გმადლობთ Nature.com-ის მონახულებისთვის.ბრაუზერის ვერსიას, რომელსაც იყენებთ, აქვს შეზღუდული CSS მხარდაჭერა.საუკეთესო გამოცდილებისთვის, გირჩევთ გამოიყენოთ განახლებული ბრაუზერი (ან გამორთოთ თავსებადობის რეჟიმი Internet Explorer-ში).იმავდროულად, მუდმივი მხარდაჭერის უზრუნველსაყოფად, ჩვენ გამოვიყვანთ საიტს სტილის და JavaScript-ის გარეშე.
უკონტროლო სისხლდენა სიკვდილის ერთ-ერთი მთავარი მიზეზია.სწრაფი ჰემოსტაზის მიღწევა უზრუნველყოფს სუბიექტის გადარჩენას, როგორც პირველადი დახმარება საბრძოლო, საგზაო შემთხვევებისა და სიკვდილის შემცირების ოპერაციების დროს.ნანოფოროვანი ბოჭკოებით გამაგრებული კომპოზიციური ხარაჩო (NFRCS) მიღებული მარტივი ჰემოსტატიკური ფირის ფორმირების კომპოზიციიდან (HFFC), როგორც უწყვეტი ფაზა, შეიძლება გამოიწვიოს და გააძლიეროს ჰემოსტაზი.NFRCS-ის განვითარება ეფუძნება ჭრიჭინას ფრთის დიზაინს.ჭრიჭინა ფრთის სტრუქტურა შედგება განივი და გრძივი ფრთებისგან, ხოლო ფრთების გარსები ერთმანეთთან დაკავშირებულია მიკროსტრუქტურის მთლიანობის შესანარჩუნებლად.HFFC ერთნაირად ფარავს ბოჭკოს ზედაპირს ნანომეტრის სისქის ფირით და აკავშირებს შემთხვევით განაწილებულ ბამბის სისქეს (Ct) (დისპერსიული ფაზა) ნანოფოროვანი სტრუქტურის შესაქმნელად.უწყვეტი და დისპერსიული ფაზების კომბინაცია ათჯერ ამცირებს პროდუქტის ღირებულებას კომერციულად ხელმისაწვდომ პროდუქტებთან შედარებით.მოდიფიცირებული NFRCS (ტამპონები ან სამაჯურები) შეიძლება გამოყენებულ იქნას სხვადასხვა ბიოსამედიცინო აპლიკაციებში.In vivo კვლევებმა დაასკვნეს, რომ განვითარებული Cp NFRCS იწვევს და აძლიერებს კოაგულაციის პროცესს განაცხადის ადგილზე.NFRCS-ს შეუძლია მიკროგარემოს მოდულირება და იმოქმედოს უჯრედულ დონეზე მისი ნანოფოროვანი სტრუქტურის გამო, რაც იწვევს ჭრილობის უკეთეს შეხორცებას ამოკვეთის ჭრილობის მოდელში.
საბრძოლო, ინტრაოპერაციულ და გადაუდებელ სიტუაციებში უკონტროლო სისხლდენამ შეიძლება სერიოზული საფრთხე შეუქმნას დაჭრილთა სიცოცხლეს1.ეს პირობები შემდგომში იწვევს პერიფერიული სისხლძარღვთა წინააღმდეგობის საერთო ზრდას, რაც იწვევს ჰემორაგიულ შოკს.ოპერაციის დროს და მის შემდეგ სისხლდენის კონტროლის შესაბამისი ზომები განიხილება პოტენციურად სიცოცხლისთვის საშიში2,3.დიდი სისხლძარღვების დაზიანება იწვევს სისხლის მასიურ დაკარგვას, რის შედეგადაც სიკვდილიანობა ≤ 50% ბრძოლაში და 31% ოპერაციის დროს1.სისხლის მასიური დაკარგვა იწვევს სხეულის მოცულობის შემცირებას, რაც ამცირებს გულის გამომუშავებას.მთლიანი პერიფერიული სისხლძარღვთა წინააღმდეგობის მატება და მიკროცირკულაციის პროგრესირებადი დარღვევა იწვევს სიცოცხლის მხარდამჭერ ორგანოებში ჰიპოქსიას.ჰემორაგიული შოკი შეიძლება მოხდეს, თუ მდგომარეობა გაგრძელდება ეფექტური ჩარევის გარეშე1,4,5.სხვა გართულებები მოიცავს ჰიპოთერმიის და მეტაბოლური აციდოზის პროგრესირებას, ასევე კოაგულაციის დარღვევას, რომელიც აფერხებს კოაგულაციის პროცესს.მძიმე ჰემორაგიული შოკი დაკავშირებულია სიკვდილის უფრო მაღალ რისკთან6,7,8.III ხარისხის (პროგრესული) შოკის დროს სისხლის გადასხმა აუცილებელია პაციენტის გადარჩენისთვის ინტრაოპერაციული და პოსტოპერაციული ავადობისა და სიკვდილიანობის დროს.სიცოცხლისთვის საშიში ყველა ზემოაღნიშნული სიტუაციის დასაძლევად, ჩვენ შევიმუშავეთ ნანოფოროვანი ბოჭკოვანი გამაგრებული კომპოზიციური ხარაჩო (NFRCS), რომელიც იყენებს პოლიმერის მინიმალურ კონცენტრაციას (0.5%) წყალში ხსნადი ჰემოსტატიკური პოლიმერების კომბინაციის გამოყენებით.
ბოჭკოვანი გამაგრების გამოყენებით, შესაძლებელია ეკონომიური პროდუქტების შემუშავება.შემთხვევით განლაგებული ბოჭკოები წააგავს ჭრიჭინას ფრთის სტრუქტურას, რომელიც დაბალანსებულია ფრთებზე ჰორიზონტალური და ვერტიკალური ზოლებით.ფრთის განივი და გრძივი ვენები ურთიერთობენ ფრთის მემბრანასთან (სურ. 1).NFRCS შედგება გამაგრებული Ct-სგან, როგორც ხარაჩოების სისტემა უკეთესი ფიზიკური და მექანიკური სიძლიერით (სურათი 1).ხელმისაწვდომობისა და ოსტატობის გამო, ქირურგები ურჩევნიათ გამოიყენონ ბამბის ძაფის ლიანდაგები (Ct) ოპერაციებისა და სახვევების დროს. აქედან გამომდინარე, მისი მრავალჯერადი სარგებლობის გათვალისწინებით, მათ შორის > 90% კრისტალური ცელულოზის ჩათვლით (ხელს უწყობს ჰემოსტატიკური აქტივობის გაძლიერებას), Ct გამოიყენებოდა როგორც NFRCS9,10 ჩონჩხის სისტემა. აქედან გამომდინარე, მისი მრავალჯერადი სარგებლობის გათვალისწინებით, მათ შორის > 90% კრისტალური ცელულოზის ჩათვლით (ხელს უწყობს ჰემოსტატიკური აქტივობის გაძლიერებას), Ct გამოიყენებოდა როგორც NFRCS9,10 ჩონჩხის სისტემა. Следовательно, учитывая его многочисленные преимущества, в том числе > 90% кристаллической целлюлозы (участвует в повышении гемостатической активности), Ct использовали в качестве скечет. ამიტომ, მისი მრავალი უპირატესობის გათვალისწინებით, მათ შორის >90% კრისტალური ცელულოზის ჩათვლით (ჩართულია ჰემოსტატიკური აქტივობის გაზრდაში), Ct გამოიყენებოდა როგორც NFRCS ჩონჩხის სისტემა9,10.因此，考虑到它的多重益处，包括> 90% 的结晶纤维素（有助于增强止觼S的结晶纤维素（有助于增强止觼9,10 წუთი.因此，考虑到它的多重益处，包括> 90%ამიტომ, მისი მრავალი უპირატესობის გათვალისწინებით, მათ შორის 90%-ზე მეტი კრისტალური ცელულოზის ჩათვლით (ხელს უწყობს ჰემოსტატიკური აქტივობის გაძლიერებას), Ct გამოიყენებოდა როგორც ხარაჩო NFRCS9,10-ისთვის.Ct იყო ზედაპირულად დაფარული (დაფიქსირდა ნანო-სქელი ფირის წარმოქმნა) და ურთიერთდაკავშირებული იყო ჰემოსტატიკური ფილმის ფორმირების კომპოზიციასთან (HFFC).HFFC მოქმედებს როგორც მატრიგელი, რომელიც უჭირავს შემთხვევით მოთავსებულ Ct-ს ერთად.შემუშავებული დიზაინი გადასცემს სტრესს დისპერსიულ ფაზაში (გამაძლიერებელი ბოჭკოები).ძნელია ნანოფოროვანი სტრუქტურების მიღება კარგი მექანიკური სიმტკიცით პოლიმერის მინიმალური კონცენტრაციის გამოყენებით.გარდა ამისა, ადვილი არ არის სხვადასხვა ფორმის მორგება სხვადასხვა ბიოსამედიცინო გამოყენებისთვის.
