សូមអរគុណសម្រាប់ការចូលមើល Nature.com.កំណែកម្មវិធីរុករកតាមអ៊ីនធឺណិតដែលអ្នកកំពុងប្រើមានកម្រិតគាំទ្រសម្រាប់ CSS។ សម្រាប់បទពិសោធន៍ដ៏ល្អបំផុត យើងសូមណែនាំឱ្យអ្នកប្រើកម្មវិធីរុករកតាមអ៊ីនធឺណិតដែលបានអាប់ដេត (ឬបិទមុខងារដែលត្រូវគ្នានៅក្នុង Internet Explorer)។ ក្នុងពេលជាមួយគ្នានេះ ដើម្បីធានាបាននូវការគាំទ្របន្ត យើងនឹងបង្ហាញគេហទំព័រដោយគ្មានរចនាប័ទ្ម និង JavaScript ។
ភាគល្អិតស៊ីលីកា porous ត្រូវបានរៀបចំដោយវិធីសាស្ត្រ sol-gel ជាមួយនឹងការកែប្រែមួយចំនួន ដើម្បីទទួលបានភាគល្អិត macroporous ។ ភាគល្អិតទាំងនេះត្រូវបានទាញយកមកពីការផ្ទេរខ្សែសង្វាក់បន្ថែមដែលអាចផ្លាស់ប្តូរបាន (RAFT) polymerization ជាមួយ N-phenylmaleimide-methylvinylisocyanate (PMI) និង styrene ដើម្បីរៀបចំ N-phenylmaleimidestation ដំណាក់កាលដែកអ៊ីណុក។ (លេខសម្គាល់ 100 × 1.8 មីលីម៉ែត្រ) ត្រូវបានខ្ចប់ដោយការវេចខ្ចប់សារធាតុរអិល។ វាយតម្លៃការបំបែកជួរឈរ PMP នៃល្បាយ peptide ដែលមានសារធាតុ peptides ចំនួនប្រាំ (Gly-Tyr, Gly-Leu-Tyr, Gly-Gly-Tyr-Arg, Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg, leucine នៃអាល់ប៊ុមអ៊ីដ្រូសែន ឌីស្កូហ្វីលីន សេរ៉ូម អ៊ីដ្រូសែន និងប្រូសេស្តេរ៉ូអ៊ីតរបស់មនុស្ស)។ der លក្ខខណ្ឌ elution ដ៏ល្អប្រសើរ ចំនួនចានទ្រឹស្តីនៃល្បាយ peptide គឺខ្ពស់រហូតដល់ 280,000 plates/m²។ បើប្រៀបធៀបដំណើរការបំបែកនៃជួរឈរដែលបានអភិវឌ្ឍជាមួយជួរឈរ Ascentis Express RP-Amide ពាណិជ្ជកម្ម វាត្រូវបានគេសង្កេតឃើញថា ការអនុវត្តការបំបែកនៃជួរឈរ PMP គឺប្រសើរជាងជួរឈរពាណិជ្ជកម្មទាក់ទងនឹងប្រសិទ្ធភាព និងដំណោះស្រាយនៃការបំបែក។
ក្នុងប៉ុន្មានឆ្នាំថ្មីៗនេះ ឧស្សាហកម្មជីវឱសថបានក្លាយជាទីផ្សារពិភពលោកដែលកំពុងពង្រីកជាមួយនឹងការកើនឡើងយ៉ាងខ្លាំងនៃចំណែកទីផ្សារ។ ជាមួយនឹងការរីកចម្រើនយ៉ាងខ្លាំងនៃឧស្សាហកម្មជីវឱសថ 1,2,3 ការវិភាគនៃ peptides និងប្រូតេអ៊ីនគឺត្រូវបានគេចង់បានយ៉ាងខ្លាំង។ បន្ថែមពីលើ peptide គោលដៅ ភាពមិនបរិសុទ្ធជាច្រើនត្រូវបានបង្កើតឡើងកំឡុងពេលសំយោគ peptide ។ ដូច្នេះត្រូវការការបន្សុតសារធាតុ peptographic ។ និងការកំណត់លក្ខណៈនៃប្រូតេអ៊ីននៅក្នុងសារធាតុរាវរាងកាយ ជាលិកា និងកោសិកាគឺជាកិច្ចការដ៏លំបាកបំផុតមួយ ដោយសារចំនួនដ៏ច្រើននៃប្រភេទសត្វដែលអាចរកឃើញបានក្នុងគំរូតែមួយ។ ទោះបីជាម៉ាស់ spectrometry គឺជាឧបករណ៍ដ៏មានប្រសិទ្ធភាពសម្រាប់ការរៀបចំលំដាប់ peptide និងប្រូតេអ៊ីន ប្រសិនបើសំណាកបែបនេះត្រូវបានចាក់ចូលទៅក្នុងម៉ាស់ spectrometer ក្នុងមួយឆ្លងកាត់ ការបំបែកនឹងមិនត្រូវបាននាំអោយ។ ចំនួននៃការវិភាគដែលចូលក្នុងម៉ាស់ spectrometer នៅពេលវេលាដែលបានកំណត់ 4,5,6.លើសពីនេះទៅទៀត ក្នុងអំឡុងពេលបំបែកដំណាក់កាលរាវ ការវិភាគអាចត្រូវបានផ្តោតលើតំបន់តូចចង្អៀត ដោយហេតុនេះការប្រមូលផ្តុំការវិភាគទាំងនេះ និងធ្វើអោយប្រសើរឡើងនូវភាពរសើបនៃការរកឃើញរបស់ MS.Liquid chromatography (LC) បានរីកចម្រើនយ៉ាងខ្លាំងក្នុងរយៈពេលមួយទសវត្សរ៍កន្លងមកនេះ ហើយបានក្លាយជាការវិភាគដ៏ពេញនិយមមួយ, 18.
