Қоректік заттарды алу және тарату жәндіктердің қоректенуін және өмір тарихының ерекшеліктерін біріктіреді. Өмірдің әртүрлі кезеңдеріндегі белгілі бір қоректік заттардың жетіспеушілігін өтеу үшін, жәндіктер бұл қоректік заттарды қосымша тамақтандыру арқылы, мысалы, шалшық деп аталатын процесте омыртқалылардың секрециясымен қоректену арқылы ала алады. Сондықтан масалардың Anopheles arabin және nutrinis болуы қажет. метаболизм және көбею үшін де. Бұл зерттеудің мақсаты Ан. қоректік заттарды алу үшін сиыр зәріндегі arabiensis қозуы өмір тарихының сипаттамаларын жақсартады.
Қауіпсіз екеніне көз жеткізіңіз.arabiensis жаңа, 24 сағаттық, 72 сағаттық және 168 сағаттық ескі сиыр зәрінің иісіне тартылды, ал қожайын іздеуші және қанмен қоректенетін (48 сағаттық қаннан кейінгі тамақ) аналықтар Y-түтік олфактометрде өлшенді, содан кейін жүкті аналықтардың химиялық талдамасы бағаланды. Сиыр зәріндегі биоактивті қосылыстарды барлық төрт жас класында анықтау үшін қолданылады. Биоактивті қосылыстардың синтетикалық қоспалары Y-түтік және далалық сынақтарда бағаланды. Сиыр зәрін және оның негізгі азоты бар қосылыс мочевинасын безгек тасымалдаушылары үшін әлеуетті қосымша диеталар ретінде зерттеу үшін, аналық зәрдің мөлшері мен өмір сүру тарихының көрсеткіштері өлшенді. сіңірілген мочевина бағаланды. Тамақтанғаннан кейін аналықтардың тірі қалуы, байланған ұшуы және көбеюі бағаланды.
Үй иесінің қаны мен қорегін іздеңіз. Зертханалық және далалық зерттеулерде арабтар жаңа және ескі сиыр зәрінің табиғи және синтетикалық хош иісіне тартылды. Жүкті әйелдер уылдырық шашатын жерлерде сиыр зәрінің реакциясына немқұрайлы қарады. Қожайын іздеуші және қан соратын аналықтар сиырдың зәрі мен мочевина қорын белсенді түрде сіңіреді. ұшуға, өмір сүруге немесе көбеюге арналған физиологиялық күй.
Anopheles arabinis жақсартылған өмір тарихы сипаттамалары үшін сиыр зәрін алу және бөлу. Сиыр зәрін қосымша азықтандыру күнделікті өмір сүру және векторлық тығыздықты арттыру арқылы тікелей векторлық сыйымдылыққа әсер етеді және жанама түрде ұшу белсенділігін өзгерту арқылы әсер етеді, сондықтан болашақ модельдерде қарастырылуы керек.
Қоректік заттарды алу және тарату жәндіктердің қоректену және өмір тарихының сипаттамаларын біріктіреді [1,2,3]. Жәндіктер азық-түліктің қолжетімділігі мен қоректік заттардың қажеттіліктеріне негізделген тағамды таңдауға және алуға және өтемдік азықтандыруды жүзеге асыруға қабілетті [1, 3]. Қоректік заттардың таралуы өмір тарихына байланысты және диетаның әртүрлі сатыларында өмір сүру сапасы мен санына әртүрлі талаптарға әкелуі мүмкін [1,2]. Белгілі қоректік заттардың жетіспеушілігі үшін жәндіктер бұл қоректік заттарды балшықпен, омыртқалы жануарлардың әртүрлі экскременттері мен секрецияларымен және өлекселер сияқты қосымша азықтандыру арқылы ала алады, бұл шалшық деп аталатын процесс [2]. Көбелек пен көбелектің алуан түрлері бірінші кезекте сипатталғанымен, суару саңылаулары сонымен қатар қоректену тәртібіне де әсер етуі мүмкін. денсаулық және басқа да өмір тарихының белгілері [2, 4, 5, 6] ,7]. Безгек масасы Anopheles gambiae sensu lato (sl) «тамақтанбаған» ересек [8] ретінде пайда болады, сондықтан суару оның өмір сүру тарихында маңызды рөл атқаруы мүмкін, бірақ бұл мінез-құлық осы уақытқа дейін маңызды құралды пайдалану ретінде назардан тыс қалды. назар аударуды қажет етеді, өйткені бұл маңызды эпидемиологиялық салдарға әкелуі мүмкін.
Ересек анафелес масаларының аналық масаларының азотты тұтынуы личинкалық кезеңнен тасымалданатын төмен калориялық қорларға және қан ұнын тиімсіз пайдалануына байланысты шектелген [9]. Ann.gambiae sl аналықтары әдетте оны қосымша қан тағамымен толықтыру арқылы өтейді [10, 11], сөйтіп, масалардың көбірек ауруын жұқтыру қаупі бар. басқа жәндіктер [2] көрсеткендей, масалар омыртқалылардың экскрециясын қосымша қоректендіретін азотты қосылыстарға бейімделу мен ұшу маневрлік қабілетін арттыру үшін пайдалана алады.Осыған байланысты, An.The Arapian A kompleksi, a newged cosmetics, aurged coslew slesl және gambian slexel slesl құрамындағы бауырлас түрлердің бірінің күшті және айқын тартымдылығы. [12,13,14], қызық. Anopheles arabinis иесінің қалауы бойынша оппортунистік болып табылады және ірі қара малмен байланысып, онымен қоректенетіні белгілі. Сиыр зәрі азотты қосылыстарға бай ресурс болып табылады, мочевина жаңа зәрдегі жалпы азоттың 50-95% құрайды [15, Anopheles arabinis, cos 16] бұл ресурстар 24 сағат ішінде азотты қосылыстардың күрделілігін төмендетуге мүмкіндік береді [15]. Органикалық азоттың төмендеуіне байланысты аммиактың жылдам өсуімен сілтілеуші ​​микроорганизмдер (олардың көпшілігі масалар үшін улы қосылыстар шығарады) [15] өркендейді, олар әйел болуы мүмкін Ann.arabiensis [13] немесе одан азырақ тартылады. 14].
Бұл зерттеуде қожайын және қанмен қоректенетін Ans ізделді. Оның бірінші гонадотропин циклі кезінде arabiensis зәрді араластыру арқылы азотты қосылыстарды, соның ішінде мочевинаны алу үшін бағаланды. Әрі қарай, аналық масалардың осы әлеуетті қоректік ресурсты қалай бөлетінін бағалау үшін бірқатар эксперименттер жүргізілді. және қартайған сиыр зәрі олардың иесі және қанмен қоректенетін Ан үшін сенімді анықтамалар беретінін анықтау үшін бағаланды. Осы әлеуетті қоректік ресурсты іздестіру барысында arabiensis байқалған дифференциалды тартымдылықтың артындағы химиялық корреляцияны тапты. 24 сағаттық қартайған зәрде анықталған ұшпа органикалық қосылыстардың (VOCs) синтетикалық иіс қоспалары, еңбек өрісінің кеңеюі жағдайында одан әрі evalu демонтаждау нәтижелері алынды. сиыр зәрінің иістерінің әртүрлі физиологиялық күйлерге әсері. Масаларды тарту. Алынған нәтижелер Ан. arabiensis өмір тарихының сипаттамаларына әсер ету үшін омыртқалылардың зәрінде табылған азотты қосылыстарды алады және таратады. Бұл нәтижелер ықтимал эпидемиологиялық салдарлар контекстінде және оларды векторлық бақылау мен бақылау үшін қалай пайдалануға болатыны талқыланады.
