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有望な抗菌根管洗浄剤としての塩酸クロルヘキシジンナノエマルションの組成と特性評価: in vitro および ex vivo 研究
著者 Abdelmonem R.、Younis MK、Hassan DH、El-Sayed Ahmed MAEG、Hassanien E.、El-Batuti K.、Elfaham A.
リハビリ・アブデルモネム、1 モナ・K・ユニス、1 ドア・H・ハッサン、1 モハメド・アブド・エル・ガワド・エル・サイード・アーメド、2 エハブ・ハサネイン、3 カリエム・エル・バトゥティ、3 アラア・エルファハム 31 ミスル大学薬業薬学部科学技術、10 月 6 日エジプト、市。2 ミスル科学技術大学薬学部微生物学および免疫学科、10月6日、エジプト。3 歯内療法学科、アインシャムス大学、カイロ、エジプト はじめにと目的: 塩素ヘキシジン塩酸塩 [Chx.HCl] は、広範囲の抗菌活性、持続性の作用、低毒性を備えているため、潜在的な根管洗浄剤として推奨されます。この研究の目的は、新しい組成物Chx.HClナノエマルションを使用して、Chx.HClの浸透力、洗浄および抗菌作用を高め、根管洗浄剤として使用することでした。方法: Chx.HCl ナノエマルションは、2 つの異なる油: オレイン酸と Labrafil M1944CS、2 つの界面活性剤、Tween 20 と Tween 80、および共界面活性剤のプロピレングリコールを使用して調製しました。疑似三元状態図をプロットして、最適なシステムを示します。調製されたナノエマルジョン製剤は、薬物含有量、乳化時間、分散性、液滴サイズ、インビトロ薬物放出、熱力学的安定性、インビトロ抗菌活性、および選択された製剤のインビトロ研究について評価されました。Chx.HCl 0.75% および 1.6% ナノエマルションの浸透、洗浄、抗菌作用を、根管洗浄剤としての通常の粒子サイズと比較しました。結果。選択した処方は、2% ラブラフィル、12% トゥイーン 80、および 6% プロピレングリコールを含む F6 でした。小さな粒子サイズ (12.18 nm)、短い乳化時間 (1.67 秒)、2 分後の迅速な溶解。それは熱力学的/物理的に安定したシステムであることがわかっています。従来のChx.HCl粒子サイズと比較して、高濃度のChx.HCl 1.6%ナノエマルジョンは粒子サイズが小さいため、より優れた浸透性を示しました。通常の粒子サイズの材料 (2609.56 μm2) と比較して、1.6% Chx.HCl ナノエマルジョンは残留デブリの平均表面積が最も小さくなります (2001.47 μm2)。結論: ナノエマルジョン組成物 Chx.HCl は、より優れた洗浄能力と抗菌作用を持っています。エンテロコッカス・フェカリスに対して高い殺菌作用があり、菌体収縮率が高いか完全に破壊されます。キーワード：塩酸クロルヘキシジン、ナノエマルジョン、根管洗浄剤、浸透、洗浄効果、抗菌洗浄剤。
ナノエマルションは、液滴サイズが 50 ～ 500 nm の範囲のエマルションの一種であり、そのユニークな特性により近年大きな注目を集めています。優れた洗浄特性があり、水の硬度の影響を受けず、ほとんどの場合、毒性が低く、静電気相互作用がありません。2 ナノテクノロジーは、同様のバルク製品と比較して、超小さい粒子サイズ、大きな表面積対質量比、および独特の物理的および化学的特性を備えており、歯科感染症の治療と予防において新たな展望も開きます。3 塩酸クロルヘキシジン (Chx.HCl) は水にわずかに溶け、アルコールには非常にわずかに溶け、光で徐々に染まります。4.5SH。HCl は、広範囲の抗菌作用、持続性、低毒性を持っています。これらの特性により、潜在的な根管洗浄剤としても推奨されます。Chx.HCl の主な利点は、細胞毒性が低いこと、無臭、不快な味がないことです。6-9 根管の消毒を改善するために、数種類のレーザーが使用されています。レーザーの殺菌効果は、波長とエネルギーに加えて、細菌の細胞壁に変化を引き起こし、細胞死に至るまでの浸透圧勾配の変化を引き起こす熱曝露にも依存します。レーザーと根管洗浄器の相互作用により、歯髄消毒の新たな地平が開かれます。10 超音波エネルギーは高周波を生成しますが、振幅は低くなります。 ファイルは、人間の聴覚の限界 (>20 kHz) を超える 25 ～ 30 kHz の超音波周波数で振動するように設計されています。 ファイルは、人間の聴覚の限界 (>20 kHz) を超える 25 ～ 30 kHz の超音波周波数で振動するように設計されています。 Файлы предназначены для колебаний на ультразвуковых частотах 25–30 кГц, которые находятся за пределами слухового восприятия человека (> 20 кГц)。 ファイルは、人間の可聴範囲 (> 20 kHz) を超える 25 ～ 30 kHz の超音波周波数で振動するように設計されています。これらのファイルは、人間の感覚の限界 (> 20 kHz) を超える 25 ～ 30 kHz の超音波周波数で振動するように設計されています。これらのファイルは 25 ～ 30 kHz で設計されています Файлы рассчитаны на колебания на ультразвуковых частотах 25–30 кГц, что выходит за пределы слухового восприятия человека (>20 кГц)。 ファイルは、人間の可聴限界 (>20 kHz) を超える 25 ～ 30 kHz の超音波周波数の振動用に設計されています。それらは横振動で動作し、その長さに沿って結び目と腹の特徴的なモードを設定します。「受動的超音波洗浄」（PUI）という用語は、器具や壁が歯内治療用のやすりや器具と接触しない洗浄プロトコルです。PUI中、超音波エネルギーは振動ファイルから根管内の洗浄溶液に伝達されます。後者は、フラッシング剤の音速の流れやキャビテーションを引き起こす可能性があります。11 上記のデータに基づいて、Chx.HCl の浸透および洗浄作用の改善を評価するにはナノテクノロジーを使用することが適切であると考えられます。
