„არასდროს შეგეპაროთ ეჭვი, რომ გააზრებული, თავდადებული მოქალაქეების მცირე ჯგუფს შეუძლია შეცვალოს სამყარო. სინამდვილეში, ისინი ერთადერთი არიან იქ.“
Cureus-ის მისიაა შეცვალოს სამედიცინო გამომცემლობის დიდი ხნის მოდელი, რომლის მიხედვითაც კვლევის წარდგენა შეიძლება ძვირი, რთული და დროის მომთხოვნი იყოს.
თრომბოციტებით მდიდარი პლაზმა/PRP, ქსოვილების რეგენერაცია, თრომბოციტების აქტივაცია, გლუკოზის პროლიფერაციული თერაპია, თრომბოციტები, პროლიფერაციული თერაპია
სტატიის ციტირება შესაძლებელია შემდეგნაირად: Harrison TE, Bowler J, Reeves K, et al. (17 მაისი, 2022) გლუკოზის გავლენა თრომბოციტების რაოდენობასა და მოცულობაზე: შედეგები რეგენერაციული მედიცინისთვის. Cure 14(5): e25081. doi:10.7759/cureus.25081
რეგენერაციულ მედიცინაში ინექციისთვის ხშირად გამოიყენება თრომბოციტებით მდიდარი პლაზმა (PRP) და ჰიპერტონული გლუკოზის ხსნარები, ზოგჯერ ერთად. ჰიპერტონული გლუკოზის გავლენა თრომბოციტების ლიზისსა და აქტივაციაზე აქამდე არ ყოფილა აღწერილი. ჩვენ გამოვცადეთ გლუკოზის მომატებული კონცენტრაციების გავლენა თრომბოციტებისა და ერითროციტების რაოდენობაზე, ასევე უჯრედების მოცულობაზე PRP-სა და მთლიან სისხლში (WB). თრომბოციტების რაოდენობის სწრაფი ნაწილობრივი შემცირება მოხდა PRP-თან ან მთლიან სისხლთან შერეული ყველა გლუკოზის ნარევის შემთხვევაში, რაც შეესაბამება ნაწილობრივ ლიზისს. პირველი წუთის შემდეგ თრომბოციტების რაოდენობა სტაბილური დარჩა, რაც მიუთითებს ნარჩენი თრომბოციტების სწრაფ ადაპტაციაზე უკიდურეს (>2000 მოსმ) ჰიპერტონიურობამდე. პირველი წუთის შემდეგ თრომბოციტების რაოდენობა სტაბილური დარჩა, რაც მიუთითებს ნარჩენი თრომბოციტების სწრაფ ადაპტაციაზე უკიდურეს (>2000 მოსმ) ჰიპერტონიურობამდე. თრომბოციტები სტაბილურად რჩება, რაც აკომოდაციას უტოვებს ექსტრემალურ (>2000 мОсм) ჰიპერტონუსას. პირველი წუთის შემდეგ თრომბოციტების რაოდენობა სტაბილური დარჩა, რაც მიუთითებს ნარჩენი თრომბოციტების სწრაფ ადაპტაციაზე უკიდურეს (>2000 მოსმ) ჰიპერტონიურობამდე.第一分钟后，血小板计数保持稳定，表明残余血小板迅速适应极端（> 200 mOsm）高渗状态.2000 mOsm）高渗状态. თრომბოციტების არსებობის შემდეგ, რაც სტაბილურად რჩება, რაც ნიშნავს აბსოლუტურ ადაპტაციას ექსტრემალურ (> 2000 мОсм) პირველი წუთის შემდეგ თრომბოციტების რაოდენობა სტაბილური დარჩა, რაც მიუთითებს ნარჩენი თრომბოციტების სწრაფ ადაპტაციაზე ექსტრემალურ (>2000 მოსმ) ჰიპეროსმოლარულ მდგომარეობასთან.გლუკოზის 25%-იანი და მეტი კონცენტრაცია იწვევდა თრომბოციტების საშუალო მოცულობის (MPV) მნიშვნელოვან ზრდას, რაც მიუთითებს თრომბოციტების აქტივაციის ადრეულ სტადიაზე. საჭიროა შემდგომი კვლევები იმის დასადგენად, ხდება თუ არა თრომბოციტების ლიზისი ან აქტივაცია და შეიძლება თუ არა ჰიპერტონული გლუკოზის ინექცია მხოლოდ ან PRP-თან კომბინაციაში იყოს დამატებითი კლინიკური სარგებელი.
1950-იან წლებში ამერიკელმა ქირურგმა ჯორჯ ჰაკეტმა აღმოაჩინა, რომ მას შეეძლო სახსრებისა და ზურგის ტკივილის სამუდამოდ შემსუბუქება მყესებსა და იოგებში პროლიფერაციული ხსნარის შეყვანით. კურდღლებზე ჩატარებულმა ექსპერიმენტებმა აჩვენა, რომ მკურნალობა, რომელსაც მან პროლიფერაციული თერაპია უწოდა, იწვევდა მყესების გაფართოებას და გაძლიერებას. ჰისტოლოგიურმა კვლევებმა დაადასტურა, რომ ამ პროცესის დროს წარმოიქმნება ახალი კოლაგენი [1].
პირველი რამდენიმე ათწლეულის განმავლობაში, განაწილების მრავალი განსხვავებული გადაწყვეტა სცადეს. 1990-იანი წლებისთვის, პრაქტიკოსთა უმეტესობა გლუკოზის მაღალ კონცენტრაციას ყველაზე უსაფრთხო და ეფექტურ მეთოდად მიიჩნევდა. თუმცა, მოქმედების მექანიზმი კვლავ გაურკვეველი რჩება.
ჰეკეტის ნაშრომის შემდეგ მე-20 საუკუნეში კლინიკური კვლევების მცირე რაოდენობა ჩატარდა. თუმცა, 2000-იან წლებში ინტერესი განახლდა და პროლიფერაციული თერაპიის რამდენიმე წარმატებული კლინიკური კვლევა დასრულდა წელის ტკივილის [2], მუხლის ოსტეოართრიტის [3] და გვერდითი ეპიკონდილიტის [4] სამკურნალოდ.