Anopheles arabicans (Dongola штаммы) 25 ± 2 °C, 65 ± 5% RH және 12:12 сағат жарық: қараңғы циклде ұсталды. Дернәсілдер тазартылған сумен толтырылған пластик науаларда (20 см × 18 см × 7 см) өсірілді және Tetramin® балық жинағымен қоректендірілді (MelTetramin® P балық жинап,). 30 мл шыныаяқтарда (Nolato Hertila, Åstorp, SE) және одан кейін ересектердің шығуына мүмкіндік беру үшін Bugdorm торларына (30 см × 30 см × 30 см; MegaView Science, Тайчунг, Тайвань) ауыстырылды. Ересектерге 10% сахароза ерітіндісі либитуммен қамтамасыз етілді, олар диетадан кейін 4 күн өткенге дейін ұсынылды. эксперимент алдында тікелей немесе төменде сипатталғандай, эксперимент алдында дистилденген сумен түні бойы аш қалдырылды. Ұшу түтіктері эксперименттері үшін пайдаланылған әйелдер тек 4-6 сағат бойына сумен аштыққа ұшырады. Кейінгі биоанализдерге қан соратын масаларды дайындау үшін, 4 dpe аналықтары дефибротикалық қой қаны (BroHet, мембрана жүйесі) арқылы қамтамасыз етілді. Discovery Workshops, Аккрингтон, Ұлыбритания). Толығымен кептеліп қалған аналықтар жеке торларға ауыстырылды және төменде сипатталғандай тікелей диетамен қамтамасыз етілді немесе төменде сипатталған эксперименттерге дейін 3 күн бойы 10% сахароза ad libitum. Соңғы аналықтар ұшу түтігінің биоанализдері үшін пайдаланылды және зертханаға жіберілді, содан кейін дистилденген су эксперименті үшін сағат 46i болды.
Азықтандыру талдаулары ересек араб әйеліндегі несеп пен мочевина шығынын анықтау үшін пайдаланылды. Хост іздеуші және қанмен қоректенетін аналықтарға 48 сағат бойы 1% сұйылтылған жаңа піскен және қарт сиыр зәрі, әртүрлі концентрациядағы мочевина және екі бақылау құралы (10% сахароза және су) бар диета ұсынылды. Сонымен қатар, тағамдық бояу (1 мг-ФФ) 2650-17-1; Сигма-Олдрих, Стокгольм, SE) диетаға қосылды және 250 мкл микроцентрифугалық түтіктерде 4 × 4 матрицада жеткізілді (Axygen Scientific, Union City, CA, АҚШ; Сурет 1A) Шетіне дейін толтырыңыз (~300 түс пен түс арасындағы бәсекелестікке жол бермеу үшін). Үлкен Петри табақшасында 10 маса (диаметрі 12 см және биіктігі 6 см; Semadeni, Ostermundigen, CH; 1A сурет) 25 ± 2 см °C және 65 ± 5% салыстырмалы ылғалдылықта толық қараңғылықта. Бұл тәжірибелер 5-10 рет қайталанды. Диетадан кейін масалардың әсерінен кейін -0 2 ° C-та орналастырылды.
Ірі қара несеп пен мочевина иесі және қан соратын аналық Anopheles arabianus сіңіретінін табыңыз. Азықтандыру сынағы (A) кезінде аналық масалар жаңа және ескі сиыр зәрінен, әртүрлі концентрациядағы мочевинадан, сахарозадан (10%) және тазартылған судан (H2O) тұратын диетамен қамтамасыз етілді. сыналған. Ие іздеуші аналықтардың 72 сағаттық сиыр зәрін 168 сағаттық сиыр зәрінен (B) аз сіңіргенін ескеріңіз. Зәрдегі орташа жалпы азот мөлшері (± стандартты ауытқу) кірістірілгенде көрсетілген. Хост іздеуші (D, F) және қан соратын (E, G) аналықтар E-тәуелді адамда мочевина (D) мөлшерінде қабылдайды. әр түрлі әріп атаулары бір-бірінен айтарлықтай ерекшеленді (Tukey's post hoc талдауын пайдаланатын бір жақты ANOVA; p < 0,05). Қате жолақтары орташа мәннің стандартты қатесін көрсетеді (BE). Түзу үзік сызық лог-сызықты регрессия сызығын (F, G) көрсетеді.
Сіңірілген тағамды босату үшін масалар 230 мкл тазартылған суы бар 1,5 мл микроцентрифуга түтіктеріне жеке орналастырылды және ұлпа бір рет қолданылатын пестиль мен сымсыз қозғалтқыштың (VWR International, Lund, SE) көмегімен үзілді, содан кейін 10 кrpm жылдамдықта центрифугалау жүргізілді, содан кейін 10 минут ішінде супернатант 20 мкл дейін тасымалданды. 96 шұңқырлы микропластина (Сигма-Олдрих) және сіңіру қабілеті (λ620) спектрофотометр негізіндегі микропластинаны оқу құралының (SPECTROStar® Nano, BMG Labtech, Ortenberg, DE) nm көмегімен анықталды. Балама ретінде, масалар 1 мл дистилденген суда ұнтақталды, ол 900 мкг спектрлік қызарған. талдау (λ 620 нм; UV 1800, Shimadzu, Kista, SE). Диеталық тұтынудың мөлшерін анықтау үшін стандартты қисық сериялық сұйылту арқылы 0,2 мкл-ден 2,4 мкл 1 мг мл-1 ксилол цианидін алу үшін дайындалды. Содан кейін белгілі бояғыштың концентрациясын анықтау үшін қолданылған әрбір бояғыштың оптикалық тығыздығы анықталды.
Көлемдік деректер дисперсияның бір жақты талдауы (ANOVA), содан кейін Тукейдің кейінгі жұптық салыстырулары (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc., Cary, NC, АҚШ, 1989–2007) арқылы талданды. (Mac жүйесіне арналған GraphPad Prism v8.0.0, GraphPad бағдарламалық құралы, Сан-Диего, CA, АҚШ).
Әр жас тобынан шамамен 20 мкл зәр үлгілері Chromosorb® W/AW (10 мг 80/100 тор, Sigma Aldrich) байланған және қаңылтыр капсулаларға (8 мм × 5 мм) қапталған. Капсулалар жану камерасына (CHFlash/O2000 анализаторы) енгізілді. Scientific, Waltham, MA, US) өндірушінің хаттамасына сәйкес жаңа және ескі зәрдегі азот мазмұнын анықтау. Жалпы азот (g N l-1) стандарт ретінде пайдаланылатын белгілі мочевина концентрациялары негізінде сандық түрде анықталды.
