«Ойлы, адал азаматтардың шағын тобы әлемді өзгерте алатынына ешқашан күмәнданбаңыз.Шындығында, ол жерде жалғыз».
Cureus миссиясы - зерттеуді ұсыну қымбат, күрделі және көп уақытты қажет ететін медициналық басылымның көптен бергі үлгісін өзгерту.
Тромбоциттерге бай плазма/прп, тіндерді қалпына келтіру, тромбоциттерді белсендіру, глюкозаның пролиферативті терапиясы, тромбоциттер, пролиферативті терапия
Осы мақаланы келесідей келтіріңіз: Harrison TE, Bowler J, Reeves K, et al.(17 мамыр, 2022 жыл) Глюкозаның тромбоциттер саны мен көлеміне әсері: регенеративті медицина үшін салдары.Cure 14(5): e25081.doi: 10.7759/cureus.25081
Тромбоциттерге бай плазма (PRP) және гипертониялық глюкоза ерітінділері әдетте регенеративті медицинада, кейде бірге инъекция үшін қолданылады.Гипертониялық глюкозаның тромбоциттердің лизисі мен белсендірілуіне әсері бұрын хабарланған жоқ.Біз глюкоза концентрациясының жоғарылауының тромбоциттер мен эритроциттер санына, сондай-ақ PRP және жалпы қандағы (ВБ) жасуша көлеміне әсерін сынадық.Тромбоциттер санының жылдам ішінара азаюы ішінара лизиске сәйкес келетін PRP немесе толық қан араласқан барлық глюкоза қоспаларында орын алды. Бірінші минуттан кейін тромбоциттер саны тұрақты болып қалды, бұл қалдық тромбоциттердің экстремалды (>2000 мОсм) гипертонияға дейін жылдам орналасуын болжайды. Бірінші минуттан кейін тромбоциттер саны тұрақты болып қалды, бұл қалдық тромбоциттердің экстремалды (>2000 мОсм) гипертонияға дейін жылдам орналасуын болжайды. После первой минуты количество тромбоцитов оставалось стабилді, бұл тұрақты аккомодацию остаточных тромбоцитов в стремального (>2000 мОсм) гипертонуса. Бірінші минуттан кейін тромбоциттер саны тұрақты болып қалды, бұл қалдық тромбоциттердің экстремалды (>2000 мОсм) гипертониялыққа дейін жылдам аккомодациясын көрсетеді.第一分钟后，血小板计数保持稳定，表明残余血小板迅速适应极端（适应极端（> 200mOsm2000 мОсм）高渗状态、. После первой минуты количество тромбоцитов оставалось стабильным, бұл стремального бейімделу остаточных тромбоцитов к экстремалном (>2000 мОсм) гиперосмолярном состоянию. Бірінші минуттан кейін тромбоциттер саны тұрақты болып қалды, бұл қалдық тромбоциттердің экстремалды (>2000 мОсм) гиперосмолярлық жағдайға жылдам бейімделуін көрсетеді.25% және одан жоғары глюкоза концентрациясы тромбоциттер белсендіруінің ерте кезеңін көрсететін орташа тромбоциттер көлемінің (MPV) айтарлықтай ұлғаюына әкелді.Тромбоциттердің лизисі немесе белсендіруі және гипертониялық глюкоза инъекциясының жалғыз немесе PRP-мен біріктірілімі қосымша клиникалық пайда әкелетінін анықтау үшін қосымша зерттеулер қажет.
1950 жылдары американдық хирург Джордж Хакетт сіңірлер мен байламдарға пролиферативті ерітінді енгізу арқылы көптеген науқастардың буын және арқа ауырсынуын біржола жеңілдететінін анықтады.Оның қояндарға жүргізген тәжірибелері пролиферативті терапия деп атаған емнің сіңірлердің ұлғаюына және күшеюіне себеп болғанын көрсетті.Гистологиялық зерттеулер бұл процесте жаңа коллаген түзілетінін растады [1].
Алғашқы бірнеше онжылдықта көптеген әртүрлі тарату шешімдері қолданылды.1990 жылдары көптеген тәжірибешілер глюкозаның жоғары концентрациясын ең қауіпсіз және тиімді әдіс деп санады.Дегенмен, әрекет ету механизмі әлі де түсініксіз.
20 ғасырда Хакетт жұмысынан кейін бірнеше клиникалық зерттеулер жүргізілді.Алайда, 2000 жылдары қызығушылық қайта артты және бел ауруын [2], тізе остеоартритін [3] және бүйірлік эпикондилит [4] емдеу үшін пролиферативті терапияның бірнеше сәтті клиникалық сынақтары аяқталды.