Reversed-phase liquid chromatography (RP-LC) ត្រូវបានគេប្រើយ៉ាងទូលំទូលាយសម្រាប់ការបន្សុត និងការបំបែកនៃល្បាយ peptide ដោយប្រើ octadecyl-modified silica (ODS) ជាដំណាក់កាលស្ថានី 11,12,13។ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ ដំណាក់កាលស្ថានី RP មិនផ្តល់នូវការបំបែកដ៏គួរឱ្យពេញចិត្តនៃ peptides និងប្រូតេអ៊ីនដោយសារតែលក្ខណៈស្មុគស្មាញ ដំណាក់កាលទី 1 និងប្រូតេអ៊ីនពិសេសរបស់ពួកវា។ តម្រូវឱ្យធ្វើការវិភាគ peptides និងប្រូតេអ៊ីនជាមួយនឹង polar និងមិន polar moieties ដើម្បីធ្វើអន្តរកម្មជាមួយ និងរក្សាទុកការវិភាគទាំងនេះ16.Mixed-mode chromatography ដែលផ្តល់អន្តរកម្មពហុម៉ូឌីតអាចជាជម្រើសមួយសម្រាប់ RP-LC សម្រាប់ការបំបែក peptides ប្រូតេអ៊ីន និងល្បាយស្មុគស្មាញផ្សេងទៀត។ ដំណាក់កាលចម្រុះ និងប្រូតេអ៊ីនដំណាក់កាលទី 1 និង peptide ត្រូវបានរៀបចំរួចជាស្រេច។ 18,19,20,21.Mixed-mode stationary phases (WAX/RPLC, HILIC/RPLC, polar intercalation/RPLC) គឺស័ក្តិសមសម្រាប់ការបំបែក peptide និងប្រូតេអ៊ីន ដោយសារតែវត្តមានរបស់ក្រុមប៉ូលទាំងពីរ និងមិនប៉ូល 22,23,24,25,26,27,28។​ ដំណាក់កាលប៉ូលដែលបំបែកដោយឡែកពីគ្នា និងប៉ូវកំលាំងដែលដូចគ្នាបេះបិទ។ ការជ្រើសរើសសម្រាប់ការវិភាគប៉ូល និងមិនមែនប៉ូល ដោយសារការបំបែកអាស្រ័យលើអន្តរកម្មរវាងការវិភាគ និងដំណាក់កាលស្ថានី។អន្តរកម្មពហុមុខងារ 29, 30, 31, 32.Recently, Zhang et al ។30 បានរៀបចំដំណាក់កាលស្ថានី polyamine ដែលត្រូវបានបញ្ចប់ដោយ dodecyl និងបំបែកដោយជោគជ័យនូវអ៊ីដ្រូកាបូន ថ្នាំប្រឆាំងនឹងជំងឺធ្លាក់ទឹកចិត្ត សារធាតុ flavonoids nucleosides អ័រម៉ូន estrogens និងការវិភាគផ្សេងៗទៀត។ ប៉ូលប៉ូឡាមានទាំងក្រុមប៉ូល និងមិនប៉ូល ដូច្នេះវាអាចប្រើដើម្បីបំបែក peptides និងប្រូតេអ៊ីនដែលមានទាំង hydrophobic column-Polar-8 hydrophilic ។ columns) អាចរកបានពាណិជ្ជកម្មក្រោមឈ្មោះពាណិជ្ជកម្ម Ascentis Express RP-Amide columns ប៉ុន្តែជួរឈរទាំងនេះត្រូវបានប្រើសម្រាប់តែការវិភាគនៃ amine 33 ប៉ុណ្ណោះ។
នៅក្នុងការសិក្សាបច្ចុប្បន្ន ដំណាក់កាលស្ថានីដែលបង្កប់ដោយប៉ូល (N-phenylmaleimide-embedded polystyrene) ត្រូវបានរៀបចំ និងវាយតម្លៃសម្រាប់ការបំបែក peptides និង trypsin digests នៃ HSA។ ដំណាក់កាលស្ថានីត្រូវបានរៀបចំដោយប្រើយុទ្ធសាស្ត្រខាងក្រោម។ ភាគល្អិតស៊ីលីកាដែលផូរោតត្រូវបានរៀបចំតាមនីតិវិធីដែលបានផ្តល់ឱ្យនៅក្នុងការបោះពុម្ពផ្សាយពីមុនរបស់យើងជាមួយនឹងការកែប្រែមួយចំនួននៃសារធាតុ polyethylene (g) ។ TMOS, ទឹកអាស៊ីតអាសេទិកត្រូវបានកែតម្រូវដើម្បីរៀបចំភាគល្អិតស៊ីលីកាដែលមានទំហំរន្ធញើសធំ។ ទីពីរ លីហ្គែនថ្មី phenylmaleimide-methyl vinyl isocyanate ត្រូវបានសំយោគ និងប្រើដើម្បីបំលែងភាគល្អិតស៊ីលីកា ដើម្បីរៀបចំដំណាក់កាលស្ថានីដែលបង្កប់ប៉ូឡា។ ដំណាក់កាលស្ថានីជាលទ្ធផលត្រូវបានខ្ចប់ទៅជាដែកអ៊ីណុកទំហំ 10 មីលីម៉ែត្រ។ ការវេចខ្ចប់ជួរឈរត្រូវបានជួយជាមួយនឹងរំញ័រមេកានិចដើម្បីធានាថាគ្រែដូចគ្នាត្រូវបានបង្កើតឡើងនៅក្នុងជួរឈរ។ វាយតម្លៃការបំបែកជួរឈរដែលបានខ្ចប់នៃល្បាយ peptide ដែលរួមមាន peptides ប្រាំ។(Gly-Tyr, Gly-Leu-Tyr, Gly-Gly-Tyr-Arg, Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg, Leucine Enkephalin) និង Trypsin digest of human serum albumin (HAS)។ល្បាយ peptide និង trypsin digest របស់ HSA ត្រូវបានគេសង្កេតឃើញដើម្បីបំបែកជាមួយនឹងដំណោះស្រាយដ៏ល្អ និងប្រសិទ្ធភាព។ ដំណើរការនៃជួរឈរ PMP ត្រូវបានប្រៀបធៀបជាមួយ peptide columna ។ អេទីត និងប្រូតេអ៊ីនត្រូវបានគេសង្កេតឃើញថាត្រូវបានដោះស្រាយយ៉ាងល្អ និងមានប្រសិទ្ធភាពនៅលើជួរឈរ PMP ដែលមានប្រសិទ្ធភាពជាងជួរឈរ Ascentis Express RP-Amide ។