Диетаның иесі іздеуші және қан соратын әйелдердің өмір сүруіне әсерін бағалау үшін масалар жеке үлкен Петри табақшаларына (диаметрі 12 см және биіктігі 6 см; Семадени) қақпағы тормен жабылған тесігі (диаметрі 3 см) желдету және азық-түлікпен қамтамасыз ету үшін орналастырылды. несеп, мочевинаның төрт концентрациясы және екі бақылау элементі, 10% сахароза және су. Әрбір диета 5 мл шприцке (Thermo Fisher Scientific, Gothenburg, SE) енгізілген стоматологиялық тампонға (DAB Dental AB, Upplands Väsby, SE) тамшуырмен енгізілді (Термо Фишер Ғылыми, Гетеборг, SE), поршеньді алып тастап, фигураны жоғарғы жағына қойыңыз. 1).1A).Ретаңызды күн сайын өзгертіңіз.Зертхананы жоғарыда сипатталғандай ұстаңыз.Тірі қалған масалар күніне екі рет есептелді, ал өлі масалар соңғы маса өлгенге дейін лақтырылды (бір емделу үшін n = 40). Түрлі диеталармен қоректенетін масалардың тірі қалуы Каплан-Мейер диетасы мен өмір сүру деңгейінің таралуын салыстыру арқылы статистикалық түрде талданды. (IBM SPSS Statistics 24.0.0.0).
Аттисано және т.б.[17] негізіндегі арнайы масалардың ұшатын диірмені, қалыңдығы 5 мм мөлдір акрил панельдерден (ені 10 см x 10 см ұзын x 10 см биіктікте) алдыңғы және артқы панельдері жоқ (3-сурет: жоғарғы). бір-бірінен 9 см қашықтықта орналасқан жұп неодим магниттерінің арасына ілулі тұрған ине. Бірдей материалдан жасалған көлденең түтік (6,5 см L) тік түтікті екіге бөліп, байланған қолды және жарықты үзетін сигнал ретінде алюминий фольганың кішкене бөлігін алып жүретін қолды құрады.
24 сағаттық аштықтан зардап шеккен аналықтар шектеуге дейін 30 минут бойы жоғарыда аталған диетаны берді. Толық тамақтандырылған аналық масалар мұзда 2-3 минут бойы жеке жансыздандырылды және балауызбен жәндіктердің түйреуіштеріне бекітілді (Джоэл Свенссонс Ваксфабрик А.Б., Мунка Люнгби, содан кейін SEi қолтығында) түтіктер.Ұшатын диірмен. Бір ұшудағы айналымдар арнайы құрастырылған деректер тіркеушісі арқылы жазылды, содан кейін PC-Lab 2000™ бағдарламалық құралының көмегімен сақталды және көрсетілді (v4.01; Velleman, Gavere, BE). Ұшу диірмені климаты реттелетін бөлмеге орналастырылды (12 сағ:12 сағ, жарық: қараңғы, R ±5 % ±5).
Ұшу белсенділігінің үлгісін визуализациялау үшін 24 сағаттық кезең ішінде жалпы ұшу қашықтығы (м) және дәйекті ұшу әрекеттерінің жалпы саны сағатына есептелді. Сонымен қатар, жекелеген әйелдердің ұшқан орташа қашықтығы өңдеулер бойынша салыстырылды және бір жақты ANOVA және Tukey's post hoc талдауы (JMP Pro, v14.0.0) көмегімен талданды (JMP Pro, v14.0.0), институт орташа қашықтықты өңдеуге болатын болса, SASi өзгереді. тәуелсіз фактор.Сонымен қатар, айналымдардың орташа саны 10 минуттық қадамдармен есептеледі.
Диетаның An.arabiensis репродуктивті қабілетіне әсерін бағалау үшін алты аналық (4 dpe) қан алынғаннан кейін тікелей Bugdorm торларына (30 см × 30 см × 30 см) ауыстырылды, содан кейін жоғарыда сипатталғандай 48 сағат бойы эксперименталды рацион ұсынылды. Содан кейін диеталар алынып тасталды және уылдырық шашатын шыныаяқтар (30 мл; Нолато Гертила 20 үшінші күні дистрибьюторлы сумен толтырылды) 48 сағат, әр 24 сағат сайын өзгереді. Әрбір диеталық режимді 20-50 рет қайталаңыз. Әр тәжірибелік тор үшін жұмыртқалар есептелді және жазылды. Жұмыртқалардың қосалқы үлгілері Dialux-20 микроскопының (DM10DEzt, Wenstz0) жабдықталған (DM10DEZ0) көмегімен жеке жұмыртқалардың орташа мөлшері мен ұзындығының өзгеруін бағалау үшін пайдаланылды (диета үшін n ≥ 200). Leica камерасымен (DFC) 320 R2; Leica Microsystems Ltd., DE). Қалған жұмыртқалар климаты бақыланатын бөлмеде стандартты өсіру жағдайында 24 сағат бойы ұсталды және жоғарыда сипатталғандай жақында пайда болған 1-ші жастағы дернәсілдердің қосалқы үлгісі (диета үшін n ≥ 200) өлшенді. Жұмыртқалардың саны мен мөлшері жұмыртқа мен NO-кілтінен кейінгі емдеу әдісі мен дернәсілдер арасында салыстырылды. hoc талдау (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Жаңа піскен (сынама алынғаннан кейін 1 сағат), 24 сағат, 72 сағат және 168 сағат ескі зәрдің ұшқыштары Зебу, Арси нәсілдерінен алынған сынамалардан жиналды. Ыңғайлы болу үшін несеп үлгілері сиырлар әлі қорада болған кезде таңертең ерте жиналды. Зәр үлгілері әрқайсысынан 10 мл және 10 мл 20-дан алынды. жеке полиамидті пісіру қалталарына (Toppits Cofresco, Frischhalteprodukte GmbH and Co., Minden, DE) қақпағы бар 3 л полиамидке ауыстырылды. Винилхлоридті пластикалық барабандарда. Әрбір ірі қара зәр үлгісінен ұшпа заттар тікелей (жаңа) немесе бөлме температурасында 72,2 сағат және пісіп жетілгеннен кейін жиналды. әрбір зәр үлгісі әр жас тобының өкілі болды.
Кеңістіктегі ұшпа заттарды жинау үшін диафрагмалық вакуумдық сорғыны (KNF Neuberger, Freiburg, DE) пайдалану арқылы полиамидті қап арқылы 2,5 сағат бойы белсендірілген көмір сүзгіленген газ ағынын (100 мл мин-1) адсорбциялық бағанға айналдыру үшін жабық контурлы жүйе пайдаланылды. баған шыны жүн тығындар арасында 35 мг Porapak Q (50/80 тор; Waters Associates, Milford, MA, АҚШ) бар тефлон түтіктерінен (5,5 см x 3 мм идентификатор) жасалды. Қолдану алдында баған 1 мл қайта дистилденген n-гексанмен (Merck, Darmstadt) және pure% 90 ( pu 90 ml) шайылды. GC дәрежесі, Сигма Олдрих). Адсорбцияланған ұшпа заттар 400 мкл пентанмен элюцияланды. Бас кеңістігі жинақтары біріктіріліп, одан әрі талдау үшін пайдаланылғанша -20°C температурада сақталды.