Тіндердің регенерациясы дің жасушаларының қатысуын талап етеді.Сондықтан глюкозаның жоғары концентрациясы қандай да бір жолмен дің жасушаларының миграциясын, репликациясын және дифференциациясын тудыруы керек.Біз тромбоциттер хабаршы ретінде әрекет етуі мүмкін және глюкозаның жоғары концентрациясы тромбоциттердің цитокиндер мен өсу факторларын шығаруына себеп болуы мүмкін, осылайша регенеративті процестерге, әсіресе глюкоза концентрациясы жоғары аймақтарға дің жасушаларының миграциясына ықпал етеді деп болжаймыз.
Тромбоциттердің белсендірілуі әрқашан жасушаішілік кальцийдің жоғарылауынан бұрын болады [5].Лю және т.б.2008 жылы глюкозаның жоғары деңгейі плазмалық мембранадағы өтпелі рецепторлық потенциалды канондық 6 (TRPC6) арналарының белсенділігін арттыратынын көрсетті, бұл тромбоциттерге кальций иондарының түсуіне әкеледі [6].Басқа зерттеу көрсеткендей, микротүтікшелердің шеткі аймағына кальций иондарының әсер етуі шеткі аймақтың релаксациясын, кеңеюін және деформациясын тудырады, бұл өз кезегінде пішіннің дискіден сфераға өзгеруіне әкеледі, нәтижесінде тромбоциттердің орташа көлемі (MPV) пайда болады [7].
Бұл зерттеудегі біздің гипотеза тромбоциттердің глюкозаның жоғары концентрациясының әсері микротүтікшелердің шеткі аймағына және жасушаішілік ортаға әсер етіп, MPV-нің жоғарылауына әкеледі.
Барлық қатысушылар зерттеудің егжей-тегжейлері түсіндірілгеннен кейін және үлгілерді алғанға дейін ақпараттандырылған келісім формасына қол қойды.Бұл зерттеуде гематокриті 2%-дан асатын PRP үлгілері ғана пайдаланылды, осылайша эритроциттер (эритроциттер) саны мен эритроциттердің орташа корпускулярлық көлемін салыстыру үшін қосуға болады.
Зерттеу төрт фазада жүргізілді, бірінші кезең PRP болды, ал қалған фазалар толық қан болды (1-кесте).Бұрын сипатталғандай [8], барлық салыстырмалы орталықтан тепкіш күштер (RCF, g-күш) орталықтан тепкіш шприцтегі қан бағанының ортаңғы нүктесінен (Rmid, см) есептелді.Біз MPV-ді тромбоциттер сенсибилизациясының маркері және тромбоциттер санының потенциалды тромбоциттер лизисінің көрсеткіші ретінде пайдалануды таңдадық, олардың екеуін де стандартты гематологиялық анализаторларда оңай өлшеуге болады.
Бірінші кезеңде 47 ерікті қан үлгілерін тапсырды — бір түтік этилендиаминтетрасірке қышқылы (EDTA) және бір PRP толық қан үлгісі (натрий цитратымен (NaCl, 3%) антикоагулянтталған) (1-кесте).Рокерді дереу түтікке салыңыз.EDTA үлгілеріне үш данада толық қан анализі (CBC) жүргізілді, ал NaCl үлгілері CBC талдауы үшін үш данада талданды, содан кейін PRP жоғарыда сипатталған әртүрлі әдістермен дайындалды [8].Барлық PRP үлгілері 900-1000 г центрифугалау арқылы дайындалды.Әрбір PRP үлгісін құйынды араластырғышта 5-10 секунд араластырыңыз, содан кейін бес 0,5 мл аликвотты түтіктерге бөліңіз.
Тромбоциттер экспозициясының жоғары глюкоза концентрацияларына әсерін бағалау үшін судағы тең мөлшерде (0,5 мл) 0%, 5%, 12,5%, 25% және 50% глюкоза тромбоциттер үлгілерімен араластырылып, 0%, 2,5% 6,25% концентрацияда және сынама және 12,5% түтік қоспасында шалуко қоспасы алынған. 15 минутқа қалдырыңыз.Әрбір қоспаның TAC көрсеткіші 15 минуттан кейін үш данада талданды.Тромбоциттер саны (PLT), эритроциттер саны, MCV және MPV әрбір түтік үшін орташа алынған, ал орташа тромбоциттер саны, эритроциттердің саны, MCV және MPV барлық PRP үлгілері үшін есептелген.
Деректерді жинаудың бірінші кезеңі аяқталғаннан кейін D50W қосылғаннан кейін PRP тромбоциттерінде тромбоциттер көлемінің айтарлықтай ұлғаюын байқадық.PRP тромбоциттері міндетті түрде қандағы барлық тромбоциттерді білдірмейді және PRP ортасы WB ортасынан ерекшеленеді.Сондықтан біз жалпы қанға D50W қосу әсерінің екінші фазалық сынамасын жүргізуді ұйғардық.