PEG (Polyethylene Glycol), អ៊ុយ, អាស៊ីតអាសេទិក, Trimethoxy Orthosilicate (TMOS), Trimethyl Chlorosilane (TMCS), Trypsin, Human Serum Albumin (HSA), Ammonium Chloride, Urea, Hexane Methyldisilazane (HMDS), Methacryloyl Chloride (MC), HP-Tyroxy-Benoxyde, Acetonitrile (ACN), Methanol, 2-Propanol, និង Acetone បានទិញពី Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA)។
ល្បាយនៃអ៊ុយ (8 ក្រាម), polyethylene glycol (8 ក្រាម) និង 8 mL នៃ 0.01 N acetic acid ត្រូវបានកូររយៈពេល 10 នាទី ហើយបន្ទាប់មក 24 mL នៃ TMOS ត្រូវបានបន្ថែមនៅទីនោះក្រោមលក្ខខណ្ឌត្រជាក់ទឹកកក។ ល្បាយប្រតិកម្មត្រូវបានកំដៅនៅសីតុណ្ហភាព 40 °C រយៈពេល 6 ម៉ោងហើយបន្ទាប់មកនៅសីតុណ្ហភាព 120 °C ។ ដែកអ៊ីណុកត្រូវបានស្ងួតហួតហែងក្នុងទឹករយៈពេល 8 ម៉ោង។ 70°C សម្រាប់រយៈពេល 12 ម៉ោង។ ម៉ាស់ទន់ស្ងួតត្រូវបានកិនជាដីរលោងនៅក្នុងឡ ហើយត្រូវបានដុតនៅសីតុណ្ហភាព 550°C រយៈពេល 12 ម៉ោង។ បីបាច់ត្រូវបានរៀបចំ និងកំណត់លក្ខណៈដើម្បីពិនិត្យមើលការបន្តពូជក្នុងទំហំភាគល្អិត ទំហំរន្ធញើស និងផ្ទៃ។
ដោយការកែប្រែផ្ទៃនៃភាគល្អិតស៊ីលីកាជាមួយនឹង ligand phenylmaleimide-methylvinylisocyanate (PCMP) ដែលបានសំយោគមុនដោយវត្ថុធាតុ polymerization រ៉ាឌីកាល់ជាមួយ styrene សមាសធាតុដែលមានក្រុមប៉ូលត្រូវបានរៀបចំ។ដំណាក់កាលស្ថានីសម្រាប់ការប្រមូលផ្តុំ និងសង្វាក់ polystyrene។ ដំណើរការរៀបចំត្រូវបានពិពណ៌នាខាងក្រោម។
N-phenylmaleimide (200 mg) និង methyl vinyl isocyanate (100 mg) ត្រូវបានរំលាយនៅក្នុង toluene ស្ងួត ហើយ 0.1 mL នៃ 2,2′-azoisobutyronitrile (AIBN) ត្រូវបានបន្ថែមទៅក្នុងដបប្រតិកម្មដើម្បីរៀបចំ phenylmaleimide-methyl vinyl isocyanate CPPM (3 ម៉ោង CPPM) ចម្រោះ។ ស្ងួតនៅក្នុងឡនៅ 40 អង្សាសេរយៈពេល 3 ម៉ោង។
ភាគល្អិតស៊ីលីកាស្ងួត (2 ក្រាម) ត្រូវបានបំបែកនៅក្នុង toluene ស្ងួត (100 mL) កូរនិង sonicated ក្នុង 500 mL ដបខាងក្រោមជុំសម្រាប់ 10 min.PMCP (10 mg) ត្រូវបានរំលាយនៅក្នុង toluene និងបន្ថែម dropwise ទៅ flask ប្រតិកម្មតាមរយៈ funnel ទម្លាក់មួយ។ ល្បាយនេះត្រូវបាន refluxed នៅ 100 ° C តម្រងនិងស្ងួតសម្រាប់ 6 ម៉ោងនៅ 6 ° C ។ 3 ម៉ោង។បន្ទាប់មក ភាគល្អិតស៊ីលីកាដែលជាប់ចំណង PMCP (100 ក្រាម) ត្រូវបានរំលាយនៅក្នុង toluene (200 មីលីលីត្រ) និង 4-hydroxy-TEMPO (2 mL) ត្រូវបានបន្ថែមក្នុងវត្តមាន 100 µL នៃ dibutyltin dilaurate ជាកាតាលីករ។ ល្បាយនេះត្រូវបានកូរនៅសីតុណ្ហភាព 50 °C រយៈពេល 8 ម៉ោង ត្រងឱ្យស្ងួតរយៈពេល 5 ម៉ោង។
Styrene (1 mL), benzoyl peroxide BPO (0.5 mL) និងភាគល្អិតស៊ីលីកាដែលភ្ជាប់មកជាមួយ TEMPO-PMCP (1.5 ក្រាម) ត្រូវបានបែកខ្ចាត់ខ្ចាយនៅក្នុង toluene និងបន្សុទ្ធដោយអាសូត។ វត្ថុធាតុ polymerization នៃ styrene ត្រូវបានអនុវត្តនៅ 100 ° C សម្រាប់រយៈពេល 12 ម៉ោង។ ផលិតផលលទ្ធផលត្រូវបានលាងសម្អាតជាមួយនឹងប្រតិកម្ម 60°C នៃ F ពេញមួយយប់។