ქსოვილების რეგენერაცია ღეროვანი უჯრედების მონაწილეობას მოითხოვს. ამიტომ, გლუკოზის მაღალი კონცენტრაცია როგორღაც უნდა იწვევდეს ღეროვანი უჯრედების მიგრაციას, რეპლიკაციას და დიფერენციაციას. ჩვენ ვვარაუდობთ, რომ თრომბოციტებმა შეიძლება იმოქმედონ როგორც მესენჯერები და რომ გლუკოზის მაღალმა კონცენტრაციამ შეიძლება გამოიწვიოს თრომბოციტების მიერ ციტოკინების და ზრდის ფაქტორების გამოყოფა, რითაც ხელს უწყობს რეგენერაციულ პროცესებს, განსაკუთრებით ღეროვანი უჯრედების მიგრაციას გლუკოზის მაღალი კონცენტრაციის მქონე ადგილებში.
თრომბოციტების აქტივაცია ყოველთვის წინ უსწრებს უჯრედშიდა კალციუმის დონის მატებას [5]. ლიუმ და სხვებმა 2008 წელს აჩვენეს, რომ გლუკოზის მაღალი დონე ზრდის პლაზმურ მემბრანაში გარდამავალი რეცეპტორული პოტენციალის კანონიკური ტიპის 6 (TRPC6) არხების აქტივობას, რაც იწვევს კალციუმის იონების შემოდინებას თრომბოციტებში [6]. კიდევ ერთმა კვლევამ აჩვენა, რომ მიკროტუბულების მარგინალური ზონის კალციუმის იონების ზემოქმედება იწვევს მარგინალური ზონის რელაქსაციას, გაფართოებას და დეფორმაციას, რაც თავის მხრივ იწვევს ფორმის შეცვლას დისკიდან სფერულამდე, რაც იწვევს თრომბოციტების საშუალო მოცულობას (MPV) [7].
ამ კვლევაში ჩვენი ჰიპოთეზაა, რომ თრომბოციტების მაღალი კონცენტრაციის ზემოქმედება გლუკოზის მიმართ გავლენას ახდენს მიკროტუბულების მარგინალურ ზონასა და უჯრედშიდა გარემოზე, რაც იწვევს MPV-ის ზრდას.
კვლევის დეტალების ახსნისა და ნიმუშების მიღებამდე ყველა მონაწილემ ხელი მოაწერა ინფორმირებული თანხმობის ფორმას. ამ კვლევაში გამოყენებული იქნა მხოლოდ 2%-ზე მეტი ჰემატოკრიტის მქონე PRP ნიმუშები, რათა შედარებისთვის ჩართულიყო ერითროციტების რაოდენობა და სისხლის წითელი უჯრედების საშუალო კორპუსკულური მოცულობა (MCV).
კვლევა ოთხ ფაზად ჩატარდა, პირველი ფაზა იყო PRP, ხოლო დანარჩენი ფაზები - მთლიანი სისხლი (ცხრილი 1). როგორც ადრე იყო აღწერილი [8], ყველა ფარდობითი ცენტრიდანული ძალა (RCF, g-ძალა) გამოითვალა ცენტრიდანული შპრიცის სისხლის სვეტის შუა წერტილიდან (Rmid, სმ-ში). ჩვენ ავირჩიეთ MPV-ის გამოყენება თრომბოციტების სენსიბილიზაციის მარკერად და თრომბოციტების რაოდენობის გამოყენება თრომბოციტების პოტენციური ლიზისის ინდიკატორად, რომელთა გაზომვაც მარტივად შეიძლება სტანდარტული ჰემატოლოგიური ანალიზატორებით.
პირველ ფაზაში 47-მა მოხალისემ სისხლის ნიმუშები გაიღო - ეთილენდიამინტეტრაძმარმჟავას (EDTA) ერთი ტუბი და PRP-ის მთლიანი სისხლის ერთი ნიმუში (ანტიკოაგულაციური ნატრიუმის ციტრატით (NaCl, 3%)) (ცხრილი 1). როკერი დაუყოვნებლივ მოათავსეთ ტუბში. EDTA ნიმუშებზე სამჯერ ჩატარდა სისხლის სრული ანალიზი (CBC), NaCl-ის ნიმუშები კი სამჯერ გაანალიზდა CBC ანალიზისთვის, შემდეგ PRP მომზადდა ზემოთ აღწერილი სხვადასხვა მეთოდით [8]. ყველა PRP ნიმუში მომზადდა ცენტრიფუგირებით 900–1000 გ-ზე. თითოეული PRP ნიმუში აურიეთ მორევის მიქსერზე 5–10 წამის განმავლობაში, შემდეგ ხუთი 0.5 მლ ალიკვოტი გაყავით ტუბებში.
თრომბოციტების ზემოქმედების გლუკოზის მომატებულ კონცენტრაციებზე ზემოქმედების შესაფასებლად, წყალში არსებული 0%, 5%, 12.5%, 25% და 50% გლუკოზის თანაბარი რაოდენობები (0.5 მლ) შეურიეს თრომბოციტების ნიმუშებს, რათა მიღებულ იქნას გლუკოზის ნარევის 0%, 2.5%, 6.25%, 12.5% ​​და 25% კონცენტრაციები და მილები შეურიეს საცდელი მილის შენჯღრევაზე 15 წუთის განმავლობაში. თითოეული ნარევის TAC გაანალიზდა სამჯერ 15 წუთის შემდეგ. თითოეული მილისთვის საშუალოდ იქნა გამოთვლილი თრომბოციტების რაოდენობა (PLT), ერითროციტების რაოდენობა, MCV და MPV, ხოლო PRP-ის ყველა ნიმუშისთვის გამოითვალა თრომბოციტების საშუალო რაოდენობა, ერითროციტების რაოდენობა, MCV და MPV.
მონაცემთა შეგროვების პირველი ფაზის დასრულების შემდეგ, D50W-ის დამატების შემდეგ, PRP თრომბოციტებში თრომბოციტების მოცულობის მნიშვნელოვანი ზრდა შევნიშნეთ. PRP თრომბოციტები აუცილებლად არ წარმოადგენენ სისხლში არსებულ ყველა თრომბოციტს და PRP გარემო განსხვავდება WB გარემოსგან. ამიტომ, გადავწყვიტეთ, ჩაგვეტარებინა მეორე ფაზის კვლევა, რომელიც შეისწავლიდა D50W-ის მთლიან სისხლში დამატების ეფექტს.