Екінші тур үшін талдау бөлімінде сипатталғандай, бірінші сериядағы нәтижелер негізінде 30 іріктеу өлшемін таңдадық.Бұл серияда 20 ерікті қан үлгілерін тапсырды (1-кесте).Толық қан (1,8 мл) 3 мл шприцке сорылып, 0,2 мл 40% NaCl антикоагулянды болды.Толық қан шприці бес секунд бойы құйынды араластырғышпен араластырылды және CBC үш данада талданды.Анализден кейін антикоагуляцияланған қан 5 мл шприцтегі 2 мл 50% глюкозаға қосылды (соңғы глюкоза концентрациясы шамамен 25% (D25) болды) және 30 минутқа шайқау түтігіне орналастырылды. 30 минуттан кейін WB шприцтеріндегі D25/CBC үш рет талданады. Тромбоциттер саны, МРВС және орташа РБК саны және орташа есеппен алынған. PLT, эритроциттер саны, MCV және MPV глюкозаны қосқанға дейін және одан кейін әрбір үлгі үшін есептелді.
Жалпы қандағы тромбоциттер, әдетте, аз инвазивті инъекцияға байланысты пролиферативті глюкоза терапиясы кезінде гипертониялық глюкозаға ұшырайтындықтан және инъекцияға дейін гипертониялық глюкозамен PRP біріктірілмейді, біз 1-бөлімде гипертониялық глюкозаны ДБ-мен біріктіріп зерттеуді шештік. Үшінші және төртінші қадам.Әр кезеңде 20 ерікті қан антикоагулянттары үшін 7-8 мл ACD-A (құрамында тринатрий цитраты (22,0 г/л) қышқыл), лимон қышқылы (8,0 г/л) және глюкоза (24,5 г/л), ерітінді декстроза цитраты) берді (1-кесте).MPV жоғарылауымен байланысты шекті пайызды анықтау үшін тек 12,5% -дан асатын глюкоза қоспалары пайдаланылды.Үшінші кезеңде пробиркаға 1 мл қан құйылады.Содан кейін қанды құйынды араластырғышта 1 мл 30% глюкоза, 40% глюкоза немесе 50% глюкозаны түтікке қосып, сәйкесінше 15%, 20% және 25% соңғы глюкоза концентрациясын алу үшін қанды араластырыңыз.Глюкоза қан үлгілері араластырғаннан кейін бірден CBC үшін талданды және 30 минут сайын екі минут сайын қайталанады.
Бастапқы араластыру кезінде 1:1 гипертониялық глюкоза мен WB немесе PRP қосу тромбоциттерді бірнеше секунд бойы 25% жоғары концентрацияға ұшыратады.Төртінші қадамда ең төменгі бастапқы шың концентрациясы бар гипертониялық глюкозаның әсерін бағалау және глюкоза әсерінің жоғарғы шегін сынау үшін D25W немесе D50W-ге аз ғана қан қостық.Пробиркаға 1 мл D25W немесе D50W салыңыз және үлгіні 10 секунд бойы құйып жатқанда 0,2 мл ВБ қосыңыз.Бұл жағдайларда қан 3 фазадағыдай соңғы концентрациядан 50% жоғары емес, соңғы концентрациядан шамамен 20% жоғары концентрацияда глюкозаға әсер етті, нәтижесінде глюкозаның соңғы концентрациясы 20,8% және 41,6% болды.Аралас үлгілер 3-қадамдағыдай уақыт аралығында талданды.
Әрбір глюкоза сұйылту сериясының бірінші қадамында 30 сынама алынды, себебі бұл пилоттық зерттеу үшін сәйкес үлгі өлшемі болды [9].Әрбір фазаның соңында (бірінші фазаны қоса) бір жиынтықтағы үздіксіз нәтиже айнымалысының орташа мәнін бағалау үшін қажетті таңдама өлшемін анықтау үшін пайдаланылатын формуланы пайдаланып, іріктеу мөлшерінің сәйкестігін бағалаңыз.n = Z2 x SD2 /E2 формуласы.Бұл теңдеуде Z – Z – балл, SD – стандартты ауытқу, Е – қажетті қате [10].Біздің альфа 0,05, ол Z мәні 1,96 сәйкес келеді және біз қатені 5 (пайызбен) күтеміз.Демек, n = (1,962 x SD2)/52 үшін шешеміз.Нәтижелер әрбір кезең үшін талап етілетін іріктеу мөлшері нақты жиналған саннан аз екенін көрсетті.