Жаңа, 24-сағ, 72-сағ және 168-сағаттық несептен жиналған ұшпа сығындылары үшін хост іздейтін және қан жейтін An.Headspace сығындыларының мінез-құлық реакциялары түзу шыны түтік олфактометрдің көмегімен Arabidopsis масаларының ұшпа сығындыларына талдау жасалды [18]. Z15 тәжірибелер кезеңінде жүргізілді. үй іздеу әрекеті. Араб [19]. Шыны түтік олфактометр (80 см × 9,5 см идентификатор) жоғарыдан 3 ± 1 лкс қызыл жарықпен жарықтандырылды. Көмір сүзгіленген және ылғалдандырылған ауа ағыны (25 ± 2 °C, 65 ± 2% салыстырмалы ылғалдылық) биоауаның 3 сериясы арқылы өтті. тот баспайтын болаттан жасалған торлы экрандар, ламинарлы ағынды және біркелкі шлейф құрылымын жасайды. Тіс тампонының диспенсері (4 см × 1 см; L:D; DAB Dental AB), олфактометрдің желге қарай ұшында 5 см катушкаға ілінген, стимуляторды әр 5 минут сайын өзгертеді. Талдау үшін әрбір бастың 10 мкл сұйылтылған сығындысы пайдаланылды: 10 мкл. Бақылау құралы ретінде пентанның тең мөлшері пайдаланылды. Жеке хост іздейтін немесе қан соратын масаларды эксперимент басталардан 2-3 сағат бұрын жеке босату торларына орналастырды. Шығаратын тор олфактометрдің желге төмен жағында орналастырылды, ал масалар 1 минут бойы бейімделуіне мүмкіндік берді, содан кейін шыбын-шіркейлерді емдеуге арналған клапан ашылды. бақылау шығарылғаннан кейін 5 минут ішінде көзбен байланысқа түскен масалардың үлесі ретінде талданды. Әрбір бас кеңістігінің ұшпа сығындысы мен бақылауы кемінде 30 рет қайталанды және кез келген бір күннің әсерін болдырмау үшін емдеудің бірдей саны мен бақылау әр тәжірибелік күнде сыналған. Хост пен қанмен қоректенетін жауаптарды іздестіру логистикалық жауаптар арқылы қайта талданған. тақ қатынас үшін жұптық салыстырулар (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Анның уылдырық шашу реакциясы. Жаңа піскен және кәрі сиыр несепінен алынған сығындылар Bugdorm торларында (30 см × 30 см × 30 см; MegaView Science) талданды. 20 мл тазартылған сумен толтырылған пластикалық шыныаяқтар (30 мл; Nolato Hertila) уылдырық шашатын субстраттың 2 см бұрышына орналастырылды. бөлек.Емдеу шыныаяқтары 1:10 сұйылту кезінде әрбір бас кеңістігінің сығындысының 10 мклімен реттелді. Бақылау шыныаяқын реттеу үшін пентанның тең мөлшері пайдаланылды. Позиция әсерлерін бақылау үшін әр тәжірибе арасында емдеу және бақылау шыныаяқтары ауыстырылды. Қанмен қоректенетін он аналық ZT 9-11 эксперименттік торларға жіберілді және 4 сағаттан кейін жұмыртқаны есептеу формуласы 4 сағатта алынды. уылдырық шашу көрсеткіші: (емдеу стаканына салынған жұмыртқалардың саны – бақылау шыныаяққа салынған жұмыртқалардың саны)/(басылған жұмыртқалардың жалпы саны). Әрбір өңдеу 8 рет қайталанды.
Ан.arabiensis аналықтарының газ хроматографиялық және электронды антенна үлгісін анықтау (GC-EAD) талдауы бұрын сипатталғандай орындалды [20]. Қысқаша айтқанда, жаңа бас кеңістігінің ұшпа сығындылары HP-520.0 бағанымен жабдықталған Agilent Technologies 6890 GC (Санта-Клара, Калифорния, АҚШ) арқылы бөлінген (3,0 mm5 ×20. мкм пленка қалыңдығы, Agilent Technologies). және қартаю несеп. Жылжымалы фаза ретінде сутегі орташа сызықтық ағыны 45 см с-1 қолданылды. Әрбір үлгі (2 мкл) 225 °C кіріс температурасымен бөлінбейтін режимде 30 секундқа енгізілді. GC пеш температурасы 35 °C (3 минуттық ұстау) бастап 301 °C ( мин. GC ағынды суды бөлгіші, 4 psi азот қосылды және Gerstel 3D/2 төмен өлі көлемді айқаста (Gerstel, Mülheim, DE) жалын ионизациясы детекторы мен EAD арасында 1:1 бөлінді. EAD үшін GC ағынды су капилляры Gerstel ODP-2 °C температурасын көрсететін шыны түтігі арқылы өтті, ол GC температурасын қадағалайды. (10 см × 8 мм), онда ол көміртегімен сүзілген, ылғалдандырылған ауамен араласқан (1,5 л мин−1). Антенна түтіктің шығатын жерінен 0,5 см қашықтықта орналастырылды. Әрбір жеке маса бір репликацияны құрады, ал хост іздейтін масалар үшін әр жастағы зәр үлгілерінде кемінде үш репликация жасалды.
Біріктірілген GC және масс-спектрометрді (GC-MS; 6890 GC және 5975 MS; Agilent Technologies) пайдалана отырып, GC-EAD талдауында антенналық реакцияларды анықтау үшін жаңа және ескі сиыр зәрінің бас кеңістігіндегі коллекцияларындағы биоактивті қосылыстарды анықтау, GC07-де электрондық әсер ету иондау режимінде жұмыс істейтін HPC05 режимінде жұмыс істейді. Орташа сызықтық ағыны 35 см с-1 болатын жылжымалы фаза ретінде гелийді пайдаланатын UI-жабылған балқытылған кремний диоксиді капиллярлы баған (ішкі диаметрі 60 м × 0,25 мм, пленка қалыңдығы 0,25 мкм). 2 мкл үлгі GCp-E негізінде анықталған уақыт талдауына негізделген бірдей инжектор параметрлері мен пеш температурасын пайдаланып енгізілді. (Kovát индексі) және массалық спектрлер пайдаланушы кітапханасымен және NIST14 кітапханасымен (Agilent) салыстырғанда. Анықталған қосылыстар түпнұсқалық стандарттарды енгізу арқылы расталды (Қосымша файл 1: S2 кесте). Сандық анықтау үшін гептил ацетаты (10 нг, 99,8% химиялық тазалық, Aldrich стандарты) сыртқы стандарт ретінде алынды.
Жоғарыдағыдай бірдей олфактометр мен хаттаманы пайдалана отырып, жаңа және ескі зәрде анықталған биоактивті қосылыстардан тұратын синтетикалық иіс қоспасының тиімділігін бағалау. 48 сағаттық, 72 сағаттық және 168 сағаттық зәр (5D-G суреті; Қосымша 1-файл: S2 кесте). Талдау үшін толық синтетикалық қоспаның 10 мкл 1:100 сұйылтылған ерітіндісін пайдаланыңыз, жалпы шығарылу жылдамдығы шамамен 140-2400-ден қанның тартымдылығын бағалауға дейін өзгереді. масалар.Одан кейін сынақ толық қоспаның жеке қосылыстарының субтрактивті қоспалары жойылатын толық қоспалар бойынша орындалады. Хост пен қанмен қоректенетін Ans.Arab және синтетикалық және субтрактивті қоспалардан алынған жауаптар номиналды логистикалық регрессия арқылы талданды, содан кейін тақ қатынас үшін жұптық салыстырулар (JMP Inc.0, S.AS. Institute).