塩酸クロルヘキシジン Chx.HCl は、Arab Drug Company for Pharmaceuticals (カイロ、エジプト) のご厚意により提供されました。Labrafil M 1944 CS (オレオイルポリオキシ-6-グリセリド) は、Gattefosse (Saint Priest、フランス) から寛大に提供されました。Ｔｗｅｅｎ ２０（ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウレート）、Ｔｗｅｅｎ ８０（ポリオキシエチレン（８０）ソルビタンモノオレエート）、オレイン酸、プロピレングリコール（Ｇｏｍｈｏｒｙａ Ｃｏｍｐａｎｙ（カイロ、エジプト）製）。歯周治療または矯正治療のための非齲蝕性単根歯の抽出、アインシャムス大学歯学部顎顔面科学科、カイロ、エジプト。ブレインハートエキス（BHI）ブロス（RC CLEANER、IIchung Dental Ltd.、ソウル、韓国）で増殖させたEnterococcus faecalis（ATCC 29212株）の純粋培養。
さまざまな媒体 (オレイン酸、Labrafil M 1944CS、Tween 20、Tween 80、プロピレングリコール、および水) における Chx.HCl の溶解度を研究しました。大過剰のＣｈｘ・ＨＣｌ（５０ｍｇ）を遠心分離管に入れ、５．０ｇの中間相を加える。混合物をボルテックスミキサー中で１５分間振盪し、次いで室温で保存した。２４時間後、チューブ内の不溶性薬物ペレットを３０００ｒｐｍで５分間遠心分離して、透明な上清を得た。十分な量のサンプル溶液を収集し、n-ブタノールで希釈します。希釈したサンプルをワットマン 102 濾紙で濾過し、次に n-ブタノールで適切に希釈して、飽和溶液中の薬物濃度を測定しました。サンプルは、対照として n-ブタノールを使用し、UV 分光光度計を使用して 260 nm で分析されました。12.13
理想的なナノエマルジョンの最適パラメータを得るために、配合に必要な各成分の正確な比率を決定するために、擬似三相図が構築されました。配合物は、油（すなわち、オレイン酸およびラブラフィルＭ１９４４ＣＳ）、界面活性剤（すなわち、Ｔｗｅｅｎ ２０およびＴｗｅｅｎ ８０）、および追加の界面活性剤、すなわちプロピレングリコールを使用して配合された。まず、界面活性剤 (共界面活性剤なし) と油の別々の混合物を異なる体積比 (1:9 ～ 9:1) で調製しました。混合物を水で滴定する（水を滴下する）場合は、混合物が透明から濁るまでを終点として注意深く監視します。これらの終点は、擬似三相図上にマークされます。界面活性剤と二次界面活性剤 (Smix) の混合物 (Smix) を 2:1 および 3:1 の比率で調製し、選択したオイルと混合して、プロセス全体を繰り返しました 15,16。
Chx.HClを含むナノエマルジョン系は、油相としてLabrafil M 1944 CS、追加の界面活性剤としてTween 80または20界面活性剤とプロピレングリコール、そして最後に水を使用して調製されました（表1）。薬物をLabrafil M 1944 CSに溶解し、界面活性剤と二次界面活性剤を合わせた水を徐々に混合しながらゆっくりと添加しました。添加する界面活性剤と共界面活性剤の量、および添加できる油相の割合は、疑似三元状態図を使用して決定されます。超音波発生器（Ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ ＬＣ ６０ Ｈ、Ｅｌｍａ、Ｇｅｒｍａｎｙ）を使用して、顆粒を分散させるための所望のサイズ範囲を達成した。それからバランスをとります。17
分散性試験は、溶解装置(Dr. Schleuniger Pharmaton、Model Diss 6000、トゥーン、スイス)を使用して実施し、各調製物1 mlを37±0.5℃の水500 mlに添加した。50 rpm で回転する標準的なステンレス鋼の溶解パドルによって穏やかな撹拌が保証されます。得られたエマルジョンを視覚的に判定し、透明、青味を帯びた半透明、乳白色、または曇りとして分類した。さらなる研究のために明確な式を選択してください。18.19
擬似三相図に基づいて最適化されたナノエマルジョン組成物から Chx.HCl を抽出すると、超音波技術を使用して n-ブタノールが生成されます。適切に希釈した後、抽出物を波長 260 nm で分光光度法により Chx.HCl の含有量を分析しました。二十
自己乳化時間を試験するために、各組成物１mlを蒸留水２５０mlで満たしたビーカーに加え、５０rpmで一定に撹拌しながら３７±１℃に維持した。自己乳化時間は、希釈後に予備濃縮物が均一な混合物を形成する時間と見なされます。21
液滴サイズ分析の場合、最適化された製剤 50 mg をフラスコ中で水で 1000 ml に希釈し、手で穏やかに混合します。液滴サイズ分布は、Malvern Zetasizer 2000 装置 (Malvern Instruments Ltd.、英国マルバーン) を使用し、173°、温度 25°C、屈折率 1.330 の後方散乱検出条件下で測定しました。22
インビトロ溶解研究は、USP Type II装置(パドル)(Dr. Schleuniger Pharmaton、Diss Model 6000)を50rpmで使用して実施した。３７±０．５℃の温度に保たれた蒸留水（５００ｍｌ）を溶解媒体として使用し、調製した組成物５ｍｌを溶解媒体に滴下した。次に、さまざまな間隔で、5 ml の溶解媒体を採取し、放出された薬物の量を 254 nm で分光測光的に測定しました。実験は三重に実施した。23