Бірден көп глюкоза концентрациясын пайдаланған 1, 3 және 4 кезеңдерде глюкозаның әртүрлі концентрацияларының әсері 0 уақыт пен әрбір келесі уақыт арасындағы фракциялық өзгерісті салыстыру арқылы талданды (15 минутта 1-кезең, 15 минутта 3-кезең).және төртеуі 15 секундта, содан кейін екі минут сайын.) Әрбір уақыт кезеңі үшін өзгеру жылдамдығы Манн-Уитни U-сынағы арқылы салыстырылды, себебі деректер Шапиро-Уилк қалыптылық сынағымен анықталған қалыпты таралуды сақтамады.Бірнеше топтың (бес) 1-ден 1-ге дейінгі талдауы бірінші, үшінші және төртінші қадамдарда (барлығы бес) орындалғандықтан, қажетті альфа мәнін ≤0,01 мәніне реттеу үшін Bonferroni түзетуі орындалды, бірақ ≤0,05 емес.
Гипертониялық декстрозаның барлық концентрациялары кезінде тромбоциттер санының төмендеуі және >12,5% декстроза концентрациясы кезінде PRP тромбоциттеріндегі MPV жоғарылауы: PRP тромбоциттер саны әдіс бойынша өзгеретін бастапқы толық қанмен салыстырғанда бір еседен бес есеге дейін өсті (суретте көрсетілмеген). Гипертониялық декстрозаның барлық концентрациялары кезінде тромбоциттер санының төмендеуі және >12,5% декстроза концентрациясында PRP тромбоциттеріндегі MPV жоғарылауы: PRP тромбоциттер саны әдіс бойынша өзгеретін бастапқы қанмен салыстырғанда бір еседен бес есеге дейін өсті (суретте көрсетілмеген). Барлық бақылаудың гипертониялық декстрозы және MPV-де тромбоциттердің жоғарылауы > 12,5%: PRP тромбоциттерінің 1-5 разрядта 1-5 разрядтағы тромбоциттердің жойылуы. Барлық гипертониялық декстроза концентрацияларында тромбоциттер санының төмендеуі және >12,5% декстроза концентрациясында PRP тромбоциттеріндегі MPV жоғарылауы: PRP тромбоциттер саны әдіске байланысты бастапқы толық қанмен салыстырғанда 1-5 есе артты (көрсетілмеген). ).在> 12,5% 的葡萄糖浓度下，所有浓度的高渗葡萄糖降低血小板计数，PRP 萄糖降低血小板计数，PRP 坿坸在线全血相比，PRP 血小板计数从浓度的1 倍上升到5 倍，因方法而异（未／迂 Глюкозаның >12,5% концентрациясында глюкозаның жоғары концентрациясы қан құрамын төмендетеді, қандағы PRP MPV жоғарылайды: 与基线全血 салыстырғанда, PRP қан саны концентрациядан 1-ден 5 есеге дейін артады (сипатталмаған). Платформалардағы глюкоздар >12,5% жалпы концентрациядағы гипертониялық глюкоздар, а MPV тромбоциттері, PRP тромбоциттері: 1-ден 5-ке дейінгі әдістерді жинақтау арқылы 1-ден 5-ке дейінгі аралықтағы тромбоциттердің жойылуы. Глюкоза концентрациясы >12,5% болғанда, барлық гипертониялық глюкоза концентрациясы тромбоциттер санын төмендетті және PRP тромбоциттеріндегі MPV жоғарылады: PRP тромбоциттер саны әдіске байланысты (сипатталғандай) қандағы бастапқы концентрациямен салыстырғанда 1-5 есе өсті.1-суретте тромбоциттер саны бастапқы PRP және көлемге түзетілген 1:1 сұйылтумен (көлемді түзетумен 1- k1) салыстырғанда суда сұйылтылғаннан кейін 75% дерлік және глюкозаның әртүрлі концентрациясы бар сұйылтудан кейін 15 минуттан кейін 20-30% төмендегені көрсетілген.k -1 селекция).1 селекция).
Әрбір сұйылтудағы ұяшықтардың саны сұйылтуға дейінгі бастапқы санның бөлігі ретінде көрсетіледі.
MPV суда немесе глюкозада 12,5% (соның ішінде 25% PRP глюкоза қоспалары) сұйылту концентрациясын одан әрі өзгертпестен, PRP өндіру кезінде ең аз төмендеді және 50% глюкоза ерітіндісінде сұйылтылғаннан кейін 20% -дан астамға өсті (2-сурет).).Керісінше, эритроциттер H2O-дан басқа кез келген сұйылту кезінде көлемде айтарлықтай өзгерісті көрсетпеді.
Әрбір сұйылтудағы жасушалардың орташа көлемі сұйылтуға дейінгі бастапқы көлемнің пайызымен көрсетіледі.
Тромбоциттер санының ұқсас, бірақ азырақ айқын төмендеуі және CVR жоғарылауы 50% глюкозаның әсеріне ұшыраған BC (25% глюкозамен формула үшін) байқалды.2-кестеде 50% декстрозада сұйылтылған жалпы қандағы жасушалар саны мен жасуша көлемін 50% декстрозада сұйылтылған 1 фазадағы PRP деректерімен салыстырады.Эритроциттер саны мен RBC MCV өзгерістері айқын болмады және біздің назарымызда болмады.