ნახატზე ნაჩვენებია NFRCS დიზაინის დიაგრამა, რომელიც დაფუძნებულია ჭრიჭინას ფრთის სტრუქტურაზე (A).ეს სურათი გვიჩვენებს ჭრიჭინას ფრთის სტრუქტურის შედარებით ანალოგიას (ფრთის გადამკვეთი და გრძივი ვენები ერთმანეთთან არის დაკავშირებული) და Cp NFRCS (B) განივი ფოტომიკროგრაფია.NFRCS-ის სქემატური წარმოდგენა.
NFRC-ები შეიქმნა HFFC-ის გამოყენებით, როგორც უწყვეტი ფაზის, ზემოთ აღნიშნული შეზღუდვების გადასაჭრელად.HFFC შედგება სხვადასხვა ფირის წარმომქმნელი ჰემოსტატიკური პოლიმერებისგან, მათ შორის ქიტოზანი (როგორც მთავარი ჰემოსტატიკური პოლიმერი) მეთილცელულოზასთან (MC), ჰიდროქსიპროპილ მეთილცელულოზასთან (HPMC 50 cp) და პოლივინილ სპირტით (PVA)) (125 kDa), როგორც დამხმარე პოლიმერი, რომელიც ხელს უწყობს თრომბის წარმოქმნას.ფორმირება.პოლივინილპიროლიდინის K30 (PVP K30) დამატებამ გააუმჯობესა NFRCS-ის ტენიანობის შთანთქმის უნარი.პოლიეთილენ გლიკოლი 400 (PEG 400) დაემატა პოლიმერული ჯვარედინი კავშირის გასაუმჯობესებლად შეკრულ პოლიმერულ ნარევებში.სამი განსხვავებული HFFC ჰემოსტატიკური კომპოზიცია (Cm HFFC, Ch HFFC და Cp HFFC), კერძოდ, ქიტოზანი MC-ით (Cm), ქიტოზანი HPMC-ით (Ch) და ქიტოზანი PVA-ით (Cp), გამოყენებული იყო Ct.სხვადასხვა in vitro და in vivo დახასიათების კვლევებმა დაადასტურა NFRCS-ის ჰემოსტატიკური და ჭრილობის შეხორცების აქტივობა.NFRCS-ის მიერ შემოთავაზებული კომპოზიტური მასალები შეიძლება გამოყენებულ იქნას ხარაჩოების სხვადასხვა ფორმის მოსაწყობად კონკრეტული საჭიროებების დასაკმაყოფილებლად.
გარდა ამისა, NFRCS შეიძლება შეიცვალოს, როგორც ბანდაჟი ან რულონი, რათა დაფაროს ქვედა კიდურების და სხეულის სხვა ნაწილების მთელი დაზიანების არე.კონკრეტულად კიდურის საბრძოლო დაზიანებებისთვის, შემუშავებული NFRCS დიზაინი შეიძლება შეიცვალოს ნახევრად ხელით ან სრული ფეხით (დამატებითი სურათი S11).NFRCS შეიძლება დამზადდეს მაჯის სახით ქსოვილის წებოთი, რომელიც შეიძლება გამოყენებულ იქნას სისხლდენის შესაჩერებლად მძიმე სუიციდური დაზიანებებისგან.ჩვენი მთავარი მიზანია შევიმუშაოთ NFRCS რაც შეიძლება ნაკლები პოლიმერით, რომელიც შეიძლება მიეწოდოს დიდ მოსახლეობას (სიღარიბის ზღვარს ქვემოთ) და რომელიც შეიძლება მოთავსდეს პირველადი დახმარების კომპლექტში.მარტივი, ეფექტური და ეკონომიური დიზაინით, NFRCS სარგებელს მოაქვს ადგილობრივ თემებზე და შეიძლება ჰქონდეს გლობალური გავლენა.
ჩიტოზანი (მოლეკულური წონა 80 კდა) და ამარანტი შეძენილი იქნა Merck-დან, ინდოეთი.ჰიდროქსიპროპილ მეთილცელულოზა 50 Cp, პოლიეთილენ გლიკოლი 400 და მეთილცელულოზა შეძენილია Loba Chemie Pvt-დან.შპს, მუმბაი.პოლივინილის სპირტი (მოლეკულური წონა 125 kDa) (87-90% ჰიდროლიზებული) შეძენილია National Chemicals-დან, გუჯარატი.პოლივინილპიროლიდინი K30 შეძენილი იყო Molychem-დან, მუმბაი, სტერილური ტამპონები შეძენილი იქნა Ramaraju Surgery Cotton Mills Ltd.-დან, ტამილ ნადუ, Milli Q წყლით (Direct-Q3 წყლის გამწმენდი სისტემა, Merck, ინდოეთი), როგორც გადამზიდავი.
NFRCS შეიქმნა ლიოფილიზების მეთოდის გამოყენებით11,12.ყველა HFFC კომპოზიცია (ცხრილი 1) მომზადდა მექანიკური ამრევის გამოყენებით.მოამზადეთ ქიტოზანის 0,5%-იანი ხსნარი წყალში 1% ძმარმჟავას გამოყენებით 800 ბრ/წთ უწყვეტი მორევით მექანიკურ ამრევზე.დატვირთული პოლიმერის ზუსტი წონა, რომელიც მითითებულია ცხრილში 1, დაემატა ქიტოზანის ხსნარს და ურევენ გამჭვირვალე პოლიმერული ხსნარის მიღებამდე.PVP K30 და PEG 400 დაემატა მიღებულ ნარევს ცხრილში 1-ში მითითებული რაოდენობით და აურიეთ გაგრძელდა მანამ, სანამ არ მიიღწევა გამჭვირვალე ბლანტი პოლიმერული ხსნარი.პოლიმერული ხსნარის შედეგად მიღებული აბაზანა 60 წუთის განმავლობაში ზემოქმედებით იქნა გაჟღენთილი, რათა ამოეღოთ ჩარჩენილი ჰაერის ბუშტები პოლიმერული ნარევიდან.როგორც ნაჩვენებია დამატებით სურათზე S1(b), Ct თანაბრად იყო განაწილებული 6 ჭაბურღილიანი ფირფიტის (ფორმის) თითოეულ ჭაში, რომელსაც დაემატა 5 მლ HFFC.
ექვსი ჭაბურღილის ფირფიტა 60 წუთის განმავლობაში გაჟღენთილი იყო, რათა მიღწეულიყო HFFC-ის ერთგვაროვანი დასველება და განაწილება Ct ქსელში.შემდეგ გაყინეთ ექვსი ჭაბურღილის ფირფიტა -20°C-ზე 8-12 საათის განმავლობაში.საყინულე ფირფიტები ლიოფილიზებული იყო 48 საათის განმავლობაში NFRCS-ის სხვადასხვა ფორმულირების მისაღებად.იგივე პროცედურა გამოიყენება სხვადასხვა ფორმისა და სტრუქტურის დასამზადებლად, როგორიცაა ტამპონები ან ცილინდრული ტამპონები, ან ნებისმიერი სხვა ფორმა სხვადასხვა გამოყენებისთვის.
ზუსტად აწონილი ქიტოზანი (80 kDa) (3%) იხსნება 1% ძმარმჟავაში მაგნიტური შემრევის გამოყენებით.მიღებულ ჩიტოზანის ხსნარს დაემატა 1% PEG 400 და ურევენ 30 წუთის განმავლობაში.მიღებული ხსნარი ჩაასხით კვადრატულ ან მართკუთხა ჭურჭელში და გაყინეთ -80°C-ზე 12 საათის განმავლობაში.გაყინული ნიმუშები ლიოფილიზებული იყო 48 საათის განმავლობაში ფოროვანი Cs13-ის მისაღებად.