次に、それに基づいて調製されたナノエマルジョンからのインビトロでのChx.HCl放出の速度論的パラメータが測定された。ゼロ、一次、二次の反応速度論とヒグチ拡散モデルをテストして、Chx.HCl の放出に最適な速度論シーケンスを選択しました。
各配合物 2 ml を周囲温度で 48 時間保存した後、相分離が観察されました。次いで、各Ｃｈｘ・ＨＣｌナノエマルション製剤のサンプル１ｍｌを、２５℃の蒸留水で１０ｍｌおよび１００ｍｌに希釈し、２４時間保存した。その後、相分離が観察された。21
次いで、各組成物の２ｍｌのサンプルをネジ蓋付きの透明ボトルに別々に移し、２℃の冷蔵庫で２４時間保存した。その後、それらを取り出し、25℃および40℃で保管した。単一の冷却-解凍サイクルを実行しました。次に、サンプルの相分離と薬物の沈殿を観察しました。21
各Chx.HClナノエマルション製剤の5 mlサンプルをガラス管に移し、実験室用遠心分離機(Shanghai Surgical Instrument Factory Microcentrifuge Model 800、上海、中華人民共和国)に置き、4000 rpmで5分間遠心分離した。次に、サンプルの相分離と薬物の沈殿を観察しました。21
すべての実験は、エジプトのアインシャムス大学の施設倫理委員会によって承認されました。形成された根尖を有する、う蝕のない単根のヒトの歯が 50 本選択されました。抜歯した歯は患者の署名による書面による同意を得た上で使用した。歯には、上顎切歯と下顎切歯、および下顎小臼歯が含まれます。根の外表面をキューレットで処理し、すべての歯を 0.5% NaOCl で 24 時間表面滅菌し、使用するまで滅菌生理食塩水中で保管しました。安全側ダイヤモンドディスクを使用して歯冠を除去し、歯の長さを頂点から冠状縁まで 16 mm に正規化しました。24,25 リンス液に応じて、歯は次のグループに分類されます。
(A) グループ (n=24) のサンプルを Chx.HCl ナノエマルジョンで洗浄しました。サブグループ (I) (n = 12) は、サンプルを 0.75% 濃度の Chx.HCl ナノエマルション 5 ml で洗浄しました。サブグループ(II)(n=12)は、サンプルを5mlの1.6%Chx.HClナノエマルションですすいだ。(B) サンプルのグループ (n=24) を、通常の粒子サイズの 2% Chx.HCl 5 ml で洗浄します。対照群：（n=2）活性化せずに5mlの生理食塩水で洗浄した。
形成された先端を有する、う蝕のない単根のヒトの歯４４本が選択された。歯には、上顎切歯と下顎切歯、および下顎小臼歯が含まれます。根の外表面をキューレットで処理し、すべての歯を 0.5% NaOCl で 24 時間表面滅菌し、使用するまで滅菌生理食塩水中で保管しました。安全ダイヤモンドディスクを使用して歯冠を除去し、歯の長さを頂点から冠状縁まで 16 mm に正規化しました。24、25、29
標準的な方法を使用した、サイズ 50 の主根尖ファイルの機械的準備。手術中の洗浄剤として滅菌生理食塩水を使用します。最後に、根管を２ｍｌの１７％ＥＤＴＡで１分間フラッシュして、スメア層を除去した。漏れを防ぐために、各標本の根尖孔を含む根の表面全体をマニキュア（シアノアクリレート接着剤）の２回のコートで覆った。次に、取り扱いと識別を容易にするために、歯を歯石のブロックに垂直に配置します。次に、29 ～ 33 のサンプルを 121℃、15 psi で 20 分間オートクレーブ滅菌しました。滅菌後、すべてのサンプルは滅菌器具を使用して滅菌条件下で輸送および処理されました。根管は、ブレインハートエキス（BHI）ブロス中で37℃で24時間増殖させたエンテロコッカス・フェカリス（ATCC 29212株）の純粋培養物で汚染されていました。滅菌マイクロピペットを使用して、準備されたすべての歯の根管に E. faecalis 接種材料の透明な懸濁液を注入します。次いで、ブロックを滅菌ビーカーに入れ、37℃で24時間インキュベートした。31、34、35
(A) グループ (n=24) のサンプルを Chx.HCl ナノエマルションで洗浄しました。サブグループ（Ｉ）のサンプル（ｎ＝１２）を、５ｍｌの０．７５％濃度のＣｈｘ・ＨＣｌナノエマルションですすいだ。サブグループ (II) (n = 12) は、1.6% 濃度の Chx.HCl ナノエマルジョン 5 ml でサンプルをリンスしました。
対照群: 陽性対照、(n=4) 汚染された根管を 5 ml の生理食塩水で洗い流し、陽性対照として保持しました。ネガティブコントロール: (n=4) 標本には懸濁液は注入されませんでした。つまり、根管は大腸菌で汚染されておらず、滅菌と手順の信頼性を確認するためのネガティブコントロールとして滅菌状態に保たれました。各サンプルには 5 ml のテスト洗浄液を使用します。次に、各サンプルを 1 ml の滅菌生理食塩水で最終洗浄しました。
サイズ 35 の滅菌ペーパーチップを使用して根管からサンプルを収集します。ペーパーチップをチューブに有効長さまで挿入し、10 秒間放置した後、寒天プレートに移してプレートあたりのコロニー形成単位 (CFU) の数を測定しました。プレートを 37℃で 24 時間インキュベートし、細菌の増殖を視覚的に評価しました。透明なプレートは完全な滅菌を示します。ぼやけたプレートはプラスの成長を示すと考えられます。ディッシュあたりの細菌増殖ゾーンの平均 CFU 数を決定し、CFU の数を計算しました。生存者は主に点滴プレート上の生存数で測定されます。さらに、低 CFU をカウントするために注ぎカップを使用し、高 CFU をカウントするために 106 に希釈したものを使用しました。36.37