SD = стандартты ауытқу, MD = топтар арасындағы орташа айырмашылық, SE = орташа айырмашылықтың стандартты ауытқуы, РБК = эритроциттер, PLT = тромбоциттер, PRP = тромбоциттерге бай плазма, ВБ = толық қан
WB-ге D50W қосқаннан кейін, сұйылтуға байланысты түзетілген тромбоциттер жоғалту пайызы D50W-де PRP сұйылту үшін 17,8% (664±348 қарсы 544±277) салыстырғанда 7,7% (310±73 қарсы 286±96) құрады.MPV WB 16,8%-ға (10,1 ± 0,5-тен 11,8 ± 0,6-ға дейін), MPV PRP 26%-ға өсті (9,2 ± 0,8 қарсы 11,6 ± 0, 7). PRP-мен де, MPV-дің орташа айырмашылықтары едәуір көп болғанымен, WB-дегі тромбоциттердің төмендеуі айтарлықтай болды (310 ± 73-тен 286 ± 96); P = .06) және MPV-дің өсуі маңызды болды (10.1 ± 0,5-тен 11.8 ± 0,6 (+16.8) P <.001). PRP-мен де, MPV-дің орташа айырмашылықтары едәуір көп болғанымен, WB-дегі тромбоциттердің төмендеуі айтарлықтай болды (310 ± 73-тен 286 ± 96); P = .06) және MPV-дің өсуі маңызды болды (10.1 ± 0,5-тен 11.8 ± 0,6 (+16.8) P <.001).Тромбоциттер санының азаюындағы және CVR ұлғаюындағы орташа айырмашылықтар PRP кезінде айтарлықтай жоғары болғанымен, ВБ ішіндегі тромбоциттер санының төмендеуінің өзгерістері дерлік маңызды болды (310 ± 73-тен 286 ± 96-ға дейін (-7,7%); p = 0,06).увеличение MPV было значительным (от 10,1 ± 0,5 до 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001). MPV-нің өсуі айтарлықтай болды (10,1 ± 0,5-тен 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001).尽管PRP 在血小板计数减少和MPV 增加方面的平均差异显着更大，但WB 内血小板计数减少和MPV几乎是显着的（310 ± 73 至286 ± 96 (-7,7%)；p = .06）和MPV 的增加是显着的（10.5 ±1.5 (±1.5) <1.0.1) 001).尽管 PRP 在 血小板 计数 和 和 增加 方面 的 平均 差异 显着 大 ， 但 杀 大 ， 佇 杀 大 ， 但 杀 内家的 几乎 是 显着 的 （（（310 ± 73 至 286 ± 96 (-7,7%) ； p = .06）和MPV 的增加是 的增加是 的增加是1. ± 0,6 (+16,8) p < ,001）。ДБ ішінде тромбоциттер санының төмендеуінің өзгеруі айтарлықтай дерлік болды (310 ± 73-тен 286 ± 96-ға дейін (-7,7%); p = 0,06), дегенмен PRP тромбоциттер санының төмендеуі мен MPV жоғарылауында айтарлықтай үлкен орташа айырмашылықтарға ие болды.және MPV өсімі айтарлықтай болды.(от 10,1 ± 0,5 до 11,8 ± 0,6 (+16,8) р < 0,001). (10,1 ± 0,5-тен 11,8 ± 0,6-ға дейін (+16,8) p < 0,001).
MPV айтарлықтай өзгерісін көру үшін 20% глюкозаның соңғы концентрациясы қажет болды, бірақ MPV өзгерісі 25% соңғы концентрацияда айқынырақ болды.Тромбоциттердің жоғалуы бастапқы төмендегеннен кейін тұрақтанды.Біз CVR бастапқы күрт төмендеуін атап өттік, дегенмен, CVR 25% соңғы глюкоза концентрациясында тез қалпына келтірілді, ол 20% және 15% глюкозаның соңғы концентрацияларында байқалған CVR деңгейлерінен айтарлықтай жоғары болды (3-сурет және 3-кестенің сол жағында; көлеңкеленген қораптар).p-мәндерін ≤ альфаны Bonferroni түзетуімен 0,01) көрсетіңіз.Сондай-ақ PLT санының бастапқы күрт төмендеуі байқалды, бастапқы фазада 0-15 с байқалды, содан кейін тұрақты болды (15 с-тен 30 минутқа дейін; 4-кестенің сол жағында).
Толық қанға глюкозаның әртүрлі концентрацияларын қосу MPV-нің бастапқы жылдам төмендеуіне, содан кейін концентрацияға байланысты 20%-дан астам қалпына келтіруге әкелді.Аңыз сұйылтылғаннан кейінгі глюкозаның концентрациясын көрсетеді.D15, D20 және D25 1:1 сұйылтуда жүргізілді.D21 және D41 1:5 сұйылтуда жүргізілді.