განვითარებული NFRCS დაექვემდებარა ექსპერიმენტებს ფურიეს ტრანსფორმაციის ინფრაწითელი სპექტროსკოპიის (FTIR) გამოყენებით (Shimadzu 8400 s FTIR, ტოკიო, იაპონია) სხვა პოლიმერებთან ქიტოზანის ქიმიური თავსებადობის დასადასტურებლად14,15.ყველა შემოწმებული ნიმუშის FTIR სპექტრები (სპექტრული დიაპაზონის სიგანე 400-დან 4000 სმ-1-მდე) იქნა მიღებული 32 სკანირების შესრულებით.
სისხლის შთანთქმის სიჩქარე (BAR) ყველა ფორმულირებისთვის შეფასდა ჩენისა და სხვების მიერ აღწერილი მეთოდის გამოყენებით.16 მცირე ცვლილებებით.ყველა კომპოზიციის განვითარებული NFRK-ები გაშრეს ვაკუუმურ ღუმელში 105°C-ზე მთელი ღამის განმავლობაში ნარჩენი გამხსნელის მოსაშორებლად.30 მგ NFRCS (საწყისი ნიმუშის წონა - W0) და 30 მგ Ct (დადებითი კონტროლი) მოთავსებული იყო ცალკეულ ჭურჭელში, რომელიც შეიცავდა 3,8% ნატრიუმის ციტრატის პრემიქსს.წინასწარ განსაზღვრული დროის ინტერვალით, ანუ 5, 10, 20, 30, 40 და 60 წამში, NFRCS ამოიღეს და მათი ზედაპირები გაიწმინდა შეუწოვი სისხლისგან, ნიმუშების Ct-ზე დაყენებით 30 წამის განმავლობაში.სისხლის საბოლოო წონა, რომელიც შეიწოვება NFRCS 16-ით, ჩათვლილი იყო (W1) დროის თითოეულ მომენტში.გამოთვალეთ BAR პროცენტი შემდეგი ფორმულის გამოყენებით:
სისხლის შედედების დრო (BCT) განისაზღვრა, როგორც მოხსენებულია Wang et al.17 .მთლიანი სისხლის (ვირთხის სისხლი წინასწარ შერეული 3.8% ნატრიუმის ციტრატით) შედედებისთვის საჭირო დრო NFRCS-ის თანდასწრებით გამოთვლილი იყო, როგორც ტესტის ნიმუშის BCT.სხვადასხვა NFRCS კომპონენტები (30 მგ) მოთავსებული იყო 10 მლ ხრახნიანი თავსახურის ფლაკონებში და ინკუბირებული იყო 37°C-ზე.სისხლი (0.5 მლ) დაემატა ფლაკონს და 0.3 მლ 0.2 M CaCl2 დაემატა სისხლის კოაგულაციის გასააქტიურებლად.დაბოლოს, ფლაკონი გადაატრიალეთ ყოველ 15 წამში (180°-მდე), სანამ არ წარმოიქმნება მყარი შედედება.ნიმუშის BCT შეფასებულია ატრიბუტების რაოდენობის მიხედვით17,18.BCT-ზე დაყრდნობით, შეირჩა ორი ოპტიმალური კომპოზიცია NFRCS Cm, Ch და Cp-დან შემდგომი დახასიათების კვლევებისთვის.
Ch NFRCS და Cp NFRCS კომპოზიციების BCT განისაზღვრა Li et al-ის მიერ აღწერილი მეთოდის განხორციელებით.19 .მოათავსეთ 15 x 15 მმ2 Ch NFRCS, Cp NFRCS და Cs (პოზიტიური კონტროლი) ცალკე პეტრის ჭურჭელში (37 °C).3,8% ნატრიუმის ციტრატის შემცველი სისხლი შერეული იყო 0,2 M CaCl2-ით 10:1 მოცულობითი თანაფარდობით, რათა დაიწყოს სისხლის შედედების პროცესი.20 μl 0.2 M CaCl2 ვირთხების სისხლის ნაზავი დაიტანეს ნიმუშის ზედაპირზე და მოათავსეს ცარიელ პეტრის ჭურჭელში.კონტროლი იყო სისხლი ჩაასხით ცარიელ პეტრის ჭურჭელში Ct-ის გარეშე.0, 3 და 5 წუთის ფიქსირებული ინტერვალებით, შეწყვიტეთ შედედება 10 მლ დეიონიზებული (DI) წყლის დამატებით ჭურჭლის შემცველ ნიმუშში თრომბის დარღვევის გარეშე.არაკოაგულირებული ერითროციტები (ერითროციტები) განიცდიან ჰემოლიზს დეიონირებული წყლის თანდასწრებით და გამოყოფენ ჰემოგლობინს.ჰემოგლობინი დროის სხვადასხვა წერტილში (HA(t)) გაზომილი იყო 540 ნმ (λmax ჰემოგლობინი) UV-Vis სპექტროფოტომეტრის გამოყენებით.ჰემოგლობინის (AH(0)) აბსოლუტური აბსორბცია 0 წთ-ში 20 μl სისხლის 10 მლ დეიონიზებულ წყალში მიღებულ იქნა საცნობარო სტანდარტად.შედედებული სისხლის ფარდობითი ჰემოგლობინის ათვისება (RHA) გამოთვლილი იყო HA(t)/HA(0) თანაფარდობიდან სისხლის ერთი და იგივე ჯგუფის გამოყენებით.
ტექსტურის ანალიზატორის გამოყენებით (Texture Pro CT V1.3 Build 15, Brookfield, USA), განისაზღვრა NFRK-ის წებოვანი თვისებები დაზიანებულ ქსოვილზე.ღია ქვედაბოლო ცილინდრული ჭურჭელი დაჭერით ღორის კანს შიგნიდან (ცხიმის ფენის გარეშე).ნიმუშები (Ch NFRCS და Cp NFRCS) გამოიყენეს კანულის მეშვეობით ცილინდრულ ფორმებში, რათა შეექმნათ ადჰეზია ღორის კანზე.ოთახის ტემპერატურაზე (RT) (25°C) 3 წუთიანი ინკუბაციის შემდეგ, NFRCS წებოვანი სიძლიერე დაფიქსირდა მუდმივი სიჩქარით 0,5 მმ/წმ.
ქირურგიული დალუქვის მთავარი მახასიათებელია სისხლის შედედების გაზრდა და სისხლის დაკარგვის შემცირება.უდანაკარგო კოაგულაცია NFRCS-ში შეფასდა ადრე გამოქვეყნებული მეთოდის გამოყენებით მცირედი ცვლილებებით 19 .გააკეთეთ მიკროცენტრიფუგის მილი (2 მლ) (შიდა დიამეტრი 10 მმ) ცენტრიფუგის მილის ერთ მხარეს 8 × 5 მმ2 ნახვრეტით (ასახავს ღია ჭრილობას).NFRCS გამოიყენება გახსნის დახურვისთვის და ლენტი გამოიყენება გარე კიდეების დალუქვისთვის.დაამატეთ 20 μl 0.2 M CaCl2 მიკროცენტრიფუგის მილში, რომელიც შეიცავს 3.8% ნატრიუმის ციტრატის პრემიქსს.10 წუთის შემდეგ, მიკროცენტრიფუგის მილები ამოიღეს ჭურჭლიდან და განისაზღვრა ჭურჭლის მასის ზრდა NFRK-დან სისხლის გადინების გამო (n = 3).სისხლის დაკარგვა Ch NFRCS და Cp NFRCS შედარებული იყო Cs-თან.
NFRCS-ის სველი მთლიანობა განისაზღვრა მიშრასა და ჩაუდჰარის21-ის მიერ აღწერილი მეთოდის საფუძველზე მცირე ცვლილებებით.მოათავსეთ NFRCS 100 მლ ერლენმაიერის კოლბაში 50 მლ წყალთან ერთად და აურიეთ 60 წამის განმავლობაში ზემოდან ჩამოყალიბების გარეშე.ნიმუშების ვიზუალური შემოწმება და ფიზიკური მთლიანობის პრიორიტეტიზაცია შეგროვების საფუძველზე.