実験と同じ日にオートクレーブで事前滅菌した解凍寒天培地 15 ml を含むチューブを準備します。Enterococcus faecalis は、非常に高い pH、酸性度、高温でも生存できる通性グラム陽性嫌気性球菌です。39 細菌サンプル (Enterococcus faecalis ATCC 29212) は、コロニーからの細胞を滅菌生理食塩水と混合することによって調製されました。次に、細菌サンプルを生理食塩水で希釈して、108 CFU/mL に相当する McFarland 0.5 に一致させました。添加したサンプル量は 10 μl でした。39 濁度標準 (マクファーランド 0.5)40 は、1% (10 g/l) 塩化バリウム二水和物溶液 0.6 ml を 100 ml メスシリンダーに注ぎ、1% (10 g/l) 硫酸で 100 ml まで満たすことによって調製しました。濁度標準液をブロスサンプルと同じチューブに入れ、暗所、室温で 6 か月間保管し、蒸発を防ぐために密封しました。空のペトリ皿の蓋を開け、サンプルを皿の中央に注ぎます。寒天が完全に固まったら、プレートを逆さにし、37℃で24時間インキュベートします。
すべてのデータが収集され、表にまとめられ、統計分析が行われました。統計分析は、IBM® SPSS® Statistical Version 17 for Windows (SPSS Inc.、IBM Corporation、米国ニューヨーク州アーモンク) を使用して実行されました。
さまざまな油相、界面活性剤溶液、共界面活性剤溶液、および水における Chx.HCl の溶解度を研究しました。Chx.Hcl は、ラブラフィル M に対する溶解度が最も高く、オレイン酸に対する溶解度が最も低くなります。ナノエマルションは薬物を溶解した状態に保つことができるため、油相中の薬物の溶解度が高いことはナノエマルションにとって重要です。これは、油への薬物の溶解度が高いほど、製剤中の油が少なくなり、したがって薬物の量が少なくなるということを意味します。油滴を乳化するには、一定量の界面活性剤と共界面活性剤が必要です。
ナノエマルジョン領域を定義し、選択したオイル、界面活性剤、および追加の界面活性剤 (それぞれ、ラブラフィル M、Tween 80、Tween 20、およびプロピレングリコール) の濃度を最適化するために、疑似三相図が構築されました。Chx.Hcl はオレイン酸に対する溶解度が非常に低いため、最初の一滴の水でオレイン酸を滴定すると濁りが生じます。したがって、オレイン酸系はこの研究から除外されました。他の配合物は、油と界面活性剤の 1:9 混合物を使用して調製されています。pH とイオン強度の範囲を考慮して、これらの界面活性剤が選択されました。
調製された配合物はすべて、システムＦ２を除いて透明であったが、システムＦ２は曇って見えたため、さらなる評価研究から除外された。
理想的なナノエマルジョン製剤は、穏やかに撹拌して希釈したときに完全かつ迅速に分散できる必要があります。Chx.HCl ナノエマルション製剤は、1.67 ～ 12.33 秒という短い乳化時間を示しました。Tween 80 は乳化時間が最も短いです。これは、Tween 80 の高い可溶化能力によって説明できます。自己乳化時間は、界面活性剤の濃度が増加すると増加します。これは、界面活性剤の作用による系の粘度の増加によるものと考えられます。
エマルションの液滴サイズによって、薬物放出の速度と程度が決まります。エマルジョンの液滴サイズが小さいほど、乳化時間が短くなり、薬物が吸収される表面積が増加します。Chx.HClナノエマルジョンの選択された組成物の平均液滴サイズは711±0.44、587±15.3、10.97±0.11、16.43±4.55、および12.18±2.48であり、F1、F2のPDIは0.76、0.19、0.61、0.47、および0.76であった。、F3、0.16 はそれぞれ F4、F5、F6 です。界面活性剤として Tween 80 を含む配合物は、より小さい球晶を示しました。これは乳化力が高いためと考えられます。PDI 値が低いほど、システム サイズの分布が狭いことを示します。これらの製剤は、その液滴半径が、光散乱が最小限に抑えられる可視光の光学波長 (390 ～ 750 nm) より小さいため、きれいな外観を持っています。41
図上。図２は、配合された製剤から放出されたＣｈｘ・ＨＣｌのパーセンテージを示す。調製されたChx.HClナノエマルション製剤からの薬物の完全な放出は、2分から7分の範囲であった。最高の薬物放出速度は、Chx.HCl F6 ナノエマルジョン製剤 (2 分) の場合に得られることが観察されました。これは、より高い乳化度を示した Tween 80 の存在と、得られたナノエマルジョンによるものと考えられます。薬物放出のための大きな表面積を提供し、薬物放出速度の増加を可能にします。同時に、プロピレングリコールの溶解特性により、大量の親水性界面活性剤を油に溶解することができます。40
インビトロでのChx.HCl放出は異なる速度論的順序に従うことがわかっており、異なるように調製されたナノエマルション製剤からの薬物放出を反映できる明確な速度論的順序は存在しない。F4 薬物の放出速度は一次速度論であり、F4 薬物の内部に残っている薬物の量に比例して放出されることを意味します。他の薬物の速度論的放出は、放出された薬物の量が総薬物の平方根およびナノエマルション中の薬物の溶解度に比例することを示すヒグアシャ拡散モデルと一致していた。42
選択した配合物は、加熱冷却サイクル、遠心分離、凍結融解サイクルを使用したスト​​レス試験により、さまざまな熱力学的安定性を検査されました。製剤 F3 および F4 は解凍サイクル後に薬物の沈殿を示し、一方 F1 は増粘 (ゲル化) を示したことが観察されました。F5 と F6 は、連続遠心分離サイクル、加熱冷却試験、凍結融解試験に合格しました。ナノエマルションは、特定の濃度の油、界面活性剤、および水で形成され、相分離、乳化、または亀裂が生じることなく熱力学的に安定したシステムです。ナノエマルションと、動力学的に安定で最終的には相に分離するエマルションとを区別するのは、熱安定性です。19 F3 は他の製剤よりも大きな粒子サイズ (587 nm) を示しました。これは、熱力学的安定性試験における相分離と薬物の沈殿を説明できる可能性があります。Tween 80 を含み共界面活性剤を含まない F4 は薬物の沈殿を示しました。これは、ナノエマルジョン製剤の安定性を向上させるためにプロピレングリコールと Tween 80 を使用する必要があることを示している可能性があります。追加の界面活性剤を含まない Tween 20 を含む F1 は、液滴の凝集によるゲルの粘度または強度の増加である増粘 (ゲル化) を示しました。