4-кестеде гипертониялық глюкозада сұйылтылған кезде тромбоциттер санының өзгеруі көрсетілген.Біз 1:1 сұйылту кезінде және 1:5 сұйылту кезінде PLT санының бірден төмендеуі арасындағы дозаға тәуелді байланысты байқадық.Бір топ ретінде 1:1 сұйылтуларды 1:5 сұйылтулармен салыстырсақ, 1:1 тобында тромбоциттер саны 1:5 тобына қарағанда 66±48,000 (23%), 99±69,000 (37%) қарағанда бірден төмендеді., p = 0,014) 1:5 тобында.Бірінші өлшеу нүктесінде бастапқы құлдыраудан кейін тромбоциттер саны глюкозаның пайыздық қатынасында тұрақтанды (Cурет 4).
Глюкозаға 1:1 қатынасында толық қан қосылса, тромбоциттер саны шамамен 25%-ға азаяды.Дегенмен, жалпы қанды 1:5 қатынасында қосқанда, азаю әлдеқайда көп болды – шамамен 50%.
41% глюкоза MPV-ні 25% немесе 21% қарағанда тезірек және күрт арттырды.MPV нәтижелері 3-суретте көрсетілген. Барлық басқа сұйылтуларда 50% глюкоза қосылғаннан кейін MPV бірден бастапқы төмендеуі байқалмады.25% глюкозаны (соңғы сұйылтудағы глюкоза концентрациясы 20,8%) пайдаланған кезде MPV өзгерісі 1:1 сұйылту кезіндегі 20% глюкозаның өзгеруімен салыстырмалы болды (3-сурет).MPV өзгерістері бастапқыда 25%-ға қарағанда 41% аралас концентрацияда үлкен болғанымен, 16 минуттан кейін MPV 41% және 25% арасындағы айырмашылық маңызды емес болды (3-кесте, оң жақта).Сондай-ақ, 25% глюкоза MPV-ны 20,8% -дан тиімдірек арттырғаны қызықты.
Бұл in vitro зерттеу гипотезаны ішінара растады. Ол декстроза қоспасы арқылы потенциалды ішінара тромбоциттер лизисін, тромбоциттердің төтенше гипертониялыққа дейін жылдам аккомодациясын және гипертониялық декстрозаның > 25% концентрациясына жауап ретінде MPV айтарлықтай жоғарылауын көрсетті. Ол декстроза қоспасы арқылы потенциалды ішінара тромбоциттер лизисін, тромбоциттердің төтенше гипертониялыққа дейін жылдам аккомодациясын және гипертониялық декстрозаның > 25% концентрациясына жауап ретінде MPV айтарлықтай жоғарылауын көрсетті. Бұл показал потенциальный частичный лизис тромбоцитов примечается декстрозы, бросую аккомодацию тромбоцитов дейін экстремального гипертонуса және значительное повышение MPV в ответ на гипертонической локализация декстрозы > 25%. Ол декстрозамен әлеуетті ішінара тромбоциттердің лизисін, төтенше гипертонияға дейін жылдам тромбоциттердің аккомодациясын және гипертониялық декстроза деңгейіне >25% жауап ретінде MPV айтарлықтай жоғарылауын көрсетті.它显示出通过葡萄糖混合物潜在的部分血小板溶解，血小板快速适应板快速适应板快速适应板快速适应极嫗5） % 浓度的高渗葡萄糖时MPV 显着上升。它 显示 出 通过 葡萄糖 潜在 的 部分 血小板 溶解 血小板 快速 适应 漫速应> 25% 浓度 高渗 葡萄糖 时 时 mpv 显着。。。。。 Ол глюкозды потенциальды лизис тромбоцитов смесями, жылдам бейімделу тромбоцитов к экстремальді гипертонусы және значительное увеличение MPV в ответ на локирования гипертониялық глюкозы > 25%. Ол глюкоза қоспалары арқылы әлеуетті ішінара тромбоциттердің лизисін, төтенше гипертониялыққа тромбоциттердің жылдам бейімделуін және гипертониялық глюкозаға >25% жауап ретінде MPV айтарлықтай жоғарылауын көрсетеді.Бастапқы өсу 41,6% глюкоза экспозициясында максималды болды, бірақ MPV жоғарылауы әсер еткеннен кейін шамамен 20 минуттан кейін 25% глюкоза экспозициясына жақындады.
Тромбоциттердің концентрациясына глюкоза әсер етеді.Глюкозаның барлық сұйылтуларында PLT мөлшері азайғанын байқадық.PRP сериясының H2O (0%) сұйылтуларындағы тромбоциттер санының күрт төмендеуі осмотикалық лизиспен байланысты болуы мүмкін.Сонымен қатар, бұл тромбоциттердің жиналуынан туындаған артефакт болуы мүмкін, бірақ бұл сұйылту кезінде MPV өзгерісінің болмауынан айырмашылығы бар.Бұл тұжырым кейбір тромбоциттер гипоосмолярлыққа өте сезімтал екенін білдіреді.