მეორე რაუნდისთვის, პირველი სერიის შედეგების საფუძველზე, როგორც ეს ანალიზის განყოფილებაშია აღწერილი, 30 ადამიანისგან შემდგარი ნიმუში შევარჩიეთ. ამ სერიაში 20-მა მოხალისემ სისხლის ნიმუშები გაიღო (ცხრილი 1). მთლიანი სისხლი (1.8 მლ) აიღეს 3 მლ შპრიცში და ანტიკოაგულაცია გაუკეთეს 0.2 მლ 40%-იანი NaCl-ით. მთლიანი სისხლის შპრიცი ხუთი წამის განმავლობაში მორევის მიქსერით აირია და სისხლის საერთო ანალიზი სამჯერ ჩატარდა. ანალიზის შემდეგ, ანტიკოაგულირებული სისხლი დაემატა 2 მლ 50%-იან გლუკოზას 5 მლ შპრიცში (გლუკოზის საბოლოო კონცენტრაცია დაახლოებით 25% იყო (D25)) და 30 წუთის განმავლობაში მოათავსეს შენჯღრევის მილში. 30 წუთის შემდეგ, სისხლის საერთო ანალიზი სამჯერ ჩატარდა. თრომბოციტების, ერითროციტების რაოდენობის, MCV და MPV თითო შპრიცზე საშუალოდ იქნა გამოთვლილი და თითოეული ნიმუშისთვის გლუკოზის დამატებამდე და მის შემდეგ საშუალო PLT, ერითროციტების რაოდენობის, MCV და MPV გამოითვალა.
ვინაიდან მინიმალურად ინვაზიური ინექციის გამო, პროლიფერაციული გლუკოზის თერაპიის დროს მთლიანი სისხლის თრომბოციტები ხშირად განიცდიან ჰიპერტონული გლუკოზის ზემოქმედებას და ინექციის წინ PRP-ის ჰიპერტონულ გლუკოზასთან შერწყმა არ არის გავრცელებული, ჩვენ გადავწყვიტეთ, პირველ ნაწილში, მესამე და მეოთხე ეტაპზე, ჰიპერტონული გლუკოზა WB-თან ერთად შეგვესწავლა. თითოეულ ეტაპზე, 20 მოხალისემ სისხლის ანტიკოაგულანტებისთვის გაიღო 7-8 მლ ACD-A (მჟავა, რომელიც შეიცავს ტრინატრიუმის ციტრატს (22.0 გ/ლ), ლიმონმჟავას (8.0 გ/ლ) და გლუკოზას (24.5 გ/ლ), დექსტროზის ციტრატის ხსნარი) (ცხრილი 1). MPV-ის ზრდასთან დაკავშირებული ზღურბლის პროცენტული მაჩვენებლის დასადგენად გამოყენებული იქნა მხოლოდ 12.5%-ზე მეტი გლუკოზის ნარევები. მესამე ეტაპზე, 1 მლ სისხლი თავსდება სინჯარაში. შემდეგ სისხლი 10 წამის განმავლობაში მორევის აპარატზე აურიეთ, მილში 1 მლ 30%-იანი, 40%-იანი ან 50%-იანი გლუკოზის დამატებით, რათა საბოლოო გლუკოზის კონცენტრაცია შესაბამისად 15%, 20% და 25% იყოს. გლუკოზის შემცველი სისხლის ნიმუშები შერევისთანავე გაანალიზდა სისხლის საერთო ანალიზზე და გაიმეორეს ყოველ ორ წუთში 30 წუთის განმავლობაში.
საწყისი შერევის დროს, 1:1 ჰიპერტონული გლუკოზისა და WB-ის ან PRP-ის დამატება თრომბოციტებს რამდენიმე წამის განმავლობაში 25%-ზე მეტი კონცენტრაციის ზემოქმედების ქვეშ აყენებს. მეოთხე ეტაპზე, მინიმალური საწყისი პიკური კონცენტრაციებით ჰიპერტონული გლუკოზის ეფექტის შესაფასებლად და გლუკოზის ეფექტის ზედა ზღვრის შესამოწმებლად, D25W-ს ან D50W-ს მხოლოდ მცირე რაოდენობით სისხლი დავამატეთ. 1 მლ D25W ან D50W სინჯარაში მოათავსეთ და 0.2 მლ WB დაუმატეთ, ნიმუში 10 წამის განმავლობაში მორევის დროს. ამ შემთხვევებში, სისხლი გლუკოზის ზემოქმედების ქვეშ მოექცა საბოლოო კონცენტრაციაზე დაახლოებით 20%-ით მაღალი კონცენტრაციით, მე-3 ფაზაში საბოლოო კონცენტრაციაზე 50%-ის ნაცვლად, რის შედეგადაც გლუკოზის საბოლოო კონცენტრაცია 20.8% და 41.6% იყო. შერეული ნიმუშები გაანალიზდა მე-3 ეტაპზე იმავე დროის ინტერვალში.
გლუკოზის განზავების თითოეული სერიის პირველ ეტაპზე აღებული იქნა 30 ნიმუში, რადგან ეს იყო პილოტური კვლევისთვის შესაფერისი ნიმუშის ზომა [9]. თითოეული ფაზის ბოლოს (პირველი ფაზის ჩათვლით), შეაფასეთ ნიმუშის ზომის ადეკვატურობა ფორმულის გამოყენებით, რომელიც გამოიყენება ერთ პოპულაციაში უწყვეტი შედეგის ცვლადის საშუალო მნიშვნელობის შესაფასებლად საჭირო ნიმუშის ზომის დასადგენად. ფორმულა n = Z2 x SD2 /E2. ამ განტოლებაში Z არის Z-ქულა, SD არის სტანდარტული გადახრა და E არის სასურველი შეცდომა [10]. ჩვენი ალფა არის 0.05, რაც შეესაბამება 1.96 Z მნიშვნელობას და ველოდებით 5 შეცდომას (პროცენტებში). ამიტომ, ჩვენ ვხსნით n = (1.962 x SD2)/52-ს. შედეგებმა აჩვენა, რომ თითოეული ეტაპისთვის საჭირო ნიმუშის ზომა უფრო მცირე იყო, ვიდრე შეგროვებული ფაქტობრივი რაოდენობა.