សំណាកត្រូវបានបន្សាបនៅ 393 K សម្រាប់រយៈពេល 1 ម៉ោង ដើម្បីទទួលបានសម្ពាធសំណល់តិចជាង 10-3 Torr។ បរិមាណ N2 adsorbed នៅសម្ពាធដែលទាក់ទងនៃ P/P0 = 0.99 ត្រូវបានប្រើដើម្បីកំណត់បរិមាណរន្ធញើសសរុប។ សរីរវិទ្យានៃភាគល្អិតស៊ីលីកាទទេ និង ligand-bonded ត្រូវបានពិនិត្យដោយ electron របស់ប្រទេសជប៉ុន។ (ភាគល្អិតស៊ីលីកាទទេ និង ligand-bonded silica) ត្រូវបានដាក់នៅលើជួរឈរអាលុយមីញ៉ូមដោយប្រើកាសែតកាបូន adhesive។ មាសត្រូវបានលាបលើសំណាកដោយប្រើប្រាស់ឧបករណ៍បំពងទឹក Q150T ហើយស្រទាប់ 5 nm Au ត្រូវបានដាក់នៅលើសំណាក។ នេះធ្វើអោយប្រសើរឡើងនូវប្រសិទ្ធភាពដំណើរការដោយប្រើវ៉ុលទាប និងផ្តល់នូវគ្រាប់ធញ្ញជាតិល្អ ត្រជាក់ sputtering.A Thermo Electron 1 របស់ USA) ធាតុវិភាគ Thermo 1 EA របស់សហរដ្ឋអាមេរិក al analysis.A Malvern (Worcestershire, UK) ឧបករណ៍វិភាគទំហំភាគល្អិត Mastersizer 2000 ត្រូវបានប្រើដើម្បីទទួលបានការចែកចាយទំហំភាគល្អិត។ ភាគល្អិតស៊ីលីកាអាក្រាត និងភាគល្អិតស៊ីលីកាដែលជាប់ចំណងដោយលីហ្គែន (5 មីលីក្រាមនីមួយៗ) ត្រូវបានបំបែកនៅក្នុង 5 mL នៃ isopropanol, sonicated សម្រាប់ 10 នាទី, 5 minch នៃ vortexed, ការវិភាគ Master ត្រូវបានដាក់នៅលើ vortex ។ អនុវត្តក្នុងអត្រា 5 ° C ក្នុងមួយនាទីលើជួរសីតុណ្ហភាពពី 30 ទៅ 800 ° C ។
សសររាងតូចចង្អៀតដែកអ៊ីណុកដែលស្រោបដោយកញ្ចក់ (លេខសម្គាល់ 100 × 1.8 ម.ម) ត្រូវបានខ្ចប់ដោយប្រើប្រាស់វិធីសាស្ត្រវេចខ្ចប់សារធាតុរអិល ដោយអនុវត្តនីតិវិធីដូចគ្នាដែលបានប្រើក្នុង ឯកសារយោង។31. ជួរឈរដែកអ៊ីណុក (កញ្ចក់ 100 × 1.8 ម.ម. ក៏ដូចជាសារធាតុរំលាយជំរុញ។ បំពេញជួរឈរតាមលំដាប់លំដោយដោយដាក់សម្ពាធ 100 MP រយៈពេល 10 នាទី 80 MP សម្រាប់ 15 នាទី និង 60 MP សម្រាប់ 30 នាទី។ កំឡុងពេលវេចខ្ចប់ ការរំញ័រមេកានិចត្រូវបានអនុវត្តជាមួយនឹងម៉ាស៊ីនក្រឡុកជួរឈរ GC ពីរ (Alltech, Deerfield, IL, USA) ដើម្បីធានាបាននូវសម្ពាធនៃការវេចខ្ចប់យឺត ៗ នៃជួរឈរ។ ភ្ជាប់ជួរឈរពីអង្គភាពវេចខ្ចប់ slurry ហើយភ្ជាប់ឧបករណ៍ភ្ជាប់ផ្សេងទៀតទៅនឹងច្រកចូល និងប្រព័ន្ធ LC ដើម្បីពិនិត្យមើលដំណើរការរបស់វា។
ម៉ាស៊ីនបូម LC (10AD Shimadzu ប្រទេសជប៉ុន) ប្រដាប់ចាក់ (Valco (USA) C14 W.05) ជាមួយរង្វិលជុំចាក់ 50nL ភ្នាស degasser (Shimadzu DGU-14A) បង្អួច capillary UV-VIS ត្រូវបានសាងសង់ឧបករណ៍ពិសេស µLC ឧបករណ៍ចាប់សញ្ញា (UV-2075) និងកញ្ចក់ដែលមានប្រសិទ្ធិភាពសម្រាប់ខ្សែបន្ទាត់តូចចង្អៀតនៃបំពង់ពង្រីក និងខ្សែភ្ជាប់។ បន្ទាប់ពីការវេចខ្ចប់រួច សរសៃ capillaries (50 μm id 365 និងកាត់បន្ថយ union capillaries (50 μm) ត្រូវបានដំឡើងនៅ 1/16″ outlet នៃ reduction union ។ ការប្រមូលទិន្នន័យ និងដំណើរការ chromatographic ត្រូវបានធ្វើឡើងដោយប្រើកម្មវិធី Multichro 2000 ។ ការត្រួតពិនិត្យនៅ 254 nm Analytes ត្រូវបានសាកល្បងសម្រាប់ UVographic data absorbance, Chromat 8 ។
Albumin ពីសេរ៉ូមមនុស្ស ម្សៅ lyophilized ≥ 96% (agarose gel electrophoresis) 3 mg លាយជាមួយ trypsin (1.5 mg), 4.0 M urea (1 mL) និង 0.2 M ammonium bicarbonate (1 mL)។ដំណោះស្រាយត្រូវបានកូររយៈពេល 10 នាទី ហើយរក្សាទុកក្នុងទឹកងូតទឹកនៅសីតុណ្ហភាព 37°C បន្ទាប់មក 1 ម. ចាក់ដំណោះស្រាយហើយទុកក្រោម 4 ° C ។
ការបំបែកល្បាយ peptide និង HSA trypsin digests ត្រូវបានវាយតម្លៃដោយឡែកពីគ្នានៅលើជួរឈរ PMP ។ ពិនិត្យមើលការបំបែកនៃល្បាយ peptide និង trypsin digest របស់ HSA ដោយជួរឈរ PMP ហើយប្រៀបធៀបលទ្ធផលទៅនឹងជួរឈរ Ascentis Express RP-Amide ។ លេខចានទ្រឹស្តីត្រូវបានគណនាដូចខាងក្រោម:
រូបភាព SEM នៃភាគល្អិតស៊ីលីកាទទេ និងភាគល្អិតស៊ីលីកាដែលមានចំណងលីហ្គែន ត្រូវបានបង្ហាញនៅក្នុងរូបភព។2 .រូបភាព SEM នៃភាគល្អិតស៊ីលីកាទទេ (A, B) បង្ហាញថា ផ្ទុយទៅនឹងការសិក្សាពីមុនរបស់យើង ភាគល្អិតទាំងនេះមានរាងស្វ៊ែរ ដែលភាគល្អិតត្រូវបានពន្លូត ឬមានភាពស៊ីមេទ្រីមិនទៀងទាត់។ ផ្ទៃនៃភាគល្អិតស៊ីលីកាដែលជាប់ចំណងលីហ្គែន (C, D) គឺរលោងជាងផ្នែកនៃខ្សែសង្វាក់នៃសារធាតុស៊ីលីកាទទេ។ ភាគល្អិត ica ។