HFFC-ის შეკავშირების სიძლიერე Ct-თან შესწავლილი იყო ადრე გამოქვეყნებული მეთოდების გამოყენებით მცირე ცვლილებებით.ზედაპირის საფარის მთლიანობა შეფასდა NFRK აკუსტიკური ტალღების (გარე სტიმული) გამოვლენით milliQ წყლის (Ct) თანდასწრებით.განვითარებული NFRCS Ch NFRCS და Cp NFRCS მოთავსებული იყო წყლით სავსე ჭიქით და სონიკირებული იყო 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 და 30 წუთის განმავლობაში, შესაბამისად.გაშრობის შემდეგ, პროცენტული სხვაობა NFRCS-ის საწყის და საბოლოო წონას შორის გამოყენებული იქნა მასალის პროცენტული დანაკარგის (HFFC) გამოსათვლელად.In vitro BCT შემდგომში მხარს უჭერდა ზედაპირული მასალების შეკვრის სიმტკიცეს ან დაკარგვას.HFFC Ct-თან შეკავშირების ეფექტურობა უზრუნველყოფს სისხლის კოაგულაციას და ელასტიურ საფარს Ct22-ის ზედაპირზე.
განვითარებული NFRCS-ის ჰომოგენურობა განისაზღვრა ნიმუშების BCT-ით (30 მგ), რომლებიც აღებული იყო NFRCS-ის შემთხვევით შერჩეული ზოგადი უბნებიდან.დაიცავით ადრე ნახსენები BCT პროცედურა NFRCS შესაბამისობის დასადგენად.ხუთივე ნიმუშს შორის სიახლოვე უზრუნველყოფს ზედაპირის ერთგვაროვან დაფარვას და HFFC დეპონირებას Ct ბადეში.
ნომინალური სისხლის კონტაქტის არე (NBCA) განისაზღვრა, როგორც ადრე იყო მოხსენებული გარკვეული ცვლილებებით.სისხლის კოაგულაცია 20 μl სისხლის დაჭერით Ct, Ch NFRCS, Cp NFRCS და Cs ორ ზედაპირს შორის.1 საათის შემდეგ სტენტის ორი ნაწილი გამოეყო და ხელით გაზომეს თრომბის არე.სამი გამეორების საშუალო მნიშვნელობა ჩაითვალა NBCA NFRCS19.
დინამიური ორთქლის სორბციის (DVS) ანალიზი გამოყენებული იყო NFRCS-ის ეფექტურობის შესაფასებლად წყლის გარე გარემოდან ან დაზიანების ადგილიდან, რომელიც პასუხისმგებელია კოაგულაციის დაწყებაზე.DVS აფასებს ან აღრიცხავს ორთქლის შეწოვას და დანაკარგს ნიმუშში გრავიმეტრულად, ულტრამგრძნობიარე ბალანსის გამოყენებით ±0.1 მკგ მასის გარჩევადობით.ნაწილობრივი ორთქლის წნევა (ფარდობითი ტენიანობა) წარმოიქმნება ნიმუშის გარშემო მასის ნაკადის ელექტრონული კონტროლერის მიერ გაჯერებული და მშრალი გადამზიდავი აირების შერევით. ევროპული ფარმაკოპეის გაიდლაინების მიხედვით, ნიმუშების მიერ ტენიანობის შეწოვის პროცენტული მაჩვენებლის მიხედვით, ნიმუშები დაყოფილი იყო 4 კატეგორიად (0–0,012% w/w– არაჰიგროსკოპიული, 0,2–2% w/w ოდნავ ჰიგიროსკოპული, 2–15% ზომიერად ჰიგიროსკოპული) და >35% ჰიგიროსკოპიული1. ევროპული ფარმაკოპეის გაიდლაინების მიხედვით, ნიმუშების მიერ ტენიანობის შთანთქმის პროცენტული მაჩვენებლის მიხედვით, ნიმუშები დაყოფილი იყო 4 კატეგორიად (0–0,012% w/w– არაჰიგროსკოპული, 0,2–2% w/w ოდნავ ჰიგიროსკოპული, 2–15% ზომიერად ჰიგიროსკოპული) და >35% ჰიგიროსკოპიული1.ევროპული ფარმაკოპეის რეკომენდაციების შესაბამისად, ნიმუშების მიერ ტენის შთანთქმის პროცენტიდან გამომდინარე, ნიმუშები იყოფა 4 კატეგორიად (0–0,012% w/w – არაჰიგროსკოპიული, 0,2–2% w/w ოდნავ ჰიგიროსკოპული, 2– თხუთმეტი %).% ზომიერნო გიგროსკოპიური и > 15% очень гигроскопичен)23. % ზომიერად ჰიგიროსკოპიული და > 15% ძალიან ჰიგიროსკოპიული)23.根据欧洲药典指南，根据样品吸收水分的百分比，样品分为4 汻（0-2-2% 遞-0.012% w. /w 轻微吸湿性、2-15 % 适度吸湿，> 15% 非常吸湿）23.根据 欧洲 药典 指南 ， 根据 吸收 水分 的 百分比 样品 分为 分为 分-为 分为 爆-0︺ 分为 分-0︺%w.湿 性 、 、 、 、 0.2-2% w/w 轻微 、 2-15% 适度 吸湿 ，> 15% 非常吸湿）23.ევროპული ფარმაკოპეის რეკომენდაციების შესაბამისად, ნიმუშები იყოფა 4 კლასად, ნიმუშის მიერ შთანთქმული ტენიანობის პროცენტის მიხედვით (0-0,012% წონით – არაჰიგროსკოპული, 0,2-2% წონით ოდნავ ჰიგიროსკოპული, 2-15% წონით).% ზომიერნო გიგროსკოპიური, > 15 % очень гигроскопичен) 23. % ზომიერად ჰიგიროსკოპიული, > 15% ძალიან ჰიგიროსკოპიული) 23.NFCS X NFCS და TsN NFCS-ის ჰიგიროსკოპიული ეფექტურობა განისაზღვრა ანალიზატორზე DVS TA TGA Q5000 SA.ამ პროცესის დროს მიღებული იყო მუშაობის დრო, ფარდობითი ტენიანობა (RH) და ნიმუშის წონა რეალურ დროში 25°C24-ზე.ტენიანობის შემცველობა გამოითვლება ზუსტი NFRCS მასის ანალიზით შემდეგი განტოლების გამოყენებით:
MC არის NFRCS ტენიანობა.მ1 - არასტეროიდული ანთების საწინააღმდეგო საშუალებების მშრალი წონა.m2 არის რეალურ დროში NFRCS მასა მოცემულ RH-ზე.
მთლიანი ზედაპირის ფართობი შეფასდა თხევადი აზოტით აზოტის ადსორბციის ექსპერიმენტის გამოყენებით, ნიმუშების დაცლის შემდეგ 25 °C ტემპერატურაზე 10 საათის განმავლობაში (< 7 × 10-3 Torr). მთლიანი ზედაპირის ფართობი შეფასდა თხევადი აზოტით აზოტის ადსორბციის ექსპერიმენტის გამოყენებით, ნიმუშების დაცლის შემდეგ 25 °C ტემპერატურაზე 10 საათის განმავლობაში (< 7 × 10-3 Torr). ცალსახა ფასეულობების შეფასების ეფექტურობა ზედმიწევნით ზემოქმედების ქვეშ მყოფი აზოტომის შემდეგ 25 °С 10 ჩ-ზე (< 7 × 10–3 ტორ). მთლიანი ზედაპირის ფართობი შეფასდა თხევადი აზოტით აზოტის ადსორბციის ექსპერიმენტის გამოყენებით მას შემდეგ, რაც ნიმუშები დაიცალა 25°C-ზე 10 საათის განმავლობაში (< 7 × 10-3 Torr).在25°C 清空样品10 小时（< 7 × 10-3 Torr）后，使用液氮的氮吸附实靌估计总表+25°C მაღალი სიზუსტით შეფასების შეფასება 25°C ტემპერატურაზე 10 საათის განმავლობაში (< 7 × 10-3 ცელსიუსით). მთლიანი ზედაპირის ფართობი შეფასდა აზოტის ადსორბციის ექსპერიმენტების გამოყენებით თხევადი აზოტით ნიმუშების დაცლის შემდეგ 10 საათის განმავლობაში 25°C ტემპერატურაზე (< 7 x 10-3 torr).მთლიანი ზედაპირის ფართობი, ფორების მოცულობა და NFRCS ფორების ზომა განისაზღვრა Quantachrome-ით NOVA 1000e-დან, ავსტრია RS 232 პროგრამული უზრუნველყოფის გამოყენებით.