1, 3 და 4 პერიოდებში, ერთზე მეტი გლუკოზის კონცენტრაციის გამოყენებით, სხვადასხვა გლუკოზის კონცენტრაციის ეფექტი გაანალიზდა 0 დროსა და თითოეულ შემდგომ დროს შორის ფრაქციული ცვლილების შედარებით (ფაზა 1 15 წუთში, პერიოდი 3 15 წუთში) და ოთხი 15 წამში, შემდეგ ყოველ ორ წუთში). თითოეული დროის პერიოდის ცვლილების სიჩქარე შედარებული იქნა მან-უიტნის U-ტესტის გამოყენებით, რადგან მონაცემები არ მიჰყვებოდა ნორმალურ განაწილებას, როგორც ეს განსაზღვრულია შაპირო-ვილკის ნორმალურობის ტესტით. ვინაიდან რამდენიმე ჯგუფის (ხუთი) 1-დან 1-მდე ანალიზი ჩატარდა პირველ, მესამე და მეოთხე ეტაპზე (სულ ხუთი), ჩატარდა ბონფერონის კორექცია სასურველი ალფა მნიშვნელობის ≤0.01-მდე, მაგრამ არა ≤0.05-მდე დასარეგულირებლად.
თრომბოციტების რაოდენობის შემცირება ჰიპერტონული დექსტროზის ყველა კონცენტრაციის დროს და MPV-ის ზრდა PRP თრომბოციტებში >12.5%-იანი დექსტროზის კონცენტრაციის დროს: PRP თრომბოციტების რაოდენობა გაიზარდა ერთიდან ხუთჯერ კონცენტრაციამდე საწყის მთლიან სისხლთან შედარებით, მეთოდის მიხედვით განსხვავდებოდა (არ არის ნაჩვენები). თრომბოციტების რაოდენობის შემცირება ჰიპერტონული დექსტროზის ყველა კონცენტრაციის დროს და MPV-ის ზრდა PRP თრომბოციტებში >12.5%-იანი დექსტროზის კონცენტრაციის დროს: PRP თრომბოციტების რაოდენობა გაიზარდა ერთიდან ხუთჯერ კონცენტრაციამდე საწყის მთლიან სისხლთან შედარებით, მეთოდის მიხედვით განსხვავებული (არ არის ნაჩვენები). Уменьшение количества тромбоцитов при всех концентрациях гипертонической декстрозы и увеличение MPV тромбоцитах PRP დექსტროციების კონცენტრირების დროს > 12,5%: ქოლიчество тромбоцитов PRP 1-5 разной кровнени. მეთოდი (не показано). თრომბოციტების რაოდენობის შემცირება დექსტროზის ყველა ჰიპერტონული კონცენტრაციის დროს და MPV-ის მომატება PRP თრომბოციტებში >12.5%-იანი დექსტროზის კონცენტრაციის დროს: PRP თრომბოციტების რაოდენობა გაიზარდა 1-5-ჯერ საწყის მთლიან სისხლთან შედარებით, მეთოდის მიხედვით (არ არის ნაჩვენები). ).მეტი 12.5%增加：与基线全血相比，PRP 血小板计数从浓度的1 倍上升到5 倍，因方法輌 12.5%-ზე მეტი გლუკოზის კონცენტრაციის დროს, გლუკოზის მაღალი კონცენტრაცია ამცირებს სისხლის რაოდენობას, PRP-ის სისხლის MPV იზრდება: 与基线全血-თან შედარებით, PRP-ის სისხლის რაოდენობა იზრდება კონცენტრაციასთან შედარებით 1-დან 5-ჯერ (აღწერილი არ არის). При концентрациях глюкозы >12,5% все концентрации гипертонической глюкозы შემცირებული თრომბოციტები, და MPV აძლიერებს თრომბოციტებს PRP: კოლიчество тромбоцитов PRP იზრდება 1-დან 5-დან 5-დან концентрациями цельной крови, в зависи од метода (не описано ). >12.5%-იანი გლუკოზის კონცენტრაციის დროს, ჰიპერტენზიულ პაციენტებში გლუკოზის ყველა კონცენტრაციამ შეამცირა თრომბოციტების რაოდენობა და გაზარდა MPV PRP თრომბოციტებში: PRP თრომბოციტების რაოდენობა გაიზარდა 1-დან 5-ჯერ სისხლში საწყის კონცენტრაციებთან შედარებით, მეთოდის მიხედვით (როგორც აღწერილია).სურათი 1 გვიჩვენებს, რომ თრომბოციტების რაოდენობა წყალში განზავების შემდეგ თითქმის 75%-ით შემცირდა და გლუკოზის სხვადასხვა კონცენტრაციით 15 წუთიანი განზავების შემდეგ 20-30%-ით, საბაზისო PRP-თან და მოცულობის მიხედვით კორექტირებულ 1:1 განზავებასთან შედარებით (1- k1 მოცულობის კორექტირებით). k -1 გამოყვანა).1 გამოყვანა).
თითოეულ განზავებაში უჯრედების რაოდენობა გამოისახება განზავებამდე არსებული საწყისი რაოდენობის წილადად.
MPV მინიმალურად შემცირდა PRP-ის წარმოების დროს, განზავების კონცენტრაციების შემდგომი ცვლილების გარეშე 12.5%-მდე წყალში ან გლუკოზაში (მათ შორის 25%-იანი PRP გლუკოზის ნარევები) და გაიზარდა 20%-ზე მეტით 50%-იან გლუკოზის ხსნარში განზავების შემდეგ (სურ. 2). ამის საპირისპიროდ, ერითროციტებმა H2O-ს გარდა სხვა განზავების დროს მოცულობის მნიშვნელოვანი ცვლილება არ აჩვენეს.
თითოეულ განზავებაში უჯრედების საშუალო მოცულობა გამოისახება განზავებამდე არსებული საწყისი მოცულობის პროცენტულად.
თრომბოციტების რაოდენობის მსგავსი, მაგრამ ნაკლებად გამოხატული შემცირება და გულ-სისხლძარღვთა რეაქციის (CVR) ზრდა დაფიქსირდა 50%-იანი გლუკოზის შემცველი ფორმულის მქონე ძუძუს კიბოს პაციენტებში. ცხრილი 2 ადარებს 50%-იან დექსტროზაში განზავებულ მთლიან სისხლში უჯრედების რაოდენობას და მოცულობას 1 ფაზის PRP მონაცემებთან, რომლებიც განზავებულია 50%-იან დექსტროზაში. ერითროციტების რაოდენობისა და ერითროციტების MCV-ის ცვლილებები აშკარა არ იყო და ჩვენი ყურადღების ცენტრში არ იყო.