ការស្កែនរូបភាពមីក្រូទស្សន៍អេឡិចត្រុងនៃភាគល្អិតស៊ីលីកាទទេ (A, B) និងភាគល្អិតស៊ីលីកាដែលមានចំណងលីហ្គែន (C, D)។
ការចែកចាយទំហំភាគល្អិតនៃភាគល្អិតស៊ីលីកាទទេ និងភាគល្អិតស៊ីលីកាដែលជាប់ចំណងត្រូវបានបង្ហាញក្នុងរូបភាពទី 3(A) ខ្សែកោងការចែកចាយទំហំភាគល្អិតផ្អែកលើបរិមាណបានបង្ហាញថាទំហំនៃភាគល្អិតស៊ីលីកាបានកើនឡើងបន្ទាប់ពីការកែប្រែគីមី (រូបភាព 3A) ទិន្នន័យការបែងចែកទំហំភាគល្អិតនៃភាគល្អិតស៊ីលីកាពីការសិក្សាគឺប្រៀបធៀបទំហំ 1 (ភាគល្អិត 1) នៃការសិក្សាបច្ចុប្បន្ន។ 5) នៃ PMP គឺ 3.36 μm បើប្រៀបធៀបទៅនឹងការសិក្សាមុនរបស់យើងជាមួយនឹងតម្លៃ ad(0.5) នៃ 3.05 μm (ភាគល្អិតស៊ីលីកុនដែលចងភ្ជាប់ polystyrene) 34. បាច់នេះមានការបែងចែកទំហំភាគល្អិតតូចជាងបើប្រៀបធៀបទៅនឹងការសិក្សាមុនរបស់យើង ដោយសារសមាមាត្រខុសគ្នានៃ PEG, អ៊ុយ, TMOS, និងប្រតិកម្មនៃទំហំភាគល្អិត polystyren ។ ដំណាក់កាលនៃភាគល្អិតស៊ីលីកាដែលយើងបានសិក្សាពីមុនមក។ នេះមានន័យថា មុខងារផ្ទៃនៃភាគល្អិតស៊ីលីកាជាមួយនឹងស្ទីរីនបានត្រឹមតែដាក់ស្រទាប់ប៉ូលីស្ទីរ៉ែន (0.97 µm) ទៅលើផ្ទៃស៊ីលីកា ចំណែកក្នុងដំណាក់កាល PMP កម្រាស់ស្រទាប់គឺ 1.38 µm ។
ការចែកចាយទំហំភាគល្អិត (A) និងការចែកចាយទំហំរន្ធញើស (B) នៃភាគល្អិតស៊ីលីកាទទេ និងភាគល្អិតស៊ីលីកាដែលចងភ្ជាប់ដោយលីហ្គែន។
ទំហំរន្ធញើស បរិមាណនៃរន្ធញើស និងផ្ទៃនៃភាគល្អិតស៊ីលីកានៃការសិក្សាបច្ចុប្បន្នត្រូវបានផ្តល់ឱ្យក្នុងតារាងទី 1(B)។ ទម្រង់ PSD នៃភាគល្អិតស៊ីលីកាទទេ និងភាគល្អិតស៊ីលីកាដែលភ្ជាប់ដោយលីហ្គែនត្រូវបានបង្ហាញក្នុងរូបភាពទី 3(B)។ លទ្ធផលគឺអាចប្រៀបធៀបទៅនឹងការសិក្សាពីមុនរបស់យើង។ ទំហំរន្ធញើសនៃសារធាតុស៊ីលីកាទទេ និងភាគល្អិត 10 មានព្រំដែន 2 និង 10 ។ ទំហំរន្ធញើសថយចុះ 69 បន្ទាប់ពីការកែប្រែគីមី ដូចដែលបានបង្ហាញក្នុងតារាងទី 1(B) ហើយការផ្លាស់ប្តូរនៃខ្សែកោងត្រូវបានបង្ហាញក្នុងរូបភាពទី 3(B)។ ស្រដៀងគ្នានេះដែរ បរិមាណរន្ធញើសនៃភាគល្អិតស៊ីលីកាបានថយចុះពី 0.67 ទៅ 0.58 cm3/g បន្ទាប់ពីការកែប្រែគីមី។ ផ្ទៃជាក់លាក់នៃ silica / g 1g ការសិក្សាបច្ចុប្បន្នរបស់យើងគឺ 1 g ការសិក្សាពីមុន។ (124 m2/g)។ ដូចបានបង្ហាញក្នុងតារាងទី 1(B) ផ្ទៃ (m2/g) នៃភាគល្អិតស៊ីលីកាក៏បានថយចុះពី 116 m2/g ទៅ 105 m2/g បន្ទាប់ពីការកែប្រែគីមី។
លទ្ធផលនៃការវិភាគធាតុនៃដំណាក់កាលស្ថានីត្រូវបានបង្ហាញក្នុងតារាងទី 2. ការផ្ទុកកាបូននៃដំណាក់កាលស្ថានីបច្ចុប្បន្នគឺ 6.35% ដែលទាបជាងការផ្ទុកកាបូននៃការសិក្សាពីមុនរបស់យើង (ភាគល្អិតស៊ីលីកាដែលជាប់ស្អិត polystyrene, 7.93% 35 និង 10.21% រៀងគ្នា) 42. ដោយសារតែការផ្ទុកកាបូននៃដំណាក់កាលស្ថានីបច្ចុប្បន្ន និង SP កម្រិតទាបនៃការរៀបចំបច្ចុប្បន្នគឺទាប។ s ដូចជា phenylmaleimide-methylvinylisocyanate (PCMP) និង 4-hydroxy-TEMPO ត្រូវបានគេប្រើ។ ទម្ងន់អាសូតភាគរយនៃដំណាក់កាលស្ថានីបច្ចុប្បន្នគឺ 2.21% បើប្រៀបធៀបទៅនឹង 0.1735 និង 0.85% ដោយទម្ងន់នៃអាសូតក្នុងការសិក្សាពីមុនរៀងគ្នា។ នេះមានន័យថា wt% នៃអាសូត phenimle គឺខ្ពស់ជាងនៅក្នុងដំណាក់កាលបច្ចុប្បន្ននៃផលិតផល S phenyl ។ ) និង (5) គឺ 2.7% និង 2.9% រៀងគ្នា ខណៈពេលដែលការផ្ទុកកាបូននៃផលិតផលចុងក្រោយ (6) គឺ 6.35% ដូចដែលបានបង្ហាញក្នុងតារាង 2.ការសម្រកទម្ងន់ត្រូវបានពិនិត្យដោយ PMP ដំណាក់កាលស្ថានី ហើយខ្សែកោង TGA ត្រូវបានបង្ហាញក្នុងរូបភាពទី 4. ខ្សែកោង TGA បង្ហាញពីការសម្រកទម្ងន់ 8.6% ដែលមិនមានផ្ទុកកាបូនឌីអុកស៊ីត និង 6% ប៉ុណ្ណោះព្រោះថាមានផ្ទុក O.3% និង 6% ។ ហ.