安定性の結果は、粒子の分散を高め、薬物の沈殿を防ぐために追加のプロピレングリコール界面活性剤の存在が重要であることを示しています。43 F6 は、粒径が小さく (12.18 nm)、乳化時間が短く (1.67 秒)、2 分後の溶解速度が速いため、最良の配合物でした。これは熱力学的/物理的に安定したシステムであることが判明したため、さらなる研究のために選択されました。
根管治療後の失敗はより頻繁になっており、患者がより複雑な感染症を発症するリスクが高まっていることを意味します。44,45 バイオフィルムは、根管の消毒と充填中に除去する必要があります。46,47 根管系は複雑であるため、器具と洗浄のみを使用して細菌性根管を完全に除去することは困難になります。48 根管洗浄液の有効性は、DT への洗浄剤の浸透と細菌への曝露時間によって決まります。[49] したがって、徹底的な根管滅菌の新しい方法が試行され、テストされてきました。従来のリンスでは、DT.50 の浸透力が低いため、大腸菌を完全に除去することはできません。
ナノエマルジョンリンスの平均洗浄力は 2001.47 μm2、リンス助剤の平均粒径は 2609.56 μm でした。ナノエマルション洗浄と通常の粒子サイズ洗浄の間の平均差は 608.09 µm2 でした。 ナノエマルジョン洗浄剤と通常の粒子サイズの洗浄剤の間には統計的に非常に有意な (P<0.001) 差があり (P 値 0.00052) ました。 ナノエマルジョン洗浄剤と通常の粒子サイズの洗浄剤の間には統計的に非常に有意な (P<0.001) 差があり (P 値 0.00052) ました。 Между ирригационными растворами наноэмульсии иригационными растворами с нормальным размером частиц наблюдалась статистически высокозначимая (P<0,001) разница (значение P 0,00052)。 ナノエマルション洗浄剤と通常の粒子洗浄剤の間には、統計的に非常に有意な (P<0.001) 差 (P 値 0.00052) がありました。コーンエラストマー洗浄剤と通常の粒子径洗浄剤との間には、理論上顕著な差が存在する（Ｐ＜０．００１）（Ｐ値０．０００５２）。コーンエラストマー洗浄剤と通常の粒子径洗浄剤との間には、理論上顕著な差が存在する（Ｐ＜０．００１）（Ｐ値０．０００５２）。 Между ополаскивателем с наноэмульсией и ополаскивателем с нормальным размером частиц была статистически очень зна чимая разница (P<0,0001) (значение P 0,00052)。 ナノエマルジョンリンスと通常の粒径リンスとの間には、統計的に非常に有意な差（P<0.0001）があった（P値0.00052）。図 3 に示すように、ナノエマルションは通常の粒子サイズの材料と比較して統計的に非常に有意な差を示し、平均残留デブリ表面積が小さいことを示しました。つまり、ナノエマルション材料は最高の洗浄能力を持っていました。
図 3. リンス補助剤の洗浄性能の比較: (A) Nano CHX レーザー活性化あり、(B) CHX レーザー活性化あり、(C) PUI Nano CHX あり、(D) Nano CHX 活性化なし、(E) CHX 活性化なし、および (F)) CHX PUI 活性化。
残りの Chx.HCl 1.6% フラグメントの平均表面積は 2320.36 μm2 であり、Chx.HCl 2% の平均表面積は 2949.85 μm2 でした。 高濃度のナノエマルジョン洗浄剤と通常の粒子サイズの洗浄剤との間には、統計的に非常に有意な差 (P<0.001) がありました (P 値 0.00000)。 高濃度のナノエマルジョン洗浄剤と通常の粒子サイズの洗浄剤との間には、統計的に非常に有意な差 (P<0.001) がありました (P 値 0.00000)。 Наблюдалась статистически высокозначимая (P<0,001) разница между более высокой концентрацией наноэмульсионных ир Ластворов иригационными растворами с нормальным размером частиц (значение P 0,00000)。 高濃度のナノエマルション洗浄剤と通常の粒子サイズの洗浄剤との間には、統計的に非常に有意な (P<0.001) 差がありました (P 値 0.00000)。より高濃度のカーボン乳液洗浄剤と通常の粒子径の洗浄剤との間には、理論上顕著な差がある（Ｐ＜０．００１）（Ｐ値０．０００００）。より高濃度のカーボン乳液洗浄剤と通常の粒子径の洗浄剤との間には、理論的に明らかな差が存在する（P<0.001）（P 0 0.0 Наблюдалась статистически очень значимая разница (P<0,001) между более высокими концентрациями ополаскивателя с н аноэмульсией и ополаскивателя с нормальным размером частиц (значение P 0,00000)。 高濃度のナノエマルジョンリンスと通常の粒径リンスとの間には、統計的に非常に有意な差（P<0.001）があった（P値0.00000）。ナノエマルジョン洗浄剤の濃度は通常の粒子サイズの洗浄剤の濃度よりも低かったが、この低い濃度は破片の除去において著しく効果的であり、根管の洗浄においてより効果的であった。