SD = სტანდარტული გადახრა, MD = ჯგუფებს შორის საშუალო სხვაობა, SE = საშუალო სხვაობის სტანდარტული გადახრა, RBC = ერითროციტები, PLT = თრომბოციტები, PRP = თრომბოციტებით მდიდარი პლაზმა, WB = მთლიანი სისხლი
WB-ში D50W-ის დამატების შემდეგ, განზავებით კორექტირებული თრომბოციტების დანაკარგის პროცენტული მაჩვენებელი იყო 7.7% (310±73 286±96-ის წინააღმდეგ), D50W-ში PRP განზავების შემთხვევაში კი ეს მაჩვენებელი 17.8%-ს შეადგენდა (664±348 544±277-ის წინააღმდეგ). MPV WB გაიზარდა 16.8%-ით (10.1 ± 0.5-დან 11.8 ± 0.6-მდე), ხოლო MPV PRP გაიზარდა 26%-ით (9.2 ± 0.8 11.6 ± 0.7-ის წინააღმდეგ). მიუხედავად იმისა, რომ PRP-ის გამოყენებისას თრომბოციტების რაოდენობის შემცირებისა და MPV-ის ზრდის საშუალო განსხვავებები მნიშვნელოვნად მეტი იყო, WB-ის ფარგლებში თრომბოციტების რაოდენობის შემცირების ცვლილებები თითქმის მნიშვნელოვანი იყო (310 ± 73-დან 286 ± 96-მდე (-7.7%); p = .06) და MPV-ის ზრდა მნიშვნელოვანი იყო (10.1 ± 0.5-დან 11.8 ± 0.6-მდე (+16.8) p < .001). მიუხედავად იმისა, რომ PRP-ის გამოყენებისას თრომბოციტების რაოდენობის შემცირებისა და MPV-ის ზრდის საშუალო განსხვავებები მნიშვნელოვნად მეტი იყო, WB-ის ფარგლებში თრომბოციტების რაოდენობის შემცირების ცვლილებები თითქმის მნიშვნელოვანი იყო (310 ± 73-დან 286 ± 96-მდე (-7.7%); p = .06) და MPV-ის ზრდა მნიშვნელოვანი იყო (10.1 ± 0.5-დან 11.8 ± 0.6-მდე (+16.8) p < .001).მიუხედავად იმისა, რომ თრომბოციტების რაოდენობის შემცირებისა და CVR-ის ზრდის საშუალო განსხვავებები მნიშვნელოვნად მეტი იყო PRP-ის გამოყენებისას, თრომბოციტების რაოდენობის შემცირების ცვლილებები WB-ის ფარგლებში თითქმის მნიშვნელოვანი იყო (310 ± 73-დან 286 ± 96-მდე (-7.7%); p = 0.06).увеличение MPV было значительным (10,1 ± 0,5-დან 11,8 ± 0,6 (+16,8) p <0,001). MPV-ის ზრდა მნიშვნელოვანი იყო (10.1 ± 0.5-დან 11.8 ± 0.6-მდე (+16.8) p < 0.001).尽管PRP 在血小板计数减少和MPV 增加方面的平均差异显着更大，但WB内血小板计数减少的变化几乎是显着的（310 ± 73 至286 ± 96 (-7.7%)；p = .06）和V的增加是显着的（10.1 ± 0.5 到11.8 ± 0.6 (+16.8) p < .001).尽管 PRP 在 血小板 计数 和 和 增加 方面 的 平均 差异 显着 大 朌 但 佡谆 冄减少 的 几乎 是 显着 的 （（（310 ± 73 至 286 ± 96 (-7.7%) ； p = .06）和MPV 的嘯0 ± 0,5 到 11,8 ± 0,6 (+16.8) p < .001).მსოფლიო ბანკში თრომბოციტების რაოდენობის შემცირების ცვლილება თითქმის მნიშვნელოვანი იყო (310 ± 73-დან 286 ± 96-მდე (-7.7%); p = 0.06), თუმცა PRP-ს მნიშვნელოვნად უფრო დიდი საშუალო განსხვავებები ჰქონდა თრომბოციტების რაოდენობის შემცირებასა და MPV-ის ზრდაში, ხოლო MPV-ის ზრდა მნიშვნელოვანი იყო.(10,1 ± 0,5-დან 11,8 ± 0,6-მდე (+16,8) р < 0,001). (10.1 ± 0.5-დან 11.8 ± 0.6-მდე (+16.8) p < 0.001).
MPV-ის მნიშვნელოვანი ცვლილების დასაფიქსირებლად საჭირო იყო გლუკოზის 20%-იანი საბოლოო კონცენტრაცია, თუმცა MPV-ის ცვლილება უფრო გამოხატული იყო 25%-იანი საბოლოო კონცენტრაციის დროს. თრომბოციტების დაკარგვა სტაბილიზდა საწყისი შემცირების შემდეგ. ჩვენ აღვნიშნეთ CVR-ის საწყისი მკვეთრი შემცირება, თუმცა, CVR სწრაფად აღდგა გლუკოზის 25%-იანი საბოლოო კონცენტრაციის დროს, რაც მნიშვნელოვნად მაღალი იყო, ვიდრე CVR დონეები, რომლებიც დაფიქსირდა გლუკოზის 20%-იანი და 15%-იანი საბოლოო კონცენტრაციების დროს (სურ. 3 და ცხრილი 3-ის მარცხნივ; დაჩრდილული უჯრები). მიუთითებს p-მნიშვნელობებზე ≤ ალფა ბონფერონის 0.01 კორექციით). ასევე იყო PLT-ის რაოდენობის საწყისი მკვეთრი ვარდნა, რომელიც დაფიქსირდა 0-15 წმ-ის საწყის ფაზაში და შემდეგ დარჩა სტაბილური (15 წმ-დან 30 წუთამდე; ცხრილი 4-ის მარცხნივ).
სისხლში გლუკოზის სხვადასხვა კონცენტრაციის დამატებამ თავდაპირველად გამოიწვია MPV-ის სწრაფი შემცირება, რასაც მოჰყვა კონცენტრაციაზე დამოკიდებული აღდგენა 20%-ზე მეტით. ლეგენდაში ნაჩვენებია გლუკოზის კონცენტრაცია განზავების შემდეგ. D15, D20 და D25 განზავება ჩატარდა 1:1 თანაფარდობით. D21 და D41 განზავება ჩატარდა 1:5 თანაფარდობით.
