזאט חלקי, שלאחריו משתחררים ציטוקינים וגורמי גדילה לסביבה החוץ-תאית.מספר מחקרים הראו ש-lysate של טסיות דם יעיל כמעט כמו PRP כפתרון ריבוי [11].PRP עצמו הוכח כפתרון יעיל לטיפול בהתפשטות [12-14].
טסיות לא פעילות מסתובבות בצורה של דיסק מחוזקת במספר מבנים פנימיים.במהלך ההפעלה, הם מקבלים צורה כדורית או אמבה יותר, וכתוצאה מכך עלייה בנפח.הגידול בנפח מצריך גידול בשטח הפנים, שהוא תוצאה של שחול של מערכת הצינוריות הפתוחה (OCS) והוספת גרגירים אקסוציטים לממברנה.נותר לקבוע אם העלייה ב-MPV המושרה על ידי גלוקוז היפרטוני כרוכה באחד או בשני המנגנונים הללו, אך אם האחרון, אזי עלייה ב-MPV תצביע על דה-גרנולציה.
מחקר זה הראה שחשיפה לריכוז גבוה של גלוקוז על PRP או טסיות דם מלאות הביאה לעלייה ב-MPV תוך 15 דקות עם ריכוז גלוקוז של 25% ו-41.6%, בהתאמה.
העלייה ב-MPV של טסיות עשויה לנבוע מהתרחבות של סבכי המיקרוטובוליות שמסביב בתגובה לזרימת סידן.Liu et al.הוכח כי גלוקוז מתווך בריחת סידן דרך תעלת TRPC6 של הטסיות [6].ההשערה שלנו היא שגלוקוז גורם להרפיה של סבכי המיקרוטובוליות, מה שמוביל לעלייה ברגישות ו/או הפעלה של MPV וטסיות הדם.עם זאת, אם לשפוט לפי התוצאות שלנו, זה רק חלק מהסיפור.בבדיקות שלנו, שום ריכוז מתחת ל-D25W הביא לעלייה ב-MPV.בהתחשב בכך שלא בדקנו חשיפה לריכוזי גלוקוז בין 12.5% ​​ל-25%, תוצאות שלב 1 שלנו מצביעות על כך שייתכן שיש סף בטווח זה של ריכוזי גלוקוז שמוביל לעלייה ב-MPV.בדיקות נוספות בשלבים 3 ו-4 הראו שנראה כי 20-25% גלוקוז הוא הסף לכך, אך עדיין לא ברור מדוע.
ראינו גם ירידה של ~9% ב-MPV לאחר צנטריפוגה.לא ברור אם ירידה זו ב-MPV נובעת מטסיות גדולות וצפופות יותר הכלואות בשכבת ה-RBC של הצנטריפוגה.תצפית זו עשויה להיות חשובה לרופאים מכיוון שהיא עשויה לרמוז שטסיות PRP הן תת-קבוצה קטנה יותר וצפופה פחות של טסיות WB.
במחקר קודם, הראינו שהכנת PRP בשיטות ידניות היא זולה [8].אם גלוקוז גורם לרגישות לטסיות רקמה או ל-PRP, מה שהופך אותן לרגישות יותר להפעלה, או אם PRP מיוצר עם תכונות ליזאט חלקיות, הדבר עשוי לשפר את ההתחדשות ולהפחית את הצורך בטיפול.לכן, השילוב של PRP וגלוקוז בריכוז גבוה עשוי להיות חסכוני יותר מאשר PRP או גלוקוז בלבד.
למחקר שלנו יש כמה חסרונות.ראשית, אנו משתמשים ב-PRP המתקבל מכמה שיטות שונות.זה יכול להוביל לתוצאות סותרות.שנית, לא הצלחנו לבצע ניתוח ביוכימי של אף אחת מהדגימות שלנו כדי לקבוע בצורה מדויקת יותר אם התרחשה הפעלת טסיות דם.ברצוננו למדוד P-selectin, פקטור טסיות דם 4, אגרגטים מונוציטיים של טסיות דם או סמנים אחרים של הפעלת טסיות דם כדי להבין טוב יותר את מידת או הנוכחות של דה-גרנולציה של גרגירי אלפא, אך זה מעבר להיקף של מחקר זה.שלישית, לא הצלחנו לאשר במיקרוסקופ אלקטרוני או בשיטות אחרות שהעלייה ב-MPV בטסיות חשופות לגלוקוז נבעה מההשפעה על סבכי מיקרוטובוליות.
תערובות של WB או PRP עם 25% גלוקוז העלו את ה-MPV, מה שמסמן את תחילת הפעלת הטסיות, אם כי מחקר זה לא הראה התקדמות של צבירה או דה-גרנולציה.תערובת הגלוקוז ההיפרטונית הביאה לאובדן טסיות דם, אולי מייצג אפקט ליטי.הפעלה חלקית או תמוגה של טסיות יכול לגרום להתחדשות רקמות לאחר הזרקת טסיות.לא ברור לאילו השלכות קליניות עשויות להוביל שינויים אלו.מחקרים נוספים הוכיחו מדידות מדויקות יותר של הפעלה או תמוגה והעריכו את ההשפעות הקליניות השונות של תערובות גלוקוז היפרטוניות עם WB או PRP.
טיפול שגשוג בגלוקוז הוא טיפול רגנרטיבי פשוט וזול שמתרחב במהירות ותומך במחקרים קליניים.מחקר זה מציע מנגנון פיזיולוגי שאם יאושר יוכל לעזור לנו להבין חלק מהמנגנון הרגנרטיבי של טיפול שגשוג.
אינפורמטיקה ביו-רפואית ובריאות בבית הספר לרפואה של אוניברסיטת מיזורי, קנזס סיטי, קנזס סיטי, ארה"ב
נבדקים אנושיים: כל המשתתפים במחקר זה נתנו או לא נתנו הסכמה.האגודה הבינלאומית לרפואה סלולרית הוציאה את אישור ICMS-2017-003.הפרוטוקול הבא אושר לשימוש נוסף על ידי מועצת הביקורת המוסדית של האגודה הבינלאומית לרפואה סלולרית: כותרת: חישוב תפוקת תרופות פלזמה עשירות בטסיות מבוססות על ספירת טסיות CBC הבסיסית.נבדקי בעלי חיים: כל המחברים אישרו כי לא היו מעורבים בעלי חיים או רקמות במחקר זה.ניגודי עניינים: בהתאם לטופס הגילוי האחיד של ICMJE, כל המחברים מצהירים על הדברים הבאים: פרטי תשלום/שירות: כל המחברים מצהירים שלא קיבלו תמיכה כספית מאף ארגון לעבודה שהוגשה.קשרים פיננסיים: כל המחברים מצהירים כי אין להם כרגע או בשלוש השנים האחרונות קשרים פיננסיים עם ארגון כלשהו שעשוי להתעניין בעבודה שהוגשה.קשרים אחרים: כל המחברים מצהירים שאין קשרים או פעילויות אחרות שעשויות להשפיע על העבודה שהוגשה.
Harrison TE, Bowler J, Reeves K et al.(17 במאי 2022) השפעת הגלוקוז על ספירת טסיות ונפח: השלכות על רפואה רגנרטיבית.תרופה 14(5): e25081.doi:10.7759/cureus.25081
© זכויות יוצרים 2022 Harrison et al.זהו מאמר בגישה פתוחה המופץ תחת התנאים של Creative Commons Attribution License CC-BY 4.0.שימוש, הפצה ושכפול ללא הגבלה בכל מדיום מותרים, בתנאי שהכותב המקורי והמקור יזוכו.