Сиыр зәрі безгек масаларының тіршілік ету ортасы ретінде қызмет ете алатынын бағалау үшін жоғарыда сипатталғандай жиналған жаңа және кәрі сиыр зәрі және су торлы 3 л шелектерге (100 мл) салынып, жем ұстағыштарға қойылды. (BG-HDT нұсқасы; BioGents, Регенсбург, DE). Жайылымда бір-бірінен 50 м қашықтықта, ауыл қауымдастығынан 400 м қашықтықта (Силай, Эфиопия, 5°53´24´´С., 37°29´24´´E) жайылымдық жерде орналастырылған он қақпан және тұрақты жылытылатын ауылдарда мал өсірілмеген. бес тұзақ қыздырылмай қалды. Әрбір емдеу орны түнде барлығы бес түн бойы айналдырылады. Әртүрлі жастағы несеппен қоректенетін тұзақтарда ұсталған масалардың саны бета биномдық үлестірімі бар логистикалық регрессия көмегімен салыстырылды (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Эфиопия, Оромия облысы, Маки қаласына жақын жерде безгекпен ауыратын ауылда (8° 11′ 08″ N, 38° 81′ 70″ E; 6A суреті). Зерттеу тамыз айының ортасы мен қыркүйек айының ортасы аралығында жыл сайынғы жабық жаңбырмен бірге ұзақ уақыт жаңбыр жауар алдында жүргізілді. Зерттеу үшін ауылдың шетінде орналасқан (20–50 м арақашықтықта) таңдалды (6А-сурет). Үйлерді таңдау критерийлері мыналар болды: үйде жануарларға рұқсат етілмейді, үйде тамақ дайындауға (отын немесе көмір тартуға) рұқсат етілмейді (кем дегенде сынақ кезеңінде) және ең көп дегенде екі тұрғыны бар үйлер, ұйықтайтын үйлер. Өңделген москит торының астында. Этикалық мақұлдауды Аддис-Абеба университетінің Жаратылыстану ғылымдары факультетінің (CNS-IRB) Институционалдық зерттеу этикасын шолу кеңесі (IRB/022/2016) Бүкіләлемдік медициналық қауымдастықтың Хельсинки декларациясында белгіленген нұсқауларға сәйкес берді. Үй шаруашылығының әрбір басшысынан келісімді кеңейту процесінде бүкіл үй шаруашылығының басшысынан алынған. Аудандық және округтік («кебеле») деңгейіндегі әкімшіліктер. Эксперименттік жоба 2 × 2 латын шаршы дизайнын ұстанды, онда синтетикалық қоспалар мен бақылаулар бірінші түнде жұпталған үйлерге тағайындалды және келесі эксперименттік түнде үйлер арасында ауыстырылды. Бұл процесс он рет қайталанды. Сонымен қатар, таңдалған үйлердегі масалардың белсенділігін бағалау үшін, CDC басталатын бес үйлердегі шыбын-шіркейлердің белсенділігі анықталды. далалық сынақтың ортасы мен соңы тәуліктің бір уақытында.
Құрамында алты биоактивті қосылыс бар синтетикалық қоспа гептанда ерітілді (97,0% еріткіш GC сорты, Sigma Aldrich) және мақта фитильді диспенсерді [20] пайдаланып 140 нг сағ-1-де шығарылды. Шілтер таратқышы барлық қосылыстардың 12 сағат бойы тұрақты пропорцияда бөлінуіне мүмкіндік берді. Ауруларды бақылау және алдын алу орталықтары (CDC) жарық қақпағы (Джон В. Хок компаниясы, Гейнсвилл, Флорида, АҚШ; 6А сурет). Тұзақтар жерден 0,8 – 1 м биіктікте, кереуеттің етегіне жақын жерде ілінді және ерікті өңделмеген москит торының астында ұйықтап, 106-дан 106-ға дейін: 30-000-ға дейін жұмыс істейді. физиологиялық күйі (тамақтанбаған, тамақтандырылған, жартылай жүкті және жүкті [21] кейіннен A. gambiae sl ретінде морфологиялық анықталған түрді анықтау үшін полимеразды тізбекті реакция (ПТР) талдауын қолдану арқылы скринингтен өтті. Кешеннің мүшелері [23]. Далалық зерттеуде жұпталған үйлердің тұзаққа түсуі және тартымды логистикалық өңдеу үлгісінің көмегімен талданды. (синтетикалық қоспа және бақылау) бекітілген әсер болды (JMP® 14.0. 0. SAS Institute Inc. Бұл жерде біз ықтималдық арақатынасы сынағынан χ2 және p-мәндерін хабарлаймыз.
Қауіпсіз екенін бағалаңыз.arabiensis негізгі азот көзі, несепнәрді тікелей азықтандыру арқылы 48 сағат ішінде қожайын іздеген және қанмен қоректенетін аналық азықтандыру сынақтарынан кейін 4 күн ішінде (1А-сурет) ала алды. Хост іздеуші және қан соратын аналықтар кез келген басқа диеталарға қарағанда суды едәуір көп сіңіреді (F = F42) 20,15, p < 0,0001 және F(5,299) = 56,00, p <0,0001, 1B,C-сурет. Сонымен қатар, қожайын іздеуші әйелдер 168 сағаттағы зәрмен салыстырғанда 72 сағатта несеппен азырақ жеді (W суретте 1B диетасы бар әйел тағамы бар). барлық басқа концентрациялармен және сумен салыстырғанда 2,69 мМ мочевинаның айтарлықтай көп мөлшері, бұл ретте 10% сахарозадан айырмашылығы жоқ (F(10,813) = 15,72, p <0,0001; 1D сурет). Бұл қанмен қоректенетін аналықтардың реакциясынан айырмашылығы болды, олар әдетте диеталық суды көбірек сіңіреді. 10%-дан аз сахароза (F(10,557) = 78,35, p < 0,0001; 1Е сурет).Сонымен қатар, екі физиологиялық күйді салыстырған кезде флеботомизирленген аналықтар ең төменгі концентрацияларда ие іздеуші аналықтарға қарағанда мочевинаны көбірек сіңірді, ал бұл аналықтар осыған ұқсас концентрацияда жоғарырақ мөлшерде мочевина сіңірді. (F(1,953)= 78,82, p < 0,0001; 1F, G-сурет). Құрамында мочевина бар диетадан қабылдау оңтайлы мәндерге ие болып көрінгенімен (1D,E-сурет), екі физиологиялық күйдегі әйелдер де сіңірілген мочевина мөлшерін модуляциялай алды (F1, loga сызығының мочевинасының барлық концентрация диапазонында). ).Сол сияқты, москиттер сіңірілетін зәрдің мөлшерін реттеу арқылы азотты қабылдауды бақылайтын көрінеді, өйткені зәрдегі азот мөлшері сіңірілген мөлшерде көрінеді (1В, С және В кірістері).