ცხრილი 4 აჩვენებს თრომბოციტების რაოდენობის ცვლილებას ჰიპერტონულ გლუკოზაში განზავებისას. ჩვენ დავაკვირდით დოზადამოკიდებულ კავშირს PLT რაოდენობის მყისიერ შემცირებას შორის 1:1 განზავებისას და 1:5 განზავებისას. 1:1 განზავების ერთ ჯგუფში 1:5 განზავებებთან შედარებით, 1:1 ჯგუფში თრომბოციტების რაოდენობის მყისიერი შემცირება დაფიქსირდა 66±48,000 (23%)-ზე ნაკლებით, 1:5 ჯგუფში კი ეს მაჩვენებელი 99±69,000 (37%) იყო, p = 0.014. პირველი გაზომვის წერტილში საწყისი კლების შემდეგ, თრომბოციტების რაოდენობა, როგორც გლუკოზის პროცენტული მაჩვენებელი, სტაბილიზდა (სურ. 4).
როდესაც მთლიანი სისხლი გლუკოზას 1:1 თანაფარდობით ემატება, თრომბოციტების რაოდენობა დაახლოებით 25%-ით მცირდება. თუმცა, როდესაც მთლიანი სისხლი 1:5 თანაფარდობით ემატება, შემცირება გაცილებით დიდი იყო - დაახლოებით 50%.
41%-იანმა გლუკოზამ MPV უფრო სწრაფად და მკვეთრად გაზარდა, ვიდრე 25%-მა ან 21%-მა. MPV-ს შედეგები ნაჩვენებია ნახაზ 3-ში. ყველა სხვა განზავებისას, 50%-იანი გლუკოზის დამატების შემდეგ MPV-ს დაუყოვნებლივი საწყისი შემცირება არ დაფიქსირებულა. 25%-იანი გლუკოზის გამოყენებისას (გლუკოზის კონცენტრაცია საბოლოო განზავებაზე 20.8%), MPV-ს ცვლილება შედარებადი იყო 20%-იანი გლუკოზის ცვლილებასთან 1:1 განზავებისას (ნახ. 3). მიუხედავად იმისა, რომ MPV-ს ცვლილებები თავდაპირველად უფრო დიდი იყო 41%-იანი შერეული კონცენტრაციის დროს, ვიდრე 25%-იანი, MPV-ს სხვაობა 41%-სა და 25%-ს შორის 16 წუთის შემდეგ აღარ იყო მნიშვნელოვანი (ცხრილი 3, მარჯვნივ). ასევე საინტერესოა, რომ 25%-იანმა გლუკოზამ MPV უფრო ეფექტურად გაზარდა, ვიდრე 20.8%-მა.
ამ ინ ვიტრო კვლევამ ნაწილობრივ დაადასტურა ჩვენი ჰიპოთეზა. მან აჩვენა თრომბოციტების ნაწილობრივი ლიზისის პოტენციალი დექსტროზის შერევით, თრომბოციტების სწრაფი ადაპტაცია ექსტრემალურ ჰიპერტონიულობასთან და MPV-ის მნიშვნელოვანი ზრდა ჰიპერტონული დექსტროზის 25%-ზე მეტი კონცენტრაციის საპასუხოდ. მან აჩვენა თრომბოციტების ნაწილობრივი ლიზისის პოტენციალი დექსტროზის შერევით, თრომბოციტების სწრაფი ადაპტაცია ექსტრემალურ ჰიპერტონიულობასთან და MPV-ის მნიშვნელოვანი ზრდა ჰიპერტონული დექსტროზის 25%-ზე მეტი კონცენტრაციის საპასუხოდ. On pokasal potencialьnыy частичный лизис тромбоцитов примесью декстрозы, быструю аккомодацию тромбоцитов до экстремального гипертонуса и значительное повышение MPV в ответ на хипертоническую концентрация 2% >. მან აჩვენა თრომბოციტების ნაწილობრივი ლიზისის პოტენციალი დექსტროზის ზემოქმედებით, თრომბოციტების სწრაფი ადაპტაცია უკიდურეს ჰიპერტონიულობამდე და MPV-ის მნიშვნელოვანი ზრდა დექსტროზის ჰიპერტონული დონის >25%-ზე მეტის საპასუხოდ.它显示出通过葡萄糖混合物潜在的部分血小板溶解，血小板快速适应极端高渗，以及响应> 25% 浓度的高渗葡萄糖时MPV 显着上升。它 显示 出 通过 葡萄糖 潜在 的 部分 血小板 溶解 血小板 快速 适庯 极的响应> 25% 浓度 高渗 葡萄糖 时 时 mpv 显着。。。。。 Он показывает потенциальный частичный лизис тромбоцитов смесями со глюкозой, быструю адаптацию тромбоцитов к экстремальному гипертонусу и значительное უвеличение MPV in otve on concentraciy gl >25%. ის აჩვენებს თრომბოციტების პოტენციურ ნაწილობრივ ლიზისს გლუკოზის ნარევებით, თრომბოციტების სწრაფ ადაპტაციას ექსტრემალურ ჰიპერტონიულობასთან და MPV-ის მნიშვნელოვან ზრდას >25%-იანი ჰიპერტონიული გლუკოზის საპასუხოდ.საწყისი მატება მაქსიმალური იყო გლუკოზის 41.6%-იანი ზემოქმედებისას, თუმცა MPV-ს მატება გლუკოზის 25%-ს მიუახლოვდა ზემოქმედების შემდეგ დაახლოებით 20 წუთის შემდეგ.
თრომბოციტების კონცენტრაციაზე გლუკოზა მოქმედებს. ჩვენ შევნიშნეთ, რომ PLT-ის რაოდენობა გლუკოზის ყველა განზავების დროს შემცირდა. PRP სერიის H2O (0%) განზავებებში თრომბოციტების რაოდენობის მკვეთრი ვარდნა შესაძლოა ოსმოსურ ლიზს უკავშირდებოდეს. ალტერნატიულად, ეს შეიძლება იყოს თრომბოციტების შედედებით გამოწვეული არტეფაქტი, მაგრამ ეს ეწინააღმდეგება ამ განზავების დროს MPV ცვლილების არარსებობას. ეს აღმოჩენა ნიშნავს, რომ ზოგიერთი თრომბოციტი ძალიან მგრძნობიარეა ჰიპოოსმოლარობის მიმართ.