მოამზადეთ 5% ერითროციტები (ფიზიოლოგიური, როგორც გამხსნელი) მთლიანი სისხლიდან.შემდეგ გადაიტანეთ HFFC-ის ალიკვოტი (0,25 მლ) 96 ჭაბურღილის ფირფიტაზე და 5% RBC მასაზე (0,1 მლ).ნარევი 37°C-ზე 40 წუთის განმავლობაში ინკუბაცია.სისხლის წითელი უჯრედებისა და შრატის ნარევი დადებით კონტროლად განიხილებოდა, ხოლო ფიზიოლოგიური ხსნარისა და სისხლის წითელი უჯრედების ნარევი უარყოფით კონტროლად.ჰემაგლუტინაცია განისაზღვრა სტაჯიცკის სკალის მიხედვით.შემოთავაზებული სასწორები შემდეგია: + + + + მკვრივი მარცვლოვანი აგრეგატები;+ + + გლუვი ქვედა ბალიშები მოხრილი კიდეებით;+ + გლუვი ქვედა ბალიშები დახეული კიდეებით;+ ვიწრო წითელი რგოლები გლუვი ბალიშების კიდეების გარშემო;– (უარყოფითი) დისკრეტული წითელი ღილაკი 12 ქვედა ჭაბურღილის ცენტრში.
NFRCS-ის ჰემოთავსებადობა შესწავლილი იქნა სტანდარტიზაციის საერთაშორისო ორგანიზაციის (ISO) მეთოდის მიხედვით (ISO10993-4, 1999)26,27.სინგჰის და სხვების მიერ აღწერილი გრავიმეტრული მეთოდი.მცირე ცვლილებები განხორციელდა თრომბის წარმოქმნის შესაფასებლად NFRCS-ის თანდასწრებით ან ზედაპირზე.500 მგ Cs, Ch NFRCS და Cp NFRCS ინკუბირებული იყო ფოსფატის ბუფერულ ხსნარში (PBS) 24 საათის განმავლობაში 37°C-ზე.24 საათის შემდეგ, PBS ამოიღეს და NFRCS დამუშავდა 2 მლ სისხლით, რომელიც შეიცავდა 3.8% ნატრიუმის ციტრატს.NFRCS-ის ზედაპირზე, დაამატეთ 0,04 მლ 0,1 M CaCl2 ინკუბირებულ ნიმუშებს.45 წუთის შემდეგ კოაგულაციის შესაჩერებლად დაემატა 5 მლ გამოხდილი წყალი.NFRK-ის ზედაპირზე შედედებული სისხლი დამუშავდა 36-38% ფორმალდეჰიდის ხსნარით.ფორმალდეჰიდით დაფიქსირებული თრომბები გაშრეს და აიწონეს.თრომბოზის პროცენტული მაჩვენებელი შეფასდა მინის წონის და სინჯის გარეშე (უარყოფითი კონტროლი) და სისხლის მინის (დადებითი კონტროლი) წონის გამოთვლით.
როგორც თავდაპირველი დადასტურება, ნიმუშები ვიზუალიზებული იყო ოპტიკური მიკროსკოპის ქვეშ, რათა გაეგოთ HFFC ზედაპირის საფარის, Ct ურთიერთდაკავშირებული და Ct ქსელის ფორების ფორმირების უნარი.Ch და Cp-ის თხელი სექციები NFRCS-დან მოჭრილი იყო სკალპელის პირით.მიღებული მონაკვეთი მოათავსეს შუშის სლაიდზე, გადაფარეს გადასაფარებლით და კიდეები დააფიქსირეს წებოთი.მომზადებული სლაიდები დაათვალიერეს ოპტიკური მიკროსკოპის ქვეშ და გადაიღეს ფოტოები სხვადასხვა გადიდებით.
პოლიმერის დეპონირება Ct ქსელებში ვიზუალურად გამოიყურებოდა ფლუორესცენტული მიკროსკოპის გამოყენებით რაისისა და სხვების მიერ აღწერილი მეთოდის საფუძველზე. ფორმულირებისთვის გამოყენებული HFFC შემადგენლობა შერეული იყო ფლუორესცენტურ საღებავთან (ამარანტი) და NFRCS (Ch & Cp) მომზადდა ზემოთ აღნიშნული მეთოდის მიხედვით. ფორმულირებისთვის გამოყენებული HFFC შემადგენლობა შერეული იყო ფლუორესცენტურ საღებავთან (ამარანტი) და NFRCS (Ch & Cp) მომზადდა ზემოთ აღნიშნული მეთოდის მიხედვით.ფორმულირებისთვის გამოყენებული HFFC შემადგენლობა შერეული იყო ფლუორესცენტურ საღებავთან (ამარანტი) და მიღებული იქნა NFRCS (Ch და Cp) ზემოთ აღნიშნული მეთოდის მიხედვით.将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的或C将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的或Cფორმულირებაში გამოყენებული HFFC შემადგენლობა შერეული იყო ფლუორესცენტურ საღებავთან (Amaranth) და მიიღო NFRCS (Ch და Cp), როგორც ზემოთ აღინიშნა.მიღებული ნიმუშებიდან ამოჭრეს NFRK-ის თხელი სექციები, მოათავსეს შუშის სლაიდებზე და გადააფარეს საფარის შლიფებით.დააკვირდით მომზადებულ სლაიდებს ფლუორესცენტური მიკროსკოპის ქვეშ მწვანე ფილტრის გამოყენებით (310-380 ნმ).სურათები გადაღებულია 4x გადიდებით, რათა გავიგოთ Ct ურთიერთობები და ჭარბი პოლიმერის დეპონირება Ct ქსელში.
NFRCS Ch და Cp-ის ზედაპირის ტოპოგრაფია განისაზღვრა ატომური ძალის მიკროსკოპის (AFM) გამოყენებით ულტრა მკვეთრი TESP კონსოლით დაჭერის რეჟიმში: 42 ნ/მ, 320 კჰც, ROC 2-5 ნმ, ბრუკერი, ტაივანი.ზედაპირის უხეშობა განისაზღვრა ძირის საშუალო კვადრატით (RMS) პროგრამული უზრუნველყოფის გამოყენებით (Scanning Probe Image Processor).სხვადასხვა NFRCS მდებარეობები იყო გამოსახული 3D სურათებზე ზედაპირის ერთგვაროვნების შესამოწმებლად.ქულის სტანდარტული გადახრა მოცემული ფართობისთვის განისაზღვრება, როგორც ზედაპირის უხეშობა.RMS განტოლება გამოყენებული იქნა NFRCS31-ის ზედაპირის უხეშობის რაოდენობრივად დასადგენად.
FESEM-ზე დაფუძნებული კვლევები ჩატარდა FESEM, SU8000, HI-0876-0003, Hitachi, ტოკიო გამოყენებით Ch NFRCS და Cp NFRCS-ის ზედაპირის მორფოლოგიის გასაგებად, რომელიც აჩვენა უკეთესი BCT ვიდრე Cm NFRCS.FESEM კვლევა ჩატარდა ჟაოს და სხვების მიერ აღწერილი მეთოდის მიხედვით.32 მცირე ცვლილებებით.NFRCS 20-დან 30 მგ Ch NFRCS და Cp NFRCS იყო წინასწარ შერეული 20 μl 3.8% ნატრიუმის ციტრატით, წინასწარ შერეული ვირთხის სისხლით.20 μl 0.2 M CaCl2 დაემატა სისხლით დამუშავებულ ნიმუშებს კოაგულაციის დასაწყებად და ნიმუშები ინკუბირებული იყო ოთახის ტემპერატურაზე 10 წუთის განმავლობაში.გარდა ამისა, ჭარბი ერითროციტები ამოღებულ იქნა NFRCS ზედაპირიდან ფიზიოლოგიური ხსნარით გამორეცხვით.
შემდგომი ნიმუშები დამუშავდა 0,1% გლუტარალდეჰიდით და შემდეგ გაშრეს ცხელ ჰაერზე 37°C-ზე ტენის მოსაშორებლად.გამხმარი ნიმუშები დაფარული იყო და გაანალიზდა 32 .ანალიზის დროს მიღებული სხვა სურათები იყო თრომბის წარმოქმნა ცალკეული ბამბის ბოჭკოების ზედაპირზე, პოლიმერის დეპონირება Ct-ს შორის, ერითროციტების მორფოლოგია (ფორმა), შედედების მთლიანობა და ერითროციტების მორფოლოგია NFRCS-ის თანდასწრებით.დაუმუშავებელი NFRCS უბნები და Ch და Cp დამუშავებული NFRCS უბნები სისხლით ინკუბირებული იყო სკანირებული ელემენტარული იონების (ნატრიუმი, კალიუმი, აზოტი, კალციუმი, მაგნიუმი, თუთია, სპილენძი და სელენი)33.შეადარეთ ელემენტარული იონის პროცენტები დამუშავებულ და დაუმუშავებელ ნიმუშებს შორის, რათა გაიგოთ ელემენტარული იონების დაგროვება თრომბის წარმოქმნისა და შედედების ერთგვაროვნების დროს.