សារធាតុ phenylmaleimide-methylvinylisocyanate ligand ត្រូវបានជ្រើសរើសសម្រាប់ការកែប្រែផ្ទៃនៃភាគល្អិតស៊ីលីកាព្រោះវាមានក្រុម phenylmaleimide ប៉ូល និងក្រុម vinylisocyanate ។ ក្រុម Vinyl isocyanate អាចប្រតិកម្មបន្ថែមទៀតជាមួយ styrene ដោយសារធាតុ polymerization រ៉ាឌីកាល់រស់នៅ។ មូលហេតុទីពីរគឺការបញ្ចូលក្រុមដែលមានអន្តរកម្មកម្រិតមធ្យមរវាងអេឡិចត្រុង និងស្ទីលហ្វីលម៉ានីត។ imide moiety មិនមានបន្ទុកនិម្មិតនៅ pH ធម្មតាទេ។ បន្ទាត់រាងប៉ូលនៃដំណាក់កាលស្ថានីអាចត្រូវបានគ្រប់គ្រងដោយបរិមាណដ៏ល្អប្រសើរនៃ styrene និងពេលវេលាប្រតិកម្មនៃវត្ថុធាតុ polymerization រ៉ាឌីកាល់សេរី។ ជំហានចុងក្រោយនៃប្រតិកម្ម (វត្ថុធាតុ polymerization រ៉ាឌីកាល់សេរី) គឺមានសារៈសំខាន់ និងអាចផ្លាស់ប្តូរបន្ទាត់រាងប៉ូលនៃដំណាក់កាលស្ថានី។ ការវិភាគធាតុត្រូវបានអនុវត្តដើម្បីពិនិត្យមើលការផ្ទុកកាបូននៃដំណាក់កាលសកម្មនៃប្រតិកម្មទាំងនេះ និងការកើនឡើងនៃដំណាក់កាលនៃប្រតិកម្ម។ ដំណាក់កាល ary និងច្រាសមកវិញ SPs ដែលរៀបចំដោយកំហាប់ផ្សេងគ្នានៃ styrene មានការផ្ទុកកាបូនខុសៗគ្នា។ ជាថ្មីម្តងទៀត ផ្ទុកដំណាក់កាលស្ថានីទាំងនេះទៅក្នុងជួរឈរដែកអ៊ីណុក ហើយពិនិត្យមើលដំណើរការក្រូម៉ាតរបស់ពួកគេ (ការជ្រើសរើស គុណភាពបង្ហាញ តម្លៃ N ។
ល្បាយ peptide ប្រាំ (Gly-Tyr, Gly-Leu-Tyr, Gly-Gly-Tyr-Arg, Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg, leucine enkephalin) ក៏ត្រូវបានវាយតម្លៃដោយប្រើជួរឈរ PMP ដោយប្រើដំណាក់កាលចល័ត។60/40 (v/v) acetonitrile/water (0.1% TFA) នៅអត្រាលំហូរ 80 μL/min. នៅក្រោមលក្ខខណ្ឌនៃការ elution ដ៏ល្អប្រសើរ លេខទ្រឹស្ដីលេខ (N) ក្នុងមួយជួរ (100 × 1.8 mm id) គឺ 20,000 ± 100 (200,000 T plates/m²) បីជួរ។ និងក្រូម៉ាតូក្រាមត្រូវបានបង្ហាញក្នុងរូបភាពទី 5A. ការវិភាគរហ័សនៅលើជួរឈរ PMP ក្នុងអត្រាលំហូរខ្ពស់ (700 μL/នាទី) peptides 5 ត្រូវបាន eluted ក្នុងរយៈពេលមួយនាទី តម្លៃ N គឺល្អណាស់ 13,500 ± 330 ក្នុងមួយជួរ (100 × 1.8 mm id), Correspond to 1h50g (0g) ។ ជួរឈរដែលមានទំហំ entically (100 × 1.8 mm id) ត្រូវបានខ្ចប់ដោយដំណាក់កាលស្ថានី PMP ចំនួនបីផ្សេងគ្នា ដើម្បីពិនិត្យមើលភាពអាចផលិតឡើងវិញបាន។ កំហាប់វិភាគសម្រាប់ជួរឈរនីមួយៗត្រូវបានកត់ត្រាដោយប្រើលក្ខខណ្ឌ elution ដ៏ល្អប្រសើរ និងចំនួននៃទ្រឹស្តីបទ N និងពេលវេលារក្សាទុកដើម្បីបំបែកល្បាយសាកល្បងដូចគ្នានៅលើជួរឈរនីមួយៗ។ ទិន្នន័យនៃការបន្តពូជនៃជួរឈរ TMP ដែលអាចផលិតឡើងវិញបានល្អណាស់។ តម្លៃ % RSD ដូចបង្ហាញក្នុងតារាងទី 3 ។
ការបំបែកល្បាយ peptide នៅលើជួរឈរ PMP (B) និងជួរឈរ Ascentis Express RP-Amide (A);ដំណាក់កាលចល័ត 60/40 ACN/H2O (TFA 0.1%) វិមាត្រជួរឈរ PMP (100 × 1.8 mm លេខសម្គាល់);ការវិភាគលំដាប់លំដោយនៃសមាសធាតុ៖ 1 (Gly-Tyr), 2 (Gly-Leu-Tyr), 3 (Gly-Gly-Tyr-Arg), 4 (Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg) និង 5 (leucine) acid enkephalin))។
ជួរឈរ PMP (100 × 1.8 mm id) ត្រូវបានវាយតម្លៃសម្រាប់ការបំបែកការរំលាយអាហារ tryptic នៃ albumin សេរ៉ូមរបស់មនុស្សនៅក្នុង chromatography រាវដែលមានប្រសិទ្ធភាពខ្ពស់។ ក្រូម៉ាតូក្រាមក្នុងរូបភាពទី 6 បង្ហាញថាគំរូត្រូវបានបំបែកយ៉ាងល្អ ហើយគុណភាពបង្ហាញគឺល្អណាស់។ HSA digests ត្រូវបានវិភាគដោយប្រើអត្រាលំហូរ 100 µL/water tonA.0ri% 100 μL/min, mobile phase. s បានបង្ហាញនៅក្នុង chromatogram (រូបភាពទី 6) ការរំលាយអាហារ HSA ត្រូវបានបំបែកទៅជា 17 peaks ដែលត្រូវគ្នាទៅនឹង peptides 17 ។ ប្រសិទ្ធភាពបំបែកនៃ peak នីមួយៗនៅក្នុងការរំលាយអាហារ HSA ត្រូវបានគណនា ហើយតម្លៃត្រូវបានផ្តល់ឱ្យក្នុងតារាង 5 ។
ការរំលាយអាហារ tryptic នៃ HSA (100 × 1.8 mm id) ត្រូវបានបំបែកនៅលើជួរឈរ PMP;អត្រាលំហូរ (100 μL / នាទី), ដំណាក់កាលចល័ត 60/40 acetonitrile / ទឹកជាមួយនឹង 0.1% TFA ។
ដែល L ជាប្រវែងជួរឈរ η គឺជា viscosity នៃដំណាក់កាលចល័ត ΔP គឺជាសម្ពាធខាងក្រោយជួរឈរ ហើយ u គឺជាល្បឿនលីនេអ៊ែរនៃដំណាក់កាលចល័ត។ ភាពជ្រាបចូលនៃជួរឈរ PMP គឺ 2.5 × 10-14 m2 អត្រាលំហូរគឺ 25 μL / នាទី និង 60/40 v/v ACN perme នៃជួរឈរគឺ 10 × 8 ។ ស្រដៀងនឹងការសិក្សាពីមុនរបស់យើង Ref.34.The permeability of the column packed with superficly porous particles is: 1.7 × 10-15 for 1.3 μm particles, 3.1 × 10-15 for 1.7 μm particles, 5.2 × 10-15 m និង 2.1 m 2.4 m particles ភាគល្អិត 43.ហេតុនេះ ការជ្រាបចូលនៃដំណាក់កាល PMP គឺស្រដៀងទៅនឹងភាគល្អិតស្នូល 5 μm។