გლუკოზის ყველა 1:1 განზავებისას, PLT-ის რაოდენობა შემცირდა 20-30%-ით, თუნდაც D5W-ით (ჰიპოტონური 252 მოსმ-ზე), რაც შეიძლება მიუთითებდეს გლუკოზის სპეციფიკურ არაოსმოსურ ეფექტზე, რადგან როგორც PLT, ასევე MPV უცვლელი დარჩა გლუკოზის კონცენტრაციის სამჯერადი ზრდისას D5W-დან D25W-მდე. სინამდვილეში, PLT კონცენტრაციები ოდნავ იზრდებოდა ოსმოლარობის ზრდასთან ერთად.
PLT-ის შემცირება 1:1 და 1:5 განზავებებს შორის ნიშნავს, რომ გახსნის ეფექტი დამოკიდებულია გლუკოზის საწყის და საბოლოო კონცენტრაციაზე. თუ ის მხოლოდ საწყის კონცენტრაციაზე იქნებოდა დამოკიდებული, მაშინ მოსალოდნელი იქნებოდა PLT-ის შემცირებაში სხვაობის დანახვა 1:1 კონცენტრაციებს შორის. თუმცა, ჩვენ ასე არ ვფიქრობთ. თუ ლიზისის ეფექტი მხოლოდ გლუკოზის საბოლოო კონცენტრაციაზეა დამოკიდებული, მაშინ დიდ განსხვავებას არ ველით 20%-იან 1:1 განზავებასა და 20.8%-იან 1:5 განზავებას შორის. და მაინც, ჩვენ ეს შევძელით.
თუ თრომბოციტების ლიზისის გამო თრომბოციტების დაკარგვა ხდება, წარმოიქმნება ნაწილობრივი ლიზატი, რის შემდეგაც ციტოკინები და ზრდის ფაქტორები გამოიყოფა უჯრედგარე გარემოში. რამდენიმე კვლევამ აჩვენა, რომ თრომბოციტების ლიზატი თითქმის ისეთივე ეფექტურია, როგორც PRP, როგორც პროლიფერაციული ხსნარი [11]. თავად PRP პროლიფერაციის სამკურნალოდ ეფექტური ხსნარია [12-14].
არააქტიური თრომბოციტები ცირკულირებენ დისკის სახით, რომელიც გამაგრებულია რამდენიმე შიდა სტრუქტურით. აქტივაციის დროს ისინი იღებენ უფრო სფერულ ან ამებას ფორმას, რაც იწვევს მოცულობის ზრდას. მოცულობის ზრდა მოითხოვს ზედაპირის ფართობის ზრდას, რაც ღია მილაკოვანი სისტემის (OCS) ექსტრუზიის და მემბრანაში ეგზოციტური გრანულების დამატების შედეგია. ჯერ კიდევ გასარკვევია, ჰიპერტონული გლუკოზით გამოწვეული MPV-ის ზრდა მოიცავს თუ არა ამ მექანიზმებიდან ერთს თუ ორივეს, მაგრამ თუ ეს უკანასკნელია, მაშინ MPV-ის ზრდა დეგრანულაციაზე მიუთითებს.
ამ კვლევამ აჩვენა, რომ PRP-ზე ან მთლიანი სისხლის თრომბოციტებზე გლუკოზის მაღალი კონცენტრაციის ზემოქმედებამ 15 წუთის განმავლობაში გამოიწვია MPV-ის ზრდა, შესაბამისად, 25% და 41.6%-იანი გლუკოზის კონცენტრაციით.
თრომბოციტების MPV-ის ზრდა შესაძლოა გამოწვეული იყოს კალციუმის შემოდინების საპასუხოდ მიმდებარე მიკრომილაკების გაფართოებით. ლიუ და სხვ. ნაჩვენებია, რომ გლუკოზა კალციუმის შემოდინებას თრომბოციტების TRPC6 არხის მეშვეობით შუამავლობს [6]. ჩვენი ჰიპოთეზაა, რომ გლუკოზა იწვევს მიკრომილაკების ჩახლართულობის მოდუნებას, რაც იწვევს MPV-ის ზრდას და თრომბოციტების სენსიბილიზაციას და/ან აქტივაციას. თუმცა, ჩვენი შედეგებით თუ ვიმსჯელებთ, ეს მხოლოდ ნაწილია. ჩვენს ტესტებში, D25W-ზე დაბალი კონცენტრაციის არცერთმა კონცენტრაციამ არ გამოიწვია MPV-ის ზრდა. იმის გათვალისწინებით, რომ ჩვენ არ გამოგვიცდია გლუკოზის კონცენტრაციების 12.5%-დან 25%-მდე ზემოქმედება, ჩვენი 1 ფაზის შედეგები მიუთითებს, რომ გლუკოზის კონცენტრაციების ამ დიაპაზონში შეიძლება არსებობდეს ზღვარი, რომელიც იწვევს MPV-ის ზრდას. მე-3 და მე-4 ეტაპებზე შემდგომმა ტესტირებამ აჩვენა, რომ 20-25% გლუკოზა, როგორც ჩანს, ამის ზღვარია, მაგრამ გაურკვეველი რჩება, თუ რატომ.
ცენტრიფუგირების შემდეგ ასევე დავაკვირდით MPV-ის დაახლოებით 9%-იან შემცირებას. გაურკვეველია, გამოწვეულია თუ არა MPV-ის ეს შემცირება ცენტრიფუგის ერითროციტების ფენაში მოქცეული უფრო დიდი და მკვრივი თრომბოციტებით. ეს დაკვირვება შეიძლება მნიშვნელოვანი იყოს კლინიცისტებისთვის, რადგან შეიძლება გულისხმობდეს, რომ PRP თრომბოციტები წარმოადგენენ WB თრომბოციტების უფრო მცირე და ნაკლებად მკვრივ ქვეჯგუფს.
წინა კვლევაში ჩვენ ვაჩვენეთ, რომ PRP-ის ხელით მომზადება იაფია [8]. თუ გლუკოზა ქსოვილის თრომბოციტებს ან PRP-ს სენსიბილიზაციას უკეთებს, რაც მათ აქტივაციის მიმართ უფრო მგრძნობიარეს ხდის, ან თუ PRP ნაწილობრივი ლიზატის თვისებებით წარმოიქმნება, ამან შეიძლება გააძლიეროს რეგენერაცია და შეამციროს თერაპიის საჭიროება. ამიტომ, PRP-ისა და მაღალკონცენტრირებული გლუკოზის კომბინაცია შეიძლება უფრო ეკონომიური იყოს, ვიდრე PRP ან მხოლოდ გლუკოზა.