Несеп пен мочевинаның иесін іздейтін және қан соратын масалардың тіршілігіне әсерін бағалау үшін аналықтарды барлық төрт жастағы зәрмен (жаңа, 24 сағат, 72 сағат және тұндырғаннан кейін 168 сағат) және несепнәр концентрациясының ауқымы, сондай-ақ тазартылған су және 10% сахарозаның бақылау диетасы ретінде пайдаланғанын көрсетті. қожайын іздеуші аналықтардың жалпы өмір сүруіне айтарлықтай әсер етеді (зәр: χ2 = 108,5, df = 5, p < 0,0001; мочевина: χ2 = 122,8, df = 5, p < 0,0001; 2В, С-сурет) және қанмен қоректенетін аналықтарда (p3, p5 = χ9: f < 0,0001; мочевина: χ2 = 137,9, df = 5, p < 0,001 сурет. 2D,E суреті). 72 сағаттық ескірген несеппен қоректенетіндердің (p = 0,016) өмір сүру ықтималдығы ең төмен (2В-сурет).Сонымен қатар, 135 мМ мочевинамен қоректенетін хост іздеуші аналықтар суды бақылауға қарағанда ұзағырақ өмір сүрді (p <0,04) және таза сумен бірге алынған әйелдер. 24 сағаттық зәр ұзағырақ өмір сүрді (сәйкесінше p = 0,001 және p = 0,012; 2D сурет), ал 72 сағаттық несеппен қоректенетін әйелдер қысқа жаңа несеп пен 24 сағаттық зәрді тамақтандырғандарға қарағанда ұзағырақ өмір сүрді (сәйкесінше p < 0,0001 және p = 0,01 Вт, f13). mM мочевина, қанмен қоректенетін аналықтар мочевина мен судың барлық басқа концентрацияларына қарағанда ұзағырақ өмір сүрді (p <0,013; 2E сурет).
Сиыр зәрі мен мочевинамен қоректенетін Anopheles arabinis қожайынының және қансорғыш аналықтарының тірі қалуы. Биологиялық талдауда (A) аналық масаларға жаңа және ескі сиыр зәрі, әртүрлі концентрациядағы мочевина, сахароза (10%) және тазартылған судан (H2O) тұратын диета ұсынылды. зәрмен (В, Д) және мочевинамен (С, Е) қоректенетін барлық аналықтар, сахароза және су өлгенше әрбір 12 сағат сайын тіркеледі.
24 сағаттық кезеңде ұшу диірмені сынауында анықталған айналымдардың жалпы қашықтығы мен саны жалпы ұшу белсенділігін азырақ көрсеткен хост іздейтін және қан соратын масалардың арасында ерекшеленді (3-сурет). Жаңа және ескі зәрді немесе сахароза мен суды қамтамасыз ететін хост іздеуші масалардың ұшу үлгілері ерекше, жаңа піскен зәр шығару 3 кезінде белсендірек болған кезде әйелдер. ал зәрмен қоректенетін 24 және 168 сағаттық жастағы масалар әртүрлі ұшу үлгілерін көрсетті және негізінен тәуліктік болды. Сахароза немесе 72 сағаттық несеп беретін аналық масалар 24 сағат бойы белсенділік танытты, ал сумен қамтамасыз ететін аналықтар москитозоидтың ең жоғары деңгейлері кезінде белсендірек болды. түнде және таңертең ерте, ал 72 сағаттық зәрді қабылдағандар 24 сағат ішінде белсенділіктің тұрақты төмендеуін бастан кешірді (3-сурет).
Сиыр зәрімен және мочевинамен қоректенетін аңшы қан соратын аналық Anopheles arabinis ұрғашысының ұшу өнімділігі. Ұшу диірмені сынауында жаңа және ескі сиыр зәрімен, әртүрлі концентрациядағы мочевина, сахароза (10%) және тазартылған су (H2O) қоректендірілді. және қан соратын (оң жақта) аналықтар, 24 сағаттық кезеңдегі әрбір диета үшін сағатына ұшудың жалпы қашықтығы мен саны тіркелді (қара: сұр; ашық: ақ). Орташа қашықтық және ұрыстардың орташа саны циркадтық белсенділік графигінің оң жағында көрсетілген. Қате жолақтары орташа мәннің стандартты қатесін көрсетеді. Статистикалық талдау мәтінін қараңыз.
Тұтастай алғанда, хост іздеуші аналықтардың жалпы ұшу белсенділігі 24 сағаттық кезеңдегі ұшу қашықтығына ұқсас үлгіні ұстанды. Орташа ұшу қашықтығы қабылдаған диета айтарлықтай әсер етті (F(5, 138) = 28,27, p < 0,0001), ал хост іздеуші аналықтардың барлық басқа диеталармен салыстырғанда 72 сағат ұзағырақ зәр қабылдаған 0,0001) және сахарозамен қоректенетін масалар жаңа піскен (p = 0,022) және 24 сағаттық зәрмен (p = 0,022) қоректенетін масаларға қарағанда ұзағырақ ұшты. Зәр диетасымен сипатталған ұшу белсенділігінің үлгісінен айырмашылығы, несепнәрмен қоректенетін қожайын іздеуші аналықтардың екінші ұшу кезеңінде 2-ші кезеңдегі белсенділігі байқалды. қараңғы фазаның (Cурет 3). Белсенділік үлгілері ұқсас болғанымен, мочевинамен қоректенетін хост іздеуші аналықтар сіңірілген концентрацияға (F(5, 138) = 1310,91, p <0,0001) байланысты орташа ұшу қашықтығын айтарлықтай арттырды.
Қан соратын масалардың жалпы ұшу белсенділігі тұрақты және барлық диеталар бойынша 24 сағат бойы тұрақты болды, қараңғы кезеңнің екінші жартысында сумен тамақтандырылған аналықтар үшін, сондай-ақ жаңа және 24 сағаттық жаста тамақтандырылған аналықтар үшін зәр белсенділігі жоғарылады (3-сурет). Зәрді диета қанмен қоректенетін аналықтардың орташа ұшу қашықтығына айтарлықтай әсер еткенімен (F = 8, p14) (F = 8) 0,0004), мочевина диетасы болмады (F(5, 138) = 1,36, p = 0,24) .басқа несеппен және бақылау диетасымен (жаңа піскен, p = 0,0091; 72 сағат, p = 0,0022; 168 сағат, p = 0,001; сахароза = 0,001; сахароза, p = 0, р = 0,01; 0,036).
Зәр мен мочевинамен қоректендірудің репродуктивті параметрлерге әсері жұмыртқа салатын биоанализдерде бағаланды (4А сурет) және әр аналық жұмыртқаның санына, жұмыртқаның өлшеміне және жаңадан шыққан бірінші жастағы дернәсілдерге қарай зерттелді. Қалған жұмыртқалар саны. Зәрмен қоректенетін, араб әйелдері бойынша диета (2, 2) F8, p = F85. = 0,0008; 4В-сурет). 24 сағаттық зәрмен тамақтандырылған әйелдер басқа зәр диеталарымен тамақтандырылған әйелдерге қарағанда әлдеқайда көп жұмыртқа берді (сурет 4В). Сол сияқты, несеппен қоректенетін аналықтардың жұмыртқаларының мөлшері де өзгерді (F = 5, 2) 0,0001), 24 сағаттық несеппен және сахарозамен қоректенетін аналықтар сумен қоректенетін аналықтарға қарағанда айтарлықтай үлкенірек жұмыртқа салады, ал 168 сағ несеппен қоректенетін аналықтардың жұмыртқалары айтарлықтай аз болды (Cурет 4C). Сонымен қатар, зәр диетасы дернәсіл мөлшеріне айтарлықтай әсер етті (F(5, = 710, p <180, F)). 24 және 72 сағаттық зәрмен қоректенетін аналықтардың жұмыртқаларынан шыққан жұмыртқалардан айтарлықтай үлкен дернәсілдер.