PUI は、他の活性化方法と比較した場合、統計的に非常に有意な差がありました (p<0.001)。 PUI は、他の活性化方法と比較した場合、統計的に非常に有意な差がありました (p<0.001)。 PUI имел статистически высокозначимую разницу (p<0,001) по сравнению с другими методами активации. PUI には、他の活性化方法と比較して、統計的に非常に有意な差 (p<0.001) がありました。他の活性化方法と比較して、ＰＵＩには、理論的に非常に顕著な差がある（ｐ＜０．００１）。他の活性化方法と比較して、ＰＵＩには、理論的に非常に顕著な差がある（ｐ＜０．００１）。 По сравнению с другими методами активации PUI имел статистически очень значимую разницу (p<0,001)。 他の活性化方法と比較して、PUI には統計的に非常に有意な差がありました (p<0.001)。ISPの作動により、デブリの残留表面の平均面積は1695.31μm2でした。 PUI と Laser の間の平均差は 987.89929 で、(p 値 0.00000) と統計的に非常に有意な (P<0.001) 差を示しました。 PUI と Laser の間の平均差は 987.89929 で、(p 値 0.00000) と統計的に非常に有意な (P<0.001) 差を示しました。 Средняя разница между PUI и Laser составила 987,89929, демонстрируя высокостатистически значимую (P<0,001) разницу с (p-зна) 0,00000）。 PUI と Laser の間の平均差は 987.89929 で、(p 値 0.00000) と比べて統計的に非常に有意な (P<0.001) 差を示しました。 ＰＵＩとレーザーの間の平均差は９８７．８９９２９であり、高度な理論的一致性（ｐ値０．０００００）を示した。PUI 和レーザー Средняя разница между PUI и Laser составила 987,89929, что свидетельствует о высокой статистической значимости (P<0,001) ра зницы (p-значение 0,00000)。 PUI と Laser の間の平均差は 987.89929 であり、高い統計的有意性 (P<0.001) の差 (p 値 0.00000) を示しています。 PUI と活性化なしの平均差は 712.40643 で、p 値 0.00098 で統計的に非常に有意な差 (P<0.001) を示しました)。レーザー活性化の使用または活性化なしの使用は統計的に有意な差はありませんでした (P>0.05)。P 値は 0.451211 でした。 PUI と活性化なしの平均差は 712.40643 で、統計的に非常に有意な (P<0.001) 差があり、p 値は 0.00098 でした)。P 値は 0.451211 です。 Средняя разница между PUI и отсутствием активации составила 712,40643, демонстрируя высокостатистически значимую (P<0) ,001) разницу с p-значением 0,00098)。 PUI と活性化なしの平均差は 712.40643 で、統計的に非常に有意な (P<0.001) 差があり、p 値は 0.00098 でした)。P 値 0.451211。 ＰＵＩと非活性化の間の平均差は７１２．４０６４３であり、大きな着座性差を示した（Ｐ＜０．００１、ｐ値は０．０００９８）。プイ Средняя разница между PUI инактивацией составила 712,40643, что свидетельствует о высокой статистической значимост и разницы (P<0,001、p-значение 0,00098)。 ＰＵＩと不活化との間の平均差は７１２．４０６４３であり、この差の統計的有意性が高いことを示した（Ｐ＜０．００１、ｐ値０．０００９８）。レーザー光を使用しても活性化するかしないかに差はなかった(P>0.05) P値は0.451211であった。レーザー光を使用しても活性化するかしないかに差はなかった(P>0.05) P値は0.451211であった。 Статистически значимой разницы (P>0,05) с лазерной активацией или без нее было со значением P 0,451211. レーザー活性化の有無にかかわらず統計的に有意な差はなく（P>0.05）、P 値は 0.451211 でした。レーザー活性化時に残った破片の平均表面積は 2683.21 µm2 でした。活性化されていない残りの断片の平均表面積は 2407.72 µm2 でした。レーザー活性化または活性化なしと比較して、PUI は統計的に小さい平均チップ表面積、つまり最高の洗浄力を持っていました。