ჩვენს კვლევას რამდენიმე ნაკლი აქვს. პირველ რიგში, ჩვენ ვიყენებთ PRP-ს, რომელიც მიღებულია რამდენიმე სხვადასხვა მეთოდით. ​​ამან შეიძლება გამოიწვიოს ურთიერთგამომრიცხავი შედეგები. მეორეც, ჩვენ ვერ შევძელით ჩვენი ნიმუშების ბიოქიმიური ანალიზის ჩატარება, რათა უფრო ზუსტად დავადგინოთ, მოხდა თუ არა თრომბოციტების აქტივაცია. ჩვენ გვსურს გავზომოთ P-სელექტინი, თრომბოციტების ფაქტორი 4, მონოციტური თრომბოციტების აგრეგატები ან თრომბოციტების აქტივაციის სხვა მარკერები, რათა უკეთ გავიგოთ ალფა გრანულების დეგრანულაციის ხარისხი ან არსებობა, მაგრამ ეს ამ კვლევის ფარგლებს სცილდება. მესამე, ჩვენ ვერ შევძელით ელექტრონული მიკროსკოპიით ან სხვა მეთოდებით დაგვედასტურებინა, რომ გლუკოზის ზემოქმედების ქვეშ მყოფ თრომბოციტებში MPV-ის ზრდა გამოწვეული იყო მიკრომილაკების ჩახლართულობაზე ზემოქმედებით.
25%-იან გლუკოზასთან ერთად გლუკოზის ან ჰიპერტონული გლუკოზის ნარევებმა გაზარდა MPV, რაც თრომბოციტების აქტივაციის დაწყებაზე მიუთითებს, თუმცა ამ კვლევამ არ აჩვენა აგრეგაციის ან დეგრანულაციის პროგრესირება. ჰიპერტონული გლუკოზის ნარევმა გამოიწვია თრომბოციტების დაკარგვა, რაც შესაძლოა ლიზურ ეფექტს წარმოადგენდეს. თრომბოციტების ნაწილობრივმა აქტივაციამ ან ლიზისმა შეიძლება გამოიწვიოს ქსოვილების რეგენერაცია თრომბოციტების ინექციის შემდეგ. გაურკვეველია, რა კლინიკურ შედეგებამდე შეიძლება მიგვიყვანოს ეს ცვლილებები. შემდგომმა კვლევებმა აჩვენა აქტივაციის ან ლიზისის უფრო ზუსტი გაზომვები და შეაფასეს ჰიპერტონული გლუკოზის ნარევების გლუკოზასთან ან PRP-თან ერთად გამოყენების სხვადასხვა კლინიკური ეფექტი.
გლუკოზის პროლიფერაციული თერაპია არის მარტივი და იაფი რეგენერაციული თერაპია, რომელიც სწრაფად ფართოვდება და მხარს უჭერს კლინიკურ კვლევებს. ეს კვლევა მიუთითებს ფიზიოლოგიურ მექანიზმზე, რომელიც, დადასტურების შემთხვევაში, დაგვეხმარება პროლიფერაციული თერაპიის რეგენერაციული მექანიზმის ნაწილის გაგებაში.
ბიოსამედიცინო და ჯანდაცვის ინფორმატიკა მისურის უნივერსიტეტში, კანზას სიტის სამედიცინო სკოლა, კანზას სიტი, აშშ
ადამიანი სუბიექტები: ამ კვლევაში მონაწილე ყველა მონაწილემ მისცა ან არ მისცა თანხმობა. უჯრედული მედიცინის საერთაშორისო საზოგადოებამ გასცა ICMS-2017-003 დამტკიცება. შემდეგი პროტოკოლი დამტკიცებულია უჯრედული მედიცინის საერთაშორისო საზოგადოების ინსტიტუციური მიმოხილვის საბჭოს მიერ შემდგომი გამოყენებისთვის: სათაური: თრომბოციტებით მდიდარი პლაზმის პრეპარატის მოსავლიანობის გაანგარიშება სისხლის საერთო ანალიზის თრომბოციტების საბაზისო რაოდენობის მიხედვით. ცხოველური სუბიექტები: ყველა ავტორმა დაადასტურა, რომ კვლევაში არცერთი ცხოველი ან ქსოვილი არ მონაწილეობდა. ინტერესთა კონფლიქტი: ICMJE-ს ერთიანი გამჟღავნების ფორმის შესაბამისად, ყველა ავტორი აცხადებს შემდეგს: გადახდის/მომსახურების ინფორმაცია: ყველა ავტორი აცხადებს, რომ წარდგენილი ნაშრომისთვის არცერთი ორგანიზაციისგან არ მიუღია ფინანსური მხარდაჭერა. ფინანსური ურთიერთობები: ყველა ავტორი აცხადებს, რომ ამჟამად ან ბოლო სამი წლის განმავლობაში არ აქვს ფინანსური ურთიერთობები არცერთ ორგანიზაციასთან, რომელიც შეიძლება დაინტერესებული იყოს წარდგენილი ნაშრომით. სხვა ურთიერთობები: ყველა ავტორი აცხადებს, რომ არ არსებობს სხვა ურთიერთობები ან აქტივობები, რომლებმაც შეიძლება გავლენა მოახდინონ წარდგენილ ნაშრომზე.
ჰარისონ ტე.ე., ბოულერ ჯ., რივზ კ. და სხვ. (2022 წლის 17 მაისი) გლუკოზის გავლენა თრომბოციტების რაოდენობასა და მოცულობაზე: შედეგები რეგენერაციული მედიცინისთვის. Cure 14(5): e25081. doi:10.7759/cureus.25081
© საავტორო უფლება 2022 ჰარისონი და სხვები. ეს არის ღია წვდომის სტატია, რომელიც გავრცელებულია Creative Commons Attribution License CC-BY 4.0-ის პირობებით. შეუზღუდავი გამოყენება, გავრცელება და რეპროდუცირება ნებისმიერ მედიაში დაშვებულია, იმ პირობით, რომ მითითებული იქნება ორიგინალი ავტორი და წყარო.