Глюкозаның барлық 1:1 сұйылтуларында PLT мөлшері 20-30%, тіпті D5W (252 мОсм кезінде гипотоникалық) азайды, бұл глюкозаның спецификалық осмостық емес әсерін көрсетуі мүмкін, өйткені концентрацияның үш есе артуында PLT және MPV екеуі де өзгеріссіз қалды.глюкоза.D5W бастап D25W дейін.Шындығында, осмолярлықтың жоғарылауымен PLT концентрациясы аздап жоғарылады.
1:1 және 1:5 сұйылтулар арасындағы PLT төмендеуі еріту әсері глюкозаның бастапқы және соңғы концентрациясына байланысты екенін білдіреді.Егер ол бастапқы концентрацияға ғана тәуелді болса, онда 1:1 концентрациялары арасындағы PLT төмендеуінің айырмашылығын көруге болады.Бірақ бізде жоқ.Егер лизис әсері глюкозаның соңғы концентрациясына ғана байланысты болса, онда біз 20% 1:1 сұйылту мен 20,8% 1:5 сұйылту арасында үлкен айырмашылықты күтпейміз.Сонда да біз мұны жасадық.
Тромбоциттердің жоғалуы тромбоциттер лизисіне байланысты орын алса, ішінара лизат түзіледі, содан кейін цитокиндер мен өсу факторлары жасушадан тыс ортаға шығарылады.Бірнеше зерттеулер тромбоциттер лизатының пролиферация ерітіндісі ретінде PRP сияқты дерлік тиімді екенін көрсетті [11].PRP өзі пролиферацияны емдеу үшін тиімді шешім болып табылады [12-14].
Белсенді емес тромбоциттер бірнеше ішкі құрылымдармен күшейтілген диск түрінде айналады.Белсендіру кезінде олар сфералық немесе амеба пішінін алады, нәтижесінде көлем ұлғаяды.Көлемнің ұлғаюы бетінің ұлғаюын талап етеді, бұл ашық түтікшелер жүйесінің (ОКС) экструзиясының және мембранаға экзоцитарлы түйіршіктердің қосылуының нәтижесі.Гипертониялық глюкозаның әсерінен туындаған MPV жоғарылауы осы механизмдердің біреуін немесе екеуін де қамтуы мүмкін бе, анықтау керек, бірақ егер соңғысы болса, онда MPV жоғарылауы дегрануляцияны көрсетеді.
Бұл зерттеу PRP немесе жалпы қан тромбоциттеріне жоғары глюкоза концентрациясының әсер етуі 15 минут ішінде глюкоза концентрациясы 25% және 41,6% сәйкес MPV жоғарылауына әкелетінін көрсетті.
Тромбоциттер MPV-нің жоғарылауы кальций ағынына жауап ретінде қоршаған микротүтікшелердің шатасуларының кеңеюіне байланысты болуы мүмкін.Лю және т.б.Глюкозаның тромбоциттердің TRPC6 арнасы арқылы кальций ағынының делдалдығы көрсетілген [6].Біздің гипотеза глюкоза микротүтікшелердің босаңсуын тудырады, бұл MPV және тромбоциттердің сенсибилизациясының және/немесе белсендірілуінің жоғарылауына әкеледі.Алайда, біздің нәтижелерге қарағанда, бұл оқиғаның бір бөлігі ғана.Біздің сынақтарымызда D25W төмен концентрация MPV жоғарылауына әкелмеді.Біз 12,5% және 25% арасындағы глюкоза концентрациясының әсерін сынамағанымызды ескере отырып, 1 фазаның нәтижелері MPV жоғарылауына әкелетін глюкоза концентрацияларының осы диапазонында шек болуы мүмкін екенін көрсетеді.3 және 4-кезеңдердегі қосымша сынақтар 20-25% глюкоза бұл үшін шек болатынын көрсетті, бірақ неге екені белгісіз.
Біз сондай-ақ центрифугалаудан кейін MPV-нің ~9% төмендеуін байқадық.MPV-нің бұл төмендеуі центрифуганың эритроцит қабатында ұсталған үлкенірек және тығыз тромбоциттермен байланысты ма, белгісіз.Бұл бақылау клиницистер үшін маңызды болуы мүмкін, өйткені ол PRP тромбоциттері ВБ тромбоциттерінің кішірек және тығыздығы азырақ ішкі жиыны екенін білдіруі мүмкін.