Сиыр несеппен және мочевинамен қоректенетін аналық Anopheles arabinis репродуктивті өнімділігі. Қанмен қоректенетін аналық масалар жаңа және қарт сиыр зәрінен, әртүрлі концентрациядағы мочевинадан, сахарозадан (10%) және тазартылған судан (H2O) тұратын диеталармен 48 сағат бойы биоанализдерге салмас бұрын (E саны және жұмыртқаны алу) қоректенді. өлшемі (C, F) және дернәсілдердің өлшемі (D, G) ұсынылатын диета (сиыр зәрі: BD; мочевина: EG) айтарлықтай әсер етті. Әр түрлі әріп атаулары арқылы өлшенген әрбір параметр үшін құралдар бір-бірінен айтарлықтай ерекшеленді (Tukey's post hoc талдауын қолданатын бір жақты ANOVA; p < 0,05). Қате жолақтары орташа мәннің стандартты қателігін көрсетеді.
Несептің негізгі азотты құрамдас бөлігі ретінде, қанмен қоректенетін аналықтардың диетасы ретінде берілген мочевина барлық зерттеулерде репродуктивті параметрлерге айтарлықтай әсер етті. Несепнәр концентрациясына байланысты мочевинамен тамақтандырылған аналықтардың жұмыртқаларының саны (F(11, 360) = 4,69; p <1140, әйелдерде мочевина). µM және 1,34 mM көбірек жұмыртқа салды (4E сурет). 134 мкМ немесе одан жоғары мочевина концентрациясымен қоректенетін аналықтар сумен қоректенетін аналықтарға қарағанда үлкенірек жұмыртқа салады (F(10, 4245) = 36,7; p < 0,0001; 4F суреті (сурет 4F), бірақ дернәсілдің мөлшері ұқсас, F1 концентрациясы әсер етеді), 3305) = 37,9; p < 0,0001) айнымалы болды (4G-сурет).
Ірі қара малдың зәрінің ұшпа сығындылары үшін жалпы тартымдылық. Шыны түтік олфактометрінде (5А-сурет) бағаланған арабиенсис несеп жасына айтарлықтай әсер етті (χ2 = 15,9, df = 4, p = 0,0032; сурет 5B; зәр шығарудан кейінгі талдау сағаттарда айтарлықтай жоғары болғанын көрсетті). барлық басқа емдеумен салыстырғанда тартымдылық деңгейлері (72 сағат: p = 0,0060, 168 сағат: p = 0,012, пентан: p = 0,00070), жаңа зәрдің иісін қоспағанда (p = 0,13; 5В сурет). 8.78, df = 4, p = 0.067; 5C-сурет), бұл аналықтардың бақылаумен салыстырғанда 72 сағаттық зәрмен салыстырғанда ұшпа сығындылары үшін айтарлықтай тартымды екені анықталды (p = 0.0066; 5C сурет).
Қожайын және қанмен қоректенетін Anopheles arabianus іздеуде сиырдың табиғи және синтетикалық несеп иістеріне мінез-құлық реакциялары. Шыны түтік олфактометрдің схемасы (A). Бас кеңістігінің ұшпа сығындыларының жаңа және қартайған сиыр зәрінің иесіне (B) және қан сорғыш (C) шыбын шіркейлерінің сығындыларының тартылуы. балғын (D), 24 сағаттық (E), 72 сағаттық (F) және 168 сағаттық (G) жастағы сиыр несепінен оқшауланған. Электрондық антеннаны анықтау (EAD) іздері газ хроматографынан элюцияланған бас кеңістігіндегі биоактивті қосылыстарға жауап ретінде кернеудің өзгеруін көрсетеді және детектордың жауап шкаласының идентификаторы арқылы анықталады. (мВ) сақтау уақытына (с) қарсы. Биологиялық белсенді қосылыстардың қасиеттері мен босап шығу жылдамдығы (μг h-1) көрсетілген. Жалғыз жұлдызша (*) тұрақты төмен амплитудалы жауапты көрсетеді. Қос жұлдызша (**) қайталанбайтын жауаптарды көрсетеді. Хостты (H) және қан соратын (I) жаңа синтезделген қосылыстарды табыңыз. зәр иісі. Әртүрлі әріп атауларына тартылған масалардың орташа үлестері бір-бірінен айтарлықтай ерекшеленді (Tukey's post hoc талдауын пайдаланатын бір жақты ANOVA; p < 0,05). Қате жолақтары шкаланың стандартты қателігін көрсетеді.
Аналық Ann.arabiensis, қан жегеннен кейін 72 сағат және 120 сағат, уылдырық шашу кезінде, пентанды бақылаумен салыстырғанда, жаңа піскен және қарт сиыр несепінен алынған бас кеңістігінің ұшпа сығындыларына артықшылық берілмеді (χ2 = 3,07, p > 0,05; Қосымша 1 файл: S1 сурет).
Әйелдер үшін Ann.arabiensis, GC-EAD және GC-MS талдаулары сегіз, алты, үш және үш биоактивті қосылыстарды анықтады (5D-G суреті). Электрофизиологиялық реакцияларды тудыратын қосылыстардың санында айырмашылықтар байқалғанымен, бұл қосылыстардың көпшілігі жаңа піскен және ескірген несептен жиналған ұшпа сығындының әрбір бас кеңістігінде болды. табалдырықтан жоғары әйел антенналары одан әрі талдауларға қосылды.
Бас кеңістігіндегі коллекциядағы биоактивті қосылыстардың жалпы ұшпа бөліну жылдамдығы жаңа зәрдегі 29 мкг сағ-1-ден 168 сағаттық зәрдегі 242 мкг сағ-1-ге дейін өсті, бұл негізінен p-крезол мен m-формальдегид есебінен Фенол, сондай-ақ фенол артады. Керісінше, басқа қосылыстардың, мысалы, 1-кг-н және 1-кг-ның шығарылу жылдамдығы. деканальды, несеп жасының ұлғаюымен төмендеді, бұл хроматограммада (5D-сурет)-G сол жақ панельдегі сигнал қарқындылығының (молдығы) байқалған төмендеуімен және осы қосылыстарға физиологиялық жауаптармен (сурет 5D-G оң жақ панель).
Тұтастай алғанда, синтетикалық қоспада жаңа және ескі несептің ұшпа сығындыларында анықталған биоактивті қосылыстардың ұқсас табиғи қатынасы болды (5D–G-сурет) және хостты іздеуде айтарлықтай тартымдылық тудырмаған сияқты (χ2 = 8,15, df = 4, p = 0,083; 5Н-сурет) немесе қан сору (5H = 2-сурет) 4.91, df = 4, p = 0.30; 5I-сурет). Дегенмен, емдеуден кейінгі жұптық салыстырулар 24 сағаттық зәрдің синтетикалық қоспасына пентанды бақылаумен салыстырғанда айтарлықтай тартымды екенін көрсетті (p = 0.0086; сурет).