Cp HFFC ზედაპირის საფარის სისქე Ct ზედაპირზე განისაზღვრა FESEM-ის გამოყენებით.Cp NFRCS-ის ჯვარედინი სექციები მოჭრილი იქნა ჩარჩოდან და დაფარული იყო დაფარვით.შედეგად მიღებული sputter საფარი ნიმუშები დაფიქსირდა FESEM და ზედაპირის საფარის სისქე გაზომილი იყო 34, 35, 36.
რენტგენის მიკრო-CT უზრუნველყოფს მაღალი გარჩევადობის 3D არადესტრუქციულ გამოსახულებას და საშუალებას გაძლევთ შეისწავლოთ NFRK-ის შიდა სტრუქტურული მოწყობა.Micro-CT იყენებს რენტგენის სხივს, რომელიც გადის ნიმუშში, რათა ჩაწეროს ნიმუშში რენტგენის სხივების ადგილობრივი ხაზოვანი შესუსტების კოეფიციენტი, რაც ხელს უწყობს მორფოლოგიური ინფორმაციის მიღებას.Ct-ის შიდა მდებარეობა Cp NFRCS-ში და სისხლით დამუშავებული Cp NFRCS გამოკვლეული იყო მიკრო-CT-ით, რათა გავიგოთ შთანთქმის ეფექტურობა და სისხლის შედედება NFRCS37,38,39-ის თანდასწრებით.სისხლით დამუშავებული და არანამკურნალევი Cp NFRCS ნიმუშების 3D სტრუქტურები რეკონსტრუირებული იყო მიკრო-CT გამოყენებით (V|tome|x S240, Phoenix, გერმანია).VG STUDIO-MAX პროგრამული უზრუნველყოფის ვერსიის 2.2-ის გამოყენებით, რამდენიმე რენტგენის სურათი გადაიღეს სხვადასხვა კუთხიდან (იდეალურად 360° დაფარვით) NFRCS-ისთვის 3D სურათების შესაქმნელად.შეგროვებული პროექციის მონაცემები გადაკეთდა 3D მოცულობით სურათებად შესაბამისი მარტივი 3D ScanIP აკადემიური პროგრამული უზრუნველყოფის გამოყენებით.
გარდა ამისა, თრომბის განაწილების გასაგებად, 20 μl წინასწარ შერეული ციტრატული სისხლი და 20 μl 0.2 M CaCl2 დაემატა NFRCS-ს სისხლის შედედების დასაწყებად.მომზადებული ნიმუშები რჩება გასამაგრებლად.NFRK ზედაპირი დამუშავდა 0,5% გლუტარალდეჰიდით და გაშრეს ცხელ ჰაერზე 30-40°C-ზე 30 წუთის განმავლობაში.NFRCS-ზე წარმოქმნილი სისხლის შედედება სკანირებული იყო, რეკონსტრუქცია და თრომბის 3D სურათი ვიზუალურად.
ანტიბაქტერიული ანალიზები ჩატარდა Cp NFRCS-ზე (საუკეთესოა Ch NFRCS-თან შედარებით) ადრე აღწერილი მეთოდის გამოყენებით მცირედი ცვლილებებით.Cp NFRCS-ისა და Cp HFFC-ის ანტიბაქტერიული აქტივობა განისაზღვრა სამი სხვადასხვა სატესტო მიკროორგანიზმების გამოყენებით [S.aureus (გრამდადებითი ბაქტერია), E.coli (გრამუარყოფითი ბაქტერია) და თეთრი Candida (C.albicans)], რომლებიც იზრდება აგარზე პეტრის ჭურჭელში ინკუბატორში.ერთგვაროვნად შეიტანეთ 50 მლ განზავებული ბაქტერიული კულტურის სუსპენზია 105-106 CFU მლ-1 კონცენტრაციით აგარის გარემოზე.ჩაასხით საშუალება პეტრის ჭურჭელში და გააჩერეთ გამაგრება.ჭაბურღილები გაკეთდა აგარის ფირფიტის ზედაპირზე HFFC-ით შესავსებად (3 ჭაბურღილი HFFC-სთვის და 1 უარყოფითი კონტროლისთვის).დაამატეთ 200 μl HFFC 3 ჭაბურღილში და 200 μl pH 7.4 PBS მე-4 ჭაბურღილში.პეტრის ჭურჭლის მეორე მხარეს მოათავსეთ 12 მმ Cp NFRCS დისკი გამაგრებულ აგარზე და დაასველეთ PBS-ით (pH 7.4).ციპროფლოქსაცინი, ამპიცილინი და ფლუკონაზოლის ტაბლეტები განიხილება Staphylococcus aureus, Escherichia coli და Candida albicans საცნობარო სტანდარტებად.ხელით გაზომეთ დათრგუნვის ზონა და გადაიღეთ ინჰიბირების ზონის ციფრული სურათი.
ინსტიტუციური ეთიკური დამტკიცების შემდეგ, კვლევა ჩატარდა კასტურბას განათლებისა და კვლევის სამედიცინო კოლეჯში მანიპალში, კარნატაკაში, სამხრეთ ინდოეთში.ინ ვიტრო TEG ექსპერიმენტული პროტოკოლი განხილული და დამტკიცებულია კასტურბას სამედიცინო კოლეჯის ინსტიტუციური ეთიკის კომიტეტის მიერ, მანიპალი, კარნატაკა (IEC: 674/2020).სუბიექტები დაკომპლექტებული იქნა მოხალისე სისხლის დონორებისგან (18-დან 55 წლამდე) საავადმყოფოს სისხლის ბანკიდან.გარდა ამისა, მოხალისეებისგან მიღებული იქნა ინფორმირებული თანხმობის ფორმა სისხლის ნიმუშების აღებაზე.Native TEG (N-TEG) ​​გამოიყენებოდა Cp HFFC ფორმულირების ეფექტის შესასწავლად ნატრიუმის ციტრატთან შერეულ მთლიან სისხლზე.N-TEG ფართოდ არის აღიარებული მისი როლისთვის ზრუნვის წერტილში რეანიმაციაში, რაც პრობლემებს უქმნის კლინიცისტებს შედეგების კლინიკურად მნიშვნელოვანი შეფერხების პოტენციალის გამო (კოაგულაციის რუტინული ტესტები).N-TEG ანალიზი ჩატარდა მთლიანი სისხლის გამოყენებით.ყველა მონაწილისგან მიღებული იყო ინფორმირებული თანხმობა და დეტალური სამედიცინო ისტორია.კვლევა არ მოიცავდა მონაწილეებს ჰემოსტაზური ან თრომბოზული გართულებებით, როგორიცაა ორსულობა/მშობიარობის შემდგომი ან ღვიძლის დაავადება.სუბიექტები, რომლებიც იღებდნენ წამლებს, რომლებიც გავლენას ახდენენ კოაგულაციის კასკადზე, ასევე გამოირიცხნენ კვლევისგან.ძირითადი ლაბორატორიული ტესტები (ჰემოგლობინი, პროთრომბინის დრო, გააქტიურებული თრომბოპლასტინი და თრომბოციტების რაოდენობა) ჩატარდა ყველა მონაწილეზე სტანდარტული პროცედურების მიხედვით.N-TEG განსაზღვრავს სისხლის თრომბის ვიზოელასტიურობას, თრომბის საწყის სტრუქტურას, ნაწილაკების ურთიერთქმედებას, თრომბის გაძლიერებას და თრომბის ლიზისს.N-TEG ანალიზი იძლევა გრაფიკულ და ციფრულ მონაცემებს რამდენიმე უჯრედული ელემენტისა და პლაზმის კოლექტიური ეფექტების შესახებ.N-TEG ანალიზი ჩატარდა Cp HFFC-ის ორ სხვადასხვა მოცულობაზე (10 μl და 50 μl).შედეგად, 1 მლ მთლიანი სისხლი ლიმონმჟავასთან ერთად დაემატა 10 μl Cp HFFC.დაამატეთ 1 მლ (Cp HFFC + ციტრატირებული სისხლი), 340 μl შერეული სისხლი 20 μl 0.2 M CaCl2-ის შემცველ TEG ჭურჭელს.ამის შემდეგ, TEG ჭურჭელი ჩაიტვირთა TEG® 5000-ში, აშშ-ში R, K, ალფა კუთხე, MA, G, CI, TPI, EPL, LY 30% სისხლის ნიმუშების გასაზომად Cp HFFC41-ის თანდასწრებით.