Алдыңғы зерттеуде біз қол әдістерімен PRP дайындаудың арзан екенін көрсеттік [8].Егер глюкоза тіндік тромбоциттерді немесе PRP-ді сенсибилизациялайтын болса, оларды белсендіруге сезімтал етеді немесе PRP ішінара лизат қасиеттерімен өндірілсе, бұл регенерацияны күшейтіп, терапия қажеттілігін азайтуы мүмкін.Сондықтан PRP мен жоғары концентрацияланған глюкозаның комбинациясы тек PRP немесе глюкозаға қарағанда үнемді болуы мүмкін.
Біздің зерттеуімізде бірнеше кемшіліктер бар.Біріншіден, біз бірнеше түрлі әдістерден алынған PRP пайдаланамыз.Бұл қарама-қайшы нәтижелерге әкелуі мүмкін.Екіншіден, тромбоциттер активтенуінің орын алғанын дәлірек анықтау үшін үлгілеріміздің ешқайсысына биохимиялық талдау жасай алмадық.Альфа түйіршіктерінің дегрануляциясының дәрежесін немесе болуын жақсырақ түсіну үшін біз P-селектинді, тромбоциттердің 4-факторын, моноцитарлық тромбоциттер агрегаттарын немесе тромбоциттер белсендіруінің басқа маркерлерін өлшегіміз келеді, бірақ бұл зерттеудің ауқымынан тыс.Үшіншіден, біз электронды микроскопиямен немесе басқа әдістермен глюкозаға ұшыраған тромбоциттердегі MPV жоғарылауы микротүтікшелердің түйілулеріне әсер еткенін растай алмадық.
25% глюкозасы бар WB немесе PRP қоспалары тромбоциттердің активтенуінің басталуын білдіретін MPV деңгейін жоғарылатты, дегенмен бұл зерттеу агрегация немесе дегрануляцияның прогрессиясын көрсетпеген.Гипертониялық глюкоза қоспасы тромбоциттердің жоғалуына әкелді, бұл мүмкін литикалық әсерді білдіреді.Тромбоциттердің ішінара белсендірілуі немесе лизисі тромбоциттер инъекциясынан кейін тіндердің регенерациясын тудыруы мүмкін.Бұл өзгерістер қандай клиникалық салдарға әкелуі мүмкін екені белгісіз.Әрі қарайғы зерттеулер белсендіру немесе лизистің дәлірек өлшемдерін көрсетті және WB немесе PRP бар гипертониялық глюкоза қоспаларының әртүрлі клиникалық әсерлерін бағалады.
Глюкозаның пролиферативті терапиясы - бұл клиникалық зерттеулерді жылдам кеңейтетін және қолдау көрсететін қарапайым және арзан регенеративті терапия.Бұл зерттеу физиологиялық механизмді ұсынады, ол расталған жағдайда пролиферативті терапияның регенеративті механизмінің бір бөлігін түсінуге көмектеседі.
Миссури университетіндегі биомедициналық және денсаулық информатикасы, Канзас-Сити медицина мектебі, Канзас-Сити, АҚШ
Адамдар: Осы зерттеуге қатысушылардың барлығы келісімін берді немесе бермеді.Халықаралық жасушалық медицина қоғамы ICMS-2017-003 мақұлдауын берді.Келесі хаттама Халықаралық жасушалық медицина қоғамының Институционалдық шолу кеңесімен одан әрі пайдалану үшін мақұлданды: Тақырып: CBC тромбоциттерінің бастапқы санына негізделген тромбоциттерге бай плазмадағы дәрілік препараттың шығуын есептеу.Жануарлар субъектілері: Барлық авторлар бұл зерттеуге жануарлар немесе ұлпалар қатыспағанын растады.Мүдделер қақтығыстары: ICMJE Бірыңғай ашып көрсету нысанына сәйкес барлық авторлар мынаны мәлімдейді: Төлем/қызмет туралы ақпарат: Барлық авторлар ұсынылған жұмыс үшін ешбір ұйымнан қаржылық қолдау алмағанын мәлімдейді.Қаржылық қарым-қатынастар: Барлық авторлар қазіргі уақытта немесе соңғы үш жыл ішінде ұсынылған жұмысқа қызығушылық танытатын кез келген ұйыммен қаржылық қарым-қатынаста болмағанын мәлімдейді.Басқа қатынастар: Барлық авторлар ұсынылған жұмысқа әсер етуі мүмкін басқа қарым-қатынастар немесе әрекеттер жоқ екенін мәлімдейді.
Harrison TE, Bowler J, Reeves K et al.(17 мамыр, 2022 жыл) Глюкозаның тромбоциттер саны мен көлеміне әсері: регенеративті медицина үшін салдары.Cure 14(5): e25081.doi: 10.7759/cureus.25081
© Copyright 2022 Harrison et al.Бұл Creative Commons Attribution License CC-BY 4.0 шарттары бойынша таратылатын ашық қол жетімді мақала.Түпнұсқа авторы мен дереккөзі көрсетілген жағдайда, кез келген ортада шектеусіз пайдалануға, таратуға және көшіруге рұқсат етіледі.