24 сағаттық зәрдің синтетикалық қоспаларындағы жеке құрамдастардың рөлін бағалау үшін жеке қосылыстар жойылған Y-түтік талдауындағы толық қоспаларға қарсы алты субтрактивті қоспа бағаланды. Хост іздеуші масалар үшін толық қоспадан жеке қосылыстарды алып тастау мінез-құлық реакцияларына айтарлықтай әсер етті (χ2, d = 19. p = 06.06. 1-файл: S2A суреті), барлық субтрактивті қоспалар толық араласқаннан кішірек қарағанда тартымды болды. Керісінше, толық синтетикалық қоспадан жеке қосылыстарды алып тастау қан соратын масалардың мінез-құлық реакцияларына әсер етпеді (χ2 = 11,38, df = 6, p = 0,077), одан төмен деңгейлермен салыстырылған деканды қоспағанда 0,022; 1-қосымша файл: S2B суреті).
Эфиопиядағы безгек-эндемиялық ауылда 24 сағаттық сиыр зәрінің синтетикалық қоспасының дала жағдайында масаларды тартудағы тиімділігі он түн бойы бағаланды (6А-сурет). Барлығы 4 861 маса ұсталды және сәйкестендірілді, оның 45,7% -ы га-18% болды. Anopheles pharoensis және 35,4% Culex spp.(Қосымша файл: S1 кесте). Anopheles arabinis ПТР талдауы арқылы анықталған An.Gambian түрлер кешенінің жалғыз мүшесі болып табылады. Орташа алғанда, бір түнде 320 маса ұсталды, осы уақыт ішінде синтетикалық қоспасы бар тұзақтар қоспасыз масалардың ұсталғанына қарағанда (χ0, көп) 3196) = 170,0, p < 0,0001) .Сынақтың басында, ортасында және соңында бес бақылау түнінің әрқайсысына жем салынбаған тұзақтар орнатылды. Әр жұпта масалардың ұқсас саны ұсталды, бұл үйлер арасында ауытқудың жоқтығын көрсетеді (χ2(0, = 16, p >19) 0,05) және зерттеу кезеңінде популяцияның азаюы байқалған жоқ. Бақылау тұзақтарымен салыстырғанда, синтетикалық қоспасы бар тұзақтарға ұсталған масалардың саны айтарлықтай өсті: хост іздеу (χ2(0, 2107) = 138,7, p < 0,0001), соңғы уақытта қан беру (χ2(0, 0,03, χ2) және <00,25) жүктілік (χ2(0, 228) = 6,27, p = 0,0123; 1-қосымша файл: S1-кесте). Бұл ұсталған масалардың жалпы санынан да көрінеді: хост іздеуші > қансорғыш > жүкті > жартылай жүкті > еркек.
24 сағаттық синтетикалық сиыр зәрінің иісі қоспасының тиімділігін далалық бағалау. Далалық сынақтар оңтүстік-орталық Эфиопияда (карта), Маки қаласына жақын жерде (кірістіру), жұптастырылған үйлерде (оң жақта) Ауруларды бақылау орталықтары (CDC) жарық қақпағын (оң жақта) пайдаланып, латынша кескіні бар) өткізілді. CDC фототұзақтары аналық Anopheles arabesques (B) тартады және түсіреді, бірақ Anopheles farroes (C) емес, басқа жолмен, күйге байланысты физиологиялық әсер етеді. Сонымен қатар, бұл тұзақтар иесі Culex масаларының санын едәуір арттырды.(D) бақылаумен салыстырғанда. бақылау (ашық) қақпақтар (N = 10), ал оң жақтағы жолақтар бақылау қақпақтарының жұптарындағы орташа таңдау көрсеткішін білдіреді (ашық; N = 5). ).Жұлдызшалар статистикалық маңыздылық деңгейлерін көрсетеді (*p = 0,01 және ***p < 0,0001)
Үш түр синтетикалық қоспалары бар тұзақтарда басқаша ұсталды. Хост (χ2(1, 1345) = 71,7, p < 0,0001), қанмен қоректену (χ2(1, 517) = 16,7, p < 0,0001) және жүктілік (χ2(1, 1, p1 = 1) ізделуде. 0,0134) а .arabiensis синтетикалық қоспаны шығаратын тұзаққа түсіп қалды (6В-сурет), ал An мөлшері ерекшеленбеді. Әртүрлі физиологиялық күйдегі фаренсис табылды (6С-сурет). Culex үшін синтетикалық қоспамен бастырылған қожайындарды іздейтін масалардың санының айтарлықтай өсуі ғана табылды. (χ2(1,1319) = 12,6, p = 0,0004; 6D-сурет), бақылау тұзақтарымен салыстырғанда.
Эфиопиядағы өсіру орындары мен ауылдық қауымдастықтардың арасында әлеуетті иелерінен тыс орналасқан жем ұстағыштары безгек масаларының сиыр зәрінің иісін негізгі тіршілік ету ортасының белгісі ретінде пайдалануын бағалау үшін пайдаланылды. Қожайын сигналдары болмаған кезде, қызу және сиыр зәрінің иісі бар немесе жоқ болса, ешбір маса ұсталған жоқ (Қосымша файл: 1: жоғары температура және SH файлындағы жоғары температура). сиыр зәрінің иісі, аналық безгек масалары несеп жасына қарамастан аз мөлшерде болса да тартылды және ұсталды (χ2(5, 25) = 2,29, p = 0,13; Қосымша файл 1: сурет S3 ). Керісінше, су бақылаулары безгек масаларын жоғары температурада ұстамады (A:dd3 сурет).
Безгек масалары басқа жәндіктер сияқты өмір сүру тарихын жақсарту үшін сиыр зәрімен (яғни, шалшық) өтемдік қоректену арқылы құрамында азот бар қосылыстарды алады және таратады [2, 4, 24, 25, 26]. Сиыр зәрі маляриямен тығыз байланысқан демалу орындары үшін оңай қол жетімді жаңартылатын ресурс болып табылады. Ауылдық үйлер мен уылдырық шашатын жерлерге жақын өсімдіктер. Аналық масалар бұл ресурсты иіс арқылы орналастырады және зәрдегі азотты қосылыстардың, оның ішінде несептегі негізгі азотты құрамдас мочевинаның сіңірілуін реттей алады [15, 16]. Аналық масалардың физиологиялық күйіне қарай ұшу және зәр шығарудағы барлық қоректік заттар. қожайын іздейтін аналық масалар, сондай-ақ бірінші гонадотропты цикл кезінде қанмен қоректенетін даралардың өмір сүруі мен репродуктивті ерекшеліктері. Сондықтан, зәрді араластыру тамақтанбаған ересектер сияқты жабық безгек таратқыштары үшін маңызды қоректік рөл атқарады [8], өйткені ол аналық масалардың төменгі қауіпті қосылыстармен қоректену қабілетін қамтамасыз етеді. табудың маңызды эпидемиологиялық салдары бар, өйткені әйелдер өмір сүру ұзақтығын, белсенділігін және репродуктивті өнімділігін арттырады, олардың барлығы векторлық қабілеттілікке әсер етеді. Сонымен қатар, бұл мінез-құлық болашақ векторларды басқару бағдарламаларының мақсаты болуы мүмкін.