ナノエマルジョンリンスの平均洗浄力は 2001.47 μm2、リンス助剤の平均粒径は 2609.56 μm でした。ナノエマルション洗浄と通常の粒子サイズ洗浄の間の平均差は 608.09 µm2 でした。 ナノエマルジョン洗浄剤と通常の粒子サイズの洗浄剤の間には、統計的に非常に有意な (P<0.001) 差があり (P 値 0.00052) ました。 ナノエマルジョン洗浄剤と通常の粒子サイズの洗浄剤の間には、統計的に非常に有意な (P<0.001) 差があり (P 値 0.00052) ました。 Между ирригационными растворами наноэмульсии ирригационными растворами с нормальным размером частиц была статист ически высокозначимая (P<0,001) разница (значение P 0,00052)。 ナノエマルション洗浄剤と通常の粒子洗浄剤の間には、統計的に非常に有意な (P<0.001) 差 (P 値 0.00052) がありました。コンパウンド乳液洗浄剤と通常の粒子径洗浄剤との間には、理論上顕著な差がある（Ｐ＜０．００１）（Ｐ値０．０００５２）。 P<0.001）（P値0.00052）。 Между ополаскивателем с наноэмульсией и ополаскивателем с нормальным размером частиц была статистически очень зна чимая разница (P<0,0001) (значение P 0,00052)。 ナノエマルジョンリンスと通常の粒径リンスとの間には、統計的に非常に有意な差（P<0.0001）があった（P値0.00052）。通常の粒子サイズの材料と比較して、ナノエマルションには統計的に非常に有意な差があり、残留デブリの平均表面積が小さいことが示されています。つまり、図 3 に示すように、ナノエマルション材料の方が優れた洗浄能力を持っています。
残りの Chx.HCl 1.6% フラグメントの平均表面積は 2320.36 μm2 であり、Chx.HCl 2% の平均表面積は 2949.85 μm2 でした。 高濃度のナノエマルジョン洗浄剤と通常の粒子サイズの洗浄剤の間には、統計的に非常に有意な (P<0.001) 差がありました (P 値 0.00000)。 高濃度のナノエマルジョン洗浄剤と通常の粒子サイズの洗浄剤との間には、統計的に非常に有意な差 (P<0.001) がありました (P 値 0.00000)。 Имелась статистически высокодостоверная (P<0,001) разница между более высокой концентрацией наноэмульсионных ирриг ционных средств ирригационными растворами с нормальным размером частиц (значение P 0,00000)。 高濃度のナノエマルジョン洗浄剤と通常の粒子サイズの洗浄剤との間には統計的に有意な差（P<0.001）がありました（P 値 0.00000）。より高濃度のカーボン乳液洗浄剤と通常の粒子径の洗浄剤との間には、理論上顕著な差がある（Ｐ＜０．００１）（Ｐ値０．０００００）。より高濃度のコメ乳液洗浄剤と通常の粒子径の洗浄剤との間には、理論上高い差が存在する（P<0.001）（P000） Наблюдалась статистически высокозначимая разница (P <0,001) между более высокими концентрациями ополаскивателя с на ноэмульсией и ополаскивателем с нормальным размером частиц (значение P 0,00000)。 高濃度のナノエマルジョンリンスと通常の粒子サイズのリンスとの間には、統計的に非常に有意な差（P < 0.001）がありました（P 値 0.00000）。ナノエマルジョン洗浄剤の濃度は通常の粒子サイズの洗浄剤の濃度よりも低かったが、この低い濃度は破片の除去において著しく効果的であり、根管の洗浄においてより効果的であった。
PUI は、他の活性化方法と比較した場合、統計的に高い有意差 (p<0.001) がありました。 PUI は、他の活性化方法と比較した場合、統計的に高い有意差 (p<0.001) がありました。 PUI имел статистически высокую значимую разницу (p<0,001) по сравнению с другими методами активации. PUI には、他の活性化方法と比較して統計的に有意な差がありました (p<0.001)。他の活性化方法と比較して、ＰＵＩには、理論上の差異がある（ｐ＜０．００１）。 他の活性化方法と比較して、PUI には統計的に有意な差があります (p<0.001)。 PUI は、 отличался (p<0,001) は、 другими методами активации を表示します。 PUI は、他の活性化方法と比較して統計的に有意な差がありました (p<0.001)。PUIの活性化中、残留表面破片の平均面積は1695.31μm2でした。 PUI とレーザーの平均差は 987.89929 で、(p 値 0.00000) と非常に統計的に有意な差 (P<0.001) を示しました。PUI と活性化なしの平均差は 712.40643 で、(p 値 0.00098) との非常に統計的に有意な (P<0.001) 差を示しました。 (P 値 0.451211)。 PUI と Laser の間の平均差は 987.89929 で、(p 値 0.00000) と統計的に非常に有意な (P<0.001) 差を示しました。ＰＵＩと活性化なしとの間の平均差は７１２．４０６４３であり、（ｐ値０．０００９８）との統計的に非常に有意な（Ｐ＜０．００１）差を示した。レーザー活性化の使用または非活性化のいずれを使用しても、統計的に有意な差はありませんでした (P>0.05) (P 値 0.451211)。 Средняя разница между PUI и лазером составила 987,89929, демонстрируя высокостатистически значимую (P<0,001) разницу с (p-значение 0,00000)。 