ដែល Wx គឺជាទម្ងន់នៃជួរឈរដែលផ្ទុកដោយសារធាតុក្លរ៉ូហ្វម Wy គឺជាទម្ងន់នៃជួរឈរដែលផ្ទុកដោយមេតាណុល ហើយ ρ គឺជាដង់ស៊ីតេនៃសារធាតុរំលាយ។ ដង់ស៊ីតេនៃមេតាណុល (ρ = 0.7866) និង chloroform (ρ = 1.484)។ porosity សរុបនៃ SILICA PARTICLES-180 × 10 C. ជួរអ៊ុយ 31 ដែលយើងធ្លាប់សិក្សាពីមុនគឺ 0.63 និង 0.55 រៀងគ្នា។ នេះមានន័យថាវត្តមានរបស់អ៊ុយរ៉ាលីហ្គែនកាត់បន្ថយការជ្រាបចូលនៃដំណាក់កាលស្ថានី។ ម៉្យាងវិញទៀត porosity សរុបនៃជួរឈរ PMP (100 × 1.8 mm id) គឺ 0.60.The permeability of particles-bond columns 1.PMP ដោយសារតែជួរឈរ 1. ដំណាក់កាលស្ថានីប្រភេទ C18 លីហ្គែន C18 ត្រូវបានភ្ជាប់ទៅនឹងភាគល្អិតស៊ីលីកាជាខ្សែសង្វាក់លីនេអ៊ែរ ខណៈពេលដែលនៅក្នុងដំណាក់កាលស្ថានីប្រភេទ polystyrene ស្រទាប់ប៉ូលីម៊ែរក្រាស់ដែលទាក់ទងគ្នាត្រូវបានបង្កើតឡើងនៅជុំវិញវា។ នៅក្នុងការពិសោធន៍ធម្មតា porosity ជួរឈរត្រូវបានគណនាដូចជា៖
រូបភាព 7A,B បង្ហាញជួរឈរ PMP (100 × 1.8 mm id) និង Ascentis Express RP-Amide column (100 × 1.8 mm id) ដោយប្រើលក្ខខណ្ឌ elution ដូចគ្នា (ឧទាហរណ៍ 60/40 ACN/H2O និង 0.1% TFA)។) នៃគ្រោង Van Deemter ។ល្បាយ peptide ដែលបានជ្រើសរើស (Gly-Tyr, Gly-Leu-Tyr, Gly-Gly-Tyr-Arg, Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg, Leucine Enkephalin) ត្រូវបានរៀបចំក្នុង 20 µL/ អត្រាលំហូរអប្បបរមាសម្រាប់ជួរឈរទាំងពីរគឺ 800 µL/min។ តម្លៃ HETP អប្បរមា អត្រាលំហូរអតិបរមា µMP ជាជួរ 0 µMP ។ ជួរឈរ Express RP-Amide មាន 2.6 µm និង 3.9 µm រៀងគ្នា។ តម្លៃ HETP បង្ហាញថាប្រសិទ្ធភាពបំបែកនៃជួរឈរ PMP (100 × 1.8 mm id) គឺល្អជាង Ascentis Express RP-Amide ជួរឈរដែលមានពាណិជ្ជកម្ម (100 × 1.8 mm លេខ 7 ដែលកើនឡើងនៅក្នុងគ្រោង 7) ។ គួរឱ្យកត់សម្គាល់បើប្រៀបធៀបទៅនឹងការសិក្សាពីមុនរបស់យើង។ ប្រសិទ្ធភាពនៃការបំបែកកាន់តែខ្ពស់នៃជួរឈរ PMP (100 × 1.8 mm id) បើប្រៀបធៀបទៅនឹងជួរឈរ Ascentis Express RP-Amide គឺផ្អែកលើការធ្វើឱ្យប្រសើរឡើងនូវរូបរាងភាគល្អិត ទំហំ និងនីតិវិធីវេចខ្ចប់ជួរឈរស្មុគស្មាញដែលប្រើក្នុងការងារបច្ចុប្បន្ន 34 ។
(A) van Deemter plot (HETP ធៀបនឹងល្បឿនលីនេអ៊ែរដំណាក់កាលចល័ត) ទទួលបានដោយប្រើជួរឈរ PMP (100 × 1.8 mm id) ក្នុង 60/40 ACN/H2O ជាមួយ 0.1% TFA.(B) van Deemter plot (HETP ធៀបនឹងល្បឿនលីនេអ៊ែរដំណាក់កាលចល័ត) ទទួលបានដោយប្រើជួរឈរ Ascentis Express 40 × 0.10 RP-8 CN/H2O ជាមួយ 0.1% TFA ។
ដំណាក់កាលស្ថានី polystyrene បង្កប់ប៉ូលត្រូវបានរៀបចំ និងវាយតម្លៃសម្រាប់ការបំបែកល្បាយ peptide សំយោគ និងការរំលាយអាហារ trypsin នៃ albumin សេរ៉ូមមនុស្ស (HAS) ក្នុងដំណើរការ chromatography រាវដែលមានប្រសិទ្ធភាពខ្ពស់។ ដំណើរការ chromatographic នៃជួរឈរ PMP សម្រាប់ល្បាយ peptide គឺល្អឥតខ្ចោះក្នុងប្រសិទ្ធភាពនៃការបំបែក និងដំណោះស្រាយ។ ការធ្វើឱ្យប្រសើរឡើងនូវការបំបែកដោយសារទំហំភាគល្អិតនៃជួរឈរ ហេតុផល និងទំហំភាគល្អិត។ ការសំយោគដែលបានគ្រប់គ្រងនៃដំណាក់កាលស្ថានី និងការវេចខ្ចប់ជួរឈរស្មុគស្មាញ។ បន្ថែមពីលើប្រសិទ្ធភាពបំបែកខ្ពស់ សម្ពាធថយក្រោយជួរឈរទាបក្នុងអត្រាលំហូរខ្ពស់គឺជាអត្ថប្រយោជន៍មួយផ្សេងទៀតនៃដំណាក់កាលស្ថានីនេះ។ ជួរឈរ PMP បង្ហាញការបន្តពូជដ៏ល្អ ហើយអាចត្រូវបានប្រើសម្រាប់ការវិភាគនៃល្បាយ peptide និងការរំលាយអាហារ trypsin នៃប្រូតេអ៊ីនផ្សេងៗ។ យើងមានបំណងប្រើជួរឈរនេះសម្រាប់ការបំបែកសារធាតុចម្រាញ់ពីរុក្ខជាតិធម្មជាតិ និងសារធាតុចម្រាញ់ពីធម្មជាតិនាពេលអនាគត។ ជួរឈរ MP ក៏នឹងត្រូវបានវាយតម្លៃសម្រាប់ការបំបែកប្រូតេអ៊ីន និងអង្គបដិប្រាណ monoclonal ផងដែរ។
Field, JK, Euerby, MR, Lau, J., Thøgersen, H. & Petersson, P. ការស្រាវជ្រាវលើប្រព័ន្ធបំបែក Peptide ដោយ Reversed Phase Chromatography ផ្នែកទី I: ការអភិវឌ្ឍន៍នៃ Column Characterization Protocol.J.Chromatography.1603, 113–129.https://doi.org/10.1016/j.chroma.2019.05.038 (2019)។
Gomez, B. et al.Improved active peptides បានរចនាឡើងសម្រាប់ការព្យាបាលជំងឺឆ្លង។Biotechnology.Advanced.36(2), 415-429.https://doi.org/10.1016/j.biotechadv.2018.01.004 (2018)។
Vlieghe, P., Lisowski, V., Martinez, J. & Khrestchatisky, M. Synthetic therapeutic peptides: science and the market.drug discovery.15 (1-2) today, 40-56.https://doi.org/10.1016/j.drudis.2009.10.10.