in vivo კვლევის პროტოკოლი განიხილა და დაამტკიცა ინსტიტუციური ცხოველთა ეთიკის კომიტეტი (IAEC), კასტურბას მედიცინის სკოლა, მანიპალის უმაღლესი განათლების ინსტიტუტი, მანიპალი (IAEC/KMC/69/2020).ცხოველებზე ყველა ექსპერიმენტი ჩატარდა ცხოველებზე ექსპერიმენტების კონტროლისა და ზედამხედველობის კომიტეტის (CPCSEA) რეკომენდაციების შესაბამისად.ყველა in vivo NFRCS კვლევა (2 × 2 სმ2) ჩატარდა მდედრ ვისტარის ვირთხებზე (წონა 200-დან 250 გ-მდე).ყველა ცხოველი აკლიმატიზირებული იყო 24-26°C ტემპერატურაზე, ცხოველებს ჰქონდათ თავისუფალი წვდომა სტანდარტულ საკვებსა და წყალზე ad libitum.ყველა ცხოველი შემთხვევით იყოფა სხვადასხვა ჯგუფად, თითოეული ჯგუფი შედგებოდა სამი ცხოველისგან.ყველა კვლევა ჩატარდა Animal Studies: Report of In Vivo Experiments 43 შესაბამისად.კვლევის დაწყებამდე ცხოველებს ანესთეზირებდნენ 20-50 მგ კეტამინის (1 კგ სხეულის მასაზე) და 2-10 მგ ქსილაზინის (1 კგ სხეულის მასაზე) ნარევის ინტრაპერიტონეალური (IP) შეყვანით.კვლევის შემდეგ, სისხლდენის მოცულობა გამოითვალა ნიმუშების საწყისი და საბოლოო წონის სხვაობის შეფასებით, სამი ტესტიდან მიღებული საშუალო მნიშვნელობა აღებული იქნა ნიმუშის სისხლდენის მოცულობად.
ვირთხის კუდის ამპუტაციის მოდელი დანერგილი იყო NFRCS-ის პოტენციალის გასაგებად სისხლდენის მოდულაციისთვის ტრავმის, საბრძოლო ან საგზაო შემთხვევის დროს (დაზიანების მოდელი).სკალპელის პირით მოჭერით კუდის 50% და განათავსეთ ჰაერში 15 წამის განმავლობაში ნორმალური სისხლდენის უზრუნველსაყოფად.გარდა ამისა, ტესტის ნიმუშები მოთავსებული იყო ვირთხის კუდზე ზეწოლის გამოყენებით (Ct, Cs, Ch NFRCS და Cp NFRCS).სისხლდენა და PCT მოხსენებული იყო ტესტის ნიმუშებზე (n = 3) 17,45.
NFRCS წნევის კონტროლის ეფექტურობა ბრძოლაში გამოკვლეული იყო ზედაპირული ბარძაყის არტერიის მოდელზე.ბარძაყის არტერია იხსნება, პუნქცია 24G ტროკარით და სისხლდენა 15 წამში.მას შემდეგ, რაც დაფიქსირდა უკონტროლო სისხლდენა, ტესტის ნიმუში მოთავსებულია პუნქციის ადგილზე ზეწოლით.ტესტის ნიმუშის გამოყენებისთანავე დაფიქსირდა შედედების დრო და დაფიქსირდა ჰემოსტატიკური ეფექტურობა მომდევნო 5 წუთის განმავლობაში.იგივე პროცედურა განმეორდა Cs და Ct46-ით.
დოულინგმა და სხვებმა.47-მა შემოგვთავაზა ღვიძლის დაზიანების მოდელი ჰემოსტატიკური მასალების ჰემოსტატიკური პოტენციალის შესაფასებლად ინტრაოპერაციული სისხლდენის კონტექსტში.BCT ჩაწერილი იყო Ct ნიმუშებისთვის (უარყოფითი კონტროლი), Cs ჩარჩო (დადებითი კონტროლი), Ch NFRCS ნიმუშებისთვის და Cp NFRCS ნიმუშებისთვის.ვირთხის ზედა ღვიძლის ღრუ ვენა გამოიკვეთა მედიანური ლაპაროტომიის ჩატარებით.ამის შემდეგ მაკრატლით ამოჭრეს მარცხენა წილის დისტალური ნაწილი.სკალპელის პირით გააკეთეთ ჭრილობა ღვიძლში და გააჩერეთ სისხლდენა რამდენიმე წამით.ზუსტად აწონილი Ch NFRCS და Cp NFRCS სატესტო ნიმუშები მოთავსდა დაზიანებულ ზედაპირზე ყოველგვარი დადებითი წნევის გარეშე და BCT ჩაიწერა.საკონტროლო ჯგუფმა (Ct) შემდეგ გამოიყენა წნევა, რასაც მოჰყვა Cs 30 s47 დაზიანების გატეხვის გარეშე.
in vivo ჭრილობის შეხორცების ანალიზი ჩატარდა ამოკვეთილი ჭრილობის მოდელის გამოყენებით განვითარებული პოლიმერზე დაფუძნებული NFRCS-ების ჭრილობის სამკურნალო თვისებების შესაფასებლად.ამოკვეთის ჭრილობების მოდელები შეირჩა და შესრულდა ადრე გამოქვეყნებული მეთოდების მიხედვით მცირედი ცვლილებებით19,32,48.ყველა ცხოველს გაუკეთეს ანესთეზირება, როგორც ადრე იყო აღწერილი.გამოიყენეთ ბიოფსიის პუნჩი (12 მმ) წრიული ღრმა ჭრილობის გასაკეთებლად ზურგის კანზე.მომზადებული ჭრილობის ადგილები ჩაცმული იყო Cs-ით (პოზიტიური კონტროლი), Ct (აღიარებული, რომ ბამბის ბალიშები ხელს უშლის შეხორცებას), Ch NFRCS და Cp NFRCS (ექსპერიმენტული ჯგუფი) და უარყოფითი კონტროლი ყოველგვარი მკურნალობის გარეშე.კვლევის ყოველ დღეს, ჭრილობის ფართობი გაზომილი იყო ყველა ვირთხაში.გამოიყენეთ ციფრული კამერა, რომ გადაიღოთ ჭრილობის ადგილი და ჩაიცვათ ახალი სახვევი.ჭრილობის დახურვის პროცენტი იზომება შემდეგი ფორმულით:
კვლევის მე-12 დღეს ჭრილობის დახურვის პროცენტზე დაყრდნობით, საუკეთესო ჯგუფის ვირთხის კანი ამოკვეთეს ((Cp NFRCS) და საკონტროლო ჯგუფი) და შეისწავლეს H&E შეღებვით და მასონის ტრიქრომული შეღებვით. კვლევის მე-12 დღეს ჭრილობის დახურვის პროცენტზე დაყრდნობით, საუკეთესო ჯგუფის ვირთხის კანი ამოკვეთეს ((Cp NFRCS) და საკონტროლო ჯგუფი) და შეისწავლეს H&E შეღებვით და მასონის ტრიქრომული შეღებვით.კვლევის მე-12 დღეს ჭრილობის დახურვის პროცენტზე დაყრდნობით, საუკეთესო ჯგუფის ((Cp NFRCS) და საკონტროლო ჯგუფის) ვირთხების კანი ამოკვეთეს და გამოიკვლიეს ჰემატოქსილინ-ეოზინით და მასონის ტრიქრომით შეღებვით.根据研究第12天的伤口闭合百分比，切除最佳组((Cp NFRCS)和对照组)的大连褌分比切除最佳组sson三色染色研究.根据研究第12天的伤口闭合百分比，切除最佳组((Cp NFRCS)和对照组)的大连褌猌大迌褌的大褼輡眳组)ვირთხები საუკეთესო ჯგუფში ((Cp NFRCS) და საკონტროლო ჯგუფებში) ამოკვეთეს ჰემატოქსილინ-ეოზინის შეღებვისთვის და მასონის ტრიქრომის შეღებვისთვის, ჭრილობის დახურვის პროცენტული საფუძველზე კვლევის მე-12 დღეს.განხორციელებული შეღებვის პროცედურა ჩატარდა ადრე აღწერილი მეთოდების მიხედვით49,50.მოკლედ, 10%-იან ფორმალინში ფიქსაციის შემდეგ, ნიმუშები დეჰიდრატირებული იყო ხარისხოვანი სპირტების სერიის გამოყენებით.გამოიყენეთ მიკროტომი ამოკვეთილი ქსოვილის თხელი მონაკვეთების (5 მკმ სისქის) მისაღებად.კონტროლის თხელი სერიული სექციები და Cp NFRCS დამუშავდა ჰემატოქსილინით და ეოზინით ჰისტოლოგიური ცვლილებების შესასწავლად.მასონის ტრიქრომის ლაქა გამოიყენებოდა კოლაგენის ფიბრილების წარმოქმნის დასადგენად.მიღებული შედეგები ბრმად შეისწავლეს პათოლოგებმა.