PUI とレーザー間の平均差は 987.89929 で、統計的に非常に有意な (P<0.001) 差 (p 値 0.00000) を示しています。 - значение 0,00098).Использование лазерной активации или отсутствие активации не имело статистически значимой разни цы (P>0,05) с (P-значение 0,451211)。 - 値 0.00098)。レーザー活性化の使用または非活性化には、(P 値 0.451211) と統計的に有意な差 (P>0.05) がありました。 ＰＵＩとレーザーの間の平均差は９８７．８９９２９であり、（ｐ値０．０００００）の差は高度な理論的意義を有する（Ｐ＜０．００１）。 PUI とレーザー間の平均差は 987.89929 であり、その差 (p ‼0.00000) は高い統計的有意性を持っています (P<0.001)。 Средняя разница между PUI и лазером составила 987,89929, что было высоко статистически значимым (P<0,001) с (значение p) 0,00000)。 PUI とレーザー間の平均差は 987.89929 で、統計的に非常に有意でした (P<0.001) (p 値 0.00000)。 ＰＵＩと非活性化の間の平均差は７１２．４０６４３であり、（ｐ）との差は高度な理論性を有する（Ｐ＜０．００１）−値０．０００９８。 PUI と非アクティブの間の平均差は 712.40643 で、差 (p) は統計的に高い有意性 (P<0.001) を持っています (値 0.00098)。 Средняя разница между PUI инактивацией составила 712,40643, что было высоко статистически значимым с разницей (p) ( P<0,001 — 0,00098)。 PUI と不活化の間の平均差は 712.40643 で、差 (p) で統計的に非常に有意でした (P<0.001 – 値 0.00098)。レーザーを使用しても活性化または非活性化(P>0.05)と(P値0.451211)に差はなかった。 レーザー活性化と非活性化の間に有意な統計的差異はありませんでした (P>0.05) および (P ‼0.451211)。 Не было статистически значимой разницы (P>0,05) по сравнению с (значение P 0,451211) с лазерной активацией или без неえ。 レーザー活性化の有無に比べて、統計的に有意な差はありませんでした (P>0.05) (P 値 0.451211)。レーザー活性化中に残った破片の平均表面積は 2683.21 μm2 でした。活性化されていない残りの断片の平均表面積は 2407.72 μm2 でした。レーザー活性化または非活性化と比較して、PUI はチップの平均表面積が統計的に小さく、つまり洗浄能力が優れています。
デブリ除去に対するナノエマルションリンスの平均効果は、通常の粒子サイズのリンスの効果よりも統計的に有意に高かった。Chx.HCl 1.6%、PUI 1938.77 µm2、レーザー使用時 2510.96 µm2。活性化なしの場合、平均値は 2511.34 µm2 です。2% Chx.HCl を使用し、レーザーで活性化した場合、結果は最悪で、破片の量は最大でした。0.75% Chx.HCl が活性化されなかった場合にも、同じ結果が得られました。明らかに、ナノエマルジョン中のリンス助剤の濃度を高くすると、最良の結果が得られました。図 3A ～ F)) に示すように、PUI は洗浄剤の活性化と破片の洗い流しに最も効果的でした。
表 2 に示すように、Chx.HCl ナノエマルションは、生存微生物数の点で通常のサイズの粒子よりも優れた性能を発揮し、サイズ、フラッシング剤の濃度、活性化方法のパラメーターに従って製剤の浸透および洗浄効果と良好な相関関係を示しました。
高濃度のすすぎ剤を使用すると、細菌を完全に死滅させることができます。PUI を活性化しても、0.75% Chx.HCl の抗菌効果は最悪でした。レーザーの活性化は、ナノエマルジョンのすすぎに悪影響を及ぼします。これまでのすべての結果からわかるように、レーザーの使用により Chx.HCl 0.75% ナノエマルジョンの効率が低下します。ナノ Chx.HCl 0.75% の CFU は 195 であり、これは非常に高い値であり、この濃度の試薬がレーザー活性化に匹敵することを示しています。ダイオードレーザーは光熱性であるため、光または熱によりナノエマルジョンの抗菌効果が失われる可能性があります。高濃度の結果、細菌は完全に破壊されます。ナノ Chx.HCl 1.6% は、レーザー活性化の存在下で負の細菌増殖を示しました。これは、レーザーがナノ Chx.HCl 1.6% の抗菌能力に影響を与えなかったことを意味します。ナノエマルジョン材料の濃度が高いほど抗菌効果が優れていると結論付けることができます。
この研究では、2 つの異なる油、2 つの界面活性剤および共界面活性剤を使用して Chx.HCl ナノエマルジョンを調製し、粒子サイズが小さく、乳化時間が短く、溶解速度が高い最適な配合物 (F6) を選択しました。さらに、(F6) の熱力学的/物理的安定性がテストされました。濃度1.6%のChx.HClナノエマルションでは、洗浄液としての従来のChx.HClと比較して、Chx.HClナノエマルションが象牙細管内で最高の透過性を示し、活性化方法としてのPUIは洗浄能力を有していた。さらに、Chx.HCl ナノエマルジョンの抗菌研究では、細菌が完全に除去されることが示されました。結果はこれを裏付けました。Chx.HCl ナノエマルションは、有望な洗浄液として考えられます。
ミスル科学技術大学研究室のスタッフの皆様の多大なるご支援に心より感謝申し上げます。