Xie, F., Smith, RD & Shen, Y. Advanced Proteomic Liquid Chromatography.J.Chromatography.A 1261, 78–90 (2012) ។
Liu, W. et al.Advanced liquid chromatography-mass spectrometry អនុញ្ញាតឱ្យមានការបញ្ចូលសារធាតុរំលាយអាហារគោលដៅទូលំទូលាយ និង proteomics.anus.Chim.Acta 1069, 89-97 (2019)។
Chesnut, SM & Salisbury, JJ តួនាទីរបស់ UHPLC ក្នុងការអភិវឌ្ឍន៍ថ្នាំ។ខែ កញ្ញា Sci.30(8), 1183-1190 (2007)។
Wu, N. & Clausen, AM ទិដ្ឋភាពជាមូលដ្ឋាន និងជាក់ស្តែងនៃ chromatography រាវសម្ពាធខ្ពស់សម្រាប់ការបំបែកយ៉ាងឆាប់រហ័ស។ខែកញ្ញា Sci.30(8), 1167-1182.https://doi.org/10.1002/jssc.200700026 (2007)។
Wren, SA & Tchelitcheff, P. ការអនុវត្តនៃ chromatography រាវដែលមានប្រសិទ្ធភាពខ្ពស់ក្នុងការអភិវឌ្ឍន៍ថ្នាំ។Chromatography.1119(1-2), 140-146.https://doi.org/10.1016/j.chroma.2006.02.052 (2006)។
Gu, H. et al.Monolithic macroporous hydrogels រៀបចំពីសារធាតុ emulsion ដំណាក់កាលខាងក្នុងកម្រិតខ្ពស់នៃប្រេងក្នុងទឹក សម្រាប់ការបន្សុតប្រកបដោយប្រសិទ្ធភាពនៃមេរោគ enteroviruses.Chemical.Britain.J.401, 126051 (2020)។
Shi, Y., Xiang, R., Horváth, C. & Wilkins, JA តួនាទីនៃក្រូម៉ាតរាវក្នុង proteomics.J.Chromatography.A 1053(1-2), 27-36 (2004)។
Fekete, S., Veuthey, J.-L.&Guillarme, D. និន្នាការដែលកំពុងកើតមាននៅក្នុងការបំបែកក្រូម៉ាតូក្រាមរាវដំណាក់កាលបញ្ច្រាសនៃ peptides និងប្រូតេអ៊ីនព្យាបាល៖ ទ្រឹស្តី និងកម្មវិធី។Pharmacy.Biomedical Science.anus.69, 9-27 (2012)។
Gilar, M., Olivova, P., Daly, AE & Gebler, JC ការបំបែកពីរវិមាត្រនៃ peptides ដោយប្រើប្រព័ន្ធ RP-RP-HPLC ដោយប្រើតម្លៃ pH ផ្សេងគ្នានៅក្នុងវិមាត្របំបែកទីមួយ និងទីពីរ។J.កញ្ញា Sci.28(14), 1694-1703 (2005)។
Feletti, S. et al. លក្ខណៈនៃការផ្ទេរម៉ាស់ និងដំណើរការ kinetic នៃជួរឈរ chromatographic ប្រសិទ្ធភាពខ្ពស់ packed ជាមួយ C18 sub-2 μm ភាគល្អិត porous យ៉ាងពេញលេញ និង superficially ត្រូវបានស៊ើបអង្កេត.J.កញ្ញា Sci.43 (9-10), 1737-1745 (2020)។
Piovesana, S. et al. និន្នាការថ្មីៗ និងបញ្ហាប្រឈមក្នុងការវិភាគក្នុងភាពឯកោ ការកំណត់អត្តសញ្ញាណ និងសុពលភាពនៃរុក្ខជាតិ bioactive peptides.anus.biological anus.Chemical.410(15), 3425–3444.https://doi.org/10.1007/s0018x.
Mueller, JB et al.ទេសភាពដ៏ប្រណិតនៃនគរជីវិត។ ធម្មជាតិ 582(7813), 592-596.https://doi.org/10.1038/s41586-020-2402-x (2020)។
DeLuca, C. et al.Downstream processing of therapeutic peptides by preparative liquid chromatography.Molecule (Basel, Switzerland) 26(15), 4688(2021)។
Yang, Y. & Geng, X. Mixed-mode chromatography និងកម្មវិធីរបស់វាចំពោះ biopolymers.J.Chromatography.A 1218(49), 8813–8825 (2011)។
Zhao, G., Dong, X.-Y.& Sun, Y. Ligands សម្រាប់ chromatography ប្រូតេអ៊ីន របៀបចម្រុះ៖ គោលការណ៍ លក្ខណៈ និងការរចនា.J.Biotechnology.144(1), 3-11 (2009)។