Cp NFRCS ნიმუშების სტაბილურობა შესწავლილი იყო ოთახის ტემპერატურაზე (25°C ± 2°C/60% RH ± 5%) 12 თვის განმავლობაში51.Cp NFRCS (ზედაპირის ფერის გაუფერულება და მიკრობული ზრდა) ვიზუალურად შემოწმდა და შემოწმდა ნაკეცის ცვეთა წინააღმდეგობისა და BCT-ზე მასალებისა და მეთოდების სექციაში ასახული ზემოთ მეთოდების მიხედვით.
Cp NFRCS-ის მასშტაბურობა და განმეორებადობა გამოკვლეული იყო Cp NFRCS-ის მომზადებით ზომით 15×15 სმ2.გარდა ამისა, 30 მგ ნიმუშები (n = 5) ამოღებულ იქნა სხვადასხვა Cp NFRCS ფრაქციებიდან და შესწავლილი ნიმუშების BCT შეფასდა, როგორც ზემოთ აღწერილი იყო მეთოდები სექციაში.
ჩვენ შევეცადეთ შეგვემუშავებინა სხვადასხვა ფორმები და სტრუქტურები Cp NFRCS კომპოზიციების გამოყენებით სხვადასხვა ბიოსამედიცინო აპლიკაციებისთვის.ასეთი ფორმები ან კონფიგურაციები მოიცავს კონუსურ ნაცხებს ცხვირიდან სისხლდენის, სტომატოლოგიური პროცედურების და ცილინდრული ნაცხის საშოდან სისხლდენისთვის.
მონაცემთა ყველა ნაკრები გამოხატულია საშუალოდ ± სტანდარტული გადახრით და გაანალიზებულია ANOVA-ით Prism 5.03-ის გამოყენებით (GraphPad, San Diego, CA, USA), რასაც მოჰყვება ბონფერონის მრავალჯერადი შედარების ტესტი (*p<0.05).
ადამიანთა კვლევებში ჩატარებული ყველა პროცედურა შეესაბამებოდა ინსტიტუტისა და კვლევითი ეროვნული საბჭოს სტანდარტებს, ასევე ჰელსინკის 1964 წლის დეკლარაციას და მის შემდგომ შესწორებებს ან ეთიკურ მსგავს სტანდარტებს.ყველა მონაწილეს ეცნობა კვლევის თავისებურებებსა და მის ნებაყოფლობით ბუნებას.მონაწილეთა მონაცემები კონფიდენციალური რჩება შეგროვების შემდეგ.ინ ვიტრო TEG ექსპერიმენტული პროტოკოლი განხილული და დამტკიცებულია კასტურბას სამედიცინო კოლეჯის ინსტიტუციური ეთიკის კომიტეტის მიერ, მანიპალი, კარნატაკა (IEC: 674/2020).მოხალისეებმა ხელი მოაწერეს ინფორმირებულ თანხმობას სისხლის ნიმუშების აღებაზე.
ცხოველების კვლევებში ჩატარებული ყველა პროცედურა ჩატარდა კასტუბის მედიცინის ფაკულტეტის, მანიპალის უმაღლესი განათლების ინსტიტუტის, მანიპალის (IAEC/KMC/69/2020) შესაბამისად.ცხოველებზე შექმნილი ყველა ექსპერიმენტი ჩატარდა ცხოველებზე ექსპერიმენტების კონტროლისა და ზედამხედველობის კომიტეტის (CPCSEA) მითითებების შესაბამისად.ყველა ავტორი მიჰყვება ARRIVE-ის მითითებებს.
ყველა NFRCS-ის FTIR სპექტრები გაანალიზებული და შედარებულია ქიტოზანის სპექტრთან, რომელიც ნაჩვენებია სურათზე 2A.ქიტოზანის დამახასიათებელი სპექტრული მწვერვალები (ჩაწერილი) 3437 სმ-1-ზე (OH და NH გაჭიმვა, გადახურვა), 2945 და 2897 სმ-1 (CH გაჭიმვა), 1660 სმ-1 (NH2 დაძაბულობა), 1589 სმ-1 (N–H დაჭიმვა), 115 სმ-ზე (OH და NH დაჭიმვა), 115 სმ-ზე (O-H დაჭიმვა), 117 სმ მეორადი ჰიდროქსილი), 993 სმ-1 (გაჭიმვის CO, Bo-OH) 52.53.54.დამატებითი ცხრილი S1 გვიჩვენებს FTIR NFRCS შთანთქმის სპექტრის მნიშვნელობებს ქიტოზანისთვის (რეპორტიორი), სუფთა ქიტოზანისთვის, Cm, Ch და Cp.ყველა NFRCS-ის FTIR სპექტრმა (Cm, Ch და Cp) აჩვენა იგივე დამახასიათებელი შთანთქმის ზოლები, როგორც სუფთა ქიტოზანი ყოველგვარი მნიშვნელოვანი ცვლილებების გარეშე (ნახ. 2A).FTIR-ის შედეგებმა დაადასტურა ქიმიური ან ფიზიკური ურთიერთქმედების არარსებობა პოლიმერებს შორის, რომლებიც გამოიყენება NFRCS-ის შესაქმნელად, რაც მიუთითებს, რომ გამოყენებული პოლიმერები ინერტულია.
Cm NFRCS, Ch NFRCS, Cp NFRCS და Cs in vitro დახასიათება.(A) წარმოადგენს ჩიტოზანისა და Cm NFRCS, Ch NFRCS და Cp NFRCS კომპოზიციების გაერთიანებულ FTIR სპექტრებს შეკუმშვის ქვეშ.(B) ა) NFRCS Cm, Ch, Cp და Cg მთლიანი სისხლით შეწოვის სიჩქარე (n = 3);Ct ნიმუშებმა აჩვენა უფრო მაღალი BAR, რადგან ბამბის ტამპონს აქვს უფრო მაღალი შთანთქმის ეფექტურობა;ბ) სისხლი სისხლის შეწოვის შემდეგ შთანთქმის ნიმუშის ილუსტრაცია.C ტესტი ნიმუშის BCT-ის გრაფიკული წარმოდგენა (Cp NFRCS-ს ჰქონდა საუკეთესო BCT (15 წმ, n = 3)). მონაცემები C, D, E და G ნაჩვენები იყო როგორც საშუალო ± SD და შეცდომის ზოლები წარმოადგენს SD, ***p <0.0001. მონაცემები C, D, E და G ნაჩვენები იყო როგორც საშუალო ± SD და შეცდომის ზოლები წარმოადგენს SD, ***p <0.0001. Данные в C, D, E და G შემოთავაზებულია, როგორც среднее ± სტანდარტული отклонение, а გეგმის არასწორი ცნებები, ***p <0,0001. მონაცემები C, D, E და G წარმოდგენილია როგორც საშუალო ± სტანდარტული გადახრა, ხოლო შეცდომის ზოლები წარმოადგენს სტანდარტულ გადახრას, ***p<0.0001. C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD，误差线代表SD，***p <0.0001。 C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD，误差线代表SD，***p <0.0001。 Данные в C, D, E და G, როგორც среднее значение ± стандартное отклонение, გეგმა погрешноей представляют стандартное отклонение, ***p <0,0001. მონაცემები C, D, E და G ნაჩვენებია როგორც საშუალო ± სტანდარტული გადახრა, შეცდომის ზოლები წარმოადგენს სტანდარტულ გადახრას, ***p<0.0001.